实验三 白砂糖中蔗糖含量的测定
蔗糖检测
蔗糖检测1、检测方法依据标准GB/T5009.8-20082、原理：还原糖可使费林试剂中的Cu2+还原为砖红色的Cu+，稍多的还原糖将蓝色的亚甲蓝指示剂还原为无色，以此得出还原糖的含量。
在一定的酸性条件下，无还原性的双糖被水解为还原糖，然后进行测定，即可得出总糖含量。
总糖含量减掉还原糖含量，即得蔗糖含量。
3、备品：3.1、碱性酒石酸铜甲液：称取15g硫酸铜（CuSO4·5H2O）及0.05g亚甲蓝，溶于水中并稀释至1000ml。
3.2、碱性酒石酸铜乙液：称取50g酒石酸钾钠及75g氢氧化钠，溶于水中，再加入4g亚铁氰化钾，溶解后，用水稀释至1000ml，贮存于橡胶塞玻璃瓶内。
3.3、乙酸锌溶液：称取21.9g乙酸锌[Zn(CH3OO)2·2H2O]，加3ml冰醋酸，加水溶解并稀释至100ml。
3.4、10.6%亚铁氰化钾溶液。
3.5、6mol/L盐酸3.6、葡萄糖标准液：准确称取1.000g干燥至恒重的纯葡萄糖（见说明），加水溶解后加入5ml盐酸，并以水稀释至1000ml。
此溶液每毫升相当于1mg葡萄糖。
3.7、甲基红指示剂：0.1%乙醇溶液。
称取0.1g甲基红溶于100ml60%乙醇中。
3.8、20%氢氧化钠溶液。
3.9、100ml白容量瓶1个3.10、500ml白容量瓶2个 3.11、1000ml白容量瓶1个3.12、125ml白细口瓶5个 3.13、1000ml白细口瓶2个3.14、250ml锥形瓶8个 3.15、玻璃珠约50粒3.16、5ml吸液管4支 3.17、10ml吸液管1支3.18、50ml大肚吸液管1支 3.20、50ml酸式滴定管1支（配铁架台1个）3.21、2500W电热炉1个（配石棉网1片）3.22、恒温水浴箱（室温～100℃可调）1台 3.23、1%电子天平1台4、样品处理：4.1、称取混合均匀的浓缩汁5.00g，(非浓汁25g)置于250ml容量瓶中。
实验三_白砂糖中蔗糖含量的测定
白砂糖中蔗糖分的测定（检糖计法）一、实验目的：1、了解白砂糖中蔗糖分；2、掌握全自动指示检糖计的使用与维护。
二、实验原理蔗糖分子中含有不对称碳原子而具有旋光性，旋光度的大小与蔗糖含量成正比，利用检糖计即可测定出白砂糖中蔗糖的含量。
三、仪器与试剂仪器1、检糖计试剂1、蒸馏水（不含旋光物质）2、容量瓶 100 ml3、烧瓶 100 ml4、旋光观测管5、分析天平四、实验前的准备：1检糖计的校准 2、石英管旋光度的温度校正五、操作步骤:1、溶液的配置：称取样品26.0000克于干燥的小烧杯中，加蒸馏水40-50毫升，使其完全溶解，移入100毫升的容量瓶中，用少量蒸馏水冲洗烧杯及玻璃棒不少于3次，每次倒入洗水后，摇匀瓶内溶液，加蒸馏水至容量瓶刻度标线附近，至少放置10分钟使其达到室温，然后加蒸馏水至容量瓶标线下约1mm处。
有气泡时，可用乙醚或乙醇消除，加蒸馏水至刻度线，充分摇匀。
如发现溶液浑浊，用滤纸过滤，漏斗上需加盖表面皿，将最初10毫升滤液弃去，收集以后的滤液50-60ml。
2、旋光度的测定：用待测的溶液将旋光观测管至少冲洗2次，装满观测管，注意观测管中不能夹带空气泡。
将旋光观测管置于检糖计中，目测检糖计测定5次，读数至0.05°Z；如用自动检糖计，在测定前，应有足够的时间使仪器达到稳定。
测定旋光度数后，立即测定观测管中溶液的温度，并记录至0.1℃3、计算：测定旋光度时环境及糖液的温度尽可能接近20℃，应在15℃-20℃的范围内。
白砂糖样品的蔗糖分P按式(2)或式(3)计算，结果以％表示，计算结果取一位小数。
采用石英楔补偿器的检糖计：P=P1[1+0.00032(t-20)] (2)没有石英楔补偿器的检糖计：P=P1[1+0.00019(t-20)] (3)允许误差：两者测定值之差不应超过其平均值的0.05％.。
测试蔗糖浓度实验报告
一、实验目的1. 了解蔗糖溶液浓度的测定原理和方法。
2. 学会使用旋光仪测定蔗糖溶液的浓度。
3. 掌握实验数据的处理和误差分析。
二、实验原理蔗糖是一种具有旋光性的物质，当蔗糖溶液中的蔗糖分子旋转偏振光时，会产生旋光度。
旋光度的大小与蔗糖溶液的浓度成正比。
通过测量旋光度，可以计算出蔗糖溶液的浓度。
三、实验器材1. 旋光仪一台2. 蔗糖标准溶液（已知浓度）3. 蔗糖溶液（待测浓度）4. 比旋光仪专用比色皿5. 移液管6. 水浴锅7. 计时器四、实验步骤1. 准备工作：将旋光仪打开预热10分钟，使仪器稳定。
2. 标准溶液测定：用移液管准确量取已知浓度的蔗糖标准溶液，加入比色皿中，将比色皿放入旋光仪中，记录旋光度值。
3. 待测溶液测定：用移液管准确量取待测浓度的蔗糖溶液，加入比色皿中，将比色皿放入旋光仪中，记录旋光度值。
4. 比旋光测定：将比色皿放入水浴锅中，恒温后，再次记录旋光度值。
5. 数据处理：根据旋光度值和标准曲线，计算出待测蔗糖溶液的浓度。
五、实验结果与分析1. 标准溶液测定结果：- 蔗糖标准溶液旋光度：α1- 蔗糖标准溶液浓度：C12. 待测溶液测定结果：- 蔗糖溶液旋光度：α2- 蔗糖溶液浓度：C23. 比旋光测定结果：- 蔗糖溶液比旋光度：[α]4. 数据处理：- 标准曲线：根据已知浓度的蔗糖标准溶液旋光度值，绘制标准曲线。
- 待测溶液浓度计算：根据待测溶液旋光度值，从标准曲线上查找对应的浓度值，即为待测蔗糖溶液的浓度。
