Biotek和MD连续波长酶标仪对比分析
Biotek和Thermo滤光片型酶标仪对比分析
厂家Thermo Biotek产品ELx800ELx808MK3ELx808IU Multiskan FC Multiskan Ascent 图片价格3-4万4-6万 2.5-3万5-6万5-6万3-5万波长范围（nm）400-750nm400-750nm400-700/340-750nm(紫外可选装)340-900nm340-850nm340-850带宽（nm）10nm10nm10nm3-9nm（半带宽）3-6nm （半带宽）读数范围0-3.0 OD0-4 OD0-3.5 OD0-4 OD0-6 OD0 – 6.0Abs线性范围0-3.0 OD＜1%at 2.5 OD405nm，0-2.000Abs±2％＜1%at 2.5 OD 405 nm0-3Abs，96孔板，快速测量模式0-4Abs，96孔板，标准测量模式线性（96孔板） 0-4Abs,1/-1%0-3Abs,1/-1%,340nm及450nm0-3Abs,1/-1%，连续进板方式线性（384孔板） 0-3Abs,±1%,0-2Abs,1/-1%,连续进板方式准确性0-2.0Abs±1%±0.010＜1% at 2.5 OD±1%(0-2.0 OD)＜1% at 2.5 OD ±1%(0-3Abs)±2%(3-4 Abs)（405nm）±1%或0.003Abs时准确性值更高±2%（2－3Abs)可重复性± 0.5% ± 0.005 （0-2.0OD）＜ 0.5% at 2.5 OD<0.5%（0-1.5 OD）＜ 0.5% at 2.5 OD CV≤0.2%(0-3 Abs)CV≤1.0%(3-4 Abs)（405nm）步进模式：CV<0.2%(0-3Abs)CV<1.0%(3-4Abs)连续模式：CV<0.2%(0-2Abs)CV<0.4%(2-3Abs)标配滤光片（nm）4块：405、450、490、630nm4块：405、450、490、630nm4块：405；450；492；6304块：340、405、450、490、630nm标配3块滤光片：405nm、450nm和620nm，其他滤光片可选配4块标准滤光片,406nm,450nm,492nm,620nm滤光轮可承载滤光片数568688读数模式单、双波长单波长/双波长单、双、多波长单波长/双波长测读分辨率0.001OD0.001OD0.001OD0.001OD0.001Abs0.001Abs测读模式终点法，动力学法终点法，动力学法，线性扫描法终点法；动力学法；终点法，动力学法，线性扫描法微孔板类型6- ，12-，24-, 48-, 96- 孔板96孔板96孔板96和384孔板96和384孔板检测通道18+1多通道光纤测量系统8+1读板时间单波长 30秒（终点法）快速单波长/双波长：8/13sec/96孔，动力学检测96孔板 6秒96孔 ：5秒快速单波长/双波长：8/13sec/96孔，动力学检测96孔板 6秒快速测量模式：6s，96孔板；11s，384孔板标准测量模式：12s，96孔板；33s，384孔板96 孔板：6 s384 孔板：14 s振荡有4速(低、中、高、变速)线性振荡，三种速度可选有4速(低、中、高、变速)线性振荡，三档速度可选线性振荡，三档速度可选控温孵育无无无温控至50℃，温控均一性±0.5℃@37℃室温 +4°C 至50°C（选配）孵育器(选配):温控范围：室温＋4℃－50℃光源卤素灯卤素灯卤素灯卤素灯卤素灯石英卤素灯用户界面25键触摸按键，仪器自带2×24字LED显示屏25键触摸按键，仪器自带2×24字LED显示屏30键触摸按键，仪器自带2 × 20 字液晶显示屏仪器自带2×24字LED显示屏高分辨彩色显示屏，分辨率为480×272像素高分辨率（480×272）彩色显示屏Biotek和Thermo滤光片型酶标仪对比Biotek ThermoELx8084-6万400-750nm10nm0-4 OD＜1%at 2.5 OD＜1% at 2.5 OD＜ 0.5% at 2.5 OD4块：405、450、490、630nm6单波长/双波长0.001OD终点法，动力学法，线性扫描法96孔板8+1快速单波长/双波长：8/13sec/96孔， 动力学检测96孔板 6秒有4速(低、中、高、变速)卤素灯仪器自带2×24字LED显示屏。
连续波长酶标仪—SpectraMax+M5操作手册
微孔板孔 A1的位置
适配框，正面 朝上放置 微孔板孔 H12的位置
强烈建议！ ！ ！在连有优质电源的情况下，保持仪器 24 小时开机(对高 能氙闪灯源没有损耗)，不要罩防尘罩以保持透气和除湿。隔 1-2 个 月关机重启一次即可。
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软件操作步骤
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四种检测类别：
在上图中
分别代表：
终点法检测，即获得在单一时间点的样品检测值。
动力学法检测，即获得在预先设定的时间段中样品在不同时间点的检测值。
波长扫描检测，即获得样品在连续多个波长处的检测值。
