3种脱钙液对牙体牙周联合切片H-E染色效果的对比

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三种关节组织脱钙液的应用比较

关键词：关节组织；硝酸脱钙；ＥＤＴＡ脱钙；甲酸脱钙
骨组织脱钙技术是病理实验室常用技术之一，直接关系到骨组织切片的制备和观察。大鼠关节组织制片的关键步骤即是脱钙，其直接影响到制片的成败。选用合适的脱钙液进行脱钙，既能较快达到脱钙目的便于切片，又不破坏组织结构完整性影响后期染色。因此制备病理诊断所需要的理想标本，显得十分必要。本研究在大鼠关节组织石蜡制片实验中，分别用Ｓｃｈｒｉｄｄｅ液、５％甲盐酸和１５％ＥＤＴＡ对关节组织进行脱钙处理后制片染色，镜下观察脱钙效果及着色效果，从中选择一种较为适宜的关节组织脱钙方法。ｌ材料与方法１．１标本制备选取大鼠踝关节组织标本，共计３Ｏ个，经１２％中性甲醛液固定４８ｈ后备用。１．２试剂及仪器所有试剂均为国产分析纯。ＣＨ３０光学显微镜，奥林巴斯株式会社；ＬＥＩＣＡＴＰ１０２０组织自动脱水机，德国球卡仪器有限公司；ＴＢ一７１８Ｅ生物组织自动包埋机，湖北泰维医疗科技有限责任公司；ＬＥＩＣＡＲＭ２３５轮转切片机，德国球卡仪器有限公司；ＴＲ一１８０生物组织自动染色机，湖北泰维医疗科技有限责任公司。１．３脱钙液的配制Ｓｃｈｒｉｄｄｅ液：２０ｍ１浓硝酸加１００ｍｌ１２％中性甲醛溶液配制而成。５％

不同脱钙方式观察牙髓组织切片的效果比较

齿。将新鲜拔除的１４颗牙齿分为两组，８各组数目见
表１
表１两组牙齿依据牙位分类的数目颗
全随机设计资料的方差分析。
２结果
２１２种脱钙法完成脱钙所需时间在操作时间上．
ＥＴＤＡ组完成脱钙过程要长于复合酸组，差异有统计
片观察牙髓组织学形态时，ＤＡ脱钙液和Ｐａｋ—Ｒｃｌ脱钙液所制切片均能取得良好的染色效果。ＥＴｌｎｙｈｏ
【关键词】脱钙技术；石蜡切片；ＨＥ染色
在牙体牙髓研究领域，采用显微镜观察牙髓组织特定染色切片为最常见的研究手段之一。由于牙体硬组织内含有大量的无机盐成分，硬致密，碎难切，坚易而位于牙体中央的牙髓则为柔软的结缔组织，制ｊ在片过程中易受挤压、牵拉而变形、离甚至脱落流失，分所以牙体组织需经脱钙处理才能制成较薄的石蜡切片并获得满意的染色效果。传统研究主要通过劈牙获取牙髓，即所谓的劈牙取髓法，关为群等报道劈牙取髓虽然简便快速，不适用于需要对牙髓不同部位进行但
１１材料来源和实验分组．３
牙齿标本取自２１０１年
月广东省口腔医院因治疗需要而拔除，齿发育牙
完全、冠完整、见充填物及明显龋坏或微裂的牙牙未
１５统计学方法．
采用ＳＳ３０统计软件进行完ＰＳ１．
比较的研究实验。现在，着脱钙技术的成熟，过脱随通

三种染色方法在小鼠下颌第一磨牙牙根不同发育时期的染色效果比较

三种染色方法在小鼠下颌第一磨牙牙根不同发育时期的染色效果比较蒋伟东;朱佩琪;周诺【摘要】目的比较3种染色方法在小鼠下颌第一磨牙牙根不同发育时期的染色效果,为选择合适的染色方法提供参考.方法选取出生后第5、7、14、21天的ICR 小鼠,制备小鼠下颌第一磨牙冠状切片,采用H-E染色、Masson染色法和Gomori 染色法进行组织形态学研究,比较染色结果 .结果在小鼠出生后第5天(PN5)至PN7为牙根发育起始阶段,H-E染色显示:成牙本质细胞、成釉细胞及上皮根鞘细胞形态最为清晰;Masson染色法显示:图片色彩鲜艳,牙釉质、牙本质及前期牙本质间层次分明;Gomori染色方法显示:细胞核呈单一的蓝黑色,但软、硬组织对比度不佳.从PN14小鼠牙齿开始萌出到PN21牙根发育基本完成阶段,H-E染色显示:成釉细胞、成牙本质细胞及牙周膜成纤维细胞形态最为清晰;Masson染色法显示:牙骨质与牙槽骨间的胶原纤维排列规则,牙槽骨形态清晰;而Gomori染色效果总体不佳.结论在小鼠下颌第一磨牙牙根不同发育时期,3种染色方法各有优势.H-E染色适用于各类细胞形态的观察,Masson染色适用于牙体硬组织及骨组织的观察,Gomori染色法总体效果不佳.【期刊名称】《同济大学学报（医学版）》【年(卷),期】2018(039)006【总页数】5页(P66-70)【关键词】牙根发育;上皮根鞘;H-E染色;Masson染色法;Gomori染色法【作者】蒋伟东;朱佩琪;周诺【作者单位】广西口腔颌面修复与重建研究自治区级重点实验室,广西南宁530021;广西颅颌面畸形临床医学研究中心,广西南宁530021;颌面外科疾病诊治研究重点实验室(广西高校重点实验室),广西南宁530021;广西口腔颌面修复与重建研究自治区级重点实验室,广西南宁530021;广西颅颌面畸形临床医学研究中心,广西南宁530021;颌面外科疾病诊治研究重点实验室(广西高校重点实验室),广西南宁530021;广西口腔颌面修复与重建研究自治区级重点实验室,广西南宁530021;广西颅颌面畸形临床医学研究中心,广西南宁530021;颌面外科疾病诊治研究重点实验室(广西高校重点实验室),广西南宁530021【正文语种】中文【中图分类】R781组织形态学染色方法有助于在微观下研究组织形态[1]，对牙根生长发育阶段的研究十分重要。