六、实验结论1. 通过旋光法测定蔗糖溶液的浓度，可以快速、准确地得到实验结果。
2. 在实验过程中，应严格控制实验条件，如温度、溶液浓度等，以保证实验结果的准确性。
3. 旋光法在食品、医药、化工等领域具有广泛的应用前景。
七、实验误差分析1. 旋光仪本身的精度和稳定性对实验结果有较大影响。
2. 溶液浓度测量过程中，移液管、比色皿等仪器的准确性对实验结果有影响。
3. 实验过程中，温度、光照等环境因素也会对实验结果产生一定影响。
《蔗糖的测定》课件
确保实验结果的记录足够详细，包括 每个步骤的操作、使用的仪器、试剂 和时间等，以便后续分析和追溯。
数据处理
使用适当的统计方法处理数据，如求 平均值、标准差等，以便更好地理解 数据分布和变化。
结果误差分析
系统误差
分析实验过程中可能存在的系统误差来源，如仪器校准、试 剂纯度等。
随机误差
考虑随机误差的影响，如操作人员的技术水平、环境因素等 。
02
滴定法测定准确性
采用滴定法测定蔗糖含量，实验数据表明该方法具有较高的准确性和可
靠性。通过滴定操作和计算，可以获得较为精确的蔗糖含量数值。
03
实验误差分析
在实验过程中，存在一定的误差。误差来源主要包括称量误差、滴定管
读数误差、样品溶解不充分等。为了减小误差，需要严格控制实验操作
，提高测量精度。
对实验的反思与建议
实验注意事项
温度控制
加热时要注意控制温度 ，避免温度过高导致蔗
糖焦化。
搅拌均匀
在加热过程中要不断搅 拌，确保蔗糖完全溶解
。
防止溅出
在加入蒸馏水时要注意 防止溅出，以免影响实
验结果。
准确测量
使用试纸或滴定法测定 pH值时要准确测量，以 保证实验结果的准确性
。
CHAPTER 04
蔗糖测定结果分析
实验结果记录与处理
离子色谱法
适用于复杂样品中蔗糖的 测定，尤其适用于含有大 量盐分、色素和其他杂质 的样品。
酶法
利用酶水解蔗糖，通过测 定水解产物来计算蔗糖含 量，具有操作简便、准确 度高等优点。
CHAPTER 02
蔗糖测定原理
蔗糖的化学性质
蔗糖是一种双糖，由 葡萄糖和果糖通过α1,2糖苷键连接而成 。
白砂糖的检验方法
白砂糖的检验方法1 干燥失重测定：1.1 仪器、设备：1.1.1干燥箱：测定过程中，离称量皿上面2.5cm土0.5cm处的温度要保持在105C ±1°C（或130°C±仁C）；1.1.2 带温度计干燥器；1.1.3扁型称量皿：直径为6〜10cm 深度为2〜3cm1.2 步骤：将干燥箱预热至105C（a 法）130C（b 法）。
将已打开盖的干洁空铝皿及其盖子一同放入干燥箱中，干燥30mi n,然后将皿盖上盖子，从干燥箱中取出，放入干燥器中冷却至室温。
称取20〜30g （a法）或9.5〜10.5g（b法）样品（应准确至土0.1mg）,样品在皿中要摊平，然后将盛有样品已开盖的称量皿及其盖子一同放入预热至105C（a 法）或130C（b 法）的干燥箱中，准确地干燥3h（a 法）或18min（b 法），将称量皿盖上盖子，从干燥箱中取出，放入干燥器中冷却至室温，称量，应准确至± 0.1mg。
不必干燥到恒重。
但必须确保在测定的任何阶段，都不能有砂糖的有形损失。
注： a 法为仲裁法； b 法为常规法。
化验室一般情况下用 a 方法。
1.3 计算及结果表示：白砂糖样品的干燥失重按下式计算，以百分数表示，计算结果取到两位小数。
m2-m3干燥失重%= --------- x 100m2-m1式中：m ------ 称量皿的质量，g；m2 称量皿及干燥前样品的质量，g;m3 称量皿及干燥后样品的质量，g。
2 不溶于水杂质的测定：2.1 仪器、设备：2.1.1坩埚式玻璃过滤器：孔径40卩m2.1.2 干燥箱；2.1.3 带温度计干燥器；2.1.4 分析天平：精确度达± 0.001g；2.2 试剂：2.2.1 1% a -萘酚乙醇溶液：称取a -萘酚1g，用95%L醇溶解至100mL2.2.2 浓硫酸：含硫酸95%〜98%.2.3 测定：称取样品500.0g于1000mL烧杯中，精制白砂糖则称取1000g于2000mL烧杯中，加入不超过40C的蒸馏水，搅拌至完全溶解，倾入干燥至恒重的玻璃过滤器中进行减压过滤。
蔗糖的成分实验报告
一、实验目的1. 了解蔗糖的化学成分；2. 掌握实验室分析蔗糖成分的方法；3. 通过实验验证蔗糖的化学性质。
二、实验原理蔗糖（C12H22O11）是一种由葡萄糖和果糖通过糖苷键连接而成的二糖。
本实验通过酸水解、旋光法等方法，分析蔗糖的成分，验证其化学性质。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 蔗糖- 葡萄糖- 果糖- 硫酸- 氢氧化钠- 氯化钠- 水浴锅- 旋光仪- 烧杯- 量筒- 玻璃棒- 移液管2. 实验仪器：- 分析天平- 紫外可见分光光度计- 恒温水浴锅四、实验步骤1. 称取一定量的蔗糖，溶解于适量蒸馏水中，配制成一定浓度的蔗糖溶液。
2. 将蔗糖溶液置于恒温水浴锅中，加热至60℃，加入适量硫酸，使蔗糖水解成葡萄糖和果糖。
3. 加热一段时间后，用氢氧化钠中和溶液，使溶液pH值调至中性。
4. 使用旋光仪测定水解后溶液的旋光度，计算水解度。
5. 使用紫外可见分光光度计测定溶液中葡萄糖和果糖的浓度，计算其含量。
6. 根据实验结果，分析蔗糖的成分。
五、实验结果与分析1. 水解度测定结果：实验测得蔗糖水解度为98.5%。
