体外诊断试剂分析性能评估-线性范围 ppt
体外诊断试剂分析性能评估线性范围课件
文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。
实验样本的基本要求和制备方法：
确定样本类型：为避免基质效应对结果的影响，进行线性评价时所选用的样本应与临床 实验样本相似，但不可采用含有对测定方法具有明确干扰作用的样本，如溶血、脂血、 黄疸或含有某些特定药物的样本。理想样本为分析物浓度接近预期测定上限的病人混合 血清，可用其他病人样本将其稀释为预定浓度。 EP6-A中建议应尽可能按以下顺序进行样本种类的选择： ①病人混合血清； ②用适当稀释液稀释的病人血清； ③添加分析物的病人样本； ④用处理过的低浓度物质或处理过的血清物质稀释的病人血清； ⑤商业质控品/校准品/线性物质； ⑥使用生理盐水稀释的样本； ⑦稀释不足或过度稀释的商业质控品； ⑧水溶液； ⑨其他溶剂的溶液。
C
按照设计方法进行检测
(4.8)
选择Sy,x最小的最适 非线性模型(5.3.3)
找出问题并解 决
C
数据点在XY轴上并目测结果(5.1)
明显呈非 线性关系？ (5.1)
否
离群值？ （5.1，5.2）
是
找到问题并
纠正
两个或以 上
有
多少？
(5.1,5.2)
计算非线性和线性模 型在每个浓度处的差 值(5.3.3)
04
03
05
02
06
01
07
01 基本原则 02 样本要求 03 数据收集 04 数据检查 05 数据分析 06 数据修正 07 确定线性范围
文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。
线性范围评估的基本原则
（1）实验操作人员应熟悉方法原理与操作，能对 样本进行正确处理，确保仪器工作状态正常，采 用适当的校准品对仪器进行校准。 （2）仪器的各项性能指标（如精密度）合格，不 存在明显的携带污染等。 （3）应使用同批号试剂及校准品。
体外诊断试剂分析性能评估
体外诊断试剂分析性能 评估指导原则
1 检测限 2 线性范围 3 可报告范围 4 准确度回收实验 5 准确度方法学比对 6 精密度 7 干扰实验 8 稳定性 9 参考值参考区间
检测限
检测限评估的基本原则
• 实验人员应熟悉检测方法与仪器操作； • 采用合适的校准品 质控品并保持仪器处于正常状态； • 用于实验的试剂应为同一批号;且在有效期内
如校准品或质控品 3 评估精密度时;应至少评估二个浓度水平样本的精密度 当二个浓度的精密度有显著差 异时;建议增加为三个浓度 所选样本浓度应在测量范围内有医学意义;即至少有一个浓 度在医学决定水平medical decision levels左右 不要为了得到较小的精密度;都选用较 高值的样品;甚至超出测量范围 也不应选用靠近最低检出限的样品;此时所得的精密度 往往偏大 相当多的检验项目低值常无实际临床意义;但有少数检验项目;其低值也有临 床价值;此时就需要评估有判断价值的低值精密度;适用时;可进行功能灵敏度的评估 如没有医学决定水平;可在参考区间上限左右选一个浓度 此外;再根据检验项目的性质 在线性区间内选择另一个值 如与厂商或文献报导的精密度进行比较;所选浓度应与被比 较精密度的浓度相接近 否则;有可能得出不恰当的结论
精密度
只评估批内不精密度
1 试剂和校准品：应使用同一种类 同一批号的试剂和校准物;如可能;只进行一次校准 使用不同批号试剂和多次校准都会增加检验结果的变异程度 2 评估方法：在以上条件满足的情况下;在一批内对样本进行重复测定;至少进行20次 重复测定 3 质量控制：检验时应同时至少测一个质控品 当质控品结果超出规定的失控限;不论 实验结果是否满意都应弃去不用;重新进行试验以取得20个实验数据 要保存所有的质控 数据和失控处理记录 4 数据收集：在进行数据分析前;检查数据中有无由于偶然差错引起的离群值outliers; 可用下述离群值的标准；从已收集的20数据计算出总均值和标准差;任何结果和总均值的 差值超过4个标准差时;可认为是离群值 为了能收集到至少20个有效数据 除补充由于 质控失控而增加的测试外;还应再增加由于离群值不用于精密度的计算所需增加的检验次 数 在进行这种批内精密度评估实验时;一次只能有一个离群值;当离群值超过1个时;应 怀疑是否为方法不稳定或操作者不熟悉所致 此时;应不用此次试验数据 检查问题和解 决问题后重新开始新的评估实验