混合脱钙液与EDTA脱钙液对骨组织切片HE染色影响的分析

混合脱钙液与EDTA脱钙液对骨组织切片HE染色影响的分析吴拮;孙立国;赵成相;李静;郭国峰;吕荣【摘要】目的比较不同脱钙液对骨组织的脱钙能力的差异,探讨其对HE染色的影响.方法选取16例大鼠胫骨标本,运用两种常用的脱钙液(混合脱钙液和EDTA脱钙液)进行脱钙,比较其脱钙效果和对HE染色的影响.结果两种脱钙液对骨组织的脱钙能力、HE染色效果影响有显著区别.结论混合脱钙液时间最短,但切片和染色效果最差;EDTA脱钙液对骨组织损伤小,HE染色效果最好,但用时较长.【期刊名称】《医学信息》【年(卷),期】2017(030)026【总页数】2页(P180-181)【关键词】混合脱钙液;EDTA脱钙液;HE染色【作者】吴拮;孙立国;赵成相;李静;郭国峰;吕荣【作者单位】第四军医大学西京医院骨科研究所,陕西西安 710032;中国人民解放军天津疗养院,天津 300381;第四军医大学西京医院骨科研究所,陕西西安 710032;第四军医大学西京医院骨科研究所,陕西西安 710032;第四军医大学西京医院骨科研究所,陕西西安 710032;第四军医大学西京医院骨科研究所,陕西西安 710032【正文语种】中文【中图分类】R361骨组织是一种坚硬的结缔组织，由骨细胞和骨基质组成。

骨基质内含大量无机盐，质地坚硬，不能直接进行石蜡或冷冻切片，因此在制作病理切片过程中，常常需要经过脱钙处理，才能进行切染色[1]。

试验中脱钙过度或不足会影响染色效果，严重影响结果的判读，因此，脱钙时间和脱钙液的选择十分重要。

为了更好地了解脱钙技术对骨组织切片HE染色结果的影响，本文重点对比SD大鼠胫骨上段骨组织通过两种不同脱钙液的脱钙以及HE染色效果进行对比，现报告如下。

标本为第四军医大学西京医院骨科动物实验中心提供的大鼠8只。

取双侧胫骨上端16例标本，长约0.8 cm，用纱布包好随机标记为A组和B组，在10%中性福尔马林固定3 d，投入脱钙液中，A组为EDTA脱钙液，B组为混合脱钙液。

