抗体筛查试验室内质控品制备和日常检测典型案例分析
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结论 HIV 抗体阳性血清梯度稀释系列可用于实验室 质控和试剂评价。但灵敏度的合适范围还需继续探 讨。
李红星（商丘市卫生防疫站）； 河南预防医学杂志，2005；16:133-135.
北京大学人民医院肝病研究所联 系电话：88325729
化学发光试剂应用案例1
韩××，山东青岛人,19岁，MSM 2012年3月初，到北京大学人民医院呼吸科，
调制针对生物梅里埃（3代）_1
材料 ➢ 抗-HIV阳性灭活血清（可用梅里埃试剂盒中
的阳性对照替代）； ➢ 抗-HIV阴性的血清（可用梅里埃试剂盒中的
阴性对照）或20%小牛血清； ➢ 2 mL冻存管； ➢ 生物安全柜； ➢ 酶免仪、微量进样器、15-50 mL离心管；
调制针对生物梅里埃（3代）_2
结果 试剂盒内的阳性对照血清与健康人的血清 1：10左右混合比例比较适合。
结论 自制质控血清性能稳定，经济、方便，便 于推广使用。
韦雪芳（广西壮族自治区横县疾病预防控制中心HIV初筛实验室530300）； 检验医学与临床，2011；8:2527-2528.
HIV抗体阳性血清梯度稀释系列用于实 验室质控和试剂评价探讨（1）
室内质控品
抗体检测的统计学室内质量控制
非试剂盒组份的外部质控品，是为了监控检测 的重复性而设置的，包括强阳性、弱阳性和阴 性质控血清；
只设置一个弱阳性质控，以该试剂盒临界值 （Cut-off）的2～3倍为宜。
外部质控品的作用是，判断该批临床样品检测 的有效性，因此，每次实验必须包含室内质控 品，其结果无效，必须重新试验。
肝病研究所承担HIV抗体检测任务： 首选试剂：生物梅里埃（3代）；备用试剂：
万泰3代； 2011年检测样本量：筛查阳性样本数26例
（0.3‰）；其中，确证试验阳性样本13例， 不确定4例，阴性9例； 2012年1-4月，筛查阳性15（1 ‰ ），阳性9 例。 2012年，检验科开始用雅培化学发光进行初 筛，初筛阳性送肝病研究所进行复检。
➢ HIV 抗体阴性混合血清：筛查试验阴性；
➢ 用阴性血清稀释阳性混合血清，筛查试验确定最高 稀释度稀释倍数：103-105；
➢ -20℃保存；
李红星（商丘市卫生防疫站）； 河南预防医学杂志，2005；16:133-135.
HIV抗体阳性血清梯度稀释系列用于实 验室质控和试剂评价探讨（2）
结果 在一定稀释度范围内-log[稀释度]与OD 值呈 线性关系。实验系列用于质控，各实验室均正确报 出样品的阴阳性结果，但灵敏度（回归曲线斜率/ 残差标准差）不同，依此对实验室进行排序。
2012年2月质控图
2011-2质控考评质控图
ELISA检测HIV抗体室内质控血清的制备
目的 实验室自制外部质控血清，绘制质控图， 满足《全国艾滋病检测技术规范》要求和考评要 求。
方法 利用试剂盒内的阳性对照血清，用健康人 的血清按一定量混合稀释成弱阳性，筛选出合适 混合比例，分装冷冻保存使用。
基本操作流程 ➢ 先将抗-HIV阳性灭活血清混合进行常规检测， 读取OD值。 ➢ 将抗-HIV阳性灭活血清用抗-HIV阴性的血清、 或20%小牛血清稀释至所需浓度（4-6倍），一 般为阴性对照OD值的3-4倍。 ➢ 将配置好的质控血清分装到2 mL冻存管中，1 mL/管，置-20℃冰箱保存。 ➢ 按照室内质控要求计算出此批次质控血清的SD 值、CV值，并绘出质控图，标明批号备用。
化学发光试剂应用案例2
东直门医院&性艾所 贾××，33岁，MSM
单位 样本ID 检测日期 初筛
复检1
WB带型
东直门医 院
120740
2月21日
雅培发光： 万泰4代：
2.5
0.07
p24
性艾所 VCT
121214 3月20日
万泰4代: 梅里埃4代：
来自百度文库
1.49
1.81
p24 p31 gp160
性艾所 VCT
备注
华信
罗氏化发 70
10
41（58)
19（3）
阴性，Max:21；可疑, Max:7.8；阳性,Min:171
望京 梅里埃4代 36 5 23（63) 8（3）
中日
