β-兴奋剂类快速检测
AccuDip TM 克伦特罗快速检测试纸卡使用说明书 (尿样检测)
传真：001-408-944-9665公司网址：公司邮箱：contact@AccuDip TM克伦特罗快速检测试纸卡使用说明书(尿样检测)产品编号：AAF-111111.产品概述:克伦特罗，又名瘦肉精，属于β-兴奋剂类药物，是一种肾上腺类神经兴奋剂。
当添加到动物饲料中后，可以增加动物的瘦肉量，同时减少饲料使用。
然而瘦肉精为增加瘦肉率所需用量大，在动物体内代谢缓慢，在肉类尤其是内脏中会有大量残留，如果食用进入人体会直接危害人体健康，出现晕厥、心慌、战栗、头疼、恶心、呕吐、肌肉振颤等中毒症状，特别是对高血压、心脏病等疾病患者危害更大，严重的可导致死亡。
瘦肉精是国家明令禁止使用的饲料添加剂。
本产品将胶体金免疫层析原理应用于克伦特罗含量的快速测定。
可以直接检测动物尿样，样品不需要稀释和前处理，使用简便。
反应灵敏，检测灵敏度为3纳克/毫升（3ppb)。
检测迅速，结果在5-10分钟内显示。
2.用途及灵敏度：本产品适用于尿样中克伦特罗（Clenbuterol)含量的快速检测。
检测灵敏度：3纳克/毫升(3ppb)3.检测原理：本产品将胶体金免疫层析原理应用于克伦特罗含量的快速测定。
在试纸卡中，抗克伦特罗抗体偶联到胶体金颗粒上，克伦特罗测试抗原固定在纤维素滤膜上。
如果样品不含有克伦特罗，胶体金抗体偶联物与固定抗原结合，在膜上显示检测线，检测结果为阴性。
如果样品中含有克伦特罗，克伦特罗结合在胶体金抗体偶联物上，抑制了胶体金抗体偶联物与固定抗原的结合，不显示检测线，检测结果为阳性。
4.试纸卡产品组成：试纸卡（1块）；一次性吸管（1支）；干燥剂（1块）传真：001-408-944-9665公司网址：公司邮箱：contact@ 5. 样本收集:尿样标本必须收集在洁净、干燥、不含有防腐剂的塑料杯或玻璃容器内。
若不能及时送检，尿样可在2-8℃冷藏保存24 小时。
长期保存需冷冻于-20℃，样品需避免反复冻融。
6. 检测步骤：（1）测试前将未开封的检测卡和尿样恢复至室温,从铝箔袋中取出检测卡后尽快使用（2）将检测卡平放,用一次性吸管吸取待检尿样,在加样孔内滴加样品3滴（3）加样后计时，5-10分钟判定结果7. 结果判定：阴性（-）：检测线（T）和控制线（C）都显色，表明样品中的克伦特罗浓度低于3纳克/毫升阳性（+）：检测线（T）无色，控制线（C）显色，表明样品中的克伦特罗浓度高于3纳克/毫升无效：控制线（C）无色，表示使用方法不正确或试纸卡失效，结果无效。
β2-兴奋剂类药物残留检测的研究进展
用 反相 高 效 液相 色谱 法 测定 猪 肝 中 的盐 酸 克 伦特 ＥＬＩＳＡ法 ，得 出检测限为 ０．４８ ｗｇｋｇ。
关键词 ：１ ３２一兴奋 剂类药物 ；药物残留；研究进展
Ｒｅｓｅａｒｃｈ ｏｎ ｔｈｅ ｐｒｏｇｒｅｓｓ ｏｆ １３２－１ａｃｔａｍｓ ａｇｏｎｉｓｔｓ ｒｅｓｉｄｕｅｓ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ
ＺＨＡＯ Ｘｉａｏ－ｆｅｎｇ ， ＸＵ Ｘｕｅ－ｈｕａ２， Ｗ ＡＮ Ｙｕ－ｐｉｎｇｚ， ｅｔ ａ１．
（１．Ｘｉｎｊｉａｎｇ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｄｒｕｇ ａｎｄ Ｆｅｅｄ Ｓｕｐｅｒｖｉｓｉｏｎ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，Ｘｉｎｊｉａｎｇ Ｕｒｕｍｑｉ ８３００００，Ｃｈｉｎａ； ２．Ｕｒｕｍｑｉ Ｓａｆｅｔｙ Ｃｅｎｔｅｒ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ Ｑｕａｌｉｔｙ Ｔｅｓｔｉｎｇ，Ｘｉｎｊｉａｎｇ Ｕｒｕｍｑｉ ８３００００，Ｃｈｉｎａ
