细胞工程实验小结
细胞工程实验总结
实验一、细胞培养实验器材和试剂的准备1、哪些物品适合于高压灭菌,并说明理由。
①材料:微孔滤膜(直径25 cm):孔径为0.22μm、微孔滤膜(直径90 cm):孔径为0.22 μm、过滤器(直径25 cm)。
②仪器和器材:眼科剪刀和镊子、长镊子、培养皿、培养瓶、试剂瓶(或盐水瓶)、移液枪、10毫升试管、10毫升离心管、巴氏吸管、5毫升(或10毫升)吸量管、不锈钢过滤器、塑料过滤器、注射器、超净工作台、干燥箱、高压灭菌锅、正压泵。
理由:适合于高压灭菌是布类、橡胶制品(如胶塞)、金属器械、玻璃器皿、某些耐高温的塑料制品以及加热后不发生沉淀的无机溶液(如Hanks液、PBS等)。
2、细胞培养常用液体如何配制和灭菌?1)PBS :8.0g NaCl、0.2gKCl、2.2gNa2HPO4、0.12gKH2PO4溶于1000 mL双蒸水,高压灭菌,4℃保存。
(准备试剂瓶)灭菌方法:高压灭菌。
2)干粉培养基过滤除菌(先准备好不锈钢过滤器及滤膜,安装后高压灭菌,适度烘干;铝盒4个,三角瓶2个,容量瓶,不锈钢过滤器一套,酒精灯,酒精棉球3瓶,吸耳球3个,吸量管10毫升和5毫升各5根,分装用瓶,血清,超纯水,抗生素)认真阅读说明书。
说明书都注明干粉不包含的成分,常见的有NaHCO3、谷氨酰胺、丙酮酸钠、HEPES等。
这些成分有些是必须添加的,如NaHCO3、谷氨酰胺,有些根据实验需要决定。
配制方法(1L):1)在一个尽可能接近总体积的容器中加入大约500mL双蒸水。
2)在室温(20℃到30℃)的水中加入干粉培养基。
3)水洗袋内残留培养基,全部转移到容器内,轻轻搅拌,不要加热。
4)完全溶解之后,1袋1L粉状DMEM加3.7g NaHCO3,1mmoL∕L丙酮酸钠,即0.11g/L,添加双抗。
5)用双蒸水定容到1L,搅拌溶解。
注意不要过分搅拌。
6)通过缓慢搅拌加入1N NaOH 或1N HCL调节pH值培养基在过滤前要保持密封。
细胞实训报告心得体会
一、前言细胞是生物体的基本结构和功能单位,是生命现象的基础。
细胞生物学是研究细胞的结构、功能、发生、发育和相互作用的科学。
细胞实训作为生物学专业学生的必修课程,旨在让学生通过实践操作,加深对细胞生物学知识的理解和掌握。
本文将从实训过程、收获体会和反思改进三个方面,详细阐述细胞实训的心得体会。
二、实训过程1. 实训准备在实训开始前,我们首先对细胞生物学的基本概念、细胞结构、细胞功能等理论知识进行了复习和预习。
同时,我们了解了实训所需的仪器设备、试剂和实验步骤,为实训做好充分准备。
2. 实训操作(1)细胞观察在实训过程中,我们首先进行了细胞观察实验。
通过使用显微镜观察各种细胞样本,如口腔上皮细胞、红细胞、白细胞等,我们对细胞的基本结构有了直观的认识。
在观察过程中,我们学会了如何调整显微镜的焦距和光圈,以及如何观察细胞的形态、大小、结构等特征。
(2)细胞培养接着,我们进行了细胞培养实验。
在无菌操作条件下,我们接种了细胞,观察了细胞的生长、分裂和衰老过程。
通过实验,我们掌握了细胞培养的基本操作,如培养基配制、细胞接种、细胞传代等。
(3)细胞分子生物学实验在细胞分子生物学实验中,我们进行了DNA提取、PCR扩增、Western blot等实验。
通过这些实验,我们了解了细胞内DNA、RNA、蛋白质等分子的提取、纯化和检测方法,以及基因表达调控的分子机制。
3. 实训总结在实训结束后,我们进行了实验报告的撰写,总结实训过程中的收获和体会。
同时,我们还对实验中遇到的问题进行了讨论和交流,为今后的学习和研究奠定了基础。
三、收获体会1. 提高了实验技能通过细胞实训,我们掌握了细胞生物学实验的基本操作,如细胞观察、细胞培养、细胞分子生物学实验等。
这些实验技能对于今后从事生物学研究具有重要意义。
2. 深化理论知识细胞实训使我们对细胞生物学的基本概念、细胞结构、细胞功能等理论知识有了更深入的理解。
通过实验操作,我们将理论知识与实际应用相结合,提高了学习的兴趣和效果。
细胞工程总结
一、名词解释:细胞工程(cell engineering)是以细胞生物学和分子生物学为基础理论,采用原生质体、细胞或组织培养等试验方法或技术,在细胞水平上研究改造生物遗传特性,以获得具有新的性状的细胞系或生物体以及生物的次生代谢产物,并发展有关理论和技术方法的学科。
1.脱分化:脱分化:具有特异结构和功能的细胞转化成没有特异结构和功能的细胞的过程称为脱分化。
(如根、茎、叶)2.饲喂培养:将饲喂的细胞用培养基作平板,此平板称饲喂层,用X射线或紫外线照射,使核失活但细胞存活,然后将原生质体以液体浅层培养或平板技术铺在饲喂层上。
3.核重编成:使在体细胞中被关闭,而在正常胚胎发育中表达的基因重新被激活的过程。
4.细胞株:通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物的培养物称为细胞株(Cell Strain5.热力灭菌:主要是利用高温使菌体变性或凝固,酶失去活性,而使细菌死亡。
6.人工种子:是将植物立体培养产生的体细胚包埋在含有营养成分和保护功能的物质中,在适宜的条件下发芽出苗7.植板率:每个平板接种细胞总数中形成细胞团的百分率。
植板率=每平板形成的细胞团数/每平板接种的细胞总数8.胚胎移植: 是指将雌性动物的早期胚胎,或者通过体外受精及及其他方式得到的胚胎,移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物体内,使之继续发育为新个体的技术。
9.体细胞无性系:以单体细胞为材料,采用无性繁殖法繁殖的品种(品系)称无性系品种(品系),简称无性系10.过滤灭菌:过滤灭菌法,即用筛除或滤材吸附等物理方式除去微生物仓鼠细胞Hamster cells 白细胞抑制因子leukocyte inhibitory factor, LIF 干细胞Stem cells二、简答1.细胞活力鉴定方法:取纯化后的植物原生质体悬浮液0.5ml置于小试管中,加入含2mg/L 的FDA的丙酮溶液,使最终浓度为0.01%,混匀,放置5分钟,荧光显微镜观察(激发光滤光片QB-24,压制滤光片JB-8),有活力原生质体发绿色荧光,不产生荧光为无活力。
细胞实验报告反思总结(3篇)
第1篇一、前言细胞实验作为生物学研究的重要手段,在揭示生命现象、探索疾病机制、开发新型药物等方面发挥着至关重要的作用。
本次实验报告针对我所参与的细胞实验进行反思总结,旨在提高实验技能、优化实验设计、提升实验结果的可信度。
二、实验目的本次实验旨在:1. 掌握细胞培养的基本操作技能,包括细胞传代、细胞接种、细胞计数等。
2. 熟悉细胞实验所需的器材和试剂,了解其作用和用途。
3. 分析实验结果,探讨实验现象背后的生物学机制。
三、实验过程1. 细胞传代:在实验过程中,我们严格按照细胞传代操作规程进行,确保细胞在适宜的培养条件下生长。
通过观察细胞生长状态、调整传代比例,保证了细胞的活力和数量。
2. 细胞接种:在细胞接种过程中,我们遵循无菌操作原则,确保细胞在无菌条件下生长。
同时,根据实验需求调整接种密度,为后续实验提供充足细胞资源。
3. 细胞计数:在细胞计数实验中,我们熟练运用血球计数板进行细胞计数,并对计数结果进行统计分析。
通过对比不同处理组的细胞数量,分析实验现象背后的生物学机制。
4. 实验数据分析:在实验数据分析过程中,我们运用统计学方法对实验数据进行分析,探讨实验现象背后的生物学机制。
同时,对实验结果进行合理的解释和推断。
四、实验反思1. 实验操作方面:(1)在细胞传代过程中,我们应严格按照操作规程进行,避免细胞污染和传代失败。
(2)在细胞接种过程中,应注意无菌操作,防止细胞污染。
(3)在细胞计数过程中,应保证计数准确,避免人为误差。
2. 实验设计方面:(1)在实验设计过程中,应充分考虑实验目的和实验条件,确保实验结果具有可重复性和可靠性。
(2)在实验过程中,应密切关注实验现象,及时调整实验参数,优化实验设计。
(3)在实验结果分析过程中,应运用多种统计学方法,提高实验结果的可信度。
3. 实验结果分析方面:(1)在实验结果分析过程中,应充分挖掘实验数据,探讨实验现象背后的生物学机制。
(2)在实验结果解释过程中,应结合相关文献,对实验结果进行合理的解释和推断。
细胞学实习出科小结
细胞学实习出科小结在细胞实验室实习的这段时间,我负责的主要是研究各种药物在体内外肿瘤细胞抑制作用的实验。
在导师、师姐和师兄的指导下,我做了一些笔记,学到了许多课外知识和基本的技术操作,令我受益匪浅。
在体外实验过程中,我发现要做好实验,首先要细心。
对于刚来实验室的我,就要学会多问,多记,多背。
细胞是很容易被染菌的,它需要一个独立的细胞培养室。
细胞在培养过程中,要放到37°C的CO2培养箱中,在对细胞进行复苏、传代、换液、种板给药及冻存时,要放到紫外照射,通风过的超净工作台上操作,在细胞需要离心时还要密封盖子。
另外,每次在打开放有细胞的瓶管盖子时,注意还要在酒精灯上烘烤。
作为实验人员,还要准备消毒的手套及白大褂。
其次,做细胞实验还要有耐心。
在超净工作台上操作之前,我们还要认真准备好实验仪器和培养用液。
实验仪器包括塑料器皿和玻璃器皿,使用过的塑料器皿如96孔板,离心管要先进行清水冲洗,再放入洗洁液中浸泡过夜后拿出冲洗15遍,烘干,随后放于三蒸水中浸润再烘干,最后放于高压蒸气锅中灭菌烘干备用。
而玻璃器皿如培养瓶还需要在洗洁液中浸泡清洗烘干后,在酸酐溶液中浸泡清洗。
配制培养用液时也一样要小心谨慎,配制过程中的仪器也要进行清洗消毒灭菌,如胰酶液还要放在超净工作台上操作。
另外,在做实验时还要注意,其中的培养液因细胞而异,如C6细胞用DMEM培养液,而SGC细胞用的则是RpmI1640培养液。
其中在配制和灭菌消毒过程中的三蒸水,是通过蒸馏水净化过来的,使用时最好用新鲜配制的。
作为一名毕业在即的大学生,敢于接受挑战应作为一-种基本的素质。
通过实习,我找出了自己更多的不足和差距所在。
回想这次实验室的实习,感慨颇多,深知“理论是灰色的,生活之树常青”,只有将理论付诸于实践才能实现理论自身的价值,也只有将理论付诸于实践才能使理论得以检验。
细胞工程学习总结
主要学习内容1 植物细胞工程?是在植物细胞全能性的基础上,以植物细胞为基本单位,在体外条件下进行培养、繁殖或人为的精细操作,使细胞的某些生物学特性按照人们的意愿发生改变,从而改良品种或创制新种,或加速繁殖植物个体,或获得有用产物的过程。
2 植物细胞的全能性?生物体的细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能的特性。
3植物细胞的全能性原理 ?生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质,都有发育成为完整个体所必需的全部基因,从理论上讲,生物体的每一个活细胞都应该具有全能性。
4 植物组织与器官培养?是指在无菌条件下,将离体的植物器官、组织、细胞(体细胞、生殖细胞等)、胚胎、原生质体等培养在人工配置的培养基上,给予适当的培养条件,诱发产生愈伤组织、潜伏芽,或者长成新的完整植株的一种实验技术。
5 愈伤组织?是指由外植体组织增生的细胞产生的一团不定型的疏散排列的薄壁细胞。
6 脱分化?一个已经停止分裂的成熟细胞转变为分生状态,并形成未分化的细胞团或愈伤组织的现象。
7 再分化?指原已分化的细胞过脱分化后再次分化的现象,最终可进一步形成完整的小植株。
8继代培养 ?是指愈伤组织在培养基上生长一段时间后,营养物枯竭,水分散失,并已积累了一些代谢产物,此时需要将这些组织转移到新的培养基上进行培养的方式。
9 植物细胞培养?是指在离体条件下,将愈伤组织或其他易分散的组织置于液体培养基中进行振荡培养,得到悬浮细胞,再通过继代培养使细胞增殖,从而获得大量细胞群体的技术。
它是在组培基础上发展起来的。
10 动物细胞培养?动物细胞与组织培养是从动物体内取出细胞或者组织,模拟体内的生理环境,在无菌、适温和丰富的营养条件下,使离体细胞或者组织生存、生长并维持结构和功能的一门技术。
11细胞系? 由初代培养产生的能进行无限次传代培养的细胞群称细胞系.12干细胞?是指具有无限或较长期的自我更新能力,并能产生至少一种高度分化子代细胞的细胞。
细胞实训报告心得体会总结
一、实训背景细胞是生命科学中最基本的结构和功能单位,细胞生物学是研究细胞的结构、功能、发生和发展的科学。
为了更好地理解细胞生物学的基本原理,提高自己的实验操作技能,我们进行了为期两周的细胞实训。
二、实训目的1. 掌握细胞生物学的基本实验技术,如细胞培养、染色、显微镜观察等。
2. 了解细胞的结构、功能和发生发展规律。
3. 培养团队协作精神和科学素养。
三、实训内容1. 细胞培养:学习细胞传代、冻存、复苏等基本操作,了解细胞生长规律。
2. 细胞染色:学习细胞核染色、细胞质染色、细胞骨架染色等,观察细胞结构。
3. 显微镜观察:学习显微镜的使用方法,观察细胞在不同状态下的形态变化。
4. 细胞凋亡检测:学习TUNEL染色法检测细胞凋亡,了解细胞凋亡的机制。
5. 细胞信号转导:学习Western blot、免疫荧光等技术,研究细胞信号转导通路。
四、实训心得体会1. 实践出真知。
通过本次实训,我对细胞生物学的基本原理有了更深入的理解。
在实验过程中,我发现理论知识与实践操作有很大的差距,只有亲自操作,才能更好地掌握实验技能。
2. 团队协作精神。
在实训过程中,我们分组进行实验,每个成员都承担着不同的任务。
通过团队合作,我们共同完成了实验任务,提高了实验效率。
这使我深刻体会到团队协作的重要性。
3. 严谨的科学态度。
在实验过程中,我们严格遵守实验规程,认真对待每一个步骤。
这使我认识到,严谨的科学态度是保证实验结果准确性的关键。
4. 持续学习。
细胞生物学是一个不断发展的学科,新的技术和方法层出不穷。
在实训过程中,我意识到自己需要不断学习,才能跟上学科发展的步伐。
5. 细胞培养技术的应用。
通过学习细胞培养技术,我了解到其在生物医学、药物研发、基因工程等领域的广泛应用。
这使我认识到细胞生物学的重要性。
6. 细胞凋亡与信号转导的研究。
细胞凋亡和信号转导是细胞生物学研究的热点。
通过学习相关技术,我对这两个领域有了初步的了解,为今后的研究奠定了基础。
植物细胞工程总结
绪论1,细胞工程:是应用细胞生物学和分子生物学方法,借助工程学的实验方法或技术,在细胞水平上研究改造生物遗传特性和生物学特性,以获得特定的细胞、细胞产品或新生物体的有关理论和技术方法的学科.广义的细胞工程包括所有的生物组织、器官及细胞离体操作和培养技术。
狭义的细胞工程是指细胞融合和细胞培养技术。
根据研究对象的不同,高等生物的细胞工程分为动物细胞工程和植物细胞工程。
动物细胞工程包括细胞培养技术(包括组织培养、器官培养),细胞融合技术,胚胎工程技术(核移植、胚胎分割等),克隆技术(单细胞系克隆、器官克隆和个体克隆)。
植物细胞工程包括植物组织、器官培养技术,细胞培养技术,原生质体融合与培养技术,亚细胞水平的操作技术等。
2,植物细胞工程:以植物组织细胞为基本单位,在离体条件下进行培养、繁殖或人为的精细操作,使细胞得某些生物学特性按人们的意愿发生改变,从而改良品种或创造新物种,或加速繁殖植物个体,或获得有用物质的过程称…植物细胞工程的应用:1,利用细胞融合技术,克服远缘杂交不亲和性。
2,利用培养变异,筛选优良的突变体。
3,倍性育种,缩短育种年限. 4, 离体种质保存.5, 细胞培养生产有用的物质.第二章一,实验室设置及内部设备实验室建设应考虑的问题: 1、实验的性质 2、实验室的规模细胞工程实验室:基本实验室:准备室、无菌操作室、培养室贮藏室辅助实验室:细胞学实验室、生化分析实验室温室1、准备室完成所使用的各种药品的贮备、称量、溶解、配制、培养基分装及高压灭菌;器皿、材料的洗涤等工作。
主要设备纯水器工作台药品厨天平电磁炉冰箱玻璃器皿酸度计高压灭菌锅干燥箱等2、无菌操作室(接种室)用于植物材料的消毒、接种、培养物的转移、原生质体的制备以及一切需要进行无菌操作的技术程序。
接种室应用推拉门,设有缓冲间,面积2m2为宜。
进入接种室前更衣换鞋,减少带入接种室杂菌.接种室主要设备超净工作台:每次实验前要用紫外灯灭菌20min,关掉紫外灯开始工作,工作过程中注意一直开着吹风机。
动物细胞工程实习报告
动物细胞工程实习报告一、实习背景及目的动物细胞工程是一门综合性学科,涉及生物学、医学、生物工程等多个领域。
本次实习旨在让我们了解动物细胞工程的基本原理和技术方法,提高我们的实验操作能力,为今后的科研和工作打下坚实基础。
二、实习内容与过程1. 实习前的准备在实习开始前,我们参加了为期一周的理论学习,学习了动物细胞工程的基本原理、技术方法和实验操作流程。
同时,我们还学习了实验室安全知识,了解了各种实验仪器的作用和操作方法。
2. 实习过程实习过程中,我们分为若干小组,每组负责一个实验项目。
以下是本次实习的几个主要实验项目:(1)动物细胞培养我们使用了体外培养的人胚肝细胞作为实验材料,通过添加适当的培养基、血清等物质,保持了细胞的生长和增殖。
在实验过程中,我们学会了使用细胞计数器进行细胞计数,掌握了细胞培养的基本技术。
(2)动物细胞融合我们采用了电融合法将两种不同类型的动物细胞进行融合,观察了融合后的细胞特性。
通过这个实验,我们了解了细胞融合的原理和方法。
(3)动物细胞核移植我们进行了动物细胞核移植实验,将一个细胞的细胞核移入另一个去核的细胞中,观察了重组细胞的发育情况。
这个实验让我们认识了动物细胞核移植技术及其在生物工程中的应用。
(4)动物细胞载体构建我们利用质粒载体将目的基因导入动物细胞,观察了目的基因在细胞内的表达。
这个实验让我们了解了基因工程的基本原理和方法。
3. 实习成果通过本次实习,我们掌握了动物细胞培养、细胞融合、核移植、基因导入等技术方法,了解了动物细胞工程在生物科研和医学领域的应用。
同时,我们的实验操作能力和团队协作能力得到了提高。
三、实习体会与总结本次实习让我们对动物细胞工程有了更深入的了解,实验过程中的每一个步骤都离不开理论知识的支持。
同时,实践操作也让我们发现了理论知识的不足,促使我们更加努力地学习。
此外,实习过程中的团队协作也让我们学会了与他人共同解决问题,提高了我们的综合素质。
生物技术细胞工程实验报告
课程学习报告课程名称:细胞工程大实验实验一培养基母液和培养基的配置实验二胡萝卜再生体系的建立实验三水稻再生体系的建立实验四水稻悬浮细胞系的建立及胚状体的诱导与观察实验五水稻遗传转化实验六烟草的组织培养实验七百合组织培养实验八原生质体游离、融合与培养实验九玉米幼胚再生系统的建立实验十植物快速繁殖实验1 培养基母液和培养基的配制摘要:培养基是供植物离体培养组织或细胞赖以生存的营养基质,相当于人公配制的“土壤“,在植物组织培养过程中,外植体生长所必需的营养成分、生长因子、理化环境等主要由培养基提供。
为了避免每次配制培养基都要对几十种化学药品进行称量,应该将培养基中的各种成分,按原量10倍、100倍或1000倍称量,配成浓缩液,这种浓缩液叫做母液。
这样,每次配制培养基时,取其总量的1/10、1/100、1/1000,加以稀释,即成培养液。
关键词:培养基母液、培养基、无机营养物、碳源、维生素、生长调节物质、有机附加物培养基实际一是一个人工模拟的植物生长、发育环境。
在植物组织培养过程中,外植体生长所必需的营养万分生长因子、理化环境等主要同培养基提供。
在植物组织培养中,选用适当的培养基,是组织培养成功与否至关重要的因素。
不同植物材料对培养基的要求不尽相同,进行一系列的预培养和筛选是很必要的。
由于离体的培养材料不像完整植物体那样具有自我平衡的能力,所以在配制培养基时,离子失衡或某种物质过量都可能导致培养物生长不良或导致死亡。
另外,组织培养物的脱分化、分化等状态的调控,次生代谢物的产出等都要通过调节培养基成分来实现。
本实验的目的是要学习并掌握培养基母液和培养基配制的方法,掌握不同物质浓度按比例稀释和转化的计算方法。
1 材料与方法步骤1.1试剂培养基母液(以MS 为例):NH 4NO 3;KNO 3 ;CaCl 2.2H 2O ;MgSO 4.7H 2O ;KH 2PO 4;(NH4)2SO 4;H 3BO 3;KI ;MnSO 4.H 2O ;ZnSO 4.7H 2O ;NaMoO 4.2H 2O ;CuSO 4.5H 2O ;CoCl 2.6H 2O ;Na 2EDTA.2H 2O ;FeSO4. 7H2O ;甘氨酸;盐酸吡哆醇;盐酸硫氨素;烟酸;肌醇;2,4—D ;6—BA ;NAA培养基:1N HCl ;1N KOH ; 标准pH 溶液(25℃下,pH4.01和pH6.08的标准溶液各100ml );蔗糖;琼脂;水解蛋白酶;谷氨酰胺;脯氨酸。
细胞工程小结
植物的组织培养:讲清原理、理解应用、操作方法和步骤 重点 重点) 植物的组织培养 讲清原理、理解应用、操作方法和步骤(重点 讲清原理
工厂化生产药物 人工种子 ?
外 植 体
脱分化(去分化) 脱分化(去分化) 条件 营养条件
愈伤 组织
再分化
形成胚状体或 形成胚状体或丛芽 胚状体
微型繁殖 作物脱毒 光 单倍体育种 突变体的利用
原因2 原因2:
克隆:克隆是英文clone一词的音译,就是指无性繁殖。 一词的音译, 克隆:克隆是英文 一词的音译 就是指无性繁殖。 克隆一词常用于分子、细胞水平的描述。 克隆一词常用于分子、细胞水平的描述。一般认为生物学上 有三个层次的克隆: 有三个层次的克隆: 分子水平的克隆: 目的)基因克隆、 分子水平的克隆:(目的)基因克隆、PCR技术 技术 植物细胞克隆: 植物细胞克隆:组培获得愈份组织 克 细胞水平的克隆 动物细胞培养 隆 动物细胞的克隆 单克隆抗体的制备 植物组织培养 个体水平的克隆 动物克隆(核移植技术) 动物克隆(核移植技术) 克隆技术( 克隆技术(cloning)是指从众多的基因或细胞群体中通过 ) 无性繁殖和选择目的基因或特定类型细胞的技术的操作。 无性繁殖和选择目的基因或特定类型细胞的技术的操作。
无性生殖
克隆技术及种类
是指从一个共同的祖先 通过无性繁殖 一个共同的祖先, 无性繁殖的方法产生出 是指从一个共同的祖先,通过无性繁殖的方法产生出 来的一群遗传特性相同的DNA分子 细胞或个体, 一群遗传特性相同的DNA分子、 来的一群遗传特性相同的DNA分子、细胞或个体,是一种 人工诱导的无性繁殖方式。 人工诱导的无性繁殖方式。 分子水平克隆:PCR技术 分子水平克隆:PCR技术 个体水平克隆: 个体水平克隆: 克隆羊多利 细胞水平克隆: 细胞水平克隆:动物细胞 培养(单克隆体) 培养(单克隆体)
细胞工程 小结
细胞工程第一章1何谓细胞工程:细胞工程是生物工程重要组成部分,它是应用细胞生物学和分子生物学的理论和方法,按照人们的设计进行在细胞水平上的遗传操作及进行大规模的细胞和组织培养,以获得具有新性状的细胞系或生物体以及生物的次生代谢产物,并发展有关理论和技术方法的学2细胞工程的目的:获得新性状、新个体、新物质3按涉及主要技术领域:细胞培养、细胞融合、细胞拆合、染色体操作及基因转移等方面。
4细胞工程按操作层次分:细胞融合工程、染色体工程、胚胎工程、细胞质工程等几个方面5细胞工程分为:植物组织和培养技术;动物组织和培养技术;干细胞培养技术细胞融合技术;细胞核移植技术;胚胎移植技术;6动物细胞工程内容:1动物细胞培养技术2细胞融合与单克隆抗体3胚胎工程4干细胞与组织工程5核移植技术与动物克隆6转基因动物与动物发生器7动物染色体工程7植物细胞工程内容:1植物细胞培养技术2植物快速繁殖3植物单倍体诱导与育种4植物胚胎发育与人种种子5植物原生质融合技术6植物染色体工程与转基因8动物细胞培养技术的应用:1)生产蛋白生物制品:病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等。
(2)获得大量自身的皮肤细胞,用于植皮。
(3)用于检测有毒物质4)用于生理、病理、药理等方面的研究,为治疗和预防疾病提供理论依据9单克隆抗体:将B型淋巴细胞与骨髓瘤细胞在仙台病毒的诱导下进行融合,所得杂交瘤细胞既保持了癌细胞大量繁殖的特点,又具有B型淋巴细胞产生抗体的能力书P77 HAT选择原理杂交瘤技术10单克隆抗体制备技术意义:①在基础理论研究中具有重要意义②在疾病诊断、治疗和预防方面,与常规抗体相比,具有产量高,特异性强,灵敏度高,优越性十分明显③作为载体,运载抗癌药物,制成生物导弹11动物体细胞核移植技术:将细胞核和细胞质用某种方法拆开,然后再把分离的不同细胞的细胞核和胞质重新组合成一个新细胞12干细胞定义:现在发现哺乳动物的许多已分化组织和器官中都保留了一些能够分裂形成该组织或器官的未分化原始细胞,这些细胞称为干细胞。
细胞工程综合实训报告
2010—2011学年第二实践学期细胞工程综合实训报告专业:班级:姓名:学号:2011年 9月1日实验日期:2011.7.4-2011.7.12实验地点:农学院生物技术实验室及农学院创新实验室蓝莓细胞悬浮培养一、实验目的(1)掌握蓝莓细胞悬浮系建立的方法和原理(2)学会对悬浮细胞培养物进行细胞计数及绘制细胞生长曲线二、实验材料蓝莓愈伤组织三、实验试剂MS液体培养基、三氧化铬、0.1%酚藏红花、0.1%荧光素双醋酸酯(FDA)四、实验仪器超净工作台、高压灭菌锅、旋转式摇床、水浴锅、倒置显微镜、镊子、酒精灯、100ml三角瓶、移液管、PH计、漏斗、不锈钢网、血细胞计数板五、实验步骤1、配制MS液体培养基500ml(平均分装在11个三角瓶中),高压灭菌,常温放置1-2天,观察无菌后备用。
2、超净台内,镊子夹取生长旺盛的蓝莓愈伤组织,夹碎放入含MS的培养瓶中,每瓶1-1.5g.扎紧瓶口。
3、将接种完毕的三角瓶置于旋转式摇床上。
100r/min,25-28℃条件下进行振荡培养。
4、培养6-10天后,进行第一次继代培养。
5、悬浮培养物的过滤:继代培养几天后,若仍含有较大的细胞团,则用适当孔径不锈钢网过滤,再将滤后的悬浮细胞继续培养。
6、细胞数目计算:取一定体积的细胞悬液,加入2倍体积的8%三氧化铬,置于70℃水浴处理15分钟。
冷却后,用移液管重复吹打细胞悬液,以使细胞充分分散。
混匀后,取一滴悬液置于细胞计数板上计数。
六、注意事项1、各步骤均需无菌操作!培养基、用具、器皿等要高压灭菌后方可使用。
2、如培养液浑浊或呈现乳白色,表明已污染。
3、每次继代培养时,应在倒置显微镜下观察培养物中各类细胞及其残余物的情况,有意识的留下圆细胞,弃去长细胞。
七、实验记录蓝莓愈伤组织悬浮培养松江鲈鱼细胞体外培养一、实验材料松江鲈,捕于鸭绿江。
透明质酸酶、II型胶原酶、碱性成纤维细胞生长因子、表皮细胞生长因子、胰蛋白酶、L-15、MEM、DMEM/F-12培养基、胎牛血清、含羧甲基壳多糖(50ug/ml)、N-乙酰葡萄糖盐酸盐(50ug/ml)、碱性成纤维细胞生长因子(bEGF,10ng/ mL)、表皮生长因子( EGF , 10 ng/mL)。
12细胞工程作业总总结
细胞工程作业1(第一、三、五章)一、名解:1.细胞工程:以细胞为对象,应用生命科学理论,借助工程学原理与技术,有目的的利用或改造生物遗传性状,以获得特定的细胞、组织产品或新型物种的一门综合性科学技术。
2.细胞全能性:每一个活细胞都包含植物生长发育所必需的全部基因,都具有再生成一个完全的有机体的潜力。
3.愈伤组织:由脱分化的细胞经过分裂产生的无组织结构无明显极性的松散细胞团,它具有再分化成为完整植物体的潜能。
4.外植体:植物组织培养中用来进行无菌培养的离体材料,可以是器官、组织、细胞和原生质体等。
5.脱分化:又称去分化,是指分化细胞失去特有的结构和功能变为具有未分化细胞特性的过程,即分化的细胞在适当条件下转变为胚性状态而重新获得分裂能力的过程。
6.原生质体:植物细胞工程中脱去全部细胞壁的细胞叫原生质体。
7.胚胎培养:指对植物的胚及胚器官(如子房、胚珠)进行人工离体无菌培养,使其发育成幼苗的技术。
8.成熟胚培养:一般是指子叶期至发育成熟的胚的培养。
9.幼胚培养:是指胚龄处于早期原胚、球形期胚、心形期胚、鱼雷期胚的培养。
10.胚乳培养:指处于细胞期的胚乳组织的离体培养,它的功能是为胚发育和种子萌发提供营养。
11.胚珠培养:是指未受精或受精后的胚珠离体培养。
12.子房培养:是指授粉和未授粉的子房培养。
13.人工种子:将植物离体培养中产生的胚状体或芽包裹在含有养分和保护功能的人工胚乳和人工种皮形成的类似种子的颗粒。
14.植物脱毒:利用物理、化学或生物学方法脱除植物所感染的病毒,在无菌条件下培养不带病毒的植株,进行快速繁育无病毒种苗的技术。
二、问答题:1、细胞培养有哪些主要设备及途?超净工作台,压力蒸汽消毒器,电热干燥箱,CO2培养箱,倒置显微镜,酶标仪、液氮罐、滤器,自动双重纯水蒸馏器,纯水仪等。
自动双重纯水蒸馏器和纯水仪是水处理设备,细胞培养对水的要求较高,至少是使用双蒸水,最好使用三蒸水或超纯水。
超净工作台为细胞操作提供无菌环境。
细胞工程总结
细胞工程考点总结名词解释:细胞工程:是指以细胞为对象,应用生命科学理论,借助工程学原理与技术,有目的地利用或改造生物遗传特性,以获得特定的细胞、组织产品或新型物种的一门综合性科学技术。
细胞周期:通常将通过细胞分裂产生的新细胞的生长开始到下一次细胞分裂形成子细胞结束为止所经历的过程称为细胞周期。
细胞全能性:细胞具有该个体全部遗传的可能性,在一定条件下如受精卵一样,有发育成完整个体的固有潜在能力。
两层含义:细胞无论是体细胞还是生殖细胞,均具有该物种全部的遗传信息;每个细胞均具有发育成完整个体的潜在能力。
细胞分化:指细胞在形态、结构和功能上发生差异的过程,,包括时间上和空间上的分化。
实质是基因的差异表达。
细胞脱分化:又称去分化,是指分化的细胞失去特有的结构和功能变成具有未分化细胞特性的过程,即分化细胞在适当的条件下转变为胚性状态而重新获得分裂能力的过程。
可采用人工诱导技术诱导体细胞脱分化。
细胞再分化:指在离体条件下,无序生长的脱分化细胞在适当的条件下重新进入有序生长和分化状态的过程。
事实上是基因选择性表达与修饰的人工调控的过程。
植物组织培养:是将植物器官,组织,细胞和原生质体等外植体在离体无菌条件下培养在人工培养基上,在适当的条件下诱发长成完整植株的一种技术。