金豪 58 30 14（24) 14（5）
罗氏化发 71 12 31（43) 28（4）
批号
样本 ID
检测日期
初筛
复检1
WB带型
北京大学 人民医院
3月6日
雅培发光： 25
梅里埃、 万泰3代：
<0.1
未送检
人民医院 121176
3月13日
梅里埃3代: 1.6
万泰3代: 0.32
p17 gp120 gp160
地坛医院 121631
4月10日
梅里埃4代: 2.9
万泰4代: 0.66
p24 gp41 gp120 gp160
以发烧、腹泻住院治疗； 检验科雅培化学发光：S/CO值29；送肝病
研究所复核阴性（梅里埃、万泰，三代）； 主治医生比较负责任，采血继续送检，梅
里埃（1.9）、万泰（0.3），均阳性；CD4 细胞计数和CD4/CD8比值偏低； 地坛医院皮肤科就诊，送检确证。
化学发光试剂应用案例1（续）
北京大学人民医院&地坛医院 韩××，山东青岛人,19岁，MSM
方法 用阴性血清梯度稀释HIV抗体确认阳性血清，用 第三代ELISA检测试剂进行检测，寻找稀释度与OD 值 间的关系，然后应用于实验室质控和试剂评价。
➢ HIV 抗体阳性混合血清：
➢ WB确证阳性样本：WB全条带（gp160、gp120、p66、 p55/p51、gp41、p31、p24、p17）；
室内质控品可以是商品或实验室自行制备。
室内质控品的使用和质量要求
每一次实验必须使用室内质控品，以便监控 实验的重复性。
同时可以了解各批试剂盒的批间或孔间差异。 室内质控品的管间或瓶间变异必须小于监测
系统预期的变异（cv＜20%）；
并且质控品应稳定、无菌，且不含有影响试 剂反应的防腐剂。
北京大学人民医院
121518 4月10日
万泰4代: 1.89
梅里埃4代： 2.05
p17 p24 p31 gp41 p51 p55 p66 gp120
gp160
雅培：2.51 万泰4：0.013
一个月后， 梅里埃4：1.81 万泰4：1.49
部分单位送检样本确证结果分析
初筛试剂
筛查阳 确证阳 性性
确证阴性 确证可疑 （%） （疑似感染）
李红星（商丘市卫生防疫站）； 河南预防医学杂志，2005；16:133-135.
北京大学人民医院肝病研究所联 系电话：88325729
化学发光试剂应用案例1
韩××，山东青岛人,19岁，MSM 2012年3月初，到北京大学人民医院呼吸科，
调制针对生物梅里埃（3代）_1
材料 ➢ 抗-HIV阳性灭活血清（可用梅里埃试剂盒中
的阳性对照替代）； ➢ 抗-HIV阴性的血清（可用梅里埃试剂盒中的
阴性对照）或20%小牛血清； ➢ 2 mL冻存管； ➢ 生物安全柜； ➢ 酶免仪、微量进样器、15-50 mL离心管；
调制针对生物梅里埃（3代）_2
结果 试剂盒内的阳性对照血清与健康人的血清 1：10左右混合比例比较适合。
结论 自制质控血清性能稳定，经济、方便，便 于推广使用。
韦雪芳（广西壮族自治区横县疾病预防控制中心HIV初筛实验室530300）； 检验医学与临床，2011；8:2527-2528.
HIV抗体阳性血清梯度稀释系列用于实 验室质控和试剂评价探讨（1）
室内质控品
抗体检测的统计学室内质量控制
非试剂盒组份的外部质控品，是为了监控检测 的重复性而设置的，包括强阳性、弱阳性和阴 性质控血清；
只设置一个弱阳性质控，以该试剂盒临界值 （Cut-off）的2～3倍为宜。
外部质控品的作用是，判断该批临床样品检测 的有效性，因此，每次实验必须包含室内质控 品，其结果无效，必须重新试验。
肝病研究所承担HIV抗体检测任务： 首选试剂：生物梅里埃（3代）；备用试剂：
万泰3代； 2011年检测样本量：筛查阳性样本数26例
（0.3‰）；其中，确证试验阳性样本13例， 不确定4例，阴性9例； 2012年1-4月，筛查阳性15（1 ‰ ），阳性9 例。 2012年，检验科开始用雅培化学发光进行初 筛，初筛阳性送肝病研究所进行复检。
➢ HIV 抗体阴性混合血清：筛查试验阴性；
➢ 用阴性血清稀释阳性混合血清，筛查试验确定最高 稀释度稀释倍数：103-105；
➢ -20℃保存；
李红星（商丘市卫生防疫站）； 河南预防医学杂志，2005；16:133-135.
