固定脱钙液配方
EDTA 脱钙液使用说明书
EDTA脱钙液使用说明书储存条件：常温保存，有效期1年。
产品内容：Components SL1500 EDTA脱钙液（pH7.2-7.4）500mL说明书1份产品说明：1.在病理实验制作切片时，我们会经常碰到一些含钙组织，而且钙十分坚硬。
由于组织中的钙和石蜡之间的密度不同，含钙的组织一般不能直接制作切片。
骨组织含钙量最多。
除了骨组织之外其它组织也可发生钙化，在组织中形成钙化区，所以需要经过脱钙过程。
脱钙是制作骨组织切片的重要环节，尤其是要进行免疫组织化学染色的骨组织。
2.为达到骨组织既充分脱钙，又保护骨组织中的抗原不受破坏，需要对含钙的组织固定之后再进行脱钙。
然后再行常规制片。
3.EDTA与羟基磷灰石结晶的外层钙结合，形成可溶性的非离子化合物，同时又促进晶体内层的结合钙向外转移。
借助这种连续性的作用使羟基磷灰石晶体逐渐融解，pH中性时可起螯合作用。
其特点是脱钙时间长，对骨组织的损伤少，酶活性(碱性磷酸酶)和细胞抗原性保存较好，制作的切片可用于组织化学和免疫组化分析。
4.主要用途：用于骨组织、牙齿等脱钙。
使用说明：1.骨组织脱钙时，取材不易过厚，一般大约5mm。
2.组织固定后，用PBS清洗3次，每次20min。
3.组织用蒸馏水洗清洗3次，每次20min。
4.组织转移至20～30倍体积的EDTA脱钙液中，脱钙10～30天或更长时间。
如果想加快脱钙速度，可以置于37℃进行脱钙。
如果必要，更换新的EDTA脱钙液继续脱钙，多数组织脱钙2周～3个月即可，每周更换一次，直至终点。
亦可采用微波快速脱钙法：微波炉设在200W左右的档位，每次加热5min，依据组织厚度和密度重复3～5min，中间间隔3～5min。
5.用蒸馏水冲洗数次。
6.常规脱水、包埋。
注意事项：1．为使脱钙更为充分，每次最好更换新液，这既弃去脱掉的钙盐，增加脱钙强度，又起到降低脱钙的温度。
2．脱钙时间以大头针能刺进骨密质为完成脱钙标准。
3．脱钙温度不要太高，一般以室温(25℃)为宜，高温可加快脱钙速度，但可破坏组织中的核酸而影响染色效果。
JYBL-Ⅰ脱钙液
北京雷根生物技术有限公司 JYBL-Ⅰ脱钙液简介：对含钙组织最好固定之后，再进行脱钙或二者同时进行。
然后进行下游操作如脱水、透明、浸蜡、包埋、切片。
用于脱钙的试剂很多，脱钙剂包括有机酸、无机酸、乙二胺四乙酸(EDTA)以及电解法脱钙。
JYBL-Ⅰ脱钙液主要由稀酸、甲醛、甲酸等组成。
其优点是：①作用迅速，24～36h 即可；②对组织的结构损害小；③脱钙完全。
该脱钙液特别适用于日常病理科骨组织标本的脱钙，但不宜用化学方法确定脱钙终点。
组成：操作步骤(仅供参考)：1、 骨组织脱钙时，取材不易过厚，一般大约5mm 。
2、 组织固定后，用PBS 清洗3次。
3、 组织用蒸馏水洗清洗3次。
4、 组织转移JYBL-Ⅰ脱钙液中脱钙。
如果想加快脱钙速度，可以置于37℃进行脱钙。
5、 用蒸馏水冲洗数次。
6、 常规脱水、包埋。
注意事项：1、 厚度5mm 的骨组织块脱钙时间一般脱钙24～36h 即可。
2、 适当加温能加快脱钙的速度，一般不应超过37～40℃，温度过高容易使骨组织造成松散解体，尤其不可大于60℃。
3、 脱钙应彻底，防止脱钙不足或过度。
脱钙程度应控制在不影响组织切片的同时尽量缩短脱钙时间，以免脱钙过长引起组织损害。
