抗体筛查试验室内质控品制备和日常检测典型案例分析
实验室内质量控制样品研制实例：药物质控样
附录E（资料性）案例5-药物质控样11）E.1 前言药物研发和商业化过程中建立质控样是一项非常复杂的任务，需要深入理解（整个过程）。
在此过程的起始阶段，制药企业需要考虑建立质控样以评估原材料、加工过程的杂质、中间产物、代谢产物、降解产物和活性药物成分（APIs）【25】等。
候选药物研发的每一个阶段都需要质控样，以保证最终的药物产品具有最高的品质。
如果没有官方的质控样，制药企业往往需要建立内部质控样。
用于质控样生产的原料采集和制备是一项非常艰巨的任务，有时需要的量非常大。
高品质的质控样要求苛刻、生产昂贵，因此如果通过其他渠道能够得到的话，实验室就不必自己去制备了。
然而，如有必要，可为非专业实验室提供指南，指导其制备质控样用于质量控制。
需要考虑的关键问题包括：原料的选择（适宜性，本地材料或混合材料，材料制备等）、可追溯性、测试结果、制备和包装（均匀匀性、受污染程度等），稳定性测试、价值分配活动、不确定性评估、文件记录、赋值审核机制、贮藏与分销等。
需要注意的是生物制剂（大分子）并不在该指南的范围内。
E.2 药厂建立质控样时总体的选择准则E.2.1 概述选择一个材料作为参考质控样的准则非常复杂，依赖于多种因素，目前为止并没有解决这个问题的妙法，每种情况都有差异。
以下是选择质控样的总体流程，以及一个药物企业选择标准的特定示例。
原材料收集之后需要经过大量的前处理过程，以保证材料具有合适的均匀性和稳定性以达到预期目标。
通过干燥去掉水分和溶剂是一些普遍的步骤，从而保证材料更容易处理并提高稳定性。
去掉水分同时能够降低微生物生长的可能性，尤其是对于生物材料尤其是一个特定的问题，通常会采取冷冻干燥的方式。
需要注意的是这篇文章的范畴仅局限于小的有机质控样。
磨样之后过筛是另外一个附加步骤，用于提高材料的均匀性。
大体积的固体材料需要通过彻底的混合以保证均匀。
有些分析物可能不太稳定，这需要加入合适的盐来稳定材料。
E.2.2 原料的规范质控样的制备过程须采用最常见的合成工艺，产生最高的纯度和最少的外部成分，如残留溶剂和重金属等。
免疫室室内质控方法分析
免疫室室内质控方法分析室内质控的目的是监测测定过程，当出现医学上重要的误差时，用适当的质控方法警告分析人员。
一般来说，实验室通过测定质控品来检查检验结果的质量，并将质控结果画在质控图上，观察质控结果是否超过质控限来决定是否失控。
实验室最常用的是Levey-Jennings质控图，由于样本数量和检验成本的限制也可采用“即刻法”质控图进行外部质量评价。
一、室内质控的实际操作步骤二、1 设定靶值1.1 稳定性较长的质控品在开始室内质控时，首先要设定质控品的靶值。
各实验室应对新批号的质控品的各个测定项目自行确定靶值。
靶值必须在实验室内使用自己现行的测定方法进行确定。
定值质控品的标定值只能做为确定靶值的参考。
1.1.1 暂定靶值的设定为了确定靶值，新批号的质控品应与当前使用的质控品一起进行测定。
根据20或更多独立批获得的至少20次质控测定结果，计算出平均数，作为暂定靶值。
以此暂定靶值作为下一个月室内质控图的靶值进行室内质控；一个月结束后，将该月的在控结果与前20个质控测定结果汇集在一起，计算累积平均数（第一个月），以此累积的平均数做为下一个月质控图的靶值。
重复上述操作过程，连续三至五个月。
1.1.2 常用靶值的设立以最初20个数据和三至五个月在控数据汇集的所有数据计算的累积平均数作为质控品有效期内的常用靶值，并以此作为以后室内质控图的平均数。
对个别在有效期内浓度水平不断变化的项目，则需不断调整靶值。
1.2 稳定性较短的质控品在3-4天内，每天分析每水平质控品3-4瓶，每瓶进行2-3次重复。
收集数据后，计算平均数、标准差和变异系数。
对数据进行异常值检验。
如果发现异常值，需重新计算余下数据的平均数和标准差。
以此均值作为质控图的靶值。
2 设定控制限对新批号质控品应确定控制限，控制限通常以标准差倍数表示。
2.1 稳定性较长的质控品2.1.1 暂定标准差的设定为了确定标准差，新批号的质控品应与当前使用的质控品一起进行测定。
临床免疫定性试验室内质量控制-郝崇华
三、临床免疫定性试验的性能指标
• CLSI文件规定：
– 1 灵敏度（分析和诊断） – 2 特异性（分析和诊断） – 3 符合率（诊断效率） – 4 重复性（总不精密度）
三、临床免疫定性试验的性能指标
(一)灵敏度(sensitivity )
