EDTA脱钙液

合集下载

EDTA 脱钙液使用说明书

EDTA 脱钙液使用说明书

EDTA脱钙液使用说明书储存条件:常温保存,有效期1年。

产品内容:Components SL1500 EDTA脱钙液(pH7.2-7.4)500mL说明书1份产品说明:1.在病理实验制作切片时,我们会经常碰到一些含钙组织,而且钙十分坚硬。

由于组织中的钙和石蜡之间的密度不同,含钙的组织一般不能直接制作切片。

骨组织含钙量最多。

除了骨组织之外其它组织也可发生钙化,在组织中形成钙化区,所以需要经过脱钙过程。

脱钙是制作骨组织切片的重要环节,尤其是要进行免疫组织化学染色的骨组织。

2.为达到骨组织既充分脱钙,又保护骨组织中的抗原不受破坏,需要对含钙的组织固定之后再进行脱钙。

然后再行常规制片。

3.EDTA与羟基磷灰石结晶的外层钙结合,形成可溶性的非离子化合物,同时又促进晶体内层的结合钙向外转移。

借助这种连续性的作用使羟基磷灰石晶体逐渐融解,pH中性时可起螯合作用。

其特点是脱钙时间长,对骨组织的损伤少,酶活性(碱性磷酸酶)和细胞抗原性保存较好,制作的切片可用于组织化学和免疫组化分析。

4.主要用途:用于骨组织、牙齿等脱钙。

使用说明:1.骨组织脱钙时,取材不易过厚,一般大约5mm。

2.组织固定后,用PBS清洗3次,每次20min。

3.组织用蒸馏水洗清洗3次,每次20min。

4.组织转移至20~30倍体积的EDTA脱钙液中,脱钙10~30天或更长时间。

如果想加快脱钙速度,可以置于37℃进行脱钙。

如果必要,更换新的EDTA脱钙液继续脱钙,多数组织脱钙2周~3个月即可,每周更换一次,直至终点。

亦可采用微波快速脱钙法:微波炉设在200W左右的档位,每次加热5min,依据组织厚度和密度重复3~5min,中间间隔3~5min。

5.用蒸馏水冲洗数次。

6.常规脱水、包埋。

注意事项:1.为使脱钙更为充分,每次最好更换新液,这既弃去脱掉的钙盐,增加脱钙强度,又起到降低脱钙的温度。

2.脱钙时间以大头针能刺进骨密质为完成脱钙标准。

3.脱钙温度不要太高,一般以室温(25℃)为宜,高温可加快脱钙速度,但可破坏组织中的核酸而影响染色效果。

不同的脱钙液在骨组织制片中的比较应用

不同的脱钙液在骨组织制片中的比较应用

不同的脱钙液在骨组织制片中的比较应用【摘要】目的比较不同的脱钙液对骨组织的脱钙能力的差异,探讨其对HE染色的影响。

方法选取50例手术切除的新鲜骨标本,运用4种常用的脱钙液(14%硝酸、10%盐酸、20%甲盐酸和EDTA脱钙液)进行脱钙,比较其脱钙效果和对HE染色的影响。

结果不同的脱钙液对骨组织的脱钙能力、HE染色效果影响有显著区别。

结论14%硝酸脱钙能力最强,用时间最短,染色的效果最差;10%盐酸对骨组织的损伤小,HE染色的效果最好,但用时较长;20%甲盐酸脱钙能力和HE染色效果都介于10%盐酸和EDTA脱钙液之间;EDTA脱钙液脱钙用时最长, 对骨组织的损伤最小。

【Abstract】Objective To investigate the different ability of four different decalcifying solutions to decalcify and their influence of HE stain and immunohistochemistry. Methods 50 cases of fresh human bone example are selected. The bones had been decalcified with four kinds of decalcifying solution (including 14% nitric acid, 10% hydrochloric acid, 20% a hydrochloric acid and EDTA). Results Different decalcifying solutions had the different decalcified ability and the influence of HE stain and immunohistochemistry. Conclusion 14% nitric acid can decalcify strongly and rapidly. But its deficiency is the infection of HE coloration and immunohistochemistry. 10% hydrochloric acid doesn’t destroy the tissue and has the best influence for HE stain. The effect of 20% a hydrochloric acid and HE stain between 10% hydrochloric acid and EDTA decalcifying acid. EDTA can decalcify for a long , have the minimum damage for bone tissue.【Key words】Decalcifying solution; HE stain; Bone tissue骨组织是一种坚硬的结缔组织,由骨细胞和骨基质组成,骨基质内含大量无机盐,主要是羟磷灰石-磷酸钙和碳酸钙。

