药物制剂的微生物学检测
制药工程中的药物制剂质量控制与检测
制药工程中的药物制剂质量控制与检测药物制剂质量控制与检测在制药工程中扮演着至关重要的角色。
它们确保了药物制剂在生产过程中的质量稳定性和合规性，从而保证了患者的用药安全和疗效。
本文将从质量控制和质量检测两个方面对制药工程中的药物制剂进行探讨。
一、药物制剂质量控制1. 原材料选择与采购在药物制剂的质量控制中，原材料的选择与采购是首要任务。
制药企业应该与供应商建立稳定的合作关系，并建立原材料采购质量管理体系。
通过质量合格供应商的认证与评估，确保采购的原材料符合药典标准和企业的内部规范。
2. 工艺控制与优化药物制剂的工艺控制与优化是保证制剂质量的重要环节。
制药企业应根据药物特性、制剂工艺流程和设备条件等因素，建立合理的工艺控制方法，并进行工艺参数的优化。
同时，要严格执行操作规范，确保每个工序符合标准要求。
3. 质量风险评估与控制药物制剂的质量控制需要进行全面的质量风险评估与控制。
制药企业应建立质量风险管理体系，对每个环节进行风险评估，制定相应的风险控制措施，并建立风险记录和沟通机制。
这样可以防止质量风险因素对制药工程的影响，确保产品质量的稳定性和可靠性。
二、药物制剂质量检测1. 物理性质检测药物制剂的物理性质检测是对制剂样品进行物理性质分析的过程。
这包括颗粒度、溶解度、稳定性、外观等指标的测定。
制药企业应建立相应的仪器设备和分析方法，对物理性质进行准确测量，确保制剂符合规定的物理性质要求。
2. 化学成分检测药物制剂的化学成分检测是对制剂中药物成分进行定量和定性分析的过程。
这包括对活性成分、杂质、溶解度、稳定性等指标进行检测。
制药企业应建立合适的仪器设备和分析方法，进行化学成分的准确测定，确保制剂中的药物成分符合要求。
3. 微生物学检测药物制剂的微生物学检测是对制剂中微生物污染的检测和控制的过程。
这包括对细菌、霉菌、大肠杆菌等微生物的检测。
制药企业应建立严格的微生物控制体系，确保制剂的微生物质量符合药典标准和相关法规要求。
微生物限度检查法 葡萄糖酸钙口服液的微生物限度检查(药品生物检定技术课件)
（七）微生物限度标准
非无菌药品的微生物限度标准是基于药品的给药 途径和对患者健康潜在的危害以及中药的特殊性而制 订的。药品的生产、贮存、销售过程中的检验，中药 提取物及辅料的检验，新药标准制订，进口药品标准 复核，考察药品质量及仲裁等，除另有规定外，其微 生物限度均以本标准为依据。
（二）药物制剂的微生物检查的意义
1
确定药物是 否污染或其 污染程度， 控制药品的 质量；
2
保证用药的 有效性和安 全性；
3
可作为衡量 药品生产全 过程卫生质 量的指标之 一。
（三）微生物限度检查的内容
1．微生物总数检查 包括细菌数、真菌数及酵 母菌数检查。
2．控制菌检查 包括大肠埃希菌、沙门菌、铜 绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌及 梭菌的检查。
2.控制菌检查常用的培养基： 用于菌液制备的营养琼脂培养基等常规培养基 胆盐乳糖培养基、曙红亚甲蓝琼脂培养基等20余种用于培养 基适用性检查、方法验证试验及供试品检查的培养基。
三、菌种及培养基
白色念珠菌 玫瑰红钠琼脂培养基
大肠埃希菌 曙红亚甲蓝琼脂培养基
四、 方法的验证试验
Page 23
四、方法的验证试验
（一）细菌数、真菌数及酵母菌计 数检查
Page 27
（一）细菌、霉菌及酵母菌计数
检测的是药物在单位质量或体积内 所存在的活菌数量。可评价生产过 程中原辅料、设备、器具、工艺、 环境及操作者的卫生状况。
（一）细菌、霉菌及酵母菌计数
1．计数培养基的适用性检查
细菌、真菌及酵母菌计数用培养基应进行 培养基的适用性检查，成品培养基、由脱水培 养基或按培养基处方配制的培养基均应检查。
药物制剂的微生物学检查
微生物与药学
2. 2.琼脂扩散法 利用药物在琼脂培养基中扩散，并在一定浓度范围内抑制细菌 生长的原理进行的。一般用于细菌和酵母菌的药敏试验。
于新药的初筛试验（初步 药物是否有抗菌作用）及临床的药敏试验（细菌药物第三 性试验、以便选择用药）。滤纸片分湿、干两种，可以在 试验时用无菌纸片沾取药物溶液放在含菌的平板表面，也 以预先做成一定浓度的干燥纸片。一般来说预先做成的干 燥纸片实用一些而且准确一些。
微生物与药学
第一节 药物的体外抑菌试验