（1）分析灵敏度（Analytical sensitivity）：一实验的测定反 应对待测物质浓度变化的改变。(即测量示值变化除以相应 的被测量值变化所得的商)。表述是指可以将样品中分析物 检出的最少分析物的量。
• 对于FDA等批准家庭使用的技术，只要求检测装置有内 对照，检测结果满足说明书规定即可；
• 对于需要经验来判定结果的技术仍需在实验室进行，均 有质控的要求，但国际上无具体操作的规定和资料。
• 根据显色或发光直接判定阴阳性的技术，如金标 试纸，美国CDC在“CLIA’88豁免的HIV抗体快 速检测的质量保证指南<2007年版> ”中要求：除 检测装置的内对照外，每检测日或分析批，应使 用弱阳性和阴性外对照作为质控。无判定标准， 一般理解为阴、阳性质控的检测结果分别为阴性 和阳性即表明在控，相反则为失控。
一、质控的目的
• 室内质控是由实验室的工作人员采用一 系列统计学的方法，连续地评价本实验室 测定工作的可靠程度。室内质控的目的是 检测、控制本实验室测定工作的精密度， 并检测其准确度的改变，提高常规测定工 作的批间、批内标本检测结果的一致性 ， 以确定检验报告是否可靠、能否发出的一 项工作。
二、临床免疫检测类型
Levey-Jennings设定靶值和控制限
稳定性较长（效期通常1年以上）的质控品 根据20次或更多次获得的质控测定结果，计 算出均值和标准差,进行离群值检验（剔除 超过3S外的数据），再计算出均值和标准差 ，作为暂定靶值和标准差。
HIV抗体筛查实验室质量控制
2020/8/14
宿迁市疾病预防控制中心
2020/8/14
宿迁市疾病预防控制中心
HIV抗体检测技术要求
建立标准操作程序
禁止肉眼判读！
保证酶标仪，洗板机正常运转 保证加样器准确 选择高质量的与加样器配套的TIP头 使用有效期内的试剂 保证样品质量
❖ 用两种试剂但是每种试剂检测只做一次
❖ 复检概念模糊（试剂A+试剂A+试剂B）
试剂A+试剂B+试剂A ×
试剂A+试剂B+试剂B ×
阴性标本复检
×
❖ 无批批检证书
❖ 临界值（CUTOFF值）计算错误
2020/8/14
宿迁市疾病预防控制中心
规范要求
❖《全国艾滋病检测技术规范》（2004年版） 第二章 HIV抗体检测〔第3－6页〕
2020/8/14
宿迁市疾病预防控制中心
影响ELISA测定的因素
❖ 试剂盒的因素： 妥善保存试剂，在有效期内使用
❖试验操作
形成良好的操作习惯：加样时应将所加物加在ELISA 板孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可溅出， 不可产生气泡。 严格按试剂说明书操作:空白孔不加样品和酶标试剂 操作过程中集中精力：避免加样错误
2020/8/14
宿迁市疾病预防控制中心
质控报告
❖ 封皮 ❖ 考评结果报告单 ❖ 原始记录（三次） ❖ 质控图框架数据（框架） ❖ 质控图（不同试剂分开做质控图） ❖ HIV抗体阴性报告 ❖ HIV抗体复检化验单 ❖ 试剂批批检证书、试剂说明书 ❖ 封底
2020/8/14
HIV抗体筛查试验室内质控品制备和日常检测典型案例分析20120414
批号
样本 ID
检测日期
初筛
复检1
WB带型
北京大学 人民医院
3月6日
雅培发光： 25
梅里埃、 万泰3代：
<0.1
未送检
人民医院 121176
3月13日
梅里埃3代: 1.6
万泰3代: 0.32
p17 gp120 gp160
地坛医院 121631
4月10日
梅里埃4代: 2.9
万泰4代: 0.66
p24 gp41 gp120 gp160
以发烧、腹泻住院治疗； 检验科雅培化学发光：S/CO值29；送肝病
研究所复核阴性（梅里埃、万泰，三代）； 主治医生比较负责任，采血继续送检，梅
里埃（1.9）、万泰（0.3），均阳性；CD4 细胞计数和CD4/CD8比值偏低； 地坛医院皮肤科就诊，送检确证。
化学发光试剂应用案例1（续）
北京大学人民医院&地坛医院 韩××，山东青岛人,19岁，MSM
121518 4月10日
万泰4代: 1.89
梅里埃4代： 2.05
p17 p24 p31 gp41 p51 p55 p66 gp120
gp160
雅培：2.51 万泰4：0.013
一个月后， 梅里埃4：1.81 万泰4：1.49
部分单位送检样本确证结果分析
初筛试剂
筛查阳 确证阳 性性
确证阴性 确证可疑 （%） （疑似感染）
➢ HIV 抗体阴性混合血清：筛查试验阴性；
➢ 用阴性血清稀释阳性混合血清，筛查试验确定最高 稀释度稀释倍数：103-105；
➢ -20℃保存；
李红星（商丘市卫生防疫站）； 河南预防医学杂志，2005；16:133-135.