EDTA脱钙液

EDTA脱钙液

EDTA脱钙液产品简介:在组织切片过程中,一些组织内含有骨质或钙化灶时,含钙的组织不宜直接用石蜡包埋切片。

这是因为钙和石蜡之间的密度不同,较难切出完整的切片。

对含钙组织最好固定之后,再进行脱钙或二者同时进行。

然后进行下游操作如脱水、透明、浸蜡、包埋、切片。

用于脱钙的试剂很多,脱钙剂包括有机酸、无机酸、乙二胺四乙酸(EDTA)以及电解脱钙。

EDTA 是一种相对较好的螯合脱钙剂,对组织结构影响最小,可以较好的保存组织的某些酶类,经EDTA脱钙后的组织可以进行免疫组化和原位杂交染色。

但是该法脱钙速度太慢,一般脱需要数周至数月。

Jimei EDTA脱钙液主要由EDTA、磷酸盐等组成,pH值为7.2。

其优点是:①经EDTA 脱钙的组织染色结果好;②对组织的结构损害小。

其缺点是:①脱钙速度很慢,不适合常规标本脱钙使用;②脱钙后组织会稍微变硬;③不宜用化学方法确定脱钙终点。

产品组成:自备材料:1、PBS2、蒸馏水3、加热装置或微波炉操作步骤(仅供参考)1、骨组织脱钙时,取材不易过厚,一般大约5mm。

2、组织固定后,用PBS清洗3次,每次20min。

3、组织用蒸馏水洗清洗3次,每次20min。

4、组织转移至20~30倍体积的EDTA脱钙液中,脱钙10~30天或更长时间。

如果想加快脱钙速度,可以置于37。

C进行脱钙。

如果必要,更换新的EDTA脱钙液继续脱钙,多数组织脱钙2周~3个月即可,每周更换一次直至终点。

亦可采用微波快速脱钙法:微波炉设在200W左右的档位,每次加热5min,依据组织厚度和密度重复3~5min,中间间隔3~5min。

5、用蒸馏水冲洗数次。

6、常规脱水、包埋。

注意事项:1、厚度5 mm的骨组织块脱钙时间一般脱钙10~30天即可,大多数在14~60天即可。

2、适当加温能加快脱钙的速度,一般不应超过37~40。

C,温度过高容易使骨组织造成松散解体,尤其不可大于60。

C。

3、脱钙应彻底,防止脱钙不足或过度。

三种脱钙液对骨组织免疫组化染色的影响

三种脱钙液对骨组织免疫组化染色的影响

三种脱钙液对骨组织免疫组化染色的影响目的探讨三种脱钙液对骨组织免疫组化染色的影响。

方法选择12例骨组织,随机分为3组。

A组用14%硝酸脱钙液进行处理,B、C组分别用EDTA 脱钙液、PLANK脱钙液进行处理,同时对CD3、CD68、Ki—67 和TTF—1染色。

结果室温条件下,硝酸脱钙液的脱钙时间最短,但对组织损伤最大。

PLANK 脱钙液和EDTA脱钙液脱钙效果较好,组织结构完整,形态清晰,免疫组化染色较好。

结论室温条件下,三种脱钙液中PLANK脱钙液和EDTA脱钙液对骨组织脱钙及免疫组化染色效果较好。

但由于EDTA脱钙液脱钙时间过长,PLANK 脱钙液脱钙均匀,速度快,更适合用于临床病理检查。

硝酸脱钙液脱钙最快,但是免疫组化染色效果较差。

标签:脱钙液;骨组织;免疫组化染色骨组织内含有大量无机钙盐,结缔组织坚硬,难以直接制片[1]。

如果强制切片,在蓝色钙盐背景下,往往无法看清细胞结构,所以需要选择一种能保持骨组织形态结构和染色后有利于保持细胞结构清晰度和对比度的脱钙液。

本文研究14%(体积分数)硝酸脱钙液、EDTA脱钙液、PLANK脱钙液对骨组织免疫组化染色的影响,以期寻找一种效果比较理想的脱钙液,对病理诊断工作提供帮助。

1 材料与方法1.1 标本选择12例骨组织标本均来源于我院,切成1 cm×1 cm×0.3 cm的骨块,在福尔马林中性液内固定24 h,用于脱钙及免疫组化染色实验。

1.2 三种脱钙液①脱钙液Ⅰ:14%(体积分数)硝酸脱钙液,配制方法为14 mL浓硝酸加入86 mL蒸馏水;②脱钙液Ⅱ:EDTA脱钙液,配制方法为EDTA10 g,蒸馏水100 mL,加NaOH充分搅拌溶解,在用10 mol/L的HCl调pH为8.0,最后加入4%甲醛15 mL。