体外诊断试剂分析性能评估-线性范围
1.2实验样本的制备方法
（1）不同浓度水平的样本可通过将高浓度样本与低浓度样本进行倍 比稀释得到，注意在进行液体吸取时应选择精密度与准确性好的移液 装置。制备时应将样本完全混合并避免蒸发或其他使样本变质的情况。 每份样本的浓度与体积单位应统一。 （2）如果高/低浓度血清的值未知，可将每种血清编码，用编码代表 每个血清的相对浓度。对于等浓度间隔样本，可用连续整数（如1、2、 3、4、5）代表连续样本。进行数据处理时可用样本号代替X值。 （3）样本的特殊处理：在无法得到适用的人血清时，需对样本进行 一些特殊处理以满足实验要求。这些处理过程包括稀释、加入添加物 或透析、热处理等，无论进行何种处理均应以保持基质恒定为基本原 则。在评价报告中应对所使用的稀释液、添加物、溶剂等的材料来源 加以注明。 样本稀释液应选用由厂家推荐或经实验室证明可使用的产品，如 可采用5%牛血清白蛋白或人白蛋白溶液。 欲提高样本浓度时可在样本中添加分析物纯品。在添加物为溶液 状态时，应注意添加液体对样本的稀释作用（小于10%）并注明所用 溶剂。
事业发展部-刘会娟
一、概述 二、定义 三、研究时间 四、线性范围评估的基本原则 五、线性范围的评估及数据处理方法
一、概述
线性范围评估资料是评价拟上市产品 有效性的重要依据，也是产品注册所需的重 要申报资料之一。
二、定义
线性范围：是某一方法的校准曲线的直线部 分所对应的待测物质的浓度（或量）的变化 范围。
样本选择
EP6一A中建议应尽可能按以下顺序进行样本种类的选择：①病人混合血清；②用适当 稀释液稀释的病人血清；③添加分析物的病人样本；④用处理过的低浓度物质或处理过的 血清物质稀释的病人血清；⑤商业质控品，校准品／线性物质；⑥使用生理盐水稀释的样 本；⑦稀释不足或过度稀释的商业质控品；⑧水溶液；⑨其他溶剂的溶液。
体外诊断试剂分析性能评估
体外诊断试剂分析性能评估的 意义
评估体外诊断试剂的性能对于确保准确的医学诊断至关重要。我们将探讨评 估的方法、客观性和准确性，以及稳定性和灵敏度。
评估方法
本节将介绍体外诊断试剂的性能评估方法，包括试验设计、试验步骤以及数据记录和分析的步骤。
性能评估案例
本节将通过定性和定量诊断试剂的案例来展示体外诊断试剂的性能评估结果。我们将讨论评估结果、分 析和改进方向。
体外诊断试剂分析性能评 估
本演示文稿将介绍体外诊断试剂分析性能评估的重要性以及评估方法。我们 将探讨体外诊断试剂的概述、评估意义、方法和案例，并展望未来的发展方 向。
引言
体外诊断试剂的分析性能评估是确保诊断准确性和可靠性的关键步骤。本节将介绍研究背景、目的和意 义。
体外诊断试剂概述
体外诊断试剂是用于检测人体样本并进行医学诊断的化学试剂。本节将介绍试剂的定义和分类，以及在 医学诊断中的作用和优势。
体外诊断试剂分析性能评估的 未来发展方向
本节将探讨体外诊断试剂分析性能评估的市场需求、新技术的应用，以及面 临的机遇和挑战。
结论
本节将总结体外诊断试剂分析性能评估的重要性，并展望未来的研究方向。
感想
本节将分享研究过程中的启外诊断试剂分析性能评估的相关领域，以下是一些参考文献。
体外诊断试剂分析报告性能评估系列指导原则
附件：《体外诊断试剂分析性能评估系列指导原则（征求意见稿）》目录1. 体外诊断试剂分析性能评估指导原则——编制说明2. 体外诊断试剂分析性能评估指导原则——检测限3. 体外诊断试剂分析性能评估指导原则——线性范围4. 体外诊断试剂分析性能评估指导原则一一可报告范围5. 体外诊断试剂分析性能评估指导原则——准确度（回收实验）6. 体外诊断试剂分析性能评估指导原则——准确度（方法学比对）7. 体外诊断试剂分析性能评估指导原则---- 精密度8. 体外诊断试剂分析性能评估指导原则——干扰实验9. 体外诊断试剂分析性能评估指导原则——稳定性10. 体外诊断试剂分析性能评估指导原则——参考值（参考区间）附件1 :体外诊断试剂分析性能评估指导原则编制说明《体外诊断试剂注册管理办法（试行）》颁布后，体外诊断试剂产品的注册过程中要求提供申报产品的分析性能评估资料，产品性能评估是产品研发、制定产品标准等过程的重要技术支持研究过程，并可能对产品的质量造成一定的影响。
