离体心脏灌流
心脏灌流实验报告结论
一、实验背景心脏灌流实验是一种生理学实验，旨在通过模拟心脏的血液循环过程，研究心脏的功能和血液动力学特性。
本实验采用离体心脏灌流的方法，通过观察不同条件下心脏的血流动力学变化，分析心脏的功能状态和影响因素。
二、实验目的1. 了解心脏灌流实验的基本原理和方法。
2. 观察心脏在不同灌流条件下的血流动力学变化。
3. 分析影响心脏功能的主要因素。
三、实验方法1. 实验材料：离体心脏、灌流装置、生理盐水、药物等。
2. 实验步骤：（1）将离体心脏置于灌流装置中，连接好各种管道。
（2）调整灌流装置，使心脏处于正常工作状态。
（3）观察心脏在不同灌流条件下的血流动力学变化。
（4）在实验过程中，加入不同药物，观察心脏对药物的反应。
四、实验结果1. 心脏在正常灌流条件下，表现出规律性的收缩和舒张，血流动力学指标稳定。
2. 在低灌流压力下，心脏收缩幅度减小，心率减慢，心输出量降低。
3. 在高灌流压力下，心脏收缩幅度增大，心率加快，心输出量增加。
4. 加入肾上腺素后，心脏收缩幅度增大，心率加快，心输出量增加。
5. 加入乙酰胆碱后，心脏收缩幅度减小，心率减慢，心输出量降低。
6. 加入乳酸后，心脏收缩幅度减小，心率减慢，心输出量降低。
五、实验结论1. 心脏灌流实验是一种有效的生理学实验方法，可以模拟心脏的血液循环过程，研究心脏的功能和血液动力学特性。
2. 心脏的收缩和舒张是维持血液循环的关键，心脏功能与灌流压力、药物等因素密切相关。
3. 低灌流压力和乳酸等因素会导致心脏收缩幅度减小，心率减慢，心输出量降低，影响心脏功能。
4. 肾上腺素和乙酰胆碱等药物可以调节心脏功能，改变心脏的收缩幅度、心率和心输出量。
5. 心脏灌流实验为研究心脏疾病、药物作用等提供了重要手段。
六、实验讨论1. 本实验结果表明，心脏灌流实验可以有效地模拟心脏的血液循环过程，为研究心脏功能提供了重要手段。
2. 在实验过程中，应注意灌流压力、药物等因素对心脏功能的影响，以保证实验结果的准确性。
离题心脏灌流实验报告
一、实验目的1. 掌握离体心脏灌流技术的基本操作方法。
2. 观察不同生理和化学因素对离体心脏活动的影响。
3. 了解心脏生理学中离子和体液调节在心脏功能中的作用。
二、实验原理心脏的正常节律性活动依赖于其内环境的稳定性。
离体心脏灌流实验通过在体外模拟心脏的生理环境，研究各种因素对心脏功能的影响。
实验中，离体心脏被置于特定的灌流液中，通过改变灌流液的成分，可以观察心脏的收缩、舒张以及心率等生理指标的变化。
三、实验材料1. 实验动物：青蛙或鱼类。
2. 实验器材：蛙心夹、张力传感器、支架、双凹夹、双针形露丝刺激电极、滴管、培养皿、棉线、任氏液、生理盐水、NaCl、KCl、CaCl2、乳酸、肾上腺素、乙酰胆碱等。
3. 实验试剂：任氏液、生理盐水、0.65%NaCl、2%CaCl2、1%KCl、3%乳酸、1:10000肾上腺素、1:10000乙酰胆碱等。
四、实验方法与步骤1. 蛙心插管法：将青蛙双毁髓后背位置于蜡盘中，暴露心脏，并在左主动脉下方穿一线，于动脉圆锥处结扎。
用蛙心夹固定心脏，将刺激电极插入心室。
2. 灌流液准备：将任氏液或生理盐水加热至37℃，保持恒温。
3. 灌流系统建立：将蛙心夹连接到张力传感器，通过支架固定。
将灌流液从灌流瓶经滴管缓慢滴入蛙心夹，通过张力传感器记录心脏的收缩和舒张。
4. 实验操作：a. 记录正常心脏灌流下的心率和收缩幅度。
b. 分别向灌流液中加入不同浓度的NaCl、KCl、CaCl2、乳酸、肾上腺素、乙酰胆碱等试剂，观察心脏活动的变化。
c. 重复上述步骤，观察不同因素对心脏活动的影响。
五、实验结果与分析1. 正常心脏灌流：在正常灌流条件下，心脏呈现规律的节律性收缩，心率和收缩幅度稳定。
2. NaCl：低浓度NaCl对心脏活动影响较小，高浓度NaCl会导致心率减慢，收缩幅度降低。
3. KCl：低浓度KCl对心脏活动影响较小，高浓度KCl会导致心率加快，收缩幅度降低。
4. CaCl2：低浓度CaCl2对心脏活动影响较小，高浓度CaCl2会导致心率加快，收缩幅度增强。
心脏灌流
Radnoti 离体工作心脏灌流系统 (Working Heart System)
可进行工作心脏实验， LANGENDORFF 恒 压，恒流，循环或非循环实验。实验可以是 起博或自发心跳状态。
灌流液从左心耳流入左心室，左心室收缩克服 主动脉阻力将心室内液体射入模拟主动脉管道， 使心脏在生理状态下进行灌流实验。在此装置 中，左心室充盈压（前负荷）及主动脉柱压 （后负荷）可以保持恒定，心率亦可通过电起 搏装置加以控制。因此，可以根据需要将三者 同时进行控制，观察药物对心肌收缩性能的影 响，或控制其中两项，观察心肌收缩性与另一 项的关系。此外通过测定冠脉流出液中某些物 质，可以了解药物或其它因素对心脏生化方面 的影响。
缺点和局限性
失去了机体完整统一的内环境和神经体液 调控作用，失去了体内各种组织、细胞之间
的相互关系，不能完全反映心脏在整体情况
下的活动规律与正常整体情况。
离体心脏灌流方法
两栖类动物： 蟾蜍、青蛙等 Straub法、八木法
哺乳类动物：大鼠、家兔、猫等
Langendroff 法
经典的离体蛙心灌流——Straub法
心室腔直接记录和测定左心室内压力变化，如左心室 收缩压（LVSP）、左心室舒张末期压（LVEDP）和左 心室压力变化速率（LV dP/dP）等； 利用放入肺动脉内的导管连接到PMH 73酸碱／血气检
