结核杆菌五种实验室检测方法比较张小红
5种结核杆菌检测方法的临床应用价值
Ｄ ＯＩ ： １ ０ ． ３ ９ ６ ９ ／ ｊ ． ｉ ｓ ｓ ｎ ． １ ６ ７ ２ — ９ ４ ５ ５ ． ２ ０ １ ５ ． ０ ３ ． ０ １ ９ 文献 标 志 码 ： Ａ 文章编号 ： １ ６ ７ ２ — ９ ４ ５ ５ （ ２ ０ １ ５ ） ０ ３ — ０ ３ ３ ４ — ０ ３
别为 ３ ５ ． ２ ９ 、 ４ ３ ． １ ４ 、 ６ Ｏ ． ７ ８ 、 ９ ３ ． １ ４ ， 特 异性 分别为 ９ ５ ． ８ ３ 、 ９ ５ ． ８ ３ 、 ７ ５ ． Ｏ Ｏ 、 ９ １ ． ６ ７ 。 结 论 Ｉ ＭＣ — Ｐ Ｃ Ｒ —
Ｅ Ｉ Ｉ Ｓ Ａ 与 ＡＦ Ｓ 、 Ｉ ＭＣ — ＡＦ Ｓ 、 Ｄ Ｉ Ｃ Ａ及普通 Ｐ Ｃ Ｒ相 比 ， 具有快速 、 灵敏 、 特异 、 可 定量 的特 点 ， 是 临 床 快 速诊 断 结 核 病 的
【 摘 要】 目的 比较 和 分 析 免 疫 磁 珠 捕 获 联 合 双 内标 聚 合 酶 链 反 应 一 酶 联 免 疫 吸 附试 验 定 量 检 测 结 核 杆 菌 技 术（ Ｉ ＭＣ － Ｐ Ｃ Ｒ — Ｅ ｌ Ｉ Ｓ Ａ） 与 其 他 几 种 结核 杆 菌检 测 法在 结核 病 诊 断 中 的 临 床 应 用 价 值 。 方 法 以 １ ０ ２ 例 结 核 分 枝 杆 菌痰 培 养 阳性 的 患 者作 为 阳性 对 照 ， 以４ ８例 结 核 分 枝 杆 菌 培 养 阴性 的 非 结 核 普 通 住 院患 者 作 为 阴性 对 照 。比 较 抗 酸 染 色涂 片 法 （ ＡＦ Ｓ ） 、 免 疫 磁 珠～ 抗 酸 染 色涂 片 法 （ Ｉ ＭＣ — ＡＦ Ｓ ） 、 金标抗 结核抗体 检测 法（ Ｄ Ｉ Ｃ Ａ） 、 普通 Ｐ Ｃ Ｒ及 Ｉ ＭＣ —
结核菌的实验室检测
结核菌的实验室检测实验室检查是确诊结核病、选择治疗方案、评价治疗效果的重要依据，也是发现传染源，控制结核病流行的重要手段。
目前，结核病常用的实验室检查主要包括：痰涂片检查、痰结核菌培养及药物敏感性试验、分子生物学检查等。
1.痰涂片检查痰标本采集：一般应采集3种痰标本：即时痰：就诊即时咳出的痰清晨痰：清晨深咳出的痰夜间痰：就诊前夜间咳出的痰。
痰标本的要求：痰标本采集的时间、痰标本质量好坏和是否在使用抗结核药等均直接影响结核菌的检出。
痰标本应以脓样、干酪样或脓性粘液样性质的痰液为合格标本。
痰量为3ml～5ml。
晨痰涂片阳性率比较高。
当患者痰少时，可采用高渗盐水超声雾化导痰。
痰涂片结果：包括：阳性、阴性结果的意义：涂片染色阳性只能说明抗酸杆菌存在，不能区分是结核菌还是非结核分枝杆菌。
由于我国非结核分枝杆菌病较少，故检出抗酸杆菌对诊断结核病有极重要的意义。
直接涂片方法简单、快速，应作为常规检查方法。
涂片阴性不能排除肺结核，连续检查3次以上,可提高其检出率。
2痰结核菌培养确定诊断：临床怀疑肺结核，但直接痰涂片结果为阴性，为进一步明确诊断，可进行痰培养。
确定诊断的培养检查应采集2个合格的痰标本，即夜间痰和晨痰。
耐药监测：以耐药监测为目的的培养，主要是为了获得分枝杆菌的纯培养物用于药敏试验，所以一般选用涂片阳性的标本进行培养。
药敏试验：这是了解抗结核药物是否对结核菌敏感、诊断耐药结核以及指导结核病治疗的有效手段。
痰培养结果：包括：阳性、阴性痰结核菌培养的灵敏度高于痰涂片检查，可直接获得菌落，便于与非结核分枝杆菌鉴别。
未进行抗结核治疗或停药48-72小时的肺结核患者可获得比较高的检出率。
痰结核菌培养所需时间较长，一般需培养4-8周。
3、分子生物学检测目前，国内结核病的检测，绝大部分还是采用的是痰涂片镜检。
由于它敏感性差，漏检率可达40%-80%。
而结核菌培养通常需要1-2个月左右的时间才能出结果，这样，在实际工作中就会带来很多问题，有时，结果还没有出来，病人却已经不在了；或病人虽然在，但早已离开医院，这就要花大量时间和精力去追踪病人。
结核病实验室诊断技术介绍
1．结核分枝杆菌鉴定方法1. 1萋尼氏抗酸染色痰涂片显微镜检查目前萋尼氏抗酸染色痰涂片显微镜检查是我国结核病实验室使用最为普遍的方法，其操作简单快捷，特异性高，设备要求低，但是灵敏度较低，不能及时发现病人。
1.2 发光二极管荧光显微镜（LED荧光显微镜）发光二极管荧光显微镜管利用二极管光源，延长了显微镜使用寿命，不需要暗室，且价格低廉，可以提高涂片的阳性检出率。
目前在国内应用评估结果显示灵敏度较明场显微镜明显提高，已在部分区县开始使用。
1.3 交叉引物恒温扩增结核病诊断技术在恒定温度下，特殊的引物和特异性探针在酶的作用下，反应体系在一个密闭的反应管内反应。
扩增反应一般不超过一个小时，最短半小时。
目前应用玻璃化试剂，稳定性好，便于运输。
目前在国内区县级应用评估。
1.4 夹层杯结核病诊断方法将痰标本（或其它标本）用专用消化灭活液充分消化，完全暴露并保留抗酸杆菌，通过自动离心涂片机（或半自动制片染色机）对消化后的标本进行充分集菌。