一、药物的体外抑菌试验 （一）体外抑菌试验 药物的体外抑菌试验是常用抗菌试验方法，其中最常用 的方法用系列稀释法和琼脂扩散法。
稀释法 稀释法有液体培养基连续稀释法和固体稀释法（斜面法） 两种。这两种方法都可以用来测定药物的最小抑菌浓度 （MIC）：是指该药物能抑制细菌生长的最低浓度，通 常用μg∕ml或U/ml表示。 具体的液体培养基连续稀释法见书本（P138图8-1），
微生物与药学
三、影响抗菌试验的因素
1. 菌种 在抗菌试验中所用到的菌种，必需是国家
卫生部生物制品检定所菌各保藏中心专门提供 的标准菌株。在特殊情况下，也可以采用临床 新分离的并经过鉴定、纯化及合理保藏的菌株。 而且我们要用到的试验菌种应该选择是对数期 生长的菌。因为那时菌种生命力最旺盛，这对 于我试验测定的结果也会准确些。
微生物与药学
抗菌药物
纸片含药量 （ug）
丁胺卡那霉素
30
头孢唑啉
30
先锋霉素I
75
头孢噻吩
30
头孢噻甲羧肟
30
氯霉素
30
红霉素
15
庆大霉素
10
体外抗菌实验-18
棋盘格法
是由于在试验时， 是由于在试验时，含两种不同浓度 药物的试管排列呈棋盘状而得名， 药物的试管排列呈棋盘状而得名， 用以 评价两种药物同时用不同浓度进行联合 试验时的抗菌活性。 试验时的抗菌活性。
琼脂扩散法agar diffusion test 琼脂扩散法
是利用药物可以在琼脂培养基中扩散， 是利用药物可以在琼脂培养基中扩散，在药 物有效浓度的范围内形成抑菌圈或抑菌距离， 物有效浓度的范围内形成抑菌圈或抑菌距离，以 抑菌圈直径或抑菌距离的大小来评价药物抗菌作 用强弱。 用强弱。 inhibition zones 1、滤纸片法 、 适用于新药的初筛试验。 适用于新药的初筛试验。 2．打孔法 ． 适于药物血浓度的监测。 适于药物血浓度的监测。 3．挖沟法 ． 适用于在一个平板上试验一种药物对几种试验 菌的抗菌作用。 菌的抗菌作用。
• 方法： 方法：
取一定量的供试品药物以无菌生理盐水按比 例进行系列稀释， 例进行系列稀释，加入定量的稀释液于无菌平皿 再加入一定量的已熔化的、温度在55 中，再加入一定量的已熔化的、温度在 ℃左 右的琼脂培养基混匀，凝固后于37 培养24— 右的琼脂培养基混匀，凝固后于 ℃培养 48h,计数平板内菌落数。一般取菌落数在 计数平板内菌落数。 计数平板内菌落数 一般取菌落数在30— 300之间的平板进行计数，然后乘以稀释倍数即 之间的平板进行计数 之间的平板进行计数， 可得每毫克或每毫升供试药物中的活菌数。 可得每毫克或每毫升供试药物中的活菌数。
药物制剂的微生物学检查
检查结果的异常分析
异常指标识别
根据检查结果，识别异常的微生 物学指标，如菌落总数超标、霉
菌和酵母菌数过多等。
原因分析
对异常指标进行深入分析，探究 可能的原因，如生产过程中灭菌 不彻底、存储条件不当、原材料
污染等。
风险评估
根据异常指标的严重程度，评估 其对药物制剂质量和安全性的影
响，以及可能产生的风险。
菌和酵母菌计数，以及控制菌检查等内容。
药品生产质量管理规范（GMP）
02
要求制药企业必须建立严格的微生物控制体系，确保药品生产
过程中的微生物污染得到有效控制。
药品注册管理办法
03
规定药品注册时必须提交微生物方面的相关资料，包括微生物
限度、无菌保证水平等。
国际标准与法规
1 2
国际药典（Ph. Int.） 由世界卫生组织（WHO）和国际制药联合会 （IFP）共同制定，为各国药典的制定提供了参 考。
05
药物制剂的微生物学检 查技术发展
新技术介绍与应用
01
02
03
自动化检测系统
通过集成样品处理、检测 和分析等步骤，提高检测 效率，减少人为误差。
基因检测技术
利用基因测序等方法，快 速、准确地检测微生物种 类和耐药性。
生物感器技术
通过生物传感器对微生物 代谢产物进行检测，实现 快速、灵敏的微生物检测。
预防疾病传播
微生物学检查可以检测出可能携带病 原体的微生物，从而预防疾病传播， 保护公众健康。
微生物学检查的方法与标准
方法
包括细菌计数、霉菌和酵母菌计数、 支原体检测、细菌内毒素检测等。
标准
根据不同药物制剂的国家标准和行业 标准，规定了各种微生物的限量要求 和检测方法。
药物制剂微生物学检查
药物制剂微生物学检查
药物制剂微生物学检查是通过对药物制剂中的微生物进行检测和分析，以确定其微生物污染的程度和类型。
这个检查的目的是确保药物制剂的质量和安全性。