ELISA检测HIV抗体室内质控血清的制备与应用分析
ELISA检测HIV抗体室内质控血清的制备与应用分析目的探讨分析ELISA检测HIV抗体室内质控血清的制备与临床应用。
方法应用ELISA对我血库收集的血液标本32000份进行HIV抗体检测；同时选择正常人群血清与试剂盒内HIV阳性血清混合稀释，混合恰当比例，冷藏保存使用；同时将自制的质控血清保存1～12个月，对其均匀性、精确性及稳定性进行评价。
结果ELISA法检测结果显示阳性115例，阳性率为0.36%，实际上HIV 抗体为阳性共120例，漏诊率为0.016%；研究结果显示正常人群的血清与试剂盒内HIV阳性血清以10：1的比例进行混合最为恰当；对自制的质控血清为期1～12个月的观察，发现其均匀性、S/CO值、准确性12个月的差异不显著（P＜0.05），无统计学意义。
结论ELISA在HIV抗体的检测中具有较高的准确度，且检测结果能够在短时间内反映，值得临床推广应用；同时发现自制质控血清经济方便，且具有稳定性高的优点，具有较大的应用前景。
标签：ELISA；HIV抗体；质控血清HIV指人类免疫缺陷病毒，HIV病毒对人体的免疫系统造成破坏进而削弱机体的免疫抵抗力，造成健康人群患上获得性免疫缺陷综合征，感染HIV的途径主要包括血液传染、性交、母婴传播。
现阶段，临床上对于艾滋病的治疗尚无显著进展，患者大都以死亡告终，其对人类的身体健康和生命安全产生极大的威脅，引起了国内外医学的高度重视[1]。
目前，艾滋病主要以早发现及早控制为主，ELISA法在HIV抗体的检测中作用显著，然而有诸多因素会导致其检测结果出现偏差，故进行室内控制十分有必要，本文旨在探讨分析ELISA检测HIV抗体室内质控血清的制备与临床应用，具体信息如下。
1 资料与方法1.1一般资料由上海纪宁实业有限公司提供的人抗人类免疫缺陷病毒抗体（HIV）酶联免疫试剂盒；由北京万泰生物药业有限公司提供的HIV抗体试剂盒，批准文号：国药准字S2*******；由卫生部临检中心提供的临界值质控血清，批号为NCCL 070049；由深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司提供的酶标仪。
ELISA检测HIV抗体室内质控血清的制备与应用
［］壶垂亘！变垂蚴：ｉ墨墼！鳗生！亘塑圆亟匦画［］
由于很多因素都会影响到ＥＬＩＳＡ法检测结果的准确性． 所以每次检测都应进行室内质控【ｌｌ。我们试制了抗一ＨＩＶ室内 质控血清．并与卫生部临床检测中心生产的ＨＩＶ抗体室内质 控血清进行了对照．考核了其精密性、均匀性和稳定性。现报
告如下．
血清稀释成低值弱阳性．分别以每管０．５ｍ１分装，置一２０℃保 存备用。检测方法分别按照说明书操作步骤严格执行。 １．３统计学处理采用统计学软件ＳＰＳＳ １２．０建立数据库． 通过ｔ检验和卡方检验，以Ｐ＜Ｏ．０５差异有统计学意义。
近的弱阳性外部对照质控血清，反应强度的变化很容易观俨＞ｏ．０５）。提示自制质控血清和标准质控血清的准确性无明 测，并且能指示出改变的检测能力，即能显示半定最分析或 定性分析上的假阴性结果或误差。为了确保ＨＩＶ抗体检测的 显差异。通过两种试剂盒对随机抽取的ｌＯ支自制质控血清 进行测定，ＣＶ分别为１２．１％和１０．８％。与标准（下转第５６８页）
万方数据
・５６８・
第２７卷第５期
２００９年ｌＯ月
实
验
与
检
验
医
学
ＭＥＤＩＣＩＮＥ
Ｖ０１．２７ Ｎｏ．５ Ｏｃｔ．２００９
ＥＸＰＥＲＩＭＥＮＴＡＬ
ＡＮＤ ＬＡＢＯＲＡＴＯＲＹ
正常的上呼吸道有许多常居菌寄生。如鼻咽部的大量甲 型溶血性链球菌、奈瑟氏菌属、类白喉棒状杆菌、卡他布兰汉 菌、表皮葡萄球菌、金黄色葡葡球菌、肺炎链球菌、脑膜炎奈 瑟菌、流感嗜血杆菌及真菌等。在正常情况下．这些细菌是不 致病的。但是在机体全身或局部抵抗力减低或其他外因影响 下。它们可以致病，并可以侵入下呼吸道引起感染。另外，在 上呼吸道标本的微生物学检验中．几乎每一份日Ｉ！Ｉ拭子都是有 菌的．分离出来的病原微生物是否与疾病有关．需要临床医 生和微生物学检验人员共同根据病原微生物的特点及其检 出数量，病人的临床症状等各方匝综合分折．以作出正确判 断１１Ｉ。 新生儿由于本身的特点．非特异性免疫及特异性免疫功 能均有一定的缺陷。与成年人相比．新生儿的抵抗力较弱．对 细菌、病毒等医院感染不易局限．此诸多方面造成新生儿的 易感性。胎儿和新生儿对感染的高度易感性主要是免疫功能 发育不全１２ｌ：新生儿呼吸道管腔狭窄、黏膜柔软、衄管丰富、纤 毛运动差。易致气管阻塞、感染：呼吸困难及拒乳；同时皮肤 黏膜薄弱易损伤、脐残端未完全闭合．离血管近，细菌易进入