直接在夹层杯装置中进行抗酸染色，取出基片或膜片置于普通显微镜进行观察。
夹层杯法操作方便快捷，便于标准化操作，通过消化灭活，安全性改善，阳性检出率也比直接涂片法大大提高。
夹层杯的装置有沉降式和虑过式，适用于不同工作量的医疗机构。
1.5 环介导等温扩增方法采用2对引物在等温条件下即可完成DNA的扩增，扩增结果通过肉眼观察荧光进行判定，诊断是否为结核病。
同时整个反应体系采用封闭系统减少了工作区域扩增子的污染，整个反应过程只需一个小时即可完成，通过肉眼观察荧光判读结果。
2．结核分枝杆菌培养方法2.1 固体培养培养是结核病诊断的精标准，也是获得分离菌株开展耐药检测的前提，我国结核病实验室最常用的是固体罗氏培养法，包括简单法和中和离心法。
虽然培养是诊断的精标准，但是花费时间长，需要4-8周时间。
2.2 液体培养液体培养通过添加生长刺激剂，改变检测方法提高检测灵敏度等方式缩短了阳性报告时间。
结核杆菌的检测方法
结核杆菌的检测方法结核杆菌，这家伙可是个让人头疼的“小调皮”，要想抓住它可不容易。
但咱们医学工作者那是有办法的！今天就来给您唠唠结核杆菌的检测方法。
先来说说涂片镜检法。
这就好比是在一群人里找那个穿着特别衣服的家伙。
咱们把痰液、脑脊液或者其他可能含有结核杆菌的样本涂在玻片上，染色后放在显微镜下瞧。
要是能看到红色的、细长稍弯的小杆子，那可能就是结核杆菌啦。
不过这个方法有点像“大海捞针”，要是结核杆菌数量少，那就不容易发现，容易漏网之鱼。
我记得有一次，我们科室接收了一位一直咳嗽不停的病人。
初步怀疑是肺结核，就给他做了涂片镜检。
那时候大家都特别紧张，眼睛紧紧盯着显微镜，就盼着能找到结核杆菌的身影。
结果找了半天，啥也没发现。
这可把我们急坏了，难道判断错了？后来才知道，这病人体内的结核杆菌数量少，涂片镜检没那么容易发现。
再说说培养法。
这个就像是给结核杆菌“盖房子”，给它们提供一个舒适的生长环境，让它们大量繁殖。
等它们繁殖得多了，就容易被发现。
一般得等上几周甚至几个月才能出结果。
虽然时间长，但是结果比较准确。
还有一种分子生物学检测方法，比如 PCR 技术。
这就像是拿着放大镜和探测器，专门去找结核杆菌的特有基因片段。
速度快，准确性也高。
有一回遇到一个小朋友，老是发低烧，家里人担心得不行。
我们先用了涂片镜检，没发现啥。
又用培养法，等结果的过程中大家都很揪心。
最后用 PCR 技术，终于确定是结核杆菌在捣乱。
结核菌素试验也挺常见。
在胳膊上打一小针，观察反应。
要是红肿硬结比较大，那就可能是感染了结核杆菌。
不过这个方法不是直接检测结核杆菌，而是看身体对它的反应。
总之啊，检测结核杆菌的方法各有优缺点，医生得根据具体情况选择合适的方法，才能把这个“小调皮”给抓住，让病人能早点恢复健康。
希望通过这些检测方法，能让更多的人摆脱结核杆菌的困扰，过上健康快乐的日子！。
PCR、胶体金法、涂片法在结核杆菌检测中的应用及评价
3 讨论 随着医疗技术水平的不断进展，使得自身免疫性肝病
的阳性检出率在不断的提高，这样则可为不明原因肝病的 诊断和治疗更好地提供依据[3]。本研究中，实验组肝功能异 常患者均属于不明原因性疾病，经多方诊断仍然难以检出 其病因，而实施自身抗体检查干预后，最终患者的疾病得以 确诊[4]。为不明原因肝功能异常患者实施自身抗体检测，可 根据其AIH的类型进行分型，其中I型的发生率最高。PBC 是自身免疫相关的一种肝内胆汁淤积症，患者在疾病的初 期，临床症状缺乏典型，较易出现误诊的情况[5]，而实施自 身抗体检测，则可较易将其检出。综上，自身抗体检测，对
关键词：PCR；胶体金法；涂片法；结核杆菌检测
感染结核杆菌极易引起结核病，进而发展成为全身性 疾病。随着治疗药物种类的增多，导致结核杆菌出现的变 异，明显提升了耐药性[1]。控制该疾病的有效措施为及早诊 治。临床对肺结核诊断方法较多，但是不同的检测方法的 灵敏性差异较大。为了分析定量、胶体金法以及涂片法的效 果，本次对52例确诊肺结核患者的痰液标本应用以上三种 检测方法的效果进行研究。详情如下。
表 2 AIH亚型自身抗体检测结果对比［n（%）］
亚型
n SLA/LP
AMA-M2
AIH-I型 15 0（0.00）
0（0.00）
AIH-II型 11 6（54.55）
0（0.00）
AIH-III型 4 0（0.00）
0（0.00）
LC-1 0（0.00） 0（0.00） 2（50.00）
LKM-1 0（0.00） 8（80.00） 0（0.00）
