实验培养基的配制详解演示文稿
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培养基的配制.ppt
平板培养基的制作过程
1：将装在锥形瓶额琼脂培养基融化； 2：待冷至50度左右倾入无菌培养皿中； 3：在酒精灯火焰旁，左手拿培养皿，右手拿锥 形瓶的底部，左手同时用小指将棉塞打开，灼 烧瓶口； 4：用左手大拇指将培养皿打开一缝至瓶口刚好 伸入，倾入10-12ml培养基，迅速盖好皿盖； 5：置于桌上，轻轻旋转平皿，使培养基均匀分 布在整个平皿中，冷凝后即成平板。
培养基的配制
第四组 何毅峰、软胜海Fra bibliotek液体培养基的简单步骤
1、配料：蛋白胨，牛肉膏，氯化钠 量取自来水 2、加热溶解：将已称量好的上述固体配料置于烧杯 中，加适量水，电炉加热使各成份完全溶解，边加 边搅拌, 加水补足 3、过滤：如果培养液有沉渣或浑浊，则用多层纱布 过滤，使培养基澄清透明。 4、调PH值：用精密PH试纸或酸度计测试培养液PH值， 并用1mol/L的NaOH溶液校正至PH7.6 5、分装: 取上述已溶解的液体培养基50mL，分装至10 个试管中，5mL/支。 6、包扎：塞上合适的试管塞，用两层报纸包扎。
倾注分离法
1：通、过不断的稀释手段使被分离的样品分散到最低限度， 然后吸取一定量注入平板； 2：这样分散的细菌就被固定在原处而形成菌落； 3：通常将含菌材料（已制成悬浮液）作一系列稀释（ 10 -1 10 -2 、 10 -3 ……）吸各种稀释度的含菌液 1ml 分别置于培 养皿中； 4：将融化并冷却到 45 ℃左右的琼脂培养基 15ml 倒入平皿 内，迅速将平皿左右来回摇动，使菌在培养基中分布均匀； 5：待凝，置于 37 ℃（细菌）恒温培养 24-48 小时，在固体 平板上即有分散的单菌落出现。
涂步分离法
1：将已熔化并冷却至约50℃(减少冷凝水)的琼脂培养基, 先 倒入无菌培养皿中, 制成无菌平板； 2：待充分冷却凝固后,将一定量(约0.1 ml)的某一稀释度的样 品悬液滴加在平板表面； 3：再用三角形无菌玻璃涂棒涂布,使菌液均匀分散在整个平 板表面, 倒置温箱培养后挑取单个菌落。
《培养基及其配制》课件
2 选择性培养基
添加抗生素或抑菌剂，选择性培养特定的微生。
3 固体培养基
用于在培养皿中培养微生物，便于观察和分离。
培养基的消毒方法
1 高温灭菌
2 化学消毒
通过高温蒸汽或干热处理， 将细菌、病毒等微生物杀 灭。
使用化学物质如酒精、次 氯酸钠等消毒培养基。
3 辐射消毒
利用紫外线或电离辐射对 培养基进行消毒处理。
3 研究工具
培养基在微生物学和细胞 学等领域中广泛应用，是 研究的重要工具。
培养基的配制方法
1
添加营养物质
2
根据细胞需要，在基质中添加有机或无
机营养物质。
3
消毒处理
4
通过高温、辐射等方法对培养基进行消 毒，以杀灭潜在的微生物。
选择基质
根据实验需求选择适当的基质作为培养 基的基础配方。
调整pH值
使用酸碱溶液调整培养基的pH值。
培养基的主要组分及其功能
营养物质
提供细胞生长所需的碳水化合物、氮源和无机盐 等。
生长因子
促进细胞分裂和增殖，维持细胞的正常功能。
胺基酸
作为蛋白质的组成单元，参与细胞代谢。
染色剂
用于观察和分析细胞的形态和结构。
常用培养基类型及适用领域
1 富养基
提供丰富的营养物质和生长因子，适用于细胞的扩增和生物制剂的生产。
《培养基及其配制》PPT 课件
欢迎来到《培养基及其配制》的PPT课件！本课件将带你深入了解培养基的定 义、配制方法以及常用类型和适用领域。让我们开始学习吧！
培养基的定义和作用
1 定义明确
了解培养基的具体定义和 主要作用，为后续内容提 供基础。
2 支撑细胞生长
培养基为细胞提供营养和 环境条件，促进其正常生 长和分裂。