药物制剂微生物学检查通常包括以下内容：
1. 细菌检查：使用培养基和相关的培养技术，检测药物制剂中是否存在细菌污染。
常见的方法包括菌落计数、肉汤稀释法、滤膜法等。
2. 真菌检查：使用培养基和相关的培养技术，检测药物制剂中是否存在真菌污染。
常见的方法包括菌落计数、真菌培养、荧光显微镜检查等。
3. 真空法检查：使用真空吸引药物制剂样品到微孔滤膜上，然后将滤膜移植到培养基上进行菌落计数和分析。
4. 内毒素检查：使用内毒素试剂盒，检测药物制剂中是否
存在内毒素污染。
常见的方法包括内毒素抑制试验、内毒
素检测试纸法等。
5. 孢子检查：使用染色方法，检测药物制剂中是否存在孢
子污染。
常见的方法包括热耐受试验、营养条件筛选法等。
药物制剂微生物学检查是药品质量控制的重要环节，可以
有效预防和控制微生物污染对药物制剂的影响，确保药物
制剂的质量和安全性。
药物的制剂检验法
药物的制剂检验法药物的制剂检验法是药学中重要的一项研究内容。
通过对药物制剂的检验，可以确保药物的质量，保障患者的用药安全。
本文将介绍一些常见的药物制剂检验法及其原理和应用。
一、理化性质检验法1. 外观检验法外观检验法是一种对药物制剂外观特征进行评估的方法。
通过观察药物颜色、形状、气味等外观特征，可以初步判断药物的质量。
2. pH值测定法pH值是描述溶液酸碱性的指标，药物制剂的pH值可以反映其适应性和稳定性。
常用的pH值测定法包括玻璃电极法和指示剂法。
3. 溶解度测定法溶解度是药物在溶剂中能够溶解的程度，常用于评估药物的物理性质和溶解度特性。
溶解度测定法可以根据药物在不同溶剂中的溶解度来评估药物溶解度特性。
二、质量控制检验法1. 含量测定法含量测定法是评估药物中活性成分含量的方法。
常用的含量测定法包括比色法、色谱法、滴定法等。
通过测定药物中活性成分的含量，可以确保药物的疗效和安全性。
2. 可溶性和可溶出性测定法可溶性和可溶出性测定法用于评估药物制剂中溶解的活性成分。
药物的可溶性和可溶出性直接关系到药物的溶解速度和溶解度特性。
常用的可溶性和可溶出性测定法包括溶出度测定法、相对溶出度测定法等。
3. 残留溶剂测定法残留溶剂测定法用于评估药物中残留的有机溶剂量。
有机溶剂是药物制剂过程中常用的溶剂，但过高的残留溶剂会对用药安全造成潜在风险。
常用的残留溶剂测定法包括气相色谱法、气相色谱-质谱联用法等。
三、微生物检验法1. 细菌限度检验法细菌限度检验法用于评估药物制剂中细菌的污染情况。
常用的细菌限度检验法包括总大肠菌群检验、金黄色葡萄球菌检验等。
通过细菌限度检验，可以确保药物制剂符合微生物质量标准。
2. 真菌限度检验法真菌限度检验法用于评估药物制剂中真菌的污染情况。
常用的真菌限度检验法包括霉菌限度检验、酵母菌限度检验等。
真菌的污染会导致药物的变质和安全问题，因此真菌限度检验对于药物质量控制至关重要。
四、稳定性检验法稳定性检验法用于评估药物制剂在储存期间的稳定性和可持续性。
药物制剂微生物检
产生毒素
微生物在药物制剂中生长繁殖过 程中可能会产生毒素，对人体造 成危害。
改变药物制剂性质
微生物的生长繁殖可能会改变药 物制剂的理化性质，如颜色、气 味等，影响药物制剂的质量和稳 定性。
03
药物制剂微生物检测的实验 方法
实验前生理盐水、酒 精灯等实验器材，确保
加强国际间的合作与交流，共同推动药物制剂微生物安全性评价体系的建立与完善。
感谢您的观看
THANKS
准确性和效率。
药物制剂微生物安全性评价体系的建立与完善
完善微生物限度标准和检测方法
根据药物制剂的特点和安全性要求，制定更加科学、合理的微生物限度标准和检测方法。
加强风险评估与风险管理
建立药物制剂微生物安全性评价体系，对不同药物制剂中的微生物进行风险评估，制定相 应的风险管理措施。
强化国际合作与交流
接种培养
将稀释后的样品接种于相应的培养基上，在 适宜的温度和湿度条件下进行培养。
染色鉴定
对有需要的微生物进行染色鉴定，以便更准 确地识别其种类。
实验结果分析与报告
结果分析
根据观察记录和染色鉴定的结果， 分析微生物的种类、数量等参数， 判断药物制剂是否符合质量标准。
撰写报告
根据分析结果撰写药物制剂微生物 检测报告，包括实验目的、方法、 结果和结论等内容。
02
药物制剂中微生物的来源与 危害
微生物的来源
01
02
03
生产原料
药物制剂的生产原料可能 携带微生物，如未能彻底 清洁或灭菌，会导致微生 物污染。
生产环境