ELISA检测HIV抗体的实验室内质量控制
［ 关键词］ % C@9 抗体；获得性免疫缺陷综合征；质量控制 ［ 中图分类号］ % EDF# G DD% % ［ 文献标识码］ % B% % ［ 文章编号］ % !HI! G IIJD （ #$$" ） $! G $$II G $#
% % 艾滋病的流行给人类的健康、 生命安全以及经 济社会发展带来了严重影响， 要了解和掌握 C@9 的 感染情况， 关键就是实验室的检测技术， 而 C@9 抗 体的检测是目前获得性免疫缺陷综合征 （ 艾滋病） 诊断中最常用的方法， 因此， 提高实验室检测的准确 性， 减少假阳性和假阴性反应的发生， 对诊断艾滋病 十分重要。为了更准确、 更严谨地出示检测报告， 本 室进行了 >?@AB 检测 C@9 抗体的室内质量控制， 现 将质控过程报告如下。 !% 材料与方法 !: !% 材% 料 C@9 G ! K # 型抗体 >?@AB 诊断试剂盒： 丽珠集团 生物制品有限公司， 所用试剂盒及质控血清均在有 效期内。 质控标准血清： 包括内部对照质控血清和外部 对照质控血清。内部对照质控血清指试剂盒内提供 的阳性和阴性对照血清。内部对照是质控的基础。 外部对照质控血清是为了监控 C@9 抗体检测的重 复性和稳定性以及试剂盒批间差异而由实验室设置 的一个弱阳性对照血清， 以试剂盒临界值 （ 8(4L’-- ） 的 # M D 倍 为 宜。用 C@9 抗 体 阴 性 血 清 梯 度 稀 释 C@9 抗体强阳性血清 （ "HN D$ O.* 灭活） 并标定后 得到， 按一年使用量配制， 一周实验用量分装、 标记、 封口， G #$N 冷存。不可反复冻融， 一旦融化后应该 存放 # M JN ， 一周内使用。 !: #% 实验室设备标准 P.’83,, #$!$ 酶标仪： 本室根据质量手册的要求， 定 期进行期间检查， 并详细填写期间检查记录。P.’8.,, B*4Q’0 <,(.7’ !"I" 微孔洗板器： 本室严格按照作业指 导书操作规程进行自校准， 有自校准报告。恒温培养 箱： 调节并控制温度在 DIN 左右。微量加样器： 均经常 洲计量所检定合格， 并在检定周期 （! 年） 内使用。 !: D% 操% 作 严格按照作业指导书的操作规程进行操作。加
乙肝抗原、抗体免疫测定室内质控品的制备及使用
乙肝抗原、抗体免疫测定室内质控品的制备及使用发表时间：2016-12-06T10:03:52.967Z 来源：《医药前沿》2016年11月第33期作者：陈亮[导读] 临床进行免疫测定的准确性已得到明显性提升，同时对临床进行疾病预后评估和诊疗考核等均有促进作用。
（江苏省东台市中医院检验科江苏东台 224200）【摘要】目的：探讨分析乙肝抗原、抗体免疫测定室内质控品的制备和使用情况。
方法：将我院2014年1月至2015年期间接受乙肝抗原、抗体免疫测定的149例患者作为研究对象，用全自动酶免疫分析仪测定其标本，分析总结测定结果。
结果：自制乙肝抗原质控品最佳批内CV和均值，并观察其稳定性均较为良好。
结论：在进行乙肝抗原、抗体免疫测定室内质控品使用和制备上，可采用低值质控，此对正确掌握和判定可疑结果上存在有利作用，临床推广应用价值较为明显。
【关键词】免疫；制备；室内；质控品；抗体；乙肝抗原【中图分类号】R37 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2016）33-0366-02目前，临床进行免疫测定的准确性已得到明显性提升，同时对临床进行疾病预后评估和诊疗考核等均有促进作用，在确保免疫检验结果更加可靠上面较为重要。
为此，本文采用全自动酶免疫分析仪Rayto进行分析，因所采用的酶联免疫乙肝试剂盒中无低值血清，所以，在制备室内质控品时需从临检中心进行购买，因此单一质控品、批号过期、购买不及时等状况均会导致室内质控品出现成本较高、使用不方便等状况[1]。
本研究按照实验室检测实际状况，将两个复合自制免疫质控品应用到全自动酶免疫分析过程中内，使用时间为六个月，效果较为满意。
具体报告如下。
1.资料及方法1.1 一般资料将我院2014年1月至2015年期间接受乙肝抗原、抗体免疫测定的149例患者作为研究对象，其中包含男性共89例，女性共60例，最小年龄为26岁，最大年龄为65.5岁，平均年龄为（45.1±2.7）岁。
ELISA法检测HIV抗体室内质量控制方法的探讨
３２ １
Ｏ● ３０２
２● ｌ ８２
