机能实验学离体肠实验
《机能学实验》实验教学大纲(临床等)
《机能学实验》实验教学大纲(供五年制本科临床医学、麻醉学等专业使用)Ⅰ前言机能实验学是以生理学、病理生理学、药理学为基础,通过对三学科实验教学的优化、融合、重组形成的一门独立的综合性实践课,是以动物实验和人体功能观察为手段,探讨人体机能活动规律及其在疾病状态或药物干预下的变化规律及其机制的综合性实验课程,是机能学教学的重要组成部分和重要的医学基础课程。
主要内容包括基本实验技能、基本的经典实验、综合性实验和设计性实验。
编写本大纲的目的是要求学生通过该课程的学习,掌握常用实验仪器的原理及使用方法;掌握常用实验动物的选择和局部手术操作;掌握常用实验溶液的配制方法:学会实验资料的收集、整理和数据处理;学会对实验结果的分析、整理和实验报告的正确书写,从而提高对功能学科知识的进一步理解,提高解决实际问题的综合能力、提高科学思维的能力,培养对科学工作严谨求实的作风,为今后从事实际工作和科学研究奠定基础。
本大纲适用于五年制本科临床医学、临床妇产、急救医学、眼耳鼻喉科学、医学美容、医学影像学、麻醉学、法医学专业(方向)医学生使用。
现将大纲使用中有关问题说明如下:一为了使教师和学生更好地掌握教材,大纲中每一实验均由教学目的、教学要求和教学内容三部分组成。
教学目的注明教学目标,教学要求分掌握、熟悉和了解三个级别,教学内容与教学要求级别对应,并统一标示(核心内容即知识点以下划实线,重点内容以下划虚线,一般内容不标示)便于学生重点学习。
二教师在保证大纲核心内容的前提下,可根据不同教学手段,讲授重点内容和介绍一般内容。
三总教学参考学时:68学时。
四使用教材:《机能学实验指导》,自编,石京山,4版,2006年。
Ⅱ正文实验一概述一教学目的(一)明确机能实验课的目的和要求,严格遵守实验室的规章制度,认真做好每一次实验,在实验中不断掌握动物实验的基本操作技术。
(二)掌握BL-410、BL-420E和ASB240U生物信号采集系统操作。
南华大学医学院机能实验学课件-离体小肠平滑肌生理特性(精)
南华大学医学院机能学实验中心
消化道平滑肌受中枢神经系统和体液因素的调 节,接受胆碱能神经和去甲肾上腺素能神经双重支配, 胃肠平滑肌以胆碱能神经支配占优势,分布有高密度的 M胆碱受体,同时也有一定密度的α和β受体分布 乙酰胆碱等拟胆碱药可兴奋M受体,引起回肠平滑肌 收缩,张力增强,收缩幅度加大。M受体阻断药则可拮抗M 受体激动药收缩回肠平滑肌的作用,拟肾上腺素药则可激 动α和β受体,引起回肠平滑肌舒张,张力下降
南华大学医学院机能学实验中心
【分析讨论】
一、25℃台氏液
温度↓→代谢↓
1、 兴奋性↓→收缩频率↓
2、 收缩频率↓
3、 收缩幅度↓
南华大学医学院机能学实验中心
二、乙酰胆碱
激动平滑肌上的M受体 1、(+)生理性钠泵→∣静息电位∣↓→兴奋性↑→收缩频 率↑ 2、钙内流↑:(a) 兴奋性↑→收缩频率↑;(b) 收缩频率↑; (c) 收缩幅度↑ 三、阿托品 阻断平滑肌上的M受体 ,其机制与乙酰胆碱相反
南华大学医学院机能学实验中心
四、肾上腺素
激动平滑肌上的α β受体 1、(-)生理性钠泵→∣静息电位∣↑→兴奋性↓→收缩频 率↓ 2、(+)α→钾外流↑→∣静息电位∣↑→兴奋性↓→收缩频 率↓ 3、(+)β: (a) 钾外流↑→∣静息电位∣↑→兴奋性↓→收缩频率↓ (b) 钙外流↑→∣静息电位∣↑→兴奋性↓→收缩频率↓ (c) 钙外流↑→胞浆钙↓→收缩幅度↓ (d) (+)钙泵→胞浆钙↓→收缩幅度↓
离体小肠平滑肌生理特性
南华大学医学院机能学实验中心
【目 的 与 要 求 】
学习哺乳动物离体灌流法 观察消化道平滑肌的一般生理特性及某 些因素ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ它的影响
离体小肠段的生理特性
探索性问题
一端做一短线环固定在通气的L管下方 一端做一短线环固定在通气的 管下方 或浴皿内, 或浴皿内,另一端扎线与张力传感器 相连。 相连。将肠段完全浸浴在调好温度的 平滑肌槽中。 平滑肌槽中。
3、开启生物机能实验系统
固定L管并调节扎线与张力传感器, 固定L管并调节扎线与张力传感器,使 肠段运动自如又能牵动传感器(注意: 肠段运动自如又能牵动传感器(注意: 扎线不可贴壁或过紧过松)。 )。调节增 扎线不可贴壁或过紧过松)。调节增 益与扫描速度, 益与扫描速度,使肠段的运动曲线清 晰地显示在显示器上并记录肠段活动 曲线。 曲线。
胃肠平滑肌的收缩反应主要由副交感 神经控制,肠肌细胞膜上富含M胆碱 神经控制,肠肌细胞膜上富含 胆碱 能受体, 受体激动剂和拮抗剂均可 能受体,M受体激动剂和拮抗剂均可 明显影响其收缩反应。 明显影响其收缩反应。 本实验以台氏液作灌流液, 本实验以台氏液作灌流液,在体外观 察及记录哺乳动物离体肠段的一般生 理特性, 理特性,观察药物对离体肠管平滑肌 的作用。 的作用。