2. 葡萄糖和果糖浓度测定结果：实验测得葡萄糖浓度为0.4mol/L，果糖浓度为0.6mol/L。
3. 成分分析结果：根据实验结果，可以得出以下结论：- 蔗糖在水解后生成葡萄糖和果糖；- 葡萄糖和果糖的生成量与蔗糖的水解度成正比；- 蔗糖的化学性质在实验过程中得到了验证。
六、实验结论通过本实验，我们成功分析了蔗糖的成分，验证了其化学性质。
实验结果表明，蔗糖在水解后生成葡萄糖和果糖，且葡萄糖和果糖的生成量与蔗糖的水解度成正比。
本实验为实验室分析蔗糖成分提供了一种可行的方法，有助于深入了解蔗糖的化学性质。
化验操作规程
第二十一章化验室日常分析方法一、白砂糖分析方法１、蔗糖分测定称取26.000±0.002g样品, 于干洁的小烧杯中, 加入蒸馏水40～50mL, 搅拌至完全溶解, 倾入100mL容量瓶中, 用少量蒸馏水冲洗烧杯及玻棒干净, •洗水倒入容量瓶中, 然后加蒸馏水至刻度下, 放置10分钟以平衡温度。
若有气泡,•可加一至二滴无水乙醇(或乙醚)使之消除, 然后准确加蒸馏水至刻线。
若发现混浊就过滤。
先用滤液洗涤两次200mm观测管, 然后注满滤液置于检糖旋光仪中测定糖液旋光读数, 并记录观测读数和温度。
计算公式：蔗糖分（％）＝Ｐt【１＋０.０００３２（ｔ－２０）】式中：Ｐt-----观测旋光读数，（°Z）;ｔ------观测Ｐt时糖液的温度（℃）。
２、还原糖分测定称取样品白砂糖10.00g, 用50mL蒸馏水溶于250mL锥形瓶中,加入50mL奥氏试剂（即铜溶液）,充分混和, 然后加50毫克滑石粉（或浮石）, •用一烧杯倒转复盖其上, 放置电炉上加热, 使在５分钟内沸腾，并继续准确煮沸５分钟(•表面有适当气泡即开始计时, 不须等锥瓶底部有气泡生起)。
取出放置冷水中冷却至室温(不摇动), 取出加入冰醋酸１毫升，在不段摇动下, 加入准确计量的碘液, 视还原的铜量而加入5～30mL, 以确保碘液过量为准，然后加入15毫升1mol/L盐酸, •塞上瓶盖让碘起作用约 2分钟, 不时摇动溶液。
然后用硫代硫酸钠溶液滴定过量的碘，滴定至溶液呈浅黄绿色时，加入１％淀粉指示剂2～3毫升,•继续滴定至蓝色刚好退色为止。
记录滴定耗用硫代硫酸钠溶液毫升数。
计算公式：还原糖分(％)＝100×0.001(Ａ－Ｂ－Ｉ)／10＝0.01(•Ａ－Ｂ－Ｉ)式中: Ａ----加入0.01615mol/L(即0.0323N)碘液量(毫升);Ｂ----滴定耗用0.0323mol/L(即0.0323N)硫代硫酸钠溶液的量(毫升);Ｉ----10克蔗糖的改正值(由溶液含蔗糖克数与耗用碘液毫升数,查附录表三"分析计算用表15"得)３、电导灰分测定称取样品白砂糖31.3±0.1克于干洁的小烧杯中, 加蒸馏水溶解之, 移入100毫升容量瓶中, 用蒸馏水冲洗干净烧杯及玻棒并移入容量瓶中, 加蒸馏水至刻线, 摇匀。
测定食品中的蔗糖
测定食品中的蔗糖一、案例因为糖尿病患者人数的增强，“无糖食品”需求量的市场不断扩大，但是在对无糖食品的检测中发觉，某些无糖食品中蔗糖含量超标在十几倍以上，在国家《预包装特别膳食用食品标签通则》中规定，“无糖”的要求是指每100g或100mL的固体或液体食品中含糖量不高于O．5g，含糖量超标，而且超标10多倍，会给食用它的糖尿病患者带来严峻后果。
二、选用的国家标准 GB／T 5009．8—2003食品中蔗糖的测定——酸水解法。
三、测定办法 l.样品处理同挺直滴定法测定还原糖举行操作。
2．测定吸取处理后的样品溶液2份各50mL，分离放入100mL容量瓶中，一份加入5mI。
(1+1)盐酸溶液(200g／L)，置68～70℃水浴中加热15min，取出快速冷却至室温，加2滴甲基红指示剂，用20％NaoH溶液中和至中性，加水定容，混匀；另一份挺直用水稀释到100mL。
然后按挺直滴定法测定还原糖含量举行操作。
3．结果计算式中 X——蔗糖质量分数，％； F——10mL酒石酸钾钠铜溶液相当于转化糖的质量，mg； V2——测定时消耗未经水解的样品稀释液的体积，mL； V-——测定时消耗经过水解的样品稀释液的体积，ml； m——样品质量，g； 0.95——转化糖换算为蔗糖的系数。
4．试剂①(1+1)盐酸溶液。
②甲基红指示剂：O.1g甲基红，用60％乙醇溶解并定容到100mL。
③氢氧化钠溶液(200g／L)。
④O.1％转化糖标准溶液：纯蔗糖1.900g(105℃烘干至恒重的蔗糖)，用水溶解并移入1000ml。
容量瓶中，定容，混匀后，取50mL于100ml。
容量瓶中，加(1+1)盐酸溶液5mL，在68～70℃水浴中加热15min，取出快速冷却，加甲基红指示剂2滴，用20％Na0H溶液调至中性，加水定容，混匀，此溶液含转化糖lmg／mL。
⑤其他试剂同还原糖测定中的挺直滴定法。
5．仪器同还原糖测定。
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蔗糖比色测定实验报告
一、实验目的1. 熟悉比色法测定蔗糖含量的原理和方法；2. 掌握3，5-二硝基水杨酸比色法测定蔗糖含量的实验步骤；3. 培养实验操作技能和数据分析能力。
二、实验原理比色法是利用有色物质在不同波长下吸收光的能力不同，通过比较溶液颜色的深浅来定量分析物质含量的方法。
在本实验中，我们采用3，5-二硝基水杨酸比色法测定蔗糖含量。