添加抗生素或抑菌剂，选择性培养特定的微生。
3 固体培养基
用于在培养皿中培养微生物，便于观察和分离。
培养基的消毒方法
1 高温灭菌
2 化学消毒
通过高温蒸汽或干热处理， 将细菌、病毒等微生物杀 灭。
使用化学物质如酒精、次 氯酸钠等消毒培养基。
3 辐射消毒
利用紫外线或电离辐射对 培养基进行消毒处理。
3 研究工具
培养基在微生物学和细胞 学等领域中广泛应用，是 研究的重要工具。
培养基的配制方法
1
添加营养物质
2
根据细胞需要，在基质中添加有机或无
机营养物质。
3
消毒处理
4
通过高温、辐射等方法对培养基进行消 毒，以杀灭潜在的微生物。
选择基质
根据实验需求选择适当的基质作为培养 基的基础配方。
调整pH值
使用酸碱溶液调整培养基的pH值。
培养基的主要组分及其功能
营养物质
提供细胞生长所需的碳水化合物、氮源和无机盐 等。
生长因子
促进细胞分裂和增殖，维持细胞的正常功能。
胺基酸
作为蛋白质的组成单元，参与细胞代谢。
染色剂
用于观察和分析细胞的形态和结构。
常用培养基类型及适用领域
1 富养基
提供丰富的营养物质和生长因子，适用于细胞的扩增和生物制剂的生产。
《培养基及其配制》PPT 课件
欢迎来到《培养基及其配制》的PPT课件！本课件将带你深入了解培养基的定 义、配制方法以及常用类型和适用领域。让我们开始学习吧！
培养基的定义和作用
1 定义明确
了解培养基的具体定义和 主要作用，为后续内容提 供基础。
2 支撑细胞生长
培养基为细胞提供营养和 环境条件，促进其正常生 长和分裂。
《培养基的制备》课件
在制备培养基时，需要将 培养基中的气泡排除，以 确保培养基的质量。
3 除菌
必须对培养基进行严格的 除菌处理，以避免外源性 的微生物污染。
6. 结语
培养基的重要性
培养基是细胞培养和微生物研究的基础，对于科学 研究和产业应用具有重要意义。
经验总结
制备培养基时要注意操作规范，保持实验环境的清 洁，确保培养基的质量。
4. 培养基的贮存
1
贮存时间
不同类型的培养基有不同的贮存期限，要根据需要及时更新。
2
贮存温度
培养基应该在指定的温度下储存，避免因温度过高或过低而导致变质。
3
细菌培养
使用培养基时，必须遵循无菌操作，确保细菌的纯度和培养环境的卫生。
5. 培养基的常见问题
1 氧化
2 消泡
培养基暴露在空气中会发 生氧化反应，影响培养效 果，需在贮存时防止氧化。
《培养基的制备》PPT课 件
这是一个关于培养基制备的PPT课件，课件内容包括前言、培养基的组成、培 养基的配制、培养基的贮存、培养基的常见问题以及结语。
1. 前言
培养基是一种用于细菌、真菌和细胞培养的人工培养环境。它提供了细胞生长所需的营养物质和调节因子。
2. 培养基的组成
基Hale Waihona Puke 成分包括碳源、氮源、矿物质和生长因子等。
辅助成分
提供额外的营养物质和调节剂，如洋菜、琼脂和血清等。
酸碱度调节剂
控制培养基的酸碱度，维持适宜的生长环境。
3. 培养基的配制
1
操作步骤
按照特定的步骤和顺序，将不同成分加
器材准备
2
入适量的溶液中，并进行搅拌和消毒处 理。
准备好所需的培养皿、量杯、瓶子、搅
培养基及其配制PPT课件
氯是光合作用水光解的活化剂 微量元素的主要作用是作为酶的辅助因子或激活剂参与代谢
的调节。
第11页，共50页。
缺铁症状：叶面呈绿色网纹状失绿。随病势发展，叶片 失绿程度加重，出现整叶变为白色，叶缘枯焦，引起落 叶。严重缺铁时，新梢顶端枯死。
桃 树
第12页，共50页。
缺铜症状：
新梢顶端叶片的叶尖失绿 变黄，叶片出现褐色斑点至扩 大变成深褐色，引起落叶。
◆对生长，分化等有很好的促进作用 ◆主要分为脂溶性维生素和水溶性维生素
◆常用维生素有VB1和VB6
第18页，共50页。
5、肌醇
◆环己六醇