中 图分 类 号 ：￥８５４．４ 文献标 识 码 ：Ａ 文章 编 号 ：１００１—８９６４｛２０１ １）０７—００２９—０２
摘要 ：１ ３２一兴奋剂类药物具有 降低脂肪含量 ，提 高瘦 肉率的作 用，常被用作饲料添加剂 ，由于具有潜 在的危 害，已被大 多数 国家禁止使 用。本文介绍 了国内外检 测 １３２一兴奋剂类药物残留的研 究进展 ，对各 种 方 法 的优 缺 点 进行 了比较 ，为研 究该 类 药物 的检 测 技 术提 供 借 鉴 。
定 法（ＥＬＩＳＡ）和放射受体分析法等。
测 ＣＬ的竞 争 ＥＬＩＳＡ法 ，并对 马尿和 人尿 进行 了分
１．１ 高效液相 色谱法（ＨＰＬＣ） ＨＰＬＣ是具有高效分离 析 ，其 灵敏 度达 １ Ｌ。近几年国内对 ＣＬ，ＳＡＬ残留检 和 检测能力的方法 ，我国将其作 为检测瘦 肉精 的半确 测的报道逐渐增多 ，多名研究者都建立 了酶免疫 分析
动物源食品中β-兴奋剂的检测技术和质量控制 20141014泉州讲课2
以沙丁胺醇为搜索词 GB/T 22147-2008 饲料中沙丁胺醇、莱克多巴胺和盐酸克仑特罗的测定 液相色谱质谱联用法
SB/T 10773-2012 动物肌肉中沙丁胺醇的快速筛查 胶体金免疫层析法
SN/T 1924-2011 进出口动物源食品中克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇和特布他林残留量的 测定 液相色谱-质谱/质谱法 SN/T 1116-2002 进出口饲料中克伦特罗、沙丁胺醇残留量的检验方法 液相色谱法 NY/T 1030-2006 饲料中沙丁胺醇的测定 气相色谱-质谱法
合并上清液待用
称取样品5g（精确至0.01g）
加入内标200ul(内标200ng/mL)
配置：取 43.0gNaAC.4H2O 和25.2g乙酸加 水定容至100酸酯酶
加入10mlPH5.2乙酸-乙酸钠缓冲液，漩涡60s 加混合酶100ul，漩涡30s，37℃酶解过夜
超声15min，4℃10000r/m离心10min 10mlPH5.2乙酸-乙酸钠缓冲液重复提取一次
合并上清液待用
酶解的必要性 沙丁胺醇在排泄物和组织中主要以硫酸 轭合物的形式存在，其次为葡萄糖醛酸轭 合物；特布他林主要为硫酸轭合物；莱克 多巴胺主要以葡萄糖醛酸轭合物形式存在 酶解可释放结合态 沉淀蛋白
在网络上以“克仑特罗”为搜索关键词
NY/T 1460-2007 饲料中盐酸克仑特罗的测定 酶联免疫吸附法 GB/T 22147-2008 饲料中沙丁胺醇、莱克多巴胺和盐酸克仑特罗的测定 液相色谱质谱联用 法 农业部958号公告-8-2007 牛可食性组织中克仑特罗残留检测方法 气相色谱-质谱法 NY/T 933-2005 尿液中盐酸克仑特罗的测定 胶体金免疫层析法NY 438-2001 饲料中盐酸克 仑特罗的测定 NY 438-2001 饲料中盐酸克仑特罗的测定
液相色谱-串联质谱结合谱库检索测定猪组织中的9种β-兴奋剂残留量
农牧发［ ２ ０ ０ ２ ］ １号 文 件 中明确 规 定 克 伦 特 罗 、 沙 丁 胺醇 、 莱 克多 巴胺 为 禁 用 药 物 。 一 兴 奋 剂 的 检 测 方 法 主要 有 酶联 免 疫 法 、 液 相 色 谱 法 、 气 相 色 谱一 质 谱 法 和 液 相 色 谱一 串联质 谱法 （ Ｌ Ｃ — ＭＳ ／ ＭＳ ） ‘ 等 ， 。 目前常 用 的检测 方法 是 Ｌ Ｃ － ＭＳ ／ ＭＳ 。
欧盟发布 的 ２ ０ Ｏ ２ ／ ６ ５ ７ ／ Ｅ Ｃ法 规 是 药 物 残 留分
９ ８ ． ５ ％） 、 利 托君 （ ｒ ｉ ｔ ｏ ｄ ｒ ｉ ｎ ｅ ， ９ ９ ． ５ ％） 、 特布 他林 （ ｔ ｅ ｒ －
