氯霉素试剂盒检测方法
氯霉素检验方法 文档
氯霉素检验方法1. 试剂与材料1.1氯霉素试剂盒，德国r-Biopharm公司。
1.2乙酸乙酯，分析纯。
1.3双蒸水。
2.仪器与设备2.1微孔板酶标仪，MuLtisKan Ascent,芬兰Labsystens公司。
2.2 8道移液器，50-300uL。
2.3 单道移液器，5-50ul,20-200ml,100-1000ul,1-5ml。
2.4 离心机。
2.5 旋转蒸发器，配真空冷却系统。
2.6 液体混匀器。
3.样品前处理3.1样品提取称取约2g（准确至0.01g）蜂蜜于20ml具塞试管中，加入用4ml双蒸水溶解，再加4ml乙酸乙酯，在混匀器上混匀10分钟。
将上述样液转至10ml离心管中，以4000转/分离心12分钟。
3.2净化从上述离心管中移取1ml上层的乙酸乙酯（相当于0.5样品）至另一试管中，60℃以下减压旋转蒸干，残留物用0.5ml缓冲液1溶液，此为样品溶液，供酶标仪测定。
4.测定4.1 酶标仪测定条件酶标仪测定波长为450nm。
4.2 酶标测定（以下操作在20-24℃室温条件下进行）。
4.2.1测定之前的准备工作将氯霉素酶试剂盒附带的所有试剂回升至室温20-24℃。
其中氯霉素酶标记物、氯霉素抗体用缓冲液1以1；11的比例稀释，在吸取浓缩液之前，要仔细振摇使之充分混匀。
4.2.2 标准应用的制备；50uL标准浓缩液（氯霉素试剂盒附带）用450uL缓冲液1稀释并混合均匀用玻璃不能用塑料瓶。
标准应用液1：50uL标准浓缩液1用450uL缓冲液1稀释oppt标准应用液2：50uL标准浓缩液2用450uL缓冲液1稀释50ppt标准应用液3：50uL标准浓缩液3用450uL缓冲液1稀释150ppt标准应用液4：50uL标准浓缩液4用450uL缓冲液1稀释450 ppt标准应用液5：50uL标准浓缩液5用450uL缓冲液1稀释1350ppt标准应用液6：50uL标准浓缩液6用450uL缓冲液1稀释4050ppt4.2.3.测定程序：取出实验需要数量的微孔板条，按顺序加入50ul标准或处理好的样品到各自的微孔中，加入50ul稀释了的酶标记物到微孔底部，加入50ul稀释了的抗体溶液到每一个微孔中充分混合（轻轻振荡板并在桌面上做圆周运动以混均）用薄膜覆盖板上在室温孵育2小时（注意在加入抗体的过程中移液器管尖千万不要接触到放进孔中的液体，避免交叉污染）。
氯霉素说明书(简化版)
RIDASCREEN® Chloramphenicol酶联免疫法定量检测氯霉素摘要RIDASCREEN®Chloramphenicol（编号：R1505）竞争酶标免疫分析法定量检测尿液、血清的氯霉素。
试剂盒中包含有酶联免疫试验所需的所有试剂，包括标准溶液。
试剂盒足够进行96次检测（包括标准）。
定量检测需要微孔板酶标仪。
检测限：尿液、血清………………………………………………..………75ppt回收率：尿液、血清 (80)特异性：RIDASCREEN®Chloramphenicol检测的特异性，是通过分析相应抗生素的交叉反应性而得到的。
Chloramphenicol..................................................................100 %Chloramphenicol base ......................................................... 75 %Thiamphenicol.................................................................. < 0.1 %1. 用途RIDASCREEN®Chloramphenicol竞争酶标免疫分析法定量检测牛奶，奶粉，蜂蜜，虾，肉，鱼粉和鸡蛋中的氯霉素。
2. 概要氯霉素是一种广谱抗生素，具有很好的抗菌效果，常用于畜牧业生产中，然而，氯霉素会造成人的再生障碍性贫血，而且诱发浓度还没有确定，所以目前已经禁止在动物及食品中使用氯霉素。
3. 测定原理测定的基础是抗原抗体反应，微孔板包被有针对氯霉素的抗体，加入氯霉素标准或样品溶液和氯霉素酶标记物，游离的氯霉素与氯霉素酶标记物竞争氯霉素抗体（竞争性酶联免疫法）。
没有结合的酶标记物在洗涤步骤中被除去。
氯霉素ELISA检测试剂盒说明书
氯霉素（Chloramphenicol）ELISA检测试剂盒说明书一、概要氯霉素（chloramphenicol, CAP）是应用广泛的抗菌素，曾对畜禽疾病控制和治疗起到了重要作用。
但由于氯霉素存在严重的副作用，能引起人的再生障碍性贫血，粒细胞缺乏症等疾病，欧美等发达国家已相继禁止或严格禁止使用。
本试剂盒是应用ELISA技术研发的新一代药物残留检测产品，能最大限度地减少操作误差和工作强度。
操作时间仅需1.5小时。
二、试验原理本试剂盒采用间接竞争ELISA方法，在酶标板微孔条上预包被偶联抗原，样本中残留的氯霉素和微孔条上预包被的偶联抗原竞争抗氯霉素抗体，加入酶标二抗后，用TMB底物显色，样本吸光值与其残留物氯霉素的含量成负相关，与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数，即可得出样品中氯霉素的含量。
三、适用范围可定性、定量检测动物组织（肌肉、肝脏等）、尿液、血清、肠衣、牛奶、奶粉等样本中氯霉素的残留量。
四、交叉反应率氯霉素……………………………………100%；琥珀氯霉素…………………………………92%；氯霉素-葡萄糖苷酸………………………57%。