单孔多点检测，即获得每孔样品在多个位置进行检测并且平均后的检测值。 根据用户所需要获得的结果类型选择合适的检测类型，然后从左边的列表(如下左图)中从上 往下依次用鼠标点中选项，并在右栏(如下右图)中选择对应的参数设定。全部设定完成后按 界面右下角的 OK，如果需要取消则按 Cancel。
仪器保养注意
1） 有良好的电源，保持 24 小时开机。 2） 保持避光和干净的室内环境，维持一定的湿度(30%-80%)。 3） 维持室内比较恒定的温度，以 20-22 度为最适宜。 4） 适用 6-384 孔板。96 孔微孔板内每孔可检测 100-300ul 溶液，最佳检测体积为 200ul。 5） 384 孔微孔板内每孔可检测 50-100ul 溶液，最佳检测体积为 80ul。 6） 检测后的微孔板和比色皿不要长期置于仪器插槽中，检测完后就从仪器中取出，避免溶 液蒸发腐蚀或损坏仪器内部光路系统。如果为有腐蚀性或挥发性溶液，请带盖检测。 7） 对于可见光吸收检测，使用全透明微孔板；紫外光吸收检测，使用紫外可透全透明微孔 板；荧光强度和荧光偏振，使用黑色不透明板，需要检测底读的用黑色底透微孔板；化 学发光和时间分辨荧光，使用白色不透明微孔板。 8） SpectraMax M5/M5e 随仪器有一块紫红色的适配板， 在检测 96 孔板和 384 孔板光吸收以 及荧光顶读的时候必须预先以下图方向置于插槽中，然后再如图放入微孔板进行检测。
进口酶标仪参数对比-科邦实验室
☆☆☆
0~3Abs
0~6Abs
0~3Abs
☆☆
单双波长
单双波长
单波长
目前主流酶
8 通道
8 通道 标仪基本全
是 8 光通道
表示酶标仪
适用的滤光
380~900nm 400~750nm 片波长范围，
越宽越好
代表酶标仪
Z 高的读数
0~4Abs
0~3.5Abs 示值范围，一
般来说越高
越好。
单双波长
两种读数模 单双波长
☆☆
单波长，6 秒； 量模式； 单波长 30 秒
双波长，10 秒 11s，384 孔板，
快速测量模
式；33s，384
孔板，标准测
量模式
单波长 6 秒，表示采样速 8秒
10 秒双波长 度
☆☆☆
线性震荡，三
档速度可选
可以
读板前的混 速度可调
匀功能
进口酶标仪参数对比表 参数名称 重要程度 安图斯 2010 赛默飞 FC 宝特 ELX-800 宝特 ELX-808 伯乐 imark 参数涵义
光源 通道 波长范围 读数范围 读板模式 重复性
线性
卤钨灯 石英卤素灯 卤素灯
卤素灯
8 通道
8 通道
8 通道
☆☆☆ 400~750nm 340~850nm 400~750nm
式
CV≤0.2%
（0—3Abs）；
<±025%，
☆☆☆
450nm，1OD 处 CV≤1%
（3-4Abs）
<0.5%@2.5OD <1.5%@3.5OD
表示同一样 本连续采样 多次误差的 大小，越小越
好。
0-3Abs，96 孔 405nm，
对于酶标仪的结构解析 酶标仪如何操作
对于酶标仪的结构解析酶标仪如何操作酶标仪即酶联免疫检测仪。
是酶联免疫吸附试验的专用仪器又称微孔板检测器。
可简单地分为半自动和全自动两大类，但其工作原理基本上都是一致的，其核心都是一个比色计,即用比色法来进行分析。
测定一般要求测试液的最后体积在250μL以下，用一般光电比色计无法完成测试，因此对酶标仪中的光电比色计有特别要求。
酶标仪的结构：规格有40孔板，55孔板，96孔板等多种，不同的仪器选用不同规格的孔板，对其可进行一孔一孔地检测或一排一排地检测.酶标仪所用的单色光既可通过相干滤光片来获得，也可用分光光度计相同的单色器来得到.在使用滤光片作滤波装置时与一般比色计一样，滤光片即可放在微孔板的前面，也可放在微孔板的后面，聚光镜，光栏后到达反射镜，经反射镜作90°反射后垂直通过比色溶液,然后再经滤光片送到光电管.从酶标仪工作框图和光路图上可看出，它和一般的光电比色计有以下几点差异：1.盛装待测比色液的容器不再使用比色皿，而是使用塑料微孔板.微孔板常用透亮的聚乙烯材料制成，对抗原抗体有较强的吸附作用，故用它作为固相载体.2.由于盛样本的塑料微孔板是多排多孔的，光线只能垂直穿过，因此酶标仪的光束都是垂直通过待测溶液和微孔板的，光束既可是从上到下，也可以是从下到上穿过比色液.3.酶标仪通常不仅用A，有时也使用光密度OD来表示吸光度.酶标仪可分为单通道和多通道2种类型，单通道又有自动和手动2种之分.自动型的仪器有X,Y方向的机械驱动机构，可将微孔板L的小孔一个个依次送入光束下面测试，手动型则靠手工移动微孔板来进行测量.在单通道酶标仪的基础上又进展了多通道酶标仪，此类酶标仪一般都是自动化型的.它没有多个光束和多个光电检测器，如12个通道的仪器设有12条光束或12个光源，12个检测器和12个放大器，在X方向的机械驱动装置的作用下，样品12个为一排被检测.多通道酶标仪的检测速度快，但其结构较多而杂价格也较高.怎么使用酶标仪作为微孔板比色计的酶标仪，其基本功能不外乎一个比色测定，所不同的是在测定波长范围、吸光度范围、光学系统、检测速度、震板功能、温度掌控、定性和定量测定软件功能等方面的差异，当然全自动酶免疫分析系统还具有自动洗板、温育、加样等功能。
MD酶标仪介绍
量身定制多标记分析卡盒！
为什么选择 Paradigm?
任何实验分析，我们都有解决方案!!!