测仪上的电极测定冠状静脉的 Po2, 并可结合灌流液的
Po2和冠状动脉流量计算心肌耗氧量； 经过两根固定在心脏表面的电极可记录心外膜心电图； 心脏内埋藏电极记录希氏束电图等。
• 配合不同的测量装置可测量： 左室压（LVP) 心电 温度 心肌张力 心输出量 灌注压 冠脉血流 新陈代谢 离子 转基因研究
生理学离体心脏实验报告
一、实验目的1. 了解离体心脏灌流法的原理和操作步骤。
2. 观察Na+、K+、Ca2+及肾上腺素（Adr）、乙酰胆碱（ACh）、乳酸对离体心脏活动的影响。
3. 掌握生理学实验技能，提高实验操作水平。
二、实验原理离体心脏灌流法是将心脏从生物体内取出，在一定时间内保持在适宜的环境中，通过改变灌流液的成分，观察其对心脏活动的影响。
心肌细胞的自律性、兴奋性、传导性及收缩性，都与钠、钾及钙等离子有关。
外源性给予去甲肾上腺素或乙酰胆碱可产生类似心交感神经或迷走神经兴奋时对心脏的作用。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：青蛙、常用手术器械、蛙板（或蜡盘）、蛙心夹、计算机采集系统、张力传感器、支架、双凹夹、双针形露丝刺激电极、滴管、培养皿（或小烧杯）、棉线、任氏液、0.65%NaCl、2%CaCl2、1%KCl、1：10000肾上腺素、1：10000乙酰胆碱、3%乳酸。
2. 实验仪器：BL-420生物信号分析系统、张力换能器、铁支台、试管夹、蛙类手术器械、蛙心插管、滴管、大烧杯、棉线、双凹夹、滑轮。
四、实验步骤1. 斯氏蛙心插管法：一只青蛙，双毁髓后背位置于蜡盘中，按前面的方法暴露心脏。
仔细识别心脏周围的大血管，在左主动脉下方穿一线，于动脉圆锥下方穿线，将心脏拉出。
2. 心脏插管：将蛙心夹固定在支架上，将心脏放在蛙心夹上，用棉线将心脏与蛙心夹固定。
将蛙心插管插入左心室，用生理盐水冲洗心脏，排除空气。
3. 灌流液准备：分别配制任氏液、0.65%NaCl溶液、2%CaCl2溶液、1%KCl溶液、1：10000肾上腺素、1：10000乙酰胆碱、3%乳酸溶液。
4. 灌流实验：将心脏置于灌流槽中，通过灌流泵将灌流液以一定流速（如5ml/min）灌流心脏，同时用计算机采集系统记录心脏的收缩活动。
5. 观察并记录以下指标：（1）在正常灌流液条件下，记录心脏的收缩频率、收缩幅度。
（2）分别加入Na+、K+、Ca2+、肾上腺素、乙酰胆碱、乳酸，观察并记录心脏的收缩频率、收缩幅度。
实验4-4 蛙类离体心脏灌流
实验4-4 蛙类离体心脏灌流引言离体心脏灌流实验是生理学中常用的方法之一。
不同种类的动物可以通过体表切口或开放胸骨来取出其心脏进行灌流。
而离体心脏灌流实验可以帮助研究者了解心脏的解剖学和生理学特征。
本实验将讲解如何进行蛙类离体心脏灌流实验。
实验器材和试剂1.蛙类（建议使用大型蛙类）。
2.离体心脏灌流系统，包括：- 离体心脏灌流装置（含灌流缓冲液、温度控制器等）。
- 稳压泵。
3.灌流缓冲液，常用的为Tyrode's盐溶液。
实验步骤1. 先将离体心脏灌流系统检查一遍，保证各项设备均运转正常。
2. 杀死一只蛙类，立即进行解剖，取出心脏，并将其迅速转移到灌流装置中。
在移植心脏时应注意不损伤其血管和肌肉组织。
在灌流系统中，除了心脏，不能有其他生物组织残留。
3. 确认灌流系统中的灌流缓冲液温度为20~25℃。
在开始灌流之前，要先排除灌流管路中的空气。
4. 打开灌流泵，根据所选择的灌流缓冲液flow rate控制注入速度，一般建议在3~8ml/min。
确保满足心脏需求的氧气和营养物质可以通过灌流液输送到心脏内部。
5. 注入灌流缓冲液的同时，对心脏进行观察，确认心脏速率、收缩波幅度等生理特征。
6. 加入适当的药物来研究心脏对药物的反应性。
此时应读取每个添加药物后的心脏特征和响应（如速率、波幅等）。
7. 在实验结束时，切断灌流管路和心脏连接，灌流系统中的灌流液应该被排除并清洁。
结果和分析离体心脏灌流实验可以观察心脏的生理学特征和对不同药物的反应，这有助于研究者了解心脏的生理学机制。
在进行本实验时，需要注意不仅仅是心脏的特征，还要关注灌流流量和药物导致的生理反应。
在实验的过程中，如果发现心脏节律不齐或收缩波幅度明显下降，这可能是灌流流量不足造成的。
而添加不同的药物，可以帮助研究者了解心脏的调控机制，同时也可以评估药物的疗效。
需要注意的是，不同种类的动物其心脏组织的特征也是不同的，因此需要根据具体的实验目的选择合适的动物进行实验。
离体心脏灌流实验报告
离体心脏灌流实验报告离体心脏灌流实验报告心脏是人体最重要的器官之一，它的正常运转对于维持身体的正常功能至关重要。
然而，心脏病是全球范围内的一大健康问题，每年造成数百万人死亡。
为了更好地研究心脏病的发病机制以及开发新的治疗方法，离体心脏灌流实验成为了一种重要的研究手段。
离体心脏灌流实验是指将动物或人体心脏取出后，通过人工装置对其进行血液灌流，模拟体内环境，以便研究心脏的生理和病理过程。
这种实验方法可以提供更加精确和可控的条件，避免了体内环境的干扰，从而更好地研究心脏的功能和疾病。
在离体心脏灌流实验中，首先需要将动物或人体心脏取出，并迅速将其连接到灌流装置上。
灌流装置通常由氧气供应系统、血液泵、温度控制系统等组成，以模拟体内环境。
通过调节血液流速、氧气浓度和温度等参数，可以控制心脏的工作状态，观察其生理反应。
通过离体心脏灌流实验，研究人员可以观察心脏在不同条件下的工作情况，如心脏收缩力、心脏节律等。
同时，还可以通过添加特定的药物或激素，研究其对心脏功能的影响。
