实验培养基的配制详解演示文稿

3、消毒与灭菌的区别
（1）消毒（如巴氏消毒法62℃，30min、酒精 擦拭等）仅杀死活的微生物，不能杀死芽孢。
（2）灭菌（高压灭菌1.05kg/cm2、121℃、1530min；灼烧灭菌、干热灭菌等）能杀死所有微 生物及其芽孢。
微生物重点实验2 ——微生物的培养
•掌握划线法接种方法与作用
补充：菌落
实验培养基的配制详解演示文 稿
优选实验培养基的配制
1、计算 2、称量
牛肉膏 蛋白胨
NaCl H2O 琼脂
5.0g 10.0g 5.0g 1000mL 2.0g
3、熔化 4、调节pH
5、分装
6、灭菌
灭菌——高压灭菌
1.05kg/cm2、121℃，15—30min
灭菌锅
高压灭菌作用：杀死所有活的微生物及芽孢
1.定义： 单个 菌体
菌落是由单个细胞分裂形成的种群
固体培养基上 子细胞群体
大量繁殖
2.特征：大小、形状、光泽度、 颜色、硬度、透明度等。
3.功能：鉴定菌种的重要依据
常用工具图示
接种环
玻璃刮铲
微生物（如大肠杆菌）的培养：
㈠制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 1.计算 2.称量 3.熔化 4.调节pH 5.分装 6.灭菌 7.恒温培养
（补充：倒“平板”）
超 净 工 作 台
约50℃
倒平板
灼烧灭菌， 防止瓶口的微生物污染培养基
防止培养皿盖Leabharlann Baidu的水珠滴落污染培养基
7、恒温培养（恒温培养箱）
计算 称量
培养基的配制
加热熔化琼 脂（搅拌）
熔化
定容 调节PH至
7.2-7.4
调节pH
分装
恒温培养
灭菌
倒入三角烧瓶，与 其他器具一起放入
灭菌锅 高压灭菌
滕黄八叠球菌菌落 菌落黄色，圆形、边缘 光滑
为什么在操作的第一步以及每次划线之前都 要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要 灼烧接种环吗？为什么？
操作的第一步灼烧接种环是为了防止接种环上 的微生物污染培养物
杀死残留的菌种，保证使下一次划线时，菌种 直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次 数的增加，使每次划线时接种物逐渐稀释，培 养后得到单个菌落。
二.大肠杆菌的培养：
㈠制备牛肉膏蛋白胨固体培养基
㈡培养大肠杆菌： 1.接种： （超净工作台上、酒精灯火焰旁进行）
划线法 接种环
冷却后刮取菌苔
菌种 划线法接种
划线法接种： 使接种物逐渐 稀释，培养后 出现单个菌落
大肠杆菌菌落 菌落灰白色，圆形，透明或半透明
枯草杆菌菌落 菌落灰白色，较 大，边缘比较粗 糙
（一般需要作无菌检查）
核心：保证无菌操作
超净工作台、酒精灯火焰旁操作
超净工作台
1、如何检验培养基是无菌的？
将未接种的培养基放在恒温培养箱中适宜条 件下培养2-3d，如果无菌落产生，则培养基 是无菌的。
2、常用灭菌方法有哪些？
高压（蒸气）灭菌 用于培养基、培养皿、锥形瓶等
灼烧灭菌
用于接种环等金属器具
避免接种环上的细菌污染环境和感染操作者。