常用抗凝剂及其配置法
常用抗凝剂的配制及用法
常用抗凝剂的配制及用法 Prepared on 22 November 2020在医学实验中常需动物的全身抗凝,采出的全血或血浆有的也需加入适当的抗凝剂抗凝。
对抗凝剂的要求是:用量少、溶解度大、不带进干扰实验的杂质。
一、肝素(1)肝素抗凝作用原理肝素的抗凝作用很强,作死亡复苏等实验时,常用它作动物全身抗凝剂,肝素的抗凝作用主要是抑制凝血致活酶的活力,阻止血小板凝聚以及抑制抗凝血酶等作用,从而使血液不发生凝固。
(2)配制和用量纯的肝素10mg能抗凝65~125 ml血液(按lmg等于125U,10~20U能抗1 ml血液计)。
但由于肝素制剂的纯度高低以及其保存时间长短不等,因而其抗凝效果也不相同。
一般可配成1%肝素生理盐溶液,用时取0.1毫升于试管内,100℃烘干,每管能抗凝5~10ml血液。
也可将抽血注射器用配好肝素湿润一下管壁,直接抽血至注射器内而使血液不凝。
在动物实验作全身抗凝时,一般剂量为:大白鼠2.5~3.0mg/200~300g体质量,兔10mg /kg体质量,狗5~10mg/kg体质量。
肝素可改变蛋白质等电点,因此当用盐析法分离蛋白质作蛋白质各部分的测定时,不可采用肝素。
市售的肝素钠溶液每毫升含肝素12500U,相当于100mg。
二、草酸盐合剂(1)原理草酸胺能使血细胞略为膨大,而草酸钾能使血细胞微缩小,因此草酸铵与草酸钾按3:2比例配置,可使血细胞体积保持不变;加福尔马林则能防止微生物在血中繁殖。
此抗凝剂最适于作红细胞比积测定。
(2)配制方法及用量草酸铵1.2g、草酸钾0.8g、福尔马林1.0ml、蒸馏水加至100ml每毫升血加草酸盐合剂0.1ml(即相当草酸铵1.2mg,草酸钾0.8mg)。
根据取血量将计算好的草酸盐剂量加入玻璃容器内烤干备用。
如取0.5ml于试管,烘干后每管可使5ml血不凝固。
(3)注意事项草酸的作用在于能够沉淀血凝过程中所必需的钙离子,而达到抗凝目的。
用时注意加的量应适中,不能过多,以免妨碍去蛋白质血滤液的制取。
常用抗凝剂种类_全
常用抗凝剂种类_全抗凝剂是一类用于预防或治疗血液凝结的药物,常用于防治血栓形成和危及生命的凝血疾病。
以下是常用抗凝剂的种类及其介绍:1.肝素类抗凝剂:肝素是一种天然存在于人体中的抗凝剂,其通过结合抗凝酶抑制凝血酶生成,从而抑制凝血过程。
肝素在体内的半衰期较短,在治疗期间需要持续静脉或皮下给药。
肝素常用于防治深静脉血栓、肺栓塞和心肌梗死等凝血疾病。
2.低分子肝素:低分子肝素是一种从肝素中得到的分子量较小的肝素衍生物,其抗凝活性更高、生物利用度更好,而且不需要监测抗凝效果。
低分子肝素适用于各种血栓性疾病的预防和治疗,如深静脉血栓、肺栓塞和冠心病等。
3.华法林:华法林是一种维生素K拮抗剂,能够阻断凝血因子II、VII、IX和X 的合成,从而抑制凝血过程。
华法林需要个体化调整剂量,治疗期间需要监测凝血酶原时间(INR)来控制抗凝治疗的效果。
华法林多用于长期的抗凝治疗,如心房颤动、静脉血栓栓塞症和机械瓣膜置换等。
4.新型口服抗凝剂:新型口服抗凝剂是一类直接作用于凝血酶或凝血因子Xa的药物,包括达比加群(Dabigatran)、利伐沙班(Rivaroxaban)、阿哌沙班(Apixaban)和依度沙班(Edoxaban)等。
这些药物不需要个体化调整剂量,并且不需要监测抗凝治疗的效果。
新型口服抗凝剂适用于各种抗凝治疗的情况,如心房颤动、深静脉血栓、肺栓塞和机械瓣膜置换等。
5.抗血小板药物:除了抗凝剂,抗血小板药物也常用于预防血栓形成。
常见的抗血小板药物有阿司匹林、氯吡格雷、普拉格雷和替格瑞洛等。
这些药物通过不同机制抑制血小板聚集,从而达到抗凝作用。
抗血小板药物适用于预防心肌梗死、脑卒中和周围动脉疾病等。
总结起来,常用抗凝剂的种类包括肝素类抗凝剂、低分子肝素、华法林、新型口服抗凝剂以及抗血小板药物,它们在预防和治疗血栓形成的临床应用中起到重要作用。
需要特别注意的是,这些药物在使用过程中需要根据具体情况调整剂量,并且注意监测抗凝治疗的效果,以确保达到最佳的治疗效果和预防血栓相关并发症的发生。
枸橼酸钠抗凝剂循管的操作流程
枸橼酸钠抗凝剂循管的操作流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成,希望大家下载以后,能够帮助大家解决实际的问题。
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血液透析抗凝剂的配置和应用
抗凝剂配置流程一、普通肝素配置方法肝素规格:2ml/支,100mg/支,12500iu/支1毫升=5mg配制方法:NS18ml+肝素2ml(1支)计算方法为:加入NS中肝素的总mg÷(NS+加入肝素的总ml)=每毫升盐水所含肝素量二、低分子肝素的配置方法低分子肝素目前多是预充式注射器,或粉剂,规格不同,医嘱给药量也不同,为保证给药量的准确性,低分子肝素应盐水稀释后在给患者推注。