1.2 方法 1.2.1 标本采集 分别取两组每位患者各两份痰液标本，用 于涂片法和PCR检测，具体操作方式：患者清晨漱口后咳 痰，并将其装入一次性无菌样品杯中。采取患者清晨空腹 血2mL，经离心处理后获得血清，并用于胶体金法检测。 1.2.2 检测方式 ①PCR：在痰液标本中加入氢氧化钠4%， 剂量为痰液标本体积的四倍，充分摇匀后在室内静置半小 时，以使其完全液化，之后按照PCR荧光定量扩增试剂要 求进行预处理。应用DA7600PCR仪预变性2 min 93 oC， 之后根据45 s 93 oC和60 s 55oC，进行10个循环，最后30个 循环为30 s 93 oC、45 s 55 oC，当Ct低于30则属于阳性。② 涂片法：选择脓性黏液痰或者干酪性痰均匀涂在玻片中， 为了确保检出率，可增加涂片层数，完全风干后用酒精灯固 定，具体涂片方式以《全国结核病诊断细菌学检验规程》 中相关标准为主，在三张涂片中一张找到抗酸杆菌就可判
结核分枝杆菌的微生物学诊断方法
结核分枝杆菌的微生物学诊断方法
1.痰液涂片染色：这是最常用的方法之一、将痰液制备成涂片，进行
酸性染色，如抗酸杆菌染色和耐酸染色。
结核分枝杆菌是抗酸杆菌，其细
胞壁富含脂质，可以抵抗酸性染料的脱色作用。
这种方法可以快速检测出
结核分枝杆菌的存在。
2.结核分枝杆菌的培养：这是鉴定结核分枝杆菌的“金标准”。
痰样
品通常会涂在含有富含营养物质的培养基上，并在适当的温度和湿度条件
下孵育。
结核分枝杆菌需要一个相对较长的孵育时间（通常需要数周）才
能生长和生成可见的菌落。
分枝杆菌的培养是确诊结核病的关键步骤，同
时还可以进行对特定抗结核药物的药敏试验。
3.伊红染色：这种方法旨在鉴定酸酒杆菌属分枝杆菌和其他酸杆菌的
超微结构。
伊红染色可使细胞壁和细胞内储存的色素显现为红色或粉红色。
该方法可以帮助确定分枝杆菌的类属。
4.PCR检测：聚合酶链反应（PCR）能够通过扩增目标基因片段来检
测和诊断结核分枝杆菌。
这种方法具有高度特异性和灵敏度，并可以通过
荧光标记的探针来定量检测。
5.蛋白质组学：蛋白质组学技术通过检测和分析结核分枝杆菌内部蛋
白质的组成和变化，可以为诊断和治疗提供信息。
质谱法是一种常用的蛋
白质组学技术，可以通过检测菌落样品中的特定蛋白质来鉴定结核分枝杆菌。
总的来说，微生物学诊断方法在结核分枝杆菌检测和鉴定中起着至关
重要的作用。
这些方法可以帮助医生确定结核病的诊断和治疗方案，并对
结核分枝杆菌的流行病学研究和控制提供重要的科学依据。
结核杆菌微生物学检查方法
结核杆菌微生物学检查方法
“嘿，你知道不？最近我听说了一种超厉害的细菌叫结核杆菌呢！”我对着小伙伴神秘兮兮地说。
咱先讲讲结核杆菌的微生物学检查方法之一——涂片镜检吧。
步骤呢，就是医生从病人那儿取点痰啊或者别的啥样本，然后在玻璃片上涂一涂，再用特殊的染料染色，最后放在显微镜下面看。
注意哦，取样本的时候一定要小心，可不能弄洒了。
这涂片镜检就像找宝藏一样，医生在显微镜下仔细寻找结核杆菌这个“小坏蛋”。
应用场景嘛，比如说有人咳嗽老不好，医生就可能用这个方法来看看是不是结核杆菌在捣乱。
它的优势就是快呀，可以很快知道有没有结核杆菌。
有一次，我们学校有个同学老是咳嗽，大家都可担心了。
后来医生用涂片镜检，发现不是结核杆菌，大家这才松了一口气。
这不是很好吗？
还有培养检查呢。
这就像种小植物一样，把样本放在特殊的培养基里，等结核杆菌长出来。
步骤有点复杂，要等好几天甚至几周呢。
注意的是，培养基得弄好，不然结核杆菌可长不出来。
这个方法虽然慢，但是很准确。
就像钓鱼一样，得有耐心等鱼儿上钩。
如果涂片镜检没发现啥，但又怀疑有结核杆菌，就可以用这个方法。
我听说有个叔叔生病了，医生用培养检查，最后真的找到了结核杆菌，然后就赶紧给他治病。
这多棒呀！
结核杆菌虽然很可怕，但是有这些检查方法，就能早早发现它，把它打败。
我们一定要注意卫生，保护好自己，不让结核杆菌有可乘之机。
难道不是吗？。
结核分枝杆菌实验室检测方法(共30张PPT)
灵 敏：21、0 个菌分/反响枝〔TB杆〕； 菌快速液体培养技术
• BD公司推出的BACTEC—MGIT 960全自动 抗酸染色对分枝杆菌非特异，其他如Nocardia〔奴卡〕、Rhodococcus〔红球菌属〕、Legionella micdadei〔军团菌〕、cryptosporidium〔
呈泡沫状，称麻风细胞。 分枝状，无芽孢和鞭毛，因衰老或抗结核药物的
近年来核酸扩增技术和杂交分析技术的开展，为分枝杆菌的检测、鉴定和药敏实验提供了极大的方便，可将诊断时间从几周降低到几天。 萋尼染色法—红色—普通显微镜〔高倍〕 γ干扰素释放试验能较好地为临床效劳 发光二极管荧光显微镜〔LED〕 灵敏度：103 个菌/反响 荧光染色—黄或橘色—荧光显微镜〔低倍〕
检测范围：结核、胞内、鸟、戈登、堪萨斯、偶然、瘰疬、浅黄、土、龟-脓 肿、草、不产色、海-溃疡、金色、苏尔加、蟾蜍、耻垢。
➢ 高 效： 同时检测 17 种分枝杆菌〔包括TB〕 ➢ 快 速：＞4周〔菌种鉴定〕 6 小时 ➢ 灵 敏： 103 个菌/反响
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结核分枝杆菌耐药基因检测试剂盒
基于rpoB〔利福平〕和katG/inhA〔异烟肼〕的基因突变，对耐多药结核病做 出快速诊断。
• 敏感性差，一般1mL痰中有5000-10000条菌 时可检出，而培养可检出>10-100条菌.