③脱钙液Ⅲ:PLANK脱钙液,配制方法为氯化铝10 g,甲酸50 mL,10%福尔马林10 mL,冰乙酸1.5 mL,加蒸馏水至总体积100 mL。

骨组织脱钙液介绍

骨组织脱钙液介绍

骨组织脱钙液介绍骨组织脱钙液概述在病理实验制作切片时,我们会经常碰到一些含钙组织,而且钙十分坚硬。

由于组织中的钙和石蜡之间的密度不同,含钙的组织一般不能直接制作切片。

骨组织含钙量最多。

除了骨组织之外其它组织也可发生钙化,在组织中形成钙化区,所以需要经过脱钙过程。

脱钙是制作骨组织切片的重要环节,尤其是要进行免疫组织化学染色的骨组织。

为达到骨组织既充分脱钙,又保护骨组织的抗原不受破坏,需要对含钙的织固定之后再进行脱钙或采用固定兼有脱钙的液体处理,固定并脱钙。

然后再行常规制片。

用于脱钙的试剂很多,脱钙剂包括有机酸、无机酸、乙二胺四乙酸(ethylenediamine tetraacetic acid EDTA)除此之外还有电解脱钙法。

强有机酸,如硝酸和盐酸可用于密皮质骨的脱钙,在短时间内可除去大量的钙。

令人遗憾的是这些强酸对组织形态会产生不良影响,脱钙作用强对组织破坏性大。

细小的组织,例如,骨髓组织不推荐用强酸脱钙。

虽然可以使用各种附加剂,如缓冲液具有保护组织的作用,但也降低了脱钙速度。

因此,各种脱钙液的配方都围绕着脱钙速度和消除对组织的不良影响而设计。

在酸类脱钙液中醋酸和甲酸比较适合于骨髓组织脱钙。

甲酸是一种使用范围较广的脱钙剂。

甲酸脱钙 10% 浓度比较合适。

醋酸和甲酸的作用比较弱,脱钙速度比较慢,它们不适合密皮质骨的脱钙。

EDTA 是一种比较温和的脱钙剂(EDTA 不是酸)。

对组织的渗透性差,作用慢。

大剂量使用价格较贵。

电解脱钙对组织损害最小,因为它的脱钙速度太慢,所以,不适合常规使用。

不同的脱钙液对骨组织的脱钙作用不同,脱钙效果也不完全相同。

为了达到良好的脱钙效果,建议使用EDTA脱钙液,该脱钙液对组织损伤较小,缺点就是脱钙时间会比较长些,但脱钙时间也要根据组织块大小而定。

目前国内生产EDTA脱钙液的公司也很少,个人感觉上海舜百生物的EDTA脱钙液使用效果还不错,脱钙脱的比较彻底,而且对组织损伤很小,就是周期长了些。

脱钙方法总结

脱钙方法总结
缺:
(1)该液对细胞核作用较慢,使细胞核着色较差。
(2)要用5%硫酸钠液中和,然后充分流水冲洗至少12小时。
4.Perenyi’s液:
10%硝酸4份,0.5%铬酸3份,无水乙醇3份。
5mm厚的骨组织块脱钙时间需要2-7天。
优点:
(1)该液是一种暖和的脱钙液,可能由于铬酸和乙醇的存在可以抑制组织泡软。
厚度5mm骨组织块脱钙3-7天。
优点:
(1)细胞核染色相当好。
(2)不需要水洗,脱水时酸就会首先被脱出来。
缺点:使用化学方法测试不能确定脱钙的终点。
6.甲酸液:
甲酸10ml,10%福尔马林盐90ml。
厚度5mm骨组织块脱钙时间需要3-7天。
优点:
(1)脱钙同时可以对组织固定。
(2)对细胞核染色比较好。
(2)细胞核和细胞浆细微结构着色均好。
(3)推荐该液作为常规脱钙使用。
(4)组织脱钙后不需要碱性液中和和流水冲洗。脱钙组织直接移到90%乙醇中。
缺点:
(1)脱钙较慢,因此,紧急情况下不能使用。
(2)用化学方法测试不能确定脱钙的终点。
5.Von Ebener’s液:
饱和水溶液氯化钠50ml,蒸馏水50 ml,浓盐酸8 ml。
9.AFIP甲酸-柠檬酸钠液:
A液:甲酸25ml,蒸馏水25ml。B液:枸橼酸钠(结晶)10g,蒸馏水50ml。
临用时A液和B液等量混合,每日换1次,因为柠檬酸钠可以和钙离子螯合,具有促进脱钙的作用。
10.蒋维中(Jangweizhong’s)液:
盐酸80ml。甲酸70ml,三氯化钙50g,冰醋酸25ml甲醛100ml,生理盐水900ml。
缺点:脱钙时间必需仔细控制防止过度脱钙损害组织。