◆细胞壁的构建材料 ◆参与碳水化合物、磷脂代谢及离子平衡等生理 活动 ◆促进活性物质发挥作用
第19页，共50页。
6、氨基酸 ◆蛋白质的组成成分 ◆有机氮源
◆可直接被细胞吸收利用 ◆培养基中常用的是甘氨酸
❖ 所谓母液是欲配制液的浓缩液。
❖ 意义: ①保证各物质成分的准确性 ②配制时的快速移取 ③便于低温保藏。
第33页，共50页。
母液的配制方法： 单配法：将培养基配方中的各种成分分别配成一定浓
度的母液。一般用mg/ml 。
混配法：将几类营养成分按配方中的用量扩大一定倍
数称量，分别溶解后再混合成母液。
第42页，共50页。
化合物名称
NH4NO3 KNO3 (NH4)2SO4 NaNO3 KCl CaCl2•2 H2O
Ca(NO3)2•4H2O MgSO4•7H2O Na2SO4 KH2PO4 K2HPO4 FeSO4•7 H2O Na2-EDTA Na-Fe-EDTA FeCl3•6H2O Fe(SO4) 3 MnSO4•4 H2O ZnSO4•7 H2O Zn (螯合体) NiCl2•6H2O CoCl2•6 H2O CuSO4•5H2O AlCl3 MoO3
的调节。
第11页，共50页。
缺铁症状：叶面呈绿色网纹状失绿。随病势发展，叶片 失绿程度加重，出现整叶变为白色，叶缘枯焦，引起落 叶。严重缺铁时，新梢顶端枯死。
桃 树
第12页，共50页。
缺铜症状：
新梢顶端叶片的叶尖失绿 变黄，叶片出现褐色斑点至扩 大变成深褐色，引起落叶。
◆对生长，分化等有很好的促进作用 ◆主要分为脂溶性维生素和水溶性维生素
◆常用维生素有VB1和VB6
第18页，共50页。
5、肌醇
◆环己六醇
◆细胞壁的构建材料 ◆参与碳水化合物、磷脂代谢及离子平衡等生理 活动 ◆促进活性物质发挥作用
第19页，共50页。
6、氨基酸 ◆蛋白质的组成成分 ◆有机氮源
◆可直接被细胞吸收利用 ◆培养基中常用的是甘氨酸
❖ 所谓母液是欲配制液的浓缩液。
❖ 意义: ①保证各物质成分的准确性 ②配制时的快速移取 ③便于低温保藏。
第33页，共50页。
母液的配制方法： 单配法：将培养基配方中的各种成分分别配成一定浓
度的母液。一般用mg/ml 。
混配法：将几类营养成分按配方中的用量扩大一定倍
数称量，分别溶解后再混合成母液。
第42页，共50页。
化合物名称
NH4NO3 KNO3 (NH4)2SO4 NaNO3 KCl CaCl2•2 H2O
Ca(NO3)2•4H2O MgSO4•7H2O Na2SO4 KH2PO4 K2HPO4 FeSO4•7 H2O Na2-EDTA Na-Fe-EDTA FeCl3•6H2O Fe(SO4) 3 MnSO4•4 H2O ZnSO4•7 H2O Zn (螯合体) NiCl2•6H2O CoCl2•6 H2O CuSO4•5H2O AlCl3 MoO3
实验一培养基的配制.ppt
2、pH的调节、分装、包扎、灭菌及无菌检查同牛 肉膏蛋白胨培养基的配制。 121℃灭菌20-30min。
2020/1/21
22
3、马丁氏培养基的配制
2020/1/21
23
马丁氏培养基的配制
配方：
KH2PO4 1g，MgSO4·7H2O 0.5g，蛋白胨 5g，葡萄糖 10g，琼脂 15-20g，水 1000ml，pH 自然
2020/1/21
27
各组任务
第一、二组配制牛肉膏蛋白胨培养基各400mL 第三、四组配制高氏I号培养基各500mL 第五、六组配制马丁氏培养基各400mL
水均为自来水
每组分装10支试管，其余装三角瓶，马丁氏 培养基100ml/每三角瓶。
2020/1/21
28
每组任务
1ml吸管5支，用报纸包好 试管4支，每支装4.5ml水，加塞，外加报纸 10个培养皿，用报纸包好 一个三角瓶，装99毫升的自来水，放玻璃珠，加塞，