发光二极管荧光显微镜〔LED〕
• 荧光显微镜本钱高、易损坏、耗电量大、光源寿 命短、显微镜价格昂贵且需要在暗室内工作等， 荧光染色法一直没有在结核病痰涂片诊断中得到 广泛的应用。
• 只需将二极管替换普通光学显微镜的目镜就 相当于一台荧光显微镜，组装的“荧光显微 镜〞结合金胺O染色在结核病痰涂片检查中 有一定的应用价值。
五种结核病实验室检测方法对结核病诊断价值的效果评价
五种结核病实验室检测方法对结核病诊断价值的效果评价高会霞;张志;戴二黑【期刊名称】《实用检验医师杂志》【年(卷),期】2012(004)003【摘要】目的评价涂片法、BACTEC MGIT 960快速培养法、改良罗氏培养法、荧光定量PCR法和斑点免疫层析法在结核病实验室快速诊断方法中的作用和地位.方法对1260例结核病患者(结核病组)和100例非结核病患者(非结核病组)的各类标本采用涂片法、快速培养法、改良罗氏培养法、荧光定量PCR法进行检测,同时分离患者外周血血清进行结核抗体检测,并对这五种检测方法的结果进行分析比较.结果五种实验室检测方法对结核病组阳性标本和非结核病组阴性标本的检测结果差异均有统计学意义(X2=466.31,X2=216.14,P均＜0.05).对于结核病组的涂阳和涂阴标本,快速培养法和荧光定量PCR法检测的灵敏度及准确度均高于其他三种方法,而涂片法、改良罗氏培养法、快速培养法的特异性均为100.0％,高于荧光定量PCR法和斑点免疫层析法；快速培养法的阳性检出率均较改良罗氏培养法高,差异均有统计学意义(X2=3387.00,X2=4233.00,P均＜0.05),平均培养时间也较改良罗氏培养法短；但快速培养法与荧光定量PCR法的阳性检出率差异均无统计学意义(P均＞0.05).结论 BACTEC MGIT 960快速培养法和荧光定量PCR法是诊断结核病快速、有效的检测方法,其阳性检出率高,且能缩短培养时间,BACTEC MGIT 960快速检测系统还能进行快速药物敏感性试验,为结核病的快速诊断提供依据.【总页数】4页(P157-160)【作者】高会霞;张志;戴二黑【作者单位】050021石家庄市,石家庄市第五医院检验科;050021石家庄市,石家庄市第五医院检验科;050021石家庄市,石家庄市第五医院检验科【正文语种】中文【相关文献】1.三种结核病实验室检测方法对结核病的临床诊断价值的评价 [J], 曾年华;王志斌;李兴国;彭贵福2.蛋白芯片技术与其他4种检测方法对结核病诊断价值的比较 [J], 冯英凯;王勇;黄正谷;赵小莉;刘英3.加强结核病实验室工作，为全国结核病防治工作服务——在“全国结核病参比实验室工作会议”上的讲话 [J], 肖东楼4.4种检测方法对结核病的诊断价值 [J], 兰小英;卢榕;练明建5.三种检测方法在结核病中的诊断价值比较 [J], 陈礼昌;汪小五;刘海清;高勇因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
不同实验室检测方法对结核分枝杆菌患者灵敏度和特异度的影响
论著·临床辅助检查CHINESE COMMUNITY DOCTORS中国社区医师2019年第35卷第33期结核分枝杆菌是导致结核病发生的主要因素，而结核病则是一种传染性比较强的疾病。
在过去一段时间内结核病得到一定程度控制，但是近几年其发病率却不断提高，成为当前对人们生命健康威胁较大的传染性疾病，得到了不少国家的关注[1]。
结核病实验室诊断是防治结核病的重点内容，金标法、抗酸染色体涂片法等都是实验室常见的检测方法，但是由于阳性检出率较低，花费时间多，所以无法更好地满足临床实际需求[2]。
基因芯片法是一种新出现的结核分枝杆菌检测技术，简单快速，准确度高[3]。
本文将选择实验室中常见的四种检测技术展开分析，具体如下。
资料与方法2018年2月-2019年2月收治结核分枝杆菌患者120例，分为4组；经过诊断后明确得出结核病患者52例，其中肺结核50例，其他种类结核2例。
方法：A 组、B 组、C 组和D 组分别接受基因芯片法、金标法、抗菌染色片涂片法和结核菌素检测法。
分枝杆菌菌种鉴定芯片从北京购买，结核抗体则是购买于上海，另外使用到的仪器包含PPD 皮试液、核酸快速提取仪、芯片干洗仪、微阵列芯片扫描仪。
征得患者同意后，所有患者分别接受四种检测法检测，具体步骤如下：①A 组方法为基因芯片法，先收集临床标本，然后再开始核算提取工作，PCR 扩增，杂交芯片、判读结果等，具体操作程序按照购买机器的说明书开展。
②B 组方法为金标法，标本需要离心之后使用。
需要在反应孔中间加上封闭液，在薄膜吸入之后继续开展检测工作，选取新鲜的血清标本，用量控制在40μL 左右，等到薄膜吸入后加入6滴洗涤液，观察结果，若检测和质控区域都呈现出红色斑点则表示结果阳性，若检测区无色，质控区红色，则为阴性。
③C 组方法为抗菌染色法，需要选取标本，在玻片正面靠右位置2/3左右的位置，将其涂抹成卵圆形，正面朝上，等到自然干燥之后再经火焰固定。
结核杆菌的检测方法
结核杆菌的检测方法结核病是一种由结核杆菌引起的严重传染病，对人类健康造成了巨大威胁。
早期、准确地检测出结核杆菌对于结核病的诊断、治疗和控制至关重要。
下面我们就来详细了解一下结核杆菌的检测方法。
一、涂片镜检法涂片镜检法是最常用的结核杆菌检测方法之一。
通过采集患者的痰液、脓液、脑脊液等标本，经过涂片、染色处理后，在显微镜下观察是否有抗酸杆菌。