edta脱钙液配制方法

edta脱钙液配制方法

edta脱钙液配制方法EDTA脱钙液是一种常用的化学试剂,适用于在生化、分子生物学以及细胞生物学实验中,去除镁和钙离子的干扰。

本文将介绍一种EDTA脱钙液配制方法。

1.原料准备:1) 乙二胺四乙酸(EDTA):分子式为C10H16N2O8,化学纯,实验室常备品,一定要质量优良。

2) 纯水:经过蒸馏或离子交换处理的自来水。

3) 氢氧化钠(NaOH):实验室常备品,化学纯。

4) 氯化钙(CaCl2):实验室常备品,纯度要求95%以上。

2. 配制方法:1) 取EDTA 10克,加入100毫升蒸馏水中,并充分搅拌至完全溶解。

2) 用氢氧化钠溶液调节pH值至8.0,溶液会变成无色透明。

3) 用蒸馏水将溶液加至总体积200毫升,均匀混合。

4) 氯化钙和氯化镁分别加入到50毫升蒸馏水中,若有残留颗粒,则需过滤至溶液无颗粒为止。

5) 将氯化钙和氯化镁溶液缓慢滴加到EDTA水溶液中,同时用磁力搅拌器搅拌,注意滴加时不要加的过快,需滴加至完全反应。

6) 倒入500毫升容量瓶中,并用蒸馏水加至刻度处,摇匀。

3. 注意事项:1) 在配制EDTA脱钙液时,应严谨操作,确保实验的准确性。

2) 水溶液的pH值应被精确地测量,并调节至8.0,以确保溶液的准确性与稳定性。

3) 在溶液调节和滴加氯化钙和氯化镁的过程中,应缓慢平稳,反应完全,避免产生沉淀和反应失误。

4) 为了得到稳定的EDTA脱钙液,应将其保存在阴凉、避光的环境中,并尽量降低其与大气中的CO2接触的机会。

总结:以上就是制备EDTA脱钙液的方法,这是适用于实验室的一种方法。

在添加脱钙剂到实验中时,确保您了解反应的机理和适用于您实验的最佳体系。

edta脱钙原理

edta脱钙原理

edta脱钙原理
EDTA(乙二胺四乙酸)是一种有效的螯合剂,常用于蛋白质分离与纯化、酶活性的测定等生化实验中,其脱钙原理是通过与钙离子形成稳定的络合物,从而将钙离子与溶液中的其他离子分离。

EDTA脱钙原理的具体步骤如下:
1.EDTA与钙离子的络合反应:
EDTA分子中包含有四个羧酸基(-COOH),这些羧酸基通过它们的羧基与钙离子形成很强的配位键。