10％ EDTA、5％硝酸用于大鼠颞骨脱钙处理的效果对比观察

10％ EDTA、5％硝酸用于大鼠颞骨脱钙处理的效果对比观察卓洋;王巧;杨聪颖;陈昊;李爱民【摘要】目的观察并比较10％乙二胺四乙酸二钠(EDTA)和5％硝酸脱钙处理大鼠颞骨的效果.方法 SD大鼠10只,随机分为EDTA组和硝酸组,取出大鼠颞骨后分别置于10％ EDTA、5％硝酸脱钙液中进行脱钙处理.观察两组脱钙效果,记录脱钙时间,采用甲苯胺蓝染色进行颞骨组织形态学观察,采用免疫荧光双标染色检测α-tubulin蛋白、水通道蛋白1(AQPl).结果两组取材过程中,颅骨硬度适当,颞骨可轻松切下,无砂砾感,切下的颞骨无松散及组织脱落.硝酸组脱钙所需时间分别为(11.20±0.83)d、(26.20 ±2.38) min,两组相比,P＜0.05.EDTA组颞骨整体形态保持完好,蜗管、镫骨肌、岩动脉、神经元、雪旺细胞、郎飞结、神经干可清晰辨识;硝酸组颞骨整体结构保存较理想,神经元形态保持尚可,但存在骨质染色不均、雪旺细胞崩解、轴突肿胀、郎飞结消失现象.EDTA组颞骨脱钙后AQP1、α-tubulin蛋白定位准确,组织区分度高;硝酸组由于细胞膜中AQP1遭受破坏、位于微管内的α-tubulin蛋白漏出细胞,荧光消减明显,组织形态保持较差.结论 10％ EDTA和5％硝酸用于大鼠颞骨脱钙处理效果均较好,两种脱钙液均适用于普通病理及结构观察,若用于蛋白定量及定性方面研究,应首选10％ EDTA.【期刊名称】《山东医药》【年(卷),期】2016(056)031【总页数】3页(P43-45)【关键词】骨脱钙技术;乙二胺四乙酸二钠;硝酸;颞骨【作者】卓洋;王巧;杨聪颖;陈昊;李爱民【作者单位】徐州医学院附属连云港医院,江苏连云港222000;徐州医学院附属连云港医院,江苏连云港222000;徐州医学院附属连云港医院,江苏连云港222000;徐州医学院附属连云港医院,江苏连云港222000;徐州医学院附属连云港医院,江苏连云港222000【正文语种】中文【中图分类】R446.6颞骨参与构成头颅的侧部与颅底，其中穿行面神经、脑膜中动脉及分支，颞骨同时容纳听觉器官及其附属结构，颞骨骨折可造成上述结构损伤，引起相应并发症[1]。

临床病理检验中不同骨组织脱钙液效果的比较

临床病理检验中不同骨组织脱钙液效果的比较李玉莲;徐晓艳【摘要】目的对两种脱钙方法进行比较,获得简单、便捷、快速适用于临床病理制片的脱钙方法. 方法观察两种脱钙液:5％硝酸脱钙液(硝酸5ml加入95 ml蒸馏水)和快速脱钙液(含36％-38％盐酸8ml、冰醋酸5ml、水杨酸10 g、蒸馏水87ml),在常温及微波条件下对骨组织脱钙及HE切片染色效果的影响. 结果常温条件下,5％硝酸使组织结构有些破坏,染色效果不佳.微波条件下,使用快速脱钙液对骨组织结构损伤小,染色效果佳,适合于临床病理的骨组织制片. 结论标本经快速脱钙液处理后,其切片质量大大提高并远远优于普通脱钙液.【期刊名称】《山西医科大学学报》【年(卷),期】2014(045)010【总页数】3页(P996-997,1004)【关键词】骨组织;脱钙液;HE切片【作者】李玉莲;徐晓艳【作者单位】内蒙古医科大学病理学教研室,呼和浩特010059;内蒙古医科大学第一附属医院病理科;内蒙古医科大学病理学教研室,呼和浩特010059;内蒙古医科大学第一附属医院病理科【正文语种】中文【中图分类】R361.2含有骨质的肿瘤，钙化组织及骨髓穿刺组织都很坚硬，要想制成几微米的漂亮HE 切片是很困难的。

脱钙液是决定骨骼、牙齿、病理性钙化或骨化组织切片质量、染色效果的关键技术之一。

目前使用的脱钙液大多数是无机强酸类制剂，虽然脱钙效果好，但造成组织形态，特别是细胞结构的破坏。

因此，在本实验中我们选择了传统的脱钙液和快速脱钙液两种脱钙液进行比较，进而寻找一种更适合于骨组织脱钙的方法。

研究中发现快速脱钙液在不破坏组织结构及影响染色的同时，它可促进脱钙并加快脱钙速度，防止纤维性组织过度膨胀，并且保证了切片的质量，现报道如下。

1 材料与方法1.1 材料收集内蒙古医科大学附属医院2009-2011年手术切除的骨肿瘤、病变骨及骨髓穿刺病人标本共40例。

根据标本的不同将骨组织取成体积为1.5 cm×1.5 cm×0.5 cm的薄片(骨髓一般直径均为0.1 cm)，放入10%中性福尔马林固定24 h，用于脱钙实验。

不同脱钙液对牙齿牙周联合石蜡切片HE染色的影响

不同脱钙液对牙齿牙周联合石蜡切片HE染色的影响【摘要】目的探讨不同脱钙液对牙齿牙周联合切片HE染色质量的影响。

方法选用10%乙二胺四乙酸钠(EDTA)、复合酸(Plank-Rychlo脱钙液)和5%硝酸3种不同的脱钙液,分成A、B、C 3组用于犬和大鼠牙齿牙周组织联合石蜡切片脱钙,通过记录脱钙时间,观察HE染色效果,评价室温下(20℃～28℃)不同脱钙液对切片制作的影响。

结果A组脱钙液所制切片染色效果良好,但脱钙速度缓慢,所需时间较长;B组脱钙液脱钙速度快,所制切片染色好;C组脱钙液所制切片的染色强度和对比度均不如前两种脱钙液。

结论在制作牙齿牙周联合切片时,EDTA 脱钙液和Plank-Rychlo脱钙液所制切片均能取得良好的染色效果,但EDTA脱钙液脱钙周期过长;Plank-Rychlo脱钙液脱钙均匀,速度快,更适合于临床速检工作;硝酸脱钙液组染色效果较差。