Ｏ● ２９ ｌ
２● ２ ４５
Ｏ● ３１４
２● １９８
Ｏ● ３２Ｏ
２● ２ Ｏ １ Ｏ● ３Ｏ０
Ｏ● ７ ６ ２ ０ ８ ５７
●
ｌ● Ｏ ８９ １● ２７８ １● ２ ｌ０ ｌ● ３ ３４ １● ４ ｌ ３
● １３ ４ ３４ ９
●
● ２５ ５ ● １５ ５
｝Ｉ● ２７ ｌ
［２］赵淑华，李景舜，白兰．除草剂２一甲一４氯苯氧乙酸对雄性小鼠 的毒作用［Ｊ］．环境与健康杂志，２００３，２０（３）：１５１—１５３．
［３］李春阳，陈小玉，许东，等．苯磺隆对大鼠生殖细胞毒性试验研 究［Ｊ］．河南科技大学学报（医学版），２００４，２２（３）：１６１—１６２．
［４］武惠珍，王贵娟，刘贵生．混合除草剂对小鼠睾丸超微结构的 毒性影响口］．电子显微学报，２００４，２３（４）：３３７．
随着艾滋病流行形势的日趋严峻，新发现的感 染者数量不断增加，艾滋病检测也显得越来越重要。 目前国内检测ＨＩＶ抗体的方法主要是酶联免疫法 （ＥＩ。ＩＳＡ）。２００４年版的《全国艾滋病检测技术规 范》要求采用ＥＬＩＳＡ法时必须要包含内部和外部对 照质控血清，其中外部对照质控血清是为了监控检 测的重复性和稳定性以及试剂盒批间或孑Ｌ间差异， 通常为弱阳性对照，以该试剂盒临界值（Ｃｕｔ—ｏｆｆ 值）的２～３倍为宜。目前江苏省有近４００家的艾滋 病筛查实验室，有部分实验室由于检测的样本量较 小而无法采用常规的Ｌｅｖｅ）一ｅｎｎｉｎｇｓ质控图法（质 控图法）进行质控，为解决这个问题，可采用“即刻 法”（即Ｃｒｕｂｂｓ氏法）来进行质控，２０次以后再采用 质控图法进行质控［１’２］。具体的方法如下。
［１］中国疾病预防控制中心．全国艾滋病检测技术规范（２００４年
多项目复合免疫测定质控品的制备及使用_陈文虎 (1)
用时取出 1 支, 37 e 水浴融溶。和日常标本一 为在控范围。与 Abbot t 公司提供的浓度水平相近
起测定, 连续 23 个工作日每日测定一次, 月末统计 的控制品允许范围比较见表 2。
表 2 自制质控品6项目与原厂质控物靶值及在控范围比较
项目
A bbot t 质控物 自制质控物
A FP( Lg/ L) 靶值( 范围) 175( 140- 210) 314( 278- 350)
类抗原 125( CA125) 、糖类抗原 199( CA199) 和总 甲状腺素( T T 4) 等 6 种。选择日常检测中发现所 需项目的高浓度标本, 加至一定量的血浆中调节各 成份至一定的浓度, 56 e 10 h 灭活[ 1] , 离心去除沉 淀物, 总量为每日 1 m l 的一年用量, 加 0. 5% 叠氮 钠防腐[ 1] 。
CA199( ku/ L) 360. 3
CA125( ku/L ) 44. 5
TT 4( mg/ L) 59. 5
HBsAg( S/ Co) 44. 8
s
17. 2
3. 29
11. 9
1. 64
3. 52
1. 16
CV( % )
5. 4
3. 3
3. 7
3. 7
5. 9
2. 6
二、日常使用初步评价
各项目的 CV% 值在 4. 4% ~ 7. 3% 之间, 以 x ? s
中图分类号: R446. 1
文献标识码: A
多项目复合免疫测定质控品的制备及使用
陈文虎 ( 浙江省肿瘤医院检验科, 杭州 310022)
摘要: 目的 自行制备质控品, 用于免疫检测系统的内部质量控制。方法 收集日常工 作中检测 出高含量 的剩 余标本, 用一般混合血清进行调整内含分析物含量。灭活、离心、加千分 之五叠氮钠, 分装 , 低温 保存。结果 5 个肿瘤标志物和 HBsA g 项目在美国 Abbott 的 AXSYM 仪器 上检测, 控制 效果良 好。重复精 度好于 Abbo tt 控 制要求。质控品稳定。结论 自制质控品可以满足室内质控要求。
免疫室杂项岗室内质控总结
.
4
手工方法：同正常样本一样的方法检测
上机项目质控配制方法：
取４μＬ各项目阳性血，加入400 μＬ试 剂船稀释液充分混匀后，加130 μＬ至试剂 船反应孔内（注意不要产生气泡），然后同 样本一同检测。. Nhomakorabea5
情 况现
开 展 项 目 室 内 质 控
正在累积者：
优生四项、ANA、心磷脂抗体、β2抗体、 EB病毒抗体
免疫室杂项岗室内质控总结
.
1
目录
现有项目室内质控情况 存在问题 解决方案
.
2
现有项目
手工方法
上机项目
新项目
优生四项
抗子宫、 精子抗体
结核抗体
ENA ANA EB抗体 心磷脂 β2抗体 CCP、R33
细结 胞核
感 染
Ｔ
.