ｂ ｕ ｔ ａ ｌ ｉ ｎ ｅ ， ９ ８ ． ０ ％） 、 班 布 特 罗 （ｂ ａ ｍｂ ｕ ｔ ｅ ｒ ｏ ｌ ，
９ ７ ． ５ ％） 、 异 舒普 林 （ ｉ ｓ ｏ ｘ ｓ ｕ ｐ ｒ ｉ ｎ ｅ ， ９ ８ ． ５ ％） 、 妥 布特 罗
（ ｔ ｕ ｌ ｏ ｂ ｕ ｔ ｅ ｒ ｏ ｌ ，９ ９ ． ０ ％） 、西 马 特 罗 （ｃ ｉ ｍａ ｔ ｅ ｒ ｏ ｌ ， ９ ９ ． ５ ％） 标准 品， 购于 Ｓ ｉ ｇ ｍａ公 司 。用 少 量 乙 腈 溶
第 ３期
蔡勤仁， 等： 液相色谱一 串联质谱结合谱库检索测定猪组织中的９种／ ３ － 兴奋剂残留量
・ ２ ０ １・
Ｋｅ ｙ ｗｏ ｒ ｄ ｓ ： ｌ ｉ ｑ ｕ ｉ ｄ ｃ ｈ ｒ ｏ ｍａ ｔ ｏ ｇ ｒ ａ ｐ ｈ ｙ — ｔ ａ ｎ ｄ ｅ ｍ ｍａ ｓ ｓ ｓ ｐ ｅ ｃ ｔ ｒ ｏ ｍｅ ｔ ｒ ｙ（ Ｌ Ｃ — ＭＳ ／ ＭＳ ） ；ｓ ｐ ｅ ｃ ｔ ｒ ａ ｌ ｌ ｉ ｂ ｒ ａ ｙ； ｒ
金标快速检测检测试剂卡检测技术110325-02
金标免疫检测试纸条的结构
主体的膜反应体系由以下部分组成：
1： 高蛋白亲和性的高分子纤维素膜（NC膜），为反应膜用来作为 系统反应的载体和显示反应结果。 2：选用有较强吸水能力的玻璃纤维，经特殊处理后，为反应系统提 供适合的反应条件，并帮助吸水。 3：吸附力较强的玻璃纤维，作为金标记物的固相载体。 4：吸收垫，吸水，牵引反应物的运动。 5：塑料基板，作为反应体系的支撑物。
检测方法对比
检测方法 样品 处理 是否 需标 准品 测 量 耗时 优点 缺陷
确认方法
液相色谱质谱联用
最复 杂
是
定 量
24小 时
仪器价格昂贵且方 法操作复杂，存在 结果准确，检 检测成本高、检测 测精度高，灵 周期长、对检测人 敏度高 员的技术要求较高， 需要较复杂的样品 处理过程 操作简单，使 用方便 具有良好的特 异性，操作简 单方便，一步 测试，用时只 需5分钟 适于实验室检测
5、中毒事件
在互联网上用“瘦肉精中毒”搜索，可以查到有6710 项的相关报道。世界上最早的“瘦肉精”中毒事件于 1990年3月在西班牙发生。我国则于1998年5月在香港 最早出现。 1、2003年8月22日，广东信宜市发生530人瘦肉精集体中 毒事件 2、2002年2月浙江省平湖市170余名群众发生瘦肉精中毒 3、2001年11月2日，北京发生14人瘦肉精中毒 4、 2001年11月，广东河源市发生484人食用含瘦肉精的 猪肉后集体中毒的事件，闻名全国 5、1999年10月，浙江嘉兴市发生57人“瘦肉精”（含盐 酸克伦特罗)集体中毒事件 6、1998年，广东高明市发现有7例因喝猪肺汤致人中毒 事件
4-氨基-α-（叔丁胺甲基）-3，5-二氯苯甲醇盐酸盐
1、药理作用
GBT22286-2动物源性食品中多种-受体激动剂残留量的测定 液相色谱串联质谱法
样品复测时应先将样品稀释一定倍数后过固相萃取柱，保证最终浓度在曲 线范围之内，且最终对应内标浓度应与曲线保持一致 ✓ 4、检测结果无需校正回收率
Q&A
目前，针对β-兴奋剂有效检测方法主要集中在胶体金快速检测卡法、酶联免 疫法（ELISA）、高效液相色谱法（HPLC）、液相色谱串联质谱法(LCMS/MS)、气相色谱-质谱法(GC-MS)
二、GB/T 22286-2008适用范围及原理
✓ 范围：本标准规定了动物源性食品中（适用于猪肝和猪肉）克伦特罗、 沙丁胺醇、特布他林、莱克多巴胺、塞曼特罗、塞布特罗、溴布特罗、 苯氧丙酚胺、马布特罗、溴代克伦特罗残留量的检测方法，检出限均为 0.5μg/kg。
2.“瘦肉精”体内代谢