五、使用单位需自备的设备及试剂设备：┅┅微孔板酶标仪450nm/630nm┅┅旋转蒸发仪/氮气吹干装置┅┅均质器┅┅振荡器┅┅涡旋仪┅┅离心机┅┅天平：感量0.01g┅┅刻度移液管：10ml┅┅洗耳球┅┅容量瓶：100ml、500ml┅┅玻璃试管：10ml┅┅聚苯乙烯离心管：10ml、15ml、50ml┅┅微量移液器：单道20μl～200μl、100μl～1000μl多道250μl试剂：┅┅乙酸乙酯（分析纯）┅┅乙腈（分析纯）┅┅正己烷（分析纯）┅┅二水合亚硝基铁氰化钠（分析纯）（供奶样用）┅┅七水合硫酸锌（分析纯）（供奶样用）┅┅葡萄糖苷酸酶(Merck,Art.No.4114)（供尿样本用）┅┅醋酸钠（分析纯）（供尿样本用）┅┅肝素钠（分析纯）（供血样本用）┅┅醋酸（分析纯）（供尿样本用）----去离子水六、提供的材料与试剂1、96孔酶标板×1块（包被有偶联抗原）2、标准液×6瓶：（2ml/瓶）0ppb,0.025ppb,0.075ppb,0.225ppb,0.675ppb,2.025ppb3、高浓度标准品：（2ml/瓶）100ppb4、酶标二抗…………………………7m l5、抗体工作液…………………………7m l6、底物液A液…………………………7m l7、底物液B液……………………………7ml8、终止液……………………………7m l9、20×浓缩洗涤液………………………40m l10、2×浓缩复溶液………………50m l七、溶液的配制配液1: C液（供奶样专用）0.36M 二水合亚硝基铁氰化钠（Na2Fe(CN)5·NO·2H2O）溶液称取10.7g二水合亚硝基铁氰化钠加去离子水溶解定容至100ml。
氯霉素检测试剂盒说明书
氯霉素检测试剂盒使用说明书Kit Catalog No.BC-3001一、概要:氯霉素(Chloramphenicol)是一种广谱抗生素，对畜禽疾病控制和治疗有重要功效。
但由于氯霉素存在严重的副作用，可抑制人体骨髓的造血功能，从而引起再生障碍性贫血，粒细胞缺乏等疾病，欧美等发达国家已相继禁止使用于动物饲料中。
本公司研发的氯霉素(Chloramphenicol)檢測試劑盒是應用抗原，抗体特异性的免疫学原理而建立的一种敏感，特异，简便及快速的檢測产品。
主要應用於檢測蜂蜜、蛋类、牛奶、奶粉、水產品、动物组织(肌肉、肝臟等)、饲料、血清、血浆及尿液樣本中存在的氯霉素。
二、检测原理:本试剂盒利用竞争酶联免疫方法，预先在微孔中包被羊抗兔抗体，实验时先后加入氯霉素标准品或待测样本，氯霉素酶标抗原和兔抗氯霉素抗体。
经过室温温育，反应液中的兔抗氯霉素抗体与微孔板上的羊抗兔抗体结合，待测样品中的抗原与氯霉素酶标抗原竞争微孔板上的兔抗氯霉素抗体。
洗涤后，没有与抗体结合的待测样品中的抗原或酶标抗原被洗去，再加入反应底物，结合的酶标抗原的酶将底物转化为蓝色产物，加入终止液后颜色由蓝色变为黄色。
反应完成后，样品中氯霉素含量越多，反应呈色就越浅；反之，样品中氯霉素含量越少，则呈色越深。
利用标准曲线可计算出样品中氯霉素含量。
三、试剂盒提供试剂:1.羊抗兔抗体包被的微孔板:96孔。
2.氯霉素参考标准品:0，0.025，0.05，0.10，0.25，0.75ppb (ng/ml);1.5ml/瓶(黄色)，一套共6瓶。
3.氯霉素酶标抗原试剂(1X):7ml/瓶。
4.兔抗氯霉素抗体:7ml/瓶。
5.样品稀释液：100ml/瓶。
6.显色剂/底物：11ml/瓶。
7.反应终止液：11ml/瓶。
8.洗涤液(20X)：50ml/瓶，使用前稀释20倍。
四、实验需要但试剂盒不提供的试剂和仪器:1.试剂∙乙酸乙酯∙正己烷或正庚烷2.仪器∙均质机(Ultra-turrax)∙微孔板酶标仪∙振荡器∙离心机∙氮气吹干仪或旋转蒸发器∙20µl,50µl,100µl,200µl,及1ml 移液器五、待测样品处理方法:1.蜂蜜a)称取2g 样品加入4ml 蒸馏水溶解均匀。
氯霉素检测方法有哪些呢？【健康小知识】
氯霉素检测方法有哪些呢？
文章导读
说到氯霉素很多人可能不了解，这其实就是人们常说的抗生素。
很多疾病的治
疗中都可能会用到氯霉素，也有的疾病需要做专业的医学检查，有的医学检查也需要检测
氯霉素。
临床上对于氯霉素检测的方法有很多，体内氯霉素含量太多对身体健康的影响也
是非常大的，需要注意摄入量。
那么到底什么是氯霉素检测？
1.氯霉素检测
氯霉素属广谱抗生素，曾在畜牧业中广为应用。
但氯霉素有较强的副作用和毒性作用，如果氯霉素在食用动物中残留，可通过食物链传给人类，长期微量摄入氯霉素，不仅使人
体肠道正常菌群失调，而且还会引起多种疾病，对人类的健康造成危害。
世界上许多国
家禁止此药用于生产食品动物，并规定了在畜产品中氯霉素不得检出。
2.主要方法
氯霉素检测方法包括微生物法、色谱法、免疫测定法。
微生物法易操作，费用低，但
灵敏度低，特异性差。
色谱法精确可靠、灵敏度高，检测极限可达到0. 1μgPkg ，但前处
理步骤多，回收率偏低。
免疫测定具有灵敏度高、特异性强、对仪器设备和人员素质要求低以及样品前处理简单等优点，适于现场监控和大规模样品筛选。
3.反应原理
ELISA法：氯霉素酶联免疫检测试剂盒，主要是利用抗原与抗体的特异性免疫化学反应的基本原理来进行的，换句话说，就是利用酶标记物与样品中的氯霉素与微孔中的抗体进。
氯霉素酶联免疫检测试剂盒(组织、生乳、蜂蜜、饲料、蛋)
氯霉素酶联免疫检测试剂盒说明书【反应原理】氯霉素酶联免疫检测试剂盒，主要是利用抗原与抗体的特异性免疫化学反应的基本原理来进行的，换句话说，就是利用酶标记物与样品中的氯霉素与微孔中的抗体进行竞争反应。
在整个反应当中，如果样品中的氯霉素残留的越多，相对地就会竞争反应越多的酶标记物，使得能结合上抗体的酶标记物相对地减少，用TMB底物显色，样品中的氯霉素含量与样品的吸光度值呈反比，与标准曲线比较即可得出氯霉素含量。