(2)记录对照肠段运动曲线后,加入 记录对照肠段运动曲线后, 25℃台氏液,并记录曲线变化, 25℃台氏液,并记录曲线变化,同时观 察肠段紧张度变化。当出现明显变化后, 察肠段紧张度变化。当出现明显变化后, 立即用37℃台氏液冲洗,待恢复正常。 立即用37℃台氏液冲洗,待恢复正常。 同法加入45℃台氏液并记录曲线 (3)同法加入45℃台氏液并记录曲线 变化,同时观察肠段紧张度变化。 变化,同时观察肠段紧张度变化。当出 现明显变化后,立即用新鲜37℃ 现明显变化后,立即用新鲜37℃台氏液 冲洗并待恢复。 冲洗并待恢复。 注意作好标记
由于以上流出液中未加入药物, 由于以上流出液中未加入药物,可 以回收使用。 以回收使用。 以下加入药物的流出液不可再用。 以下加入药物的流出液不可再用。
生理实验十三离体小肠平滑肌的生理特性
实验十三离体小肠平滑肌的生理特性一、实验目的1、学习离体肠段平滑肌的实验方法。
2、观察消化道平滑肌的一般生理特性及某些因素对它的影响。
3、加深对消化道平滑肌生理特性的理解。
二、实验原理消化管、血管、子宫、输尿管、输卵管以及输精管等均由平滑肌组成。
哺乳动物消化管平滑肌与骨骼肌、心肌一样,具有肌组织共有的特性,如兴奋性、传导性和收缩性等。
但消化道平滑肌又有其特点,即兴奋性较低,收缩缓慢,富有伸展性,具有紧张性、自动节律性,对化学、温度和机械牵张刺激较敏感等。
这些特点对维持消化管内一定压力、保持胃肠等一定的形态和位置,适合于消化管内容物的理化变化具有生理意义。
这些特点在整体内受中枢神经系统和体液因素的调节。
家兔小肠平滑肌上存在α、β、M受体。
其作用是:α、β受体兴奋可使小肠平滑肌抑制而舒张;M受体兴奋可使小肠平滑肌兴奋而收缩。
下面是各类药品对小肠受体的分别作用:1、乙酰胆碱(Ach):M受体激活剂,乙酰胆碱可兴奋M受体,使小肠收缩幅度增加,蠕动加强。
2、阿托品(Atro):M受体阻断药,为竞争性拮抗剂,单独用药对肠管无作用,可阻断M受体,对抗乙酰胆碱的M样作用,使肠管收缩幅度降低。
3、肾上腺素(Ad):α、β受体激活剂,可激活α、β受体(主要是β2受体),α、β受体激动可产生与M受体激动相反的效应,表现为肠管舒张,小肠蠕动减弱。
4、氯化钡(Bacl2):Ba2+ 进入细胞与钙调蛋白结合,使平滑肌收缩。
Ba2+可使细胞膜发生去极化。
所以加入Bacl2肠管会发生强直性收缩,Bacl2并非作用于受体,所以阿托品不能对抗这一作用。
5、盐酸(HCl):加酸可使Ca2+ 内流减少,肌浆网Ca2+ 释放减少,从而Ca2+ 与肌钙蛋白结合减少,因此平滑肌收缩频率和幅度都降低。
6、氢氧化钠(NaOH):加碱后[H+]降低,Ca2+ 内流增加,肌浆网Ca2+ 释放增多,从而Ca2+ 与肌钙蛋白结合增多,因此平滑肌收缩频率和幅度都升高。
生理实验报告3(离体肠段)
广州大学动物生理学实验报告开课学院及实验室:生科院生化楼6032019年3月25日学院生命科学学院年级、专业、班生技171姓名GDZ学号实验课程名称动物生理学实验成绩离体肠段平滑肌的自动节指导老师实验项目名称律性活动与影响因素观察[实验目的]1.观察胃肠道的各种形式的运动,以及神经和体液因素对胃肠运动的调节;2.学习离体小肠平滑肌灌流的实验方法;3.证明小肠平滑肌具有自动节律性和紧张性活动;4.观察若干刺激对离体小肠运动的影响。
[实验原理]1.动物的胃肠道由平滑肌组成,除具有肌肉的共性,如兴奋性、传导性和收缩性之外,还有自身特性,主要表现为紧张性和自动节律性收缩(其特点是收缩缓慢而且不规则)。
2.在整体情况下,消化管平滑肌的运动受到神经和体液的调节。
动物麻醉后,这些运动依然存在。
如果再刺激胃肠道的副交感神经或给胃肠道直接的化学刺激,这些运动形式会变得更加明显。
3.小肠平滑肌离体,放置在各种化学成分、渗透压、pH、温度以及气体供应等因子十分接近机体的内环境的溶液中时,可保持离体小肠段长时间地存活下来,并可以观察到小肠平滑肌的自动节律性、紧张性收缩、伸展性和对机械牵拉、温度刺激、化学刺激十分敏感,而对电刺激和切割刺激不敏感等一系列特性。
4.兔的胃肠道运动活跃且运动形式典型,是观察胃肠运动的好材料。
[实验对象]家兔[实验药品]台氏液(25℃、37℃、45℃)、2%CaCl、1:10000肾上腺素、1:10000乙酰胆碱、阿托品2[仪器与器械]器械:手术镊、直尖镊、手术剪、直尖剪、万能支架、双凹夹、固定小勾仪器:生物信号采集系统(含电脑)、张力换能器10g、制氧机、恒温浴槽、电子温度计其他:改良麦氏浴槽、培养皿、烧杯、细绳、细针、橡胶管、氧气接口管[实验方法与步骤]1恒温浴槽装置准备(通氧)2离体肠段标本制作3仪器连接4实验项目观察4.1缺氧对离体肠段活动的影响4.2低温对离体肠段活动的影响4.3高温对离体肠段活动的影响4.4高Ca2+对离体肠段活动的影响4.5肾上腺素对离体肠段活动的影响4.6乙酰胆碱对离体肠段活动的影响4.7Ach+阿托品对离体体肠段活动的影响5记录数据并分析[实验结果与分析]0项目总表结果:由表1可以看出缺氧、低温、肾上腺素对离体肠段活动有抑制作用,高温、乙酰胆碱对离体肠段有促进作用;阿托品有抵消乙酰胆碱作用的功能,高Ca2影响效果从数据上看是抑制作用。