盐酸克伦特罗在动物体内主要发生氧化作用，也发生硫酸 化反应和葡萄糖醛酸络合反应(存在形式为结合态和游离 态)。其主要代谢场所是肝脏，最终大部分随尿液排出， 实验证明，盐酸克伦特罗在动物体内代谢周期长，易富集 和残留，耐热性较高，在100℃的沸水中很稳定。
3.检测方法及相应标准
Β-受体激动剂是一类化学合成的苯乙醇胺类物质，早期主要 用于防治人、动物支气管哮喘和支气管痉挛，后来发现在饲料 中添加该类药物后具有营养再分配作用，可明显提高动物的瘦 肉率（提高10%），因此曾被作为促生长添加剂被广泛关注， 但是人们食用了该类药物残留的畜禽产品后会出现面色潮红、 头痛、头晕、胸闷、心悸、四肢麻木等不良反应，严重的可危 及生命。因此欧盟、美国等都先后立法禁止在养殖业中使用该 类药物，我国政府也明令禁止其使用。
克伦特罗
沙丁胺醇
特布他林 莱克多巴胺
β-激动剂(六合一)检测卡说明书(完整版)
β-激动剂（六合一）快速检测卡说明书使用说明书盐酸克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇、氯丙那林、特布他林、马布特罗、西布特罗残留均属于β—兴奋剂，是一种人和兽医作为治疗哮喘的药物。
在牲畜中超剂量使用可以使脂肪组织转化为肌肉组织，由于能够显著改善脂肪率和生产效率，β兴奋剂往往被滥用于畜牧养殖生产中。
近来又有一些非法使用作为饲料添加，并存在滥用现象。
国家已经明令禁止在动物饲养中使用。
本品是一种不需要任何仪器设备的尿液检测法，应用单克隆抗体技术从而特异性地定性检测尿液中的盐酸克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇、氯丙那林、特布他林、马布特罗、西布特罗残留。
本品盐酸克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇阈值为5ng/ml，氯丙那林、特布他林、马布特罗、西布特罗阈值为8 ng/ml。
【测定原理】本试剂运用抗原抗体的特异反应以及侧向层析和胶体金技术进行尿液中盐酸克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇、氯丙那林、特布他林、马布特罗、西布特罗分子的快速定性检测。
用BSA偶联的β兴奋剂分子与胶体金颗粒结合后，包被在醋酸纤维素膜上；在硝酸纤维素膜上将β兴奋剂抗体和BSA抗体分别包被在检测区（T）和质控区(C)。
当尿液样本加样孔后，样本中的β兴奋剂分子与β兴奋剂-BSA-胶体金偶联物一起层析泳动到检测区竞争与β兴奋剂抗体结合，剩余的β兴奋剂-BSA-胶体金继续泳动到质控区与抗体结合。
因此，当样本中的β兴奋剂浓度超过一定量后，胶体金偶联物就不能与β兴奋剂抗体结合，因此，当样本中的β兴奋剂浓度超过一定量后，胶体金偶联物就不能与β兴奋剂抗体结合，此时检测区不出现紫红色线条；当样本中β兴奋剂浓度低于一定值或样本中没有β兴奋剂时，胶体金偶联物就与β兴奋剂抗体结合，从而在检测区显示出一条紫红色线条；而无论样本中是否含有β兴奋剂分子，质控区都会出现紫红色线条，以示检测有效。
【包装组成】●β兴奋剂胶体金法检测卡（50份）●一次性塑料滴管（50支）●一次性塑料手套（5支）●使用说明书（1份）【检测所需设备】●计时器●一次性洁净塑料尿杯或玻璃容器【标本收集】尿液标本必须收集在洁净、干燥不含有任何防腐剂的塑料尿杯或玻璃容器内。
动物组织中β-兴奋剂类药物多残留酶联免疫检测方法的建立
Ｊ ｏ ｕ ｒ ｎ ａ ｌ ｏ ｆ Ｈｅ ｎ ａ ｎ Ａｇ ｒ ｉ ｃ ｕ ｌ ｔ ｕ ｒ ａ ｌ Ｓ ｃ ｉ ｅ ｎ ｃ ｅ ｓ
动 物 组 织 中 Ｐ一 兴 奋 剂 类 药 物 多 残 留 酶 联 免 疫 检 测 方 法 的 建 立