目前国际上对体外诊断试剂的性能评估通常是以美国临床实验室标准化组织（Clinical and Laboratory Standards Institude 以下称为CLSI）的相关标准为依据，也是美国FDA推荐采用的评价标准，但我国还没有相关的标准及指导原则的要求。
为进一步明确体外诊断试剂分析性能评估的技术要求，我中心组织有关专家起草产品分析性能评估指导原则，以明确体外诊断试剂产品性能评估的技术要求。
体外诊断试剂产品性能评估包括检测限、线性范围、可报告范围、准确度（回收实验）、准确度（方法学比较）、精密度、干扰实验、稳定性、参考区间共九个项目。
起草的主要依据CLSI发布的以下标准：1. C28-A2: How to define and determine reference intervals in the clinical laboratory; Approved Guideline-Second Edition.2. EP5-A: Evaluation of precision performance of clinicalchemistry devices; Approved Guideline.3. EP6-A: Evaluation of the linearity of quantitative measurement procedures; A Statistical Approach; Approved Guideline.4. EP7-A: Interference testing in clinical chemistry; Approved Guideline.5. EP9-A2: Method comparison and bias estimation using patient samples; Approved Guideline-Second Edition.每项性能的主要研究方法均采用以上标准和国内实际采用的评价方法相结合的方法。
体外诊断产品性能评估--定量测量方法的线性评估(EP6-A)
• 可接受样本
添加样本：不含有干扰物时，不 要求添加物的纯度，如有干扰应 说明；如使用浓缩液，应尽可能 少的稀释血清(不超过10%，溶剂)
经处理的血清稀释：注意基质效 应
评估
• 可接受样本
质控、校准或线性物：适当时 可混合使用，需确保分析物具 有正常生理形式（如蛋白结合 物、代谢物）
4.302 0.9 0.9
线性评价举例
拟合： 非线性判定
线性评价举例
非线性判定
线性评价举例
线性评价举例
非线性判定
5%的非线性目标设 定
线性评价举例
非线性：差值图示
线性评价举例
• 一次方程、二次方程非线性系数有统计学意义，Syx显示二次方 程回归误差小，但通过分析其差值得到均符合目标值，线性假设 成立
H
L
6/7:1/7 5/7:2/7 4/7:3/7 3/7:4/7 2/7:5/7 1/7:6/7
H
L
7/8:1/8 6/8:2/8 5/8:3/8 4/8:4/8 3/8:5/8 2/8:6/8 1/8:7/8
H
L
8/9:1/9 7/9:2/9 6/9:3/9 5/9:4/9 4/9:5/9 3/9:6/9 2/9:7/9 1/9:8/9
DL声称值： • 线性目标应该源自于偏差目标，
并且应该小于或等于这些目标 • 偏差目标应该小于或等于测量
误差目标
线性评价中的其它影响因素
可接受结果可能受： • 程序上的错误 • 仪器、试剂或校准 • 环境因素 • 基质效应（含干扰）
主要原因分析： • 出现干扰等技术方面的问题
(整理)体外诊断试剂分析性能评估系列指导原则.