FilterMax F3, F5 & SpectraMax Paradigm
功能
FI – top FI – bottom
TRF FP Abs – visible Abs – UV ABS - monochromatic Luminescence, glow HTRF Certification Shaking Temperature Control 6- to 48-well Plates 96- to 384-well Plates 96- to 1536-well Plates
(4) 底部直接激发
底部激发同时聚焦以达最大动态范围
(5) 近距信号收集
针对化学发光和AlphaScreen的专有检测读头 以近距接近微孔板而达到最大信号和最小的邻 孔干扰
卡盒技术
检测卡盒包含:
1. 最佳的光源 2. 特殊的电子检测元件 3. 染料特异性光学元件
• 激发滤光片 • 发射滤光片 • 二色镜 • 偏振片 • 光栅 (ABS)
每个卡盒就是一台单独的酶标仪!
优化的滤光片 & 光源组合达到灵敏度和速度相结合 检测信号产生的位置 预储存的应用程序 单功能和多功能卡盒可选
用户自升级!
只需点击 硬件、预存指令 & 软件升级 “plug-n-screen”
未来无限扩展!
扩展所需要的功能
重要特点
• 高速飞行检测模式 (“On-the-fly”) 保证速度但不牺牲性能 • 1, 6, 12, 24, 48, 96, 384 1536, 3456 微孔板格式 • 微孔板高度探测 – 更佳的信号 & 减少干扰 • Z 轴高度自动调整（顶部阅读和底部阅读）
酶标仪研究报告
酶标仪研究报告根据您的问题，这是一个有关酶标仪的研究报告示例：酶标仪研究报告1. 研究背景酶标仪是一种用于测定生物样品中酶活性的仪器。
它通过测量酶催化反应产生的光或色素来确定酶活性的水平。
酶标仪在生物科研领域和临床诊断中具有广泛的应用，可以用于监测患者血液中的肿瘤标志物、激素水平以及许多其他生物分子的含量。
2. 目的本研究旨在评估一种新型酶标仪的性能，并与市场上其他常见的酶标仪进行比较。
3. 方法在本研究中，选择了三种常见的酶标仪进行性能比较。
首先，通过使用标准酶溶液测定它们的最小检测浓度和动态范围来评估其灵敏度。
然后，通过测定样品中特定酶的活性，评估其准确性和重复性。
最后，对各种酶标仪的操作性进行了比较，包括仪器设置和数据分析的便捷性。
4. 结果研究结果显示，所评估的新型酶标仪在灵敏度和准确性方面表现出色。
它的最小检测浓度比其他酶标仪低，并且具有更宽的动态范围。
此外，对于特定酶的活性测量，新型酶标仪显示出稳定的结果，并具有较小的测定误差。
操作上，新型酶标仪的界面简单直观，数据分析功能也更加强大。
5. 讨论根据本研究的结果，可以得出结论，所评估的新型酶标仪在性能方面优于其他常见的酶标仪。
它具有更高的灵敏度和准确性，可以为生物科研和临床诊断提供更可靠的结果。
此外，新型酶标仪的便捷性和用户友好性也使其在实际应用中更具优势。
6. 结论本研究证明了新型酶标仪的出色性能，并建议其作为酶活性测定的首选仪器。
未来的研究可以进一步探索和优化该酶标仪的功能，以满足不同领域的需求。
这是一个简短的酶标仪研究报告示例，涵盖了研究背景、目的、方法、结果、讨论和结论。
具体的报告内容和结构可能会根据具体的研究项目和研究方向而有所不同。
单双波长在生物活性测定中的比较研究
准差 和离散 系数 均较 低 。结论 ： 双波长 法更适 于 生物 活性测 定 实验 ， 高结 果的 准确 度 。 单 提
２２ 单 双 波 长 测 定 结 果 比 较 ．
本 公 司 生 产 的 Ｉ一 １ 品 （ 号 ：０ ８ ８ １６ ０Ｕ Ｉ 伎 ） Ｌ１成 批 ２ ０ ０ ０ ，０ Ｕ 和 Ｉ一 液 （ 号 ：０ ８ ８ ４ ４５ ３ｍ ／ １的 单 波 长 ５ ０ｎ Ｌ１ １原 批 ２ ０ ０ ０ ，． ｇｍ ） ６ ７ ｍ 和 双 波 长 ５ ０ｎ ６ ０ｎ 测 定 结 果 的 比较 【， 表 １２ ７ ｍ＋ ３ ｍ －见 － 、。 由 表 １２可 知 ． 品 和 原 液 相 应 的 单 波 长 和 双 波 长 测 定 、 成
【 键词】 标仪 ； 波 长 ； 关 酶 单 双波 长 【 中图分类 号】 ９ ７２ Ｒ２． 【 献标 识码】 文 Ｂ
【 编号】 １ ７ － ２ ０ ２ １ ）４ ｂ － ５ － ２ 文章 ６ ３ ７ １ （０ ０ ０ （ ）０ ２ ０
Ｔｈｅ ｃ ｎｔａ ｔｒ ｓ ａ ｃ ｏ ｓｎｇｅ ａ ｕａ ｖ ｌｎｇ ｈ ｄｅｅ ｔｏ ｂ ｕｔｂ ｏ ｃ ｏ ｒ ｓ ｅ ｅ ｒ ｈ ｎ ｉ ｌ ｎｄ ｄ ｌｗａ ｅｅ ｔ ｔｃ ｉ ｎ ａ ｏ ｉ ａ －
ｒａ ｅ ｉ ｇｅｗａ ｅｅ ｇｈｏ ｕ ａ ｅｅ ｇｈ Ｍ ｅｈ ｄｓ ｋ ｅｍａ ｙｅ ｐ ｒｍｅ ｔ ｆｓｎ ｌ ｖ ｌｎ ｔ ｎ ｕ ｌｗ ｖ ｌｎ ｔ， ｅ ｄ ｒｓｎ ｌ ｖ ｌｎ ｔ ｒｄ ａ ｗ ｖ ｌｎ ． ｌ ｔ ｔ ｏ ：Ｍａ ｎ ｘ ｅｉ ｎｓｏ ｉ ｇｅｗａ ｅｅ ｇｈ ａ ｄｄ ａ ａ ｅｅ ｇｈ ｃ ｍｐ ｒｄ ａｌｒｓ ｌｓ ｈ ｎ ａ ａｙ ｅ ｔｔｓｉａｌ． ｓ ｌ ：Ｃｈ ｏ ｅ ｄ ａ ｖ ｌｎ ｈ ｄ ｔｃｉｎ ｕｔｂ ｅｆｒｂｏ ｃｉｉ ｅｅ － ｏ ａｅ ｌ ｅ ｕｔ，ｔｅ ｎ ｚ ｄ ｓａｉｔ ｌ ｙ Ｒｅ ｕ ｔ ｌ ｃ ｓ ｏ ｓ ｕ ｌｗａ ｅｅ ｇ ｅｅ ｔ ，ｓ ｉ ｌ ｏ ｉａ ｔ ｔ ｄ ｔｃ ｔ ｏ ａ ｖｙ