【试剂盒组份】1、酶标板：8孔/条，12条/板2、氯霉素标准溶液(1.5 mL / 瓶)：0 ppb、0.025 ppb、0.05 ppb、0.1 ppb、0.3 ppb、0.6 ppb ; 10ppb3、10倍浓缩样品稀释液………………………………30 mL4、10倍浓缩清洗液……………………………………30 mL5、氯霉素酶标记物……………………………………8 mL6、显色液………………………………………………12 mL7、反应终止液…………………………………………12 mL【试剂盒技术指标】试剂盒灵敏度：0.025ppb样本检测下限：生乳…………………………………………………0.1 ppb蜂蜜…………………………………………………0.1 ppb蜂王浆………………………………………………0.1 ppb血清………………………………………………0.025 ppb 鱼虾、蟹、鸡肉、猪肉……………………………………0.025 ppb 饲料…………………………………………………0.25 ppb 蛋…………………………………………………0.025 ppb交叉反应率：氯霉素………………………………………………100%左旋霉素…………………………………………… 1.4% 庆大霉素……………………………………………<0.1% 甲砜霉素…………………………………………… 3.1% 四环素………………………………………………<0.1% 青霉素………………………………………………<0.1% 磺胺甲嘧啶…………………………………………<0.1%回收率：生乳………………………………………70~130%蜂蜜………………………………………70~130%蜂王浆……………………………………70~130%鱼、虾、蟹、乌贼、鸡及猪肉……………70~130%饲料………………………………………70~130%血清………………………………………70~130%蛋………………………………………70~130%批间、批内变异系数：CV≤10%【所需仪器和试剂】所需仪器：酶标仪、离心机、均质机、微量移液器(单道20µl-200µl、100µl-1000µl、多道250µl)所需试剂：乙酸乙酯、正己烷、0.5 N 盐酸溶液、0.5 N 氢氧化钠溶液【注意事项】1、使用前请先将试剂盒回温至室温(置于室温60分钟以上)，各溶液皆摇匀后方可使用。
氯霉素快速检测试剂条说明书20140311
氯霉素快速检测试纸条说明书
【产品简介】
本产品用于快速检测生鲜乳中的氯霉素药物残留，操作简单快速，整个检测过程只需要15分钟左右，灵敏度为0.1ppb。
【产品组成】
氯霉素快速检测试纸条（48份/盒）
【操作步骤】
1. 撕开包装，取出金标微孔。
2. 用配套的吸管吸取适量奶样，将吸管垂直在微孔上方，加入5滴奶样在微孔中，并将吸管中的剩余奶样弃去。
2分钟后用吸管吹打样品数次使微孔中的试剂和样品充分混匀，再等2分钟后，将试纸条划有箭头线的一端插入微孔，箭头方向朝下。
3. 等待8～10分钟后判读结果。
【结果判断】
阴性（—）：T线（检测线，靠近加样孔一端）显色比C线（对照线）深或一样深，表明样品中氯霉素浓度低于检出限或者无氯霉素残留。
阳性（+）：T线比C线浅，表明样品中氯霉素浓度高于检出限。
T线比C线越浅，表明样品中氯霉素浓度越高。
无效：C线未出现，可能操作不当或试剂条已失效，应用新的试纸条，参照说明说方法重新测试。
【注意事项】
试纸条一次性使用；
请勿触摸试纸条中央的白色膜面；
切勿重复使用配备的滴管，以免交叉污染；
【特异性】
本产品与喹诺酮、四环素、链霉素、磺胺类等药物无交叉反应。
【贮存条件】
4℃～30℃避光保存，切勿冷冻。
【有效期】
12个月。
【生产日期及批号】
详见包装袋。
上海圣蓝生物技术有限公司
地址：上海市沪宜公路1868弄13号102室。
水产品中氯霉素和己烯雌酚快速检测方法初探
水产品中氯霉素和己烯雌酚快速检测方法初探作者：易鸣朱志强曾智来源：《渔业致富指南》 2017年第13期在标准《NY 5070-2002 无公害食品水产品中渔药残留限量》中氯霉素和己烯雌酚因其对人体的危害已被列为不得检出的药物残留项目。
检测氯霉素和己烯雌酚的方法主要有酶联免疫法、气相法、液质联用法，其中酶联免疫法耗时最短且操作最简单，也是笔者检测工作的主要项目之一。
结合笔者的实际工作，本文详述了酶联免疫法测定水产品中氯霉素和己烯雌酚含量的原理、方法和注意事项。
一、材料和方法１. 氯霉素和己烯雌酚氯霉素属抑菌性广谱抗生素，能对多种细菌微生物产生作用，常用于对水生动物各种传染病的治疗，曾在水产养殖业中得到广泛应用，同时也带来了水产品中氯霉素残留的严重问题。
因其会引起人类的再生障碍性贫血、新生儿灰婴综合症等严重毒副作用，作为渔药已禁用。
己烯雌酚为人工合成的非甾体雌激素，对水生动物有提高繁育率等作用。
但人食用了残留有己烯雌酚的水产品后会造成体内激素失调，对人体健康产生危害，作为渔药也已禁用。
因此对水产品中氯霉素和己烯雌酚的检测对于食品安全有重要意义。
2. 酶联免疫法1971年瑞典学者Engvail和Perlmann，荷兰学者Van Weerman和Schuurs分别报道将免疫技术发展为检测体液中微量物质的固相免疫测定方法，即酶联免疫吸附测定法（Enzyme-Linked ImmunoSorbentAssay，ELISA）。
它的中心原理就是让抗体与酶复合物结合，然后通过显色来检测。
具体步骤是使抗原或抗体结合到某种固相载体表面，然后与某种酶连接成酶标抗原或抗体，这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性，又保留酶的活性。
