离心浓缩技术
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Thermo离心浓缩系统介绍
一.为什么用离心浓缩?
对于生物样本脆弱样本采用电泳,GC,HPLC 等方法分析和处理的样本都很适于采用离心浓缩
二.离心浓缩的目的
1.浓缩样本,同时还避免以下问题:
1)交叉污染
2)样本丢失
3)样本变性
4)样本活性下降,氧化
2.同时兼备以下优点:
1)高的回收率
2)对环境无害
3)操作简单
三.与离心技术的区别
1)离心分离将悬浮的固体从液体中分离出来
2)离心浓缩溶液。偶尔, 样品会完全干燥,在这种情况下, 样品必须是无机物,或者
在干燥后马上被取走
四.离心浓缩技术
1)抽真空,降低气压,从而降低溶剂的沸点,使溶剂能在低温下蒸发
2)给腔体施加热量(能量) ,从而提高蒸发速率-
3)样本温度不会升高!
4)样本在适宜的离心转速下离心,产生少量的―g‖离心力,这样就防止了由于―暴沸‖而
产生的样本损失,或者由加热和离心浓缩很容易引起的离心管内布满泡沫现象
五.真空效益
1)在既定的气压下,溶剂的沸点是固定的.
2)对不同的溶剂施加不同的能量,对样品温度不会产生任何影响,因为样品的特定
的气压下沸点是一定的,只要蒸发还在进行,样品的温度就没有变化
六.原理–真空效益
1)低溶剂的气压(提高真空度) 这是一个关键因素!
2)液体的沸点在真空状态下会降低.
3)真空同时还能将未浓缩的气体从腔体中吸走,从而减少蒸汽流向冷阱时的遇到干扰
和阻力.
4)通过快速蒸发溶剂,可保持样品的低温状态
七.原理–能量需求
1) 能量(热量)的输入,可补充蒸发过程所需要的能量,对于加快蒸发速度是非常
重要的
2)能量必须是间接施加给样品,否则,样品必然会被局部加热,从而导致损害样品.
3)真空状态下对流是不可能发生的,因此采用辐射加热腔体温度能高达80°C,
而样品的温度却能保持在起沸点下(或许是5°C) ,直到样品完全干燥了温度才会
上升
4)如果样品在真空状态下沸点很低,在不给样品施加能量的情况下让样品如果持续蒸
发,样品很可能会结冰,浓缩也就不可能了!
八.原理–‗g‘离心力效应
1. 当溶剂蒸发(沸腾), 会形成气泡=>
2. 溶剂往往会―暴沸‖或起泡,会有小液飞溅到管外.
3.让样品在离心浓缩仪里旋转,产生足够的‗g‘离心力,就能让样品停留在离心管内.
4. 无样品损失.
5.无交叉污染.
6.样品被浓缩了或干燥后附着在管底,对于定量回收是最理想的
7.在角转头里,液体的表面积提高了,因此加快了样品蒸发和浓缩的速率原理–样品的
安全性!
九.非常重要!
1. 热敏感样品是不允许被完全干燥的.
2. 在相变过程中能量的吸收引起的低温效应消失了,也就无法给样品提供保护.
3. 真空压力计就可以用于判断是否浓缩的临界点
4.开始运行以后,马上观察最大真空度[最小气压]
5.蒸汽的产生会导致气压的上升,随着溶剂的持续蒸发和减少,产生的蒸汽也会越少,气压
也会下降.
6.在达到最小气压以前停止运行.样品仍然是湿的.
十.结论
如果离心样品,在一个适宜的离心速度/ ‘g‘离心力,在真空状态下,通过辐射给样品补充能量,样品将在非常安全的状态下被浓缩。
一.离心浓缩系统
1.完整的系统应包含以下部件
最简单的配置: 浓缩仪,转头, 连接管线, 真空泵
2.完整的系统应包括
在完善的配制: 浓缩仪, 转头,隔膜泵,或高真空油泵以及油过滤器,连接管线, 冷阱,烧瓶,化学阱和吸收柱,真空控制阀,真空压力计,手推车
二.浓缩仪的功能
1离心
2真空控制
3在应用真空以前必须先以足够的rpm离心
4能量
5resistance heating of bowl (all models)
6盖子上的辐射加热灯
7加热盖
8腔体上的加热灯
9run timer 控制整个运行时间
10 heat timer 控制加热时间,防止样品过热,保护样品
三.浓缩仪的设计–冷阱
1SpeedVac 冷阱温度范围: -5°C (药物开发), -50°C, -104°C
2温度最低的型号长用于挥发性极强的溶剂.
3剂在冷阱内的玻璃瓶里冷凝.
4快速连接口的玻璃瓶,很容易更换,也能作为溶剂的收集瓶.
5热传导液– Cryocool®硅树脂液体
(如果经费紧张,乙醇也可以用–但如果用乙醇,请务必每个月更换乙醇,防止玻
璃瓶破裂,因为冷凝水太多时会结冰)
四.浓缩仪的设计–化学吸收阱
1吸收未被冷阱捕获的蒸汽,从而保护了真空泵.
2SpeedVac System 一种尺寸, 吸收柱,用于水+酸或放射性物质& 有机物
五.浓缩仪设计–真空泵
1Thermo 能提供两种类型的真空泵.
a,Membrane (横隔膜), pumps.-无油泵
b,2 stage High vacuumoil pumps.2-级高真空旋转叶片油泵
2.无油泵非常抗强酸和有机溶剂.
3无油泵不用维护(不需换油).
4通常情况下都选择无油泵.
5在一些特定应用领域,需要用到高真空泵— free (dry) pumps无油泵
六.其它浓缩方法比较