md多功能酶标仪工作原理
md多功能酶标仪工作原理
MD多功能酶标仪的工作原理基于酶联免疫吸附实验（ELISA）的原理。
在ELISA中，需要用抗体或其他亲和物质作为捕获物质，将其固定在试验板上。
样品中含有需要检测的物质，然后在样品中加入一个与之特异性结合的二抗或标记物（如酶），通过测量二者之间的反应信号来计算样品中目标物的含量。
具体来说，多功能酶标仪会在试验板上检测波长范围内的荧光强度和吸收率，并将其转换为数字信号。
用户可以根据反应信号的大小来估计样品中目标物的浓度。
此外，它还可以测量微量的生物成分的活性，并可以用来监测酶反应的动力学情况。
高效液相色谱仪、酶标仪和快检仪检测小麦中呕吐毒素的对比分析
呕吐毒素，又名为脱氧雪腐镰刀菌烯醇（DON），主要 分别用 5 mL PBS 缓冲盐溶液和水先后淋洗，弃去流出液，
由禾谷镰刀菌和黄色镰刀菌产生，是一种全球性的污染谷物 抽干小柱。加 2 mL 甲醇洗脱亲和柱，下滴速度 1 滴 /s，收
的霉菌毒素之一，通常在小麦、大麦、燕麦、玉米等谷物及 集洗脱液，50 �下氮气缓缓吹至近干，最后加入 1.0 mL 初
检试剂条，美国 CHARM。
100 μL/ 孔，37 �避光反应 30 min。再次洗板（同上）。显色：
DON 质控样 -1、DON 质控样 -2，国家粮食和物资储 加底物 A 50 μL/ 孔，再加底物 B 50 μL/ 孔，轻轻振荡 5 min
备局科学研究院；甲醇（色谱纯）；聚乙二醇（生化试剂）； 混匀，37 �避光显色 15 min。终止：加入终止液 50 μL/ 孔，
氯化钠（分析纯）；磷酸氢二钠（分析纯）；磷酸二氢钾（分 轻轻振荡混匀，终止反应。酶标仪于 450 nm（建议双波长
析纯）；氯化钾（分析纯）；盐酸（优级纯）；去离子水。 450/630 nm）处上机测定每孔 OD 值。
1.2 样品前处理
1.3.3 DON 快速检测仪
1.2.1 高效液相色谱仪
读数仪调至 DON-00 档。取呕吐毒素快检试剂条（绿色），
（2）酶标仪筛查原理。基于抗原抗体间接竞争反应技术， DON 和酶标板上的预包被偶联抗原竞争抗呕吐毒素抗体， 标记后用 TMB 底物显色，样本吸光度值与其所含 DON 量 成负相关，与标准曲线比较后得出具体值。
称取 5.0 g 粉碎样品于 50 mL 离心管，加入 20 mL 去离
制定了严格的限量标准。
多功能酶标仪选择的要素分析
•浅谈多功能酶标仪选择的要素•近年来，随着多功能酶标仪在国内各高校实验室逐渐推广开来,多功能酶标仪品牌和型号也逐渐多了起来，乱花渐欲迷人眼。
除了三大传统优势品牌PE、MD和TECAN，还出现了众多后来者插足此市场,如收购了芬兰雷勃的Thermo、从发光起家的Berthold、针对药筛领域的BMG以及新兴的BioTek等品牌.各品牌都有各自的一个甚至多个系列产品线，特性各不相同，选购时各种技术参数、技术指标令人眼花缭乱本文尝试从用户实际使用的角度,探讨应该如何看待花样繁多的参数特性,希望能帮助大家找到真正合适自己的多功能酶标仪。
一、滤片Vs光栅多功能酶标仪的分类方法众多,但最简单的莫过于用他们的滤光方式来作分界线。
一般来说，可以分为滤光片型和光栅型两大类。
当然也有一些型号，例如Synergy4和EnVision 等，一台机器里面同时装上了滤光片和光栅。
但是滤片和光栅并不能同时完成同一个检测,还是想用光栅的时候用光栅,该用滤片的时候用滤片；还有一些实验非用其中一个不可，另一模块实现不了的.所以这类仪器本质上还只是把滤片和光栅放在了一起，并没有使两者糅合而产生新的技术突破。
总体来说，滤片技术由于发展已久，配合二向色镜（其实也就是另一模式的滤光反光滤镜）等光路系统，可以实现大部分实验的需要.目前常规多功能酶标仪中最高的检测灵敏度就是用滤光片型做出来的，例如TECAN Infinite F500的荧光检测的灵敏度可以达到0。
04 fmol/孔(荧光素，384孔/80ul)。
但是滤光片型仪器由于受限于滤片的波长和数量限制，不可能满足日益增加的实验类型的检测需要，而且有时需要对物质的吸收、激发和发射光谱进行研究，所以后来就诞生了光栅型的仪器。
最先推出光栅的是MD公司，其光栅习惯上称为单光栅.由于光纯度的不足，在光栅的后面又加入了一组带阻滤片，再把杂光过滤一遍，达到了5×10-4的杂光率，基本与纯粹的滤光片系统一致。
美国MD-SpectraMax M5 多功能酶标仪
标题美国ＭＤ－SpectraMax M5 多功能酶标仪信息描述有效期:2011-12-22目前世界上功能最强也是精度最高的单体台式酶标仪。
并且具有SpectraMax M2的所有特性。
三模式比色皿插槽，可检测吸光度（Abs)、荧光强度(FI)、时间分辨荧光（TRF)、荧光偏振（FP)、和化学发光（Lum)。
两个单色器可使吸收度波长范围达200~1000nm,FI、TRF和Lum波长范围250~850nm和FP波长范围400~750nm,步进波长1nm。