EDTA与钙离子形成的络合物非常稳定,可阻止钙离子在溶液中的沉淀和结晶。

2.离子交换:
EDTA在溶液中存在时,会释放出四价的H4Y-离子,并与其他金属离子形成络合物。

通过与其他金属离子形成络合物,EDTA将钙离子拦截在其中,从而实现了脱钙的效果。

3.配位作用:
EDTA通过与钙离子的配位作用,可以形成稳定的络合物,抑制钙离子的沉淀和结晶。

EDTA的配位数为6,即一个EDTA分子可以同时与一个钙离子形成6个配位键,形成六角形的层状结构。

这种结构对钙离子有很强的亲和力,使其离开溶液中的其他离子,而被EDTA固定。

4.温度和pH的影响:
EDTA脱钙反应的效果受温度和pH值的影响。

通常情况下,EDTA的脱钙效果在较高的温度下更好。

而pH值的增加会使EDTA与钙离子形成的络合物的溶解度增加,进而增强脱钙的效果。

总结起来,EDTA脱钙的原理是通过EDTA与钙离子的配位作用形成稳定的络合物,从而将钙离子与溶液中的其他离子进行分离。

EDTA的脱钙效果受温度和pH值的影响,通常在较高温度和碱性条件下效果更好。

EDTA脱钙技术广泛应用于蛋白质分离与纯化、酶活性的测定等生化实验中,对实验的准确性和可靠性具有重要作用。

edta脱钙原理

edta脱钙原理

edta脱钙原理
EDTA脱钙原理
EDTA(乙二胺四乙酸)是一种强螯合剂,可以与金属离子形成稳定的络合物。

在医学和生物化学领域,EDTA被广泛应用于脱钙和螯合金属离子的过程中。

EDTA脱钙是指通过EDTA与钙离子形成络合物,使钙离子从溶液中被螯合并去除的过程。

这种过程可以应用于许多领域,如水处理、食品加工、医学和生物化学等。

在水处理中,EDTA脱钙可以用于去除水中的钙和镁离子,从而减少水垢的形成。

水垢是由于水中的钙和镁离子与碳酸盐或硫酸盐结合而形成的。

这些水垢会在管道、锅炉和其他设备中积累,导致设备的损坏和效率降低。

通过EDTA脱钙,可以有效地去除水中的钙和镁离子,从而减少水垢的形成。

在食品加工中,EDTA脱钙可以用于去除食品中的钙和镁离子,从而改善食品的质量和口感。

例如,在某些奶制品中,钙离子会与蛋白质结合,导致蛋白质凝固和奶制品变得粘稠。

通过EDTA脱钙,可以去除奶制品中的钙离子,从而改善其质量和口感。

在医学和生物化学中,EDTA脱钙可以用于分离和纯化蛋白质和其他生物分子。

许多生物分子需要与钙离子结合才能发挥其功能。

通过EDTA脱钙,可以去除这些钙离子,从而分离和纯化这些生物分
子。

EDTA脱钙是一种广泛应用的技术,可以用于去除水中的钙和镁离子、改善食品的质量和口感、以及分离和纯化生物分子。

这种技术的应用范围非常广泛,对于许多领域都具有重要的意义。

大鼠关节组织硝酸\EDTA脱钙对石蜡制片的影响及比较

大鼠关节组织硝酸\EDTA脱钙对石蜡制片的影响及比较

大鼠关节组织硝酸\EDTA脱钙对石蜡制片的影响及比较标签:大鼠关节组织;硝酸脱钙;EDTA脱钙;石蜡制片骨组织脱钙技术是病理实验室常用技术之一。

它的应用,使难以切片或不能完整制片的骨或软骨组织达到完整制片的目的。

适用组织化学、免疫组化等技术的染色。

大鼠关节组织制片的关键步骤是脱钙,其直接影响到制片的成败。

现在大鼠关节组织石蜡制片实验中,分别用10%硝酸和乙二胺四乙酸二钠(EDTA)复合液进行脱钙处理后,石蜡包埋、制片、染色。

对用两种方法脱钙处理的大鼠关节组织石蜡制片后染色,镜下观察形态及着色效果。

1 材料与方法1.1 材料大鼠30只、出生10周,平均体质量400 g(购自中山大学动物实验)。

雌雄不限,随机分组。

在麻醉状态下经心脏注射生理盐水及1%多聚甲醛处死动物,取关节组织、标本置10%甲醛固定液中固定24 h。

10%的硝酸脱钙液。

EDTA脱钙液,微波炉。

1.2 方法10%硝酸脱钙液的配制及脱钙方法将1份的硝酸溶液加入到9份的蒸馏水中搅拌均匀即可。

将大鼠关节组织放入是组织体积20倍量的10%硝酸溶液中,浸泡16~18 h,浸泡中无需更换脱钙液,用针能刺入即可。

取出组织置流水中冲洗碱化2 h。

取材,入脱水机石蜡包埋、切片、染色。

1.3 EDTA脱钙液的配制及脱钙方法用PBS缓冲液(pH7.2)100 ml、加NaOH 搅拌溶解至饱合状态,再加入EDTA10 g溶解后用1 mol/L Hcl调节pH值至7.2,加甲醛15 ml即可。

把脱钙液装入小烧杯中,将大鼠关节组织放置其中,脱钙液需充足。

放入微波炉中调节微波功率50℃,微波照射50 s即可达到脱钙的目的。

取出无需流水冲洗、直接取材、入脱水机、石蜡包埋、切片、染色。

2 结果10%硝酸脱钙处理的大鼠关节组织切片组织结构尚完整,组织块也能顺利连续切片,镜下:细胞形态、结构尚清,HE着色较淡,有时细胞核仁及膜边界不太清晰,分界不清,对比度不强。

在特殊染色和免疫组化染色中,着色较困难,效果欠佳。

改良EDTA脱钙法和酸脱钙法在乳腺癌骨转移免疫组织化学中的比较研究

改良EDTA脱钙法和酸脱钙法在乳腺癌骨转移免疫组织化学中的比较研究

《中国癌症杂志》2019年第29卷第7期 CHINA ONCOLOGY 2019 Vol.29 No.7514·论 著·欢迎关注本刊公众号改良EDTA脱钙法和酸脱钙法在乳腺癌骨转移免疫组织化学中的比较研究孙 静1,袁俊清2,杨梦迪1,王智煜1,姚光宇1,周亦一1,赵 晖11.上海交通大学附属第六人民医院肿瘤内科,上海 200233;2.上海交通大学附属第六人民医院病理科,上海 200233[摘要] 背景与目的:晚期乳腺癌骨转移发生率大于70%,对骨组织进行脱钙处理是一大技术难点。