4、 每隔一段时间检测一次脱钙程度，脱钙过度会增加组织的损伤程度，影响染色结果。
5、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
附录：脱钙终点的测定(物理法)：采用针刺、手掐、钳夹等方法，当骨组织变软或针刺时没有阻力感即可终止脱钙。
物理检测法会对组织结构有一定的损害， 尽量避免用力过大或反复检测。
编号 名称 DD0016 DD0016 Storage JYBL-Ⅰ脱钙液 500ml 5L RT 避光 使用说明书 1份。
脱钙液
脱钙液（一）酸性溶液脱钙法1．硝酸-间苯三酚液：浓硝酸10ml，间苯三酚1g，通风橱内混合。
混合时会产生浓的棕黄色双硫磷烟雾。
然后加10%硝酸100ml。
骨组织块5mm 厚脱钙时间12-24 小时。
优点：该液脱钙速度非常快，大概是所有脱钙液中速度最快的一种脱钙液。
缺点：（1）细胞核染色很差。
（2）如果脱钙时间太长对组织有较大的损害。
（3）用5%硫酸钠液中和，然后充分流水冲洗至少24小时。
（4）用化学方法测试不能确定脱钙的终点。
2．硝酸水溶液：浓硝酸5-10ml，蒸馏水加至100ml。
厚度5mm 骨组织块脱钙12-24 小时。
优点：（1）硝酸水溶液是一种迅速的脱钙液。
（2）对组织损害较少，细胞核着色比福尔马林-硝酸液要好。
（3）组织可直接通过70%乙醇去除酸。
缺点：脱钙时间必需仔细控制防止过度脱钙损害组织。
3．福尔马林-硝酸液：40%甲醛5ml，浓硝酸10ml，蒸馏水85ml。
5mm 厚的骨组织块脱钙时间需要1-3 天。
优点（1）福尔马林-硝酸液是一种迅速的脱钙液。
（2）该液脱钙的组织比间苯三酚-硝酸液细胞核染色好。
（3）可作为紧急活检脱钙用。
（4）该液和5-10%硝酸水溶液一样对组织几乎没有损害。
缺点：（1）该液对细胞核作用较慢，使细胞核着色较差。
（2）用5%硫酸钠液中和，然后充分流水冲洗至少12小时。
4．Perenyi’s 液：10%硝酸4 份，0.5%铬酸3 份，无水乙醇3 份。
5mm 厚的骨组织块脱钙时间需要2-7 天。
优点：（1）该液是一种温和的脱钙液，可能由于铬酸和乙醇的存在可以抑制组织泡软。
（2）细胞核和细胞浆细微结构着色均好。
（3）推荐该液作为常规脱钙使用。
（4）组织脱钙后不需要碱性液中和和流水冲洗。
脱钙组织直接移到90% 乙醇中。
缺点：（1）脱钙较慢，因此，紧急情况下不能使用。
（2）用化学方法测试不能确定脱钙的终点。
5．Von Ebener’s 液：饱和水溶液氯化钠50ml，蒸馏水50 ml，浓盐酸8 ml。
缓冲液及组织固定液的配制
缓冲液及组织固定液的配制1、磷酸盐缓冲液的配制关于缓冲溶液PB的配制，好多参考书如生物技术实验的后面均附有缓冲溶液的配制配方，可以根据需要配制pH5.7～8.0的磷酸盐缓冲。
磷酸盐缓冲液称简PB，加NaCl（氯化钠）的称PBS，加KCl（氯化钾）、NaCl（氯化钠）的称KPBS。
S就是指氯化钠的含量，一般为0.85％，即是100ml里面加0.85克，这个时候的PBS的浓度是0.1M的。
一般在免疫组化洗涤中采用0.01M的PBS，pH7.0～7.4。
我们在实验中直接将0.1M的稀释十倍，即可。
最好能现配现用。
母液4℃可以保持1～2周，影响不大。