这种方法简单、快速、成本低，但敏感性相对较低，容易出现漏诊。
而且，它无法区分结核杆菌和其他非结核分枝杆菌。
二、细菌培养法细菌培养法是检测结核杆菌的金标准。
将标本接种到特定的培养基上，在适宜的条件下培养，观察是否有结核杆菌生长。
培养法的优点是准确性高，能够确定菌株的类型和药敏情况，为治疗提供依据。
但培养周期较长，通常需要 2 8 周，不利于早期诊断。
三、分子生物学检测法1、聚合酶链反应（PCR）技术PCR 技术通过扩增结核杆菌的特定基因片段来检测结核杆菌。
具有敏感性高、特异性强、检测速度快等优点，能够在短时间内得出结果。
但 PCR 技术对实验条件和操作人员要求较高，容易出现假阳性和假阴性结果。
2、基因芯片技术基因芯片技术可以同时检测多个结核杆菌的基因靶点，实现快速、高通量的检测。
它能够对结核杆菌进行菌种鉴定和耐药基因检测，为临床治疗提供更全面的信息。
四、免疫学检测法1、结核菌素皮肤试验（TST）TST 是通过在皮内注射结核菌素，观察皮肤反应来判断是否感染结核杆菌。
但 TST 结果易受卡介苗接种和其他分枝杆菌感染的影响，特异性不高。
2、结核抗体检测检测患者血清中的结核抗体，判断是否感染结核杆菌。
但抗体检测在结核病早期和免疫功能低下的患者中敏感性较低。
五、影像学检查胸部 X 光和 CT 检查可以发现肺部的结核病灶，如渗出、增殖、干酪样坏死、空洞形成等。
但影像学检查不能直接确诊结核杆菌感染，需要结合临床症状和其他检测方法进行综合判断。
六、其他检测方法1、噬菌体生物扩增法利用噬菌体对结核杆菌的特异性感染和扩增来检测结核杆菌，具有操作简便、快速的特点。
结核杆菌的三种实验方法的应用评估
结核杆菌的三种实验方法的应用评估目的比较痰涂片法、荧光定量PCR法和结核抗体检测法对结核病的诊断意义。
方法选取2014年7月～10月在我院诊疗疑似或确诊患者172例，进行涂片抗酸染色、荧光（PCR）检测和采集血样进行结核抗体检测。
结果172例检样中，抗酸染色痰液标本阳性例只有20例阳性率为11.6%。
荧光PCR法阳性率55例，阳性率31.2%，结核抗体阳性例为87例；阳性率为50.6%。
结论三种方法中，以结核抗体阳性率最高，荧光PCR法次之，抗酸染色法阳性率最低，如果三种方法联合运用，相互佐证，可提高准确性。
标签：结核杆菌；检测方法结核杆菌又称分枝杆菌，是引发结核病的病原菌，可能对全身的各大器官造成侵害，临床中以肺结核最为常见。
结核杆菌细胞含有大量分枝菌酸，染色后能抵抗强脱色剂盐酸乙醇的脱色，故又称抗酸杆菌，结核杆菌是引起结核病的病原菌，可侵犯全身器官，但以肺结核为多见。
结核病至今仍为重要的传染病，近年来，因艾滋病、吸毒等社会原因及免疫制剂的应用，其发病呈上升趋势。
鉴定结核杆菌的方法有很多[1]。
本研究应用痰涂片染色法、PCR-荧光法、结核分枝杆菌抗体检测，对172例标本同时进行比较和评价。
1资料与方法1.1一般资料收集自2014年7月～10月在我院诊疗疑似或确诊的患者标本172例。
所有患者均通过痰涂片抗酸结核杆菌检验、胸部X线片、临床表现以及结核菌素试验等诊断为肺结核。
涂片法和荧光PCR为痰标本。
嘱患者留取晨痰2～5ml（结核患者需停抗结核药3d）。
结核抗体检测则采静脉血2ml。
1.2方法1.2.1涂片染色镜检是临床常用的简易快速的检查方法：取痰或其他已外理好的标本0.1ml，于载玻片上均匀涂抹成2cm×2.5cm椭圆形范围，以自然干燥和火焰固定后，进行抗酸染色，采用珠海贝索生物技术有限公司的结核染色液。
染色步骤：①石碳酸复红溶液染色20min；②5%盐酸酒精脱色3min；③亚甲基蓝溶液染色30S。
5种结核杆菌检测方法的临床应用价值
临床医药文献杂志Journal of Clinical Medical2019 年 第 6 卷第 8 期2019 Vol.6 No.8935种结核杆菌检测方法的临床应用价值吴 利1，葛章文2，廖 萍1（1.遵义市播州区人民医院，贵州 遵义 563100；2.贵州省人民医院，贵州 贵阳 550000）【摘要】目的 探讨分析5种结核杆菌检测方法的效果，总结其优势和临床应用价值。
方法 选取我院收治的结核病患者100例作为研究对象，采取患者的痰液和血液作为标本，分别采用AFS 、IMC 、DICA 、PCR 和IMC-PCR-ELISA 方法进行检测，以阳性率、特异性和灵敏性为观察指标。
结果 IMC-PCR-ELISA 的阳性率、特异性和灵敏性明显高于其他四种检测方法，其中特异性和灵敏性均为100%，与其他四种方法结果进行统计学比较，P ＜0.05存在明显的统计学差异。
结论 IMC-PCR-ELISA 方法存在明显的优势，临床应用价值显著，具有准确性高、灵敏性强和特异性高的特点，值得广泛推行。
【关键词】结核杆菌；检测方法；效果观察【中图分类号】R521 【文献标识码】A 【文章编号】ISSN.2095-8242.2019.08.93.01结核病是我国发病率较高的慢性疾病，具有极强的传染性，患者往往遭受心理和生理的双重折磨，而且根据临床数据统计显示，近些年来我国结核病发病率逐渐升高，临床治疗形势日趋严峻，如何提高疾病诊断率，提高临床治疗质量至关重要。
本文着重就临床上常见的疾病检测方法效果进行对比分析，研究详情见下文。
1 资料与方法1.1 一般资料本研究选取我院近一年来收治的结核病患者100例作为研究对象，其中男性患者53例，女性患者47例，年龄在25～73周岁；所有患者的临床症状和诊断结果均符合结核病的临床诊断标准，患者知情并自愿参与本研究。