1、低分子肝素规格如为5000iu/支,应配制完成后为每毫升1000iu/ml配置方法:NS4ml+低分子肝素一支(1ml),则每毫升为1000iu。
计算方法:低分子肝素总单位剂量÷(NS量+低分子肝素总毫升量)=每毫升所含低分子量。
2、低分子肝素为粉剂每支5000iu时,应配制完成后为每毫升1000iu/ml配置方法:用生理盐水5ml稀释后,则配置后的肝素为每毫升1000iu/ml总部建议:配置低分子时最好使用10ml注射器进行稀释药液,配置完成后每2ml含有低分子肝素1000iu。
(原因是如使用5ml注射器配置,透析用穿刺针管腔容积为2.5ml,如果患者应用1-3千单位的低分子肝素量,在推注1-3ml后,药液只能停留在穿刺针管腔内,未做到提前全身肝素化要求)。
附件:2019版sop对药物配置的要求:(1)治疗过程中所需的肝素溶液、低分子肝素制剂、红细胞生成刺激剂、铁剂等药品的配置,必须在透析准备室针对每位患者进行配置。
(2)配置后的药品直接送至每位患者的透析单元,标识清楚,一人一用。
已经进入透析治疗区的药品不可返回进入透析准备室。
(3)配置后未用的药品不能用于其他患者。
抗凝剂剂量选择和使用方案一、普通肝素抗凝1.血液透析、血液滤过或血液透析滤过一般首剂量0.3~0.5mg/kg,追加剂量5~10mg/h,间歇性静脉注射或持续性透析器/滤器前静脉输注(常用);血液透析结束前30~60min 停止追加。
_实验室常用血液抗凝剂的特点及应用
实验室常用血液抗凝剂的特点及应用在实验室检验中,有许多检测项目的血液标本是需要抗凝才可以检测的。
而抗凝剂种类较多,实际应用中要根据不同的需要进行选择,才能获得理想的效果。
实验室中常用的抗凝剂有肝素、乙二胺四乙酸盐(EDTA盐)、枸橼酸盐、草酸盐等4种,现将它们的特点及应用分别叙述如下:一、肝素抗凝是用于血液化学成分检测的首选抗凝剂。
肝素是一种含有硫酸基团的粘多糖,是分散相物质平均分子质量为15000。
其抗凝原理主要是通过与抗凝血酶Ⅲ结合引起抗凝血酶Ⅲ构型发生变化,加速凝血酶-凝血酶复合体形成而产生抗凝作用。
此外,肝素还能借助血浆辅助因子(肝素辅助因子Ⅱ)来抑制凝血酶。
常用肝素抗凝剂是肝素的钠、钾、锂、铵盐,其中以肝素锂最好,但其价格较贵,钠、钾盐会增加血液中的钠、钾含量,铵盐会增加尿素氮的含量。
通常用肝素抗凝的剂量为10.0~12.5 IU/ml血液。
肝素对血液成分干扰较少,不影响红细胞体积,不引起溶血,适用于做红细胞渗透性试验、血气、血浆渗透量、红细胞压积及普通生化测定。
但肝素具有抗凝血酶作用,不适合做血凝试验。
另外,肝素过量可引起白细胞聚集和血小板减少,所以不适合做白细胞分类和血小板计数,更不能用于止血检验。
此外,肝素抗凝血不能用于制作血涂片,因为Wright染色后出现深蓝色背景,影响显微镜减产。
肝素抗凝血应于短时间内使用,否则放置过久血液又可凝固。
二、乙二胺四乙酸盐(EDTA盐)EDTA能与血液中Ca2+结合成螯合物,凝血过程被阻断,血液不能发生凝固。
EDTA盐有钾、钠、锂盐,国际血液学标准化委员会推荐使用的是EDTA-K2,其溶解度最高,抗凝速度最快。
EDTA盐通常配成质量分数是15%的水溶液,每ml 血液加1.2mgEDTA,即每5ml血液加0.04ml 15%EDTA溶液。
EDTA盐可在100℃下干燥,抗凝作用不变。
此抗凝剂不影响白细胞计数及大小,对红细胞形态影响最小,并且可以抑制血小板的聚集,适用于一般血液学检测。
ICU常备药物的配置使用及不良
氯丙嗪
六 呼吸中枢兴奋药及平喘药
1 2 3 4 尼克刹米(可拉明) 尼克刹米(可拉明) 山梗菜碱(洛贝林) 山梗菜碱(洛贝林) 氨茶碱 1支=0.25 g/10ml g/10ml 喘定 1支=0.25 g/2ml g/2
七
抗 胆 碱 药
阿托品 1支=0.5 mg/1ml 1支=1m g/1ml mg/1 g/1 作用 松弛平滑肌,抑制腺体分泌,心率 松弛平滑肌,抑制腺体分泌, 上升 扩瞳
3异搏定(维拉帕米) 1支 异搏定(维拉帕米) =5mg/2ml
适应症:室上性过早搏动、室上速及心房扑动的复律、 适应症:室上性过早搏动、室上速及心房扑动的复律、 不伴有预激综合症的房扑房颤、 不伴有预激综合症的房扑房颤、房速使心室率下降 禁忌症:心衰、病态窦房结综合症、房室传导阻滞、 禁忌症:心衰、病态窦房结综合症、房室传导阻滞、 低血压 使用剂量:静推负荷量10mg 使用剂量:静推负荷量10mg 副作用: 副作用:①窦房结功能障碍者可发生窦性停搏 ②房室结功能障碍者可发生房室传导阻滞 ③静推过快或剂量较大可引起心跳骤停 ④存在预激综合征的房颤房扑时静脉用药可加快心 室率或室颤