在测定时，把受检标本（测定其中的抗体或抗原）和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。
用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开，最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。
氯霉素ELISA检测试剂盒说明书模板
氯霉素( Chloramphenicol) ELISA检测试剂盒说明书一、概要氯霉素( chloramphenicol, CAP) 是应用广泛的抗菌素, 曾对畜禽疾病控制和治疗起到了重要作用。
但由于氯霉素存在严重的副作用, 能引起人的再生障碍性贫血, 粒细胞缺乏症等疾病, 欧美等发达国家已相继禁止或严格禁止使用。
本试剂盒是应用ELISA技术研发的新一代药物残留检测产品, 能最大限度地减少操作误差和工作强度。
操作时间仅需1.5小时。
二、试验原理本试剂盒采用间接竞争ELISA 方法, 在酶标板微孔条上预包被偶联抗原, 样本中残留的氯霉素和微孔条上预包被的偶联抗原竞争抗氯霉素抗体, 加入酶标二抗后, 用TMB底物显色, 样本吸光值与其残留物氯霉素的含量成负相关, 与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数, 即可得出样品中氯霉素的含量。
三、适用范围可定性、定量检测动物组织( 肌肉、肝脏等) 、尿液、血清、肠衣、牛奶、奶粉等样本中氯霉素的残留量。
四、交叉反应率氯霉素……………………………………100%;琥珀氯霉素…………………………………92%;氯霉素-葡萄糖苷酸………………………57%。
五、使用单位需自备的设备及试剂设备:┅┅微孔板酶标仪450nm/630nm┅┅旋转蒸发仪/氮气吹干装置┅┅均质器┅┅振荡器┅┅涡旋仪┅┅离心机┅┅天平: 感量0.01g┅┅刻度移液管: 10ml┅┅洗耳球┅┅容量瓶: 100ml、500ml┅┅玻璃试管: 10ml┅┅聚苯乙烯离心管: 10ml、15ml、50ml┅┅微量移液器: 单道20ml～200ml、100ml～1000ml多道250ml试剂:┅┅乙酸乙酯( 分析纯)┅┅乙腈( 分析纯)┅┅正己烷( 分析纯)┅┅二水合亚硝基铁氰化钠( 分析纯) ( 供奶样用)┅┅七水合硫酸锌( 分析纯) ( 供奶样用)┅┅葡萄糖苷酸酶(Merck,Art.No.4114)( 供尿样本用) ┅┅醋酸钠( 分析纯) ( 供尿样本用)┅┅肝素钠( 分析纯) ( 供血样本用)┅┅醋酸( 分析纯) ( 供尿样本用) ----去离子水六、提供的材料与试剂1、96孔酶标板×1块( 包被有偶联抗原)2、标准液×6瓶: ( 2ml/瓶)0ppb,0.025ppb,0.075ppb,0.225ppb, 0.675p p b,2.025p p b 3、高浓度标准品: ( 2ml/瓶) 100ppb4、酶标二抗…………………………7m l5、抗体工作液…………………………7m l6、底物液A 液…………………………7m l7、底物液B 液…………………………… 7ml8、终止液……………………………7ml9、20×浓缩洗涤液………………………40ml 10、2×浓缩复溶液………………50m l 七、溶液的配制配液1: C液( 供奶样专用)0.36M 二水合亚硝基铁氰化钠( Na2Fe(CN)5·NO·2H2O) 溶液称取10.7g二水合亚硝基铁氰化钠加去离子水溶解定容至100ml。
美正氯霉素试条标准
美正氯霉素试条标准美正氯霉素试条是一种用于快速测定猪肉、鸡肉和牛肉等食品中氯霉素的一种试剂盒。
氯霉素是一种广泛应用于动物饲料中的抗生素，但是其使用存在一定的风险。
有机会造成人类食品中的残留物质，对人体健康产生危害。
因此，对于含氯霉素的食品进行准确、快速的检测就显得尤为重要。
本文将从美正氯霉素试条的试验原理、操作流程、结果解析等方面进行详细介绍，以帮助用户更好地了解这种试剂盒。
一、试验原理美正氯霉素试条采用免疫层析法，即将特异性单克隆抗体与金标记抗体等共同沉淀在膜上，组成成熟的免疫双抗体复合物。
当待检样品中存在氯霉素时，会和被固定在膜上单克隆抗体结合，形成一个抗原和抗体的复合物。
紧接着，标记抗体会再次结合抗原上未覆盖的表面区域，同时固定于试纸膜上。
经过一定的阴影反应，会在试纸膜上呈现出阳性条纹。
如果待测样品中没有氯霉素，那么标记抗体不会和试纸上的单克隆抗体结合，因此没有阳性条纹出现。
二、操作流程1. 取一只新的吸附板，取出所需的试条。
推开瓶盖，将试条从瓶中取出并快速用力夹紧，以免其遭到外界污染。
2. 将待检样品从冰箱中取出，混合样品使之达到均匀状态，并采用专用的万能管将其吸取至“S”标记线处。
若样品较浑浊、黏稠、含有大量沉淀物，则需先过滤。
3. 将吸取的样品加到试条的样品孔中，呈90度方向插入吸条孔中，插入后按照提示时间观察试纸浸入液反应结果，并记录相应的反应时间。
4. 观察试条的结果，在试条的控制线上无论是否被染色，都说明试剂盒操作没问题。
如果样品上出现了阴性或阳性条纹，那么相应的检测结果就应该依据试条的说明手册进行解析和判断。
三、结果解析1. 对于“无反应”或“仪器未测到”的样品，说明该样本中未检测到氯霉素。
2. 对于“仪器已测到”但“样品为阴性”，说明该样本中氯霉素的浓度低于0.3ug/kg。
3. 对于出现一条浓淡不一的颜色线，表示样品中存在氯霉素，大小意味着该食品样品中氯霉素的检测值。
4. 对于有时在样品孔旁的微型孔上出现的颜色条，称为“重复线”，是检测试验效果的保证。
氯霉素(CAP)快速检测试剂盒