【关键词】脱钙;牙齿;牙周组织;石蜡切片;HE染色【Abstract】Objective To investigate the effect of different decalcifying fluid on HE color of teeth and periodontal tissue united sections.Methods 10%EDTA decalcifying fluid, mixed acid(Plank-Rychlo)and 5% nitric acid were divided into three groups: group A, group B and Group C, which were used to decalcify the united paraffin sections of tooth and periodontal tissue from dogs and rats. The effect of three kinds of decalcifying fluid on manufacture of united sections was evaluated at room temperature(20℃~28℃)by decalcification time and HE staining quality.Results Group A had a good effect of HE staining, but its decalcification time was too long. Group B had either high speed decalcification or high staining quality.Group C was the last choice with the regard of poor staining intensity and contrast.ConclusionEDTA decalcifying fluid and Plank-Rychlo decalcifying fluid can get a favorable staining effect, but has a long decalcification period,Plank-Rychlo decalcifying fluid is more suited to clinical quick examination due to well-distributed and high speed decalcification. Nitric acid decalcifying fluid has a poor staining effect.【Key words】Decalcification;Tooth;Periodontal tissue;Paraffin section;Hematoxylin/eosin staining在涉及口腔组织病理的研究中,需要制作牙齿牙周组织联合切片进行诊断、观察和对比分析,但由于牙齿是全身硬度最高的组织,特别是牙釉质,其无机物成分羟基磷灰石[Ca10(PO4)6(OH)2] 含量占97%,硬度与石英相似;牙本质、牙骨质及牙槽骨坚硬致密、易碎难切,而牙髓、牙龈、牙周膜等软组织在切片过程中易受挤压、牵拉、分离变形甚至脱落。

三种脱钙液对骨组织脱钙后切片染色效果分析

顺利制出一张质量较好的组织切片并非易事，本要求是切基
片完整，色后各种骨细胞的细胞核及胞浆清晰，胞外胶染细
原对比度好。目前使用的脱钙方法有很多种，以分为酸类可脱钙液、螯合剂脱钙液、电解法脱钙液等。
右，辐射５ｍｎ测量脱钙液的温度（（，ｉ，＜６℃）间隙３ｍｎ）ｉ。用同
钙的效果（２。表）
表２三种脱钙液不同时间效果分析
ＬｉＡＰ０ｅａＳ３（自动脱水机；４ＬＩＡ全自动包埋机；５东ｃ￣全（）ＥＣ（）方一Ａ型恒温干燥箱；６Ｏｙｐｓ（）ｌａ显微镜及ＣＩＳ图像分析ｍＭＡ仪；７ＲｎｓｅｇＣ（）ｏｇｈｎＢＤ一１５６０冰箱；８Ｎ一６０（）８３自动温度控制漂片烤片仪。
２０ｍ，０ｌ盐酸８５｜，．Ｔ甲酸５ｎＩ２１％甲醛＋５１ｌｄ（）０％硝酸液：
４％甲醛，５０６％硝酸，０ｌ馏水；３ＥＴ中性液：ＤＡ１０ｍ蒸（）ＤＡＥＴ１，馏水１０ｍ，ＮＯ０ｇ蒸０ｌ加ａＨ搅拌溶解后，１ｏＬ的ＨＩ用０ｍｌ／Ｃ调ｐＨ为７０然后加４甲醛ｌｒ。．，％５ｎｌ１１３仪器．．（）ｉ０微波炉；２ＬｉＲ２３片机；３１ｒ２ｐ（）ｅａＭ１５切ｃ（）
３讨论
１２２脱钙方法．．
见表１。
骨组织分别按以下方法脱钙，脱钙时间
表１三种脱钙方法脱钙时间表

不同的脱钙液在骨组织制片中的比较应用

不同的脱钙液在骨组织制片中的比较应用【摘要】目的比较不同的脱钙液对骨组织的脱钙能力的差异，探讨其对HE染色的影响。

方法选取50例手术切除的新鲜骨标本，运用4种常用的脱钙液(14%硝酸、10%盐酸、20%甲盐酸和EDTA脱钙液)进行脱钙，比较其脱钙效果和对HE染色的影响。

结果不同的脱钙液对骨组织的脱钙能力、HE染色效果影响有显著区别。

结论14%硝酸脱钙能力最强，用时间最短，染色的效果最差；10%盐酸对骨组织的损伤小，HE染色的效果最好，但用时较长；20%甲盐酸脱钙能力和HE染色效果都介于10%盐酸和EDTA脱钙液之间；EDTA脱钙液脱钙用时最长, 对骨组织的损伤最小。