这种实验方法可以提供更加直接和准确的数据，有助于深入了解心脏病的发病机制。
除了研究心脏的生理功能外，离体心脏灌流实验还可以用于研究心脏疾病的发展过程。
例如，通过给心脏注射特定的病原体或药物，可以模拟心脏病的发病过程，观察心脏在不同阶段的变化。
这种实验方法可以为心脏病的早期诊断和治疗提供重要的参考。
然而，离体心脏灌流实验也存在一些限制。
首先，由于实验条件的局限性，离体心脏灌流实验无法完全模拟人体内复杂的生理环境，因此得到的结果可能与实际情况存在一定的差异。
其次，由于需要使用动物或人体心脏进行实验，涉及到伦理和道德问题，需要严格遵守相关法律和伦理规定。
尽管存在一些限制，离体心脏灌流实验仍然是研究心脏病的重要手段之一。
通过这种实验方法，研究人员可以更加深入地了解心脏的生理和病理过程，为心脏病的预防和治疗提供重要的理论依据。
未来，随着技术的不断进步，离体心脏灌流实验将进一步发展，为心脏病研究带来更多的突破。
16-哺乳类动物离体心脏灌流实验
实验三哺乳类动物离体心脏灌流实验一、实验目的和原理心脏从动物体摘取之后，用有一定压力、温度（37℃）并充氧的修正洛氏液经主动脉根部灌流。
灌流液经冠状动脉口进入冠状血管营养心脏，以维持心脏的节律性活动。
灌流液经冠状血管流入右心房，然后由腔静脉口及肺动脉口流出，在单位时间内的流出量即为冠状动脉血流量（冠脉流量）。
心脏活动可通过张力换能器进行记录，也可用压力换能器（心室内放置水囊）进行记录。
了解哺乳类动物心脏离体灌流方法（Langendorff氏法）和离体心脏冠脉血流量的测定灌流。
观察肾上腺素、乙酰胆碱对心脏活动及冠脉流量的影响。
二、实验动物大鼠三、实验器材与药品哺乳动物类手术器械一套，注射器，针头，线绳，鼠手术台，灌流液瓶，心脏Langendorff法灌流装置，恒温循环器，滑轮，烧杯，量筒，修正洛氏液，1:10000肾上腺素，1:10000乙酰胆碱。
四、实验方法和步骤1．Langendorff灌流装置(图3-1)包括恒温、恒压灌流和供气三个部分。
图3-1 Langendorff法灌流实验装置图(1).修正洛氏液的配置：成分如下2000ml 原液 1000ml20%NaCl (ml) 45 9010%kCl (ml) 4.2 8.410%CaCl (ml) 2.4 4.85%NaHCO3 (ml) 3 6葡萄糖 (g) 2.5 5注意事项：先加蒸馏水(总体积90%左右)，再依次加入上述试剂，但加NaHCO3时应逐滴加入，并不断摇晃混匀，防止形成CaCO3沉淀，最后再加入蒸馏水，补足液体量。
(2).将灌流系统用胶管连接，灌流液瓶灌满灌流液。
调整灌流液瓶的高度使灌流压力达到实验要求，一般要求灌流液瓶中心管的下端距心脏的高度为70～90cm，可按心脏的大小而适当调整。
(3).混合气瓶（或球胆）的减压阀出口用软管接至灌流管内的充气管，调节气瓶上的减压阀，使灌流液中的气泡连续且小而均匀。
(4).调节恒温循环器使心脏插管内的灌流液温度恒定在37℃左右。
机能学实验的实验报告
一、实验名称：离体心脏灌流实验二、实验目的：1. 了解离体心脏灌流实验的基本原理和操作步骤。
2. 观察心脏在不同药物作用下的生理反应，分析药物对心脏功能的影响。
三、实验原理：离体心脏灌流实验是通过将心脏从动物体内取出，放置在适宜的生理盐水中，通过灌流泵将生理盐水灌流心脏，模拟心脏在体内的生理活动，观察心脏在不同条件下的生理反应。
四、实验材料与仪器：1. 实验动物：家兔一只2. 仪器：灌流装置、生理盐水、氯化钾、肾上腺素、异丙肾上腺素、阿托品、酚妥拉明、量筒、计时器等五、实验步骤：1. 家兔处死后，迅速取出心脏，置于盛有生理盐水的培养皿中。
2. 将心脏放入灌流装置中，连接灌流泵和生理盐水。
3. 调整灌流泵的流速，使心脏在适宜的生理盐水环境中进行灌流。
4. 观察心脏的跳动情况，记录心跳次数。
5. 分别向灌流系统中加入不同药物，观察心脏的生理反应，记录心跳次数和药物浓度。
6. 比较不同药物对心脏功能的影响。
六、实验结果：1. 在正常生理盐水中，心脏跳动正常，心跳次数约为每分钟80次。
2. 加入氯化钾后，心跳次数逐渐减少，直至心跳停止。
3. 加入肾上腺素后，心跳次数明显增加，心跳次数达到每分钟150次。
4. 加入异丙肾上腺素后，心跳次数也明显增加，心跳次数达到每分钟200次。
5. 加入阿托品后，心跳次数逐渐减少，直至心跳停止。
6. 加入酚妥拉明后，心跳次数明显减少，心跳次数约为每分钟50次。
七、实验分析：1. 氯化钾是心脏的抑制剂，可导致心跳停止。
2. 肾上腺素和异丙肾上腺素是心脏的兴奋剂，可导致心跳次数增加。
3. 阿托品是心脏的抑制剂，可导致心跳停止。
4. 酚妥拉明是心脏的抑制剂，可导致心跳次数减少。
八、实验结论：通过离体心脏灌流实验，我们了解了心脏在不同药物作用下的生理反应。
实验结果表明，不同药物对心脏功能具有不同的影响，肾上腺素和异丙肾上腺素可兴奋心脏，使心跳次数增加；氯化钾、阿托品和酚妥拉明可抑制心脏，使心跳次数减少或停止。
离体心脏灌流实验报告
一、实验目的1. 熟悉离体心脏灌流技术的基本操作。
2. 观察和分析不同生理、病理因素对离体心脏功能的影响。
3. 掌握记录和分析心脏功能指标的方法。
二、实验原理离体心脏灌流实验是生理学研究中常用的一种方法，通过将心脏从机体中取出，在体外模拟生理环境条件下进行灌流，观察和分析心脏功能的变化。