该方法基于以下原理：1. 蔗糖在酸性条件下被水解生成葡萄糖和果糖；2. 葡萄糖和果糖与3，5-二硝基水杨酸反应生成红色的复合物；3. 通过比较标准溶液和待测溶液颜色的深浅，根据标准曲线计算出待测溶液中蔗糖的含量。
三、实验仪器与试剂1. 仪器：721型分光光度计、电子天平、移液管、容量瓶、烧杯、试管、试管架、滴定管、滤纸等；2. 试剂：3，5-二硝基水杨酸溶液、pH5.5磷酸缓冲液、无水蔗糖、蒸馏水、标准葡萄糖溶液等。
四、实验步骤1. 准备标准溶液：准确称取无水蔗糖0.1g，溶解于10ml蒸馏水中，配制成0.01g/ml的标准蔗糖溶液。
分别取1ml、2ml、3ml、4ml、5ml标准蔗糖溶液于烧杯中，加入10ml蒸馏水，搅拌均匀；2. 配制显色剂：准确称取3，5-二硝基水杨酸0.5g，溶于20ml 2N氢氧化钠和50ml水中，再加入18.2g酒石酸钾钠，用水稀释至100ml；3. 显色反应：向标准溶液和待测溶液中加入2ml显色剂，混合均匀，放置10分钟；4. 比色：将显色后的溶液倒入比色皿中，在波长500nm下，以蒸馏水为参比，用分光光度计测定吸光度；5. 标准曲线绘制：以吸光度为纵坐标，蔗糖浓度为横坐标，绘制标准曲线；6. 待测溶液的测定：准确吸取待测溶液2ml，按照上述步骤进行显色反应和比色，根据标准曲线计算待测溶液中蔗糖的含量。
五、实验结果与分析1. 标准曲线绘制：根据实验数据绘制标准曲线，发现吸光度与蔗糖浓度呈线性关系；2. 待测溶液的测定：根据标准曲线，计算出待测溶液中蔗糖的含量为0.025g/ml。
白砂糖蔗糖分检测的不确定度评定
白砂糖蔗糖分检测的不确定度评定曾史俊;高裕锋;钟宏星;余构彬;郭剑雄;李海乔【摘要】The uncertainty determination of sucrose in white granulated sugar by polarimetry was evaluated. The results showed that main uncertainty components arose from constant volume process and precision of polarimeter. When the sucrose value was 99.71%, the expanded uncertainty value was 0.02%, results could be expressed as99.71%±0.02%,k=2,P=95%.%分析旋光法测定白砂糖中蔗糖分的不确定度来源，对不确定度的各个分量进行评估和合成。
结果表明，影响蔗糖分测定不确定度的主要原因是定容体积和旋光仪精度引入的不确定度分量。
当白砂糖中蔗糖分的测定值为99.71%时，扩展不确定度为0.02%，测定结果表示为99.71%±0.02%，k=2，P=95%。
【期刊名称】《甘蔗糖业》【年(卷),期】2016(000)003【总页数】4页(P55-58)【关键词】白砂糖;蔗糖分;旋光法;不确定度【作者】曾史俊;高裕锋;钟宏星;余构彬;郭剑雄;李海乔【作者单位】广州甘蔗糖业研究所广东省甘蔗改良与生物炼制重点实验室，广东广州510316; 国家糖业质量监督检验中心，广东广州510316;广州甘蔗糖业研究所广东省甘蔗改良与生物炼制重点实验室，广东广州510316; 国家糖业质量监督检验中心，广东广州510316;广州甘蔗糖业研究所广东省甘蔗改良与生物炼制重点实验室，广东广州510316; 国家糖业质量监督检验中心，广东广州510316;广州甘蔗糖业研究所广东省甘蔗改良与生物炼制重点实验室，广东广州510316; 国家糖业质量监督检验中心，广东广州510316;广州甘蔗糖业研究所广东省甘蔗改良与生物炼制重点实验室，广东广州510316; 国家糖业质量监督检验中心，广东广州510316;广州甘蔗糖业研究所广东省甘蔗改良与生物炼制重点实验室，广东广州510316; 国家糖业质量监督检验中心，广东广州510316【正文语种】中文【中图分类】TS247蔗糖分是衡量白砂糖品质的重要指标之一，尤其是白砂糖质量分级的重要指标，因此蔗糖分测量值的准确性显得尤为重要[1]。
蔗糖的测定
0.1
0.2
0.4
0.6
0.8
0.9
蒸馏水（ml）
0.9
0.8
0.7
0.5
0.3
0.1
0
2N氢氧化钠（ml）
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
混合后100℃沸水浴中10min,冷却。再加入间苯二酚，Hcl。
间苯二酚（ml）
1
1
1
1
1
1
1
10N盐酸（ml）
3
3
3
3
3
3
3
蔗糖量
0
40
80
160
蔗糖含量（%）=（C×V/a×n）/(W×106)
式中C---标准方程求的蔗糖量(微克)。
a---吸取样品液体积(ml)
V---提取液(ml)
n---稀释倍数(ml)
W---重量（g）
240
320
360
混合后100℃沸水浴中10min,冷却。500nm下测定光密度。绘制标准曲线。
2样品的测定取0.9ml的样品，加入0.1ml 2N的氢氧化钠,混合后100℃沸水浴中10min,冷却。再加入1ml间苯二酚，3ml 10NHcl,混合后100℃沸水浴中10min,冷却。500nm下测定光密度。
蔗糖的测定
实验试剂:
1.间苯二酚:0.1g的间苯二酚用6N的盐酸溶解后定容到100ml.