ｂａ ｓ ｅ ｄ ｏ ｎ ｄｉ ｒ ｅ ｃ ｔ ｃ ｏ ｍｐｅ ｔ ｉ ｔ ｉ ｖｅ ｅ ｎｚ ｙｍｅ — ｌ ｉ ｎ ｋｅ ｄ ｉ ｍ ｍｕｎ ｏｓ ｏ ｒ ｂｅ ｎ ｔ ａ ｓ ｓ ａ ｙ（ ＥＬＩ Ｓ Ａ） ．Ｔｈ ｅ ｒ ｅ ｓ ｕｌ ｔ ｓ ｓ ｈ ｏｗｅ ｄ
Ｋｅ ｙ ｗｏ ｒ ｄｓ ：ＥＬＩ ＳＡ ； — ａ ｇｏ ｎｉ ｓ ｔ ｓ ；ｍｕｌ ｔ ｉ — ｒ ｅ ｓ ｉ ｄ ｕｅ；ａ ｎｉ ｍａ ｌ ｔ ｉ ｓ ｓ ｕ ｅ
万 宇平 ， 刘 宁 ， 陶 光灿 ， 吴 鹏 ， 李 勇 ， 崔 廷 婷
（ １ ． 北京勤邦生物技术有限公司 ， 北京 １ ０ ２ ２ ０ ６ ； ２ ． 临 沂 新 程 金 锣 肉制 品 集 团有 限 公 司 ， 山东 临 沂 ２ ７ ６ ０ ３ ６ ）
摘要 ： 应 用直接 竞 争酶联 免疫 吸 附技 术 ， 建立 了一种 快速检 测 动物 组 织 中 ｐ 一 兴奋 剂 类 药物 多残 留 的方 法 ， 并对其技 术性 能进 行 了评 价 。结 果表 明 ， 该方法的 Ｉ Ｃ 。 浮动范围为 ０ ． ４ ～０ ． ７ ｕ ｇ ／ Ｌ， 对 组
ｔ ｈ ａ ｔ ｔ ｈ ｅ Ｉ Ｃ５ ０ ｗａ ｓ ０ ． ４ —０ ． ７ ｔ ￣ ｇ ／ Ｌ， ａ ｎ ｄ ｔ ｈ ｅ ｄ ｅ ｔ ｅ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ｌ ｉ ｍｉ ｔ ｆ ｏ ｒ ａ ｎ ｉ ｍａ ｌ ｔ ｉ ｓ ｓ ｕ ｅ ｗａ ｓ ０ ． ５￣ ｇ ／ ｋ ｇ ． Ｓ ａ ｍｐ ｌ ｅ
瘦肉精快速检测
瘦肉精快速检测
瘦肉精是一类药物，而不是一种特定的物质，是指能够促进瘦肉生长的饲料添加剂。
任何能够促进瘦肉生长、抑制肥肉生长的物质都可以叫做“瘦肉精”。
目前，能够实现这种功能的物质是一类叫做β-兴奋剂（β-agonist）的药物，比如在中国造成中毒的克仑特罗（clenbuterol）和美国允许使用的莱克多巴胺/又译雷托巴胺（Ractopamine）。
瘦肉精在上海曾经引发了几百人的中毒事件。
而在台湾，由于从美国进口的猪肉里含有瘦肉精，几乎挑起一场政治争端。
由于西方国家一般不消费动物内脏（猪肉一般不含瘦肉精，但内脏特别是肝脏则会残留瘦肉精），因而在美国、加拿大、新西兰等国，瘦肉精这类物质的使用是合法的。
其它这样类似药物还有沙丁胺醇（Salbutamol）和特布他林（erbutaline)等，同样能起到“瘦肉”作用、却对人体健康危害过大，因而造成安全隐患。
它们也因而在全球遭到禁用。
早在2002年，农业部、卫生部、国家食品药品监督管理局就公告，明令禁止在饲料和动物饮用水中添加盐酸克伦特罗和莱克多巴胺等7种瘦肉精。
而据有关专业人士透露，各地在进行瘦肉精检测中基本都只检测盐酸克伦特罗，莱克多巴胺只有个别地方有检测。
而正因为如此，一些不法养殖户就选择回避盐酸克伦特罗，改用莱克多巴胺等其他品种的瘦肉精。
为了较彻底排查检测“瘦肉精”，最好检测盐酸克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇三种“瘦肉精”。
适用的快速检测手段。
新型β-激动剂快速检测卡的性能验证与临床应用
使用 。２ Ｏ世纪 ８ ０ 年代初 ， 美 国一家公 司开始将其
添加 到 饲料 中 ， 对 动物 有 促 进 生 长 、 大 幅 度 提 高瘦 肉率 、 改 善 生 产 性 能 等 作 用 。人 食 用 含 有 “ 瘦肉 精” 的猪 肉 、 内脏 及其 加工 产 品后会 导致 中毒 ｊ 。
速筛查 的手段 ， 适用于基层开展食 品安全监测 。 关键词 ： 苯乙醇胺 Ａ； 溴布特罗 ； 快速检测 卡 ； 应用
极大提高。我们联合北京维德维康生物技术有 限