可读取6、12、24、48、96和384孔微孔板。
提供终点检测、动力学、单孔扫描和光谱扫描四种测读模式。
技术参数:光密度测读模式：波长范围 200~1000nm，精确选择波长1nm；带宽 <= 4nm；波长准确度 ±2.0nm；波长重现性 ±0.2nm；测读范围 0~4.0 OD；光分辨度：0.001 OD；测读准确度(微孔板) <±0.006 OD±1.0%,0~2.0 OD；(比色杯) <±0.005 OD±1.0%,0~2.0 OD；测读精确度 <±0.003 OD±1.0%,0~2.0 OD；杂散光 <0.05% 230nm；微孔盘测读时间 18秒；温度范围室温+4~45度。
在此的基础上增加了对时间分辨荧光（TRF)、荧光偏振（FL)、和化学发光（Lum)的测量支持。
时间分辨荧光法（TRF）：波长范围 280~850nm，单色器递增量1nm；数据采集可调；测读次数：1~100flashes，测读延迟0~600usec，读取数据积分时间50~1500usec；发射光带宽9nm，激发光带宽15nm；精确度：100fM/孔铕元素（96孔及384孔顶读模式）；读取速度：96孔板17秒，384孔48秒。
荧光偏振（FL）：光栅式连续波长，以1nm递增；波长范围400~750nm；发射光带宽9nm，激发光带宽15nm；检测灵敏度1nM荧光素/孔时，<5mp SD；读取速度96孔板42秒，384孔123秒。
多功能酶标仪中荧光检测技术介绍
荧光分析技术是一种强大的分析手段，广泛地应用在临床检验、生物学研究、农业科学、食品和环境科学中，是多功能酶标仪的重要应用，如TECAN(M1000、M200等)，Thmeral(Varioskan Flash)，Bio-tek（Synergy 4等），MD（M2、M5）都可以应用于荧光检测。
1.概述室温下，大多数分子处于基态的最低振动能级，处于基态的分子吸收能量（光能、化学能、电能或热能）后跃迁至激发态，激发态不稳定，将很快衰变到基态，以光的形式放出能量，这种现象称为“发光现象”。
分子发光包括荧光，磷光，化学发光，生物发光等。
受到光照时发光，光照切断时发光立即消失的叫荧光，光照切断时，发光逐渐变弱以致消失的叫磷光，吸收化学反应的化学能量而发光叫化学发光，由生物能转变为光辐射的称作生物发光。
由于发光物质不同荧光有分子荧光和原子荧光之分，分子荧光为带光谱，原子荧光为线光谱，通常所说的荧光为分子荧光。
通过测定所发射荧光的特性和强度，可以对物质进行定性、定量分析。
2.荧光检测技术2.1荧光强度(FI)荧光强度与荧光物质的浓度成正比，这是荧光分析法是量分析的依据。
在生物学上的应用非常广泛，可以进行生物大分子定量，酶活性分析，荧光免疫分析，细胞学分析（细胞增殖，细胞毒理，细胞吸附等）和分子间相互作用。
2.1.1细胞凋亡检测Caspase家族在介导细胞凋亡的过程中起着非常重要的作用，其中Caspase-3为关键的执行分子，它在凋亡信号传导的许多途径中发挥功能。
Caspase-3正常以酶原（32KD）的形式存在于胞浆中，在凋亡的早期阶段，它被激活，活化的Caspase-3由两个大亚基（17KD）和两个小亚基（12KD）组成，裂解相应的胞浆胞核底物，最终导致细胞凋亡。
但在细胞凋亡的晚期和死亡细胞，caspase-3的活性明显下降。
设计出荧光物质偶联的短肽Z-DEVD-AMC。
在共价偶联时，AMC不能被激发荧光，短肽被水解后释放出AMC，自由的AMC才能被激发发射荧光（图1）。
酶标仪
近年来，随着多功能酶标仪在国内各高校实验室逐渐推广开来，多功能酶标仪品牌和型号也逐渐多了起来，乱花渐欲迷人眼。
除了三大传统优势品牌PE、MD和TECAN，还出现了众多后来者插足此市场，如收购了芬兰雷勃的Thermo、从发光起家的Berthold、针对药筛领域的BMG以及新兴的BioTek等品牌。
各品牌都有各自的一个甚至多个系列产品线，特性各不相同，选购时各种技术参数、技术指标令人眼花缭乱。
本文尝试从用户实际使用的角度，探讨应该如何看待花样繁多的参数特性，希望能帮助大家找到真正合适自己的多功能酶标仪。
1.滤片Vs光栅多功能酶标仪的分类方法众多，但最简单的莫过于用他们的滤光方式来作分界线。
一般来说，酶标仪可以分为滤光片型和光栅型两大类。
当然也有一些型号，例如Synergy4和EnVision等在一台机器里面同时装上了滤光片和光栅。
但是滤片和光栅并不能同时完成同一个检测，还是想用光栅的时候用光栅，该用滤片的时候用滤片；还有一些实验非用其中一个不可，另一模块实现不了的。
所以这类仪器本质上还只是把滤片和光栅放在了一起，并没有使两者糅合而产生新的技术突破。
总体来说，滤片技术由于发展已久，配合二向色镜（其实也就是另一模式的滤光反光滤镜）等光路系统，可以实现大部分实验的需要。
目前常规多功能酶标仪中最高的检测灵敏度就是用滤光片型做出来的，例如TECAN Infinite F500的荧光检测的灵敏度可以达到0.04 fmol/孔（荧光素，384孔/80ul）。
但是滤光片型仪器由于受限于滤片的波长和数量限制，不可能满足日益增加的实验类型的检测需要，而且有时需要对物质的吸收、激发和发射光谱进行研究，所以后来就诞生了光栅型的仪器。