生产车间、设备、容器等 可能成为微生物的滋生地， 如清洁和消毒不彻底，会 导致微生物污染。
人员操作
药物制剂的微生物学检查
❖ 方法是将所要检测菌的相应阳性对照菌株，稀释成每毫升含 活菌1000个的菌液，将其0.lml吸到待检药品的相应培养液 中，在同等条件下进行检测。如果阳性对照菌生长良好，说 明检测结果有效。
h
35
活螨的检验
h
37
h
23
沙门菌
❖ 寄生于人和动物的肠道内，能引起伤寒、 副伤寒、急性胃肠炎（食物中毒）和败血症。
h
24
1、革兰阴性，杆菌
2、分离培养：
❖ EMB平板上菌落无色或粉红色。
3、生化反应： 4、血清学反应： ❖ 凝集反应： ❖ 抗原——可疑菌， ❖ 抗体——沙门菌A-F组的多价血清（抗O抗体）
h
25
❖ O抗原： ❖ 细菌细胞壁脂多糖中的特异性多糖，100℃不被破
h
20
❖ 检测时先把一定量药均经增菌后转种到选 择鉴别培养基——麦康凯平板或伊红美兰平 板（EMB平板）。
❖ 培养后挑取可疑菌落作革兰染色及生化反应。 生化反应包括 IMViC试验和乳糖发酵试验。 大肠杆菌IMViC试验结果为+、+、—、—
h
21
❖ 大肠杆菌的鉴定主要靠形态和生化反应两方面 的特征。
h
33
❖ 毒力试验和保护力试验
取破伤风杆菌液体培养物于小鼠后肢肌肉 注射，动物发病时，腿及尾巴强直，肢体痉 挛，最后死亡。
在对照组动物中，先注射破伤风抗毒素， 再注射液体培养物，则该动物得到特异性保 护。
h
34
❖ 上述致病菌检测时，皆需同时作相应细菌的阳性对照试验， 即与药品检测同步用阳性对照菌作对照试验。
５天 ７天
欧洲药典10.0 5.1.4 50104 药物制剂的微生物质量
04/2014:501045.1.4药用非无菌药物制剂和物质的微生物质量(1)（MICROBIOLOGICAL QUALITY OF NON-STERILE PHARMACEUTICAL PREPARATIONS AND SUBSTANCES FOR PHARMACEUTICAL USE）(1)◇本章节不适用于其中包含活性微生物作为活性物质的产品。
◇非无菌制剂存在的某些微生物可能会潜在地降低甚至使该产品治疗活性失活，而且对病人的健康产生潜在的负面影响。
因此生产商必须在药物制剂生产、储存和分配过程中通过执行药品质量管理规范（GMP）的现行指南，以确保低生物负载的最终剂型。
根据通用章节2.6.12和2.6.13给出方法进行非无菌产品的微生物检查，基于总需氧微生物数（TAMC）和酵母/霉菌总数（TYMC）的非无菌药物产品的可接受标准由表5.1.4.-1和表5.1.4.-2给出。
可接受标准是基于单个结果，或者当进行平行计数时，是基于平行计数的平均值（例如，直接平皿培养法）。
当规定一微生物质量的可接受标准时，可以理解如下：—101CFU：最大可接受总数=20；—102CFU：最大可接受总数=200；—103CFU：最大可接受总数=2000，以此类推。
表5.1.4.-1包含了一张已设定特定微生物的可接受标准的列表，该列表无需详尽无遗且对于一给定的制剂，依据起始原料的特性和生产工艺可能需要检查其他的微生物。
在所描述层面上，如果上述检测均都不能有效地进行规定水平上的微生物计数，则可以使用更有效的具有一定检测限的方法，该检测限应尽可能与表中标明的可接受标准接近。
除了表5.1.4.-1列出的微生物之外，其它微生物的重要性可按下列情况评价：(1) 该章已通过药典协调，见章5.8 药典协调—产品的用途：依据给药途径的不同（眼睛、鼻子、呼吸道），危害也有差异；—产品的性质：支持生长的能力、足够抗菌防腐剂性；—适用的方法；—受体：对于新生儿、婴儿、身体虚弱者，其风险可能不同；—免疫抑制剂，皮质激素的用途；—疾病、伤口、器官损伤的存在。
药物制剂微生物检验
药物制剂微生物检验一、概述药物制剂微生物检验是确保药品质量和安全性的重要环节。
它通过对药品制剂中微生物的种类、数量和活性进行检测和分析，确保药品符合相关法规和质量控制标准，保障公众的健康和安全。
本文将探讨药物制剂微生物检验的基本概念、检验方法和实际应用。
二、药物制剂微生物检验的基本概念药物制剂微生物检验主要包括细菌、真菌、病毒等微生物的检测。
这些微生物可能对药品质量和公众健康构成威胁。
例如，某些细菌和真菌可能会引起药品污染，而病毒则可能引发感染。
因此，进行药物制剂微生物检验是十分必要的。