成份分子量（MW）浓度（g/1000mL）0.01M PBS①0.1M PBS0.1M PBNa2HPO4·12H2O 358.14 2.684 29.009 29.009NaH2PO4·2H2O 156.01 0.39 2.964 2.964NaCl 58.44 8.5 8.5~9 /pH值/ 7.4 7.4 7.4注：①配方来自网上。
2、组织固定液的配制2.1、4%多聚甲醛-0.1M磷酸缓冲液[1]（pH=7.3）：多聚甲醛40g，置于三角烧瓶中，加入500~800mL 0.1M的磷酸缓冲液（PB），加热至60℃左右，持续搅拌（或磁力搅拌）至粉末完全溶解，通常需要滴加少许1N NaOH才能使溶液澄清，最后补足0.1M PB至1000mL，充分混匀。
该固定试剂适用于光镜免疫细胞化学研究，因较温和，适用于组织标本的较长期保存。
2.2、10%中性缓冲福尔马林固定液[2]：甲醛溶液（37~40%）100mL，蒸馏水900mL，NaH2PO4（磷酸二氢钠）4g，Na2HPO4（磷酸氢二钠）6.5g，混合摇匀后调pH至7.2~7.4。
2.3、10%福尔马林固定液配制[2]：甲醛溶液（37~40%）100mL，自来水900mL，混合后在溶液中加入碳酸钙使溶液呈中性或偏碱性。
一些固定剂的配方及性能介绍
一些固定剂的配方及性能介绍固定，就是用某种方法以最快的速度将细胞杀死并保持组织及细胞原有的形态结构及其组成。
固定在组织制片中极为重要，因为机体死后血液循环停止，细胞逐渐死亡，如不立即处理，则细胞内的酶（水解酶）会使蛋白质分解为氨基酸渗出细胞，使细胞溶解破坏，组织变形，在无冰藏的条件下，更可因其病原微生物的迅速繁殖而腐败，组织结构破坏，不利于形态学的诊断。
组织固定的目的为1、迅速防止组织、细胞死后变化，防止自溶与腐败，以保持和细胞与正常生活时的形态相似；2、使细胞内的蛋白质、脂肪、糖、酶等各种成分转变成不溶解物质，以保持它原有的结构与生活时相仿；3、使组织中的各种物质沉淀和凝固起来而产生不同的折光率，造成光学上的差异，以便染色后易于鉴别和观察；4、固定剂兼有硬化作用，使组织硬化，增加组织硬度，便于制片；5、防止细胞过度收缩或膨胀而失去其原有的形态结构；经过固定的组织，能对染料产生不同的亲和力而着色清晰，便于辨认。
为了能够达到固定的目的，固定剂必须具备以下的性质和条件：1、迅速渗入组织而固定原生质，使短期解剖的组织细胞形态不至于有较大变化；2、固定液有相当的渗透力，对组织各部分的渗透力相等，可使组织内外完全固定；3、使组织细胞中不至于因固定引起人为的改变；4、在凝固原生质以后，增加细胞对于各种穿透的抵抗力，不至于因以后的处理，而使固定后的原生质变形；5、尽可能避免使组织膨胀或收缩（不致改变原生质原来的体积）；6、能使细胞内的成分（蛋白质）凝固或沉淀下来；7、增加细胞内含物的折光度，易于鉴别，增加媒染作用和染色作用；8、使细胞变硬，适于切片，但又不使材料太坚硬或松脆；9、使组织充分固定，便于保存。
[1][2]下面我们介绍中华医学会病理分会推荐的几种常用固定剂的性能[3]：1、4%中性甲醛（10%中性福尔马林）固定液配方：甲醛（40%）100ml，无水磷酸氢二钠6.5g，磷酸二氢钠4.0g，蒸馏水900ml。
edta脱钙液配制方法
edta脱钙液配制方法EDTA脱钙液是一种常用的化学试剂，适用于在生化、分子生物学以及细胞生物学实验中，去除镁和钙离子的干扰。
本文将介绍一种EDTA脱钙液配制方法。
1.原料准备：1) 乙二胺四乙酸(EDTA)：分子式为C10H16N2O8，化学纯，实验室常备品，一定要质量优良。
2) 纯水：经过蒸馏或离子交换处理的自来水。
3) 氢氧化钠(NaOH)：实验室常备品，化学纯。
4) 氯化钙(CaCl2)：实验室常备品，纯度要求95%以上。
2. 配制方法：1) 取EDTA 10克，加入100毫升蒸馏水中，并充分搅拌至完全溶解。
2) 用氢氧化钠溶液调节pH值至8.0，溶液会变成无色透明。
3) 用蒸馏水将溶液加至总体积200毫升，均匀混合。
4) 氯化钙和氯化镁分别加入到50毫升蒸馏水中，若有残留颗粒，则需过滤至溶液无颗粒为止。
5) 将氯化钙和氯化镁溶液缓慢滴加到EDTA水溶液中，同时用磁力搅拌器搅拌，注意滴加时不要加的过快，需滴加至完全反应。
6) 倒入500毫升容量瓶中，并用蒸馏水加至刻度处，摇匀。
3. 注意事项：1) 在配制EDTA脱钙液时，应严谨操作，确保实验的准确性。
2) 水溶液的pH值应被精确地测量，并调节至8.0，以确保溶液的准确性与稳定性。
3) 在溶液调节和滴加氯化钙和氯化镁的过程中，应缓慢平稳，反应完全，避免产生沉淀和反应失误。
4) 为了得到稳定的EDTA脱钙液，应将其保存在阴凉、避光的环境中，并尽量降低其与大气中的CO2接触的机会。
总结：以上就是制备EDTA脱钙液的方法，这是适用于实验室的一种方法。
在添加脱钙剂到实验中时，确保您了解反应的机理和适用于您实验的最佳体系。
脱钙液的配制
脱钙液配制30%盐酸溶液1000 ml(10%中性福尔马林液700 ml+浓盐酸300 ml)加入140 g 氯化钠,待其完全溶解后再加入20 ml冰醋酸。
在日常病理技术工作中,有多种对骨骼的脱钙方法和脱钙组织切片的制作方法,本文所述脱钙方法和脱钙液从脱钙速度,对组织的损伤程度以及切片染色等方面效果都比较理想,这种脱钙液与其他酸类脱钙液相比较,对组织损伤小,脱钙时间短,并作用温和,其中30%的盐酸溶液对脱钙组织造成的损害较小,对组织不膨胀,不至于导致脱钙过程缓慢,但核染色不佳。
加入氯化钠可以防止脱钙组织因经过盐酸脱钙后导致的切片染色偏红,加入冰醋酸可使脱钙组织软化,有利于切片,从而使制片效果更加理想。
对照组以单纯30%盐酸为主的脱钙液与新方法脱钙液对同等体积、大小、部位相同的骨组织同时进行脱钙,前者制作的骨骼切片不平整,染色偏红,胞核红染,核质不清晰,切片整体组织结构显示不清。
经新方法脱钙后所制作的切片组织结构显示清晰,切片中的软组织和骨组织结构均可完整显示,细胞染色清晰,核质对比鲜明,制片中所用的固定剂、脱水剂、透明剂等都为日常技术工作必备试剂,而且制作出的切片效果很好,在本方法中所用的固定、脱水、透明、浸蜡、染色试剂都可以数次重复使用,试剂配制和操作方法简单,值得临床推广应用。
王淑兰，制作骨骼组织切片的新脱钙液改良的Plank·Rycho脱钙液的配制:氯化铝7g ,盐酸815ml ,甲酸5ml ,甲醛15ml ,TritonX-1000.5ml ,蒸馏水100ml。
为了保持良好的骨组织形态结构,达到脱钙目的,我们在Plank·Rycho脱钙液中加入甲醛和TritonX-100 ,更加充分发挥各自的作用,使固定、脱脂、脱钙同时进行。
甲醛不仅是优良的固定剂,还可适度保护组织免受酸的侵蚀。
TritonX-100 (聚乙醇辛基苯基醚)是一种表面活性剂,虽不具备脱钙作用,但能溶解脂质,改善细胞膜的通透性〔1 ,2〕,使骨组织中的脂质在短时间内脱去,加快了脱钙速度。
骨组织脱钙液介绍
骨组织脱钙液概述在病理实验制作切片时，我们会经常碰到一些含钙组织，而且钙十分坚硬。
由于组织中的钙和石蜡之间的密度不同，含钙的组织一般不能直接制作切片。
骨组织含钙量最多。
除了骨组织之外其它组织也可发生钙化，在组织中形成钙化区，所以需要经过脱钙过程。
脱钙是制作骨组织切片的重要环节，尤其是要进行免疫组织化学染色的骨组织。
为达到骨组织既充分脱钙，又保护骨组织的抗原不受破坏，需要对含钙的织固定之后再进行脱钙或采用固定兼有脱钙的液体处理，固定并脱钙。
然后再行常规制片。
用于脱钙的试剂很多，脱钙剂包括有机酸、无机酸、乙二胺四乙酸（ethylenediamine tetraacetic acid EDTA）除此之外还有电解脱钙法。
强有机酸，如硝酸和盐酸可用于密皮质骨的脱钙，在短时间内可除去大量的钙。
令人遗憾的是这些强酸对组织形态会产生不良影响，脱钙作用强对组织破坏性大。
细小的组织，例如，骨髓组织不推荐用强酸脱钙。
虽然可以使用各种附加剂，如缓冲液具有保护组织的作用，但也降低了脱钙速度。
因此，各种脱钙液的配方都围绕着脱钙速度和消除对组织的不良影响而设计。
在酸类脱钙液中醋酸和甲酸比较适合于骨髓组织脱钙。
甲酸是一种使用范围较广的脱钙剂。
甲酸脱钙 10% 浓度比较合适。
醋酸和甲酸的作用比较弱，脱钙速度比较慢，它们不适合密皮质骨的脱钙。
EDTA 是一种比较温和的脱钙剂（EDTA 不是酸）。
对组织的渗透性差，作用慢。
大剂量使用价格较贵。
电解脱钙对组织损害最小，因为它的脱钙速度太慢，所以，不适合常规使用。
不同的脱钙液对骨组织的脱钙作用不同，脱钙效果也不完全相同。
为了达到良好的脱钙效果，建议使用EDTA脱钙液，该脱钙液对组织损伤较小，缺点就是脱钙时间会比较长些，但脱钙时间也要根据组织块大小而定。
目前国内生产EDTA脱钙液的公司也很少，个人感觉上海舜百生物的EDTA脱钙液使用效果还不错，脱钙脱的比较彻底，而且对组织损伤很小，就是周期长了些。
组织学技术脱钙切片标本制作
组织学技术脱钙切片标本制作含钙的组织，骨、牙1 脱钙剂常用：硝酸、盐酸、硫酸、甲酸（蚁酸）、枸橼酸（柠檬酸）、三氯醋酸（三氯乙酸）、乙二胺四乙酸（EDTA）最常用的无机酸为硝酸，最常用的有机酸为EDTA。
（1）硝酸脱钙快，效果好一般用5%硝酸水溶液，不超过10%2毫米厚的骨片脱钙2~3天（2）甲酸良好的脱钙剂。
脱钙较慢，对骨组织结构破坏较轻2~3毫米厚骨片，松质骨约48小时，密质骨7~10天，经常换液染色效果比硝酸好脱钙时加入尿素等试剂，防止纤维性组织过度肿胀而使组织受破坏（3）乙二胺四乙酸（EDTA）很好的脱钙剂，对组织破坏极小，长期脱钙也无明显破坏脱钙后的染色效果好脱钙时间长。
2周以上甚至3个月。
加温至37℃可加快脱钙常用15%水溶液。
2 脱钙液（1）单纯脱钙液：一种脱钙剂浓硝酸5毫升，尿素3~5克，蒸馏水100毫升浓硝酸5毫升，甲醛5毫升，甘油5毫升，蒸馏水100毫升浓甲酸50毫升，70%酒精 50毫升5%甲酸水溶液5毫升，蒸馏水95毫升三氯醋酸5克，10%甲醛100毫升浓盐酸15毫升，氯化钠175克，蒸馏水1000毫升。
用时每200毫升每天加浓盐酸1亳（von Ebner）EDTA15克，蒸馏水100毫升（2）混合脱钙液枸橼酸甲酸液：枸橼酸钠结晶10克，90%甲酸25毫升，蒸馏水75毫升甲酸三氯醋酸液：85%甲酸50毫升，95%酒精50毫升，枸橼酸钠结晶10克，三氯醋酸0.5克，蒸馏水50毫升3 脱钙基本方法⑴取新鲜骨固定于10%甲醛水溶液或稍久。