1.2 方法首先抽取患者的血液和痰液，在痰液中加入等量消化剂，震荡静置直至完全液化，然后离心10分钟，加入缓冲液混匀[1]；患者的血液样本则经离心处理选择上清液作为标本；每位患者的痰液和血液标本均准备5份；分别采用AFS 、IMC 、DICA 、PCR 和IMC-PCR-ELISA 方法进行相关检测[2]。
结核病实验室诊断方法的研究进展
可靠 方法 ， 还 可进一 步进行 菌种 鉴定 和药 敏试验 ， 但 培 养时 间长 ， 需要 ４ ～ ６周 才 能 检 测 到 生 长 ， 阳性 率
只有 ３ Ｏ ～４ Ｏ ， 培养 ＋药 敏结果 需 ２ ～ ３个 月 ， 且 各种 分枝 杆 菌均 可生 长 ， 要 确 定 是 否 为 ＭＴＢ， 需 结 合 分 枝杆 菌菌种 鉴定 。
差 ， 无 法 区别 死菌 与活 菌 ， 并 且受 检验人 员 的技术水 平 和 收 集 痰 液 标 本 的 质 量 影 响 很 大 。 张 立 群 等 对 比 了 ４种 不 同结 核 分 枝 杆 菌 检 测 方 法 ， 显 示 萋 一 尼抗 酸染 色 涂 片 阳 性 率 为 ２ ６ ． ３ ％［ 引。 １ ． １ ． ２ 荧 光 染 色 法 。 荧 光 染 色 法 以 金 胺 。一 罗 丹 明为 代表 ， 提 高 了镜 检 的 灵 敏 度 ， 使 读 片时 间大大缩 １ １ ． ６ ，灵 敏 度 仅 为
无 需 特殊设 备 ， 因 而 被 广 泛 应 用 。缺 点 是 灵 敏 度 较
低， 仅 ２ Ｏ ～３ ０ ， 假 阳性 和 假 阴性 较 高 ， 特 异 性
用［ ７ ］ 。存 在 的 问 题 是 阳 性 率 不 高 ， 结 果 判 断 易 带 主
观性 ， 且变 色存 留时 间较 短 ， 仅 ２ ～３ ｄ紫 色 即 消 失 ， 需 及 时观察 结果 ［ ８ ｊ 。
１ ． ２ ． １ 传 统 的 固体 培 养 基 培 养 法 — — 罗 氏 培 养 法 。
罗 氏 培 养 法 的灵 敏 度 略 高 于 涂 片 法 ， 是 鉴 定 活 菌 的
结核杆菌五种实验室检测方法比较
结核杆菌五种实验室检测方法比较发表时间：2017-09-12T16:39:57.607Z 来源：《中国误诊学杂志》2017年第12期作者：于江[导读] 肺结核患者经由罗氏改良痰培养检验痰结核杆菌准确率较高，但临床使用时需结合其他检查结果、临床表现进行综合判断，并选择合适的检验方式。
解放军第一六九医院检验科湖南衡阳 412000摘要：目的：分析结核患者结核杆菌检验的方法及效果。
方法：选择2016年1月-2016年12月在我院接受治疗肺结核患者60例，分别经由荧光定量PCR检查、痰涂片检查、涂片金胺“0”染色法、T-SPOT.TB检测法进行检测，分析5种检查结果阳性率。
结果：60例肺结核患者TB-PCR检查、罗氏改良痰培养、痰液直接厚涂片检查、涂片金胺“0”染色法、T-SPOT.TB检测法检测阳性率分别为71.67%（43/60）、93.33%（56/60）、75.00%（45/60）、68.33%（41/60）、58.33（35/60）。
结论：肺结核患者经由罗氏改良痰培养检验痰结核杆菌准确率较高，建议进一步在临床应用及推广。
关键词：结核；痰结核杆菌；血液标本；血液检验肺结核是由结核杆菌感染肺部造成的传染性疾病，可累及机体多个脏器及系统，还能够与其他疾病相互影响，进一步加重病情，尤其是对于老年、幼儿等特殊患者而言，影响更加严重，不仅病情发展快，复杂多变，而且很容易出现诸多并发症，治疗效果也有限，引发多器官衰竭风险也明显高于普通患者。
我国目前已经成为肺结核发病的重灾区，若未能及时得到有效治疗，可导致患者病情进一步发展，甚至发展至难治性肺结核。
因此早期诊断治疗就显得非常重要[1-2]。
通常情况下，肺结核多经X线检出，但很多肺结核患者多无典型肺结核典型影像学检查，导致很容易出现假阳性[3]。
本次研究选择2016年1月-2016年12月在我院接受治疗肺结核患者60例，收集其痰液、血液标本，分别经由PCR检查、痰涂片检查、罗氏培养法等五种实验室检测方法进行检测，分析检查结果阳性率，获得一定检验成果，现报道如下。
4种不同结核分枝杆菌检测方法对结核病的诊断价值分析
4种不同结核分枝杆菌检测方法对结核病的诊断价值分析【摘要】目的：分析结核分枝杆菌的检测方法。
方法：收集60份肺结核患者的痰液标本，分别采用涂片抗酸染色、荧光染色法、罗氏培养和DNA环介导恒温扩增试验检测结核分枝杆菌，同时比较四种方法的阳性检出率。
结果LAMP试验结核分枝杆菌检出率为72.2%，高于罗氏培养法57.8%，也高于荧光染色的60%，显微镜下抗酸染色法的检出率为四种检测方法中最低的一种，为51.7%，显著低于LAMP法。
结论：LAMP试验检测痰结核分枝杆菌具有速度快、敏感度高、便捷、特异性强的特点在肺结核的早期诊断当中其作用十分显著。
【关键词】抗酸杆菌；结核分枝杆菌；荧光染色；核酸扩增技术结核病是目前严重威胁人类健康的重大传染性疾病之一，但只要早期诊断和合理用药，绝大多数的结核病人是可以治愈的。
然而现有的结核病实验室诊断方法远不能满足临床诊治的需要，因此快速、准确的诊断方法研究尤为重要。
我们采用涂片、培养、聚合酶链反应(PCR)和增菌PCH四种方法对可疑结核病人痰标本进行检测，以比较和评价各种检测方法的临床应用价值[1]。
