不同温度对小鼠肾脏急性缺血再灌注损伤的影响
小鼠急性缺血-再灌注肾损伤模型的建立及体会
小鼠急性缺血-再灌注肾损伤模型的建立及体会吴建国;张丹;吴新胜;吴建新;周强【期刊名称】《医学信息（中旬刊）》【年(卷),期】2007(020)012【摘要】目的观察应用小鼠制备急性缺血一再灌注性肾损伤模型的效果.方法应用微型动脉夹夹闭小鼠双侧肾动脉制备急性缺血一再灌注肾损伤模型,其中两组分别于术后24 h 48 h后处死观察肾功能及肾脏病理变化,另一组观察其病情及存活情况14天.结果各次造模成功率均达85%以上;术后24 h及48 h实验组血清肌酐(Scr)和血尿素氮(BuN)水平明显升高,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01);实验组肾脏外观出现典型"大白肾" 表现,镜下出现典型急性肾小管坏死表现,并有较多炎症细胞浸润,肾小管组织学评分与对照组比较差异有统计学意义(P均<0.01);实验组在观察期间逐渐出现典型急肾衰竭表现,至14天末,死亡率达91.7%,而对照组全部正常存活.结论应用微型动脉夹夹闭小鼠双侧肾动脉可制备稳定急性缺血一再灌注肾损伤模型,而且成功率较高.【总页数】3页(P1103-1105)【作者】吴建国;张丹;吴新胜;吴建新;周强【作者单位】哈尔滨医科大学附属肿瘤医院黑龙江省肿瘤医院,哈尔滨,150040;哈尔滨医科大学附属肿瘤医院黑龙江省肿瘤医院,哈尔滨,150040;哈尔滨医科大学附属肿瘤医院黑龙江省肿瘤医院,哈尔滨,150040;哈尔滨医科大学附属肿瘤医院黑龙江省肿瘤医院,哈尔滨,150040;哈尔滨医科大学附属肿瘤医院黑龙江省肿瘤医院,哈尔滨,150040【正文语种】中文【中图分类】R332【相关文献】1.小鼠急性缺血-再灌注肾损伤模型的建立及体会 [J], 李广宇;周南;王利民;黄有林;吴陈喾;刘华锋2.缺血再灌注及顺铂诱导小鼠急性肾损伤模型的建立及评估 [J], 姜燕;王葳;李泽争;程劲;王巍巍;张金元3.急性缺血-再灌注肾损伤小鼠肾组织Caspase-1蛋白表达及酶活性变化 [J], 刘付捷;刘华锋;陈孝文4.lncRNA-XIST在小鼠急性缺血再灌注肾损伤中的表达情况 [J], 李欢;郭涛;王鹏波5.FVB小鼠急性缺血再灌注肾损伤中CHOP蛋白作用的探讨 [J], 张军力;陆春来;郑丰;刘风因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
小鼠缺血再灌注
小鼠缺血再灌注（实用版）目录1.小鼠缺血再灌注的背景和意义2.小鼠缺血再灌注的实验方法和操作步骤3.小鼠缺血再灌注的实验结果和分析4.小鼠缺血再灌注的结论和展望正文一、小鼠缺血再灌注的背景和意义小鼠缺血再灌注是指在小鼠体内某一部位发生缺血后，再通过灌注使其恢复血流。
这一过程在生物医学研究中具有重要意义，因为它可以模拟人类某些疾病的发生过程，如心肌梗死、脑卒中等。
通过研究小鼠缺血再灌注，可以深入了解缺血后再灌注对组织和器官的影响，为临床治疗提供理论依据。
二、小鼠缺血再灌注的实验方法和操作步骤1.实验动物选择：选用健康成年小鼠，分为实验组和对照组。
2.制备缺血模型：将实验组小鼠放入灌注装置中，通过调整灌注流量和时间，使小鼠某一部位（如心肌、脑组织等）发生缺血。
3.观察缺血程度：通过检测相关生理指标（如心率、血压、血氧饱和度等），评估小鼠缺血程度。
4.再灌注操作：在观察到缺血程度达到预设值后，恢复灌注流量，使缺血部位重新获得血流。
5.观察再灌注效果：通过检测生理指标，评估再灌注对小鼠的影响。
三、小鼠缺血再灌注的实验结果和分析实验结果显示，在缺血发生后，小鼠的心率、血压、血氧饱和度等指标会发生明显变化。
再灌注后，这些指标会逐渐恢复到正常水平。
但不同缺血时间和程度的小鼠，再灌注后的恢复情况有所不同。
通过对实验结果的分析，可以得出以下结论：1.缺血再灌注对小鼠的组织和器官具有一定的保护作用，能够减轻缺血带来的损伤。
2.缺血时间和程度的不同，再灌注的效果有所差异，提示再灌注治疗需要个体化。
四、小鼠缺血再灌注的结论和展望总之，小鼠缺血再灌注实验为研究缺血后再灌注的生物学效应提供了一个有效模型。
通过对这一模型的深入研究，可以为临床治疗缺血性疾病提供理论依据和技术支持。
小鼠肾脏急性缺血再灌注损伤不同时间点基因表达谱的差异
小鼠肾脏急性缺血再灌注损伤不同时间点基因表达谱的差异黄凝;仓静;薛张纲;王浩【摘要】Objective:To analyze the stage‐specific differences in gene expression of mouse kidneys insulted by ischemia reper‐fusion(IR)injury .Methods:Mouse kidney tissues were collected at 4 h and 24 h after IR .Total RNA of control and IR kidneys were prepared for Microarray and real‐time fluorescence quantitative reverse transcription polymerase chain reaction(RT‐qPCR) analysis .Results:The number of differential expressed genes(DEGs) at 24 h after IR was larger than that at 4 h .The DEGs at 4 h were associated with metabolism and stress responses ,while the DEGs at 24 h were associated with inflammation and apop‐tosis .The numbers ofup‐regulated genes at both 4 h and 24 h were larger than those of down‐regulated gene s .Several down‐regulated ,up‐regulated ,or unchanged genes were confirmed by RT‐qPCR .Conclusions:Stage‐specific changes of gene expres‐sion occurres during IR injury .These DEGs at early or intermediate‐late stages of IR injury are tightly associated with their stage‐specific pathophysiological processes .%目的：探讨小鼠肾脏急性缺血再灌注损伤不同时间点基因表达谱的差异。
不同方式后处理对大鼠缺血再灌注肾脏的影响的开题报告
不同方式后处理对大鼠缺血再灌注肾脏的影响的开题报告
背景介绍：
缺血再灌注（IR）是指组织或器官在缺血后恢复血流。
这种情况常见于临床上重大手术、心脏血管手术等情况下。
IR评价的标准方法是通过检测血浆肌酐的浓度来评
估肾功能的损害程度。
然而，肾脏的损害不仅仅体现在肌酐表现上，而且还包括水肿、细胞死亡、氧化应激等多个方面。
因此，我们需要采用更多的指标来评价肾脏IR的损伤程度。
此外，各种后处理方法也对IR损伤的恢复有不同的影响。
本文旨在通过对不同的后处理方式对大鼠缺血再灌注肾脏损伤的影响进行研究。
研究问题：
不同方式后处理对大鼠缺血再灌注肾脏的影响是什么？
研究方法：
将大鼠随机分为三个组别：对照组、IR组和后处理组。
IR组和后处理组的大鼠
均将进行缺血再灌注肾脏操作。
后处理组将采用不同的处理方式进行处理，例如药物
治疗、热刺激等方法。
在术后一定时间后，用细胞学和生物化学等指标来评估和比较
各组大鼠的损害程度和损伤恢复情况。
预期结果：
后处理组相对于IR组，肾脏IR损伤程度可能会得到一定的缓解，例如细胞死亡率、组织水肿情况得到改善。
不同的后处理方式可能会对肾脏恢复产生不同的影响，
热刺激也许能够缓解损伤程度，而有些治疗方法则有助于加快损伤恢复。
结论：
后处理对大鼠IR肾脏的损伤程度和恢复情况产生着重要的影响。
本研究结果可
以为IR相关的肾脏疾病治疗提供新的思路和方法。
小鼠缺血再灌注
小鼠缺血再灌注
小鼠缺血再灌注（I/R）是一种实验模型，用于研究组织缺血引起的损伤以及血液再灌注对损伤的影响。
这一模型通常用于心血管疾病、脑卒中、肝脏和肾脏等器官的研究。
操作步骤通常包括以下几个阶段：
1.缺血阶段：通过暂时封闭（结扎）或阻断（通过其他方法）血
管，以模拟组织缺血。
这可以在不同的器官中进行，比如通过
结扎冠状动脉来模拟心肌缺血，或者结扎肾动脉来模拟肾脏缺
血。
2.再灌注阶段：在一定时间后，重新开通或恢复血液供应，模拟
组织再灌注。
这一步骤旨在模拟血流的恢复，但在一些情况下，
再灌注本身也可能导致组织损伤。
3.取样和分析：小鼠通常在不同的时间点被处死，组织样本被取
出以进行各种生化、组织学和分子生物学分析，以评估缺血再
灌注对组织的影响。
小鼠缺血再灌注模型可以用于研究相关疾病的机制、开发治疗策略以及评估药物的疗效。
例如，这个模型可以用于研究心肌梗死、脑卒中、肾功能损伤等疾病。
在进行这种类型的实验时，需要确保符合伦理和动物福利的要求，并遵循实验室和国家的相关规定和指南。
研究人员应该采取适当的措施来减少动物的痛苦和苦恼。
芬戈莫德对肾缺血再灌注损伤模型小鼠的肾保护作用及其机制研究
芬戈莫德对肾缺血再灌注损伤模型小鼠的肾保护作用及其机制研究目的：研究芬戈莫德对肾缺血再灌注损伤（RIRI）模型小鼠的肾保护作用及其机制。
方法：将60只小鼠随机分为假手术组、模型组、芬戈莫德组（1 mg/kg）和芬戈莫德+wortmannin组[芬戈莫德1 mg/kg+磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）特异性阻滞药wortmannin 1.4 mg/kg]，每组15只。
除假手术组外，其余3组小鼠均建立RIRI模型，术前24 h一次性经尾静脉注射相应的药物。
再灌注24 h后收集每组小鼠血清，使用全自动生化分析仪测量各组小鼠血清中血肌酐（Scr）和尿素氮（BUN）水平；光镜下观察肾组织病理变化；Western blot法检测肾组织中细胞间黏附分子1（ICAM-1）、单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）、磷酸化蛋白激酶B（p-Akt）蛋白的表达。
结果：与假手术组比较，模型组小鼠血清中Scr和BUN 水平明显升高（P＜0.01）；肾组织出现病理性改变，肾小管上皮细胞坏死，炎性细胞浸润；肾组织中ICAM-1和MCP-1蛋白表达水平明显升高（P＜0.01），p-Akt 蛋白表达水平轻微升高（P>0.05）。
与模型组比较，芬戈莫德组小鼠除肾组织中p-Akt蛋白表达水平明显升高（P＜0.01）外，其余指标均明显改善（P＜0.01）。
与芬戈莫德组比较，芬戈莫德+wortmannin组小鼠的上述指标变化均逆转（P＜0.05或P＜0.01）。
结论：芬戈莫德能减轻RIRI模型小鼠的肾损伤，其机制可能与激活PI3K/Akt信号通路有关。
ABSTRACT OBJECTIVE：To study the protective effect of fingolimod on renal ischemia reperfusion injury （RIRI）model mice and its mechanism. METHODS：A total of 60 mice were randomly divided into sham operation group，model group，fingolimod group （1 mg/kg）and fingolimod+wortmannin group [fingolimod 1 mg/kg+phosphatidylinositol 3-kinase （PI3K）specific blocker wortmannin 1.4 mg/kg]，with 15 mice in each group. Except for sham operation group，RIRI model was induced in other 3 groups，and those model mice were given relevant medicine via caudal vein at once 24 h before surgery. Serum of mice were collected in each group after 24 h perfusion. Serum levels of Scr and BUN were measured by automatic biochemical analyzer. The pathological changes of renal tissue were observed under light microscope. The protein expression of intercellular cell adhesion molecule-1 （ICAM-1），monocyte chemoattractant protein-1（MCP-1）and phosphorylated protein kinase B （p-Akt）in renal tissue were measured by Western blot assay. RESULTS：Compared with sham operation group，the serum levels of Scr and BUN in model group were increased significantly （P＜0.01）. Pathological changes were found in the kidney，and RIRI led to widespread renal tubular epithelial cell injury，apoptosis and inflammatory cells infiltration. The protein expression of ICAM-1 and MCP-1 in renal tissue were increased significantly （P＜0.01），the protein expression of p-Akt was increased slightly （P>0.05）. Compared with mo- del group，other indexes of fingolimod group were improved significantly （P＜0.01）except that the protein expression of p-Akt in renal tissue was increased significantly （P＜0.01）. Compared with fingolimod group，above indexes of fingolimod+wortmannin group were reversed （P＜0.05 or P＜0.01）. CONCLUSIONS：Fingolimod can obviously ameliorate renal injury induced byRIRI in mice，the mechanism of which may be associated with the activation of PI3K/Akt signaling pathway.KEYWORDS Fingolimod；Renal ischemia reperfusion injury；Mice；Phosphatidylinositol 3-kinase；Phosphorylated protein kinase B肾缺血再灌注损伤（RIRI）是临床常见的病理过程，如处理不及时可能使多个脏器受累。
小鼠肾脏缺血再灌注损伤模型
小鼠肾脏缺血再灌注损伤模型缺血再灌注损伤(IRI)是器官移植、休克、动脉搭桥术后等普遍存在的问题。
肾脏是发生IRI极为常见的器官之一，尤其肾移植，不可避免的要经历一定程度的IRI,肾脏缺血再灌损伤是急性肾衰的常见原因。
对麻醉动物的肾动脉进行阻断和再通后，可引起肾脏缺血再灌注损伤。
在缺血再灌注过程中，钙超载、线粒体能量合成障碍、氧自由基的增多等因素导致肾小管内皮细胞脱落，肾脏组织结构的破坏进而使肾脏功能发生障碍。
1.实验动物SPF级Balb/C小鼠，雄性，周龄为4w~6w，体重为20g~22g。
2.实验分组：实验分组：正常对照组、模型组、阳性药组、受试药组，每组15只动物。
3.模型周期24h、72h4.建模方法1. 选取20-22g左右小鼠，术前禁食12h，自由饮水。
2. 3％戊巴比妥钠(80mg／kg)腹腔注射麻醉,小鼠背部去毛，消毒备皮。
3. 在背部脊椎旁0.5cm、肋骨下缘0.5cm处剪开皮肤及肌肉，可见到肾脏,小心分离出两侧肾脏的肾动脉，迅速用动脉夹夹闭两侧肾动脉。
4. 缺血45min后松开动脉夹，恢复血流，观察肾脏恢复情况。
5. 分两层缝合开口,待小鼠清醒后，将其放回洁净笼具后放回饲养室饲养，定期观察小鼠状态及死亡情况并做好记录。
6. 对照组不做缺血处理，其他操作相同。
7. 分别取再灌注0h、3h、6h、12h、24h、72h六个时间点取材。
麻醉小鼠，摘眼球取血，室温静置2h后于4℃3000r离心10分钟提取血清，放入-80冰箱冻存。
同时取左肾组织留作病理标本，右肾组织分生标本。
5.模型的评价1 血清生化指标检测：取各时间点（0h、1h、3h、6h、12h、24h、72h)血清，检测血清BUN（尿素氮）和Scr（血肌酐）水平,评估肾功能。
2 肾系数检测摘取双侧肾脏后，生理盐水冲洗，称重计算肾系数。
肾系数=双侧肾重（mg）/体重（g）3 病理组织学检测：4％多聚甲醛溶液固定48h。
常规组织脱水、透明、浸蜡、包埋。
肾功能不全小鼠心肌缺血再灌注损伤加重及机制：心肌脂联素信号通路受损
肾功能不全小鼠心肌缺血/再灌注损伤加重及机制：心肌脂联素信号通路受损研究背景慢性肾脏疾病是世界性的大众健康问题，其与心血管疾病的发病率和死亡率升高密切相关。
慢性肾脏疾病并发心血管疾病的危害日趋严重。
慢性肾脏病患者心肌梗死的发生率是正常人的2倍。
所以，防治慢性肾脏疾病对心血管系统的损伤是必须解决的首要课题。
脂联素是一种脂肪来源的30kDa细胞因子，具有降低炎症反应、促进能量代谢、以及保护心血管的作用。
脂联素在血液中主要存在形式有：脂联素三聚体、全长脂联素、高分子量脂联素。
在常见疾病如：高血压、冠心病等中，血清脂联素水平较低。
以往研究证实：MI/R后脂联素水平下降，且脂联素通过减轻氧化/硝化应激保护I/R心肌。
然而，慢性肾功能不全患者血浆脂联素水平升高，肾功能不全伴发的心血管并发症的发病率和死亡率也明显升高。
到目前为止，脂联素对慢性肾脏疾病并发心血管疾病的作用及机制没有阐明。
研究目的⒈观察肾功能不全小鼠动物模型血、尿脂联素的动态变化及I/R对肾功能不全小鼠心肌的作用。
⒉阐明脂联素对肾功能不全小鼠I/R心肌的作用及机制。
研究方法⒈肾功能不全模型的建立：动物麻醉后，切除左侧2/3肾脏。
完整保留肾上腺，将剩余的肾脏组织送回腹腔。
动物恢复2周后再次麻醉，完整切除右侧肾脏。
⒉小鼠心肌缺血再灌注模型的建立：小鼠经2%异氟烷麻醉后，用活结丝线结扎小鼠冠状动脉的前降支血管。
30分钟后解开活结，心肌再灌注3小时(心肌凋亡检测)或24小时（心功能检测）。
小鼠心肌缺血再灌注后，用预先置入的丝线再次结扎前降支，然后将2%伊文氏蓝注入小鼠左心室。
⒊外源性补充脂联素方法：野生型小鼠和脂联素敲除鼠部分肾切除术后立即给予随机腹腔注射PBS或gAd(globular adiponectin,gAd)2μg/g,1次/天，连续7天。
⒋生化检验：ELISA法检测肾功能不全小鼠的血、尿脂联素。
第四军医大学西京医院检验科检验部分肾切除术后的血肌酐、尿肌酐、尿素氮、胱抑素、肌酐清除率和尿蛋白。
亚低温上调冷休克蛋白RBM3表达减轻肾脏缺血-再灌注损伤
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器官移植
第 １２ 卷
SOD 活性升高，差异均有统计学意义（均为 P<0.05）。结论 亚低温对肾脏 IRI 具有保护作用，可减轻 IRI 所 致细胞凋亡和氧化应激损伤，其机制可能为亚低温上调 RBM3 及其下游效应分子 YAP1 和 Nrf2 的表达水平。
【关键词】 亚低温；RNA 结合基序蛋白 3（RBM3）；Yes 相关蛋白 1（YAP1）；核因子 E2 相关因子 2（Nrf2）； 肾移植；缺血 - 再灌注损伤；氧化应激；丙二醛（MDA）；超氧化物歧化酶（SOD）
度降低时，生物体会产生一组蛋白来适应环境的变 化，通常我们称此组蛋白为冷休克蛋白。RNA 结合 基 序 蛋 白 3（RNA-binding motif protein 3，RBM3） 是 哺 乳 动 物 重 要 的 冷 休 克 蛋 白， 在 32~34 ℃ 条 件 下 RBM3 的表达量最高 [3]。RBM3 属于应激反应蛋 白，在其 N 段具有 RNA 结合区域，拥有一个保守的 RNA 识别基序，包含两个核糖核蛋白结构域 [4]，在 应激反应中，RBM3 可以结合并改变信使核糖核酸
DOI: 10.3969/j.issn.1674-7445.2021.05.011 基金项目：江西省青年科学基金资助项目（20192BAB215012）；江西省卫生健康委科技计划（20203206） 作者单位：330006 南昌大学第一附属医院器官移植科 作者简介：宋克芹，女，1991 年生，硕士研究生，研究方向为肾移植相关肾缺血 - 再灌注损伤的保护，Email:948667973@ 通信作者：肖琦，男，1985 年生，博士，主治医师，研究方向为肾移植相关肾缺血 - 再灌注损伤的保护，Email：xiaoqidoctor@
机能实验 肾缺血再灌注
影响尿生成的因素和肾缺血再灌注损伤（南方医科大学广州510515）【摘要】目的探究影响肾泌尿功能的因素，探究肾缺血后再灌注对肾的损伤现象。
方法静脉分别补充37℃的生理盐水和20%的高渗葡萄糖，观测平均动脉压，尿量；结扎左肾动脉，一段时间后松开动脉夹再灌注，观测平均动脉压，尿量，血肌酐和尿肌酐含量，计算内生肌酐清除率(Ccr)。
结果补充37℃的生理盐水和20%的高渗葡萄糖尿生成量增加，缺血再灌注后血肌酐浓度增高，尿肌酐浓度降低,内生肌酐清除率(Ccr)明显降低。
结论增加血容量，肾滤过血液增多，尿生成增加；注射高渗溶液增加肾小管内原尿浓度，尿生成量增加；缺血再灌注后肾排泄能力降低，肾的功能受损。
【关键词】尿生成；肾缺血再灌注损伤；尿肌酐；内生肌酐清除率肾是机体主要的排泄器官之一，探究影响肾泌尿功能的因素有助于利尿药等干预肾脏功能药物的研发；肾缺血再灌注(Ischemic reperfusion，I／R)损伤是临床上常见的病理过程，在肾脏手术、肾移植和体外震波碎石等过程中，均可发生不同程度的再灌注损伤，它是急性肾衰最常见的原因，因此探究肾的缺血再灌注这一病理现象具有重要意义。
肾缺血再灌注时，内生肌酐清除率（Ccr）明显降低，肾功能受损.本实验通过复制肾脏缺血再灌注损伤的模型，对肾脏缺血再灌注损伤后血肌酐和尿肌酐的含量，以及内生肌酐清除率（Ccr）进行测定，来探究肾脏的缺血再灌注损伤。
1 材料与方法1.1 实验材料动物：家兔器材：医用计算机记录系统，家兔手术台，哺乳动物手术器械，压力换能器，动脉静脉插管，三通管，注射器，兔绳，分光光度计，恒温水浴箱。
药品与试剂：20%乌拉坦，0.2%肝素，生理盐水，20%葡萄糖溶液，速尿，肌酐测定试剂。
1.2 探究影响尿生成的因素的方法[1]家兔称重后用20%乌拉坦耳缘静脉麻醉，麻醉后将家兔仰卧位固定在兔台上。
家兔颈部剪毛，沿甲状软骨下正中剪开皮肤5cm，分离右侧颈总静脉和左侧颈总动脉。
低温环境复灌对兔肾缺血-再灌注损伤保护作用的实验研究
第９卷第５期２０１８年９月Ｖｏｌ． ９ Ｎｏ． ５ Ｓｅｐ． ２０１８器官移植Ｏｒｇａｎ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ【摘要】 目的 探讨建立兔肾缺血低温环境、常温环境及高温环境再灌注损伤模型的新方法，并评价低温环境复灌对兔肾缺血-再灌注损伤（IRI ）的影响。
方法 将60只健康新西兰兔随机分为5组：对照组（A 组）、假手术组（B 组）、低温环境复灌组（C 组）、常温环境复灌组（D 组）、高温环境复灌组（E 组），每组 12只。
术后7 d 内每日检测各组兔的血清肌酐（Scr ）、血尿素氮（BUN ）水平；术后1 d 检测各组兔肾组织内丙二醛（MDA ）含量和超氧化物歧化酶（SOD ）活性；术后1 d 采用苏木素-伊红（HE ）染色观察肾组织病理学变化；术后1 d 采用dUTP 缺口末端标记（TUNEL ）染色评价细胞凋亡。
结果 术后1 d ，与A 组和B 组比较，C 、D 和E 组兔的Scr 和BUN 水平均升高（均为P <0.01）；与C 组比较，D 组和E 组兔的Scr 和BUN 水平升高更明显（均为P <0.05）。
术后7 d 内，C 、D 和E 组兔的Scr 和BUN 水平呈下降趋势。
与D 组和E 组比较，C 组兔的Scr 和BUN 水平较低（均为P <0.05）。
与A 组和B 组比较，C 、D 和E 组的MDA 含量均升高，SOD 活性均降低（均为P <0.01）；与C 组比较，D 组和E 组的MDA 含量升高更明显，SOD 活性更低（均为P <0.01）。
术后1 d 肾组织病理学检查示A 组和B 组肾组织形态结构正常，D 组和E 组损伤表现明显，与D 、E 组比较，C 组损伤较轻。
TUNEL 染色结果显示，D 组和E 组肾小管上皮细胞阳性细胞明显增多，管腔内也可见到阳性细胞，C 组阳性细胞数量较D 组和E 组明显减少。
结论 冰泥覆盖肾脏、37 ℃生理盐水及40 ℃生理盐水连续滴加肾脏可建立不同温度环境复灌模型。
亚低温与甘露醇在小鼠脑缺血再灌注中
亚低温与甘露醇在小鼠脑缺血再灌注中对脑保护作用的实验研究王洪顺(浙江大学医学院临床医学系)【摘要】目的：探讨亚低温与甘露醇在小鼠脑缺血再灌注中对小鼠大脑的保护作用。
方法：采用动脉夹夹闭小鼠两侧颈总动脉的方法制造脑缺血模型，并对小鼠分组用甘露醇、亚低温以及两者联合进行处理。
通过对不同小组小鼠行为学测试以及大脑海马区细胞凋亡数目计算来评价小鼠脑部损伤的严重程度。
结果：小鼠在实验后，甘露醇处理组、亚低温处理组以及两者一起处理组小鼠与未处理组小鼠相比运动能力都有明显提高(p<0.05)。
TUNEL染色以及Nissl染色显示甘露醇处理组、亚低温处理组以及两者一起处理组小鼠用。
【关键词】缺血,灌注;甘露醇,压低温;TUNEL染色;Nissl染色;SODThe protective function of hypothermia and mannitol in cerebral ischemia-reperfusion mouseWANG Hong Shun(Department of Clinical Medicine, Zhejiang University School of Medicine)【ABSTRACT】AIM: To investigate the function of the hypothermia and the mannitol in the在我国，缺血性脑血管病是严重威胁人们健康的主要疾病之一，因而越来越多的学者开始关注脑缺血的机制以及脑缺血的预防措施及治疗措施。
现已证明亚低温治疗对脑缺血有保护作用，且治疗越早，降温速度越快，治疗效果越好；亚低温持续时间因脑缺血损伤的程度而定，长时程亚低温治疗疗效优于短时程。
目前临床广泛应用脱水降颅内压药物甘露醇治疗缺血性脑卒中疗效显著，但同时应用亚低温与甘露醇治疗脑缺血的方法尚有待研究。
本实验就这一问题进行研究与讨论。
浙江大学实验动物饲养中心提供。
亚低温对大鼠脑缺血再灌注损伤后热休克蛋白70表达及细胞凋亡的影响
亚低温对大鼠脑缺血再灌注损伤后热休克蛋白70表达及细胞凋亡的影响华正宇;张春蕾【摘要】[Objective] To observe the effect of mild hypothermia on expression of heat shock protein 70 ( HSP70) after focal cerebral ischemia and reperfusion injury in rats, and to explore the protection mechanism for neuron of mild hypothermi-a. [ Methods ] The rats were randomly divided into normal group, sham - operation group, normothermiaischemia/reper-fusion group and hypothermia ischemia/reperfusion group. The focal cerebral ischemia/reperfusion models of rats were induced by line bolt. After ischemia for 2 hours, reperfusion at middle cerebral artery was performed for 3 , 6, 12, 24, 72 h and 7 d, then the rats were killed. Sub - hypothermia at focal side was performed 30 min after ischemia for 4 h. Pathological changes were observed under microscope. The expression of HSP70 was detected with immunohistochemistry. The apop-tosis was detected with TUNEL. [ Results] No obvious pathological changes were observed in normal group and sham - operation group. There were obvious infarction region with lots of neuron necrosis in normothermia ischemia/reperfusion group, but no obvious infarction region with neuron necrosis in hypothermia ischemia/ reperfusion group. No or little expressionsof HSP70 were detected in normal group and sham - operation group. High expressions of HSP70 were detected in normo-thermia ischemia/reperfusion group. The expressions of HSP70 in hypothermiaischemia/reperfusion group were lower obviously than that in normothermia ischemia/reperfusion group at corresponding time spots (P < 0. 05). The apoptotic cells increased gradually with the elongation of reperfusion time and reached the peak till the 72 h. The apoptotic cells in hypothermia ischemia/reperfusion group were fewer than those in normothermia ischemia/reperfusion group(P <0. 05). [Conclusion ] Mild hypothermia can protect neurons at the cerebral ischemia - reperfusion injury in rats by inhibiting neuron apop-tosis and reducing the protective expression of HSP70.%[目的]观察亚低温对大鼠局灶脑缺血再灌注损伤后热休克蛋白70 (HSP70)表达的影响,探讨亚低温对脑神经细胞保护作用的机制.[方法]将SD大鼠随机分为正常组、假手术组、常温缺血组和亚低温缺血组.应用大脑中动脉线栓法(MCAO)建立大鼠局灶脑缺血再灌注模型,于缺血2h再灌注,再灌注后3、6、12、24、72 h和7d处死.其中亚低温组大鼠于缺血后30 min实施病灶侧脑亚低温并持续4h.采用HE染色观察神经细胞形态学改变,免疫组化法检测脑组织HSP70表达,TUNEL法检测凋亡细胞.[结果]正常组及假手术组均未见明显病理改变；常温缺血组梗死灶明显,大量神经元坏死消失；亚低温缺血组未见明显梗死灶,但可见神经元固缩.正常组及假手术组未见或偶见HSP70阳性细胞；常温缺血组HSP70阳性细胞较多；与常温缺血组相比亚低温缺血组在相应时间点均明显减少(P＜0.05).常温缺血组TUNEL阳性细胞数随再灌注时间的延长而逐渐增多,至72 h 达高峰；与常温缺血组相比,亚低温缺血组各时间点均明显减少(P＜0.05).[结论]亚低温对大鼠缺血再灌注损伤脑有保护作用,通过降低HSP70的表达和减少细胞凋亡可能是其保护机制之一.【期刊名称】《大连医科大学学报》【年(卷),期】2012(034)001【总页数】5页(P42-46)【关键词】亚低温;脑缺血再灌注损伤;热休克蛋白70;TUNEL【作者】华正宇;张春蕾【作者单位】大连医科大学附属第一医院病理科,辽宁大连 116011;大连大学附属中山医院中心实验室,辽宁大连 116001【正文语种】中文【中图分类】R363脑缺血再灌注损伤是一个复杂的病理生理过程，近几年来许多临床研究报告肯定了亚低温的脑保护作用[1]。
13975466_普罗布考对小鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用与机制
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第 38 卷第 5 期
2017 年 5 月
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38 No.
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May 2017
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普罗布考对小鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用与机制
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淼1,张
雷1,赵春芳1,李
莉1,张亚楠1,任广伟2*
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河北医科大学基础医学院组织胚胎学教研室,河北 石家庄 050017;
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热缺血时间对小鼠肾脏缺血再灌注损伤后肾功能的影响
热缺血时间对小鼠肾脏缺血再灌注损伤后 肾功能的影响陈牧1沈海波2李欣燕3李权4钱苏波21上海交通大学医学院附属新华医院心血管内科，上海200092;2上海交通大学医学院附属新华医院泌尿外科，上海 200092;3上海交通大学药学院，上海 200240;4同济大学附属上海市第四人民医院泌尿外科200081通信作者：钱苏波，Email:qiansubo@【摘要】目的探讨热缺血时间对小鼠肾脏缺血再灌注损伤（IRI)后肾功能的影响及与肾脏损伤分子丨（K1M-1)的关系.：方法选取雄性C57BL/6小鼠36只，异氟烷吸人麻醉下阻断双侧肾蒂血管，建立双侧肾脏IR I模型t根据肾缺血时间将小鼠分为四组，即假手术组（Sham 组）、阻断28 min组(28 Min组）、30 min组（30.Min组）和32 min组.(32Min组）。
术后动态监测各组血清肌酐（Scr)和血尿素氮（BUN)的变化_术后48h取肾脏组织行Western I—和免疫荧光染色法检测近端肾小管细胞（PTCs)中!UM-l的表达：术后6周取肾脏组织行苦味酸-天狼星红染色法检测小鼠肾纤维化程度。
结果除Sham组外，其余各组小鼠均出现术后Sci•及BUN升高，Sc r和BUN的达峰时间为24 h，随后缓慢下降，至术后2周达稳定水平1R I急性期评估提示，除Sham组外，其余各组小鼠术后々S h P T C s表达KIM-1明显上调，且K1M-1的表达量与肾损伤程度及热缺血时间成正比慢性期评估表明，Sham组和28 Mm组术后6周无明显肾纤维化，而30 Min组和32 Mm组出现明显肾脏纤维化，且纤维化程度随热缺血时间的延长而加重。
术后6周观察期内，Sham组、28 Min组和30 Min组均无小鼠死亡，而32 Min组有50%小鼠死亡。
结论小鼠肾脏m i的损伤程度随热缺血时间的延长而加重。
IR I导致的轻微肾损伤是可逆的，急性期后肾功能可逐渐恢复正常，而严重的肾损伤会明显增加小鼠病死率，且会长期影响肾功能，KIM-1吋用于监测IR1引起的肾损伤，并评价肾脏损伤的严重程度；【关键词】再灌注损伤；肾；模型，动物；小鼠；热缺血基金项目：上海市青年科技英才扬帆计划（19YFI431900)D0I ： 10. 3760/cma. j. cn431460-20191025-00006Effect of warm ischemia time on renal function after renal ischemia-reperfusion injury in mice Chen Mu', Shen Haibo2, Li Xinyan, Li Quan4 , Qian Subo2'Department o f Cardiology .Xinhua Hospital, School o f Medicine, Shanghai Jiaotong University, Shanghai 200092 , China ；2 Department o f Urology .Xinhua Hospital, School o f Medicine ^Shanghai Jiaotong University, Shanghai 200092, China'^School o f Pharmacy, Shanghai Jiaotong University, Shanghai 200240, China \4Department of Urology, Shanghai Fourth Peoples Hospital Affiliated to Tongji University School o f Medicine ^Shanghai 200081, ChinaCorresponding author： Qian Subo,Email：qiansubo@xinhuamed. com. cnAbstract Objective To investigate the influence of different warm ischemia time on renal function after renal ischemia-reperfusion injuiy in mice and its correlation with kidney injuiy molecule-1(KIM-1 ) , so as to assisting urologists lo optimize the time of renal arteiy occlusion during the surgery of partial nephrectomy. Methods A total of 36 male C57BIV6 mice were divided randomly into4 groups (Sham, 28 Min, 30 Min and 32 Min) according to different renal pedicle occlusion duration. Serum creatinine (Scr) and blood urea nitrogen ( BUN) were monitored before surgery, and at eachtime-point of 24 hours, 72 hours and weekly from 1week to 6 weeks after the surgeiy. Western blot and ininiun〇nuoreseence staining were used to detect the KIM-1 expression in kidney proximal tubular cells (PTCs) in the acute phase of 48 hours post the procedure. Picrosirius red staining was used to e- valuate the kidney fibrosis severity as the indii-ator of chronic phase of kidney injury 6 weeks post the surgery. Results A half of mice in the group of 32 Min died within 1week after the surgeiy, while mice in the other groups survived until euthanasia. Phe mice receiving renal pedicle occlusion exhibited incTeased Scr and BUN after the surgen while the sham-operated mice did not. The peak concentration of Scr and BUN both appeared at 24 hours post the surgen-, then decreased gradually till 2 weeks after the surgery and sustained stably thereafter. The peak and steady concentration of Scr and BUN showed a positive correlation with warm ischemia duration. Western blot and immunofluorescence staining showed FrCs presenting KIM-1 promptly and dramatically increased 48 hours post the surgeiy and indicated a [)〇sitive correlation between KIM-1 expression and the warm ischemia duration. Moreover ,picrosirius red staining implicated that the kidney librosis also deteriorated with the extended warm ischemia time. Conclusions The severity of kidney injuiy deteriorates with the extended warm ischemia time. Hie mice surviving the episode of acute kidney injury (AKI) could make a full renal recove r' when the injury in the acute phase is mild. However, AKI is appreciated to he markedly associated with increased risk of future chronic kidney disease and end-stage renal disease wiien the injury is se- \ere. KIM-1 could be used as a biomarker to indicate the ischemia-repe^rfusion injury inducing kidney injury and to evaluate the severity.Key words Reperfusion Injury; Kidney; Models, Animal；Mice；Warm IschemiaFund program ：This ork was Supported by Shanghai Sailing; Program, Shanghai, China (19YF1431900)DOI：10. 3760/cma. j. cn431460-20191025-00006缺血再灌注损伤（丨R I)是指在缺血基础上恢复血流后，不仅不能使组织、器官功能恢复，反而加重 组织和器官的功能障碍，甚至发生不可逆性损伤的现象。
小鼠缺血再灌注
小鼠缺血再灌注摘要：1.研究背景2.小鼠缺血再灌注的实验过程3.实验结果与分析4.实验的意义与应用正文：1.研究背景缺血再灌注是指在组织或器官因缺血而失去血液供应后，重新恢复血液供应的过程。
这一过程在医学领域中具有重要的研究意义，因为它涉及到许多疾病的治疗，如心肌梗死、中风等。
近年来，研究者们对小鼠缺血再灌注的研究取得了显著进展，为我们更深入地理解这一过程提供了宝贵的实验数据。
2.小鼠缺血再灌注的实验过程在本次研究中，研究者选用了健康的成年小鼠作为实验对象。
首先，通过手术将小鼠的股动脉和股静脉结扎，以阻断下肢的血液循环，制造缺血环境。
缺血时间设定为60 分钟，以确保组织发生明显的缺血损伤。
在缺血期结束后，松开结扎，使血液重新灌注到下肢，开始再灌注过程。
实验过程中，通过检测小鼠的血压、心率等生命体征，以及观察组织的颜色、质地等形态学变化，以评估缺血再灌注的效果。
3.实验结果与分析实验结果显示，在缺血期结束后，小鼠的股动脉血压和心率逐渐恢复到正常水平。
在再灌注开始后，小鼠的组织颜色由苍白逐渐变得红润，表明血液灌注逐渐改善。
此外，组织学检查发现，在再灌注过程中，缺血损伤的细胞逐渐恢复，炎性细胞浸润减少，血管通透性降低。
这些结果表明，再灌注对缺血损伤具有一定的保护作用。
4.实验的意义与应用本实验为研究缺血再灌注的生物学机制提供了一个有效的实验模型。
通过对小鼠缺血再灌注的研究，我们可以深入了解缺血再灌注过程中细胞和分子层面的变化，为临床治疗提供新的靶点。
此外，本实验还可以为药物筛选和评价提供一个实验平台，有助于开发更有效的治疗缺血再灌注损伤的药物。
ARNT基因失活对小鼠肾脏缺血再灌注损伤的影响的开题报告
ARNT基因失活对小鼠肾脏缺血再灌注损伤的影响
的开题报告
研究背景：
缺血再灌注损伤（IRI）是一种常见的病理生理过程，它可以在多种季节和严重程度上出现在肾脏中。
小鼠肾脏缺血再灌注损伤是一个广泛使用的模型，它被用于研究肾脏疾病的机制以及开发治疗策略。
研究目的：
本研究旨在探究ARNT（aryl hydrocarbon receptor nuclear translocator）基因在小鼠肾脏缺血再灌注损伤中的作用。
研究方法：
使用Cre-LoxP系统构建ARNT基因敲除的实验小鼠模型，比较野生型和敲除模型之间缺血再灌注损伤的不同。
采用实时PCR、免疫荧光染色、Western blot等技术分析基因和蛋白表达水平的变化。
采用肾功能测定、组织学等方法评价小鼠肾脏损伤程度。
研究预期：
通过研究ARNT基因的作用，可以深入了解肾脏缺血再灌注损伤的分子机制，为开发治疗策略提供新的思路。
同时，本研究也有望为了解ARNT在其他疾病中的作用提供一定的参考。
研究意义：
肾脏缺血再灌注损伤是导致肾脏损伤和功能障碍的重要原因之一，而ARNT是一种重要的转录因子，因此对于肾脏缺血再灌注损伤中ARNT 功能的了解有助于深入了解其病理生理机制，并且可能成为治疗的潜在靶点。
地塞米松抗小鼠肾缺血-再灌注损伤的作用研究
地塞米松抗小鼠肾缺血-再灌注损伤的作用研究张炯;李俊华;张颖;江潮;杨娟;余冲;肖芳;兰小勤;裴广畅;李月强【摘要】目的研究糖皮质激素受体(GR)激动药地塞米松(DEX)对小鼠肾缺血-再灌注损伤的作用及其机制.方法建立小鼠肾缺血-再灌注损伤模型.18只雄性 C57BL/6小鼠随机分为 3组(n＝ 6),分别为假手术(SHAM)组、肾缺血-再灌注损伤模型(IRI)组、地塞米松预处理(DEX)组.SHAM组和IRI组缺血前1 h给予0.9%氯化钠溶液(4 mg·kg-1,腹腔注射),DEX组缺血前1 h给予地塞米松(4 mg·kg-1,腹腔注射),IRI 组和DEX组血管夹夹闭左肾动脉,置于32 ℃温箱后1 h松开血管夹,去除右肾.SHAM组操作同上,但不夹闭左肾动脉.再灌注24 h后处死小鼠,收集血清和肾脏标本.测定血尿素氮(BUN)和血清肌酐(Cr),PAS染色后显微镜下观察肾脏形态学变化,PCR检测单核细胞趋化蛋白(MCP-1)和干扰素(IFN-γ).结果与SHAM组相比,IRI组血清肌酐,血尿素氮明显升高.病理检查可见肾脏内肾小管上皮细胞明显肿胀坏死、蛋白管型形成明显,还可观察到炎症细胞浸润明显增加.PCR显示MCP-1,IFN-γ明显上调.与IRI组相比,DEX组血清肌酐,血尿素氮明显下降,肾小管上皮细胞肿胀坏死减轻,炎症细胞浸润减少,MCP-1、IFN-γ表达降低.结论 GR激动药DEX可通过抑制炎症反应减轻肾缺血-再灌注损伤.【期刊名称】《医药导报》【年(卷),期】2013(032)012【总页数】4页(P1535-1538)【关键词】糖皮质激素激动药;地塞米松;损伤,缺血-再灌注,肾;炎症【作者】张炯;李俊华;张颖;江潮;杨娟;余冲;肖芳;兰小勤;裴广畅;李月强【作者单位】华中科技大学同济医学院附属同济医院肾内科,武汉,430030;华中科技大学同济医学院附属同济医院肾内科,武汉,430030;华中科技大学同济医学院附属同济医院肾内科,武汉,430030;华中科技大学同济医学院附属同济医院肾内科,武汉,430030;华中科技大学同济医学院附属同济医院肾内科,武汉,430030;华中科技大学同济医学院附属同济医院肾内科,武汉,430030;华中科技大学同济医学院附属同济医院消化内科,武汉,430030;华中科技大学同济医学院附属同济医院消化内科,武汉,430030;华中科技大学同济医学院附属同济医院肾内科,武汉,430030;华中科技大学同济医学院附属同济医院肾内科,武汉,430030【正文语种】中文【中图分类】R966肾缺血-再灌注损伤(ischemic reperfusion injury，IRI)是一种常见的临床病理生理过程，常见于主动脉搭桥，心肺和肾移植等手术后[1-3]，具有高发病率和高死亡率[4-6]。
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不同温度对小鼠肾脏急性缺血再灌注损伤的
影响
作者：张晓丽夏世金严震文肖婧张振兴叶志斌
【摘要】目的探讨不同温度对小鼠肾脏急性缺血再灌注损伤（IRI）的影响及其机制。
方法雄性C57BL/6N小鼠随机分为假手术组（sham组）、轻度低温IRI组（LTI）、常温IRI组（NTI）和高温IRI 组（HTI）。
采用夹闭双侧肾蒂35 min再灌注48 h制成IRI模型。
观察IRI小鼠肾脏组织病理学改变，检测肾功能、肾组织丙二醛（MDA）含量和肾小管上皮细胞凋亡数目。
结果与Sham组相比，常温IRI组小鼠发生中等程度肾损伤，其Scr升高〔（237.0±41.2）μmol/L〕，肾组织形态学改变，肾组织中MDA含量升高〔（1.54±0.37）μmol·L-1·mg-1〕，肾小管上皮细胞凋亡数目增加。
高温明显加重小鼠的IRI损伤（P＜0.05），轻度低温对小鼠IRI具有保护作用。
结论缺血阶段体温的高低明显影响小鼠肾IRI的程度，轻度低温可能通过抑制脂质过氧化反应和细胞凋亡对小鼠发挥保护作用；高温则可能通过促进脂质过氧化反应和细胞凋亡加重肾IRI。
【关键词】高温；肾脏；缺血再灌注；凋亡
肾脏是一高灌注器官，对缺血再灌注损伤（ischemia/reperfusion injury，IRI）异常敏感，故IRI成为急性
肾损伤的重要损伤环节〔1〕，也是影响肾移植中移植肾早期功能恢复及长期存活的主要因素〔2〕。
鉴于肾IRI病理生理学机制复杂〔3〕，涉及此方面的研究一直走在移植学研究的前沿。
肾IRI动物模型为急性缺血性肾损伤的发生机制和防治策略研究奠定了基础。
制作肾IRI 动物模型的方法包括双侧肾蒂夹闭、双侧肾动脉夹闭、单侧肾切除+对侧肾动脉夹闭等。
手术方法不同、血管夹闭的时间长短、手术操作过程中温度的控制均对实验结果有着重要影响，尤其是术中温度在此过程中起着不可忽视的作用。
本文通过调控肾缺血过程中小鼠体温，观察不同温度对小鼠肾IRI的影响，以期为临床上辅助治疗IRI的新途径提供实验依据。
1 材料与方法
1.1 实验动物与分组
雄性C57BL/6N小鼠24只，22～26 g（SPF级，中科院上海实验动物中心），随机分假手术（Sham）组、轻度低温IRI组（LTI）、常温IRI组（NTI）和高温IRI组（HTI），每组6只。
1.2 模型制作
2%戊巴比妥钠（50 mg/kg）腹腔注射麻醉小鼠，取腹正中切
口，钝性分离肾蒂，无创动脉夹夹闭双侧肾蒂造成肾缺血，持续夹闭35 min后松开动脉夹，恢复血流，观察1 min，肾脏由暗紫色逐渐转为鲜红色，表明再灌注成功，缝合伤口。
Sham组只分离肾蒂，关腹。
再灌注48 h后，采血并处死小鼠，留取肾组织备用。
LTI组在室温无热板状态下进行手术；NTI组手术在热板上进行，手术过程中每5 min 测1次体温，通过开关调控热板温度，使小鼠体温始终维持在36.0℃～37.0℃之间；HTI组整个手术也在热板上进行，温度不受控制。
体温采用肛温测定法。
1.3 指标检测
1.3.1 肾功能检测
眶下静脉丛采血，分离血清，酶法测定小鼠血清肌酐（Scr）水平（日立全自动生化分析仪）。
1.3.2 肾组织病理学检查
10%中性甲醛固定肾组织，制作石蜡切片，常规HE染色，显微镜下观察肾脏病理改变。
根据肾小管细胞扁平、管腔扩张、细胞脱落坏死、肾小管管型堵塞、间质水肿，炎症细胞浸润及出血等观察肾小管间质损伤情况。