探索乳腺癌骨转移的临床特点及更适合对骨组织进行脱钙的方法。

方法:收集2012年1月—2018年1月期间病理学诊断为乳腺癌骨转移患者的临床资料,分析临床特征;分析改良乙二胺四乙酸二钠(ethylenediaminetetraacetic acid ,EDTA )脱钙法及酸脱钙法对骨转移组织进行处理后,骨组织形态、结构的差异;比较两组原发灶与转移灶免疫组织化学检查结果中雌激素受体(estrogen receptor ,ER )、孕激素受体(progesterone receptor ,PR )的一致性;分析两组骨转移组织ER 、PR 、Ki-67的阳性率;分析乳腺癌骨转移患者ER 、PR 阳性和阴性的生存差异。

结果:116例乳腺癌骨转移患者中91.4%为溶骨性骨转移,80.1%骨转移的数量为4~20,81.9%发生骨相关事件(skeletal-related event ,SRE )。

41例为改良EDTA 脱钙,75例为酸脱钙,两组骨组织的形态结构无明显差异。

改良EDTA 脱钙组ER 一致性为95.1%,明显高于酸脱钙组(69.3%)(P <0.05);改良EDTA 脱钙组骨组织ER 的阳性率为90.2%,明显高于酸脱钙组(73.3%)(P <0.05);改良EDTA 组PR 的阳性率(58.5%)明显高于酸脱钙组(36.0%)(P <0.05),Ki-67增殖指数明显高于酸脱钙组(P <0.05);骨转移组织ER +患者的平均生存时间为(41.09±4.26)个月,明显优于ER -患者[(25.81±5.71)个月](P <0.05)。

混合脱钙液与EDTA脱钙液对骨组织切片HE染色影响的分析

混合脱钙液与EDTA脱钙液对骨组织切片HE染色影响的分析

混合脱钙液与EDTA脱钙液对骨组织切片HE染色影响的分析目的比较不同脱钙液对骨组织的脱钙能力的差异,探讨其对HE染色的影响。

方法选取16例大鼠胫骨标本,运用两种常用的脱钙液(混合脱钙液和EDTA 脱钙液)进行脱钙,比较其脱钙效果和对HE染色的影响。

结果两种脱钙液对骨组织的脱钙能力、HE染色效果影响有显著区别。

结论混合脱钙液时间最短,但切片和染色效果最差;EDTA脱钙液对骨组织损伤小,HE染色效果最好,但用时较长。

Abstract:Objective To compare the difference of different decalcifying fluid on bone decalcification ability,and to investigate its effect on HE staining.Methods 16 cases of rat tibia specimens,using two kinds of decalcifying fluid(mixture of decalcifying fluid and EDTA decalcifying fluid)were decalcified,compare the decalcification effect and the effects on HE staining.Results Two decalcification of bone tissue decalcification ability,HE staining effect has significant difference.Conclusion Mixed decalcifying fluid in the shortest time,but the sectioning and staining effect is the worst;EDTA decalcification of bone HE staining had the best effect,but with a longer time.Key words:Mixed decalcification solution;EDTA decalcification liquid;HE staining骨组织是一种坚硬的结缔组织,由骨细胞和骨基质组成。

EDTA脱钙方法的实验观察

EDTA脱钙方法的实验观察

EDTA脱钙方法的实验观察
黄美雅;黄云梅;林燕萍;郑良朴
【期刊名称】《福建中医药》
【年(卷),期】2007(038)004
【摘要】骨骼组织是一种坚硬的结缔组织,有机成分类骨质和无机成分骨盐2种成分紧密结合形成骨基质,使其变得十分坚硬,不能直接制片。

我们实验工作中要获得一张优质的骨切片,均需脱钙处理,使钙盐溶解,组织变软后才能制作切片。

然后进行HE染色、特殊染色和免疫组化等观察。

在诸多脱钙方法中,笔者在实践中认为化学螯合物(EDTA)脱钙法是一种较为理想、可行的方法,特别适合科学研究。


【总页数】2页(P46-47)
【作者】黄美雅;黄云梅;林燕萍;郑良朴
【作者单位】福建中医学院,福建,福州,350108;福建中医学院,福建,福州,350108;福建中医学院,福建,福州,350108;福建中医学院,福建,福州,350108
【正文语种】中文
【中图分类】R446.8
【相关文献】
1.混合脱钙液与EDTA脱钙液对骨组织切片HE染色影响的分析 [J], 吴拮;孙立国;赵成相;李静;郭国峰;吕荣
2.两种EDTA脱钙方法的比较 [J], 李喜红;杨海新;张睿
3.改良EDTA脱钙法和酸脱钙法在乳腺癌骨转移免疫组织化学中的比较研究 [J], 孙静; 袁俊清; 杨梦迪; 王智煜; 姚光宇; 周亦一; 赵晖
4.EDTA脱钙在骨组织大切片制片中的应用效果 [J], 翁丹枫;傅晓丹;陈淑惠;张真真
5.5%硝酸、10%EDTA用于大鼠尾椎椎间盘组织脱钙处理的效果观察 [J], 齐妍;李建华;王咏梅
因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