氯霉素氯霉素（（CAP CAP））酶联免疫酶联免疫分析分析分析（（ELISA ）试剂试剂盒使用说明书盒使用说明书盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。
1 使用目的使用目的：：本试剂盒用于水产、鱼、虾和肉类组织（如鸡、牛肉和猪肉）中氯霉素（CAP ）残留的定量检测。
2 实验原理本试剂盒采用竞争ELISA 方法，在微孔板包被有氯霉素（CAP ）偶联抗原，加入氯霉素（CAP ）标准品或样品，游离氯霉素（CAP ）与微孔条上预包被的氯霉素（CAP ）偶联抗原互相竞争抗氯霉素（CAP ）抗体酶标记物，用TMB 底物显色，加入终止液后颜色由蓝色变为黄色，用酶标仪在450nm 波长下进行检测，吸光值与样品中氯霉素（CAP ）含量成反比，通过标准曲线计算样品中氯霉素（CAP ）的含量。
3 试剂盒组成3.1 预包被的氯霉素（CAP ）偶联抗原的可拆酶标板：1块（12孔×8条）。
3.2 氯霉素（CAP ）标准品：6瓶（1ml/瓶），含量分别是：0ng/ml, 0.025ng/ml,0.1ng/ml,0.25ng/ml,1ng/ml,4ng/ml3.3抗氯霉素（CAP ）抗体酶结合物：1瓶（6ml ）。
3.4显色液A ：1瓶（6ml ）。
3.5显色液B ：1瓶（6ml ）。
3.6终止液：1瓶（6ml ），2M 硫酸。
3.7样本稀释液：1瓶（10×, 6ml ），用于样品稀释用。
3.8浓缩洗涤液：1瓶（20×，20ml ），用于洗板。
3.9说明书一份。
4 需要而未提供的材料4.1 设备4.1.1波长450nm 酶标仪。
4.1.2粉碎机。
4.1.3量筒。
4.1.4振荡器。
4.1.5漏斗。
4.1.6Whatman No 1或相当的滤纸。
4.1.7微量移液器。
4.2 试剂4.2.1去离子水或蒸馏水。
4.2.2 甲醇。
5 贮存5.1 试剂盒贮存于2~8℃，切勿冷冻5.2 未用完的微孔板应该密封干燥保存6 注意事项6.1 使用试剂盒前请仔细阅读说明书。
氯霉素免疫胶体金速测盒
使用说明书 宁波美成生物科技有限公司
撕开氯霉素免疫胶体金快速检测试剂条包装，取出金标微孔。（实验 环境的温度必须20度以上。冷冻过的原奶，明显出现颗粒的，容易导 致跑板不完全，此时必须使用加热器或者离心取中间层样本进行检测） 用移液枪取0.2ml生乳金标微孔中，2分钟后用滴管吹打生乳，使微孔 中的金和生乳充分混匀，（必须使孔中红色物质充分溶解，一般为2 分钟，不充分溶解会使检测结果显示假阳性，吹打不 少于10下），将试剂条箭头指向的一端插到微孔中。 8-10分钟后判读结果
试剂条一次性使用
不要使用过期试剂条，废弃物应妥善处理 请勿触摸试剂条中央的白色膜面
切勿重复使用配备的滴管，以免交叉污染
切勿食用配备的试剂 若需直接检测标准品，我方可提供配置液 试验遇到的任何问题，请与供应商联系
氯霉素ELISA快速检测试剂盒
氯霉素ELISA快速检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用产品编号：CSB-E12037f检测范围：0.312 ng/ml-10 ng/ml最低检测限：0.2 ng/ml特异性：本试剂盒可用于快速检测氯霉素。
有效期：6个月预期应用：ELISA法定量测定动物组织样品（虾、鱼及肉类）、饲料、蛋、血清、血浆、尿液、蜂蜜、牛奶等样品中的氯霉素残留。
说明1．试剂盒保存：-20℃（较长时间不用时）；2-8℃（频繁使用时）。
2．浓洗涤液低温保存会有盐析出，稀释时可在水浴中加温助溶。
3．中、英文说明书可能会有不一致之处，请以英文说明书为准。
4．刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质，此为正常现象，不会对实验结果造成任何影响。
实验原理本试剂盒采用酶联免疫间接竞争法检测氯霉素。
微孔板上包被有氯霉素偶联物。
加入氯霉素抗体和氯霉素标准品或样品，游离氯霉素与微量反应板上的氯霉素结合物竞争结合抗氯霉素抗体，没有结合的抗体被洗去，再向微孔中加辣根过氧化物酶标记二抗，与结合在反应板上的抗体作用一定时间，洗去多余的辣根过氧化物酶标记二抗。
再向反应孔中加入相应反应底物TMB，作用一定时间后，结合的酶结合物将TMB转化为蓝色，转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的氯霉素呈负相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制1.已包被氯霉素偶联物的酶联板(Assay plate )：一块（96孔）。
2.标准品（Standard）：6×250ul/瓶。
3.样品稀释液(Sample Diluent)：1×20ml/瓶。
4.辣根过氧化物酶标记二抗稀释液（HRP-anti-antibody Diluent）：1×20ml/瓶。
5.氯霉素单克隆抗体：1×60μl/瓶（1：100）6.辣根过氧化物酶标记二抗（HRP-anti-antibody ）：1×120μl/瓶（1：100）7.底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
氯霉素ELISA检测试剂盒的研制及其性能测试
浓度的 ＣＡＰ 标准溶液， 设空白样品为对照。与 １０
ｍＬ 蒸馏水充分混合， 取 ２．５ ｍＬ 转移至各玻璃试
管中。每管加入 ５ ｍＬ 乙酸乙酯， 旋涡振荡 ２ ｍｉｎ，
２ ０００ ｒ／ｍｉｎ 离心 ５ ｍｉｎ， 转移 ２ ｍＬ 上层乙酸乙酯
至 试 管 中 ， ４０ ℃氮 流 吹 干 ， 残 留 物 中 加 入 １ ｍＬ