1支=0.4mg/2ml
作 用 1、正性肌力作用,心肌收缩力增加,心 2、减慢心率作用 3、利尿作用 治 疗:心功能不全和房扑、防颤。 不良反应 1、心律失常 2、胃肠道反应 3、中枢神经系统反应
四
抗心律失常药
1、利多卡因 1支=400 mg/20ml 1支=100 mg/20ml
mg/5ml mg/5ml 适应症: 适应症:治疗和预防室性快速性心律失常,尤其是 急性心肌缺血或梗死时 使用剂量:50~100mg/次 10分钟一次 使用剂量:50~100mg/次 静推 5~10分钟一次 总量 <250~ 300mg 250~ 300mg 副作用: 副作用: ① 神经系统症状 ( 头晕 、 嗜睡 、 视力模糊 、 呼吸 神经系统症状( 头晕、 嗜睡、 视力模糊、 困难或停止、抽搐) 困难或停止、抽搐) ② 心脏反应( 大剂量引起传导阻滞 、 窦性停搏、 心脏反应 ( 大剂量引起传导阻滞、 窦性停搏 、 心肌抑制、血压下降) 心肌抑制、血压下降)
第二节 常用抗凝剂的种类、浓度与配置方法
第二节常用抗凝剂的种类、浓度与配制方法在机能学实验研究中,常用的抗凝剂有3.8%枸橼酸钠、2%草甲酸、2%草酸钠、1%乙二胺四乙酸钠和肝素等。
一、枸橼酸钠它与血液中Ca2+结合形成络合物,去除血Ca2+而防止血液凝固,且枸橼酸盐类对动物机体无毒,故一般若需抗凝血回注动物体内时,宜用枸橼酸钠抗凝。
二、草甲酸其溶解度大,抗凝作用强,是机能学实验和生化实验常用抗凝剂。
能与血液中Ca2+结合生成不溶解的草酸钙,使血液不凝固。
2mg草酸钾可抗凝1mL血,常用于全血抗凝,但不宜用于钾、钙等离子测定。
此外草酸钾对乳酸脱氢酶、酸性磷酸酶及淀粉酶有抑制作用。
2%草酸钾溶液。
取准备取血用的试管数支,每支试管加0.5ml 2%草酸钾溶液,置80℃烤箱内烤干备用,每管可抗凝5mL血。
三、乙二胺四乙酸(EDTA)可与钙形成螯合物,而使血液不凝固。
常用EDTA-Na,1~2mg可抗凝1mL血液。
特别2适用血液学检查,不宜用于含氮化合物和钠的测定。
四、肝素肝素能阻止凝血酶原转变为凝血酶,从而抑制纤维蛋白原形成纤维蛋白,达到抗凝效果。
是机能实验研究中最常用的抗凝剂,最合适电解质、血气与pH值的测定。
肝素浓度表示法有体积-质量百分比和国际单位计量法,两者的等量关系是1mg相当于100U。
其使用浓度因使用目的、方法与对象而定。
①实验动物全身体内抗凝,一般用量为:大白鼠2.5~3mg/200~300g;家兔10mg/kg;狗50~100mg/kg。
②实验动物局部抗凝,如记录实验动物动脉血压时,需在动脉插管和血压换能器等血压传输管道系统内充满0.1%(100U/mL)为例,是取12500U/2mL肝素一支,加水至125mL即成。
肝素应避光低温保存。
EDTA抗凝剂简易配制法
EDTA抗凝剂简易配制法【关键词】饱和;抗凝;溶解度常用EDTA-Na 2 抗凝剂的浓度是15g/L,每0.4ml干燥后可抗凝5ml血液 [1] 。
EDTA-Na 2 的溶解度较大,22℃时可达11.1克,其有效抗凝浓度为1~2mg/ml,通过计算得知100ul(约两滴)饱和溶液可抗凝5~10ml血液,由于EDTA-Na 2 的溶解度受Nac1影响不大,为防止溶血在实践中我们用500毫升生理盐水加56克EDTA-Na 2 配制成饱和溶液,每份标本滴加3~5滴直接使用,取得了令人满意的效果。
1.材料和方法1.1对象:1999年~2007年潍坊市无偿献血者。
1.2试剂:ELISA试剂盒HBsAg购自厦门新创和上海科华公司,抗-HCV购自厦门新创和上海科华公司,抗-HIV购自北京吉比艾和北京万泰公司,TP-ELISA购自北京中生和吉比艾公司,ALT活性试剂盒购自北京中生和浙江东瓯公司。
1.3仪器:TECAN全自动酶免加样器,FAME全自动酶免分析系统。
1.4方法:配制方法将EDTA-Na 2 粉末直接加入到生理盐水瓶内边加边摇匀直到瓶子底部有少许晶体不能再溶解为止,静置稳定片刻后即为EDTA-Na 2 饱和溶液。
本溶液用普通塑料滴管滴加2~3滴即可,当血液沿试管内壁下流时由于冲击作用自动与抗凝剂混合均匀勿需再人为摇匀。
每人留取两份标本,一份用本法抗凝,一份非抗凝,两份标本用同一种试剂和方法检验,阳性者均做双孔复试。
抗-HIV阳性标本是向同一个人的两份等量标本中加入等量抗-HIV阳性对照物制得。
将得到的结果对比分析。
所有操作均按试剂盒说明书和仪器操作规程严格进行。
2.结果(见表1)表1抗凝和非抗凝标本的检验结果比较注:各组阳性标本中均包含10例弱阳性标本。
3.讨论3.1由(上表可看出)抗凝标本和非抗凝标本检验结果完全相符,二者之间无差异。
3.2乙二胺四乙酸盐对血细胞和血小板形态影响很小,适用于一般血液学检查,稍微过量不影响检验结果。
枸橼酸钠抗凝剂(3.8%,无菌)说明书