实验中，通过改变灌流液的成分、温度、pH值等条件，可以研究不同因素对心脏功能的影响。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：青蛙、蛙心夹、蛙板、蛙类手术器械、二道仪、任氏液、长滴管、铁支架、玻璃管、量筒、秒表等。
2. 实验仪器：显微镜、电子天平、恒温器、恒温水浴箱、高压消毒锅等。
四、实验方法与步骤1. 实验准备（1）取一只青蛙，用蛙类手术器械进行解剖，暴露心脏。
（2）将心脏夹在蛙心夹上，用线固定在蛙板上。
（3）在心脏主动脉下方穿一线，结扎并留出一段备用。
（4）将心脏主动脉左支结扎，于动脉圆锥处剪一向心斜切口，插入灌流管。
2. 灌流实验（1）将灌流管一端插入恒温器中的任氏液中，另一端与心脏主动脉相连。
（2）调整恒温器，使任氏液温度保持恒定。
（3）开启灌流泵，使任氏液以恒定速度灌流心脏。
（4）观察心脏收缩情况，记录心率、收缩幅度等指标。
（5）依次改变灌流液的成分、温度、pH值等条件，观察心脏功能的变化。
3. 实验数据记录与分析（1）记录不同灌流条件下心脏的心率、收缩幅度等指标。
（2）分析不同生理、病理因素对离体心脏功能的影响。
（3）绘制心脏功能曲线，分析实验结果。
五、实验结果与分析1. 灌流液中加入肾上腺素后，离体心脏心率加快，收缩幅度增强。
2. 灌流液中加入乙酰胆碱后，离体心脏心率减慢，收缩幅度减弱。
3. 降低灌流液温度后，离体心脏心率减慢，收缩幅度减弱。
4. 提高灌流液pH值后，离体心脏心率加快，收缩幅度增强。
六、实验结论1. 肾上腺素和乙酰胆碱对离体心脏功能具有调节作用，肾上腺素使心脏兴奋，乙酰胆碱使心脏抑制。
2. 温度和pH值对离体心脏功能有显著影响，低温和碱性环境有利于心脏功能的维持。
离体灌流功能介绍
离体灌流功能介绍
离体心脏灌流系统是配合做离体心脏灌流实验的一套系统。
离体心脏灌流实验将动物心脏取出，连接到特定的灌流装置，用灌流液灌注，排除了神经和体液的控制，配合特别分析软件记录心室内压、动脉血压和心电信号，自动分析各项生理参数，离体心脏灌流系统用于病理生理情况下的心功能与血流动力学改变等研究，在生理、病理生理以及药理学研究中已得到广泛地应用。
药物的心脏毒性是指药物作用于心脏后，引起的心脏生理功能异常或者损害的药效反应，如心肌损伤、心律失常、收缩或舒张功能异常，心肌肥厚和心力衰竭等。
近年来，随着新药研发量及上市药物量的不断增加，心脏毒性的不良反应报道也随之上升，因此药物的心脏安全性评价研究越来越受到重视。
Langendorff 离体心脏灌流技术是19世纪末Oskar Langendorff开发的一种实验方法，它凭借重复性高，稳定性强的特点成为心血管研究领域中使用最为广泛的实验模型之一。
该技术通过将导管插入心脏主动脉实现冠状动脉逆行灌注，可用于评估药物对心脏的直接影响或药物对于心肌损伤的保护作用。
因此，在药物前期研发阶段加强对心血管不良反应的研究，可以有效趋利避害，同时拓展药物的新用途。
蛙类离体心脏灌流PPT课件
直接引用参考文献中的原文或数据，需要在文中注明出处，并在末尾列出相应的参考文献 。
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使用蛙心夹夹住心脏，确保心脏保持一定的张力， 便于插管。
实验方法与步骤
插管
将蛙心插管插入心脏， 确保插管与心脏紧密 连接，无漏液现象。
灌流
将灌流装置与插管连 接，打开灌流装置， 使生理盐水或其他实 验试剂流入心脏。
观察与记录
观察心脏的跳动情况， 记录相关数据，如心 率、收缩压等。
实验结束
实验结束后，断开灌 流装置与插管的连接， 取出插管，用生理盐 水冲洗心脏，取出蛙 心夹，取出心脏。
实验的局限性
我们指出了实验的局限性， 包括实验条件、样本量等 方面的问题。
04
实验结论与展望
实验结论
实验表明，蛙类离体心脏灌流实 验是一种可靠的生物学实验方法， 可用于研究心脏生理和药理机制。
在实验过程中，我们观察到了心 脏的收缩和舒张过程，以及药物 对心脏功能的影响，证明了该实
验方法的可行性和有效性。
通过深入研究蛙类心脏的生理和 药理机制，可以为人类心脏相关 疾病的防治提供更多有益的思路
和方法。
未来发展方向
我们计划进一步优化实验条件和方法， 提高实验的准确性和可靠性，为更多 的科研工作者提供更好的服务。
在未来的发展中，我们将不断更新实 验技术和方法，加强与其他科研机构 的合作与交流，共同推动相关领域的 发展和进步。
实验注意事项
实验前应仔细检查所有实 验材料是否完好，如有损 坏应及时更换。
在实验过程中要保持安静， 避免干扰到心脏的正常跳 动。
插管时要小心操作，避免 损伤心脏组织。
在灌流过程中要保持恒温， 以免影响实验结果。
心脏灌流实验报告
一、实验目的1. 学习离体心脏灌流技术的基本原理和方法。
2. 观察不同灌流液成分对离体心脏活动的影响。
3. 分析Na+、K+、Ca2+等离子及肾上腺素、乙酰胆碱等药物对心脏功能的作用。
二、实验原理离体心脏灌流实验是通过将离体心脏置于特定的灌流液中，模拟心脏在体内的生理环境，研究心脏生理功能的一种实验方法。
在实验过程中，通过改变灌流液的成分，可以观察心脏的收缩、舒张、心率、传导性等生理指标的变化，从而了解不同因素对心脏功能的影响。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：青蛙、常用手术器械、蛙板、蛙心夹、计算机采集系统、张力传感器、支架、双凹夹、双针形露丝刺激电极、滴管、培养皿、棉线、任氏液、0.65%NaCl、2%CaCl2、1%KCl、1:10000肾上腺素、1:10000乙酰胆碱、3%乳酸。