2.10N的盐酸
3.2N的氢氧化钠
4.蔗糖标准溶液：0.1g溶解定容到100ml。
实验步骤：
1.标准曲线的制定：1mg/ml的蔗糖溶液稀释成0.4mg/ml蔗糖溶液。
试管号
食品中蔗糖测定方法
食品中蔗糖的测定方法酶－比色法食品中蔗糖的测定方法，一般采用盐酸水解法。
由于盐酸水解蔗糖过程中，还有其他糖类被水解为还原糖，导致测定结果偏高。
本标准采用的酶-比色法是在检索了近20年148篇国外文献的基础上，经过反复实验、验证而制定的。
由于酶法具有高度的专一性(β-果糖苷酶只能催化蔗糖转化为葡萄糖和果糖)，灵敏度高，操作简便，因此测定结果准确。
蔗糖酶解后的产物-葡萄糖的测定方法，与GB／T 16285－96保持一致。
食品中蔗糖的测定方法GB／T 16286-96酶－比色法1 范围本标准规定了用酶－比色法测定食品中蔗糖的方法，适用于各类食品中蔗糖的测定。
本标准最低检出限量为0.04μg(蔗糖)／mL(试液)。
2 原理在β－果糖苷酶(β－FS)催化下，蔗糖被酶解为葡萄糖和果糖。
葡萄糖氧化酶(GOD)在有氧条件下，催化β－D－葡萄糖(葡萄糖水溶液状态)氧化，生成D －葡萄糖酸－δ－内酯和过氧化氢。
受过氧化物酶(POD)催化，过氧化氢与4 －氨基安替比林和苯酚生成红色醌亚胺。
在波长505nm处测定醌亚胺的吸光度，计算食品中蔗糖的含量。
β－FSC12H22O11＋H2O ────> C6H12O6(G) ＋C6H12O6(F)GODC6H12O6(G) ＋O2────> C6H10O6＋H2O2PODH2O2＋C6H5OH ＋C11H13N3O ────> C6H5NO ＋H2O3 试剂3.1 组合试剂盒1号瓶：内含β－果糖苷酶(fructosidase)400U(活力单位)、柠檬酸、柠檬酸三钠；2号瓶：内含0.2mol／L 磷酸盐缓冲液(pH＝7.6) 200mL，其中含4 －氨基安替比林0. 00154mol／L；3号瓶：内含0.022mol／L苯酚溶液200mL；4号瓶：内含葡萄糖氧化酶(glucose oxidase)800U(活力单位)、过氧化物酶(辣根，peroxidase)2000U(活力单位)。
蔗糖的测定方法
蔗糖的测定方法1.原理样品经除去蛋白质后，蔗糖经盐酸水解转化为还原糖，再按还原糖测定。
水解前后还原糖的差值为蔗糖含量。
2.适用范围GB5009.8-85。
本方法适合于所有食物样品蔗糖的检测。
3.仪器（1）滴定管（2）25ml古式坩埚或G4垂融坩埚（3）真空泵（4）水浴锅4.试剂除特殊说明外，实验用水为蒸馏水，试剂为分析纯。
4.1 6 mol/L盐酸：量取50ml盐酸加水稀释至100 ml。
4.2 甲基红指示剂：称取10mg甲基红，用100ml乙醇溶解。
4.3 5 mol/L氢氧化钠溶液：称取20g氢氧化钠加水溶解并稀释至100ml。
4.4 碱性酒石酸铜甲液：称取34.639g 硫酸铜（CuSO4·5H2O），加适量水溶解，加0.5ml 硫酸，再加水稀释至500ml，用精制石棉过滤。
4.5 碱性酒石酸铜乙液：称取173g酒石酸钾钠与50g氢氧化钠，加适量水溶解，并稀释至500ml，用精制石棉过滤，贮存于橡胶塞玻璃瓶中。
4.6 精制石棉：取石棉先用3mol/L盐酸浸泡2～3天，用水洗净，再加2.5mol/L氢氧化钠溶液浸泡2～3天，倾去溶液，再用热碱性酒石酸铜已液浸泡数小时，用水洗净。
再以3 mol/L 盐酸浸泡数小时，以水洗至不呈酸性。
然后加水振摇，使成微细的浆状软县委，用水浸泡并贮存于玻璃瓶中，即可用做填充古式坩埚用。
4.7 0.1000mol/L高锰酸钾标准溶液。
4.8 1mol/L氢氧化钠溶液：称取4g 氢氧化钠，加水溶解并稀释至100ml。
4.9 硫酸铁溶液：称取50g硫酸铁，加入200ml水溶解后，慢慢加入100ml硫酸，冷却后加水稀释至1L。
4.10 3mol/L盐酸：量取30ml盐酸，加水稀释至120ml。
5.操作方法5.1样品处理：5.1.1乳类、乳制品及含蛋白质的食品：称取约0.5～2 g固体样品（吸取2～10 ml液体样品），置于250 ml容量瓶中，加50 ml水，摇匀。
蔗糖分和视纯度分析方法
蔗糖分和视纯度分析方法１、膏（蜜）类和糖浆视纯度测定①用口盅称取100 克样品，加200～ 300 毫升热水将其晶体全部溶解 , 然后按规定稀释（膏类、蜜类稀解 6 倍，糖浆稀释 4 倍）搅匀后，先测定样液锤度，并记录读数时温度。
倾取样液约 100 毫升于干洁的 250 毫升锥形瓶中，加入碱性醋酸铅适量，摇匀过滤，以最初滤液洗涤盛器并倾去，收集滤液，用 200mm?观测管放入旋光仪测其旋光读数。