不同浓度和pH值EDTA脱钙液对下颌骨免疫组化结果的影响

不同浓度和pH值EDTA脱钙液对下颌骨免疫组化结果的影响

不同浓度和pH值EDTA脱钙液对下颌骨免疫组化结果的影响沈溪明;何欣欣;吴东霞;陈耿标;王林【期刊名称】《临床与实验病理学杂志》【年(卷),期】2014(30)6【摘要】传统骨组织脱钙常采用酸性液体,但易导致组织结构难以保持完整,影响病理学进一步诊断。

骨组织用乙二胺四乙酸二钠(EDTA)作为脱钙液进行脱钙,能使骨组织中的蛋白抗原保持完好,组织细胞结构保持完整清晰。

已有大量文献报道肯定了EDTA脱钙液的作用,但对EDTA脱钙液的适宜浓度和pH值报道不一。

本文旨在探讨不同浓度和pH值EDTA脱钙液对下颌骨组织HE形态和免疫组化结果的影响。

【总页数】3页(P696-698)【作者】沈溪明;何欣欣;吴东霞;陈耿标;王林【作者单位】中山大学附属第二医院病理科,广州510120;中山大学附属第二医院病理科,广州510120;中山大学附属第二医院病理科,广州510120;中山大学附属第二医院病理科,广州510120;中山大学附属第二医院病理科,广州510120【正文语种】中文【中图分类】R446.6【相关文献】1.四种脱钙液对骨组织HE和免疫组化染色的影响 [J], 李锐;金玉兰;韩一丁;刘红刚2.固定液及抗原修复液pH值对免疫组化染色的影响 [J], 杨京平;张燕;钟延丰;郑杰3.混合脱钙液与EDTA脱钙液对骨组织切片HE染色影响的分析 [J], 吴拮;孙立国;赵成相;李静;郭国峰;吕荣4.两种盐酸脱钙液对骨髓HE及免疫组化染色的影响 [J], 李锐;金玉兰;杨冬梅;岳常丽;马志红;刘红刚5.微波对不同浓度EDTA骨脱钙的影响 [J], 曾跃琴;李芳华;张天娥;陈继兰;秦健因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

EDTA脱钙液在原位杂交中的应用

EDTA脱钙液在原位杂交中的应用

EDTA脱钙液在原位杂交中的应用
张丽红;梅红;王医术;李玉林
【期刊名称】《中国实验诊断学》
【年(卷),期】2008(012)001
【摘要】脱钙是含钙组织进行常规病理染色、免疫组化染色及原位杂交染色过程中必不可少的重要环节。

由于脱钙液的种类很多,本研究发现,10%的EDTA脱钙液(内含1‰的DEPC水)能有效的保护组织内的核酸不受破坏,报告如下。

【总页数】1页(P122-122)
【作者】张丽红;梅红;王医术;李玉林
【作者单位】吉林大学病理生物学教育部重点实验室,吉林,长春,130021;吉林大学病理生物学教育部重点实验室,吉林,长春,130021;吉林大学病理生物学教育部重点实验室,吉林,长春,130021;吉林大学病理生物学教育部重点实验室,吉林,长
春,130021
【正文语种】中文
【中图分类】R4
【相关文献】
1.微波-EDTA快速脱钙技术及其在免疫组化染色中的应用 [J], 熊正文;黄勇;胡海霞;苏红;李春光
2.改良EDTA脱钙液在骨髓活检组织中染色效果观察 [J], 翁丹枫;张声;李国平;王鹏程;黎三艳
3.微波-EDTA脱钙技术在免疫组织化学染色中的应用研究 [J], 熊正文;黄勇;胡海
霞;苏红;李春光
4.EDTA缓冲液在原位杂交中的应用 [J], 吴惠茜;刘泳冬;车丽洪;董愉
5.EDTA在骨脱钙中的应用 [J], 王海彬;吴宇峰;刘少军
因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

EDTA在骨脱钙中的应用

EDTA在骨脱钙中的应用

EDTA在骨脱钙中的应用
王海彬;吴宇峰;刘少军
【期刊名称】《中山大学学报:自然科学版》
【年(卷),期】2000()S2
【摘要】研究不同浓度的EUTA在3种动物鼠、兔、人骨骼脱钙中的作用效果取大鼠、兔、人的大小不同的骨(松质骨、皮质骨)在不同EDTA浓度下脱钙,并进行电镜、酶学和免疫组化的观察.在磁力搅拌下,松质骨3d完成脱钙,皮质骨需要5d的时间;而无磁力搅拌的情况下,松质骨的脱钙需要12d,而皮质骨大于12d据不同动物部位和有无磁力搅拌下。