目的：学习和掌握配制培养基的一般方 法和步骤
2020/1/21
6
二、操作步骤 1、牛肉膏蛋白胨培养基的配制
2020/1/21
7
牛肉膏蛋白胨培养基的配制
配方：
牛肉膏3g，蛋白胨10g，NaCl 5g，琼脂15-20g， 水1000ml，pH7.4-7.6。
2020/1/21
8
牛肉膏蛋白胨培养基的配制
外加报纸 刮铲一个，用报纸包好
实验一、培 养 基 的 配 制
实验一、培养基的制作 实验二、消毒灭菌（多种灭菌方法） 实验三、细菌观察（一） 实验四、细菌观察（二） 实验五、放线菌观察（5406、紫、灰、诺卡氏等） 实验六、酵母菌观察和血球板计数 实验七、霉菌观察（青、曲、根、木等）
2020/1/21
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3、马丁氏培养基的配制
2020/1/21
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马丁氏培养基的配制
配方：
KH2PO4 1g，MgSO4·7H2O 0.5g，蛋白胨 5g，葡萄糖 10g，琼脂 15-20g，水 1000ml，pH 自然
2020/1/21
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各组任务
第一、二组配制牛肉膏蛋白胨培养基各400mL 第三、四组配制高氏I号培养基各500mL 第五、六组配制马丁氏培养基各400mL
水均为自来水
每组分装10支试管，其余装三角瓶，马丁氏 培养基100ml/每三角瓶。
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每组任务
1ml吸管5支，用报纸包好 试管4支，每支装4.5ml水，加塞，外加报纸 10个培养皿，用报纸包好 一个三角瓶，装99毫升的自来水，放玻璃珠，加塞，
目的：学习和掌握配制培养基的一般方 法和步骤
2020/1/21
6
二、操作步骤 1、牛肉膏蛋白胨培养基的配制
2020/1/21
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牛肉膏蛋白胨培养基的配制
配方：
牛肉膏3g，蛋白胨10g，NaCl 5g，琼脂15-20g， 水1000ml，pH7.4-7.6。
2020/1/21
8
牛肉膏蛋白胨培养基的配制
外加报纸 刮铲一个，用报纸包好
实验一、培 养 基 的 配 制
实验一、培养基的制作 实验二、消毒灭菌（多种灭菌方法） 实验三、细菌观察（一） 实验四、细菌观察（二） 实验五、放线菌观察（5406、紫、灰、诺卡氏等） 实验六、酵母菌观察和血球板计数 实验七、霉菌观察（青、曲、根、木等）
实验一 培养基的配制和消毒灭菌(精编课件).ppt
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四、 消毒和灭菌 化学药品灭菌法 物理灭菌法
五、 附录： 棉塞的制作方法 方法1：过程及图解 方法2： 过程及图解
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2. 配制过程和方法(以牛肉膏蛋白胨培养基为例)： 称取 药品 → 加热溶解 → 调pH值 → 过滤 →分装 →加棉 塞 → 包扎 → 灭菌 → 摆斜面 → 无菌检察
3. 其他培养基的配制: 高氏1号培养基,察氏培养基,马丁氏等培养基的配
制方法见教材附录 注意药品加入的次序避免起沉淀反应，避免药品
结块，以及配备储备液等等。
马铃薯培养基的配置：
马铃薯：20g
蔗糖： 2g
蛋白胨：0.4g
水
100ml
PH
自然
方法：马铃薯去皮，削成片、煮沸30分钟、 纱布过滤、加糖和蛋白胨琼脂、补足水分、 121度、灭菌30分钟。