最先推出光栅的是MD公司，其光栅习惯上称为单光栅。
由于光纯度的不足，在光栅的后面又加入了一组带阻滤片，对杂光进行二次过滤，达到了5×10-4的杂光率，基本与纯粹的滤光片系统一致。
后来TECAN又发展出了双光栅技术，通过两次光栅滤光，杂光率降到了10-6。
全波长酶标仪操作技术
主讲：张玲 广西中医药科学实验中心
课程主要内容
一、酶标仪简介 二、Bio-tek酶标仪的主要技术指标 三、应用范围：ELISA、核酸和蛋白质含量的 鉴定及其相关知识简介 四、视频（Gen5软件的使用、实例） 五、超微量板的使用
一、酶标仪简介
全波长酶标仪：可做紫外/可见光检测的酶标 仪，全波长范围一般为200nm-1000nm，也 有190-850nm的。
二、BIO-tek全波长酶标仪 主要技术指标
配置： 1.主机一台：全波长酶标仪 2.超微量检测板一个：可对16个体积为2ul的样 品进行检测，用于核酸、蛋白样品的直接定量； 3.石英杯一个：又名吸收池，样品池，用来装参 比液，样品液；用于在紫外光区域有吸收的物 质的测定； 4.Biocell杯一个：Biocell位置可快速进行1cm光 路径样品检测； 5.分析软件一套：Gen5软件
核酸、蛋白的检测
常用波长范围： 紫外光区 （10～400nm） 近紫外区（石英紫外区）：200～400 nm 远紫外区（真空紫外区）：10～200 nm 可见光分区：400 ～760nm; 近红外光区：760 ～2500nm 红外光区：2.5 ～ 25um（按波数计为4000 ～400cm-1 ）
BIO-tek全波长酶标仪：检测范围200-999nm。
三、应用范围
Elisa检测、核酸定量和蛋白分析。 性能：微孔板分光光度计具有连续波长功 能，1nm波长步进，检测范围200-999nm； 可读孔板类型6-384孔。
Hale Waihona Puke 四、视频教学1.Gen5软件的使用 2.吸收光检测编辑实例
Gen5软件的使用
核酸、蛋白的检测
五、超微量板的使用
酶标仪及洗板机参数
酶标仪及洗板机参数酶标仪和洗板机是常用于实验室中酶标测定和洗板操作的仪器设备。
它们在生物学、医学和生物化学等领域中起着关键作用。
下面将详细介绍酶标仪和洗板机的参数。
酶标仪的参数主要包括波长范围、线性范围、检测限、精密度和准确度等。
波长范围是指酶标仪可以测量的光的波长范围。
一般酶标仪的波长范围在200纳米到1000纳米之间。
不同波长的光可以用于测定不同的试剂和底物，以及各种酶反应。
线性范围是指酶标仪测量结果的线性范围，也就是说，在这个范围内，测量结果与物质浓度成正比。
线性范围的广度对于准确测定样品的浓度非常重要。
一般线性范围从低浓度到高浓度可以覆盖几个数量级。
检测限是指酶标仪可以检测的最低浓度或最低吸光度。
一般检测限越低，酶标仪的灵敏度越高。
灵敏度较高的酶标仪可以检测非常低浓度的试剂和底物。
精密度是指酶标仪的测量结果的重复性。
在重复测量同一样品的情况下，精密度越高，测量结果的差异越小。
一般可以通过测量相同样品多次来评估酶标仪的精密度。
准确度是指酶标仪的测量结果与实际值的接近程度。
准确度越高，测量结果与实际浓度的偏差越小。
一般可以通过测量已知浓度的标准样品来评估酶标仪的准确度。
洗板机的参数主要包括洗涤方式、吸液方式、洗涤头数量、洗板盘数量和洗板时间等。
洗涤方式包括顺序洗涤和交叉洗涤两种方式。
顺序洗涤是指依次将各个孔洗涤，而交叉洗涤是指根据设定的洗涤顺序，交叉将孔进行洗涤。
交叉洗涤可以更充分地洗去残留液体，并减少样品之间的交叉污染。
吸液方式一般有鼓泡吸液和真空吸液两种。
鼓泡吸液是通过压缩空气产生负压，吸取孔中液体；真空吸液是通过连接真空泵产生负压来吸取液体。
真空吸液的吸力较大，可以更彻底地吸取液体。
洗涤头数量是指洗板机上的洗涤头的数量。
一般洗涤头数量越多，洗板速度越快，洗涤效果越好。
洗板盘数量是指洗板机上可以放置洗板盘的数量。
一般洗板盘数量越多，可以同时处理的样品数量越多。
洗板时间是指洗板机进行洗涤操作的时间。
如何选择酶标仪
如何选择酶标仪近年来，随着多功能酶标仪在国内各高校实验室逐渐推广开来，多功能酶标仪品牌和型号也逐渐多了起来，乱花渐欲迷人眼。
除了三大传统优势品牌PE、MD和TECAN，还出现了众多后来者插足此市场，如收购了芬兰雷勃的Thermo、从发光起家的Berthold、针对药筛领域的BMG以及新兴的BioTek等品牌。
各品牌都有各自的一个甚至多个系列产品线，特性各不相同，选购时各种技术参数、技术指标令人眼花缭乱本文尝试从用户实际使用的角度，探讨应该如何看待花样繁多的参数特性，希望能帮助大家找到真正合适自己的多功能酶标仪。
一、滤片Vs光栅多功能酶标仪的分类方法众多，但最简单的莫过于用他们的滤光方式来作分界线。
一般来说，可以分为滤光片型和光栅型两大类。
当然也有一些型号，例如Synergy4和EnVision 等，一台机器里面同时装上了滤光片和光栅。
但是滤片和光栅并不能同时完成同一个检测，还是想用光栅的时候用光栅，该用滤片的时候用滤片;还有一些实验非用其中一个不可，另一模块实现不了的。
所以这类仪器本质上还只是把滤片和光栅放在了一起，并没有使两者糅合而产生新的技术突破。