【Abstract】Objective To investigate the different ability of four different decalcifying solutions to decalcify and their influence of HE stain and immunohistochemistry. Methods 50 cases of fresh human bone example are selected. The bones had been decalcified with four kinds of decalcifying solution (including 14% nitric acid, 10% hydrochloric acid, 20% a hydrochloric acid and EDTA). Results Different decalcifying solutions had the different decalcified ability and the influence of HE stain and immunohistochemistry. Conclusion 14% nitric acid can decalcify strongly and rapidly. But its deficiency is the infection of HE coloration and immunohistochemistry. 10% hydrochloric acid doesn’t destroy the tissue and has the best influence for HE stain. The effect of 20% a hydrochloric acid and HE stain between 10% hydrochloric acid and EDTA decalcifying acid. EDTA can decalcify for a long , have the minimum damage for bone tissue.【Key words】Decalcifying solution; HE stain; Bone tissue骨组织是一种坚硬的结缔组织，由骨细胞和骨基质组成，骨基质内含大量无机盐，主要是羟磷灰石-磷酸钙和碳酸钙。

不同脱钙液对大鼠骨髓切片染色的影响

畜牧与饲料科学
ＡｎｉｍａｌＨｕｓｂａｎｄｒｙａｎｄＦｅｅｄＳｃｉｅｎｃｅ
不同脱钙液对大鼠骨髓切片染色的影响
高甜，李慧强，吴晓红
（１．内蒙古医科大学蒙医药研究院，内蒙古呼和浩特０１０１１０；２．内蒙古医科大学药学院．内蒙古呼和浩特０１０１１０）
（Ｂ组）、５％硝酸脱钙液（Ｃ组）中进行充分脱钙后，再经流水冲洗，制作石蜡切片，ＨＥ染色，显微镜观察并评价其效果。［结果］ ①制片时间：５％甲酸组＞甲酸氯化铝脱钙液＞５％硝酸组； ②ＨＥ染色效果：甲酸氯化铝脱钙液与５％甲酸组无显著差异，优于５％硝酸组。［结论］采用甲酸氯化铝脱钙液方法制作的大鼠胸骨骨髓切片，骨髓组织结构完整，细胞形态清晰，耗时较短，能够满足组织学评价的要求。
ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ，ａｎｄｔｈｅｎｈｅｔｓａｍｐｌｅｓｗｅｒｅｗａｓｈｅｄｗｉｔｈｆｌｏｗｉｎｇｗａｔｅｒａｇａｉｎ．Ａｆｔｅｒｔｈａｔ，ｐａｒａｆｉｆｎｓｅｃｔｉｏｎｗａｓｍａｄｅａｎｄＨＥｓｔａｉｎｉｎｇ
Ｃｏｌｌｅｇｅ，ＩｎｎｅｒＭｏｎｇｏｌｉａＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｓｉｒｔｙ，Ｈｏｈｈｏｔ０１０１１０，Ｃｈｉｎａ）

比较四种脱钙法对人牙免疫组化染色抗原性的影响

比较四种脱钙法对人牙免疫组化染色抗原性的影响作者：陈洪伟刘英群温黎明冯晓杰李任来源：《中国美容医学》2012年第06期[摘要]目的：比较四种脱钙方法对人牙牙体组织免疫组化染色抗原活性的影响。

方法：40颗人牙随机分为四组，分别在微波、超声、微波-超声联合及常温下用10%乙二胺四乙酸二钠溶液(EDTA-2Na)脱钙。

应用SABC免疫组化染色技术检测Ⅰ型胶原蛋白、纤维粘连蛋白在各组牙体组织中的表达情况。

结果：在微波-超声联合组脱钙所需时间最短，且免疫组化染色效果最好﹙P＜0.05﹚；微波组脱钙时间较超声组略短，但二者免疫组化染色效果无显著差异（P ＞0.05）。

常温组所需脱钙时间最长且免疫组化染色效果最差。

结论：微波-超声联合法脱钙速度较快，免疫组化染色效果较好，是一种较为理想的脱钙方法。

[关键词]微波；超声；牙齿；脱钙方法；免疫组化[中图分类号]R783.1 [文献标识码]A [文章编号]1008-6455（2012）06-0955-03牙体组织结构较为特殊，其硬组织中含有大量钙盐（洛氏硬度值达340）[1]，是全身最坚硬的组织，不易切片极易脱片，因此在病理制片过程中首先要脱去其中的钙盐再进行制片，而位于牙体硬组织中心的牙髓为柔软的结缔组织，在制片过程中易受挤压、牵拉而至变形、分离甚至脱落流失，脱钙不佳也会影响组织细胞染色效果或使组织抗原丢失[2]，从而影响对病变组织的病理诊断或科学研究工作。

因此合适的脱钙方法成为牙体组织制片，进行免疫组化染色实验首先要解决的难题。

本实验中对微波、超声、微波-超声联合脱钙法的脱钙效果，及不同脱钙方法对牙体组织免疫组化染色抗原的影响程度进行了初步检测，旨在寻找出更适合牙体组织免疫组化染色实验的脱钙方法。