本产品仅供体外研究使用,不得用于临床诊断
产品简介: 枸橼酸钠(sodium citrate)又称柠檬酸钠,常见原料为二水合柠檬酸三钠,分子量为 294.12, 枸橼酸钠能与血液中的钙离子结合形成螯合物从而阻止血液凝固,用于血液抗凝时常选用 3.2% (109mmol/L),亦可选用 3.8%(129mmol/L)或者 4%(136mmol/L)。
相关产品:
肝素钠溶液(0.1%,125U_ml,无菌) 肝素钠溶液(0.5%,625U_ml) 肝素钠溶液(0.5%,625U_ml,无菌) 肝素钠溶液(1%,1250U_ml) 肝素钠溶液(1%,ml
说明书 1份
有效期 1年
操作步骤(仅供参考): 1、根据实验具体要求操作。 2、一般情况下应 10 倍稀释后使用即 0.2ml 的枸橼酸钠抗凝剂(3.8%,无菌)可抗凝 1.8ml 血 液。
注意事项: 1、该试剂为无菌产品,应注意无菌操作。 2、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
枸橼酸钠抗凝剂(3.8%,无菌)主要由柠檬酸三钠和水组成,已无菌处理,做血液抗凝时与血液 的体积比一般采用 1:9,主要适用于凝血象和红细胞沉降率测定,当用于魏氏法测定血沉 时,抗凝剂与血液的比例采用 1:4(V:V)。该试剂仅适用于科研领域,不适用于临床诊断 或其他用途。
产品组成:
产品名称 枸橼酸钠抗凝剂(3.8%,无菌)
项目十六 免疫细胞的分离
项目十六免疫细胞的分离一、抗凝血的制备【实验原理】常用的抗凝剂如肝素能阻止凝血酶的形成;乙二胺四乙酸(EDTA)和柠檬酸能与Ca2+结合;机械脱纤维使血液中血小板和纤维蛋白凝聚;从而都能阻止血液凝固。
实验室常用的抗凝方法有如下几种:肝素抗凝、EDTA抗凝、脱纤维抗凝及Alsever液抗凝等方法。
【试剂和器材】1.试剂肝素、EDTA-Na2、Alsever液、生理盐水等。
2.器材三角烧瓶、玻璃珠、试管或离心管、采血器具。
【步骤和方法】1.肝素抗凝法将肝素用生理盐水配制成250U/ml或其它浓度的溶液,115℃灭菌10min(或112℃15min),置-20℃可保存数月。
实验中常用的肝素抗凝浓度为20~50U/ml血液,实际当肝素浓度为5~10U/ml血液时已显出良好的抗凝效果。
2.EDTA法常用EDTA二钠盐(EDTA-Na2),用生理盐水配制成浓度为27g/L的溶液。
配制时将溶液调至pH7.2,否则EDTA-Na2不溶解。
用时取0.05ml即可使1ml血液抗凝。
EDTA-Na2有效抗凝浓度为1~2mg/ml血液。
3.脱纤维法在三角烧瓶中放入一些小玻璃珠(放入数目视采血量多少而定,通常放30~40粒),将血采入后立即轻轻顺一个方向旋转,直到血纤维凝聚为止。
4.Alsever液抗凝法血液与Aalsever液混合比例为1:1~1:2。
【结果判定】除玻璃珠脱纤维法有血纤维凝聚之外,抗凝血中不能有血凝块出现,否则应重新制备。
【注意事项】1.采血所用器具、抗凝剂、操作过程均应无菌。
2.加入血液后应轻轻混合,直到与抗凝剂均匀混合为止。
常采用旋转混合的方法混匀。
3.抗凝血放4℃保存。
【方法评价】肝素制备的抗凝血不易长期保存(保存时间12h)。
EDTA 法能保持血小板与白细胞的正常形态,避免聚集。
脱纤维法可使少量淋巴细胞丢失,但是悬液中细胞活力好,而且血小板污染甚少。
Alsever可较长时间保存血液,一般可保存2~3周。
抗凝剂规格
抗凝剂规格
抗凝剂规格及其应用
抗凝剂在医疗、实验室和工业领域中都扮演着重要的角色,其主要功能是阻止或延缓血液的凝固过程。
抗凝剂的规格和种类因用途而异,下面我们将详细介绍几种常见的抗凝剂及其规格。
首先,让我们关注CPD抗凝剂。
CPD(枸橼酸钠、磷酸盐、葡萄糖)抗凝剂主要用于血液保存。
其规格通常为100ml,适用于各种血液采集和保存的需求。
CPD抗凝剂的主要优点是它能够在一定时间内保持血液的新鲜度和活性,从而确保实验室检测或输血时的血液质量。
接下来是枸橼酸钠抗凝剂,这是另一种常见的抗凝剂。
枸橼酸钠可以与血液中的钙离子结合,形成可溶性的螯合物,从而阻止血液凝固。
其规格多样,包括180ml:7.2g、160ml:6.4g 等多种选择。
枸橼酸钠抗凝剂主要用于血液学检查,如血常规、凝血功能等。
此外,EDTA(乙二胺四乙酸)盐也是一种广泛使用的抗凝剂。
它的主要优点是对红、白细胞形态影响小,因此在血细胞计数等实验中常常被使用。
EDTA盐的规格通常以每毫升血液所需的EDTA-K2·2H2O的毫克数来表示,如1.5-2.2mg。
总的来说,抗凝剂的规格因种类和用途而异。
在选择抗凝剂时,需要根据具体的实验或医疗需求来确定最合适的规格和类型。
同时,正确的抗凝剂使用方法和注意事项也是确保实验或医疗过程顺利进行的重要因素。
抗凝剂配方的配方有什么?