观测管须先用滤液洗涤 2～ 3 次。
②计算：更正锤度＝（观测锤度±温度更正系数）×稀释倍数注 :①温度更正系数查附录表三" 观测锤度温度改正表 ";②温度高于20℃时则加，温度低于20℃时则减。
（旋光读数×糖度因数）×稀释倍数视纯度（％）＝──────────────────×１００更正锤度注：糖度因数是以观测锤度查糖度（或蔗糖分）因数检索表得出。
２、蔗汁视纯度测定（包括初汁、未汁、混合汁、清汁、滤汁）①先测出降温接近室温的混合均匀的蔗汁（不用稀释）的锤度，并记录温度。
取一定量的蔗汁加入适量的碱性醋酸铅，摇匀过滤，以最初滤液洗涤盛器并倾去，收集滤液，用200mm观测管放入旋光仪测其旋光读数。
观测管须先用滤液洗涤 2～ ?3 次。
②计算：更正锤度＝观测锤度±温度更正系数注 :①温度更正系数查附录表三" 观测锤度温度改正表 ";②温度高于20℃时则加，温度低于20℃时则减。
视纯度（％）＝１００×旋光读数×糖度因数／更正锤度注：糖度因数以观测锤度查糖度因数检索表（附录三表５）得。
３、蔗汁蔗糖分测定（包括混合汁、糖浆、清汁）①吸取 50mL 滤液（测视纯度滤得的滤液）移入 100 毫升容量瓶中（两倍稀释） , 先加入 20 毫升蒸馏水，再加入 10 毫升24.85 ° BX的盐酸，插入温度计，在水浴中准确加热至 60℃ , 并在此温度下保持１０分钟（最初３分钟内应不断摇动）， ?取出浸入冷水中迅速冷却至室温，以少量蒸馏水将附着温度计上的糖液洗入容量瓶内，取出温度计加水至刻度，充分摇匀，如发现混浊则过滤。
蔗糖的检验
蔗糖的检验1. 在线产品检验：1.1. 仪器设备：全组分分析仪，100ml烧杯，恒温水浴锅，榨汁机1.2. 样品处理：1.2.1. 将配料奶、乳酸菌饮料等样品分别倒入100ml烧杯中，在恒温水浴锅中预热至30--40℃；1.2.2. 将酸奶样品经过榨汁机处理后，再放入恒温水浴锅中预热至30--40℃；1.2.3. 样品检验：将预热好的样品放在全组分分析仪的吸样管下，按测样键，仪器自动检测，结果显示于显示器上，记录结果。
2. 基准法（莱茵---埃农氏法）：2.1. 原理：蔗糖是非还原糖，没有还原力，但可以经过盐酸水解转化具有还原力的葡萄糖和果糖，在用测还原糖（如上述的乳糖）的方法进行测定。
2.2. 试剂：2.2.1. 200g/L乙酸铅溶液：取20g乙酸铅，溶解于100ml水中。
2.2.2. 草酸钾-磷酸氢二钠溶液：取草酸钾3g，磷酸氢二钠7g，溶解于100ml水中；2.2.3. 费林试液甲液：取34.63g硫酸铜，溶于水中，加入0.5ml浓硫酸，加水至500ml；2.2.4. 费林试液乙液：取173g酒石酸钾钠及50g氢氧化钠溶于水中，稀释至500ml，静止两天后过滤；2.2.5. 10g/L次甲基蓝溶液：称取1g次甲基蓝溶解于100ml水中；2.2.6. 体积比1：1的盐酸溶液；2.2.7. 300g/L氢氧化钠溶液：称取30 g氢氧化钠溶解于100ml水中；2.2.8. 5g/L酚酞溶液：称取0.5 g酚酞溶解于75ml95%的乙醇中，并加入20 ml水，然后再加入氢氧化钠溶液，直到加入一滴立即变成粉红色，再加水定容至100 ml。
2.3. 仪器：常用理化实验室仪器。
2.4. 操作步骤：2.4.1. 费林液的标定：2.4.1.1. 称取在105℃烘箱中干燥2小时的蔗糖约0.2 g（准确到0.2mg），用50ml水溶解并洗入100ml容量瓶中，加水10ml，在加入盐酸（2.6）10ml，置于75℃水浴锅中，时时摇动，在2分30秒至2分45秒间使瓶内温度升至67℃。
蔗糖鉴定试验实验报告
蔗糖鉴定试验实验报告实验目的：本实验旨在通过化学方法鉴定蔗糖（sucrose）的存在，了解其化学性质，并掌握蔗糖的鉴定技术。
实验原理：蔗糖是一种二糖，由葡萄糖和果糖通过α-1,4-糖苷键连接而成。
在实验中，我们通常利用蔗糖在酸性条件下水解生成葡萄糖和果糖，然后通过特定的试剂来鉴定这两种单糖。
例如，葡萄糖可以用本尼迪特试剂（Benedict's reagent）检测，而果糖则可以用巴氏试剂（Benedict's reagent）进行检测。
实验材料：1. 蔗糖样品2. 蒸馏水3. 稀硫酸4. 本尼迪特试剂5. 巴氏试剂6. 试管7. 酒精灯8. 滴管9. 磁力搅拌器10. 试管架11. 冷却水浴实验步骤：1. 取少量蔗糖样品，溶解在蒸馏水中，制备成蔗糖溶液。
2. 向蔗糖溶液中加入稀硫酸，使溶液呈酸性，以促进蔗糖的水解。
3. 将试管置于水浴中加热，使蔗糖水解反应进行。
4. 待水解反应完成后，取出试管，冷却至室温。
5. 取适量的水解后的溶液，分别加入两个干净的试管中。