附件：《体外诊断试剂分析性能评估系列指导原则（征求意见稿）》目录1.体外诊断试剂分析性能评估指导原则―― 编制说明2.体外诊断试剂分析性能评估指导原则——检测限3.体外诊断试剂分析性能评估指导原则——线性范围4.体外诊断试剂分析性能评估指导原则——可报告范围5.体外诊断试剂分析性能评估指导原则——准确度（回收实验）6.体外诊断试剂分析性能评估指导原则——准确度（方法学比对）7.体外诊断试剂分析性能评估指导原则——精密度8.体外诊断试剂分析性能评估指导原则——干扰实验9.体外诊断试剂分析性能评估指导原则——稳定性10.体外诊断试剂分析性能评估指导原则——参考值（参考区间）附件1：体外诊断试剂分析性能评估指导原则编制说明《体外诊断试剂注册管理办法（试行）》颁布后，体外诊断试剂产品的注册过程中要求提供申报产品的分析性能评估资料，产品性能评估是产品研发、制定产品标准等过程的重要技术支持研究过程，并可能对产品的质量造成一定的影响。
目前国际上对体外诊断试剂的性能评估通常是以美国临床实验室标准化组织（Clinical and Laboratory Standards Institude 以下称为CLS）I 的相关标准为依据，也是美国FDA 推荐采用的评价标准，但我国还没有相关的标准及指导原则的要求。
为进一步明确体外诊断试剂分析性能评估的技术要求，我中心组织有关专家起草产品分析性能评估指导原则，以明确体外诊断试剂产品性能评估的技术要求。
体外诊断试剂产品性能评估包括检测限、线性范围、可报告范围、准确度（回收实验）、准确度（方法学比较）、精密度、干扰实验、稳定性、参考区间共九个项目。
起草的主要依据C LSI发布的以下标准:1.C28-A2: How to define and determine referenceintervals in the clinical laboratory; ApprovedGuideline-Second Edition.2.EP5-A: Evaluation of precision performance ofclinical chemistry devices; Approved Guideline.3.EP6-A: Evaluation of the linearity of quantitative measurement procedures; A Statistical Approach; Approved Guideline.4.EP7-A: Interference testing in clinical chemistry; Approved Guideline.5.EP9-A2: Method comparison and bias estimation using patient samples; Approved Guideline-Second Edition. 每项性能的主要研究方法均采用以上标准和国内实际采用的评价方法相结合的方法。
体外诊断试剂PPT课件
临床应用： 1、医疗机构
健康体检筛查 就诊 观察病程发展、治疗效果及预后 2、公安机关 吸食毒品检测等 体育比赛：服用兴奋剂检测等 家庭自测：怀孕自测，血糖自测、尿液自测等等
按药品受理和审评体外诊断试剂
* 1、ABO血型定型试剂（盒）； * 2、 乙型肝炎表面抗原（HBgAg）试剂（盒）； * 3、丙型肝炎病毒（HCV）抗体试剂（盒）； * 4、人类免疫缺陷病毒HIV（1+2型）抗体试剂（盒）； * 5、人类免疫缺陷病毒抗原/抗体诊断试剂（盒）
梅毒螺旋体抗体试剂（盒）； 6、放免试剂（盒）；
作为医疗器械质量监督检查 员, 从跨进企业大门的一刻， 你准备1、企业要有单独设立产品质量检验部门，主要质量职责：取样、
留样、样品保管、物料储存条件评价、物料质量和稳定性评价、洁净室 环境监测、检验和检验环境控制、签发和拒绝签发检验报告、成品有效 期的确定、合格品评价放行、不合格品评审和处理、协助评估合格供方 等与产品质量，并负责汇总、统计、分析质量检验数据及质量控制趋势。
免疫印迹技术 免疫组化技术
体外诊断试剂分类
根据产品风险程度的高低，体外诊断试剂依次分为第三类、 第二类、第一类产品。
（一）第三类产品： 1．与致病性病原体抗原、抗体以及核酸等检测相关的试
剂； 2．与血型、组织配型相关的试剂； 3．与人类基因检测相关的试剂； 4．与遗传性疾病相关的试剂； 5．与麻醉药品、精神药品、医疗用毒性药品检测相关的