HIV抗体阳性血清梯度稀释系列用于实 验室质控和试剂评价探讨（2）
结果 在一定稀释度范围内-log[稀释度]与OD 值呈 线性关系。实验系列用于质控，各实验室均正确报 出样品的阴阳性结果，但灵敏度（回归曲线斜率/ 残差标准差）不同，依此对实验室进行排序。
2012年2月质控图
2011-2质控考评质控图
ELISA检测HIV抗体室内质控血清的制备
目的 实验室自制外部质控血清，绘制质控图， 满足《全国艾滋病检测技术规范》要求和考评要 求。
方法 利用试剂盒内的阳性对照血清，用健康人 的血清按一定量混合稀释成弱阳性，筛选出合适 混合比例，分装冷冻保存使用。
基本操作流程 ➢ 先将抗-HIV阳性灭活血清混合进行常规检测， 读取OD值。 ➢ 将抗-HIV阳性灭活血清用抗-HIV阴性的血清、 或20%小牛血清稀释至所需浓度（4-6倍），一 般为阴性对照OD值的3-4倍。 ➢ 将配置好的质控血清分装到2 mL冻存管中，1 mL/管，置-20℃冰箱保存。 ➢ 按照室内质控要求计算出此批次质控血清的SD 值、CV值，并绘出质控图，标明批号备用。
化学发光试剂应用案例2
东直门医院&性艾所 贾××，33岁，MSM
单位 样本ID 检测日期 初筛
复检1
WB带型
东直门医 院
120740
2月21日
雅培发光： 万泰4代：
2.5
0.07
p24
性艾所 VCT
121214 3月20日
万泰4代: 梅里埃4代：
来自百度文库
1.49
1.81
p24 p31 gp160
性艾所 VCT
备注
华信
罗氏化发 70
10
41（58)
19（3）
阴性，Max:21；可疑, Max:7.8；阳性,Min:171
望京 梅里埃4代 36 5 23（63) 8（3）
中日
金豪 58 30 14（24) 14（5）
罗氏化发 71 12 31（43) 28（4）
批号
样本 ID
检测日期
初筛
复检1
WB带型
北京大学 人民医院
3月6日
雅培发光： 25
梅里埃、 万泰3代：
<0.1
未送检
人民医院 121176
3月13日
梅里埃3代: 1.6
万泰3代: 0.32
p17 gp120 gp160
地坛医院 121631
4月10日
梅里埃4代: 2.9
万泰4代: 0.66
p24 gp41 gp120 gp160
以发烧、腹泻住院治疗； 检验科雅培化学发光：S/CO值29；送肝病
研究所复核阴性（梅里埃、万泰，三代）； 主治医生比较负责任，采血继续送检，梅
里埃（1.9）、万泰（0.3），均阳性；CD4 细胞计数和CD4/CD8比值偏低； 地坛医院皮肤科就诊，送检确证。
化学发光试剂应用案例1（续）
北京大学人民医院&地坛医院 韩××，山东青岛人,19岁，MSM
方法 用阴性血清梯度稀释HIV抗体确认阳性血清，用 第三代ELISA检测试剂进行检测，寻找稀释度与OD 值 间的关系，然后应用于实验室质控和试剂评价。
➢ HIV 抗体阳性混合血清：
➢ WB确证阳性样本：WB全条带（gp160、gp120、p66、 p55/p51、gp41、p31、p24、p17）；
室内质控品可以是商品或实验室自行制备。
室内质控品的使用和质量要求
每一次实验必须使用室内质控品，以便监控 实验的重复性。
同时可以了解各批试剂盒的批间或孔间差异。 室内质控品的管间或瓶间变异必须小于监测
系统预期的变异（cv＜20%）；
并且质控品应稳定、无菌，且不含有影响试 剂反应的防腐剂。
北京大学人民医院
121518 4月10日
万泰4代: 1.89
梅里埃4代： 2.05
p17 p24 p31 gp41 p51 p55 p66 gp120
gp160
雅培：2.51 万泰4：0.013
一个月后， 梅里埃4：1.81 万泰4：1.49
部分单位送检样本确证结果分析
初筛试剂
筛查阳 确证阳 性性
确证阴性 确证可疑 （%） （疑似感染）