6. 向第一个试管中加入本尼迪特试剂，加热至沸腾，观察溶液颜色变化。
7. 向第二个试管中加入巴氏试剂，同样加热至沸腾，观察溶液颜色变化。
8. 根据颜色变化判断葡萄糖和果糖的存在。
实验结果：在加热并加入本尼迪特试剂的试管中，观察到溶液由无色变为黄色或橙黄色，表明葡萄糖的存在。
在加入巴氏试剂的试管中，观察到溶液由无色变为红色，表明果糖的存在。
实验结论：通过本实验，我们成功地鉴定了蔗糖样品中葡萄糖和果糖的存在，验证了蔗糖的水解反应和单糖的鉴定方法。
实验结果表明，蔗糖在酸性条件下可以水解为葡萄糖和果糖，并且可以通过特定的化学试剂进行鉴定。
注意事项：1. 在实验过程中，应严格控制加热时间和温度，避免过度加热导致试剂失效。
2. 使用本尼迪特试剂和巴氏试剂时，应严格按照说明书操作，确保实验结果的准确性。
3. 实验结束后，应妥善处理实验废液，避免对环境造成污染。
实验十二 旋光法在食品分析中的应用(未完)
实验十二旋光法在食品分析中的应用1.实验目的1)学习掌握旋光法的基本技术,了解旋光仪的基本结构并掌握正确使用方法；2)学用旋光法测定淀粉含量,蔗糖分及味精纯度。
2.实验原理旋光法是利用物质的旋旋旋光性质测定溶液浓度的方法。
许多物质具有旋旋旋光性，当平面偏振光通过这些物质（液体或溶液）时，偏振光的振动平面向左或向右旋转，这种现象称为旋光。
偏振光旋转的角度称为旋转角。
旋光法可以用各种光学活性物质的定量测定或纯度检验，甚至可测定旋光物质的反应速率常数。
如测定糖类含量，糖类是旋旋旋光性较强的物质，当偏振光通过糖类溶液时，产生旋转角度与糖类溶液的体积百分浓度成正比，因此可以推算糖类溶液的含量。
3.仪器及材料3.1仪器WZZ-2B型自动旋光仪3.2试剂1）氯化钙溶液:溶解546gCaCl2·2H2O于水中，稀释至1000mL，调整相对密度为1.30(20℃)，再用1.6%的醋酸调整PH值为2.3～2.5，过滤后备用；2）氯化锡溶液:称取2.5gSnCl4·5H2O溶解于75mL上述氯化钙溶液中；3）6mol/L盐酸溶液:量取500mL浓HCl，缓缓注入水中，并加水至1000mL，冷却摇匀。
3.3材料木薯淀粉或面粉，白砂糖，味精3.4注意事项1）温度对旋亮度有很大影响.如果测定时样品溶液的温度不是20℃,应进行校正；2）淀粉中除了蛋白质有影响外,其他可溶性糖即糊精均有影响,用此法测定淀粉含量时应充分注意；3）蔗糖样品中若蔗糖是唯一光学活性物质,用一次旋光法得到满意的分析结果,若样品中含有较多的其他光学活性物质,如葡萄糖(+52.5o)，果糖(-92.5o)等，则应采用二此旋光法。
4.实验步骤4.1样品制备4.1.1淀粉测定称取淀粉样品2.000g,置于250mL烧杯中,加水10mL,搅拌使样品湿润,再加入70mL氯化钙溶液。
盖上表面皿,在5min内加热至沸,并继续加热15min,加热过程中应随时搅拌,防止样品粘附在烧杯壁上,若泡沫过多,可加入1～2滴辛醇消泡。
蔗糖含量的测定方法二
蔗糖含量测定（方案一）：果实中蔗糖含量测定可参考（薛应龙等.植物生理学实验手册〔M].上海:上海科学技术出版社，1985.135~138）1实验原理：先用碱性溶液同植物材料的可溶性糖提取液一起加热，破坏其中的还原糖。
然后用蒽酮法在较低的温度下，测定蔗糖中的果糖部分。
不含果糖苷的其他糖类在较低的温度下不与蒽酮显色，材料中如含有其他带有果糖苷的非还原糖（如：棉子糖、松三糖和土木香粉）对测定会有干扰，但是在有蔗糖存在的生物材料中这些糖几乎是不存在的。
一般的说此方法的精确性是很高的。
2实验仪器：衡温水浴，分光光度计、3实验材料：植物的根、茎、叶。
4实验试剂：30%KOH的水溶液；蒽酮试剂【150mg 蒽酮溶于100ml 稀硫酸（76ml 浓硫酸溶于30ml 水中）】；标准蔗糖溶液（1 mg/ml）；转化酶溶液。
5实验步骤：植物材料在110摄氏度下杀死，经70~80摄氏度烘干研磨，称取50mg加3ml 80%的乙醇，在80摄氏度下提取半小时，离心取上清液，共提取3次。
合并上清液，加少许（约0.1克）活性炭脱色，并定容至10ml。
根据蔗糖含量的多少吸取0.1~1.0ml于试管中，沸水浴中加热浓缩至0.05~0.1ml（不要大于0.1ml，否则显色时间要延长），加入0.1ml30%的KOH，在沸水浴中放10min，冷却至室温。
加入3ml蒽酮试剂，40摄氏度保温10~15min，在620nm测定吸光度值。
同时取20~100μg蔗糖（在0.1ml体积中）于一系列试管中，加入0.1ml30%KOH以同法显色，做成标准曲线。
据此计算植物材料中蔗糖的含量。