2. 实验仪器：手术显微镜、手术刀、镊子、剪刀、缝针、线、电子天平、量筒、移液器、秒表、温度计等。
四、实验方法与步骤1. 蛙心制备：- 取青蛙一只，用手术刀在颈部背侧切开皮肤，暴露心脏。
- 用镊子轻轻夹住心脏周围的组织，使其脱离周围组织。
- 将心脏置于蛙板上，用手术刀将心脏周围的血管和神经分离。
- 将心脏固定在蛙心夹上，连接张力传感器。
2. 灌流液准备：- 将任氏液、0.65%NaCl、2%CaCl2、1%KCl、1:10000肾上腺素、1:10000乙酰胆碱、3%乳酸等试剂按照实验要求配置好。
3. 实验操作：- 将蛙心置于任氏液中，调节温度至37℃。
- 用移液器将配置好的灌流液滴入蛙心，记录心脏的收缩、舒张、心率等生理指标。
- 依次更换灌流液，观察不同灌流液成分对心脏功能的影响。
- 记录实验数据，并进行统计分析。
4. 结果分析：- 分析不同灌流液成分对心脏收缩、舒张、心率等生理指标的影响。
- 分析Na+、K+、Ca2+等离子及肾上腺素、乙酰胆碱等药物对心脏功能的作用。
五、实验结果与分析1. 正常灌流液对心脏功能的影响：- 心脏在正常灌流液中呈现规律性的收缩和舒张，心率稳定。
离体心脏灌流
灌流压大小恰当，压力过低则冠状动脉灌流量不足，
过高则因主动脉根部过于扩张导致主动脉瓣关闭不全。
灌流液温度恒定：37 ℃ (95% O2 + 5% CO2饱和)。
Langendorff 法的缺陷与改进
由于在实验过程中心室不充盈，心室不按照容
量－压力曲线作功。
后来其实验方法被不断改进，以适应各种不同研 究的需要，如在按上述灌流方法进行灌流以保持心脏 存活的同时，在用另一根插管插入右心房灌流心脏，
人一个体外的闭合循环通路中，并由两个弹性瓣膜控制其
单向流动。
每次心脏收缩时，由球囊排除的液体量相当于心脏的
每搏输出量，可以通过顺序连接的一个流量计探头和一个 积分仪进行测量。前负荷和后负荷可以分别调整。经主动 脉逆灌进入冠状动脉的灌注液流量也可单独记录下来。
其它改进
将微型压力传感器经肺静脉、左心房和二尖瓣放入左
负荷和后负荷。
注意事项
① 不能损伤或结扎静脉窦； ② 主动脉内的插管不要过深以免抵住主动脉瓣 ③ 两根插管有一定相对位置，插管前要考虑好方向， 插管后应避免血管扭曲，保证灌流畅通 ④ 避免气泡进人心脏。
哺乳类动物离体心脏灌流
——Langendorff 法
Langendorff首次描述了保持哺乳动物离体心
的相互关系，不能完全反映心脏在整体情况
下的活动规律与正常整体情况。
离体心脏灌流方法
两栖类动物： 蟾蜍、青蛙等 Straub法、八木法
哺乳类动物：大鼠、家兔、猫等
Langendroff 法
经典的离体蛙心灌流——Straub法
灌流途 心室腔内，灌流液通过 同一蛙心插管进入心室 腔和流出，前负荷和后
则可研究压力－容积作功关系。
实验六 蛙类离体心脏灌流
五、注意事项
1. 向套管中加入药物之前，套管中应保留 少量的任氏液； 2．吸去的药液和清洗的任氏液应滴入废液 缸，切记不能污染新鲜的任氏液和其他 药液； 3. 实验记录要完整，即有头有尾，要记得 作标记。
六、结果和目标
观察并记录各灌流成分对心搏的影响。
七、思考题 1． 此实验说明心肌有哪些生理特性？ 2. 以本实验为例说明内环境相对恒定 的重要意义。
四、实验内容 （步骤）
看示范和录像） （一）离体蛙心的制备 （看示范和录像） （二）暴露心脏 （三）连接实验装置 （四）记录心搏曲线
（五）向套管内加2-6滴5%NaCl溶液，加液时 按一下“enter”键作标记记录的曲线出现变化 时，立即吸套管中的灌流液（作好冲洗标记）， 用新鲜任氏液清洗2-3次，待心搏恢复正常。 （2）向套管内加入1滴2%Cacl2溶液观察心搏 曲线的变化（方法同上）。 （3）向套管中加1-2滴1%Kcl溶液观察心转曲 线的变化（方法同上）。 （4）向套管中加入1-2液1:100,000肾上腺素 溶液，观察心搏曲线的变化（方法同上）。 （5）向套管中加入1-2滴1:1000,000乙酰胆碱 溶液，观察心搏曲线变化（方法同上）。
动物生理实验模块
实验六
蛙类离体心脏灌流
一、实验目的 1#43;、Ca2+、肾 上腺素、乙酰胆碱等对离体心 脏活动的影响。
二.原理
心肌具有自动节律性，可用人工灌流的方 法研究心脏活动的体液调节。
三、试剂与器材
蛙、微机、生物信号处理系统、解剖针、 手术剪、眼科剪、尖头手术镊、蛙心套 管、圆头手术镊、蛙板、张力换能器、 蛙心夹、棉花、棉线、任氏液、长胶头 滴管、5%NaCl溶液、2%CaCl溶液， 1%Kcl溶液、1:100,000肾上腺素溶液、 1:1000,000乙酰胆碱溶液、烧杯
蛙类离体心脏灌流实验
蛙类离体心脏灌流实验蛙类离体心脏灌流实验一、实验目的1、探究不同溶液对心肌特性的影响2、掌握离体心脏灌流的技术二、实验原理（一）两栖类动物无冠状循环两栖类动物无冠状循环，心肌直接从流经心腔的血流中获取营养。
即心室肌直接从心室腔中获得营养。
故用任氏液置换心室中的血液后，心室插管中的灌流液便成为心室肌的细胞外液。
（二）心肌对细胞外离子浓度和体液因素敏感（三）钾、钙和钠离子对心肌特性的影响由于心肌细胞生物电活动和收缩过程与离子密切相关，因此，细胞外液中离子浓度升升高或降低均会影响到心肌的电生理特性和收缩性。
（1）钾离子的影响K＋与静息电位的形成有关。
细胞外液K＋浓度[K＋]0变化对心肌生理特性的影响较为复杂。