公司 ， 基于胶 体 金 免疫 层 析 方 法 建 立 了饲 料 、 动物 尿 液等 样 品 中 ｐ 一 激动剂 快速检测方法 ， 研 究 开发 了新型 ｐ 一 激动 剂快 速 检 测 卡 ， 实现新型 ８ 一 激 动剂 的现场 快速 检测 。本 实 验进 行 了新 型 Ｂ 一 激 动 剂快
广 西畜 牧兽 医
２ ０ １ ５年 Ｖ ｏ １ ． ３ １（ ５ ）
２ ３ ７
新型 Ｐ － 激 动 剂 快 速检 测 卡 的性 能验 证 与 临床 应 用
罗昭 军 ， 叶 云锋 ， 严 明 ， 唐 建， 陈 幸， 杨武宁， 何 琼， 卜泽 明 ， 黎 书长
（ 广西兽药监察所 ， 广西南 宁 ５ ３ ０ ０ ０ １ ）
溴布特罗 ） 等违禁药 物使 用现 象 ， 建 立 饲料 、 动物 尿液 等样 品中 Ｂ ． 激动剂快 速检测 方法 ， 本所 对北 京维 德维
康生物技术有 限公 司的 ３批苯 乙醇胺 Ａ快 速检测 卡 ，
进行 了性能验证并在全 区基 层质检机 构及养殖 场进行 了临床应用 。结果表 明 ， 新型 Ｂ － 激动 剂快 速检测 卡检 测灵敏度高 ， 结果 准确 。此 快速 检测 卡 可作 为一 种快
B兴奋剂免疫快速检测技术
二、β-兴奋剂的检测技术进展及国家相关法规 和检测标准
1. β-兴奋剂的检测技术进展
• 目前，国内外已形成了完整的“筛选”—“确证” 检测体系，发展了 成熟的检测技术和方法；
• β -兴奋剂的检测方法根据原理不同可分为色谱技术、免疫分析技术
（ELISA技术与金标技术）等。
色谱技术
• 高效液相色谱法（HPLC） • 高效液相色谱质谱法（ LC-MS） • 气相色谱-质谱联用（GC-MS） 特点：色谱技术需要时间较长、设备要求高、需专业人员操作； 灵敏度和分辨率都很高，可作为“确证”时使用。
β-兴奋剂分子结构
克伦特罗(Clenbuterol)
莱克多巴胺（Ractopamine）
苯乙醇胺类化合物
沙丁胺醇（Sabutamol）
2、对人体健康的危害性
• 由于用作生长促进剂时的剂量是治疗量的5～ 10倍， β-兴奋剂在动物脏器中残留，并通过食 物链进入人体，人体的累计摄入量超过一定 值或食用了高残留的内脏组织，易出现毒副 作用。
（2）使用：室温（2-40℃）使用， 检测卡取出20min内使用，避免受 潮失效。
（3）反应：检测卡避免阳光直射、 空调或风扇直吹。
2.2. 注意事项
2）.操作过程
（1）检测卡放置：放置于水平的台
面上，忌倾斜。
（2）加样： ①尿样加入加样孔中，不要加入检测 区； ②垂直滴加2滴尿样，不要整管加入
（3）结果判读： 测试结果在5min时判读
三、胶体金技术在β-兴奋剂检测中的实务
四、新型β-兴奋剂(齐帕特罗，苯乙醇胺A）的研究和检测应对
五、 β-兴奋剂及莱克多巴胺试剂盒的技术要领及数据分析
一、 β-兴奋剂的危害性及国内外违法使用概况
高效液相色谱-串联质谱法测定牛肉中18种β-受体兴奋剂
高效液相色谱-串联质谱法测定牛肉中18种β-受体兴奋剂徐成钢;胡巧茹;崔嘉;颜鸿飞;杨丽君【摘要】建立一种同时测定牛肉中18种β-受体兴奋剂残留量的高效液相色谱串联质谱（HPLC-MS/MS）检测方法。
样品加入乙酸铵缓冲液，β-葡萄糖醛酸酶/芳基硫酸酯酶酶解过夜，经固相萃取柱净化、浓缩、定容后，采用Thermo Hypersil Gold（2.1 mm ×100 mm，3μm）色谱柱，液相色谱串联质谱法在正离子模式下检测。
该方法所有β-受体兴奋剂在0.5μg/kg～10μg/kg浓度范围内线性良好，定量限均为0.5μg/kg。
0.5、1.0、2.5μg/kg 3个浓度添加水平平均回收率在68.5%～91.9%之间，变异系数在4.2%～13.2%之间。
本方法灵敏度高，重现性好，操作简单、经济，可用于牛肉中β-受体兴奋剂动剂残留的检测确证。
