高三生物复习——基因工程

高三生物复习——基因工程

1．真核生物的cDNA 文库与基因组文库

2.PCR 技术扩增

(1)原理：DNA 双链复制。

(2)条件：模板DNA 、引物、游离的dNTP(dCTP 、dATP 、dGTP 、dTTP)、热稳定DNA 聚合酶。 (3)过程⎩

⎪⎨⎪⎧ 变性：90～95 ℃，DNA 解链 ↓复性：55～60 ℃，引物与单链DNA 结合 ↓延伸：70～75 ℃，在热稳定DNA 聚合酶(Taq 酶) 作用下合成子链

3．限制酶的选择方法

(1)选择的限制酶的切点不能位于目的基因内部，也不能位于标记基因内部，否则会破坏目的基因或标记基因，上图中不能选择Sma Ⅰ。

(2)应选择切点位于目的基因两端的限制酶，同时质粒上也有其切点，如上图中可选择Pst Ⅰ。

(3)为避免目的基因和质粒的自身环化和随意连接，也可使用不同的限制酶切割目的基因和质粒，如上图也可选择用Pst Ⅰ和Eco R Ⅰ两种限制酶。

4.蛋白质工程