1 材料和方法1.1 材料：收集因正畸拔除的健康人前磨牙40颗,患者年龄17～25岁,牙齿完好。

经生理盐水冲洗后,入4%多聚甲醛溶液固定24h。

1.2 仪器试剂：微光波炉（WG700TL20Ⅱ-k6,广东格兰仕集团有限公司）；KQ118型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；Ⅰ型胶原蛋白抗体(武汉博士德公司)；纤维粘连蛋白抗体(武汉博士德公司)；SABC试剂盒(武汉博士德公司)。

比较四种脱钙法对人牙免疫组化染色抗原性的影响

中国美容医学２１０２年６月第２卷第６期ＣｉｅｅＪｕｎｌｆｓｅｉＭｅｉｉｅｕ．０２Ｖ１１Ｎ．１ｈｎｓｏｒａｔｔｄｃｎ．ｎ２１．ｏ．．ｏｏＡｅｈｃＪ２６
９５５
时间效应。浓度越高，制率越强，Ｓｏｅ等的研究一抑与ｗｐ
１９．７（）：０ — ４．９６８６２９５２１７
［］ｕｐｒＳＧｏｅＲ．ｈｉｔｌｕｉ一ａｉｎｃｔｅｕ７ＫｐｅＴ，ｒｖｓＷＴｅｎｅｅｋｎ１ｘｓｄｕａｏｓｒａｎｉｆｍｍａｉｎＪ－ＩｖｓＤｒａｌ９５１５１ｕｐ）ｓ２￥６ｎａｌｔ［］ｅｔｅｔ，９，（Ｓｐ１：６一６．ｏＪｎｍｏ１０［］ｗｏｅＶＢＡｄｌ８Ｓｐ，ｂｅ —ＭａｋｚＭａｓｍＭ，１Ｉｔｌｕｉｌｈｌ，ｓｅＬｅａ．ｎｅｅｋｎ１ａｐａｅｔｒ
ｎ６ｎｕｒｎｃｏｉａｔｒａｐａａｅｐｒｃｉｅｉｈｉｉｓｏａｄａｄｔｍｏｅｒｓｓｆｃｏ — ｌｈｒａａｒｎｎｂｔｒｆｏ
ｈａｌｏｙｅｒｌｅａｏａｄｍｕｎｍｅａｃｔｎｐｏｉｒｔｎｎｍｅａｏｅｅｉ［］ＩｖｓｆｉｌｎｇｎｓｓＪ－ｎｅｔＪ
实验研究［．国美容医学，０，２（）４４４６Ｊ中］２３１５：６－６．０［】５陈菊萍，玉平，大鹏，．黑素细胞培养最佳条件的选择和生冉魏等人

三种不同脱钙液在骨组织石蜡切片中的应用比较

三种不同脱钙液在骨组织石蜡切片中的应用比较杜洪;金荣【摘要】目的:比较不同的脱钙液对骨组织的脱钙能力,优化骨组织石蜡切片的制作流程.方法:选取15例手术切除的新鲜骨标本,运用3种不同的脱钙液(Jenkins脱钙液、14％硝酸水溶液、14％硝酸甲醛生理盐水溶液)进行脱钙,记录脱钙时间,常规脱水、切片、HE染色,镜下观察,对比3种脱钙液对骨和骨髓组织常规病理切片质量和HE染色效果.结果:14％硝酸甲醛生理盐水溶液组脱钙能力最强,脱钙最均匀,耗时最短,既能有效完全除去骨皮质中的钙质,又能保护骨髓组织及细胞的形态完好,切片质量和HE染色的效果最佳;14％硝酸水溶液组脱钙液,使骨组织疏松发泡,组织变黄,对组织的损伤大,脱钙不均匀,组织切片不完整,制片质量和HE的效果最差;Jenkins脱钙液组对组织的脱钙能力、损伤程度、制片质量和HE染色效果良好,14％硝酸甲醛生理盐水溶液组和14％硝酸水溶液组之间.结论:3种脱钙液对骨和骨髓组织都具有良好的脱钙能力,制片质量及HE染色效果比较,14％硝酸甲醛生理盐水溶液＞ Jenkins脱钙液＞14％硝酸水溶液;14％硝酸甲醛生理盐水溶液最适用于临床常规病理制片中骨和骨髓组织的脱钙.【期刊名称】《甘肃医药》【年(卷),期】2016(035)005【总页数】3页(P368-370)【关键词】骨组织;脱钙液;HE染色【作者】杜洪;金荣【作者单位】730050 甘肃兰州,甘肃省肿瘤医院病理科;730050 甘肃兰州,甘肃省肿瘤医院病理科【正文语种】中文骨组织是由骨细胞和骨基质组成的坚硬的结缔组织，骨基质富含以磷酸钙和碳酸钙为主的无机钙盐，二者的存在造成骨组织的硬度较大，不易切片且极易脱片，即便能够勉强制成切片，在蓝色钙盐背景下也难以看清细胞结构，对病理诊断工作造成很大的不便，因此在临床病理活检或实验性动物研究中必须要进行脱钙处理才能进行常规制片和观察［1］。