三、药物制剂微生物检验的方法1、细菌学检验：通过培养、分离、鉴定细菌，检测细菌种类和数量，评估药品制剂的细菌污染程度。
2、真菌学检验：通过培养、分离、鉴定真菌，检测真菌种类和数量，评估药品制剂的真菌污染程度。
3、病毒学检验：通过检测病毒的核酸、蛋白质等成分，鉴定病毒种类和活性，评估药品制剂的病毒感染风险。
4、生物安全实验室：为了确保药物制剂微生物检验的准确性和安全性，通常需要在生物安全实验室中进行检验。
这些实验室具备特殊设备和条件，可以防止微生物外泄，保障检验人员的安全。
四、药物制剂微生物检验的实际应用1、新药研发：在新药研发过程中，药物制剂微生物检验有助于评估新药的抗菌、抗真菌和抗病毒效果，为新药的研发和优化提供依据。
2、药品质量控制：通过对药品制剂进行微生物检验，可以评估药品生产过程中的质量控制情况，确保药品符合相关法规和质量标准。
3、感染预防：通过对药品制剂进行病毒学检验，可以评估药品的抗病毒效果，为预防和治疗病毒感染提供参考。
4、公众健康保障：通过药物制剂微生物检验，可以保障公众使用的药品安全、有效，防止药品污染和病毒感染。
五、结论药物制剂微生物检验是保障药品质量和安全性的重要环节。
通过对药品制剂中微生物的种类、数量和活性进行检测和分析，可以确保药品符合相关法规和质量控制标准，保障公众的健康和安全。
未来，随着微生物检测技术的发展和药物制剂研究的深入，药物制剂微生物检验将在新药研发、药品质量控制、感染预防和公众健康保障等方面发挥更大的作用。
药品微生物检测项目
药品微生物检测项目
微生物检测分为染菌量检测和控制菌检测，其中药品微生物限度检测的内容有以下三个方面：
-细菌数检测：细菌数测定是衡量药品卫生质量的重要指标。
-真菌数检测：包括霉菌、酵母菌数检测。
细菌、真菌数测定是对染菌量检测，是检测单位质量、体积或面积（g、ml或10cm²）的药品中所污染活菌数量。
其测定结果可用于判断药品被污染的程度，用于评价药品卫生质量。
-控制菌检测：非规定灭菌制剂不但要控制微生物的数量，同时不允许含有致病菌。
此外，无菌检查、微生物无限度检查、细菌内毒素、热原质检查也是药品微生物检测的重要项目。
生物药物的微生物限度检查(NO)
目录
• 引言 • 微生物限度检查的基本概念 • 生物药物的特点和风险 • 微生物限度检查的实验步骤 • 微生物限度检查结果的分析和解读 • 微生物限度检查的注意事项和要求 • 生物药物微生物限度检查的发展趋势和展望
01
引言
目的和背景
确保生物药物的安全性和有效性
微生物限度检查的目的是检测生物药物中微生物的种类、数量和污染程度，以 确保药物的安全性和有效性。
性和可靠性。
实验过程中应定期对实验环境 和仪器进行监测，确保符合微
生物限度检查的要求。
实验后的清洁和消毒
实验结束后，应对实验室进行彻底的 清洁和消毒，确保无菌状态。
实验所用的仪器和器具应进行清洁和 消毒，确保无菌状态。
实验人员应将个人防护装备脱下并进 行清洁和消毒。
实验废弃物应按照相关规定进行处理， 避免对环境和人员造成危害。
微生物限度检查结果的分析应基于统计学原理，对多次检查结果进行比较，分析微生物的分布和数量 是否符合预期。
对于异常的检查结果，应进行深入分析，找出可能的原因，为生产过程的优化提供依据。
微生物限度检查结果的报告和记录
微生物限度检查结果的报告应清晰、 准确，注明样品名称、批号、检验日 期等信息，并按照药典规定和相关法 规要求给出结论。
07
生物药物微生物限度检 查的发展趋势和展望
生物药物微生物限度检查的发展趋势
自动化与智能化
多参数检测
随着技术的进步，生物药物微生物限 度检查将更加自动化和智能化，减少 人为误差，提高检测效率和准确性。
发展多参数检测技术，同时检测多种 微生物和指标，提高检测的全面性和 可靠性。
快速检测技术
开发和应用更快速的检测技术，缩短 检测周期，满足生物药物生产快速放 行的需求。
药剂学实验内容
药剂学实验内容药剂学实验是药学专业的重要课程之一，其内容涉及药品配方、制备方法、质量控制等方面。
本文将介绍药剂学实验的主要内容。
一、药物配方实验药物配方实验是药剂学实验的基础，它通常包括以下内容：1. 药物计量：学习使用药品名、规格，加工数量、测量剂量等方法。
2. 药品溶解度：了解药物在水、酸、碱、醇、酯等溶剂中的溶解性。
3. 药物稳定性：了解药物在不同储存条件下的稳定性，包括温度、光照、空气、湿度等因素。