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六、 实验报告
1. 记录你所配制培养基的名称、数量、图解配制过程 及注意事项
2. 记录高压蒸汽灭菌的操作过程和注意事项 3.准备灭菌用的物品：无菌试管6只、无菌培养皿11套、 无菌移液管6只（1ml）、6只(5ml或10ml) 4.无菌水200-300ml
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实验内容： ① 配制牛肉膏蛋白胨培养基200ml，分装到5 只试管做斜面； ② 剩余的培养基倒入三角瓶中，统一灭菌 ③ 制作棉塞5只； 作业与思考：
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四、 消毒和灭菌 化学药品灭菌法 物理灭菌法
五、 附录： 棉塞的制作方法 方法1：过程及图解 方法2： 过程及图解
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2. 配制过程和方法(以牛肉膏蛋白胨培养基为例)： 称取 药品 → 加热溶解 → 调pH值 → 过滤 →分装 →加棉 塞 → 包扎 → 灭菌 → 摆斜面 → 无菌检察
3. 其他培养基的配制: 高氏1号培养基,察氏培养基,马丁氏等培养基的配
制方法见教材附录 注意药品加入的次序避免起沉淀反应，避免药品
结块，以及配备储备液等等。
马铃薯培养基的配置：
马铃薯：20g
蔗糖： 2g
蛋白胨：0.4g
水
100ml
PH
自然
方法：马铃薯去皮，削成片、煮沸30分钟、 纱布过滤、加糖和蛋白胨琼脂、补足水分、 121度、灭菌30分钟。
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六、 实验报告
1. 记录你所配制培养基的名称、数量、图解配制过程 及注意事项
2. 记录高压蒸汽灭菌的操作过程和注意事项 3.准备灭菌用的物品：无菌试管6只、无菌培养皿11套、 无菌移液管6只（1ml）、6只(5ml或10ml) 4.无菌水200-300ml
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实验内容： ① 配制牛肉膏蛋白胨培养基200ml，分装到5 只试管做斜面； ② 剩余的培养基倒入三角瓶中，统一灭菌 ③ 制作棉塞5只； 作业与思考：
培养基的配制及质量控制课件(共44张PPT)
3、当批培养基不符合促生长试验，应寻找造成不合格的原因。
禁用金属容器如铁、铜、铝容器，避免 ①每种菌液接种量含菌小于100cfu
⑶其他 如溶血，可能冷藏温度下形成的结晶，大量的汽泡，微生物污染，氧化还原指示剂的状况，批数量和有效期的检查和记录，培养 基的无菌检查等。
金属离子与培养基成分结合，生成有害 当培养基需要添加其它组分时，添加后也应将其充分混匀。
⑵微生物限度检查(计数培养基)培养基 的适用性检查
微生物限度检查(计数培养基) 使用 前应进行适用性试验，适用性试验包括 促生长、抑制及指示能力检查。
菌种
铜绿假单胞菌 [CMCC(B)10 104]
金黄色葡萄球菌 [CMCC（B）26003]
枯草芽孢杆菌 [CMCC(B)63501 ]
白色念珠球菌 [CMCC（B）98001]
矫正pH 配制培养基必须矫正pH，干燥培养基也
必须对pH进行验证，高压灭菌前的pH应比最终 pH值高左右。矫正pH后的培养基应加热、过滤，
使培养基澄清。
2、培养基的灭菌
灭菌方法及条件不当可直接影响培养基质量，培 养基灭菌方法和条件,商品化的成品培养基或自配 的培养基若采用不适当的加热和灭菌条件，有可能 引起颜色变化、透明度降低、琼脂凝固力或pH的变