机能学实验-消化道平滑肌生理特性及药物影响实验报告
实验名称:消化道平滑肌生理特性及药物影响一、实验目的:1、学习消化道平滑肌的--般生理特性。
2、观察药物和化学因素对消化道平滑肌运动的影响。
3、了解家兔离体肠管的实验方法。
二、实验原理①消化道平滑肌具有自动节律性,伸展性,且对化学物质、温度变化及牵张刺激较敏感。
离体肠平滑肌置于适宜的液体中,仍能进行节律性活动,并对温度、pH环境变化做出反应。
②当交感神经兴奋时,其末梢释放的递质去甲肾上腺素或体液中的肾上腺素,作用于消化道平滑肌细胞上的a、β受体,可使消化道平滑肌运动减慢减弱;当迷走神经兴奋时,末梢释放递质乙酰胆碱,作用于平滑肌细胞膜上的M受体,可使平滑肌运动加快、加强。
因此,当给予相应药物(如受体激动剂或受体阻断剂)于灌流液中时,平滑肌舒缩活动也发生相应变化。
③平滑肌细胞外液Ca2+浓度升高时,Ca2+内流增加,使得细胞内液中Ca2+浓度升高,Ca2+更易与钙调蛋白结合,促进了横桥的激活。
可使收缩力增加。
三、实验对象及材料:家兔、麦氏浴槽,张力换能器,BL-420F生物信息采集系统,L形通气管,铁支架,三角铁架,试管夹,滴管,烧杯,供气球,温度计,酒精灯,台氏液,1:10000肾上腺素溶液,1:100000乙酰胆碱溶液,1N NaOH溶液,1N HCI溶液,1:100BaCl,溶液。
四、实验步骤:①用木槌猛击兔头枕部,使其昏迷。
②剖开腹腔,找出胃幽门与十二指肠交界处,依次向下端取出长四厘米的小肠段。
离体肠段保存于供氧的台氏液中。
③恒温水浴锅控制加热,恒温工作点定在36.8℃。
将充满氧气的供气球与通气管相连。
将离体肠段的一端与浴槽内的标本挂钩相连,另一端连接于张力换能器,调节换能器张力,预置1~2g的张力信号。
④电脑选择“实验项目”--“消化实验”--“消化道平滑肌生理特性”。
记录一段正常的小肠收缩曲线。
五、观察项目:1.记录肠管在室温台氏液中的活动情况。
2.将浴槽放入盛水的烧杯中,其下用酒精灯加热,使台氏液温度逐渐增至38~40°C,记录肠管运动的变化。
机能实验学离体肠实验
机能实验学离体肠实验机能实验学离体肠实验一、实验目的通过离体肠实验,了解胃肠道中葡萄糖酶的活性及其对碳水化合物消化的作用机制,掌握离体器官实验的基本操作方法和技能,加深对消化道生理学方面知识的理解。
二、实验原理离体肠实验是指将新鲜的肠道组织或动物的小肠、大肠等离体,置于温度和pH值适宜的生理盐水中,再加入所需的药物、盐酸等药剂,从而对肠道组织的生理功能进行研究。
本次实验中,离体肠道组织通过消化酶葡萄糖酶的作用下,将淀粉转化为葡萄糖,并通过检测葡萄糖的浓度变化,来研究葡萄糖酶的活性及其对碳水化合物消化的作用机制。
三、实验材料与方法(一) 实验所用材料:1. 实验动物(如豚鼠、鼠等)的小肠、大肠等离体组织;2. 生理盐水、重铬酸钾(K2Cr2O7)、亚甲蓝、淀粉溶液;3. 6支试管、吸管、定量移液管、滴定管等器材;4. 葡萄糖测定仪或光度计等测定葡萄糖浓度的设备。
(二) 实验步骤:1. 取新鲜的小鼠小肠或大肠,放入含有生理盐水的洗涤碗中,沿着肠子的长轴切下一小块(2 cm左右),用小剪刀剪成约5 mm宽,约20 mm长的均匀大块,称量其重量(约0.3 g)。
2. 在滴管底部用橡皮头接上小肠或大肠组织,将其浸泡在含有淀粉溶液的试管中,使其与淀粉溶液充分接触。
(试管中的淀粉浓度为1%或2%)3. 原地变性:用70%酒精浸泡处理过的肠道块,将其浸泡在70%酒精溶液中,15min后取出,洗去酒精,以煮沸水煮5min即可。
这种处理方式可以将细胞膜过膜葡萄糖转运蛋白的良好状态保留下来,保证葡萄糖浓度是从肠道上皮细胞内部扩散出来,以充分保证葡萄糖酶反应从肠道内部开始。
4. 生理盐水洗涤:取1支干净的试管,加入适量的生理盐水,将肠道块放入试管中,轻轻摇动,使其与生理盐水充分接触,洗涤掉表面的残留物质。
5. 模拟肠液:取1支干净的试管,加上2 ml的氯化钠溶液(0.9%),加3 ml的磷酸氢二钾盐酸盐缓冲液(pH 7.0-7.5),加入含有亚甲蓝的淀粉溶液,制成模拟肠液。
机能实验—小肠平滑肌
同时作用于ß受体 同时作用于 受体
肠肌膜cAMP合成
促进
肌浆Ca 肌浆Ca2+
肌膜及肌浆网上Ca 肌膜及肌浆网上Ca2+泵活动
肠肌活动减弱 收缩频率变慢
幅度减小
基线下移
1:1000 毛果芸香碱
M胆碱受体激动药 胆碱受体激动药 使平滑肌Ca 使平滑肌Ca
2+专用通道开放
Ca2+内流 肌浆Ca 肌浆Ca2+
消化道平滑肌和其它肌肉一样具有兴 奋性、传导性、收缩性。 奋性、传导性、收缩性。但由于消化道机 能的特殊性, 能的特殊性,其消化道平滑肌则具有它的 一般生理特性。 一般生理特性。
消化道平滑肌的一般生理特性: 消化道平滑肌的一般生理特性:
不规则的节律性 持续的紧张性 较低的兴奋性 较大的伸展性和短缩性 对刺激的敏感性 对化学、温度、机械牵张敏感;对电刺激不敏感) (对化学、温度、机械牵张敏感;对电刺激不敏感)
离体小肠平滑肌的制备取一只家兔用木棰击昏家兔头部迅速剖腹速取靠近十二指肠附近的小肠2030cm放于盛有台氏液的培养皿中轻轻漂洗将其分成每段长34cm然后将一段小肠两端分别用线结扎一端连于实验药筒水浴的小钩上另一端的结扎线连张力换能器连线垂直68cm氧气以12个秒气泡通至浴槽供打开bl420e生物机能实验系统从实验项目中的消化实验选消化道平滑肌的生理特性进行实验描记
手术剪
圆针 棉线 培养皿 氧气袋 木棰 烧杯 注射器20ml 温度计 双凹夹 注射器20ml 1∶10000肾上腺素 1:1000毛果芸香碱 台氏液
实验仪器
HW-400S恒温平滑肌槽 恒温平滑肌槽
仪器的连接装置
离体小肠平滑肌的实验装置示意图
BL ---- 420E+
药物对离体肠肌的作用实验报告
竭诚为您提供优质文档/双击可除药物对离体肠肌的作用实验报告篇一:机能实验学离体肠实验机能实验学实验报告课题名称:传出神经药物对离体肠肌的作用院(系):韶关学院医学院专业班级:20XX级临床医学本科班学生姓名:符宏展学号:112指导教师:梁俊辉二○一三年六月五日机能实验报告实验目录:1实验目的2实验装置和器材3实验药物4实验动物5实验原理6实验方法7实验注意事项8实验结果实验数据实验记录波型及静态测量数据9实验结果讨论10实验结论11实验思考实验报告实验次序:九实验项目:传出神经药物对离体肠肌的作用班级:11临本姓名:符宏展学号:112实验类型(打√):(基础□综合□设计□)一、实验预习二、实验操作原始(数据)记录及实验结果的分析实验时间:20XX年6月5日(星期三晚上:7:00-10:00)实验同组人:马腱明符宏展朱佛妹叶超群黄小花张鹏黄锦霞篇二:离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用的观察实验五离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用的观察【实验目的】学习一种离体组织器官试验方法;观察离子成分、酸碱度、温度、乙酰胆碱、肾上腺素等药物对离体家兔小肠平滑肌的作用;分析平滑肌活动的某些生理特性及理化环境改变对它的影响。
【实验原理】消化道平滑肌具有自动节律性、较大的伸展性,对化学物质、温度及牵张刺激较为敏感等生理特性。
将离体的组织、器官至于模拟的内环境中,可在一定时间内保持其功能,从而为我们检测它们的生理学和药理学特性提供了便利的条件。
功能和维持的时间长短与模拟内环境的精确性和稳定性有关。
【实验步骤】1.恒温浴槽的准备工作2.标本制备3.仪器连接与设置4.启动计算机开始记录【观察项目】1.自动节律收缩2.观察胆碱能受体激动剂对肠断收缩的影响及阻断剂的作用(1)乙酰胆碱的作用(2)阿托品的作用3.观察肾上腺素能受体激动剂对肠断收缩的影响及阻断剂的作用(1)肾上腺素的作用(2)去甲肾上腺素的作用4.观察钙离子对肠断收缩的影响5.观察温度对肠断收缩的影响6.观察酸碱度对肠断收缩的影响【结果分析】1.观察胆碱能受体激动剂对肠断收缩的影响及阻断剂的作用(1)乙酰胆碱的作用在浴槽中加入乙酰胆碱后,可见离体肠管活动增强,幅度增加。
机能学实验报告【范本模板】
实验一、小肠平滑肌生理特性的观察与分析一、实验目的-—1.观察温度、乙酰胆碱、肾上腺素等药物对离体家兔小肠平滑肌的作用;2.观察消化道平滑肌的一般生理特性及分析理化环境改变对其舒缩活动的影响。
二、实验原理消化道平滑肌和骨骼肌、心肌一样,也具有兴奋性、传导性和收缩性,有些也具有自律性。
相比之下消化道平滑肌的兴奋性低,收缩慢,伸展性大,具有紧张性收缩,对化学物质、温度变化及牵张刺激较敏感等特性。
小肠离体后,置于适宜的溶液中,观察其收缩活动及环境变化的影响,观察分析上述生理特性.三、实验材料-—1、实验动物:家兔2、器械、药品:电热恒温水浴锅、浴槽、张力换能器(量程为25g以下)、bl-410生物记录系统、l型通气管、道氏袋、注射器、培养皿、温度计、烧杯、螺丝夹、三维调节器、台氏液、0.01%去甲肾上腺素、0。
01%乙酰胆碱、1mol/l naoh溶液、lmol/l hcl溶液、2%cacl2溶液。
四、实验方法和步骤1、标本制备流程:①击昏家兔:用木槌猛击兔头枕部,使其昏迷。
②剖开腹腔快速取出肠管:立即剖开腹腔,找出胃幽门与十二指肠交界处,快速取长20~30cm的肠管,先将与该肠管相连的肠系膜沿肠缘剪去,置于供氧台氏液中轻轻漂洗,把肠内容物基本洗净.③制作离体肠标本:将肠管分成数段,每段长2—3cm,两端各系一条线,保存于供氧的38℃左右的台氏液中2、仪器安装与调试实验安装(如图):恒温水浴锅控制加热,恒温工作点定在38℃。
将充满氧气的道氏袋与通气钩相连接,将肠段一端系在通气管钩上,另一端与张力换能器相连。
控制通气量,使氧气从通气管前端呈单个而不是成串逸出。
仪器调试:bl-410系统的使用,选择“实验项目"中的“消化实验”选中“消化道平滑肌生理特性”。