高钾：[K＋]0轻度或中度增高时，膜内、外K＋浓度差减小，静息电位绝对值减小，与阈电位差距缩短，因此，兴奋性增高。
[K＋]0显著升高时，由于静息电位绝对值减小过多（膜内达-55mV 左右），Na＋通道失活，因而兴奋性降低甚至消失。
另外，还使0期去极化速度和幅度减小，传导性降低，导致兴奋传导减慢，甚至传导阻滞。
此外，[K＋]0增高还可提高膜对K＋的通透性，加速K＋外流，动作电位平台期缩短，因此，不应期缩短。
此外由于平台期缩短，减少了Ca2＋的内流，加上细胞外K+与Ca2+在膜上有竞争性抑制作用，导致心肌收缩功能减弱；（2）钙离子的影响细胞外Ca2＋在细胞膜上对Na＋内流有竞争性抑制作用，称为膜屏障作用。
[Ca2＋]0增高时，Na＋内流受抑制，细胞0期除极速度与幅度减小，使兴奋性及传导性均降低。
[Ca2＋]0增高使Ca2＋内流增多，因此慢反应细胞0期去极化加快加强，传导性增高，而快反应细胞平台期缩短，有效不应期缩短，复极加速。
Ca2＋内流增多，使心肌收缩能力增强。
[Ca2＋]0降低时，所引起的变化与高钙时相反。
（3）钠离子的影响细胞外液中钠浓度差梯度的变化一般对心肌活动影响不明显。
只有当[Na＋]0明显增高时，膜内外钠的浓度差梯度增大，因此，快反应细胞Na＋内流加快，0期去极速度和幅度均增加，导致传导性和自律性增高。
离体心脏灌流 - 成都泰盟软件有限公司
Tolerance to acute ischemia in adult male and female spontaneously hypertensive rats. Physiol Res. 2006 Jun 22; GENE EXPRESSION OF STRETCHACTIVATED CHANNELS AND MECHANOELECTRIC FEEDBACK IN THE HEART. Clin Exp Pharmacol Physiol. 2006 Jul;33(7):642-648.
Isolated Working heart Perfusion apparatus
基础灌流液：K-H液 Nacl 118mM KCl 4.7mM KH2PO4 0.93mM NaHCO3 24mM 1.5mM se 10mM 加d.H2O至1000ml /pH7.4 在此基础上，可加白蛋白，氨基酸，去纤维蛋白 血，RBC…… 灌流液的气体：95%O2+5%CO2 1.5升/分（25ml/s） 灌流压力：80~100mmHg
Calcium measurements with a new highaffinity n.m.r. indicator in the isolated perfused heart Biochem. J. (1993) 293, 407-411
注意事项
1. 待灌流装置运转良好，灌流液充分氧合、37℃ 后，再开始准备取心脏。 2. 取心脏的过程要快捷、轻柔，尽可能长地保留升 主动脉。 3. 心脏取出后迅速置于冷仃跳液中，使心脏仃跳， 并轻压心脏排出心脏和冠脉中残留的血液。 4. 插管时保持主动脉始终在液面下，避免空气进入 主动脉。 5. 插管不宜太深，避免顶住冠脉入口，甚至进入左 心室。
大鼠离体心脏灌流技术
附录三 大鼠离体心脏灌流技术大鼠离体心脏灌流（Langendorff）是研究离体心脏在人工控制条件下，观察各种因素（药物、缺氧、离子等）对大鼠心脏活动（心脏的收缩功能、舒张功能、冠脉流量、心肌电活动等）的影响的一种可靠方法。
心脏从大鼠体内摘出之后，以一定压力、温度及充氧的生理溶液经主动脉根部流入进行灌流。
灌流液经冠状动脉口进入冠状血管营养心脏，维持心脏的节律活动。
灌流液经冠状血管进入右心房，然后由腔静脉口和肺动脉口流出，其流出量即为冠状血管的管流量。
离体心脏的节律性活动及心肌电活动变化可以通过记录系统进行记录和分析。
用Langendorff发灌流心脏，其节律性活动可维持较长的时间（一般可维持3~6h）。
仪器装置：仪器的核心部分是恒温、循环和浴槽三部分组成，一般进口这套设备需人民币十几万元。
我们教研室因经费十分紧张又急需这样的设备，针对这种情况，我们自行设计和制作出这套离体心脏灌流设备（见下图）。
经过反复的试验，验证了这套灌流装置无论在性能上、稳定性上都达到了要求，而且只用了二千元人民币。
循环装置恒温装置离体心脏及浴槽操作步骤1．摘取心脏先准备好手术器械（手术剪1把、无勾镊1把、眼科剪1把、眼科镊1把、止血钳2把、50ml烧杯1个、5ml和20ml注射器各1个、1号缝合线等）和充氧之冷台氏液（4℃左右）。
将大鼠麻醉或颈部脱臼后，打开胸腔充分暴露心脏，轻轻提起心脏并迅速摘取心脏。
手术过程中注意不要损伤心脏。
主动脉根部要保留0.5cm长以备插管用。
心脏摘取后立刻置于预先准备好的充氧冷台氏液中，用手指轻压心室将腔内的血液排出，防止血块形成。
心脏停跳后迅速剪去心脏周围的组织，操作中注意避免损伤静脉窦。
2．灌流心脏先将灌流系统的管道内充满台氏液（或其他灌流液），并连续充气（纯氧或O2 95%+CO2 5%的混合气体），灌流液温度保持在37℃。
将主动脉套进灌流管末端的动脉套管上并结扎固定好。
套管进入主动脉不易过深，以免损伤主动脉瓣或堵住冠状动脉开口处影响冠状血管的灌流。
离体蛙心灌流实验报告
离体蛙心灌流实验报告
实验目的，通过离体蛙心灌流实验，观察心脏在不同药物作用下的生理变化，
为心脏药理学研究提供实验数据。
实验材料与方法，取新鲜的蛙心，进行离体灌流实验。
首先，将蛙心置于离体