整个有效期内均需符合这些相应的标准。每批培养基储 存的时间将取决于一定存放条件（包括容器和密封性） 的培养基组成成分的稳定性。
试验结果处理
⑴当批培养基不符合促生长试验，应寻找造成不 合格的原因。
⑵这个调查包括采取适当的行动以防止问题的重 复出现。
⑶如果未找到原因或还没有解决有关培养基的促 生长问题，那么任何不符合要求的批次均不能使 用。
一、培养基的配制
培养基是绝大多数微生物试验的基础。因此，培养基的质 量是微生物试验成功与否的关键因素。适宜的培养基制备 方法、贮藏条件和质量控制试验是提供优质培养基的保证。
禁用金属容器如铁、铜、铝容器，避免 ①每种菌液接种量含菌小于100cfu
⑶其他 如溶血，可能冷藏温度下形成的结晶，大量的汽泡，微生物污染，氧化还原指示剂的状况，批数量和有效期的检查和记录，培养 基的无菌检查等。
金属离子与培养基成分结合，生成有害 当培养基需要添加其它组分时，添加后也应将其充分混匀。
⑵微生物限度检查(计数培养基)培养基 的适用性检查
微生物限度检查(计数培养基) 使用 前应进行适用性试验，适用性试验包括 促生长、抑制及指示能力检查。
菌种
铜绿假单胞菌 [CMCC(B)10 104]
金黄色葡萄球菌 [CMCC（B）26003]
枯草芽孢杆菌 [CMCC(B)63501 ]
白色念珠球菌 [CMCC（B）98001]
矫正pH 配制培养基必须矫正pH，干燥培养基也
必须对pH进行验证，高压灭菌前的pH应比最终 pH值高左右。矫正pH后的培养基应加热、过滤，
使培养基澄清。
2、培养基的灭菌
灭菌方法及条件不当可直接影响培养基质量，培 养基灭菌方法和条件,商品化的成品培养基或自配 的培养基若采用不适当的加热和灭菌条件，有可能 引起颜色变化、透明度降低、琼脂凝固力或pH的变
整个有效期内均需符合这些相应的标准。每批培养基储 存的时间将取决于一定存放条件（包括容器和密封性） 的培养基组成成分的稳定性。
试验结果处理
⑴当批培养基不符合促生长试验，应寻找造成不 合格的原因。
⑵这个调查包括采取适当的行动以防止问题的重 复出现。
⑶如果未找到原因或还没有解决有关培养基的促 生长问题，那么任何不符合要求的批次均不能使 用。
一、培养基的配制
培养基是绝大多数微生物试验的基础。因此，培养基的质 量是微生物试验成功与否的关键因素。适宜的培养基制备 方法、贮藏条件和质量控制试验是提供优质培养基的保证。
培养基Microsoft PowerPoint 演示文稿 (2)
菌液制备操作步骤1无菌操作从斜面取1接种环菌苔2至10ml营养肉汤培养1618小时3取1ml到9ml灭菌生理盐水中作系列稀释4取适宜稀释级1ml注碟培养作菌数计数1ml1ml9ml9ml5选择含10100个ml的菌液为供试菌液培养基灵敏度检查方法试验菌液支数接种量培养时间100cfuml品种ml1ml金黄色葡萄球菌硫乙醇酸盐12铜绿假单孢菌同上12枯草芽孢杆菌同上12同上12空白1支同上12白色念珠菌改良马丁黑曲霉同上空白1支同上结果判定
培养基的储存
商品脱水培养基应避光储存于25℃以下阴凉 干燥处； 植被好的培养基应保存在2～25℃避光环境， 有条件置4℃冰箱冷藏储备更好。 非密闭容器配制的培养基应在三周内使用， 若密闭容器配制的培养基则可保存一年。
适用性检查
1无菌性检查 方法：每批培养基随机不少于5支（瓶），培养14 天，应无菌生长。 本检查可在供试品的无菌性检查前或与供试品的无 菌检查同时进行。 2灵敏度检查 菌种：所用的菌株传代次数不得超过5代。 供试菌液制备：制成＜100cfu/ml菌悬液。 检查方法：每种供试菌液分别接种2管相应的培养基。 结果判定：加菌的培养基管均应生长良好。
5）选择含10～100个/ml的菌液为供试菌液
培养基灵敏度检查方法