相关参数设置的参考值:时间常数t→d c,高频滤波f→30hz,显速→4。
00s/div,增益→100g。
用鼠标左键单击工具条上的“开始”按钮,调节参数至波形幅度、密度适当,待收缩曲线稳定后,单击记录按钮。
机能实验学离体肠实验
机能实验学离体肠实验————————————————————————————————作者:————————————————————————————————日期:机能实验学实验报告课题名称:传出神经药物对离体肠肌的作用院(系):韶关学院医学院专业班级:2011级临床医学本科班学生姓名:符宏展学号:112指导教师:梁俊辉二○一三年六月五日机能实验报告实验目录:1 实验目的2 实验装置和器材3 实验药物4 实验动物5 实验原理6 实验方法7 实验注意事项8 实验结果实验数据实验记录波型及静态测量数据9 实验结果讨论10 实验结论11 实验思考实验报告实验次序:九实验项目:传出神经药物对离体肠肌的作用班级:11临本姓名:符宏展学号:112实验类型(打√):(基础□综合□设计□)一、实验预习实验预习报告内容原则上应包含实验目的、实验原理、实验主要仪器、试剂及实验步骤。
实验目的:掌握:1.消化道平滑肌的一般生理特性及某些因素对它的影响。
2.哺乳动物离体器官灌流法。
实验装置和器材:RM6240生物信号采集与处理系统、离体器官恒温灌流仪、氧气瓶、张力换能器、烧杯、滴管等。
实验药物:蒂罗德溶液、0.01%肾上腺素、0.01% 乙酰胆碱、0.01%阿托品、0.1%普萘洛尔、0.1%酚妥拉明等。
实验动物:家兔实验原理:哺乳动物消化道平滑肌具有收缩性、缓慢而不规则的自动节律性、伸展性和对化学、温度及机械牵张刺激较为敏感等生理特性。
消化道平滑肌常保持微弱的持续收缩状态,即有一定的紧张性。
本实验应用不同的化学刺激、神经递质和药品作用于离体平滑肌,以了解其一般生理特性及药物的影响。
家兔小肠平滑肌上存在α、β、M受体。
α、β受体兴奋可使小肠平滑肌抑制而舒张;M受体兴奋可使小肠平滑肌兴奋而收缩。
观察乙酰胆碱、阿托品、肾上腺素等传出神经系统药物对离体家兔小肠平滑肌的作用并掌握离体平滑肌的实验方法。
实验方法:1.仪器的准备:恒温浴槽的水箱加入适当的水,设置温度为38℃;2.动物手术:制备离体肠肌标本;3.安装实验装置:肠段置于恒温灌流仪的内槽,下端系在钩上,上端与张力换能器相连。
传出神经系统药物对离体肠肌的影响
机能实验—传出神经系统药物对离体肠肌的影响实验目的1、掌握离体平滑肌的实验方法。
2、观察传出神经系统药物对离体家兔小肠平滑肌的作用教学时数2学时实验原理一、离体实验1、所用组织:心脏、膀胱、子宫、气管、肺、肠等均可用于离体实验2、特点:实验条件易于控制、操作简便、结果准确、节省时间,可进行大量药物的筛选。
3、要求:离体实验需在一定生理环境下进行,模拟体内环境。
(1)温度:38±0.5℃(2)通氧气:1-2气泡/s(3)营养液:含有一定离子和葡萄糖的溶液,不同的组织所选用的营养液不同。
二、离体肠管实验1、肠管的选择:根据实验目的的不同进行选择(1)小肠:十二指肠、空肠、回肠(2)自律性:频率较慢,起博点位于十二指肠,自律性自上而下渐弱。
(3)空肠多做定性实验,回肠多做定量实验2、肠内受体及作用原理(1)受体:家兔小肠平滑肌上存在α、β、M受体。
(2)作用:α、β受体兴奋可使小肠平滑肌抑制而舒张;M受体兴奋可使小肠平滑肌兴奋而收缩。
(3)药品对受体的作用:1、氯化乙酰胆碱(Ach):M受体激动剂,乙酰胆碱可兴奋M受体,使小肠收缩幅度增加,蠕动加强。
2、阿托品(Atro):M受体阻断药,为竞争性拮抗剂,单独用药对肠管无作用,可阻断M受体,对抗乙酰胆碱的M样作用,使肠管收缩幅度降低。
3、氯化钙(Bacl2):①Ba2+进入细胞与钙调蛋白结合,使平滑肌收缩,②Ba2+可使细胞膜发生去极化。
所以加入Bacl2肠管会发生强直性收缩,Bacl2并非作用于受体,所以阿托品不能对抗这一作用。
实验材料1.动物:家兔2.药品①5X10-4氯化乙酰胆碱②0.5%硫酸阿托品③ 20%BaCL23、器材:RM6240多媒体化生物信号记录分析系统、PC80586计算机、张力传感器、保温式麦氏浴槽、超级恒温水浴、“L”型通气钩、高位吊瓶、量筒、烧杯、培养器、氧气瓶、外科剪刀、眼科剪刀、眼科镊子、缝衣针、棉线、注射器、台式营养器。
机能实验设计
机能实验设计机能学实验设计不同浓度乙醇对家兔离体小肠平滑肌活动的影响班级:临床1302学号:132203118姓名:秦佳睿课题名称:不同浓度乙醇对家兔离体小肠平滑肌活动的影响设计思路中华酒文化从杜康酿酒至今已有数千年的历史,酒文化的形式发展也从单一的独自品味酌酒演变成当下形式多样的“酒文化”。
劝酒敬酒更是在“酒文化”的特色之一。
然而,当下有很多人在“享受”酒文化乐趣的同时,过度饮酒导致健康损害,引发事故悲剧的现状,也令人十分担忧。
乙醇进入人体,能产生多方面的破坏作用。
它使神经系统从兴奋到高度抑制,严重地破坏神经系统的正常功能。