1资料与方法1.1一般资料选择我院2018年8月~2019年8月收治的60例肺结核患者，其中男46例，女14例，患者年龄38~79岁，平均年龄（50.3±4.1）岁。
其中新患者52例，初治失败1例，复治7例。
1.2试剂与仪器萋－尼染色试剂，酸罗氏培养基、ＬＡＭＰ试剂、显微镜、低温高速离心机、生物安全柜、ＰＣＲ扩增仪。
1.3方法叮嘱患者于清晨漱口，之后在无菌塑料瓶当中咳出2~3口痰，患者的痰液标本为3份，共180份，检验中采用没分合格痰标本。
此外还要开展萋－尼式染色，金胺染色镜检、罗氏培养以及LAMP试验[2]。
1.3.1萋－尼染色显微镜检查检查中，涂片、染色和显微镜检查操作均严格按照操作规范的要求进行，荧光染色镜检标准：以暗色为背景，抗酸杆菌为黄绿色或橙色的荧光。
五种方法检测临床标本中结核分支杆菌的比较分析
五种方法检测临床标本中结核分支杆菌的比较分析
康润田;胡德华;黄克峻;唐振良;朱庆义
【期刊名称】《中国防痨杂志》
【年(卷),期】2001(023)001
【摘要】迄今为止，对结核病的病原体快速诊断的方法仍很有限，国内外学者一直在寻找快速、敏感、特异、简便的实验室诊断方法。
我们应用抗酸染色、细菌培养、荧光染色、ＰＣＲ、ＰＣＲ反向探针膜杂交法检测临床标本中的结核分杆菌比较分析，报告如下。
【总页数】1页(P60)
【作者】康润田;胡德华;黄克峻;唐振良;朱庆义
【作者单位】山西长治医学院微生物学教研室;山西长治医学院微生物学教研室;山西长治医学院微生物学教研室;长治医学院附属和平医院;山西省儿童医院
【正文语种】中文
【中图分类】R52
【相关文献】
1.聚合酶链式反应与DNA探针检测临床标本中结核分支杆菌的评价 [J], 李小英;张捷
2.聚合酶链反应反向膜杂交技术检测临床标本中结核分支杆菌的临床意义 [J], 董德琼;杨渝浩;肖瑜;彭理年
3.PCR反向膜杂交技术检测临床标本中结核分支杆菌的临床意义 [J], 董德琼;杨渝浩;肖瑜;彭理年
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5.应用巢氏PCR-RFLP直接检测结核病临床标本中结核分支杆菌链霉素耐药基因型 [J], 吴雪琼;张俊仙;庄玉辉;张晓刚;李国利;何秀云
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区域性结核病实验室结核杆菌检测方法比较研究
区域性结核病实验室结核杆菌检测方法比较研究郝珊珊;侯彦强【期刊名称】《国际医药卫生导报》【年(卷),期】2022(28)11【摘要】目的比较区域性结核病实验室结核杆菌3种检验方法[抗酸染色法、液体培养法以及实时荧光聚合酶链式反应(PCR)法]结核杆菌检出率、结果符合率、检测周期及费用,为各级医疗机构临床医生选择合适的检验方法提供科学依据。
方法选取区域性结核病实验室2018年5月至2021年8月初诊患者1169例晨痰标本作为研究对象。
其中,男830例,女339例,年龄10~89岁,每份标本分别采用上述3种方法进行检测,并用χ^(2)检验对结核杆菌检出率进行分析,对结果符合率、检测周期、费用进行比较。
结果1169例晨痰标本中,抗酸染色法、液体培养法、实时荧光PCR法阳性率分别为16.6%(194/1169)、28.1%(329/1169)、26.1%(305/1169);统计显示抗酸染色法与液体培养法检测结果差异有统计学意义(χ^(2)=44.888,P<0.001),抗酸染色法与实时荧光PCR法检测结果差异有统计学意义(χ^(2)=31.391,P<0.001),液体培养法和实时荧光PCR法检测结果差异无统计学意义(χ^(2)=1.247,P>0.05),但3种检验方法结果符合率较高。
抗酸染色法、液体培养法以及实时荧光PCR法检测周期分别为30 min、6周、2 h,费用分别为15元、100元、800元。
结论液体培养法和实时荧光PCR法的结核杆菌检出率较抗酸染色法高,但抗酸染色法费用低,检测周期较液体培养法和实时荧光PCR法短。
实时荧光PCR法较其他2种方法灵敏度高,特异性强,但价格昂贵。
虽然3种检验方法各有优缺点,但它们的结果符合率较高。
【总页数】4页(P1557-1560)【作者】郝珊珊;侯彦强【作者单位】上海市松江区中心医院检验科【正文语种】中文【中图分类】R44【相关文献】1.结核杆菌五种实验室检测方法比较2.3种结核杆菌检测方法在结核病诊断中的应用研究3.几种结核杆菌检测方法在结核病中的诊断价值4.实验室检测奶牛结核病的方法比较5.肺结核病人痰液结核杆菌三种检验方法检测结果分析因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
几种结核杆菌检测方法的对比分析
几种结核杆菌检测方法的对比分析
矫捷
【期刊名称】《中国实用医药》
【年(卷),期】2007(002)035
【摘要】@@ 结核病是一种较严重的传染病,目前的疫情呈上升趋势.检出痰中含有结核杆菌是临床诊断肺结核或鉴别肺结核与其他肺病的重要依据.痰中结核杆菌的检测方法常规采用痰涂片及痰培养.涂片虽简单易行,但阳性率低,培养虽为金标准,但周期太长,均难以满足临床需要.本文对聚合酶链反应(PCR)法、噬菌体裂解法、斑点杂交法、PCR-斑点杂交法,4种结核分支杆菌检测方法进行评价.