二、药物制剂实验药物制剂实验是药剂学实验的核心，它主要包括以下内容：1. 固体药物制剂：了解固体药品的制备方法、工艺流程、设备和操作方法。
2. 液体药物制剂：学习液体药品的制备方法、工艺流程、设备和操作方法。
3. 半固体药物制剂：学习半固体药品的制备方法、工艺流程、设备和操作方法。
三、药物质量控制实验药物质量控制实验是药剂学实验的重要部分，它通常包括以下内容：1. 药物理化性质分析：测量药品的密度、水含量、黏度、溶解度、旋光度等物理性质。
2. 药物化学成分分析：利用色谱、质谱、红外光谱等技术分析药物化学成分。
3. 药物微生物检验：检测药品的微生物污染情况，防止微生物污染。
四、药品安全实验药品安全实验是药剂学实验的重要组成部分，它主要包括以下内容：1. 毒性试验：测定药品的毒性，评估药品的安全性。
2. 不良反应试验：评估药品的不良反应，制定相应的安全措施。
3. 代谢试验：了解药物在体内代谢的过程，评估药物的安全性。
总的来说，药剂学实验的内容十分广泛，涵盖了药物配方、制剂、质量控制、安全等多方面。
这些实验对药学学生的理论学习和实际操作能力都具有重要的促进作用。
药物制剂微生物检验
三、控制菌检查－大肠菌群检查
★大肠菌群检查意义
大肠菌群主要存在于温血动物粪便中，随 粪便排出体外后可直接污染药品，若产品中 检出该菌群，表明该产品受到粪便污染，可 能存在肠道致病菌并引起疾病，以此作为粪 便指示菌比大肠埃希菌更具广泛卫生学意义。
第四十三页，共62页。
三、控制菌检查－大肠菌群检查
胆盐乳糖M
（1）当仅有1个稀释级的菌落数符合上述规定，以该级的平 均菌落数乘以稀释倍数报告菌数;当有2个或2个以上稀释级的 菌落数符合上述规定，以最高的平均菌落数乘以稀释倍数的值 报告之。
（2）如各稀释级的平板均无菌落生长，或仅最低稀释级的 平板有菌落生长，但平均菌落数小于1时，以＜1乘以最低稀释 倍数的值报告菌数。
第六页，共62页。
二、药品微生物限度检测的基本条件
㈡
由于某些供试品具有抗菌活性，在建
方
立测定方法或原测定法的检验条件发生改
法 变时，可能影响检验结果的准确性，必须
对供试品的抑菌活性及测定方法的可靠性
进行验证。
第七页，共62页。
二、药品微生物限度检测的基本条件
1.检测用量
㈢
2.检测量
取
样
量
①所有剂型＞2个最
编号
2 2
1∶10 2760
各稀释度菌落数 1 ∶102 295
1 ∶103 46
2890
271
60
比值
1.6 2.2
菌落数
37750 27100
报告数
38000 27000
第二十七页，共62页。
细菌总数检查表
培养温度：30℃-35℃
培养基名称：营养琼脂培养基（批号：14040901）
稀释度
药物制剂鉴定的原理和方法
药物制剂鉴定的原理和方法
药物制剂鉴定的原理和方法是通过一系列化学和物理性质的测试，以确定药物制剂的成分、纯度、质量等方面的特征。
药物制剂鉴定的原理包括：
1. 成分分析：通过化学分析方法，如色谱、质谱等，确定药物制剂中的活性成分和辅助成分的类型和含量。
2. 物理性质测定：通过测定药物制剂的外观、形状、溶解性、熔点、电导率等物理性质，判断其是否符合标准要求。
3. 纯度测定：通过测定药物制剂中杂质的含量和纯度，判断制剂是否纯净。
药物制剂鉴定的方法包括：
1. 色谱分析：包括薄层色谱、气相色谱、液相色谱等分离技术，用于分离和鉴定药物制剂中的成分。
2. 光谱分析：包括紫外-可见光谱、红外光谱、核磁共振等，用于分析药物制剂的结构和成分。
3. 热分析：包括差热分析、热重分析等，用于测定药物制剂的熔点、热分解温度等物理性质。
4. 激光粒度分析：用于测定药物制剂的粒径大小和分布。
5. 敏感性测定：包括微生物灭活试验、动物毒性试验等，用于评估药物制剂的安全性和有效性。
通过这些原理和方法，可以对药物制剂进行全面的鉴定，保证其质量和效果的稳定性和可靠性。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
一、无菌检验的基本原则
1.严格进行无菌操作
无菌检查应在环境洁净度10 000级下的局部洁净度100 级的单向流空气区域内或隔离系统中进行，其全过程必须 严格遵守无菌操作，防止徽生物污染。
2.建立方法的验证
进行药品的无菌检查法时，应进行方法的验证，以证明 所采用的方法适合于该药品的无菌检查。若药品的组分或 原检验条件发生改变时，检查方法应重新验证。