心脏灌流装置中，通过主动脉插管进行心脏灌流。
然后，分别加入不同药物溶液，如肾上腺素、乙酰胆碱等，观察心脏的生理变化。
实验过程中，记录心脏的心率、收缩力、舒张力等指标，并进行统计分析。
实验结果，在加入肾上腺素后，观察到蛙心的心率明显增加，心脏收缩力增强，舒张力减弱；而在加入乙酰胆碱后，心率明显减慢，心脏收缩力减弱，舒张力增强。
这些结果表明，肾上腺素具有增强心脏收缩力和加快心率的作用，而乙酰胆碱则具有减慢心率和减弱心脏收缩力的作用。
实验讨论，离体蛙心灌流实验是一种常用的心脏药理学研究方法，通过模拟体
内环境，观察心脏在不同药物作用下的生理变化。
本实验结果与心脏药理学理论相符，说明离体蛙心灌流实验是一种可靠的实验方法，能够为心脏药理学研究提供重要数据。
结论，通过离体蛙心灌流实验，我们观察到了心脏在不同药物作用下的生理变化，验证了心脏药理学理论。
这为心脏药物的研发和临床应用提供了重要参考，也为心脏疾病的治疗提供了新的思路和方法。
在今后的研究中，我们将进一步探索心脏药物的作用机制，寻找更多有效的心
脏药物，并将离体蛙心灌流实验应用于心脏药理学研究的更多领域，为心脏疾病的治疗和预防做出更大的贡献。
通过本次实验，我们对离体蛙心灌流实验有了更深入的了解，并对心脏药理学
研究有了更加清晰的认识。
希望本实验能为相关领域的研究工作提供一定的参考和帮助。
langendorff离体心脏灌流系统介绍
langendorff离体心脏灌流系统介绍
● 功能
配合完成离体心脏灌流实验。
将动物心脏取出，连接到特定的灌流装置，用灌流液灌注，排除了神经和体液的控制，配合特别分析软件记录心室内压、动脉血压和心电信号，自动分析各项生理参数，用于病理生理情况下的心功能与血流动力学改变等研究，在生理、病理生理以及药理学研究中已得到广泛地应用。
离体心脏灌流系统是针对当前医学院校及科研机构的药理实验自主研发的实验产品，分为A型和B型两种型号。
A型为标准型，具一道Langendorff灌流支路和一道工作心脏灌流支路，B型为双道Langendorff 灌流式，可同时做两路Langendorff 灌流实验。
● 参考使用方法
SD大鼠Langendorff离体心脏灌注模型：称重，腹腔注射10%水合氯醛（300mg/kg）麻醉，并注射肝素（1000U/kg）抗凝，将麻醉大鼠固定在鼠台上，刮掉胸前毛发；剑突下作切口，沿左右肋缘横向剪开腹前壁，再依次沿左右腋中线纵向剪开两胸侧壁，将胸壁翻至头侧，打开心包膜，暴露心脏；左手拇指和食指轻轻提起心脏，暴露心底血管，迅速将其剪断，取出的心脏立即放入4℃的KH灌流液中停搏；在液面下夹住主动脉断端，将套管插入主动脉，用缝线结扎固定，连接Langendorff离体心脏灌注装置，KH缓冲液经主动脉逆行灌注，恒温水箱维持体温在37℃，接测压气囊、电磁流量计和针状电极。
连接多导生理记录仪采集数据。
然后根据实验设计调节灌注液温度，添加实验试剂。
心脏的灌流实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 学习心脏灌流实验的操作方法。
2. 观察不同理化因素对心脏活动的影响，包括离子浓度、温度、pH值、激素及药物等。
3. 了解心脏生理学中离子、神经递质等对心脏活动调节的作用。
二、实验原理心脏灌流实验是研究心脏生理学的重要方法之一。
通过建立离体心脏灌流模型，可以模拟心脏在体内的生理环境，观察和分析不同因素对心脏活动的影响。
离体心脏在适宜的灌流液中，可以维持一定时间的节律性收缩和舒张，从而为实验提供基础。
三、实验对象与材料实验对象：蟾蜍实验材料：1. 任氏液2. 0.9%氯化钠溶液3. 2%氯化钙溶液4. 1%氯化钾溶液5. 0.1%肾上腺素溶液6. 0.1%乙酰胆碱溶液7. 3%乳酸溶液8. 1%碳酸氢钠溶液9. BL-420生物信号分析系统10. 张力换能器11. 铁支台12. 试管夹13. 蟾蜍手术器械14. 蟾心插管15. 滴管16. 大烧杯17. 棉线18. 双凹夹19. 滑轮四、实验步骤1. 暴露心脏：将蟾蜍处死，取出心脏，置于盛有任氏液的培养皿中。
2. 心脏插管：用蟾蜍手术器械将心脏动脉圆锥处结扎，并插入心脏插管。
3. 灌流液准备：根据实验需求，配置不同理化条件的灌流液。
4. 灌流实验：a. 将心脏插管与张力换能器连接，通过BL-420生物信号分析系统实时监测心脏活动。
b. 分别用不同灌流液进行灌流，观察心脏活动的变化。
c. 记录不同灌流液对心脏活动的影响，包括心率、收缩幅度等指标。
5. 数据分析：对实验数据进行分析，得出结论。
五、实验结果1. NaCl溶液灌流：心率减慢，收缩幅度降低。
2. KCl溶液灌流：心率减慢，收缩幅度降低。
3. CaCl2溶液灌流：心率加快，收缩幅度增强。
4. 肾上腺素溶液灌流：心率加快，收缩幅度增强。
5. 乙酰胆碱溶液灌流：心率减慢，收缩幅度降低。
6. 乳酸溶液灌流：心率减慢，收缩幅度降低。
7. 碳酸氢钠溶液灌流：心率加快，收缩幅度增强。
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测仪上的电极测定冠状静脉的 Po2, 并可结合灌流液的
Po2和冠状动脉流量计算心肌耗氧量； 经过两根固定在心脏表面的电极可记录心外膜心电图； 心脏内埋藏电极记录希氏束电图等。
Necly等的改进(1967)
在肺静脉或左心房内插入另一根导管，灌流液经 此导管进入左心房，并通过二尖瓣进入左心室，左 心室收缩时将灌流液通过主动脉泵出，该方法可改 变心脏的前后负荷，测定心输出量、压力－容积作 功关系等。