3
手工方法：同正常样本一样的方法检测
上机项目质控配制方法：
取４μＬ各项目阳性血，加入400 μＬ试 剂船稀释液充分混匀后，加130 μＬ至试剂 船样品孔内（注意不要产生气泡），然后同 样本一同检测。
尚未开展质控者：
结核抗体、抗精子抗体、抗子宫抗体、结核感染T细胞、 CCP、R33、ENA
尚未开展原因：
阳性样本较难获得、自带控制线等
.
6
1.阳性血较难获得 2.批间差较大 3.效期短
.
7
1.寻求厂家帮助 2.自制质控品
.
8
.
9
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单纯疱疹病毒Ⅱ型抗体室内质控血清制备及临床应用评价
单纯疱疹病毒Ⅱ型抗体室内质控血清制备及临床应用评价目的探讨自制外部弱阳性质控血清在检测血清单纯疱疹病毒Ⅱ型（HSVⅡ）试剂盒中应用的可行性，并与康润公司质控血清进行结果比对。
方法试验采用对比检测研究，使用美国Trinity Biotech Plc公司提供抗HSVⅡIgG型和IgM型試剂盒分别检测自制和康润公司质控血清，采用SPSS16.0进行数据处理。
不同月份和不同批号试剂盒间质控血清精密度和稳定性的比较采用均数的t检验，P ＜0.05为差异有统计学意义。
结果自制血清抗HSVⅡIgM S/CO 平均值为（2.56±0.611），CV值11.95%；康润公司质控血清抗HSVⅡIgM型S/CO值（2.38±0.48），CV值为10.08%，两种质控血清CV值比较无统计学差异P>0.05。
自制血清抗HSVⅡIgG型的S/CO值（3.57±0.98），CV值13.78%；康润公司抗HSVⅡIgG型质控血清S/CO值为（3.275±0.822），CV值为12.55%，两种质控血清CV值比较无统计学差异P>0.05。
结论自制外部弱阳性质控血清在实际检测中精密度、稳定性符合国家对质控物的要求，基层医院检验科有能力制备，值得推广应用。
标签：质控血清；单纯疱疹病毒；生殖器疱疹生殖器疱疹（GH）是皮肤性病科常见的一种由单纯疱疹病毒Ⅱ型（HSVⅡ）感染引起的性传播疾病，常与生殖道致病微生物如淋球菌，支原体，衣原体，梅毒螺旋体混合感染或其他性病治愈后而发病；此病典型临床表现为生殖器部位的密集水泡，临床诊断相对容易；部分病例由于临床症状不典型或临床医师认识不足常漏诊，因此检测血清HSVⅡ抗体（IgG型和IgM型）可辅助临床确诊此病；尤其是IgM型抗-HSVⅡ在血清中出现早，上升快，但在血液中存在时间短，可协助临床早期诊断。
为了保证检测结果准确性，精密度和可靠性，每次实验均须有内部对照质控血清（阳性及阴性血清）和外部对照质控血清，以外部对照质控血清进行室内质量控制。
临床免疫测定的室内质量控制
01
利用酶标记的抗原或抗体与待测物结合，通过酶催化底物显色
反应来测定待测物的方法。
化学发光免疫分析（CLIA）
02
利用化学发光物质在免疫反应中释放能量产生光信号，通过测
量光信号强度来测定待测物的方法。
放射免疫分析（RIA）
03
利用放射性同位素标记的抗原或抗体与待测物结合，通过测量
放射性强度来测定待测物的方法。
不利因素。
均匀性
使用前应充分混匀质量控制样 品，确保样品均匀性。
瓶间差
使用同一批号多个质量控制样 品时，应检查瓶间差是否在可
接受范围内。
异常情况处理措施
失控情况处理
当质量控制结果超出预设的质控范 围时，应立即停止检测，查找原因 并采取相应措施。必要时可重新制 备质量控制样品。
储存异常处理
如发现质量控制样品储存过程中出 现异常情况，如颜色变化、沉淀等， 应停止使用并联系供应商或重新制 备。
04
试剂应存储在干燥、阴凉、通 风良好的地方，避免阳光直射
和高温。
不同种类的试剂应分开存放， 避免相互污染。
定期检查试剂的存储条件，如 温度、湿度等，确保符合要求
。
建立试剂库存管理制度，对试 剂的入库、出库进行记录，确
保试剂在有效期内使用。
仪器校准与维护保养计划
定期对仪器进行校准，确保测量结果 的准确性和可靠性。
批次间差异处理
当使用不同批号的质量控制样品时， 应注意批次间差异对结果的影响。 如有必要，可进行批次间比对实验
以评估差异情况。
仪器故障处理
在仪器故障导致质量控制结果异常 时，应及时联系维修人员进行维修 和校准，并对故障期间的结果进行
评估和处理。
hiv筛查检测室室内质控情况分析
１．１．２健康是人类生存发展和民族兴旺发达的基 础。享有健康，追求健康，维护健康，促进健康， 是公民的重要权利。 １．１．３健康是环境、人文、社会与个人因素互动的 结果，单靠生物医学是不能完全解决健康问题的。 １．２健康管理的思想源远流长，我国和西方古代医 学文献中都蕴含有积极的健康管理思想。我国两千 多年前的《黄帝内经》就有“圣人不治已病治未病”。