抗凝剂配方的配方有什么?抗凝血剂无法凝固的血液。
人体的血液跟人体分开会发生凝固,这是正常的现象,逐渐出现血清,因试验要求血液不能凝固,否则凝固的血液无法进行试验,这个时候血液一定不能凝固起来,这个时候需要抗凝剂来使血液不出现凝固的现象,抗凝剂配方的配方有什么?下面我们来看看。
★一.备料动物,注射器,枸橼酸钠等★二.步骤1.制作抗凝剂抗凝剂有很多种,如肝素、枸橼酸钠、柠檬酸钠、EDTA等,每种都有其适合的应用。
一般来讲,实验室常用的、配方简单的就是枸橼酸钠(3%-5%)。
与血液比例1:4,也就是2ml抗凝剂+8ml 血液.2.保定动物采血对象以鸡为例,用10ml细针头注射器采集新鲜的鸡抗凝血,采血部位翼根静脉。
左手抓住鸡的两翼,使其侧卧,身体朝向内侧,翅膀朝向外侧,完成保定。
3.采血右手取酒精棉,沿鸡的腋窝处向翅膀外侧擦拭,会出现一条明显的静脉,此为翼根静脉。
左手压住近心端,右手持已吸入2ml抗凝剂的10ml注射器沿此静脉平行刺入,松开左手,即可采集8ml血液。
4.止血采血完毕后,小心抽出注射器,用干燥的脱脂棉按压采血部位使其快速止血。
5.充分混匀抗凝剂要与血液充分混匀才能发挥抗凝作用,混合不匀经常出现血块,影响下一步使用。
混匀后,拔去注射器针头后方可将抗凝血推入其他试验容器中。
6.真空采血管有条件的实验室可以直接购买真空采血管,这种采血管内就含有抗凝剂,而且是负压,相连的针头成功刺入血管后,血液自动流入管内,无需注射器,方便快捷。
★三.注意事项抗凝剂配置后最好过滤除菌,存放时间不宜过长;抗凝剂与血液要充分混匀,避免出现血凝块!。
5.5.2常用抗凝血药
血液系统药常用抗凝血药抗凝血药Anticoagulants 体内、体外抗凝血药:肝素体内抗凝药:香豆素类体外抗凝药:枸橼酸钠肝素(heparin )自猪、牛肺脏中提得,是一直链阴离子粘多糖。
分子量大,呈强酸性,带大量的负电荷。
赖氨酸肝素丝氨酸活性中心AT-Ⅲ【药理作用机制】X1000Ⅱa 、Ⅸa 、Ⅹa 、Ⅺa 、Ⅻa 等【药理作用】抗凝作用:在体内、体外均有迅速而强大的抗凝作用机理:肝素激活血浆中正常成份抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ),通过AT-Ⅲ抑制凝血因子Ⅱa 、Ⅸa 、Ⅹa 、Ⅺa 、Ⅻa和激肽释放酶而发挥效应。
抗动脉粥样硬化作用降低血脂保护动脉内皮细胞抑制血管平滑肌细胞增生抗炎作用肝素(heparin )【临床应用】血栓栓塞性疾病手术抗凝弥漫性血管内凝血(DIC )治疗烧伤【不良反应】出血发生率5%~6%长期应用可见脱发及骨质疏松偶见哮喘、荨麻疹等过敏反应【禁忌证】禁用于脏器外伤、伤口出血等出血性疾病。
肝、肾功能不良、溃疡病、恶性高血压、脑出血、血友病、血小板减少症、先兆流产及分娩病人均禁用肝素。
注射鱼精蛋白对抗(protamine )肝素(heparin )低分子量肝素(LMWH)【作用特点】✓分子量在4~6.5kDa✓选择性抗凝血因子Xa活性✓t1/2比肝素长2~4倍✓较少诱导血小板减少常用制剂: 依诺肝素(enoxaparin)替地肝素(tedelparin)弗希肝素(fraxiparin)香豆素类(coumarin)为一类竞争性拮抗维生素K的口服抗凝血药。
双香豆素(dicoumarol)醋硝香豆素(acenocoumarol,新抗凝)华法林(warfarin)【基本结构】4-羟基香豆素【药动学】 华法林口服吸收完全与血浆蛋白结合率为90%~99%主要在肝及肾中代谢t1/2为40小时【作用机制】香豆素类(coumarin )COOHCH 2CH 2CHCOOH H 2N 2CH 2CH H 2N COOH 香豆素类阻碍维生素K 环氧化物向氢醌形式转变,抑制凝血因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ活化CO 2 , O 2【药理作用特点】✓体外无抗凝作用✓抑制凝血因子的合成✓抗凝作用出现时间慢,停药后抗凝作用可维持数天【临床应用】防止血栓形成与发展,作用与肝素相同;预防深静脉血栓形成;预防来自心脏的动脉栓塞,如急性心梗【不良反应】自发性出血——应用大剂量Vit K对抗华法林可通过胎盘屏障,禁用于妊娠妇女香豆素类(coumarin)枸橼酸钠--体外抗凝剂其酸根与Ca2+形成一种难以解离的可溶性络合物,降低血中Ca2+,使凝血过程受阻。
枸橼酸钠抗凝应用细节
枸橼酸钠抗凝剂应用细节对于高危出血倾向得患者,局部枸橼酸钠抗凝法就是CBP得一种有效得抗凝方式。
其应用原理同普通血液透析。