摘要 采用包被多克隆抗体直接竞争 ＥＬＩＳＡ 法建立了氯霉素残留的酶联免疫分析方法， 并构建了氯霉素残留 ＥＬＩＳＡ 检测试剂盒。研究结果表明， 所选用的抗体对氯霉素亲合力强、特异性高， 试剂盒对氯霉素残留检测的线 性范围为 ０．２４￣２５０ ｎｇ／ｍＬ， 检测限（ ＩＣ１０） ０．４７ ｎｇ／ｍＬ， 样品的加标回收率 ７０％￣１３０％。试剂盒性能测试结果表明， 其准确性和重现性较好， 保存期至少 ６ 个月， 可用于虾肉、鸡肉、蜂蜜、鲜奶样品中氯霉素残留的批量快速、廉价 检测。
转移 ２ ｍＬ 上层乙酸乙酯至另一洁净试管中， ４０ ℃
氮流吹干， 残留物溶于 ０．５ ｍＬ 正己烷中， 加入 １
ｍＬ ＰＢＳ 稀释液， 旋涡振荡 １ ｍｉｎ， ２ ０００ ｒ／ｍｉｎ 离心
一种化妆品中氯霉素的检测试剂盒及检测方法[发明专利]
![一种化妆品中氯霉素的检测试剂盒及检测方法[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/01e0819e168884868662d6e4.png)
专利名称：一种化妆品中氯霉素的检测试剂盒及检测方法专利类型：发明专利
发明人：郭狄
申请号：CN201410482560.5
申请日：20140920
公开号：CN104515834A
公开日：
20150415
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明涉及一种化妆品中氯霉素的检测试剂盒及检测方法，该检测试剂盒包括：分析纯、提取液、双蒸水、缓冲液、试剂板。
采用该检测试剂盒对化妆品中氯霉素进行检测的方法为，先将样品进行均质，提取及离心，制得备用底层溶液，再将备用底层溶液加至样品待测管中，并滴加分析纯离心，最后取离心后的上层液加至别一试管中，旋转蒸干，并采用缓冲液洗去残留物，制得净化后的待测样品溶液；最后将净化后的待测样品溶液，滴于试剂板的加样孔中，进行检测，通过观察检测线与控制线颜色来判断待测样品氯霉素为阳性或阴性。
该检测方法操作简单，检测结果准确，不需要特殊设备和仪器，尤其适用于化妆品监管部门对化妆品中氯霉素的随机大样本抽查。
申请人：中山鼎晟生物科技有限公司
地址：528437 广东省中山市火炬开发区健康路1号一楼102室
国籍：CN
代理机构：中山市铭洋专利商标事务所(普通合伙)
代理人：邹常友
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氯霉素试剂盒 软文
关于抗生素的检测自央视近日曝光肯德基的供货商山东六和集团部分养殖农户存在违规喂养抗生素、鸡在出栏前仍违规喂药、监管部门检验检疫形同虚设等问题后，12月25日，农业部总经济师、新闻发言人在国新办举行的发布会上透露，与速生鸡事件有关的养鸡企业和加工企业已经关闭，部分大型快餐业也受到了不小的牵连。
一时之间，速成鸡被推上了风口浪尖。
那么，为什么人们如此惶恐呢？有没有什么办法可以检测呢？抗生素以前被称为抗菌素，事实上它不仅能杀灭细菌而且对霉菌、支原体、衣原体等其它致病微生物也有良好的抑制和杀灭作用，近年来通常将抗菌素改称为抗生素。
抗生素可以是某些微生物生长繁殖过程中产生的一种物质，用于治病的抗生素除由此直接提取外；还有完全用人工合成或部分人工合成的。
通俗地讲，抗生素就是用于治疗各种细菌感染或抑制致病微生物感染的药物。
但是过量使用会抑制体内的有益菌，使肠道菌群失衡，导致疾病的引起。
今天主要为大家介绍的是氯霉素：氯霉素（Chloramphenicol,CAP）曾是应用广泛的抗菌素，但由于其存在严重的副作用，能引起人的再生障碍性贫血，粒细胞缺乏症等疾病，欧美等发达国家已相继禁止或严格禁止使用。
有没有很好的检测方法呢？华安麦科推出的氯霉素检测试剂盒采用直接竞争ELISA方法，在酶标板微孔条上预包被氯霉素抗体，样品中残留的氯霉素和酶标氯霉素抗原竞争微孔条上预包被的抗体，经TMB底物显色，样品吸光值与其残留物氯霉素的含量成负相关，与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数，即可得出样品中氯霉素的含量。
适用范围：可定性、定量检测动物组织（含水产）、牛奶、蜂蜜、饲料、鸡蛋等样品中氯霉素的残留。
包装组成：酶标板、标准品、高浓度标准品、氯霉素酶标物、底物液A液、底物液B液、终止液、浓缩洗涤液、氯霉素浓缩样品稀释液检测步骤：1、将所需试剂从冷藏环境中取出；2、取出需要数量的微孔板；3、回温；4、编号；5、加标准品/样品；6、洗板；7、显色；8、测定；结果判定：粗略判定：用样本的平均吸光度值与标准值比较即可得出其浓度范围；而定量判定：定量分析检测方法灵敏度、准确度、精密度：试剂盒灵敏度：0.025ppb样品最低检测限：组织样品……………………………………………0.05ppb牛奶…………………………………………………0.025ppb饲料…………………………………………………0.1ppb蛋类…………………………………………………0.025ppb 蜂蜜…………………………………………………0.025ppb回收率：组织样品……………………………………………108±10% 牛奶…………………………………………………110±10% 饲料……………………………………………………90±15% 蛋类……………………………………………………95±15% 蜂蜜…………………………………………………100±15% 精密度：试剂盒的变异系数均小于10%详细信息请查看华安麦科氯霉素试剂盒说明书或电话垂询！注：华安麦科为答谢新老用户的大力支持与厚爱，在这新年来临之际，现所有抗生素产品均有促销活动，详情请与我们联系！公司信息：名称：北京华安麦科生物技术有限公司官网：地址：北京市昌平区科技园区超前路6号总机：+86-10-89710920 +86-10-60743100直播热线：+86-10-80108031手机热线：+86-152********传真：+86-10-69743002。