８ｎ６—瑚［ｖ ｓａｒｕｎｌ ｕｎｄｅｒ ｎｏｒｍａｌ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ ａｎｄ ｄｒａｗ ｑｕａｌ埘ｃｏｎｔｒｏｌ ｃｈａｒｔ．ＲｅｓｕＲ Ｔｈｅ ｉｎｎｅｒ ｃｏｍｐａｒｉｎｇ ｖａｌｕｅ
ｄｉｔｆ锄ａｔ．Ｔｈｅｒｅ ｏｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｂａｃｔｃｈｅｓ ｉｓ
ａｒｅ ｒｅｐｅａｔｉｔｉｖｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ ａｎｄ ｓｔａｂｉｌｉｔｙ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ ｂｅｔｗｅｅｎ ｏｓｔｉｕｍ ｉｎ
ｌ健康与健康管理 １．１人类的健康与疾病不仅是人体自身的问题，而 是与整体的社会生活方式和环境密不可分。生物一 心理一社会一生态环境医学模式认为：健康是人们 身体素质、心理素质和社会素质的完整结合。 １．１．１健康是人们每天生活的资源，并非生活的目 的。同时，公民健康又是国家的重要资源，是巨大 的社会财富。健康对经济增长贡献巨大，人口健康 是经济增长最大的驱动力。
【关键词】ＨＩＶ筛查；室内质控
ｍＶ Ｔｈｅ Ｃｏｎｄｌｔｉｏｎ Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ Ｑｕａｌｉｔｙ Ｃｏｎｔｒｏｌ Ｉｎ
பைடு நூலகம்
Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ
Ｕ Ｂｉｎｇ ＵＮ Ｘｉｎ－ｗｕ ＸＵ Ｚｈｅｎ－ｍｅｉ ｅｔ ａｌ
（Ｆｕｔｉａｎ Ｂｒａｎｃｈ ｏｆＦｕｊｉａｎ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｔｒａｖｅｌ Ｈｅａｌｔｈ Ｃａｒｅ Ｃｅｎｔｅｒ，Ｆｕｚｈｏｕ ３５１１００）
不规则抗体筛查室内质控品的制备及初步应用
不规则抗体筛查室内质控品的制备及初步应用张敏;芦慧霞;辛琪;张强;张正康【摘要】目的自制不规则抗体筛查室内质控品并进行初步应用.方法选择商品化单克隆IgG类抗D原液作为强阳性质控品,其稀释液作为弱阳性质控品,不规则抗体阴性的献血员AB型血浆作为阴性质控品.将强阳性、阴性质控品连续测定20次,确定其靶值;将单克隆IgG类抗D倍比稀释,确定红细胞凝集强度达到2+的最高稀释倍数作为弱阳性质控品的最佳稀释度,连续测定20次.质控品与待检标本同时按标准操作规程进行测定,每天测定1次,共6个月.结果强阳性质控品靶值为4+,弱阳性质控品靶值为2+,最佳稀释度为1:500,其质控范围为1～3+.弱阳性质控品在6个月的使用过程中出控4次,强阳性、阴性质控品检测结果均在控.结论实验室自制不规则抗体筛查室内质控品可行,功能上能够完全满足对检测项目的质量控制要求.【期刊名称】《临床检验杂志》【年(卷),期】2015(033)012【总页数】3页(P929-931)【关键词】不规则抗体;室内质量控制;微柱凝胶法【作者】张敏;芦慧霞;辛琪;张强;张正康【作者单位】东南大学附属中大医院输血科,南京210009;东南大学附属中大医院输血科,南京210009;东南大学附属中大医院输血科,南京210009;东南大学附属中大医院输血科,南京210009;东南大学附属中大医院输血科,南京210009【正文语种】中文【中图分类】R446不规则抗体是引起交叉配血不合的主要原因，有时还可干扰血型鉴定[1]，其筛查作为输血前检测项目之一在全国已开展多年，但室内质量控制(internal quality control，IQC)工作仍处于起步阶段。
IQC是实验室为了监测实验室工作质量，决定检验报告能否发出所采取的控制方法，旨在评价检测系统的准确度[2-3]。
《医疗机构临床实验室管理办法》规定：“医疗机构临床实验室应当对开展的临床检验项目进行IQC，出现质量失控现象时，应当及时查找原因，采取纠正措施，并详细记录” 。
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结论 HIV 抗体阳性血清梯度稀释系列可用于实验室 质控和试剂评价。但灵敏度的合适范围还需继续探 讨。
李红星（商丘市卫生防疫站）； 河南预防医学杂志，2005；16:133-135.