%A method based on high performance liquid chromatography tandem mass spectrometry (HPLC-MS/MS) has been developed for the determination of 18 β-agonists residues in beef.The analytes were extracted with ammonium acetate solution and hydrolysised with beta-glucuronidase overnight.After being cleaned up with column, concentrated and reconstituted, the analytes were separated by HPLC with an Thermo Hypersil Gold column (2.1 mm ×100 mm, 3μm) under the mobile phase containing 0.1%formic acid and acetonitrile. Identification and quantification were achieved by HPLC-MS/MS with multiple reaction monitoring (MRM) via positive-ion mode.The method showed good linearity in the range from 0.5 μg/kg to 10 μg/kg, The limit of quantitation of allβ-agonists were 0.5μg/kg. The overall recovery varied from 68.5%to 91.9%at the spiked level o f 0.5, 1.0, 2.5μg/kg and the relative standarddeviation of the method varied from 4.2%to 13.2%.The method is sensitive,reproducible,simple and economic,the method adapts to the determination of β-agonists residues in beef.【期刊名称】《食品研究与开发》【年(卷),期】2016(037)004【总页数】5页(P122-125,126)【关键词】β-受体兴奋剂;牛肉;高效液相色谱串联质谱【作者】徐成钢;胡巧茹;崔嘉;颜鸿飞;杨丽君【作者单位】威海出入境检验检疫局，山东威海264205;威海出入境检验检疫局，山东威海264205;威海出入境检验检疫局，山东威海264205;湖南省检验检疫科学研究院，湖南长沙410004;威海出入境检验检疫局，山东威海264205【正文语种】中文β-受体兴奋剂是天然的儿茶酚胺类化学合成的衍生物，选择性作用于β-肾上腺受体。
浅谈饲料中β-兴奋剂检测方法的研究进展
浅谈饲料中β-兴奋剂检测方法的研究进展作者：郭紫峰，胡晶晶来源：《江西饲料》 2015年第6期郭紫峰1胡晶晶2（1.江西科技师范大学南昌330013；2.华东交通大学理工学院南昌330100）摘要：介绍了β-兴奋剂的概况、作用机理，以及胶体金快速检测（GICT）、酶联免疫吸附法（ELISA）、高效液相色谱法（HPLC）、气相色谱串联质谱法（GC-MS）等检测手段。
关键词：饲料安全；β-兴奋剂；检测中图分类号：S816.17文献标识码：A文章编号：1008-6137（2015）06-0018-02β-兴奋剂是饲料中禁止添加的物质，相应的检测技术对于β-兴奋剂有效的监管显得极为重要。