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酶标免疫分析定量检测氯霉素残留试剂盒。
德国R-Biopharm公司制造(中文翻译件仅供参考,以试剂盒内附的英文原件为准.)简介RIDASCREEN Chloramphenicol（产品编号R1501）竞争酶标免疫法定量测定牛奶，肉类及鸡蛋中的氯霉素残留。
试剂盒中包括了所有检测用的试剂。
该试剂盒有96个试验孔包括标准试验，如果进行定量分析，必须有微孔板酶标仪。
检测下限:尿液中50ppt虾及鱼肉50ppt牛奶中：150 ppt肉类中: 100ppt1. 用途RIDASCREEN chloramphenicol竞争酶标免疫法定量测定牛奶，尿液，虾肉，鱼肉，肉类及鸡蛋中的氯霉素残留。
2.概要（略）3.测定原理测定的基础是抗原抗体反应。
微孔板包被有针对兔IgG（氯霉素抗体）的羊抗体。
加入氯霉素抗体，氯霉素酶标记物，标准或样品溶液。
游离氯霉素与氯霉素酶标记物竞争氯霉素抗体，同时氯霉素抗体与羊抗体连接。
没有连接的酶标记物在洗涤步骤中被除去。
将酶基质（过氧化尿素）和发色剂（四甲基联苯胺）加入到孔中并且孵育。
结合的酶标记物将无色的发色剂转化为蓝色的产物。
加入反应停止液后使颜色由蓝转变为黄色。
在450nm处测量（选择参比波长≥600nm）。
吸光度值与样品中的氯霉素浓度成反比。
4.提供的试剂每一个盒中的试剂足够进行96个测量（包括标准分析孔），盒中的材料如下：1 X 96孔板（12条X 8孔）包被有抗兔IgG的羊抗体6 X 浓缩标准液, 300ul/瓶, 为氯霉素溶液0ppt，500ppt, 1500ppt, 4500ppt, 13500ppt, 40500ppt1 X 过氧化物酶标记的氯霉素浓缩液…..……..红色帽1 X 氯霉素抗体浓缩液…………………………..黑色帽1 X 基质(7ml);含有过氧化尿素…….……….…..绿色帽1 X 发色剂(7ml);四甲基联苯胺…….….…….….蓝色帽1 X 反应停止液(14ml)1M硫酸....….……….…..黄色帽1 X 缓冲液1(100ml)用于标准，酶标记物，抗体，样品及缓冲液2稀释用1X 缓冲液2（1ml），测定牛奶样品时的标准稀释用缓冲液5.需要的材料但盒中不提供设备----微孔板酶标仪(450nm)----离心机----旋转蒸发器----振荡器----磁力搅拌器----刻度移液管----50ul, 100ul, 450ul微量加样器试剂----醋酸乙酯----乙腈----正己烷（或正庚烷）----异辛烷----三氯甲烷（氯仿）----葡萄糖苷酸酶glucuronidase/arysulfatasesolution（Merck, Art.No.4114）----Carrez I：0. 36M铁氰化钾（II）X 3 H2O----CarrezII：1. 04 M 硫酸锌X7 H2O筛选肉样品用试剂PBS缓冲液：(0.55g NaH2PO4 X H2O; 2.85g Na2HPO4 X 2H2O +9g NaCl 加入蒸流水至1000ml）；pH7.26. 操作者应该注意之事项----标准液含有氯霉素，应特别小心----反应停止液为1M硫酸,避免接触皮肤----不要使用过了有效日期的试剂盒, 稀释或搀杂使用会引起灵敏度的降低.----不要交换使用不同批号的盒中试剂.7. 储存条件----保存试剂盒于2-8o C.不要冷冻----无色的发色剂对光敏感,因此要避免直接暴露在光线下----将不用的微孔板放进原锡箔袋中并且与提供的干燥剂一起重新密封.8. 试剂变质的迹象发色试剂有任何颜色表明发色剂变质,应当弃之.0标准的吸光度值小于0.6个单位(A450nm<0.6)时,表示试剂可能变质.9. 样品处理(样品应当在暗处及冷藏保存)9.1 牛奶样-----10o C离心10分钟3500 g, 吸除上层的脂肪----5ml去除脂肪奶加入150ul Carrez I出现沉淀，短暂振荡，然后加入150ul Carrez II混合。
----15 o C离心10分钟3500 g----移取上层液----用buffer 1稀释液以1：2稀释上层液（1份上层液+1份buffer 1），----取50ul进行测定注意：如果离心后仍然浑浊，再重复沉淀过程9. 2. 组织样品（肉及肾脏）9．2．1定量方法----用均质器均质肉或肾脏（去除脂肪）----取5g 均质过的样品与20ml 乙腈水溶液(84+16)抽提10分钟----15 o C离心10分钟3000 g----3ml上清液与3ml蒸流水混合,加入4.5ml醋酸乙酯抽提----15 0C离心10分钟3000 g----将醋酸乙酯层转移至另一瓶中完全干燥----用1. 5ml缓冲液1溶解残留物，加入1. 5ml正己烷（或正庚烷）脱脂----完全除去上层的正己烷----取50ul下层的水相进行分析.9．2．2 筛选用简单处理方法---- 加入20ml PBS缓冲液pH7. 2 到5g样品中（去掉脂肪的肉或肾脏）。