总体来说，滤片技术由于发展已久，配合二向色镜(其实也就是另一模式的滤光反光滤镜)等光路系统，可以实现大部分实验的需要。
目前常规多功能酶标仪中最高的检测灵敏度就是用滤光片型做出来的，例如TECAN Infinite F500的荧光检测的灵敏度可以达到0.04 fmol/孔(荧光素，384孔/80ul)。
但是滤光片型仪器由于受限于滤片的波长和数量限制，不可能满足日益增加的实验类型的检测需要，而且有时需要对物质的吸收、激发和发射光谱进行研究，所以后来就诞生了光栅型的仪器。
最先推出光栅的是MD公司，其光栅习惯上称为单光栅。
由于光纯度的不足，在光栅的后面又加入了一组带阻滤片，再把杂光过滤一遍，达到了5×10-4的杂光率，基本与纯粹的滤光片系统一致。
MD酶标仪应用介绍
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For research use only. Not for use in diagnostic procedures.
ELISA酶联免疫吸附实验：
• 根据检测分子的不同，主要分为三种方法： 间接法：检测抗体疫苗等 双抗夹心法：检测抗原或特异小分子或信号蛋白等 竞争法：可检测抗原或抗体 • 根据抗体标记的酶种类和底物种类的不同，检测波长不同： 碱性磷酸酶（AP）：常用底物PNPP 405nm ，本底低， 灵敏度高，较昂贵 辣根过氧化物酶(HRP)：底物有ABTS 410/650nm，或 OPD 492nm，或TMB 450nm ，成本低，但灵敏度不如AP 系统
MD酶标仪应用介绍
© 2012-2015. Trademarks property of Molecular Devices, LLC or their respective owners. For research use only. Not for use in diagnostic procedures. 1 For research use only. Not for use in diagnostic procedures.
• 检测对象：哺乳动物细胞、组织、血清及其他液体样本等 • 试剂盒和检测波长：
– ELISA Kit for Human Glutathione(GSH)， 450nm – Glutathione Assay Kit （Cayman），405nm
• 应用：作为GSH治疗时的血药浓度检测指标。
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For research use only. Not for use in diagnostic procedures.
• 检测波长：450nm
13
For research use only. Not for use in diagnostic procedures.
酶标仪单双波长检测的比较
酶标仪单双波长检测的比较
鲁惠
【期刊名称】《实用医技杂志》
【年(卷),期】2011(018)009
【摘要】@@ 在酶联免疫法测定抗原或抗体时,不论是定量试验还是定性试验,都要求使用酶标仪进行测定.一般的酶标仪有单波长和双波长两种测定模式并且采用的都是垂直光路.在日常工作中有时会不太重视单波长和双波长的选择,对使用单波长、双波长给测定结果带来的较大差异也不很了解,易出现测定孔的数值为负数或弱阳性,甚至漏检的现象.现将酶标仪在选择单、双波长的使用进行比较,报告如下.【总页数】1页(P953)
【作者】鲁惠
【作者单位】内蒙古自治区鄂尔多斯市中心医院,010319
【正文语种】中文
【相关文献】
1.酶标仪单、双波长检测的比较 [J], 梁荣伟;吴福敢
2.酶标仪双波长与单波长比色测定HBsAg的比较 [J], 龚洪波
3.酶标仪单、双波长检测的比较 [J], 邱娜
4.酶标仪单波长和双波长的比较 [J], 梁双吟;李小云;庄祥龙
5.酶标仪单、双波长检测的比较 [J], 梁荣伟;吴福敢
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190-850
190-1000
阅读范围 线性范围 准确性
精确性
波长带宽（nm） 波长准确性 波长可重复性 吸收光分辨率 孔板规格
比色皿类型
0 - 4.0 OD
0 - 4.0 OD
0--4OD
0-2 OD: ±1% ±0.010 OD
0-2 OD: +1% +0.010 OD 2-2.5 OD: +3% +0.010 OD
室温以上4℃至65℃，±0.5℃ @ 37℃
轨道，双轨道和线性
无 氙灯
每个样品2ul(等于是一台超微量核酸蛋 每个样品2ul(等于是一台超微量核酸蛋白
白紫外分光光度计)； 同时还可以使用 紫外分光光度计)； 同时还可以使用标准
标准比色皿来进行检测，可作为常规应 比色皿来进行检测，可作为常规应用和参
用和参照
用）
在Take3微量检测板上使用）
0--4OD 0-3.0 OD(405nm) ≤±0.006±1.0% (0--2.0OD)
≤±0.003±1.0% (0--2.0OD) 2nm ±1nm ±0.2nm 0.001 OD 96
无