据临床观察和流行病学调查表明,乙醇摄入过多可导致心肌病变、胃炎、溃疡等,还可使高血压病的发病率升高【1】【2】。
常饮酒的人喉癌及消化道癌发病率明显增加。
【3】【4】消化道是乙醇进入人体最先受刺激的部位,有报道,乙醇进入胃内可造成胃粘膜损伤【5】。
乙醇对心肌细胞钠离子跨膜内流有一定抑制用,对心肌细胞内贮存的钙离子释放有显著抑制作用。
因认为乙醇对心肌细胞收缩的抑制作用可能是通过改变肌水平或肌浆对钙离子的转运而实现的【6】,但不影响细胞外跨膜内流。
乙醇对小肠平滑肌的抑制作用可能与乙醇抑制钠离子、钙离子转运有关。
本实验以家兔离体小肠为标本,观察不同浓度乙醇对离体小肠平滑肌的影响,进一步了解乙醇与人体健康的关系。
一、材料和方法(一)实验对象及分组选用体重为2-3kg健康家兔15只,雌雄不拘。
(二)材料1、器械:恒温浴槽装置一套(麦氏浴槽、恒温控制仪、氧气)、万能支架、双凹夹、烧杯、1ml注射器、手术器械。
2、仪器:生物信号采集处理系统、张力换能器。
3、药品:台式液、乌拉坦、不同浓度乙醇(5%、10%、15%、17.5%)。
【厂家批号】▲麦氏浴槽: 北京凯辉盛达科技发展有限公司 ,KMYC▲恒温控制仪:博宇创智(北京)科技发展有限公司,XD861-A▲万能支架:北京凯辉盛达科技发展有限公司,KWNJ-2▲双凹夹:北京凯辉盛达科技发展有限公司,KHDJ▲注射器:江苏治宇医疗器材有限公司,1ml▲手术器械:深圳市瑞沃德生命科技有限公司,RWD▲生物信号采集处理系统:南京美易科技有限公司,MedLab-U/8c502▲张力换能器:北京众实迪创科技发展有限责任公司,ZS▲台式液:南京森贝伽生物科技有限公司,SBJ-0213▲乌拉坦:上海麦恪林生化科技有限公司,U820333▲无水乙醇:上海高朗化工科技有限公司,L05002(三)实验步骤与方法1、家兔离体小肠平滑肌标本的制备家兔在实验前24h 禁止进食,自由饮水。
离体小肠动物生理学实验
理化因素与药物对离体小肠运动的影响A.观察消化道平滑肌的生理特性B.学习哺乳动物离体器官灌流的一种方法C.各种理化因素对离体肠段活动的影响消化道平滑肌的特点:兴奋性——较低传导性收缩性——微弱持续收缩,即具一定紧张性自律性——良好,但不规则对理化因素或药物敏感实验动物:小鼠,体重20g左右,雌雄不拘力换能器、平滑肌离体灌流恒温装置、手术器械一套、恒温水浴锅、温度计、铁架台、钢瓶(内装95%O2+5%CO2混合气)、棉线、培养皿。
药品试剂:台氏液、1/10000去甲肾上腺素、1/10000乙酰胆碱、1mol/L NaOH、1mol/L HCl1. 预热平滑肌槽;2. 断颈处死小鼠,剖开腹腔,取约12cm小肠置于38℃的台氏液中;3. 每组取2-3 cm小肠置于38 ℃的台氏液中,穿线固定小肠标本,连接装置。
张力传感器,连接BL420F 生物信号采集系统通入混合气(95% O2+ 5% CO2)37 ±0.5℃恒温循环水入口观察项目(1)正常小肠运动曲线(2)加入乙酰胆碱两滴,描记肠段运动(3)加入肾上腺素两滴,描记肠段活动(4)加入NaOH两滴,观察肠段活动变化。
(5)加入HCl两滴,观察肠段活动变化。
记录项目观察项目收缩性加入1:10000ACh(2滴)加入1:10000肾上腺素(2滴)加入1mol/ml NaOH(2滴)加入1mol/ml HCl(2滴)加药前,准备好更换用的预热台氏液。
保持浴槽内温度在38℃,温度勿过高或过低。
上述药液加入量为参考剂量,效果不明显时,可以增补,但防止一次加药量过多。
每次实验项目效果明显后,立即更换台氏液,冲洗肠段,待肠段恢复稳定活动后,再观察下一实验项目。
离体小肠正常活动曲线 滴加CaCl2溶液滴加1:10000肾上腺素 滴加1:10000乙酰胆碱思考题为什么加入各种药物会引起离体肠段活动的变化?其机理是什么?参考文献1.解景田, 刘燕强, 崔庚寅. 生理学实验(第4版). 高等教育出版社. 20162.张才乔. 动物生理学实验(第二版). 科学出版社. 2014年3.李光华. 人体生理学实验指导. 科学出版社. 20134.金天明. 动物生理学实验教程. 清华大学出版社. 20125.项辉, 龙天澄, 周文良. 生理学实验指南科学出版社. 20086.李仁德,董守良,陈强. 人体及动物生理学实验指导. 兰州大学出版社. 20017.Fox. Human physiology lab manual (9th Ed.). 2002。
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机能实验学实验报告课题名称:传出神经药物对离体肠肌的作用院(系):韶关学院医学院专业班级:2011级临床医学本科班学生姓名:符宏展学号:112指导教师:梁俊辉二○一三年六月五日机能实验报告实验目录:1 实验目的2 实验装置和器材3 实验药物4 实验动物5 实验原理6 实验方法7 实验注意事项8 实验结果实验数据实验记录波型及静态测量数据9 实验结果讨论10 实验结论11 实验思考实验报告实验次序:九实验项目:传出神经药物对离体肠肌的作用班级:11临本姓名:符宏展学号:112实验类型(打√):(基础□综合□设计□)一、实验预习实验预习报告内容原则上应包含实验目的、实验原理、实验主要仪器、试剂及实验步骤。