如植物材料中有其他含果糖苷的干扰物质存在，可将糖的提取物去掉酒精后，与转化酶一起保温。
200μg蔗糖水解97~99%。
在与转化酶保温前后各测定一次，两次结果相减，即为蔗糖测定结果。
但转化酶也能水解棉子糖，而不水解松三糖及土木香粉。
蔗糖含量测定（方案二）：（张志良等编．植物生理学实验指导[M]．高等教育出版社，2009，106．）1实验仪器：分光光度计，恒温水浴锅，电子天平，烘箱，刻度离心管，带塞试管，漏斗。
蔗糖分的测定
8.5.14 蔗糖仪器和设备：恒温水浴锅（65℃）容量瓶（200mL、250mL）移液管（5mL、50mL）滴定管（50mL）锥形瓶（500mL）加热板或火炉（有三脚架和石棉网）分析天平秒表试剂：盐酸（SG＝1.103）盐酸（0.5M）氢氧化钠（4M）酚酞指示剂（1％）费林氏试剂（A和B）EDTA溶液（4％）浮石粉末甲基蓝溶液（1％）液体石蜡玻璃珠8.5.14.1 测量方法（a）准确称量接近10g糖浆。
（b）用蒸馏水将糖浆转移至一250mL容量瓶中，加入10mL EDTA（4％）溶液，然后加蒸馏水至刻线。
（c）用称液管移取25mL稀释糖液，放入一200mL容量瓶（1）中，用来测定转化糖总含量。
8.5.14.1.1 酸转化处理和转化糖总含量的测定（a）在容量瓶（1）中加入约30mL蒸馏水，然后将其浸入恒温水浴锅（65℃）中，加热10min。
（b）加入10mL盐酸（SG＝1.103），混合均匀。
（c）静置30min。
（d）将糖液调至中性：加入一滴酚酞，逐滴加入4M氢氧化钠溶液，直至糖液呈粉红色（一般需要16.5mL氢氧化钠）。
然后逐滴加入盐酸（0.5M），直至指示剂粉红色恰好消失（需要的盐酸量一般不超过0.5mL）。
加蒸馏水至刻线，混合均匀。
（e）分别用两移液管移取5mL费林氏试剂甲液和5mL费林氏试剂乙液放入同一500mL锥形瓶，加入少量浮石粉末，4滴液体石蜡和3颗玻璃珠。
（f）用D的稀释转化糖浆装满滴定管，然后从滴定管中滴加15mL糖液至E的锥形瓶内，然后将其放在加热板上，加热直至沸腾（开始加热至溶液开始沸腾耗时不能超过2.25min）。
（g）待溶液沸腾10～15s后，观察溶液的颜色，如果仍与费林试剂接近，则表明溶液中还有大量费林试剂未被还原，需要加入更多的糖汁。
从滴定管中继续往锥形瓶中加糖汁。
每加5mL糖汁后，让溶液沸腾几秒后，观察溶液颜色。
若溶液颜色仍与费林试剂溶液接近，则继续加入糖汁直至试剂的原始颜色消失。
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实验三 白砂糖中蔗糖含量的测定
（旋光—检糖计法）
一、实验目的
1、了解白砂糖中蔗糖的含量；
2、掌握全自动指示检糖计的使用与维护。
二、实验原理
蔗糖分子中含有不对称碳原子而具有旋光性，旋光度的大小与蔗糖含量成正比，利用旋光计或检糖计即可测定出白砂糖中蔗糖的含量。
三、仪器
1、旋光计或检糖计
2、容量瓶 100 ml
3、烧瓶 100 ml
四、操作方法
1、精确称取白砂糖样品13.00g ，用水溶解并定容至100 ml ，摇匀，用干滤纸过滤，弃去初始滤液25 ml ；
2、取洁净的200 mm 旋光管一支，用其体积的2/3样品溶液洗涤两次，将样液充满旋光管，放入旋光计或检糖计中测定；
3、读取样液的旋光度数或国际糖刻度值，最好取3～5个读数的平均值，并记录样品溶液的温度。
五、计算
1、采用检糖计测定时：
在实际测定温度t ℃下读数为St （国际糖度o S ），将St 对温度进行校正得到校正糖度S 20（即测定结果），经计算可求出白砂糖中蔗糖的含量。
白砂糖中蔗糖的含量（蔗糖克数/100克白砂糖）
=2×S 20
=2×St[1+0.00034（t-20）]
式中：S 20 —校正到20℃时检糖计读数
St —t ℃
时检糖计读数 t ℃—测定时样液的温度
2、用旋光计测定时
在温度t ℃下读取旋光度αt ，由于α=[α]×CL/100
则 100][CL t
D t ⨯
=αα []L
C t
D t ⨯⨯=αα100 式中：C — 样品溶液中蔗糖含量
L — 旋光管长度，200 mm
[]t
D α—t ℃时，蔗糖的比旋光度
[][])20(0144.020--=t D t
D αα （t=12～25℃
） 其中[]20D α为20℃时蔗糖比旋光度，[]20D α=+66.536°
由于被检样液是将13g 样品溶解并稀释至100 ml ，亦即此样液100 ml 中有13g 样品，现已求出C （100ml 样液中含蔗糖克数），则白砂糖果中蔗糖含量为：
白砂糖果中蔗糖含量（克/100克）=10013⨯C。