0--4OD 0-3.0 OD(405nm) 微孔板≤±0.006±1.0% (0-2.0OD) 比色皿≤±0.005±1.0% (0-2.0OD) 微孔板≤±0.003±1.0% (0-2.0 OD) 比色皿≤±0.005±1.0% (0-2.0 OD) 2nm ±1nm ±0.2nm 0.001 OD 96/384
完成数据的整理和分析。
完成数据的整理和分析。
具有功能强大的数据分析软件SoftMax Pro
具有功能强大的数据分析软件SoftMax Pro
需要连接电脑，通过软件控制操作； Take3微量检测板可检测2μL的样品； 含有光程校正技术； 可连接打印机。 可与BioStack微孔板储板器整合。
系统大小：12”长x12.5”宽x7.7高 (30.5 cm x 31.8 cm x 19.6 cm) 重量：<15磅（6.8公斤） 连接：USB串口连接电脑控制 电源：100 – 240 VAC @ 50- 60 Hz. 外置电源：功率 < 40W
兼容机械臂
兼容机械臂
兼容机械臂
尺寸（cm）：22（高）×58（宽）×38 尺寸（cm）：22（高）×58（宽）×38 尺寸（cm）：22（高）×58（宽）×38
（深）
（深）
（深）
重量（kg）：13.6
重量（kg）：13.6
重量（kg）：13.6
电源：90-250VAC，50/60Hz
电源：90-250VAC，50/60Hz
照
氙灯
氙灯
室温+ 4 °C, to 45 °C，±0.5℃ @ 室温+ 4 °C, to 45 °C，±0.5℃ @ 室温+ 4 °C, to 45 °C，±0.5℃ @ 37
37℃
37℃
℃
有
有
有
终点，动力学法，光谱扫描和孔域扫描 波长扫描，终点法，动力学和孔域扫描 终点法，动力学，双波长
终点检测、动力学、全波长扫描
1cm标准比色皿
微量检测板
超微量检测功能 光源 温度范围 振荡方式 测读模式
可选配16个或者48个样品的微量检测板 可选配16个或者48个样品的微量检测板 无
可选配24个或64个样品的微量检测板 可选配24个或64个样品的微量检测板
无
氙闪灯 无 无
每个样品2ul(等于是一台超微量核酸蛋 白紫外分光光度计)； 同时还可以使用 标准比色皿来进行检测，可作为常规应 用和参照。 氙闪灯
Biotek和MD连续波长对比表
厂家
Biotek
MD
产品
Epoch
Eon
Versamax
190
Plus384
图片
价格
9-11万
12-14万
8-10万
10-13万($11000.00)
12-15万($13000.00)
波长范围（nm）
200 nm -999 nm
200 nm -999 nm
340-850
0-3.0 OD(405nm) ≤±0.006±1.0% (0--2.0OD) ≤±0.003±1.0% (0--2.0OD)
5 nm ±2 nm ±0.2 nm 0.0001 OD
2.4nm ±2 nm ±0.2 nm 0.0001 OD
2nm ±1nm ±0.2nm
6、12、24、48、96和384
需要连接电脑，通过软件控制操作； Take3微量检测板可检测2μL的样品； 含有光程校正技术； 可连接打印机。 可与BioStack微孔板储板器整合。
系统大小：16”长x8.5”宽x8.5”高 (40.6 cm x21.6 cm x 21.6 cm) 重量：<24磅（11公斤） 连接：USB串口连接电脑控制 电源：100 – 240 VAC @ 50- 60 Hz， 外置电源：功率 < 40W
9
终点法96孔: 9s 384孔：29s
有，PathCheck®专利技术 有
软件 其他 物理参数
Gen5软件，中文操作界面，方便中国客 Gen5软件，中文操作界面，方便中国客
户学习和使用，数据输出功能可自动将 户学习和使用，数据输出功能可自动将 具有功能强大的数据分析软件SoftMax
数据转成Excel格式，实验员可以轻松的 数据转成Excel格式，实验员可以轻松的 Pro
6、12、24、48、96和384
96
可选：BioCell（放在BioCell适配器或 可选：标准比色杯（Eonc），BioCell
Take3TM微量检测板上使用）和带塞10mm （放在BioCell适配器或Take3TM微量检测 无 标准比色杯（放在Take3微量检测板上使 板上使用）和带塞10mm标准比色杯（放
0-2 OD：±1% ±0.005 OD 2-2.5 OD：±3% ±0.005 OD
0-2 OD: ±1% +0.010 OD
0-2 OD: +1% +0.010 OD 2-3 OD: +3% +0.010 OD ± 1% + 0.005 @ 0 - 2.0 OD ± 3% + 0.005 @ 2.0 - 3.0 OD
终点法，动力学，双波长
检测通道
1
检测速度
96-well 正常: 49 秒 96-well 快速: 38 秒 96-well 扫速: 15 秒
光路径长度校正功能 有，有专利
仪器用户界面
无
1
96 孔板: 8 秒 384 孔板: 13 秒
有，有专利 无
8
终点法96孔: 12s 无 有
8
终点法96孔: 12s 有，PathCheck®专利技术 有
电源：90-25Βιβλιοθήκη VAC，50/60Hz