在CBP治疗中若使用及护理得当,使用局部枸橼酸钠抗凝方式既能获得满意得抗凝效果,又不会出现使用肝素抗凝出现得白细胞、血小板降低等并发症,对滤器得膜得生物相容性也有一定程度得改善。
(一)使用方法1.置换液组成与处方(1)市售血液滤过置换基础液:①含钙与镁得成品基础置换液(每袋4L):输入速度2-2、5L/h 为宜,若治疗总时间为8-12小时,速度为3L/h.②4%枸橼酸钠(200ml/袋):输入速度210—240 ml /h.调整幅度5-10 ml /h。
③根据患者得血电解质监测结果动态调整钾得输入量,一般以10%KCL6-10 ml/3L得浓度输入。
(2)无钙置换液得配置及处方调整(以4L基础液+枸橼酸钠为例):①液体配制:将生理盐水3000ml,灭菌注射用水820ml,5%葡萄糖注射液150ml,25%硫酸镁3、2ml,10%葡萄糖酸钙28ml一并灌入无菌静脉高营养袋中。
配置好得置换液需在4小时内使用。
②4%枸橼酸钠:输入速度140—190ml /h。
调整幅度:10 ml /h。
③每袋10%10%KCL6-10ml。
若使用市售得血液净化置换基础液,应更加注意枸橼酸钠、碳酸氢钠得输入速度。
置换液输入速度以2000—3000ml/ h不等,以前稀释输入方法为主。
对于低氧血症、肝功能受损得患者禁用枸橼酸抗凝,严重低钙血症(透析前游离钙﹤0、75mmol/L)得患者慎用枸橼酸抗凝,若使用枸橼酸应减量或加大置换量.高钙血症不宜使用含钙血液置换基础液。
2.静脉用钙制剂得补充使用血液滤过置换基础液一般不需补充钙离子,若游离钙进行性下降,应警惕枸橼酸中毒,立即停用枸橼酸,改用其她方式抗凝。
若血液净化治疗前游离钙﹤0、95mmol/L,治疗结束前可缓推10%葡萄糖酸钙10 ml;使用无钙置换液则应在静脉回血端(双腔静脉得静脉端用三通开关连接注射泵管)持续注入葡萄糖酸钙或氯化钙溶液,一般多选用葡萄糖酸钙,以2mmol/h得速率(10%葡萄糖酸钙24-26ml/h)直接输入患者静脉内,以补充患者血循环中得钙离子,根据医嘱通过调节钙得泵入速度使血钙浓度达到理想范围。
常用抗凝剂的配置、用法和选择
常用抗凝剂的配置、用法和选择常用抗凝剂大致分为三类,一类为化学药品.其作用为消除钙离子作用。
使血液中的钙转变成可溶性的,但不离子化的络合物,药物如枸橼酸钠,草盐酸和二乙胺四乙酸二钠等.另一类为生物制剂,如肝素,其作用是阻止凝血酶的生成,从而抗凝。
第三类为离子交换剂,系采用物理性方法防治血液凝固.1。
枸橼酸钠(Sodium citrate):溶于水,不溶于醇.可直接用本品粉末,每ml血液加3~5mg,用于红细胞沉降率测定.按30mg/ml的枸橼酸钠溶液1份,血液9份比例混合剂可使血液不凝固。
因本贫碱性较强,可用枸橼酸调节pH接近7。
0,所含成份为枸橼酸钠56mg/ml,枸橼酸5mg/ml和葡萄糖29mg/ml,成为复方枸橼酸钠抗凝剂,常用于各种动物连接血压计时的抗凝.现用的枸橼酸钠有两种:(1)枸橼酸三钠(Trisodium citrare):有两种结晶水含量不同的成品,一种是2Na3C6H5O7·11H2O,其与血浆成等渗浓度为3。
8%;另一种是Na3C6H5O9·2H2O与血浆成等渗浓度为3.2%(2。
5%~4.0%),均为碱性,枸橼酸或其盐与钙作用生成可溶性络合物,当制成2.5%溶液时,Ph为7.5。
最低的抗凝浓度为0。
2%,一般在血液中的最终浓度应为0.4%~0.6%,是长久以来国际上最通用的抗凝剂。
(2)枸橼酸二钠(Disodium citrare):因其中含有大量的枸橼酸离子,属于酸性的枸橼酸。
3。
5%溶液的pH为4。
5,其优点是:简化了配置保存液的处方及其配制手续;防止高压消毒时葡萄糖的焦化现象,但大量输血时,枸橼酸钠可能产生毒性反应.2.草酸钾(Potassium oxalate)和草酸钠(Sodium oxalate):草酸溶于水,微溶于醇,具有溶解度大,抗凝作用强的特点.体外抗凝时1ml血液用草酸钾1~2ml,微量检验用血较少时,可配成20mg/ml溶液。
也可根据需要,用100mg/ml草酸钾溶液放入试管中摇动,使其分散浸湿管壁周围,置60℃烘箱内烤干。
常用抗凝剂及其配置法
常用抗凝剂的配制及用法在医学实验中常需动物的全身抗凝,采出的全血或血浆有的也需加入适当的抗凝剂抗凝.对抗凝剂的要求是:用量少、溶解度大、不带进干扰实验的杂质.一、肝素(1)肝素抗凝作用原理肝素的抗凝作用很强,作死亡复苏等实验时,常用它作动物全身抗凝剂,肝素的抗凝作用主要是抑制凝血致活酶的活力,阻止血小板凝聚以及抑制抗凝血酶等作用,从而使血液不发生凝固。