但是，如果骨组织脱钙过度又会严重影响组织细胞染色效果，或使组织抗原丢失，从而影响对病变组织的病理诊断或科学实验工作［2］。

三种脱钙液对大鼠股骨切片染色效果的对比

三种脱钙液对大鼠股骨切片染色效果的对比马新峰（河南医学高等专科学校，河南　郑州　450003）【摘要】目的：不同脱钙液对大鼠股骨组织脱钙效果的比较，找出一种较为适宜制作骨组织切片的脱钙液。

方法取成年健康大鼠股骨做为标本，采用plsnk-Rychlo脱钙液、EDTA脱钙液及改良的硝酸脱钙液脱钙后进行常规HE制片染色比较。

结果改良的硝酸脱钙液脱钙时间短，常规制片效果优良，更适用于一般实验室。

【关键词】　脱钙液骨组织 HE染色【中图分类号】R36 【文献标识码】A 【文章编号】2095-4808（2020）09-042-02骨组织是机体最坚硬的组织，由骨质和骨细胞组成，骨质内的无机成分为骨盐即羟基磷灰石结晶,使骨组织十分坚硬[1]。

骨盐的存在对教学科研及临床病理等制作骨组织切片带来较大困难，在此笔者选取组织技术界较为普遍使用的三种脱钙液，对大鼠股骨进行脱钙处理、切片、HE染色，并对染色效果进行比较，旨在找出一种脱钙时间短、制片效果好的脱钙液。

1.材料与方法1.1材料,取成年健康大鼠股骨9根，浸入10%的福尔马林固定液固定5天以上，在相同生理部位取0.5cm的横断共9枚组织块。

1.2 三种脱钙液的配制,A液：（改良的硝酸脱钙液）：硝酸10ml、冰醋酸20ml、甲酸50 ml、蒸馏水70ml、甲醛10ml,B液：（plsnk-Rychlo脱钙液）：氯化铝7g、盐酸8.5ml、甲酸5ml、加蒸馏水至100ml,C液（EDTA脱钙液）：二胺四醋酸二钠200g、蒸馏水2000ml、加NaOH充分搅拌溶解后将pH值调至7.3～7.51.3仪器,型号78-7隔水式电恒温溶蜡箱、QPJ-1轮转式切片机、GNP型隔水式恒温烤片箱、BMF-1生物组织包埋机、BCD-191ckaz冰箱1.4 脱钙方法,将9枚骨组织块均等份置入三种盛有100ml脱钙液的200ml 烧杯中，12h换一次脱钙液，直至完成脱钙。

1.5 脱钙完成判断标准,物理检测法，大头针无阻力刺入组织深部为脱钙完成的标志。

不同脱钙液对兔膝关节组织切片染色的影响

不同脱钙液对兔膝关节组织切片染色的影响英永;王韶艳;王凤乾;胡建廷;李艳;屈卉锦;李莉;邱波【摘要】To investigate the effect of different decalcifying fluid on thecolor of articular joint tissue section of rabbit knee, to aid at the histological evaluation of hyaline cartilage and distribution of fibrocartilage polysaccharide. Prepare New Zealand rabbits,after the fully fixation of the whole rabbit knee joints in 10% neutral formalin, the tissues were washed with running water,then decalcified with 4 different decalcifying solutions (10% HNO3 decalcifying solutions,3% HNO3 decalcifying solutions, modified AF decalcifying solutions and modified 30% hydrochloric acid). The tissue sections were stained with hematox-ylin-eosin (HE),alcian blue and safranin-O.and observed under a microscope to evaluate the morphology of chondrocytes and the cartilage matrix. Results:?The effects of HE staining: first is 3% HNO3 decalcifying solutions group,next is modified 30% hydrochloric acid group,once again is 10% HNO3 decalcifying solutions and modified AF decalcifying solutions group. ?The effect of alcian blue and safranin-0 staining in 3% HNO3 decalcifying solutions group and modified AF decalcifying solutions group were better than other groups.%探讨不同脱钙液对新西兰大白兔膝关节切片染色效果的影响,为膝关节关节软骨及基质多糖的观察奠定试验基础.取正常新西兰大白兔膝关节,10％中性福尔马林溶液充分固定,流水冲洗后,分别浸入10％硝酸脱钙液、3％硝酸脱钙液、改良AF硝酸脱钙液及改良30％盐酸脱钙液中进行充分脱钙后,流水冲洗,制作石蜡切片,苏木精-伊红(HE)、奥尔辛蓝及沙红O染色,显微镜检观察并评价其效果.结果表明:①HE染色效果,3％硝酸组＞30％盐酸组＞10％硝酸组及改良AF硝酸组;②奥尔辛蓝及沙红O染色效果,3％硝酸组及改良AF硝酸组优于其他各组.【期刊名称】《中国畜牧兽医》【年(卷),期】2012(039)002【总页数】4页(P221-224)【关键词】膝关节;脱钙液;染色【作者】英永;王韶艳;王凤乾;胡建廷;李艳;屈卉锦;李莉;邱波【作者单位】山东省医药工业研究所药物安全性评价中心山东省化学药物重点实验室,山东济南250033;山东省医药工业研究所药物安全性评价中心山东省化学药物重点实验室,山东济南250033;山东省医药工业研究所药物安全性评价中心山东省化学药物重点实验室,山东济南250033;山东省医药工业研究所药物安全性评价中心山东省化学药物重点实验室,山东济南250033;山东省医药工业研究所药物安全性评价中心山东省化学药物重点实验室,山东济南250033;山东省医药工业研究所药物安全性评价中心山东省化学药物重点实验室,山东济南250033;山东省医药工业研究所药物安全性评价中心山东省化学药物重点实验室,山东济南250033;山东省医药工业研究所药物安全性评价中心山东省化学药物重点实验室,山东济南250033【正文语种】中文【中图分类】S852.16骨组织是一种坚硬的结缔组织，基质是有机成分和无机盐紧密结合，使骨组织十分坚硬，使制作得骨组织切片的难度增加。