【总页数】2页(P104-105)
【作者】矫捷
【作者单位】132011,吉林省吉林市结核病防治研究所
【正文语种】中文
【中图分类】R5
【相关文献】
1.几种结核杆菌检测方法的临床应用评价 [J], 姚刚;张淑娟
2.几种结核杆菌检测方法在结核病中的诊断价值 [J], 马兴钢;韩中波
3.几种支气管冲洗液结核杆菌检测方法对菌阴肺结核的诊断价值 [J], 肖海浩;汤春梅;周强;张言斌
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结核杆菌五种实验室检测方法比较张小红
发表时间：2018-08-22T10:22:10.550Z 来源：《中国误诊学杂志》2018年6月18期作者：张小红
[导读] 分析结核杆菌五种实验室检测方法比较差异。
方法：选择2016年1月-2017年12月作为研究时间段
张小红
辰溪县人民医院湖南 419500
摘要：目的：分析结核杆菌五种实验室检测方法比较差异。
方法：选择2016年1月-2017年12月作为研究时间段，选择某医院就诊结核患者335例作为研究对象，即观察组，选择同期接受体检者210作为对照组，收集其循环血液样本及痰液标本，分别全自动染色+人工镜检、荧光探针PCR检测等五种实验室检测方法，分析检测结果。
结果：观察组经全自动染色+人工镜检、荧光探针PCR检测、SAT检测、罗氏培养、结核抗体检测结核杆菌检测阳性率分别为34.93%、90.15%、95.52%、31.34%、65.37%均显著高于对照组的1.43%、0.00%、0.00%、0.00%、12.86%（均P＜0.05）。
结论：实验室检测结核杆菌方法诸多，均可获得一定的阳性检测结果，其中以荧光探针PCR检测、SAT检测单项检测阳性率最高。
关键词：结核杆菌；实验室检测；诊断方法
肺结核在临床上比较常见，可累及机体多个脏器及系统，还能够作为其他疾病的高危因素或被其他疾病所影响，导致病情进一步恶化，尤其是对于老年、幼儿等免疫系统抵抗力群体而言，影响更加严重，不仅病情发展速度快，病情复杂多变，而且其他并发症发生风险较高，治疗效果也有限，诱发多器官衰竭风险也显著高于其他普通患者[1-2]。
我国目前已经成为肺结核发病的重灾区，而肺结核患者若未能及时得到有效治疗，则很有可能导致患者病情进一步恶化，最终发展至难治性肺结核，存在较高的治疗难度及耐药风险，因此需尽早明确诊断，临床上常用诊断方法主要包括实验室诊断、影像学诊断等。
本文选择2016年1月-2017年12月作为研究时间段，选择某医院就诊结核患者335例作为观察组，同期体检者210例作为对照组，收集两组受检者痰液及血液样本，分析检测结果。
1.资料与方法
1.1一般资料
本文选择2016年1月-2017年12月作为研究时间段，选择某医院就诊结核患者335例作为观察组，同期体检者210例作为对照组。
观察组335例，男186例，女149例，年龄22-70岁，年龄平均（49.15±10.80）岁，病程3个月-8年，病程平均（24.88±3.52）个月；肺结核274例，结核性胸膜炎42例、淋巴结结核10例、结核性脓胸4例，其他5例；主要临床表现包括低烧、食欲差、盗汗等。
对照组210例，男109例，女101例，年龄23-73岁，年龄平均（48.85±10.11）岁。
纳入标准如下：（1）临床资料完整；（2）入院后完善血尿常规、生化检验，CT等影像学检查，结合临床表现，明确相应诊断；（3）精神系统无异常，能够与人正常交流，人格行为正常，能够与阅读文字资料；（4）能够耐受本次研究，研究中途无脱出；（5）所有受检者均对研究内容知情，自愿参与，并同医院签订知情同意书。
排除标准如下：（1）凝血障碍、白血病等血液系统疾病；（2）肿瘤，除结核以外传染性疾病；（3）依从性较差；（4）心肝肾等重要脏器严重疾病。
1.2方法
所有受检者均在清晨清水漱口后，提取痰液样本，空腹状态下抽取外周循环血液5ml；主要仪器及试剂包括：全自动染色机（华速ZEEDO LSS-800双排染色机），由金华市华速科技有限公司提供；结核杆菌核酸检测试剂盒（荧光探针PCR法），由上海都宜生物有限公司提供；TB-SAT检测试剂盒（RNA恒温扩增）、改良罗氏培养基，均由健康苑医药零售有限公司提供；结核抗体检测试剂盒（金标法），由上海信裕生物科技有限公司提供；检验人员均严格按照无菌操作规程，按照仪器及检测试剂盒使用说明书完成检测，判断检测结果；统计阳性检测结果。
1.3统计学分析
本次研究选择SPSS22.0软件进行分析，利用百分比（%）表示计数资料，并施行检验，当P＜0.05，提示数据差异显著，具有统计学意义。
2.结果
观察组经全自动染色+人工镜检、荧光探针PCR检测、SAT检测、罗氏培养、结核抗体检测结核杆菌检测阳性率分别为34.93%、90.15%、95.52%、31.34%、65.37%，均显著高于对照组的1.43%、0.00%、0.00%、0.00%、12.86%（均P＜0.05）；详见表1。
3.讨论
结核病是因结核杆菌感染后所引起的传染性疾病，在全世界均有所分布[3]，据权威机构统计，2012年全世界新增结核病患者860万人，其中超过100万人死亡。
而随着艾滋病等传染性疾病的流行、结核杆菌耐药性的布不断增加，这使得结核病治疗难度不断提高。
一直以来，痰液涂片及痰培养是应用率较高的结核病诊断方法，存在着耗时长、效率低、阳性率低等特点，因此丰富检测手段，缩短检测时间是相关领域研究的重点课题，目前，结核杆菌检测手段已经获得一定的发展[4-5]。
本研究中，通过全自动染色+人工镜检、荧光探针PCR检测、SAT检测、罗氏培养、结核抗体检测结核杆菌。
全自动染色机+人工镜检法是指利用仪器进行抗酸染色后人工镜检的方法；荧光探针PCR检测是指通过特异性荧光信号获知PCR全过程，灵敏度较好，自动化程度较高；SAT检测是指利用RNA恒温扩增检测的方法，属于我国自主专利技术，将荧光探针技术与RNA拷贝结合后检测结核杆菌；罗氏培养是指利用改良罗氏培养基培养后分离后镜检，虽然耗时相对于传统培养方法大大缩短，但检测成本较高，故推广存在一定的难度。
结核抗体检测是用过血液学检测的方法[6-8]；本次研究中，仅全自动染色+人工镜检、结核抗体检测方法在对照组中筛查出结核病阳性病例，疑似隐形结核患者，或因接种过卡介苗。
本次研究中，5种实验室检测方法在筛查结核杆菌方面均可获得一定的阳性率；荧光探针PCR检测、SAT
检测单项检测阳性率，分别达到了90.15%、95.52%；观察组5种实验室检测方法阳性率均显著高于对照组（P＜0.05）。
本次研究存在一定的局限性，比如并未联合检测，并未就对照组筛查阳性者进一步研究。
总之，实验室检测结核杆菌方法诸多，均可获得一定的阳性检测结果，其中以荧光探针PCR检测、SAT检测单项检测阳性率最高；建议根据临床需求，选择合适的检测方法，或可联用，以期获得更高的检查准确性。
参考文献：
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[3]杨芝光，周丽.结核杆菌实验室检测技术与临床应用进展[J].临床检验杂志（电子版），2017，6（4）：826-828.
[4]蔡杏珊，马品云，张院良，等.实时荧光核酸恒温扩增检测技术在结核病诊断中的临床应用[J].中国防老痨杂志，2014，36（6）：458-461.
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[7]路晓红，付玉荣，伊正君.基于核酸检测诊断结核分枝杆菌感染的研究进展[J].中国人兽共患病学报，2015（10）：967-971.
[8]戴芸，张珏，乔昀.手工法和全自动机器法查找结核杆菌效果比较[J].检验医学与临床，2015（23）：3558-3559.。