【总页数】4页(P276-279)
【关键词】乙二胺四乙酸二钠盐;骨
【作者】王海彬;吴宇峰;刘少军
【作者单位】广州中医药大学第一附属医院
【正文语种】中文
【中图分类】N55
【相关文献】
1.EDTA脱钙液在原位杂交中的应用 [J], 张丽红;梅红;王医术;李玉林
2.改良EDTA脱钙法和酸脱钙法在乳腺癌骨转移免疫组织化学中的比较研究 [J], 孙静; 袁俊清; 杨梦迪; 王智煜; 姚光宇; 周亦一; 赵晖
3.骨钉和脱钙骨在骨创伤和骨缺损中的应用 [J], 何飞熊;张春;石瑾;徐达传
4.EDTA微波脱钙骨的免疫组化染色 [J], 刘大维;初同伟;张良;邱俊
5.微波对不同浓度EDTA骨脱钙的影响 [J], 曾跃琴;李芳华;张天娥;陈继兰;秦健因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。

EDTA脱钙液
产品简介:
一些组织内含有骨质或钙化灶时,含钙的组织不宜直接用石蜡包埋切片。

这是因为钙和石蜡之间的密度不同,较难切除完整的切片。

对含钙组织最好固定之后,再进行脱钙或二者同时进行。

然后进行下游的实验,如脱水、透明、浸蜡、包埋、切片。

用于脱钙的试剂很多,脱钙剂包括有机酸、无机酸、乙二胺四乙酸(EDTA)以及电解法脱钙。

EDTA是一种相对较好的螯合脱钙剂,对组织结构影响最小,可以较好的保存组织的某些酶类, 经EDTA脱钙后的组织可以进行免疫组化和原位杂交染色。

但是该法脱钙速度太慢,一般脱需要数周至数月。

Leagene EDTA脱钙液优点:①经EDTA脱钙的组织染色结果好;②对组织的结构损害小;③用化学方法测试可以确定脱钙的终点。

Leagene EDTA脱钙液缺点:①脱钙速度很慢,不适合常规标本脱钙使用;②脱钙后组织会稍微变硬。

主要成分:主要由EDTA、磷酸盐等组成,用NaOH溶液调pH值为7.2。

自备材料:
1、PBS
2、蒸馏水
3、加热装置或微波炉
操作步骤(仅供参考):
1、骨组织脱钙时,取材不易过厚,一般大约5mm。

2、组织固定后,用PBS清洗3次,每次20min。

3、组织用蒸馏水洗清洗3次,每次20min。

4、组织转移至20~30倍体积的EDTA脱钙液中,脱钙10~30天或更长时间。

如果想加
快脱钙速度,可以置于37℃进行脱钙。

如果必要,更换新的EDTA脱钙液继续脱钙,多数组织脱钙2周~3个月即可,每周更换一次,直至终点。

亦可采用微波快速脱钙法:
微波炉设在200W左右的档位,每次加热5min,依据组织厚度和密度重复3~5min,中间间隔3~5min。

5、用蒸馏水冲洗数次。

6、常规脱水、包埋。

注意事项:
1、厚度5mm的骨组织块脱钙时间一般脱钙10~30天即可。

2、适当加温能加快脱钙的速度,一般不应超过37~40℃,温度过高容易使骨组织造成松散解体,尤其不可大于60℃。

3、脱钙应彻底,防止脱钙不足或过度。

脱钙程度应控制在不影响组织切片的同时尽量缩短脱钙时间,以免脱钙过长引起组织损害。

4、脱钙用具避免使用金属容器,尽量使用玻璃容器。

5、骨组织脱钙应先固定后脱钙或脱钙固定同时进行,不应先脱钙后固定,以便减少组织的损伤程度。

6、每隔一段时间检测一次脱钙程度,避免脱钙过度,脱钙过度会增加组织的损伤程度,影响染色结果。

7、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

有效期:12个月有效。

附录:
脱钙终点的测定(物理法):采用针刺、手掐、钳夹等方法,当骨组织变软或针刺时没有阻力感即可终止脱钙。

物理检测法会对组织结构有一定的损害, 尽量避免用力过大或反复检测。

相关产品:
产品编号 产品名称
DD0012甲酸脱钙液
DD0020电解脱钙液(2.5%甲酸)
DD0028脱钙后碱处理液
DZ0029硫酸钠水溶液(5%)
DH0006苏木素伊红(HE)染色液试剂盒
DZ0209脱钙终点检测试剂盒(化学法)。

相关文档
最新文档