交叉配血操作规程 凝聚胺法

交叉配血操作规程（凝聚胺法）

一．目的

规范交叉配血试验操作；保证临床用血的安全性和有效性。

二．适用范围

适用于临床配血标本。

三．职责

血库技术人员负责交叉配血试验

四．所需材料和设备

材料：凝聚胺试剂盒、患者血标本、生理盐水、小试管、滴管、献血者标本。

设备：普通离心机、血型血清学专用离心机、37℃恒温水浴箱、显微镜五．操作步骤

1.凝聚胺法

（1）以生理盐水配制供、受者3％～5％红细胞悬液。

（2）取试管3支，标记主、侧和自身对照

主侧加受血者血浆（血清）2滴，献血者3%～5%的红细胞悬液1滴；

次侧加献血者血浆（血清）2滴，受血者3%～5%的红细胞悬液1滴；

自身对照管加患者血浆（血清）2滴和患者3%～5%的红细胞悬液1滴

混匀。

（3）以1000r/分钟离心1分钟，观察盐水介质实验结果。

（4）每管各加低离子介质（LIM）溶液0.7ml,混合均匀，室温孵育1min。

（5）每管各加2滴凝聚胺溶液，混匀后静置15s。

（6）1000r/分钟离心1分钟，倾去上清液，不要沥干。

（7）轻轻摇动试管，目测红细胞有无凝集，如无凝集，必须重复步骤（3）-（6）

（8）加入2滴重悬液，并轻轻混合，观察结果。

（9）结果判定

如凝聚散开，则为凝聚胺引起的非特异性凝集，判为阴性结果，配血

相合；如凝聚不散开，则为抗原抗体结合的特异性反应，判为阳性结

果，配血不相合，如肉眼观察凝集强度弱，可进一步在显微镜下观察

有无凝集。结果判定要求在1min内完成，最长不要超过3min，因为

弱凝集的阳性结果，超过1min可能变为阴性。

六．注意事项

1.配血技术

①常规配血技术：选择的技术不仅要能检查出不配合的IgM抗体，还必须能检查出尽可能多的不配合的IgG抗体，最大限度地减少抗体的漏检。目前认为盐水法交叉配血是输血前检查必不可少的试验，首先采用盐水法进行交叉配血，再采用能够检出IgG类抗体的方法进行交叉配血；

②特殊配血技术，如：预温配血技术：主要用于解决无临床意义的冷抗体引起的交叉配血不配合。

2.主侧交叉配血不相合的原因

①患者或供者ABO血型定型不正确，或二者的ABO血型不配合；②患者

血清中存在同种抗体，与供者红细胞上的相应抗原起反应；③患者血清中存在自身抗体，与供者红细胞中的相应抗原起反应；④供者红细胞上已经包被了抗体，导致抗球蛋白阳性；

⑤患者血清不正常，如白蛋白/球蛋白比例不正常引起缗钱状假凝集，

血清中存在高分子聚合物的血浆扩容剂引起假阳性（用盐水添加试验来解决）；

⑥试验系统被污染。

3.次侧交叉配血不相合的原因

①供者血清中存在针对患者红细胞抗原的抗体；

②患者与供者的ABO血型不相合；

③患者红细胞已经包被了抗体，直接抗球蛋白试验阳性。