Bardenheuer等的改进(1983)
小球囊插入左心室，通过一个插管将球囊内的液体泵
负荷和后负荷。
注意事项
① 不能损伤或结扎静脉窦； ② 主动脉内的插管不要过深以免抵住主动脉瓣 ③ 两根插管有一定相对位置，插管前要考虑好方向， 插管后应避免血管扭曲，保证灌流畅通 ④ 避免气泡进人心脏。
哺乳类动物离体心脏灌流
——Langendorff 法
Langendorff首次描述了保持哺乳动物离体心
脏存活的方法，采用恒压或恒流方式，从主动脉
根部逆向用含氧灌流液灌流心脏，这种方式的逆
向灌注关闭了主动脉瓣，使得灌注液经冠状动脉
分布，并流入冠状窦和右心房。
实验方法
1.麻醉、取出心脏：在戊巴比妥钠麻醉和人工呼吸
的 情 况 下 迅 速 取 出 心 脏 ， 置 于 盛 满 37 ℃ 氧 饱 和 的
Ringer’s液的盘中，去除粘附的心包和肺组织，确定主 动脉的位置，并恰好在其分支下方切断。 2. 主动脉插管：将一个玻璃或塑料的插管插入主 动脉，注意插管不要过深以免损伤主动脉瓣，结扎固 定。
离体心脏灌流
Cardiac Perfusion in Vitro
离体心脏灌流的基本原理
将动物的心脏从体内取出放入特定的生理代
用液中，根据不同的实验目的和不同种属动物特
点进行恒温、通氧或恒温灌流及建立与动物机体
内环境基本相似的人工环境，以保证心脏维持正 常活动状态。
离体心脏灌流的意义
在离体条件下观察并记录心脏的生理活动、 病理变化以及各种药物和试剂等施加因素对其 生理生化及形态变化的影响。
则可研究压力－容积作功关系。
Gottlieb等的改进(1904)
将可充水的小球囊固定在一根导管末端，经肺静脉、
左心房和二尖瓣放入左心室。
球囊内注水量与左心室容积相等，相当于前负荷大
小，可根据实验要求选择预定的前负荷或改变前负荷。
心脏收缩舒张过程给球囊一个有节律的压力，传导 到压力传感器上。 优点：压力变化和前负荷大小可以读出 (mmHg)，可 记录左心室收缩曲线，并记录心率。
离体工作心脏
Isolated working heart preparation
冠状动脉结扎与心肌缺血再灌
Scholz 等(1992,1993)在进行心肌缺血再灌实验 时，用65 mmHg恒定压力灌注离体工作心脏20 min ( 缺血前期) 后，夹闭左冠状动脉近端 15 min，造成
的相互关系，不能完全反映心脏在整体情况
下的活动规律与正常整体情况。
离体心脏灌流方法
两栖类动物： 蟾蜍、青蛙等 Straub法、八木法
哺乳类动物：大鼠、家兔、猫等
Langendroff 法
经典的离体蛙心灌流——Straub法
灌流途径与正常循
环途径不同，蛙心插管
通过主动脉瓣直接插入 心室腔内，灌流液通过 同一蛙心插管进入心室 腔和流出，前负荷和后
离体心脏灌流的优点
1. 排除在整体情况下体内各种复杂因素的干扰，直
接观测离体心脏标本的各项指标。
2. 易于严格控制实验环境，方法简便精确，有利于
分析作用机制及对药物的药效作定量研究。
3. 易于获得准确、精细的结果。
缺点和局限性
失去了机体完整统一的内环境和神经体液 调控作用，失去了体内各种组织、细胞之间
灌流压大小恰当，压力过低则冠状动脉灌流量不足，
过高则因主动脉根部过于扩张导致主动脉瓣关闭不全。
灌流液温度恒定：37 ℃ (95% O2 + 5% CO2饱和)。
Langendorff 法的缺陷与改进
由于在实验过程中心室不充盈，心室不按照容
量－压力曲线作功。
后来其实验方法被不断改进，以适应各种不同研 究的需要，如在按上述灌流方法进行灌流以保持心脏 存活的同时，在用另一根插管插入右心房灌流心脏，
4. 连接记录装置：
将一特制的金属小钩固定在心尖部，利用张力传
感器与多导记录仪相连并描记心脏收缩曲线和测定
收缩力等指标。
Langendorff 离体心脏灌流装置可用于测定不同
种生理学试剂和药物的直接效应，以及对这些药物
的拮抗作用。还可观察冠脉流量的变化。
注意事项
取心脏和插管操作需迅速。 插管不易过深，以免损伤主动脉瓣。
人一个体外的闭合循环通路中，并由两个弹性瓣膜控制其
单向流动。
每次心脏收缩时，由球囊排除的液体量相当于心脏的
每搏输出量，可以通过顺序连接的一个流量计探头和一个 积分仪进行测量。前负荷和后负荷可以分别调整。经主动 脉逆灌进入冠状动脉的灌注液流量也可单独记录下来。
其它改进
将微型压力传感器经肺静脉、左心房和二尖瓣放入左
3. 灌流：
将心脏转移到一个双层壁的玻璃浴槽（类似于做离体
小肠平滑肌灌流用的恒温浴槽或麦氏浴槽）中，浴槽内加
入 Ringer’s 液或 Krebs—Henseheit 缓冲液，利用恒温水浴
使这一装置保持在37℃。 经 主 动 脉 插 管 灌 注 氧 饱 和 的 Ringer’s 液 或 Krebs— Henseheit缓冲液，持续保持适当的灌注压。
负荷相ห้องสมุดไป่ตู้。
方
1. 破坏脑脊髓，暴露心脏。
法
2. 心室插管 3. 游离蛙心 4. 使用张力传感器
5. 改变灌流液成分
注
① 不能损伤或结扎静脉窦 ② 插管一定要进入心室腔
意
③ 出现作用后立即用新鲜任氏液换洗三次，以免心肌受损
④ 蛙心插管内液面应保持恒定，以免影响结果
八木法离体蛙心灌流
特点： 灌流途径按正常循环途径 设计，一根蛙心插管插入左肝 静脉并进入静脉窦，另一根蛙 心插管仅插入主动脉，并不穿 过主动脉瓣进入心室腔内，可 以根据实验要求设定不同的前