试验菌液 → 接种培养基 → 每管装量 → 支数→ 接种量 →培养时间 ＜100cfu/ml 品种 （ml） 1ml （天） 金黄色葡萄球菌 硫乙醇酸盐 12 2 1 3 铜绿假单孢菌 同上 12 2 1 3 枯草芽孢杆菌 同上 12 2 1 3 生孢梭菌 同上 12 2 1 3 空白1支 同上 12 1 -3 白色念珠菌 改良马丁 9 2 1 5 黑曲霉 同上 9 2 1 5 空白1支 同上 9 1 -5 结果判定：空白对照管应无菌生长，若加菌的Байду номын сангаас养基管均生长良好，判 该培养基的灵敏度检查符合规定。
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（一般需要作无菌检查）
核心：保证无菌操作
超净工作台、酒精灯火焰旁操作
超净工作台
1、如何检验培养基是无菌的？
将未接种的培养基放在恒温培养箱中适宜条 件下培养2-3d，如果无菌落产生，则培养基 是无菌的。
2、常用灭菌方法有哪些？
高压（蒸气）灭菌 用于培养基、培养皿、锥形瓶等
灼烧灭菌
用于接种环等金属器具
1.定义： 单个 菌体
菌落是由单个细胞分裂形成的种群
固体培养基上 子细胞群体
大量繁殖
2.特征：大小、形状、光泽度、 颜色、硬度、透明度等。
3.功能：鉴定菌种的重要依据
常用工具图示
接种环
玻璃刮铲
微生物（如大肠杆菌）的培养：
㈠制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 1.计算 2.称量 3.熔化 4.调节pH 5.分装 6.灭菌 7.恒温培养
二.大肠杆菌的培养：
㈠制备牛肉膏蛋白胨固体培养基
㈡培养大肠杆菌： 1.接种： （超净工作台上、酒精灯火焰旁进行）
划线法 接种环
冷却后刮取菌苔
菌种 划线法接种
划线法接种： 使接种物逐渐 稀释，培养后 出现单个菌落
大肠杆菌菌落 菌落灰白色，圆形，透明或半透明
枯草杆菌菌落 菌落灰白色，较 大，边缘比较粗 糙
（补充：倒“平板”）
超 净 工 作 台
约50℃
倒平板
灼烧灭菌， 防止瓶口的微生物污染培养基
防止培养皿盖上的水珠滴落污染培养基
7、恒温培养（恒温培养箱）
计算 称量
培养基的配制
加热熔化琼 脂（搅拌）
熔化
定容 调节PH至
7.2-7.4
调节pH
分装
恒温培养
灭菌
倒入三角烧瓶，与 其他器具一起放入
灭菌锅 高压灭菌
避免接种环上的细菌污染环境和感染操作者。
滕黄八叠球菌菌落 菌落黄色，圆形、边缘 光滑
为什么在操作的第一步以及每次划线之前都 要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要 灼烧接种环吗？为什么？
操作的第一步灼烧接种环是为了防止接种环上 的微生物污染培养物
杀死残留的菌种，保证使下一次划线时，菌种 直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次 数的增加，使每次划线时接种物逐渐稀释，培 养后得到单个菌落。
实验培养基的配制详解Βιβλιοθήκη 示文 稿优选实验培养基的配制
1、计算 2、称量
牛肉膏 蛋白胨
NaCl H2O 琼脂
5.0g 10.0g 5.0g 1000mL 2.0g
3、熔化 4、调节pH
5、分装
6、灭菌
灭菌——高压灭菌
1.05kg/cm2、121℃，15—30min
灭菌锅
高压灭菌作用：杀死所有活的微生物及芽孢
3、消毒与灭菌的区别
（1）消毒（如巴氏消毒法62℃，30min、酒精 擦拭等）仅杀死活的微生物，不能杀死芽孢。
（2）灭菌（高压灭菌1.05kg/cm2、121℃、1530min；灼烧灭菌、干热灭菌等）能杀死所有微 生物及其芽孢。
微生物重点实验2 ——微生物的培养
•掌握划线法接种方法与作用
补充：菌落