实验 家兔离体肠肌活动得影响实验
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实验5 家兔离体肠肌活动得影响实验
【摘要】目得研究0、01%乙酰胆碱(Ach)、0、01%肾上腺素(E)、NaOH溶液、HCl溶液、25℃台氏液及缺氧条件对家兔离体肠肌运动得影响。方法家兔离体小肠平滑肌标本得制备,生物信号采集处理系统记录在不同因素作用下张力曲线。常用统计学方法与统计学指标。结果滴加0、01%乙酰胆碱(Ach)、1NNaOH 溶液后,肠肌运动张力与频率都增大;滴加0、01%肾上腺素(E)、1NHCl、肠肌运动张力与频率迅速降低;25℃台氏液刺激离体肠肌时,肠肌运动张力与频率先迅速下降后逐渐增大;停止通氧后,肠肌运动张力与频率逐渐降低。结论0、01%乙酰胆碱(Ach)、1NNaOH溶液刺激能促进肠肌运动,0、01%肾上腺素(E)、1NHCl能抑制肠肌运动,短时低温能使肠肌运动稍降后又加强直至正常,缺氧使肠肌运动减弱。关键词:HCl、NaOH、离体肠肌、乙酰胆碱、肾上腺素
目录
1、实验材料与方法 (1)
1、1、实验材料
1
1、2、实验方法:
2
2、实验结果: (3)
3、实验讨论(见附页) (4)
4、实验结论: (4)
5、参考文献: (4)
附页 (4)
1.实验材料与方法
1.1.实验材料
1.1.1.实验动物:兔子(浙江中医药大学动物实验中心)
1.1.
2.实验材料与器械:家兔,麦氏浴槽、超级恒温器、张力换能器、铁支架、
电脑、、木锤、止血钳、手术刀、20ml注射器、手术剪、持针器、手术
圆针、缝线、烧杯、手术盘、搪瓷碗等。
1.1.3.实验药品:台氏液:(0、8%NaCl、0、02%KCl、0、026%MgSO477H2O、0、0065%
NaH2PO4、0、02%CaCl2、0、1%NaHCO3)、0、1%葡萄糖溶液。1:10 000
肾上腺素、1:10 000乙酰胆碱、1NHCl、1NNaOH溶液。
1.2.实验方法:
1.2.1.准备好离体肠管描记装置,麦氏浴槽中加固定量(10ml-15ml)得台式液,
调节超级恒温器得温度,使麦氏浴槽内温度稳定在39摄氏度上下。通气
管接95%O
2+5%CO
2
混合气体管道。用螺丝夹调节气体管道得气体流量,调
节到浴槽中气泡一个一个逸出为止。换能器输出线接微机生物信号处理
系统,仪器参数:
RM6240系统:点击实验菜单中得“肠肌收缩记录”项,参数:通道时间常数为直流,滤波频率为10Hz,灵敏度3g,采样频率200Hz,扫描频率
1s/div。
1.2.2.离体小肠段得制备:
1.2.2.1.准备两个小手术盘,一个小手术盘用于清洗肠内容物,另一小手术盘盛预
冷台氏液倒入中,其液体量已淹过小肠段为准。
1.2.2.2.用持针器夹持手术圆针、穿线备用。
1.2.2.3.取家兔一只,将其倒提,用木锤猛击后脑勺,使之昏迷,迅速进行以下操作:将
其仰卧位固定,用手术剪从剑突下沿腹白线向耻骨联合方向剪开皮肤约
5cm长,打开腹壁,暴露腹腔,顺着胃找到与胃相连得十二指肠,沿十二指肠
向空肠得方向取出小肠段约30cm,放入一小手术盘中,用注射器抽取预冷
台氏液冲洗肠内容物,直至冲洗干净为止。将干净得小肠段放入另一盛有
预冷台氏液得小手术盘中,用手术刀刮去肠管外得血管与系膜,将小肠段切
割成小段,每小段肠约2cm长,并在小段肠得两端、距断端约1mm处各穿
约30cm长得线,注意在操作过程中,每10分钟换一次预冷台氏液。
1.2.3.取出固定架,将肠段得下端得线头尽量靠近固定架得小钩,并牢固地绑紧在
小钩上,将固定架放回内槽,小钩尽量靠近槽底,重新用张力微调器固定固定架,将空气泵重新连接至固定架,并通过固定架将空气输入内槽得台氏液中。
1.2.4.将肠段得上端得线头与张力换能器得应变梁连接, 用张力微调器缓慢升降
拉线,保持线有一定紧张度,肠段、线应与地平面垂直,同时,肠段及上端得线头不得碰及槽壁与固定架。
1.2.5.换液:打开灌流槽得内槽排水阀门,排去原来得台氏液,用注射器从恒温水泵
得小烧杯中抽取被加温得台氏液放入灌流槽得内槽中,其每次用量以淹过肠
段得量为准。调节位于固定架尾部得空气流量调节旋钮,使气泡即细小、均匀,又不影响肠段得运动。
1.2.6.实验观察:
1.2.6.1.记录一段小肠平滑肌收缩活动曲线,向台氏液中加入1:10 000乙酰胆碱2
滴,观察小肠收缩活动得改变、反应稳定后冲洗2遍。
1.2.6.2.肠活动恢复后,向台氏液中加入1:10 000肾上腺素2滴,观察小肠活动得改
变, 待反应稳定后冲洗2遍, 再加入等量得37℃~ 38℃得台氏液。
1.2.6.3.肠活动恢复后,向台氏液中加入1NNaOH 2滴,观察小肠收缩活动得改变,
待反应稳定后冲洗2遍。
1.2.6.4.记录一段小肠平滑肌收缩活动曲线,观察其收缩活动得特点。向台氏液中
加入1NHCl盐酸2滴,观察小肠收缩活动得改变、反应稳定后冲洗2遍。
1.2.6.5.肠活动恢复后,将原37℃ ~ 38℃台氏液换成等量得25℃台氏液,观察肠活动
得改变, 待其活动改变明显时,冲洗1遍, 再加入等量得37℃ ~ 38℃得台
氏液。
1.2.6.6.待肠活动恢复后,停止空气泵得工作,观察肠活动得改变,待其收缩活动改
变明显时反应稳定后冲洗1遍,再加入等量得37 ℃~ 38℃得台氏液,空气泵
描记一段肠段收缩活动恢复曲线后终止实验。
1.2.6.7.记录所得曲线。整理仪器。
2.实验结果: