第六章外界因素对细菌的影响
细菌的分布及外界因素对细菌的影响ppt课件
二、化学因素
化学药物能影响细菌的化学组成、物理结构和生理 活动，从而发挥防腐，消毒，甚至灭菌的作用。防腐剂 的浓度高或作用时间长，也可达到消毒的目的。消毒及 防ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ药物对人体组织有害，只能外用或用于环境消毒。
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（一）化学消毒剂 （二）防腐剂
用于防腐的药物称为防腐剂。生物制剂（如疫苗、 类毒素、抗毒素等）中常加入防腐剂，以防止杂菌生长。 常用防腐剂有0.5%石炭酸、0.01%硫柳汞和0.1～0.2%甲 醛等。
消毒: 杀灭病原微生物的方法。 灭菌：杀灭物体上所有的微生物的方法。 无菌：物体上或容器内无活菌存在的意思。 防腐：防止或抑制微生物生长繁殖的方法。
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一、物理因素
（一）热力灭菌 1．湿热灭菌法 2．干热灭菌法 （二）电磁波与射线 1．日光与紫外线 2．电离辐射
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（三）滤过除菌法 除菌滤器简称滤菌器，将液体或空气通过含有微细 小孔的滤器，只允许小于孔径的物体如液体和空气通过， 大于孔径的的物体不能通过。它们可用陶瓷、硅藻土、 石棉或玻璃屑等制成。主要用于一些不耐热的血清、毒 素、抗生素、药液、空气等除菌。一般不能除去病毒、 支原体和细菌的L型。
养基中菌落的数目及菌落的形态特点。
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（三）皮肤表面细菌的检查 1．将普通培养基分为三等份，将未洗的手指、用肥
皂洗过的手指、经上碘酊+75%酒精处理的手指在培养基 上轻涂。
2．将培养板置37℃培养箱24h，观察培养基中菌落 的数目及菌落的形态特点。
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第二节 外界因素对细菌的影响
细菌在自然界必然不断经受周围环境中各种因素的 影响。当环境适宜时，细菌能进行正常的新陈代谢而生 长繁殖；若环境条件变化，可引起细菌的代谢和其他性 状发生变异；若环境条件改变剧烈，可使细菌生长受到 抑制或导致死亡。
第六章外界因素对细菌的影响 PPT课件
➢低于最低生长温度时，微生物不 生长，温度过低，甚至会死亡。
➢超过最高生长温度时，微生物不
生长，温度过高，甚至会死亡。
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（一）高温对微生物的影响
1.影响
高温对微生物有明显的致死作用，其主要原因是高温能使蛋 白质变性或凝固，酶失去活性，核酸结构遭到破坏等，从而 导致其死亡。
★微生物对热的耐受力与以下因素有关:
(1)微生物种类及发育阶段 ► 嗜热菌比其它类型的菌体抗热 ► 有芽孢的细菌比无芽孢的抗热 ► 老龄菌比幼龄菌抗热
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(2)细菌对热的耐受力还受环境条件的影响
▪与培养基的营养成分有关—培养基中蛋白质含量高时比较耐热. ▪与pH 有关—pH适宜时不易死亡，pH不适宜时，容易死亡. ▪与水分有关—含水量大时容易死亡，含水量小时不容易死亡. ▪与含菌量有关 —含菌量高，抗热性增强，含菌量低，抗热性 差。 ▪与热处理时间有关—热处理时间长，微生物易死亡。
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高压蒸汽灭菌法
利用水的沸点随水蒸气压力的增加而上升，以达到100 ℃以上高温灭菌的方法。
方法：121℃（1kg/cm2或15磅/英寸2）维持15-20min。
115℃（0.75kg/cm2或11磅/英寸2）20-30min。
112℃（0.5kg/cm2或8磅/英寸2）20-30min。
应根据灭菌物品的性质或成分选择灭菌温度
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单门烤箱
双门烤箱
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电热干燥箱
back
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高压蒸汽灭菌法 最有效的灭菌方法 121℃ 20-30mim 煮沸消毒法 水煮100℃ 5mim(繁殖体)-2h(芽胞) 间歇灭菌法 反复多次流动蒸汽间歇加热灭菌 巴氏消毒法 较低的温度杀灭致病菌
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湿热灭菌与干热灭菌的比较 同一温度下，湿热灭菌比干热灭菌效果好
外界因素对细菌的影响实验报告
一、实验目的1. 了解外界因素对细菌生长、繁殖的影响。
2. 掌握不同外界因素对细菌生长速率和形态的影响。
3. 分析外界因素对细菌生理特性的影响。
二、实验原理细菌的生长、繁殖和生理特性受到多种外界因素的影响，如温度、pH值、营养物质、氧气、湿度等。
本实验通过模拟不同外界环境条件，观察细菌的生长情况，探讨外界因素对细菌的影响。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌等细菌菌种，牛肉膏蛋白胨培养基、琼脂、生理盐水、pH试纸等。
2. 实验仪器：恒温培养箱、显微镜、酒精灯、高压蒸汽灭菌器、无菌操作台、pH计等。
四、实验方法1. 分组实验：将金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌等菌种分别接种于牛肉膏蛋白胨培养基，分为以下五组：（1）温度组：分别在30℃、37℃、45℃恒温培养箱中培养；（2）pH值组：分别在pH 4.0、6.0、8.0条件下培养；（3）营养物质组：在添加和未添加牛肉膏蛋白胨培养基条件下培养；（4）氧气组：分别在有氧和无氧条件下培养；（5）湿度组：分别在干燥和湿润条件下培养。
2. 观察与记录：观察不同组别细菌的生长情况，包括菌落形态、生长速率、颜色等，并记录实验数据。
3. 数据分析：对实验数据进行分析，比较不同外界因素对细菌生长、繁殖的影响。
五、实验结果与分析1. 温度对细菌生长的影响：随着温度的升高，金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌的生长速率逐渐加快，菌落形态逐渐增大。
在45℃条件下，细菌生长最为旺盛。
2. pH值对细菌生长的影响：在适宜的pH值条件下，细菌生长良好；pH值过高或过低均会抑制细菌生长。
金黄色葡萄球菌在pH 6.0时生长最佳，大肠杆菌在pH 7.0时生长最佳。
3. 营养物质对细菌生长的影响：添加牛肉膏蛋白胨培养基的组别，细菌生长旺盛，菌落形态较大；未添加培养基的组别，细菌生长缓慢，菌落形态较小。
4. 氧气对细菌生长的影响：有氧条件下，金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌的生长速率较快；无氧条件下，细菌生长缓慢。
外界因素对细菌的影响实验报告
外界因素对细菌的影响实验报告摘要：本实验主要研究外界因素对细菌的影响，我们使用几种不同的方法研究了温度、pH值和紫外线对细菌的生长和复制的影响。
结果表明，在不同的温度下，细菌的生长和复制速率不同。
当温度较高时，细菌生长和复制速率较快。
在不同的pH值下，细菌的生长也有所不同。
细菌在pH值为7左右的中性条件下生长最好。
经过紫外线照射，细菌的生长也呈明显的受到抑制的趋势，紫外线照射的时间越长，细菌生长能力就越弱。
总的来说，外界因素对细菌的生长和复制有着显著的影响，我们需要了解这些影响以便更好地控制和使用细菌。
引言：细菌是一类单细胞原核生物，广泛存在于自然界中，在医学、环境科学等领域中有着广泛的应用。
对于细菌的生长和繁殖，其与环境因素密切相关。
本实验旨在研究外界因素对细菌生长和复制的影响，包括温度、pH值和紫外线照射等。
材料与方法：1. 材料：细菌溶液、培养基、三角量杯、试管、移液管、离心机、紫外线灯、温度控制箱、pH计、电子天平等。
2. 方法：(1) 温度对细菌的影响实验：准备好培养基和细菌溶液，分别取5ml细菌液，分别放入三个试管中，分别放置在20℃、30℃和40℃的温度箱中，过程中每隔1小时进行一次离心取样，记录细菌生长情况。
(2) pH值对细菌的影响实验：将细菌溶液分别放入pH为4、5、6、7、8、9的培养基中，混合均匀后，进行培养，观察48小时内细菌的生长情况。
(3) 紫外线对细菌的影响实验：在细菌培养基中加入适量的细菌液，用紫外线灯照射不同时间（0、10、20、30分钟），然后观察细菌生长情况。
结果：1. 温度对细菌的影响实验结果表明，在温度为20℃的条件下，细菌生长缓慢，到48小时时，只有非常少的细菌复制了。
在30℃的条件下，细菌生长得更快，到48小时时，有很多细菌繁殖了。
在40℃的条件下，细菌的生长呈明显的停滞，只有很少数的细菌繁殖了。
2. pH值对细菌的影响实验结果表明，在pH为7左右的条件下，细菌的生长最好，在48小时后，培养液中细菌数量大大增加。
微生物学检验外界因素对细菌的影响
噬菌体形态模式图
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毒性噬菌体的溶菌周期 课件制作 陆曙梅
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噬菌斑
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温和噬菌体
前噬菌体
溶原性细菌
温和噬菌体
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细菌的遗传和变异