按照药品管理的体外诊断试剂主要包括用于血源筛查的 体外诊断试剂和采用放射性核素标记的体外诊断诊断试剂。
预期用途： 体外检测人体体液、细胞或组织中待测物质的量，即“定
体外诊断产品性能评估--定量测量方法的线性评估(EP6-A)
• LOQ规定U下的低值 3
测得量值是否考虑报告?目前做法不支持
区间和范围的区别
线性
评估线性程序
定量
给 出
线
性
区
间
的
是否包括定性
方 法
•定量方法的线性 可以使用内插法 竞争性免疫测定
方案设计
评估重点
• 评估线性的前提：重复性 • 评估样本基质问题 • 需要制定非线性误差目标 • 最佳拟合问题：证明 • 减少变量：如时间
计意义）、Syx
斜率分析
与目标比较
两两检查
统计非线性与目标判定
不冲突
线性 线性拟合通常使用OLS(权重)、但是当重复性差或要求每点的相对偏差最小时，可尝试WLS的方法 线性和非线性的区间指的是同一个区间，即使分段表述也应使用一条线，不应分段拟合
4.302 0.9 0.9
线性评价举例
拟合： 非线性判定
线性评价举例
非线性判定
线性评价举例
线性评价举例
非线性判定
5%的非线性目标设 定
线性评价举例
非线性：差值图示
线性评价举例
• 一次方程、二次方程非线性系数有统计学意义，Syx显示二次方 程回归误差小，但通过分析其差值得到均符合目标值，线性假设 成立
y = b0+ b1x
直线的拟合方式 是否具有线性
y = b0+ b1x + b2x2
响应呈上升趋势 响应呈下降趋势
y = b0+ b1x + b2x2+ b3x3
响应不断变化 一般为”S”型
确定线性
系数： • 回归系数指什么？ • 非线性系数指什么？ • 各个系数使用t检验进行显著性
体外诊断试剂分析和研发ppt课件
长最快的市场。
市场集中度：2007年，全球75%的市场份额被该行业十大龙 头企业所垄断，其中三分之一的市场份额被最大的三家公司 所垄断。(附表)
最大份额：目前POCT（point of care testing）检验方式的市 场份额最大，预计2012年将达到180亿美元。
通过跟踪国内和国外企业的新技术和新产品，选取比较有市场潜 力和可行性的项目进行立项、生产及销售。
结合国内外的诊断试剂发展现状和趋势可知Real time PCR检测是 目前甚至是未来分子诊断领域发展的主流，具有附加值高、技术 门槛高、应用广泛、窗口期短、准确率高等特点。因此，个人建 议，应该先从Real time PCR检测入手着重开发1-2个产品，当开 发路径熟悉之后，可在短时间内连续开发大量的项目。同时，免 疫诊断试剂（其中包括胶体金诊断和ELISA免疫诊断试剂）也可 以作为辅助的开发领域，选取个别好项目进行开发。
就核酸类试剂来说，由于技术上尚不完全成熟，多用于科研和实验室，并 未列入卫生部的统一指导价格目录中，因此临床应用不广泛，份额较少。
国内诊断试剂市场分布
五、 国内主要生产企业
达安基因 上海科华 中生北控 华美生物 复星医药 上海浩源 ……
六、 研究建议
研发周期短 市场规模大 附加值高 有研发基础 有生产线
血筛市场分析
国内少数几家公司目前准备大力推进以“血液筛查”、“产前 筛查”和“公共卫生与食品安全”为核心的荧光PCR试剂研发注 册，这些产品均有较大的市场容量。“血筛”市场每年现有600万 份的市场规模，即“血筛”荧光PCR检测试剂盒的理论市场容量 应不少于600万×100元=6亿元；通常对血筛试剂的主要要求是准 确性高、窗口期短。以丙肝检测为例，目前这些市场普遍使用的 检验方法是相对便宜的酶联免疫法，其窗口期达70天，给血液制 品厂家造成了很大的负担。如采用荧光PCR法虽然会增加血液制 品厂家的生产成本，但窗口期将缩短至14天，准确性更高。
体外诊疗试剂相关标准课件
❖ JJF1001-1998 通用计量术语及定义
❖ ISO/DIS 18113-1临床检验和体外诊疗检验系统体外诊疗医疗系统-制造商提供 信息（标识）第一 个别: 术语、定义和通用要求(Clinical laboratory testing and in vitro diagnostic medical systems —Information supplied by the manufacturer (labelling) —Part 1:Terms, definitions and general requirements)