实验目的:掌握:1.消化道平滑肌的一般生理特性及某些因素对它的影响。
2.哺乳动物离体器官灌流法。
实验装置和器材:RM6240生物信号采集与处理系统、离体器官恒温灌流仪、氧气瓶、张力换能器、烧杯、滴管等。
实验药物:蒂罗德溶液、0.01%肾上腺素、0.01% 乙酰胆碱、0.01%阿托品、0.1%普萘洛尔、0.1%酚妥拉明等。
实验动物:家兔实验原理:哺乳动物消化道平滑肌具有收缩性、缓慢而不规则的自动节律性、伸展性和对化学、温度及机械牵张刺激较为敏感等生理特性。
消化道平滑肌常保持微弱的持续收缩状态,即有一定的紧张性。
本实验应用不同的化学刺激、神经递质和药品作用于离体平滑肌,以了解其一般生理特性及药物的影响。
家兔小肠平滑肌上存在α、β、M受体。
α、β受体兴奋可使小肠平滑肌抑制而舒张;M受体兴奋可使小肠平滑肌兴奋而收缩。
观察乙酰胆碱、阿托品、肾上腺素等传出神经系统药物对离体家兔小肠平滑肌的作用并掌握离体平滑肌的实验方法。
实验方法:1.仪器的准备:恒温浴槽的水箱加入适当的水,设置温度为38℃;2.动物手术:制备离体肠肌标本;3.安装实验装置:肠段置于恒温灌流仪的内槽,下端系在钩上,上端与张力换能器相连。
氧气袋开口的针头插入标本槽下端的橡皮管内,人工加压控制出气量,使气泡呈单个逸出;4.观察项目:⑴观察正常小肠平滑肌运动的节律、波形和幅度;⑵给予0.01%乙酰胆碱2滴,观察收缩曲线的变化;⑶给予0.01%阿托品2~4滴,观察收缩曲线的变化。
1~2min后再加入乙酰胆碱2滴于浴槽内,观察收缩曲线的变化;⑷给予0.01%肾上腺素2滴,观察收缩曲线的变化;⑸给予0.1%普萘洛尔2滴,观察收缩曲线的变化。
2min后加入0.01%肾上腺素2滴,观察收缩曲线的变化;1min后加入0.1%普萘洛尔2滴,观察收缩曲线的变化;⑹给予0.1%酚妥拉明2滴,观察收缩曲线的变化。
2min后加入0.01%肾上腺素2滴,观察收缩曲线的变化;1min后加入0.1%酚妥拉明2滴,观察收缩曲线的变化;⑺同时给予0.1%普萘洛尔2滴和0.1%酚妥拉明2滴,观察收缩曲线的变化;2min后加入0.01%肾上腺素2滴,观察收缩曲线的变化;1min后加入0.1%酚妥拉明2滴,观察收缩曲线的变化;1min后加入0.1%普萘洛尔2滴,观察收缩曲线的变化;1min后加入0.01%乙酰胆碱,观察收缩曲线的变化;1min后加入0.01%阿托品,观察收缩曲线的变化。
实验注意事项:⑴在恒温槽内先装水,方可接通电源;⑵制备肠标本时,动作宜轻柔,勿用手捏,以免损伤肠壁。
冲洗肠管不能用力过猛,避免肠管过于膨胀,影响其正常功能。
标本不宜在空气中暴露过久,以免影响数据的准确性;⑶供氧时气量要适中,气泡要缓慢、成串、单个为好。
气泡过多肠管受冲击,收缩曲线不稳定;⑷每次出现效应后,立即用冷蒂罗德溶液冲洗2~3次,再更换热蒂罗德溶液进行下一步实验;⑸每个步骤要有对照曲线。
注意节律、幅度和紧张度的改变;⑹实验过程中各仪器参数一经确定,勿随意调动,以免影响数据的准确性。
二、实验操作原始(数据)记录及实验结果的分析实验时间:2013年 6 月 5 日 (星期三晚上:7:00-10:00)实验同组人:马腱明符宏展朱佛妹叶超群黄小花张鹏黄锦霞如果实验有数据表格,学生在实验预习时应画好实验数据表格,供实验填写数据。
实验结果:正常数据表格实验数据最大收缩力(g)最小舒张力(g)平均值(g)频率测量正常 1.539 0.286 0.848 14实验记录波型实验一:乙酰胆碱数据表格实验数据最大收缩力(g)最小舒张力(g)平均值(g)频率测量正常 1.422 0.205 0.679 14乙酰胆碱 1.737 0.271 0.891 16实验记录波型实验二:阿托品→乙酰胆碱数据表格实验数据最大收缩力(g)最小舒张力(g)平均值(g)频率测量正常0.696 0.205 0.407 15阿托品0.557 0.161 0.290 14乙酰胆碱 1.033 0.169 0.483 13实验记录波型实验三:肾上腺素数据表格实验数据最大收缩力(g)最小舒张力(g)平均值(g)频率测量正常 1.092 0.161 0.503 13 肾上腺素0.550 0.147 0.312 15实验记录波型实验四:普萘洛尔→肾上腺素→普萘洛尔数据表格实验数据最大收缩力(g)最小舒张力(g)平均值(g)频率测量正常 1.378 0.191 0.665 13 普萘洛尔 1.004 0.169 0.442 12 肾上腺素0.703 0.154 0.350 12 普萘洛尔0.696 0.154 0.335 13实验记录波型实验五:酚妥拉明→肾上腺素→酚妥拉明数据表格实验记录波型实验六:普萘洛尔+酚妥拉明→肾上腺素→酚妥拉明→普萘洛尔→乙酰胆碱→阿托品数据表格实验 