植物激素:是植物自然状态下产生的对生长发育有显著作用的微量有机物,包括生长素家族、细胞分裂素家族、赤霉素、乙烯和脱落酸。
愈伤组织:原指植物在受伤之后于伤口表面形成的一团薄壁细胞。
植物组培中,指脱分化后的细胞经过细胞分裂,产生无组织结构,无明显极性的松散的细胞团。
体细胞胚:又叫胚状体,是指离体条件下没有经过受精过程而形成的胚胎类似物。
其发生途径是指体细胞在离体培养的过程中经历了胚胎发育过程,起源于非合子细胞。
发生实质是细胞再分化。
人工种子:含义为将植物离体培养产生的体细胞胚或芽包埋在含有营养成分和保护功能的人工胚乳和人工种皮中,在适宜条件下发芽出苗的颗粒体,即人工种子。
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细胞工程实验小结
专业:生物技术班级:0801 姓名:励丹学号:30804305
在本次暑期短学期的细胞工程实验课上,我们做了细胞工程中基础的几个实验——饲养层细胞的制备、动物细胞的原代培养(组织块法培养小鼠肝脏细胞,消化法培养小鼠肾脏细胞)、免疫脾细胞的制备、免疫脾细胞与骨髓瘤细胞的融合、细胞的超低温冻存与复苏及活性测定(MTT法检测)、抗体IgG的检测(ELISA 法),让我受益菲浅。
其中很多知识在平时的学习中都是无法学习到的,其中很多实验都开阔了我们的视野,让我们获得了许多平时课堂上得不到的知识。
在细胞工程实验课即将结束的时候,我对这个短学期的学习进行总结,总结细胞工程课程试验来的收获与不足。
这次的实验分成了8个小组,因为细胞工程的实验都须在无菌室内进行,而无菌室较小,所以各小组轮流进无菌室进行实验操作,故没轮到进无菌室的小组在外面的实验室进行简单的操练,所以较为轻松。
我们中的大多数人都是第一次进无菌室,对无菌室充满了好奇。
而进无菌室也需要一重重地灭菌,以确保无菌室内的安全。
首先需要用新吉尔灭溶液对需要带进无菌室的物品及我们的手进行消毒灭菌,然后进入缓冲间穿戴无菌服、帽、手套及口罩。
在进入无菌室后还需要用酒精棉擦拭手、超净台以及一些物品。
在无菌室内的操作都需在超净台上进行,而且需要在酒精灯边上进行,不可以远离超净台,否则可能使培养的细胞或培养液等受到污染,从而造成实验失败。
我们小组在细胞培养的实验中较为成功,细胞生长状态良好,没有出现染菌现象。
在进行细胞超低温冻存于复苏实验时,我们组将两只小鼠的细胞混在一起,是的细胞数增加,相对的在冻存中损伤的细胞数也增多,这个实验应该算不成功的。
通过9天的细胞工程实验,我发现实验是细胞工程学学的实践,我们学到的许多理论都会最终作用于实验,也学到了许多其他专业课上没有教到的理论。
很多实验都是需要花费许多心思去学习的,也是非常复杂的。
我们学习理科的同学,更加要重视实验课,因为理论与实际结合是最重要。
在每次实验之后,我们都要做实验报告,通过实验讲义和自己参阅资料,得知本次实验的目的、原理、所需仪器、实验步骤、实验中的要求及注意事项等问题。
实验操作当然是细胞工程
实验的核心。
经过了这次的实验,我发现做实验有许多需要注意的地方,掌握了这些技巧才能让实验结果变的更加准确和方便。
做实验的时候,一定要集中精神,尤其是细胞培养的实验都需要在无菌室内进行,操作不当就容易造成污染,使得实验失败,甚至会感染别组的实验,因此集中注意力是相当重要的。
其次,做实验时要有足够的耐心和定力,不能毛毛草草敷衍了事。
最后,一定要知道实验的注意事项,什么是不能做的,在做实验时候我们就不能过于自私,把材料全部浪费完致使后面的同学无法试验。
更重要的是要学会团队精神要学会照顾别人的感受。
当然做完实验之后一定要还原好试验环境,不能做完了就拍拍屁股走人,这是一名大学生应有的素质。
总之在实验中需要注意的事情还有很多。
实验完成之后自然是数据处理和实验报告。
实验数据是对实验分析的依据,切不可因为相多得几分就伪造虚填试验结果。
不光要真实的填写试验结果,还要对试验结果进行反思和总结。
当然,我也发现了我存在的很多不足。
我的动手能力还不够强。
当有些实验需要比较强的动手能力的时侯我还不能从容应对,实验就是为了让你动手做,去探索一些你未知的或是你尚不是深刻理解的东西。
现在,大学生的动手能力越来越被人们重视,光会背书是远远不够的,我们的学习方式还有待改善。
和老师的交谈中我也了解了很多信息,有很多的感慨,这是让我受益的另一方面。
总之,这9天的细胞工程实验课让我收获颇丰,也发现了自身的许多不足的地方。
我会将在实验中学习到的东西发挥到更多的地方去,也将在今后的学习和工作中不断提高、完善自我。
在今后的学习、工作中取得更大的收获,在将来毕业的时候能够成为一个对社会有更大贡献的人才。