不同脱钙条件下三种脱钙液脱钙效果的比较

不同脱钙条件下三种脱钙液脱钙效果的比较陈敬文;张伟;王天娲;程俊;罗金风【期刊名称】《中国组织化学与细胞化学杂志》【年(卷),期】2017(026)005【摘要】Objective To compare decalcification and subsequent staining effects of 20％ formic acid,Alexander nitric acidformaldehyde solution and Jenking decalcification solution under normal and increased temperature.Method Mouse knee joint bone tissues were obtained and divided into 6 groups:3 decalcification agents under either room temperature (25C) or increased temperature (70C).The decalcification lasted 48 and 6 hours for normal and increased temperature groups respectively,followed by paraffin section and HE staining.The decalcification efficiency and staining results were evaluated.Result Among those that were decalcified under normal temperature,bone tissues were most difficult to slice in 20％ formic acid treated group and HE staining worked best in Jenking decalcification solution treated group.With increased temperature,bone tissues were easier to slice in all groups than they were under normal temperature.Overall the HE staining was good except in Alexander nitric acid-formaldehyde solution group.Conclusion Different decalcification agents and conditions directly influence decalcification efficiency and staining effects.Increasing temperature not only shortened decalcification time and reduced tissue damage byacids,but also showed better decalcification and staining results than normal temperature.Jenking decalcification solution,which was superior in all criteria,had potential application value.%目的探讨在常温和加温脱钙条件下,甲酸混合液、Alexander硝酸甲醛液及Jenking脱钙液的脱钙效果和染色结果.方法取小鼠膝关节骨组织分为6份,根据脱钙条件和脱钙液的不同,分为常温脱钙组合加温脱钙组两组.常温脱钙组:三种脱钙液常温(25℃)脱钙48h并石蜡切片HE染色;加温脱钙组:三种脱钙液70℃温箱脱钙6h并石蜡切片HE染色,并分别观察骨组织在不同脱钙液及脱钙条件下的脱钙效果及染色结果.结果常温(25℃)脱钙组标本中,经甲酸混合液脱钙的骨组织较难切片,染色较差;经Alexander硝酸甲醛液脱钙的骨组织较易切片,染色较差;经Jenking脱钙液脱钙的骨组织较易切片,染色较好.加温脱钙组标本中,经甲酸混合液脱钙的骨组织较易切片,染色较好;经Alexander硝酸甲醛液脱钙的骨组织较易切片,染色一般;经Jenking脱钙液脱钙的骨组织较易切片,染色较好.结论不同的脱钙液种类及脱钙条件对脱钙及染色结果有较大的影响,标本经三种脱钙液加温脱钙后,使脱钙时间大大缩短,减少了酸对组织的破坏,在脱钙效果及染色结果方面,均要优于常温脱钙,而Jenking脱钙液无论在常温和加温条件下的脱钙和染色效果均要优于其它两种脱钙液,有一定的应用价值.【总页数】4页(P523-526)【作者】陈敬文;张伟;王天娲;程俊;罗金风【作者单位】深圳市人民医院病理科,深圳518020;广州军区广州总医院病理科,广州510010;深圳市人民医院病理科,深圳518020;深圳市人民医院病理科,深圳518020;深圳市人民医院病理科,深圳518020【正文语种】中文【中图分类】R361.2【相关文献】1.三种脱钙液对免疫组化染色效果的比较 [J], 孙庆妹;刘军2.三种不同脱钙液在骨组织石蜡切片中的应用比较 [J], 杜洪;金荣3.不同脱钙液对钙化性主动脉瓣膜脱钙效果的比较 [J], 李灿波;李海清;叶晓峰;赵强4.不同成份脱钙液对骨组织脱钙效果的比较 [J], 祁宏枝; 罗添友; 唐涛5.三种脱钙液对狗牙齿及牙槽骨脱钙效果的比较 [J], 于洪藻;李玉林;张丽红;王成坤;蔡家骏因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。