⑵脱钙（针刺能顺利进入组织），充分水洗（中止脱钙）。
⑶入5%硫酸钠水溶液12~24小时（中和），流水冲洗过夜。
⑷脱水、透明、浸蜡、包埋、切片50%、70%、80%、90%、95%酒精、冬青油透明1、冬青油透明2、二甲苯洗去冬青油（70%酒精、80%酒精、90%酒精、95%酒精、正丁醇1、正丁醇2、软蜡、硬蜡、包埋、切片）切片10微米左右。
⑸苏木精伊红染色。
固定床干法脱硫剂成分
固定床干法脱硫剂成分固定床干法脱硫是一种常用的烟气脱硫技术，主要通过在固定床中引入脱硫剂，将烟气中的二氧化硫（SO2）转化为硫酸盐，从而实现脱硫效果。
固定床干法脱硫剂的成分对脱硫效率和脱硫产物的质量具有重要影响。
下面将介绍几种常用的固定床干法脱硫剂成分。
1. 石灰石：石灰石是一种常用的固定床干法脱硫剂成分。
石灰石主要成分为碳酸钙（CaCO3），其与烟气中的SO2反应生成硫酸钙（CaSO4）。
石灰石具有成本低、脱硫效率高的优点，但在高温下容易生成粉尘，需加入粘结剂来增加颗粒的强度。
2. 石膏：石膏是另一种常用的固定床干法脱硫剂成分。
石膏主要成分为硫酸钙（CaSO4·2H2O），其可以与烟气中的SO2反应生成更稳定的硫酸钙。
石膏具有较好的脱硫效果和脱硫产物的可利用性，然而其脱硫效率较石灰石低，需要较高温度下进行反应。
3. 活性炭：活性炭是一种常用的固定床干法脱硫剂成分，主要用于对有机硫化物（如硫化氢）的脱除。
活性炭具有较大的比表面积和吸附能力，可以吸附烟气中的有机硫化物，从而实现脱硫效果。
然而，活性炭的脱硫效率较低，且需要定期更换。
4. 硫化铁：硫化铁是一种用于高温烟气脱硫的固定床干法脱硫剂成分。
硫化铁主要成分为二硫化铁（FeS2），其可以与烟气中的SO2反应生成硫化亚铁（FeS）。
硫化铁具有较高的脱硫效率和脱硫产物的可利用性，但其耐磨性较差，需要定期更换。
5. 活性氧化铝：活性氧化铝是一种用于高温烟气脱硫的固定床干法脱硫剂成分。
活性氧化铝主要成分为氧化铝（Al2O3），其可以与烟气中的SO2反应生成硫酸铝（Al2(SO4)3）。
活性氧化铝具有较高的脱硫效率和耐高温性能，但成本较高。
总结：固定床干法脱硫剂的成分对脱硫效率和脱硫产物的质量具有重要影响。
常用的固定床干法脱硫剂成分包括石灰石、石膏、活性炭、硫化铁和活性氧化铝等。
不同的成分具有不同的脱硫效果、成本和耐久性。
在实际应用中，需要根据烟气特性和脱硫要求选择合适的脱硫剂成分，以提高脱硫效率和降低脱硫成本。
脱钙剂成分
脱钙剂成分
脱钙剂的成分通常包括以下几种：
1. 螯合剂（例如EDTA、亚麻酸）：与钙离子结合形成稳定的络合物，使钙离子溶解于水中，从而实现脱钙的效果。
2. 渗透剂（例如甘醇）：可通过增加细胞外溶液的浓度，使得细胞内外的渗透压失衡，导致细胞内的钙离子透出。
3. 剥脱剂（例如盐酸、氯化铵）：通过改变细胞的pH值，使细胞内部的蛋白质发生变性和凝固，从而使细胞的钙离子释放出来。
4. 离子交换剂（例如钠聚焦磷酸盐）：通过与钙离子发生离子交换反应，使钙离子从固体骨骼或牙齿中释放出来。
需要注意的是，不同的脱钙剂可能含有不同的成分，具体成分取决于产品的制造工艺和用途。
在使用脱钙剂时，应严格按照产品说明进行使用，以避免不必要的伤害和副作用。
微波快速脱钙及其脱钙液的选择.
作者单 位 ： 广 州 军 区 广 州 总 医 院 医学 宴 验 科 ５ １ Ｏ Ｏ ｉ Ｏ
结构保存 良好 ： 骨细胞位于骨 陷窝 内， 胞体呈 棱形（ 由于 切 面 位 置 不 同 也 可 呈 圆 形 ） ， 并 向 周 围伸 出许 多 突 起 。胞 核 大 ， 异染色质凝集 ， 核 膜清晰 ， 胞质较 少 ， 电子 密 度较 大 ， 细 胞 器 少。 陷 窝鞘 内为 电子 密度 较 低 的 无 定 形 物 质 ， 陷窝边 缘 由着色极深的 嗜锇板层 勾蜘 出来 ， 非常清晰 。 陷窝 边 缘 周 髓 有 许 多胶 原 纤维 ． 可 见 胶 原 纤 维 的 周 期性 横 纹 （ 图 １ ， ２ ） Ｂ液 组 的 超 微 结 构 保 存 较 差 ， 只 能 看 见
第六图书馆
临床 与实验 病理 学杂 志
Ｊ ａ Ｅ印 Ｐ ａ ｔ ｈ ｏ ｌ １ ９ ９ ６ ；Ｎ ｏ ｖ １ ２ （ ４ ）
骨 陷窝 、 细 胞膜 、 细胞 核的轮廓 ， 其 超 微 结 构 已模 糊 不 清 。 ３ 讨 论 微设 脱钙过 程要 不断更换脱 钙渡 ， 一 方
的 目的 。
每 ５ ａｉ ｒ ｎ更 换 一 次 脱 钙 液 ， 脱 钙 液 瓶 置 于 内
装 ２ ０ ０ ｍｌ 水 的大 培 养 皿 内 ， 以 吸收 炉 内 热
量， 使 脱钙 液 的 的温度 保持 在 ２ ０ Ｕ～４ Ｏ ℃； 室温脱钙组 ： 每 ２ ４ ｈ更 换 一 次 脱钙 液 。 ｌ ＿ ６ 脱 钙 终 点 的测 量 方 法。 将 ４ｍ１ 脱 钙 液置 入带有 标本块 的小瓶 内， 每 更 换 一 次 脱 钙 液 时， 用吸量 管从 瓶 内取脱 钙 液 ２ ｍ１ ， 然 后 加沉淀剂 （ １ ０ 草酸钾 ） ２ ｍ１ 摇匀 ， 用 分 光 光 度计确 定波长光下透 射光 密度 ， 以 光 密 度 值为纵轴 。 时 间 为横 轴 ， 画 光 密 度 随 时 间 变 化 的关 系 曲线 图 。 当曲 线 坡 度 变 小 时 可 预 知 脱 钙 终点 即将到来 ， 当光密 度值趋 于恒定Ｈ ￣ ０ １ ￣ 为脱 钙 终 点 在 实际 工 作 中 ， 只 要 取几 次 脱 钙 液 沉 淀 后 测 光 密度 值 ， 最 后 两 次 相 差 为 零 时 即 为脱 钙 终 点 。
14%硝酸脱钙液成分
14%硝酸脱钙液成分
14%硝酸脱钙液通常是指含有14%硝酸（HNO3）的水溶液，这种溶液用于脱除组织中的钙离子，以便于后续的固定、切片和显微镜观察。
硝酸脱钙液的主要成分是硝酸，但为了防止组织中的蛋白质和其他有机物质与硝酸反应，通常还会加入一些辅助成分，如：
1.乙二胺四乙酸（EDTA）：一种常用的螯合剂，能够与钙离子形成稳定的螯合物，从而帮助去除钙离子。
2.蔗糖：作为渗透压调节剂，有助于维持组织细胞的稳定。
3.柠檬酸：有时用于调节溶液的pH值，使其更适合脱钙过程。
4.PBS（磷酸盐缓冲液）：用于维持溶液的pH值稳定，防止过酸或过碱对组织造成损伤。
5.其他添加剂：根据不同的应用和制造商的配方，可能还会添加其他成分，如稳定剂、防腐剂等。
在使用14%硝酸脱钙液时，应严格按照说明书或实验室的标准操作流程进行，以确保脱钙效果和组织的完整性。
此外，由于硝酸具有腐蚀性，使用时应在通风良好的环境中进行，并采取适当的安全措施。
冰醋酸脱钙液配制方法
冰醋酸脱钙液配制方法
冰醋酸脱钙液的配制方法如下：
1. 根据实际需要，如果要求不高，可以用量杯或量筒来量取冰醋酸。
如果要求有更高的精度，建议使用天平来量取冰醋酸。
2. 冰醋酸是弱酸，有腐蚀性，有刺激性，配制时需戴好口罩、眼镜和手套。
3. 取一定量的冰醋酸（例如20毫升），再量取适量的水（例如80毫升），将冰醋酸倒入水中。
4. 使用搅拌棒轻轻搅拌，确保冰醋酸和水混合均匀。
5. 静置一段时间后，将溶液装瓶。