本文简要概述目前饲料中β-兴奋剂的检测技术。
1 β-兴奋剂概况β-兴奋剂是一类化学合成的苯乙醇胺类衍生物，20 世纪80年代至今，人工合成β-兴奋剂主要有盐酸克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇、西马特罗和班布特罗等十多种。
2 作用机理β-兴奋剂作用机理和肾上腺素、去甲肾上腺素相同，可影响营养物质在动物体内的流向和重新分配，有效促进肌肉组织生长，降低胴体脂肪含量，提高瘦肉率和增加瘦肉产量。
β-兴奋剂会引起交感神经兴奋，在治疗剂量下具有松弛气管平滑肌的作用，是治疗哮喘类疾病的药物。
但β-兴奋剂摄入过量，会引发明显的不良反应，如：心悸、头疼、目眩、恶心、呕吐、战栗、神经过敏、心率加快和肌肉振颤等症状。
通常，猪肉经过126 ℃油煎5 min只能破坏一半的残留量，因此，人食用了β-兴奋剂含量过高的动物组织，会出现中毒反应，尤以盐酸克伦特罗的毒性最大，因此，β-兴奋剂严禁在养殖业中使用。
3 检测手段由于利益的驱动，有的养殖户依然在饲料中添加β-兴奋剂。
因此，近年来，除了出台相应的法律法规，同时也在对β-兴奋剂的检测手段不断完善。
目前，已有大量的检测方法运用到实际监管中。
3.1 胶体金快速检测胶体金快速检测技术（GICT）是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型的免疫标记技术。
动物尿液中β-受体激动剂酶联免疫检测试剂盒使用通则的建立
β-受体激动剂又叫β-兴奋剂，也称“瘦肉精”，临床上常被用作止喘药，因其具有加快畜禽生长、降低动物脂肪含量、提高瘦肉率等作用，在养殖中往往被非法使用［1-3］。
β-受体激动剂会在动物组织中形成蓄积性残留，通过食物链进入人体，对人的肝、肾等内脏器官产生毒副作用，造成肌肉震颤、心悸、眩晕、恶心等症状［4-5］。
早在2002年我国就明确将盐酸克伦特罗、沙丁胺醇、莱克多巴胺、西马特罗、特布他林等β-受体激动剂列为养殖环节禁用物质。
为保证动物产品质量安全，国家每年都将β-受体激动剂类物质列为重点监控对象。
尽管如此，仍有一些不法养殖场户受利益驱使，违法使用“瘦肉精”类物质，导致有毒有害畜产品流向市场、进入百姓餐桌。
因此，加强对动物尿液中β-受体激动剂类物质的快速准确检测十分必要［6-7］。
目前，国内外关于动物尿液中β-受体激动剂类药物多残留分析一般采用气相色谱质谱联用技术［8-9］和液相色谱质谱联用技术［10-11］等方法。
该方法具有灵敏度高和准确度高的优点，但需要昂贵的仪器设备和专业的技术人员，检测成本高，无法满足基层检测机构对样品进行批量和快速检测的需要［12-13］。
近年来，酶联免疫检测技术在国内外农产品质量安全监测中得到广泛普及，其所用设备成本低、操作简便、灵敏度高［14-15］。
商品化酶联免疫检测试剂盒的检测速度快，可实现样品的批量化检测。
目前国内市场上针对动物尿液中β-受体激动剂的酶联免疫检测试剂盒种类繁多，但产品质量参差不齐。
操作人员由于对产品性质、使用方法、注意事项等关键环节理解的偏差，往往造成检测结果不正确、假阳性率高，可能导致阳性样品流入市场［16］。
本文建立了酶联免疫检测试剂盒的使用通则，将有效指导检验检测机构采购和验收该类产β-受体激动剂酶联免疫检测试剂盒使用通则的建立赵立军1，姚顺凯2，张静1，林顺全1，冯波1，李云1（1.四川省饲料工作总站，四川成都610041；2.四川省若尔盖县动植物产品检验检疫站，四川若尔盖624500）中图分类号：S851.4文献标识码：A 文章编号：1001-8964（2021）04-0035-03收稿日期：2020-12-31作者简介：赵立军（1982-），男，山东金乡县人，硕士，高级畜牧师，主要从事饲料及畜产品质量安全监测工作。