2、取10个干烤后玻璃平皿，其中6个平皿，每2个分别加 入1：10，1：100，1：1000药液各1ml，然后加入50℃普 通琼脂培养基、（2，3，5-氯化三苯基四氮唑）15ml做细 菌培养；剩余的4个平皿，每2个分别加入1：10，1：100， 药液各1ml共4个，然后加入50℃虎红马丁培养基15ml做 霉菌培养，并立刻转动平板使药液与培养基充分混匀。10 个平板置37℃培养箱培养24h后并计数每个稀释度的3个 平板的菌落均数。
3、选取菌落平均值在30-300之间的平板作为菌落总数
的测定范围，将数得的菌落数乘以相应的稀释度得到 每克检测蜜丸中细菌总数。选取霉菌菌落平均值在550之间的平板作为霉菌总数的测定范围，将数得的菌 落数乘以相应的稀释度得到每克检测蜜丸中霉菌总数。
菌落数报告规则
①当仅有1个稀释级的菌落数符合上述规定，以该级的平均菌落 数×稀释倍数报告菌数。 ②当同时有2个稀释级的菌落数符合上述规定时，视两者比值而 定。
大肠埃希菌是人和动物肠道中寄生的正常菌群，随粪
便排出体外，可直接或间接污染药物及药品生产的各个环
节。服用后有可能被粪便中存在的肠道致病菌或寄生虫卵
等病原体感染。因此，大肠埃希菌被列为粪便污染指示菌， 是口服药品常规必检项目。
大肠埃希菌检查程序
供试品（1:10稀释）→ 供试液10ml
↓
不少于100ml的乳糖胆盐增菌液
↓37℃
18~24h
取增菌液划线转种
↓
伊红美兰琼脂平板（或麦康凯琼脂平板）
↓ ┌────────────┐
阴性
菌落紫黑色、有金属光泽
乳糖发酵、IMViC试验
发酵乳糖产酸产气、 MViC：+ + - -
（1）增菌 目的:抑制不需要的细菌生长，而有利于需检菌 的生长。培养基:乳糖胆盐 (BL)培养基，作用:胆 盐(或去氧胆酸钠)具有抑制革兰阳性细菌生长的 作用。
-
+
M
- 甲基红（methyl red）实验
甲基红 甲基红 +
葡萄糖→丙酮酸→乙酰甲基甲醇 葡萄糖→丙酮酸
-
+
V
- VP（Voges-Proskauer）试验
葡萄糖→丙酮酸→乙酰甲基甲醇 →二乙酰→红色化合物 +
胍基化合物 葡萄糖→丙酮酸 × × 乙酰甲基甲醇 -
-
+
C -枸橼酸盐利用（citrate utilization）试验
方法：按该品种验证的方法将供试液10ml接种 至100ml的乳糖胆盐培养基中， 37℃培养18～24h， 必要时可延至48h。
（2）分离培养：
伊红美蓝琼脂(EMB)或麦康凯琼脂（MacC）平板
将上述培养液划线接种于伊红美蓝琼脂平板或麦康凯 琼脂平板，37℃培养18 ～ 24h 。若平板上无菌落生长、或 生长的菌落与下表所列的菌落形态特征不符，判供试品未 检出大肠埃希菌。 大肠埃希菌菌落形态特征
菌落均数 例次
1
稀释倍数
10-1 1365 10-2 164 10-3 20
比值
菌落总数 /g或 /ml 16400
报告方式 /g或/ml
-
16000
2
3
2760
2890
295
271
46
60
1.6
2.2
37750
27100
38000
27000
4 5
6
不可计 27
不可计
4650 11
305
513 5
原则性要求：丸剂、口服片剂、胶囊剂、颗粒剂。
药典中药制剂通则项下的微生物限度要求
无菌检查：注射剂。 无菌检查及微生物限度检查：散剂、软膏剂、眼用制剂、 鼻用制剂、气雾剂*、喷雾剂。 微生物限度检查：丸剂、颗粒剂、片剂、锭剂、煎膏 剂、胶剂、糖浆剂、合剂、滴丸剂、胶囊剂、酒剂、 酊剂、流浸膏剂、浸膏剂、露剂、茶剂、栓剂、贴膏 剂(贴剂)、凝胶剂、搽剂、洗剂、涂膜剂. 不要求：膏药。
二、口服及外用中药的微生物学检查
口服制剂：细菌总数、霉菌总数、大肠杆菌和
活螨的检测
外用药物：绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌、破伤
风梭菌
一般眼科制剂：细菌总数、霉菌总数、绿脓杆 菌、金黄色葡萄球菌 以上药物均不能检出致病菌！
实验方法
（一）、蜜丸细菌总数测定 （二）、蜜丸霉菌总数测定 1、无菌条件下随机称取10g蜜丸置研钵中逐渐加入100ml 生理盐水研磨为1：10药液，分别量取9ml生理盐水置 10ml 具塞刻度试管中，其中一支加入1：10药液1ml后稀 释为1：100后再取1ml加入9ml生理盐水具塞刻度试管中 药物稀释为1：1000。
（1）液体培养基稀释法：