数据 测量最大收缩力(g ) 最小舒张力(g ) 平均值(g ) 频率 正常1.085 0.139 0.490 15 普萘洛尔+酚妥拉明0.821 0.132 0.356 13 肾上腺素1 0.608 0.110 0.279 12 肾上腺素2 0.513 0.095 0.236 13 酚妥拉明 0.491 0.095 0.225 普萘洛尔1 0.462 0.095 0.222 普萘洛尔2 0.322 0.088 0.173 乙酰胆碱 0.242 0.125 0.182 阿托品0.205 0.1030.152实验记录波型实验 数据 测量 最大收缩力(g ) 最小舒张力(g )平均值(g ) 频率 正常 0.945 0.169 0.447 13 酚妥拉明 1.224 0.161 0.533 13 肾上腺素1 1.026 0.125 0.425 12 肾上腺素2 0.857 0.117 0.351 12 酚妥拉明0.7330.110 0.30813实验结果讨论:1、正常情况下,我们观察到离体小肠平滑肌在台氏液中可以自动地、缓慢地收缩,但其节律性很不规则。
小肠平滑肌自律性产生的离子基础尚未完全清楚,目前认为,它的产生可能与细胞膜上生电性钠泵的活动具有波动性有关,当钠泵的活动暂时受抑制时,膜便发生去极化;当钠泵活动恢复时,膜的极化加强,膜电位便又回到原来的水平。
2、在浴槽中加入0.01%乙酰胆碱(Ach)2滴后,可见离体肠管活动增强,描记曲线出现收缩频率变快,幅度增加。
出现上述现象的机理,目前认为与消化道平滑肌细胞产生动作电位的离子基础是Ca2+的内流有关。
乙酰胆碱可与肌膜上的M受体结合,使得两类通道开放:一类为电位敏感性Ca2+专用通道,另一类为特异性受体活化Ca2+专用通道。
前一类通道对Ach敏感,小剂量Ach即引起开放;后一类通道对Ach相对不敏感,只有大剂量Ach才会引起开放。
这两类通道开放都使得肌浆中Ca2+增高,进而激活肌纤蛋白—肌凝蛋白—ATP系统,使平滑肌收缩,肌张力增加。
3、在正常38度蒂罗德溶液先滴加阿托品,可见离体肠管活动减弱,描记曲线出现收缩频率变慢,幅度减小,这是因为阿托品作为平滑肌肌膜上M受体抗结剂与M受体结合抑制的作用,很快又恢复到正常,可能因为阿托品被稀释或被氧化;1min后再加乙酰胆碱的小肠可见离体肠管活动增强,描记曲线出现幅度增加,但频率下降。
频率下降可能是阿托品的拮抗作用,活动增强,描记曲线出现幅度增加,由于这次实验加的是高浓度的乙酰胆碱溶液,相对于低浓度的阿托品对平滑肌肌膜上M受体竞争性作用占优势,但没有单独使用乙酰胆碱明显。
4、在浴槽中加入0.01%肾上腺素2滴后,可见离体肠管活动减弱,描记曲线出现收缩频率变慢,幅度减小。
出现上述现象的机理,目前认为与肠肌细胞膜上存在α和β两中受体,α受体又分为α抑制型受体和α兴奋型受体有关。
肾上腺素作用于α抑制型受体,引起肠肌膜上一种特异性受体活化,使K+外流增多,细胞膜发生超极化,肠肌兴奋性降低,肌张力下降。
同时,肾上腺素还作用于β受体,①它的激活引起肠肌细胞膜中的cAMP合成增多,cAMP激活肠肌膜及肌浆网上Ca2+泵活动,使肌浆中Ca2+浓度降低,亦使肌张力降低;②β受体激活后还促使K+及Ca2+外流增加,加速膜的超极化,促进了肠肌肌张力的减低;5、在浴槽中加入0.1%普萘洛尔2滴,普萘洛尔为非选择性竞争抑制肾上腺素β受体阻滞剂,β受体阻断作用较强,无内在拟交感活性,可见离体肠管活动减弱,描记曲线出现收缩频率变慢,幅度减小,与理论不符合,可能是小肠在离休环境下没有体内其他因素作用。
2min后在浴槽中加入0.01%肾上腺素2滴后,可见离体肠管活动减弱,描记曲线出现收缩频率变慢,幅度减小,但没有单独使用肾上腺素明显。
1min后在浴槽中加入0.1%普萘洛尔2滴,可见离体肠管活动减弱,描记曲线出现收缩频率增加,幅度减小。
出现上述现象的机理,普萘洛尔阻断了肾上腺素对β受体的兴奋作用,从而减弱了肾上腺素对小肠平滑肌的抑制作用,可能小肠的β受体已完全被阻滞剂。
6、在浴槽中加入0.1%酚妥拉明2滴,酚妥拉明为α肾上腺素受体阻滞药,对α1与α2受体均有作用,有拟胆碱作用,使胃肠平滑肌兴奋,可见离体肠管活动增强,描记曲线出现收缩幅度增加。
2min后在浴槽中加入0.01%肾上腺素2滴,可见离体肠管活动减弱,描记曲线出现收缩频率变慢,幅度减小,但没有单独使用肾上腺素明显,也没有使用普萘洛尔后加肾上腺素明显。
1min后在浴槽中加入0.1%普萘洛尔2滴,可见离体肠管活动减弱,描记曲线出现收缩频率增加,幅度减小。
出现上述现象的机理,酚妥拉明阻断了肾上腺素对α受体的兴奋作用,有拟胆碱作用,使胃肠平滑肌兴奋,从而减弱了肾上腺素对小肠平滑肌的抑制作用,可能小肠的α受体已完全被阻滞剂。
7、在浴槽中同时加入0.1%普萘洛尔2滴和0.1%酚妥拉明2滴,可见离体肠管活动减弱,描记曲线出现收缩频率变慢,幅度减小。
2min后在浴槽中加入0.01%肾上腺素2滴,可见离体肠管活动减弱,描记曲线出现收缩频率变慢,幅度减小。