脱钙液

脱钙液
（一）酸性溶液脱钙法
1．硝酸-间苯三酚液：浓硝酸10ml，间苯三酚1g，通风橱内混合。

混合时会产生浓的棕黄色双硫磷烟雾。

然后加10%硝酸100ml。

骨组织块5mm 厚脱钙时间12-24 小时。

优点：该液脱钙速度非常快，大概是所有脱钙液中速度最快的一种脱钙液。

缺点：（1）细胞核染色很差。

（2）如果脱钙时间太长对组织有较大的损害。

（3）用5%硫酸钠液中和，然后充分流水冲洗至少24小时。

（4）用化学方法测试不能确定脱钙的终点。

2．硝酸水溶液：浓硝酸5-10ml，蒸馏水加至100ml。

厚度5mm 骨组织块脱钙12-24 小时。

优点：（1）硝酸水溶液是一种迅速的脱钙液。

（2）对组织损害较少，细胞核着色比福尔马林-硝酸液要好。

（3）组织可直接通过70%乙醇去除酸。

缺点：脱钙时间必需仔细控制防止过度脱钙损害组织。

3．福尔马林-硝酸液：40%甲醛5ml，浓硝酸10ml，蒸馏水85ml。

5mm 厚的骨组织块脱钙时间需要1-3 天。

优点（1）福尔马林-硝酸液是一种迅速的脱钙液。

（2）该液脱钙的组织比间苯三酚-硝酸液细胞核染色好。

（3）可作为紧急活检脱钙用。

（4）该液和5-10%硝酸水溶液一样对组织几乎没有损害。

缺点：（1）该液对细胞核作用较慢，使细胞核着色较差。

（2）用5%硫酸钠液中和，然后充分流水冲洗至少12小时。

4．Perenyi’s 液：10%硝酸4 份，0.5%铬酸3 份，无水乙醇3 份。

5mm 厚的骨组织块脱钙时间需要2-7 天。

优点：（1）该液是一种温和的脱钙液，可能由于铬酸和乙醇的存在可以抑制组织泡软。

（2）细胞核和细胞浆细微结构着色均好。

（3）推荐该液作为常规脱钙使用。

（4）组织脱钙后不需要碱性液中和和流水冲洗。

脱钙组织直接移到90% 乙醇中。

缺点：（1）脱钙较慢，因此，紧急情况下不能使用。

（2）用化学方法测试不能确定脱钙的终点。

5．Von Ebener’s 液：饱和水溶液氯化钠50ml，蒸馏水50 ml，浓盐酸8 ml。

厚度5mm 骨组织块脱钙3-7 天。

优点：（1）细胞核染色相当好。

（2）不需要水洗，脱水时酸就会首先被脱出来。

缺点：使用化学方法测试不能确定脱钙的终点。

6．甲酸液：甲酸10ml，10%福尔马林盐90ml。

厚度5mm 骨组织块脱钙时间需要3-7 天。

优点：（1）脱钙同时可以对组织固定。

（2）对细胞核染色比较好。

（3）推荐用于小块组织和牙齿脱钙。

缺点：（1）脱钙比较慢，不推荐作为常规标本脱钙使用。

（2）不推荐作为密皮质骨脱钙使用。

（3）要用5%硫酸钠液中和，然后充分流水冲洗至少18 小时。

7．三氯醋酸液：三氯醋酸5g，10%福尔马林盐95ml。

厚度5m 骨组织块脱钙时间需要5-8 天。

优点：（1）对细胞核染色好。

（2）脱钙之后不需要水洗，酸乙醇可以去除。

缺点：（1）脱钙作用慢，仅仅推荐用作骨的细针脱钙。

（2）不推荐作为密皮质骨脱钙使用。

8．Flemming’s 液：1%铬酸15ml，2%四氧化锇4ml，冰醋酸1ml。

Flemming’s 液虽然是一种固定液可作为微细骨针脱钙用。

液体需要新鲜配制，并在容器底部会形成沉淀。

脱钙后如果直接通过乙醇可以形成不能溶解的色素。

脱钙之后标本必需充分流水冲洗去除过多的铬盐。

使用化学方法测试不能确定脱钙的终点。

用苏木精染色时细胞核受抑制。

9．AFIP 甲酸-柠檬酸钠液：A 液：甲酸25ml，蒸馏水25ml。

B 液：枸橼酸钠（结晶）10g，蒸馏水50ml。

临用时A 液和B 液等量混合，每日换 1 次，因为柠檬酸钠可以和钙离子螯合，具有促进脱钙的作用。

10．蒋维中（Jangweizhong’s）液：盐酸80ml。

甲酸70ml，三氯化钙50g，冰醋酸25ml 甲醛100ml，生理盐水900ml。

此液脱
钙迅速，0.5cm 厚的松质骨6-20 小时就可以完成脱钙。

对组织影响极小，染色效果好。

配制简便，脱钙后不需要用碱性液中和。

11、10%盐酸福尔马林液：40%甲醛5ml，浓盐酸10ml，蒸馏水85ml。

此液脱钙比较迅速，对组织影响极小，染色效果好。

配制简便，脱钙后流水冲洗。

一般用于骨髓或含钙成分较少的组织脱钙。

12、30%盐酸福尔马林液：40%甲醛5ml，浓盐酸30ml，蒸馏水65ml。

此液脱钙迅速，对组织影响极小，染色效果好。

配制简便，脱钙后流水冲洗。

（二）螯合脱钙剂脱钙法
EDTA 是一种良好的脱钙液螯合剂，它对组织破坏极小，不产生气泡，不影响染色，如果加温至37℃，可以加快脱钙速度。

EDTA 脱钙液：乙二胺四乙酸（EDTA）5.5g，10%中性福尔马林100ml。

厚度5mm 骨组织块脱钙时间需要7-21 天。

优点：（1）经EDTA 脱钙的组织染色结果好。

（2）对组织的结构损害小。

（3）用化学方法测试可以确定脱钙的终点。

缺点：（1）脱钙速度相当慢，不适合常规标本脱钙使用。

（2）脱钙后组织会稍微变硬。