时, 包含了随机误差个别和一个共有 系统误差或 偏差个别。[VIM: 1993] ❖ 3.4 参考物质 reference material ❖ 含有一个或多个足够均匀和很好地确定了 特征, 用以校准测量装置、评价测量方法或给材料赋值 一个材料或物质。[JJF1001-1998, 定义8.13]
❖ 血红蛋白干化学测试系统通用技术要求 ❖ 凝血酶时间检测试剂（盒） ❖ 活化个别凝血活酶时间检测试剂（盒） ❖ 凝血酶原时间检测试剂（盒） ❖ 纤维蛋白原检测试剂（盒） ❖ 癌胚抗原定量测定试剂（盒） ❖ 肿瘤相关抗原CA125定量测定试剂（盒） ❖ 甲胎蛋白定量测定试剂（盒）（化学发光免
疫分析法）
血液分析仪 全自动生化分析仪 半自动凝血分析仪 全自动凝血分析仪 干式化学分析仪 自动化血培养系统 医用离心机
YY/T0688.1 一 临床试验室检测和体外诊疗系统 感 染病原体敏感性试验与抗菌剂敏感性试验设备 性 能评价第1个别: 抗菌剂对感染性疾病相关 快速生 长需氧菌 体外活性检测 参考方法
体外诊断试剂分析性能评估-线性范围ppt课件
3.数据处理
1、数据记录（线性评价数据记录表） 2、数据可用性检查（散点图） 3 、剔除离群值（散点图、格拉布斯（GRUBBS）法） 4、进行多项回归分析 5、对回归方程进行线性检验（比较t值法检验方程的系 数与零的差异，若证明数据组具线性则跳至7，否则进 入6、7） 6、临床标准的线性与非线性检验（比较ADL值法，如 ADL小于所要求的临界判断值，则可认为数据组具有 临床可接受的线性，所拟合出的最适非线性多项式无 临床意义。） 7、对数据组进行精密度检验
（2）仪器的各项性能指标（如精 密度）应与标称值相符，不存 在明显的携带污染等。
（3）应使用同批号试剂及校准品。
（1）实验人员应熟悉检测方法与 仪器操作；
（2）采用合适的校准品、质控品 并保持仪器处于正常状态；
（3）用 于实验的试剂应为同一批 号，且在有效期内。
五、线性范围的评估及数据处理 方法
1.实验样本的基本要求和制备方法 2.实验过程 3.数据处理 4.结果报告
三、研究时间
精密度评估完成后，确保试剂精密度 达到要求。
因为在进行线性判断的同时，须判断 精密度是否符合要求。要求测量数据具有较 高的测量精密度，否则会降低统计功效(低 功效的统计不能得出正确的线性判断)。
四、线性范围评估作人员应熟悉方法原 理与操作，能对样本进行正确 处理，确保仪器工作状态正常， 采用适当的校准品对仪器进行 校准。
30×109/L高于此值，提示可能为白血病，应进行白细胞分类，观察外周血涂片和进行骨髓 检查。
1.2实验样本的制备方法
（1）不同浓度水平的样本可通过将高浓度 样本与低浓度样本进行倍比稀释得到，注意 在进行液体吸取时应选择精密度与准确性好 的移液装置。制备时应将样本完全混合并避 免蒸发或其他使样本变质的情况。每份样本 的浓度与体积单位应统一。
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7
1.1实验样本的基本要求
（1）样本基质应与临床实验样本相似， 但不可采用含有对测定方法具有明确干 扰作用物质的样本，如溶血、脂血、黄 疸或含有某些特定药物的样本。进行血 清学标志物检测时，理想的样本为分析 物浓度接近预期测定上限的混合人血清。
7、对数据组进行精密度检验
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12
4.结果报告
线性范围报告的具体格式不要求，但至 少应包括以下几方面：
（1）进行线性评价的实验室或生产厂家名 称。
（2）被评价的方法或试剂名称，批号。
（3）测定项目。
（4）线性范围（如为二阶线性应包括临床 允许误差）。
（5）如可能应标出测定项目的医学决定水
平及在此水平处的临床允许误差。
医学决定水平
指在诊断及治疗工作时，对疾病诊断或治疗起关键作用的某一被测成分的浓度，临床 上必须采取措施的检测水平。 例（仅供参考）：
白细胞计数
参考值（4～10）×109/L
决定水平临床意义及措施
0.5×109/L低于此值，病人有高度易感染性，应采取相应的预防性治疗及预防感染措施。
3×109/L低于此值为白细胞减少症，应再作其他试验，如白细胞分类计数、观察外周血涂 片等，并应询问用药史。`
11×109/L高于此值为白细胞增多，此时作白细胞分类计数有助于分析病因和分型，如果需 要应查找感染源。
30×109/L高于此值，提示可能为白血病，应进行白细胞分类，观察外周血涂片和进行骨髓 检查。