请注意，冰醋酸脱钙液是一种强酸性的溶液，具有腐蚀性，因此应小心操作，避免直接接触皮肤和眼睛。
同时，配制时应遵循相关安全规定和指导，确保操作安全。
钙标准溶液的配制
钙标准溶液的配制钙标准溶液是实验室常用的一种溶液，用于校准和检验分析仪器的准确性和灵敏度。
正确配制钙标准溶液对实验结果的准确性至关重要。
下面将介绍如何正确配制钙标准溶液。
首先，准备所需的材料和试剂。
配制钙标准溶液所需的材料包括，高纯度的钙标准品、蒸馏水、烧杯、移液管、磁力搅拌器、PH 计等实验仪器和耗材。
其次，按照配制溶液的需要，选择合适的浓度的钙标准品。
一般来说，可以选择1000ppm的钙标准品，根据实际需要进行稀释。
接下来，准备好所需的容器和实验仪器。
首先，用蒸馏水清洗烧杯和移液管，确保无杂质残留。
然后，将清洁干净的烧杯放在磁力搅拌器上，准备进行溶液的配制。
然后，使用移液管将一定体积的钙标准品加入到烧杯中。
根据需要的浓度，可以加入适量的钙标准品，通常情况下，需要稀释的浓度为1000ppm。
接着，加入适量的蒸馏水进行稀释。
在加入蒸馏水的过程中，需要使用磁力搅拌器进行搅拌，以确保溶液充分混合均匀。
然后，使用PH计检测溶液的PH值。
根据实验需要，调节溶液的PH值，确保溶液的酸碱度符合实验要求。
最后，将配制好的钙标准溶液转移到干净的密封瓶中保存。
在保存过程中，需要避光和防潮，确保溶液的稳定性和准确性。
在实验室中使用钙标准溶液时，需要注意以下几点，首先，使用前需要摇匀溶液，确保溶液的均匀性；其次，在使用过程中需要注意溶液的保存条件，避免溶液受到污染或变质；最后，在使用过程中需要按照实验要求，正确稀释和使用钙标准溶液。
总之，正确配制钙标准溶液对实验结果的准确性至关重要。
通过以上步骤，可以准确、稳定地配制出所需浓度的钙标准溶液，保证实验结果的准确性和可靠性。
骨组织脱钙的方法和步骤
脱钙方法和步骤固定：10%缓冲中性福尔马林固定5天。
所有固定的标本用流水缓慢冲洗30分钟，较大的标本冲洗大约1小时。
避免用水快速冲洗。
液体和试剂A．8%盐酸储存液盐酸，浓40ml蒸馏水460mlB．8%甲酸储存液甲酸40ml蒸馏水460mlC．盐酸/甲酸工作液8%盐酸液和8%甲酸液等量混合。
*替换液：D．5%硝酸硝酸5ml蒸馏水95mlE．氨水：氨水，浓5滴蒸馏水100ml脱钙步骤1．标本放入盐酸/甲酸工作液（或5%硝酸液）20倍与它们容积。
2．每天更换新脱钙液直到脱钙完成，根据标本大小脱钙时间可能需要24小时到几天或几个月。
见下面的实验步骤（钙步骤用兔的脊椎骨进行脱钙实验，大约20小时，脱钙效果很好）。
3．一旦脱钙完成，标本短时间用水冲洗并移到氨水中30分钟中和残留在标本中的剩余的酸。
4．标本用自来水彻底冲洗24小时。
5．常规石蜡包埋。
标本不要聚集在一起并不要紧贴瓶底以便于彻底脱钙。
标本脱钙过度对组织是一种永久性的损害，无法挽救。
下面步骤可以帮助正确判断脱钙终点。
脱钙终点：X-ray(最准确的方法)化学测试法（准确）物理测试（相对准确并标本会有潜在的损害）化学测试法下面是化学检测脱钙终点需要的液体F．5%氢氧化铵储存液氢氧化铵28% 5ml蒸馏水95mlG．5%草酸铵储存液草酸铵5ml蒸馏水95mlH．氢氧化铵/草酸铵工作液：5%氢氧化铵储存液和5%草酸铵储存液等份使用。
检测步骤1.吸管插入正在进行脱钙含有样品的脱钙液中。
2.从底部抽取5ml盐酸/甲酸脱钙工作液，装入一个试管中。
3.加入大约10ml氢氧化铵/草酸铵工作液，充分混合室温放置过夜。
4.每天测试一次，连续测试两个工作日，也以2天或3天重复测试一次，骨组织完全脱钙之后液体不出现沉淀。
物理测试：物理测试包括弯曲样品或用针插入样品中，用刀片切割脱钙的组织。
缺点是插入针或刀片切入点或留下人为针孔和裂开的刀痕。
稍微弯曲标本后组织会有较小破裂，但是，如果所有钙盐去除后不能确定损伤情况。