在试管中用液体培养基进行2倍系列稀释药物→ 在每管 中加等量的试验菌液→ 16～24h培养→观察结果，以能抑 制试验菌生长的最低浓度（最高药物稀释度）为该药的 MIC。
液体培养基稀释法药敏试验的抗生素溶液稀释方案
管号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 抗生素原浓度 （μ g/ml） 5120(原液) 512 512 512 64 64 64 8 8 8 1 抗生素来源管号 原液 1号管（最终浓度，下同） 1号管 1号管 4号管（最终浓度，下同） 4号管 4号管 7号管（最终浓度，下同） 7号管 7号管 10号管（最终浓度，下 同） 取药体 积(ml) 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 CAMHB 体积（ml) 9 1 3 7 1 3 7 1 3 7 1 抗生素最终 浓度（μ g/ml ） 512 256 128 64 32 16 8 4 2 1 0.5 Log2 9 8 7 6 5 4 3 2 1 0 -1
药物制剂的微生物学检查
第一节 中药制剂的无菌检查
灭菌制剂与无菌制剂的概念
灭菌制剂：系指采用某一物理、化学方法杀灭或除去所 有活的微生物繁殖体和芽胞的一类药物制剂。 无菌制剂：系指采用某一无菌操作方法或技术制备的不 含任何活的微生物繁殖体和芽胞的一类药物制剂。 无菌制剂包括：注射用制剂，眼用制剂；植入型制剂； 创面用制剂；手术用制剂等直接注射于体内或直接用于创 面、黏膜等的一类制剂。 这些制剂必须保证不含活的微生物，否则注入人体将会 引起严重的事故。因此，在出厂、上市前都必须按药典规 定的方法进无菌检查。
培 养 基 菌 落 形 态
呈紫黑色、浅紫色、蓝紫色或粉红色，菌落中心呈深紫色或无明 伊红美蓝琼 脂（ EMB 平板） 显暗色中心，圆形，稍凸起，边缘整齐，表面光滑，湿润，常有 金属光泽。
麦康凯琼脂
（MacC）
鲜桃红色或微红色，菌落中心呈深桃红色，圆形，扁平， 边缘整齐，表面光滑，湿润。
划线接种于伊红美蓝琼脂平板
高稀释级的菌落数×稀释倍数 比值
＝
低稀释级的菌落数×稀释倍数
若比值＜2, 以两稀释级的菌落数乘以稀释倍数的均值报告菌 落数； 若比值＞2但＜5时，以低稀释级的菌落数乘以稀释倍数的值 报告菌落数； 当出现比值＞5，或高稀释级的菌落数≥低稀释级的菌落数等 异常情况时，应查明原因再行检查，必要时，应进行方法的重 新验证。
菌生长繁殖的一定量培养基中。
直接接种法图示
无抗菌 作用的 供试品 抽 样
培 养
接 种
细菌 37℃ 霉菌、酵母菌 25℃
接种于培养基硫乙醇酸盐培养 基及改良马丁培养基管
第二节 药物的微生物限度检查
药物的微生物限度检查，是指非规定灭 菌制剂（如口服药及外用药物）及其原、 辅料受到微生物污染程度的一种检查方法。
大肠埃希菌在伊红美蓝琼脂平板 上的菌落特征
大肠埃希菌在麦康凯琼脂平板上 发酵乳糖菌落
（3）纯培养、染色、镜检，观察染色性及形态 （4）生化反应
主要是与产气杆菌进行鉴别，大肠埃希菌与产气杆菌两 者在形态、染色性、菌落等方面十分相似。因此，须通过 生化反应来鉴别。挑取可疑菌落做乳糖发酵试验和IMViC 试验——吲哚试验（I）、甲基红试验(M)、V-P试验(Vi) 和枸椽酸盐利用试验(C)试验。 结果：大肠埃希菌为+ + - 产气杆菌则为- - + +
（二）致病菌检测
阳性对照试验：
供试品进行控制菌检查时，应做阳性对照试验。阳性
对照试验的加菌量为10～100 CFU，方法同供试品的控制
菌检查。阳性对照试验应检出相应的控制菌。
阴性对照试验： 取稀释液10ml照相应控制菌检查法检查，作为阴性对 照。阴性对照不得有菌生长。
（二）致病菌检测
1．大肠埃希菌的检查
3.相关试剂及培养条件
供试品检查时，使用的表面活性剂、中和剂或灭活剂， 应证明其有效性及对微生物的生长和存活无影响。将供试 品分别接种于适合需氧菌、厌氧菌、霉菌生长的培养基中， 在适宜条件下培养，细菌培养温度为30～37℃；霉菌、酵 母菌培养温度为23～28℃。
4.正确采集样品
无菌检验是对整体中部分样品进行随机抽检，来推断整 体是否有菌的情况(无菌或染菌)。因此，在一批药品的无 菌检验中，取样数量愈少，染菌的检出率愈小；取样愈多， 染菌的检出率愈大，该批药品通过无菌检验的几率愈小。 无菌检验时取样量和比例必须严格按规定执行。
如各稀释级的平板均无菌落生长，或测定数在10个以下时，