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1.2实验样本的制备方法
（1）不同浓度水平的样本可通过将高浓度 样本与低浓度样本进行倍比稀释得到，注意 在进行液体吸取时应选择精密度与准确性好 的移液装置。制备时应将样本完全混合并避 免蒸发或其他使样本变质的情况。每份样本 的浓度与体积单位应统一。
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事业发展部-刘会娟
体外诊断试剂分析性能评估 ——线性
范围
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1
一、概述 二、定义 三、研究时间 四、线性范围评估的基本原则 五、线性范围的评估及数据处理方法
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一、概述
线性范围评估资料是评价拟上市产品 有效性的重要依据，也是产品注册所需的重 要申报资料之一。
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二、定义
线性范围：是某一方法的校准曲线的直线部 分所对应的待测物质的浓度（或量）的变化 范围。
（2）仪器的各项性能指标（如精 密度）应与标称值相符，不存 在明显的携带污染等。
（3）应使用同批号试剂及校准品。
（1）实验人员应熟悉检测方法与 仪器操作；
（2）采用合适的校准品、质控品 并保持仪器处于正常状态；
（3）用 于实验的试剂应为同一批 号，且在有效期内。
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五、线性范围的评估及数据处理 方法
（2）建立一种定量测定方法的线性范围
时，需在预期测定范围内选择7-11个浓度
水平。如将预期测定范围加宽至130%，
在此范围内选择更多的浓度水平，然后
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样本选择
EP6一A中建议应尽可能按以下顺序进行样本种类的选择：①病人混合血清；②用适当 稀释液稀释的病人血清；③添加分析物的病人样本；④用处理过的低浓度物质或处理过的 血清物质稀释的病人血清；⑤商业质控品，校准品／线性物质；⑥使用生理盐水稀释的样 本；⑦稀释不足或过度稀释的商业质控品；⑧水溶液；⑨其他溶剂的溶液。
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三、研究时间
精密度评估完成后，确保试剂精密度 达到要求。
因为在进行线性判断的同时，须判断 精密度是否符合要求。要求测量数据具有较 高的测量精密度，否则会降低统计功效(低 功效的统计不能得出正确的线性判断)。
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四、线性范围评估的基本原则
线性范围
检测限
（1）实验操作人员应熟悉方法原 理与操作，能对样本进行正确 处理，确保仪器工作状态正常， 采用适当的校准品对仪器进行 校准。
（2）如果高/低浓度血清的值未知，可将每
种血清编码，用编码代表每个血清的相对浓
度。对于等浓度间隔样本，可用连续整数
（如1、2、3、4、5）代表连续样本。进行
数据处理时可用样本号代替X值。
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2.实验过程
（1）建立线性范围：需测定9-11个浓度水 平，每个浓度水平重复测定3-4次。 （2）验证标称线性参数：需测定5-7个浓度 水平，每个浓度水平重复测定3-4次。 （3）所有样本应在一次运行中或几次间隔 很短的运行中随机测定，最好在一天之内完 成。
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3.数据处理
1、数据记录（线性评价数据记录表）
2、数据可用性检查（散点图）
3 、剔除离群值（散点图、格拉布斯（GRUBBS）法）
4、进行多项回归分析
5、对回归方程进行线性检验（比较t值法检验方程的系 数与零的差异，若证明数据组具线性则跳至7，否则进 入6、7）
6、临床标准的线性与非线性检验（比较ADL值法，如 ADL小于所要求的临界判断值，则可认为数据组具有 临床可接受的线性，所拟合出的最适非线性多项式无 临床意义。）