----用均质器均质30秒，再振荡10分钟----15 o C离心15分钟3000 g----0. 2ml上清液与0. 2ml缓冲液1混合----取50ul稀释液进行分析分析9.3.蛋----称5g均质过的样品于试管中（用均质器均质蛋黄或全蛋）----用9. 2. 1方法处理9.4 尿液----转移1ml 尿液到玻璃试管中,加0. 5ml 100mM醋酸钠缓冲液pH4.8 混合----加20ul葡萄糖苷酸酶glucuronidase/arysulfatasesolution（Merck, Art.No.4114）到稀释的尿液中----在37 o C水解至少2小时(或过夜)----冷却溶液到室温并且加入2ml醋酸乙酯混合1 分钟----室温离心10分钟3000 g----取出1ml 上层液体(相当于0.5ml 尿样)在氮气流下干燥----用0.5ml 样品稀释缓冲液溶解干燥的残留物----取50ul 进行测定稀释倍数为1; 检测下限为50ng/L(50ppt)9.5虾或鱼肉----粉碎100g 虾或鱼肉----称3g 粉碎了的虾或鱼肉加入6ml醋酸乙酯----强烈混合10分钟(上下来回振荡)----室温离心10分钟2000g----取出2ml 上清液体(相当于1 样品)在氮气流下干燥----用1ml 异辛烷/氯仿混合物(2:3混合)溶解干燥的残留物----加入1 ml样品稀释缓冲液(缓冲液1)强烈振荡1分钟.----室温离心10分钟3000 g----取50ul上层水相进行分析稀释倍数为1; 检测下限为50ng/L(50ppt)如果在两相之间出现太多的泡沫或胶状物，难以取出足够的上清液，请将样品放在80o C水浴中约5分钟后再离心。
在样品处理过程中，鱼肉出现泡沫情况会比虾严重。
10. 酶标免疫分析程序（室温20-24 o C条件下操作）10.1 测定之前注意事项1.使用之前将所有试剂回升至室温20-24 o C.2.使用之后立即将所有试剂放回2-8 o C.3.在使用中不要让微孔干燥4.在EIA分析中的再现性,很大程度上取决于洗板的一致性,仔细按照推荐的洗板顺序操作是EIA测定程序中的要点.5.在所有恒温孵育过程中,避免光线照射,用盖子盖住微孔板.10.2 氯霉素酶标记物提供的酶标记物(盖红色帽的瓶子)为浓缩液.由于稀释的酶标记物稳定性不好,所以只复溶实际需用量的酶标记物. 在吸取浓缩液之前,要仔细地振摇以便充分混均。
用缓冲液1以1: 11的比例稀释酶标记物浓缩液(200ul酶标记物浓缩液+2.0ml缓冲液1,足够4个微孔板条32孔用)10. 3氯霉素抗体提供的氯霉素抗体(盖黑色帽的瓶子)为浓缩液.由于稀释的抗体稳定性不好,所以只复溶实际需用量的抗体. 在吸取浓缩液之前,要仔细地振摇以便充分混均。
用缓冲液1以1: 11的比例稀释抗体浓缩液(200ul 抗体浓缩液+2.0ml缓冲液1,足够4个微孔板条32孔用)10．4缓冲液2 （测定牛奶样品时用）缓冲液2（白色瓶盖）用9ml缓冲液1稀释并用前混合（甚至温热）均匀。
缓冲液 2 浑浊不影响实验结果，但应振荡混合均匀后使用。
10．5包被有抗体的微孔板条锡箔袋沿横向边压皱外沿剪开.取出需用数量的微孔板及框架, 将不用的微孔板放进原锡箔袋中并且与提供的干燥剂一起重新密封, 保存于2-8o C.不要冷冻.10.6标准浓缩液制备标准应用液：50ul标准浓缩液用450ul缓冲液1稀释并混合均匀，不要用塑料瓶而用玻璃瓶。
标准液1：50ul标准浓缩液1用450ul缓冲液1*稀释0ppt标准液2：50ul标准浓缩液2用450ul缓冲液1*稀释50ppt标准液3：50ul标准浓缩液3用450ul缓冲液1*稀释150ppt标准液4：50ul标准浓缩液4用450ul缓冲液1*稀释450ppt标准液5：50ul标准浓缩液5用450ul缓冲液1*稀释1350ppt标准液6：50ul标准浓缩液6用450ul缓冲液1*稀释4050ppt每一批实验所用的标准液应当即配即用*测定牛奶样品时，用稀释了的缓冲液210.7测定程序1.将足够标准和样品所用数量的孔条插入微孔架,标准和样品做两个平行实验，记录下标准和样品的位置。
2.加入50ul 稀释了的酶标记物到微孔底部, 再加入50ul的标准或处理好的样品到各自的微孔中. 标准和样品做两个平行实验。
3.加入50ul稀释了的抗体溶液到每一个微孔底部充分混合，在室温孵育2小时，覆盖上薄膜（防止蒸发）。
4.倒出孔中的液体,将微孔架倒置在吸水纸上拍打(每行拍打3次)以保证完全除去孔中的液体. 用250ul蒸馏水充入孔中,再次倒掉微孔中液体,再重复操作两次.5．加入50ul基质和50ul发色试剂到每一微孔中, 充分混合并在室温暗处孵育30分钟.6．加入100ul反应停止液到每一微孔中.混合好在450nm处测量吸光度值以空气为空白,必须在加入停止液后60分钟内读取光度值.11. 结果所获得的标准和样品吸光度值的平均值除以第一个标准(0标准)的吸光度值再乘以100，因此0标准等于100%，吸光度值以百分比表示。
标准的吸光度值(或样品)----------------------------------x 100= %吸光度值0标准的吸光度值计算标准的值并绘成一个以氯霉素浓度(ng/kg)为半对数坐标系统的曲线图,曲线在50-1350ng/kg(ppt)范围内应当成为线性. 相对应每一个样品的浓度(ng/kg)可以从校正曲线上读出.RIDASCREEN 氯霉素标准曲线见英文原版说明书请注意为了获得样品中的氯霉素的实际浓度(ng/kg),从校正曲线上读出的浓度值必须乘以相对应的稀释系数. 当样品处理过程是按指示进行的,稀释系数如下;牛奶样品（用Carrez 一次沉淀） 2. 1（用Carrez 二次沉淀） 2. 2肉类样品（按（9. 2. 1）方法处理） 2（按（9. 2. 2）方法处理）10鸡蛋 2尿液 1虾或鱼肉 112. 灵敏度RIDASCREEN氯霉素试剂盒的平均检测下限约为50ng/kg. 根据样品处理方法，尿液，虾或鱼肉的检测下限为50ppt，牛奶的检测下限为150ng/kg（150ppt）, 对肉类及蛋中氯霉素的检测下限为100ppt。