(2)配制和用量纯的肝素10mg能抗凝65~125 ml血液(按lmg等于125U,10~20U能抗1 ml血液计)。
但由于肝素制剂的纯度高低以及其保存时间长短不等,因而其抗凝效果也不相同。
一般可配成1%肝素生理盐溶液,用时取0.1毫升于试管内,100℃烘干,每管能抗凝5~10ml血液。
也可将抽血注射器用配好肝素湿润一下管壁,直接抽血至注射器内而使血液不凝.在动物实验作全身抗凝时,一般剂量为:大白鼠2.5~3.0mg/200~300g体质量,兔10mg/kg体质量,狗5~10mg/kg体质量.肝素可改变蛋白质等电点,因此当用盐析法分离蛋白质作蛋白质各部分的测定时,不可采用肝素.市售的肝素钠溶液每毫升含肝素12500U,相当于100mg。
(3)注意事项做全血DNA提取的时候抗凝剂不能采用肝素!因为肝素是聚合酶链式反应的抑制剂!二、草酸盐合剂(1)原理草酸胺能使血细胞略为膨大,而草酸钾能使血细胞微缩小,因此草酸铵与草酸钾按3:2比例配置,可使血细胞体积保持不变;加福尔马林则能防止微生物在血中繁殖.此抗凝剂最适于作红细胞比积测定.(2)配制方法及用量草酸铵1.2g、草酸钾0.8g、福尔马林1.0ml、蒸馏水加至100ml每毫升血加草酸盐合剂0.1ml(即相当草酸铵1.2mg,草酸钾0.8mg).根据取血量将计算好的草酸盐剂量加入玻璃容器内烤干备用。
如取0.5ml于试管,烘干后每管可使5ml血不凝固。
(3)注意事项草酸的作用在于能够沉淀血凝过程中所必需的钙离子,而达到抗凝目的.用时注意加的量应适中,不能过多,以免妨碍去蛋白质血滤液的制取。
常用试剂配置方法
常用试剂1.0 20 mM Tris-HCl(pH 7.1)缓冲液Tris碱 2.42 g0.02 mol/L盐酸91.2 mL加双蒸水至1000 mL酸度计检测pH,棕色瓶4℃保存。
*0.02 mol/L盐酸的配制:用洁净的2mL吸管吸取0.9mL浓HCl,加至预先装有300mL左右双蒸水的500mL烧杯中,然后倒入500mL容量瓶中,用双蒸水稀释至500mL,盖上瓶塞,摇匀。
中华绒螯蟹血液抗凝剂2.0 罗氏沼虾血液抗凝剂罗氏沼虾血液抗凝剂((1)柠檬酸三钠·2H2O 100mM(7.35g)EDTA-Na210 mM(0.93g)无水葡萄糖82mM(3.69g)NaCl 20mM(0.29g)10mM Tris-HCl 20mM Tris-HCl(pH7.1)(125mL)将Tris-HCl以外的各成分置于250mL烧杯中,用少量(约50mL)的DD水溶解,然后加入20mM Tris-HCl (pH7.1)125mL,用酸度计测pH,再用0.02 mol/L盐酸将pH调至7.56,倒入容量瓶中加入DD水至250mL。
罗氏沼虾血液抗凝剂((2)3.0 罗氏沼虾血液抗凝剂柠檬酸三钠·2H2O 0.114M(8.38g)NaCl 0.1M(1.46g)用0.1N HCl调pH至7.45,加DD水至250mL▲淡水虾普遍使用改良的Alsever溶液溶液::MAS))(改良的4.0 罗氏沼虾血液抗凝剂罗氏沼虾血液抗凝剂((3)(柠檬酸钠(无水)30mM(0.8g)EDTA 11.6mM(0.34g)Tween80 10µl双蒸水100mlpH7.45血液抗凝剂((AB,Smith and Söderhäll,1983)氏原螯虾血液抗凝剂5.0 柯氏原螯虾血液抗凝剂NaCl 0.14M(0.82g)葡萄糖0.1M(1.8g)柠檬酸三钠(无水)30mM(0.8g)柠檬酸·H2O 26mM(0.55g)EDTA 10mM(0.29g)双蒸水100mlpH4.66.0 甲壳类抗凝剂NaCl 0.45M(2.63g)葡萄糖0.1M(18g)柠檬酸钠30mM(0.8g)柠檬酸·H2O 26mM(0.55g)EDTA 20mM(0.58g)双蒸水100mlpH4.5氏抗凝剂(中国对虾、日本鲟、菲律宾蛤仔使用效果较好)7.0 Alsever氏抗凝剂葡萄糖0.114M(2.05g)柠檬酸钠30mM(0.8g)NaCl 72mM(0.42g)双蒸水加至100ml8.0 CAD抗凝剂(配制方法参见蔡武城等《生物化学实验技术教程》,复旦大学生出版社,1983,47)柠檬酸三钠(Na3C6H5O7·2H2O)(分析纯) 1.32g柠檬酸(C6H5O7·H2O)(分析纯)0.44g无水葡萄糖(C6H12O6)(分析纯) 1.47g(或C6H12O6·H2O)1.32g置于三角烧瓶内,先用70~80℃新鲜蒸馏水或去离子水100ml溶解,再加入0.1~0.2g活性炭,搅拌后静置10min过滤,所得滤液即是。
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常用抗凝剂的配制及用法
在医学实验中常需动物的全身抗凝,采出的全血或血浆有的也需加入适当的抗凝剂抗凝。
对抗凝剂的要求是:用量少、溶解度大、不带进干扰实验的杂质。
一、肝素
(1)肝素抗凝作用原理
肝素的抗凝作用很强,作死亡复苏等实验时,常用它作动物全身抗凝剂,肝素的抗凝作用主要是抑制凝血致活酶的活力,阻止血小板凝聚以及抑制抗凝血酶等作用,从而使血液不发生凝固。
(2)配制和用量
纯的肝素10mg能抗凝65~125 ml血液(按lmg等于125U,10~20U能抗1 ml 血液计)。
但由于肝素制剂的纯度高低以及其保存时间长短不等,因而其抗凝效果也不相同。
一般可配成1%肝素生理盐溶液,用时取0.1毫升于试管内,100℃烘干,每管能抗凝5~10ml血液。
也可将抽血注射器用配好肝素湿润一下管壁,直接抽血至注射器内而使血液不凝。
在动物实验作全身抗凝时,一般剂量为:大白鼠2.5~3.0mg/200~300g体质量,兔10mg/kg体质量,狗5~10mg/kg
体质量。
肝素可改变蛋白质等电点,因此当用盐析法分离蛋白质作蛋白质各部分的测定时,不可采用肝素。
市售的肝素钠溶液每毫升含肝素12500U,相当于100mg。
(3)注意事项
做全血DNA提取的时候抗凝剂不能采用肝素!因为肝素是聚合酶链式反应的抑制剂!
二、草酸盐合剂
(1)原理
草酸胺能使血细胞略为膨大,而草酸钾能使血细胞微缩小,因此草酸铵与草酸钾按3:2比例配置,可使血细胞体积保持不变;加福尔马林则能防止微生物在血中繁殖。
此抗凝剂最适于作红细胞比积测定。
(2)配制方法及用量
草酸铵1.2g、草酸钾0.8g、福尔马林1.0ml、蒸馏水加至100ml每毫升血加草酸盐合剂0.1ml(即相当草酸铵1.2mg,草酸钾0.8mg)。
根据取血量将
计算好的草酸盐剂量加入玻璃容器内烤干备用。
如取0.5ml于试管,烘干后每管可使5ml血不凝固。
(3)注意事项
草酸的作用在于能够沉淀血凝过程中所必需的钙离子,而达到抗凝目的。
用时注意加的量应适中,不能过多,以免妨碍去蛋白质血滤液的制取。
不适用于血液内钙或钾的测定,也不能用于血液非蛋白氮测定。
三、枸櫞酸钠
常配成3~5%水溶液。
也可直接加粉剂,每毫升血加3~5mg,即可达到抗凝目的。
枸櫞酸钠可使钙失去活性,防止凝血。
但其抗凝作用较差,碱性较强,不宜作化学检验之用。
仅可用于红细胞沉降速度测定。
急性血压测定实验所用枸櫞酸钠为5~6%溶液。
四、草酸钾
(一)原理和注意事项
草酸钾为最常用的抗凝剂。
其与血液混合后可迅速与血液中的钙离子结合,形成不溶解的草酸钙,使血液不凝固。
常用于非蛋白氮测定,但不适用于测定钾和钙。
草酸盐能抑制乳酸脱氢酶、酸性磷酸酶和淀粉酶的活性,故应注意。
(二)配制及使用方法
取草酸钾10g,加蒸馏水少许使溶解,再加蒸馏水至100ml。
配制成10%水溶液,如每管加0.1ml则可使5~10ml血不凝。
一般如作微量检验,用血量较少,可配制成2%溶液,如每管加0.1ml可使1~2ml血液不凝。
五、乙二胺四乙酸二钠盐(EDTA)
EDTA对血液中钙离子有很大的亲和力,能与钙离子络合而使血液抗凝。
每0.8mg可抗凝1ml血液。
除不能用于血浆中钙、钠及含氮物质之测定外,适用于多种抗凝。
六、(酸性)柠檬酸葡萄糖溶液B(ACD)(用于新鲜抽提或者是冻存的血样品,实验室常用)
柠檬酸钠:1.32%(M/V)
柠檬酸:0.48%(M/V)
葡萄糖:1.47%(M/V)
ACD抗凝剂为:柠檬酸0.48g、柠檬酸钠1.32g、葡萄糖1.47g,加水至100ml,灭菌后备用
一般20ML新鲜血液中加入3.5ML ACD抗凝剂。
比例依次类推!!
血液可以在0度条件下保存数天,或者是零下70度条件下无限期保存!
从全血中制备基因组DNA,ACD做为抗凝剂要优于EDTA,因为他更加能保存高分子质量的DNA,然而,血样常常被收集于用定量EDTA作为抗凝剂的小管中。
在大多数美国的医院中,收集血样的小管均用颜色标明是否含有抗凝剂,紫色顶管盖的小管一般含有抗凝剂,通常是EDTA的干粉。
黄色顶盖的小管不含抗凝剂。
在分子克隆实验中,前者一般用于收集血样用于制备基因组的DNA,后者用于收集血样作为用EB病毒的永生化淋巴细胞的来源。
这些永生化的细胞可以作为可更新的来源来制备大量的DNA以备后用,如进行遗传学的研究等等!。