北京大学人民医院肝病研究所联 系电话：88325729
化学发光试剂应用案例1
韩××，山东青岛人,19岁，MSM 2012年3月初，到北京大学人民医院呼吸科，
备注
华信
罗氏化发 70
10
41（58)
19（3）
阴性，Max:21；可疑, Max:7.8；阳性,Min:171
望京 梅里埃4代 36 5 23（63) 8（3）
中日
金豪 58 30 14（24) 14（5）
罗氏化发 71 12 31（43) 28（4）
以发烧、腹泻住院治疗； 检验科雅培化学发光：S/CO值29；送肝病
研究所复核阴性（梅里埃、万泰，三代）； 主治医生比较负责任，采血继续送检，梅
里埃（1.9）、万泰（0.3），均阳性；CD4 细胞计数和CD4/CD8比值偏低； 地坛医院皮肤科就诊，送检确证。
化学发光试剂应用案例1（续）
北京大学人民医院&地坛医院 韩××，山东青岛人,19岁，MSM
调制针对生物梅里埃（3代）_1
材料 ➢ 抗-HIV阳性灭活血清（可IV阴性的血清（可用梅里埃试剂盒中的
阴性对照）或20%小牛血清； ➢ 2 mL冻存管； ➢ 生物安全柜； ➢ 酶免仪、微量进样器、15-50 mL离心管；
调制针对生物梅里埃（3代）_2
肝病研究所承担HIV抗体检测任务： 首选试剂：生物梅里埃（3代）；备用试剂：
万泰3代； 2011年检测样本量：筛查阳性样本数26例
（0.3‰）；其中，确证试验阳性样本13例， 不确定4例，阴性9例； 2012年1-4月，筛查阳性15（1 ‰ ），阳性9 例。 2012年，检验科开始用雅培化学发光进行初 筛，初筛阳性送肝病研究所进行复检。
结果 试剂盒内的阳性对照血清与健康人的血清 1：10左右混合比例比较适合。
结论 自制质控血清性能稳定，经济、方便，便 于推广使用。
韦雪芳（广西壮族自治区横县疾病预防控制中心HIV初筛实验室530300）； 检验医学与临床，2011；8:2527-2528.
HIV抗体阳性血清梯度稀释系列用于实 验室质控和试剂评价探讨（1）
室内质控品
抗体检测的统计学室内质量控制
非试剂盒组份的外部质控品，是为了监控检测 的重复性而设置的，包括强阳性、弱阳性和阴 性质控血清；
只设置一个弱阳性质控，以该试剂盒临界值 （Cut-off）的2～3倍为宜。
外部质控品的作用是，判断该批临床样品检测 的有效性，因此，每次实验必须包含室内质控 品，其结果无效，必须重新试验。
121518 4月10日
万泰4代: 1.89
梅里埃4代： 2.05
p17 p24 p31 gp41 p51 p55 p66 gp120
gp160
雅培：2.51 万泰4：0.013
一个月后， 梅里埃4：1.81 万泰4：1.49
部分单位送检样本确证结果分析
初筛试剂
筛查阳 确证阳 性性
确证阴性 确证可疑 （%） （疑似感染）
化学发光试剂应用案例2
东直门医院&性艾所 贾××，33岁，MSM
单位 样本ID 检测日期 初筛
复检1
WB带型
东直门医 院
120740
2月21日
雅培发光： 万泰4代：
2.5
0.07
p24
性艾所 VCT
121214 3月20日
万泰4代: 梅里埃4代：
1.49
1.81
p24 p31 gp160
性艾所 VCT
2012年2月质控图
2011-2质控考评质控图
ELISA检测HIV抗体室内质控血清的制备
目的 实验室自制外部质控血清，绘制质控图， 满足《全国艾滋病检测技术规范》要求和考评要 求。
方法 利用试剂盒内的阳性对照血清，用健康人 的血清按一定量混合稀释成弱阳性，筛选出合适 混合比例，分装冷冻保存使用。
室内质控品可以是商品或实验室自行制备。
室内质控品的使用和质量要求
每一次实验必须使用室内质控品，以便监控 实验的重复性。
同时可以了解各批试剂盒的批间或孔间差异。 室内质控品的管间或瓶间变异必须小于监测
系统预期的变异（cv＜20%）；
并且质控品应稳定、无菌，且不含有影响试 剂反应的防腐剂。
北京大学人民医院
批号
样本 ID
检测日期
初筛
复检1
WB带型
北京大学 人民医院
3月6日
雅培发光： 25
梅里埃、 万泰3代：
<0.1
未送检
人民医院 121176
3月13日
梅里埃3代: 1.6
万泰3代: 0.32
p17 gp120 gp160
地坛医院 121631
4月10日
梅里埃4代: 2.9
万泰4代: 0.66
p24 gp41 gp120 gp160
➢ HIV 抗体阴性混合血清：筛查试验阴性；
➢ 用阴性血清稀释阳性混合血清，筛查试验确定最高 稀释度稀释倍数：103-105；
➢ -20℃保存；
李红星（商丘市卫生防疫站）； 河南预防医学杂志，2005；16:133-135.
HIV抗体阳性血清梯度稀释系列用于实 验室质控和试剂评价探讨（2）
结果 在一定稀释度范围内-log[稀释度]与OD 值呈 线性关系。实验系列用于质控，各实验室均正确报 出样品的阴阳性结果，但灵敏度（回归曲线斜率/ 残差标准差）不同，依此对实验室进行排序。
方法 用阴性血清梯度稀释HIV抗体确认阳性血清，用 第三代ELISA检测试剂进行检测，寻找稀释度与OD 值 间的关系，然后应用于实验室质控和试剂评价。
➢ HIV 抗体阳性混合血清：
➢ WB确证阳性样本：WB全条带（gp160、gp120、p66、 p55/p51、gp41、p31、p24、p17）；