细菌遗传变异类型
遗传型变异（基因型变异）
非遗传型变异遗（传表性型变变异异）非遗传性变异
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在测定致癌物质中的应用
凡能诱导细菌发生突变的物质都有可能 是致癌物质。
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在流行病学中的应用
分子生物学分析方法已被用于流行病学 调查
质粒指纹图（PFP） 对噬菌体的敏感性，对细菌素的敏感 性
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在基因工程中的应用
基因工程是根据遗传变异中细菌可因基 因转移和重组而获得新性状的原理设计 的
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滤过除菌
应用：用于不耐高温的血清、抗生素、 抗毒素、药液、空气的除菌
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化学因素对细菌的影响
常用消毒剂的杀菌机制 常用消毒剂种类 影响消毒剂消毒效果的因素
消毒剂的性质和浓度 温度和酸碱度 细菌的种类和数量 化学拮抗作用
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消毒灭菌效果检测
生物指标：嗜热脂肪芽孢杆菌、枯草杆 菌芽孢黑色变种 化学指标：硫磺
切取目的基因→连接到载体上→转移 到工程菌内，大量表达目的基因产物 目前已大量生产胰岛素、干扰素、多 种生长激素、rIL-2等细胞因子和乙肝 疫苗等生物制品
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F质粒的接合
Donor F+
F+
F-
F+
《医学微生物学》细菌的分布与外界因素对细菌的影响实验
《医学微生物学》细菌的分布与外界因素对细菌的影响实验[目的]1．掌握皮肤消毒方法。
2．掌握标准纸片扩散法(K-B法)的原理、操作方法、结果的判读与解释及其临床意义。
3．掌握纸片扩散法的质量控制方法。
了解空气、水中细菌的检查方法。
4．熟悉人体皮肤、咽喉部细菌检查方法。
5．熟悉紫外线灭菌方法。
6．了解高压蒸汽灭菌方法一、细菌的分布检查[材料]普通琼脂平板，1％高层琼脂，无菌试管，1毫升无菌吸管，无菌平皿。
[方法]1．空气中的细菌检查取琼脂平板一个，打开皿盖，暴露于空气中10分钟，然后盖好，在平皿底面注明地点、班组，放入37℃温箱内培养24小时后观察结果，计算菌落数，并观察不同的菌落形态。
2．污水和净水中细菌数的检查（1）用无菌试管分别采取自来水和未经净化消毒处理的污水各一管。
取自来水样时，须先将水龙头用酒精灯烧灼灭菌，再将龙头完全开放，放水5分钟，然后用无菌试管以无菌操作采集水样。
（2）用无菌吸管吸取自来水及经适当稀释的污水各1毫升，分别放入两个无菌平皿内。
（3）将已溶化并冷至约45℃（手握琼脂管感觉热而不烫手）的高层琼脂1支，倾注入平皿内，盖好平皿，立即将皿底贴桌面轻轻摇动，使琼脂与水样均匀混合后（但勿溢出于皿外），静置桌面，待琼脂凝固。
（4）标记，皿底向上置于37℃培养24小时，取出观察结果。
比较自来水及污水内生长的菌落数。
3．皮肤及飞沫中的细菌检查材料：普通琼脂平板，血琼脂平板。
方法：（1）皮肤细菌检查取普通琼脂平板一块，用手指轻轻涂抹培养基表面，置37℃温箱中培养24小时，观察结果。
（2）飞沫中的细菌检查取血琼脂平板一个，打开皿盖，将培养基面置于口腔前约10厘米处，用力咳嗽数次，约30秒钟，然后盖上皿盖，置37℃温箱培养24小时，观察结果。
二、外界因素对细菌的影响（一）高压蒸汽灭菌法（示教）[材料] 手提式高压蒸汽灭菌器、电炉等构造：手提式高压蒸汽灭菌器是一双层金属圆桶，外层坚厚，顶端有厚盖，盖边有翅状螺旋，借此紧闭此盖，防止蒸汽外溢。
外界因素对细菌的影响实验报告
外界因素对细菌的影响实验报告外界因素对细菌的影响实验报告引言：细菌是一类微生物，它们广泛存在于我们周围的环境中。
细菌的生长和繁殖受到许多外界因素的影响，包括温度、湿度、氧气浓度和营养物质等。
本实验旨在研究这些外界因素对细菌生长的影响，并探讨其机制。
实验方法：我们选择了一种常见的细菌株作为实验对象，将其分成多个培养皿，每个培养皿中均加入适量的培养基。
然后，我们对不同组的培养皿施加不同的外界因素，包括温度、湿度、氧气浓度和营养物质。
在一定时间内观察细菌的生长情况，并进行定量分析。
实验结果：1. 温度对细菌生长的影响：我们将细菌培养皿分为高温组、中温组和低温组。
结果显示，高温组的细菌生长速度最快，中温组次之，低温组最慢。
这是因为高温能够促进细菌代谢活动，加快细胞分裂和繁殖。
而低温则会抑制细菌的生长，使其代谢减缓。
2. 湿度对细菌生长的影响：我们将细菌培养皿分为高湿度组、中湿度组和低湿度组。
实验结果显示，高湿度组的细菌生长速度最快，中湿度组次之，低湿度组最慢。
这是因为湿度足够高时，细菌能够更好地吸收水分和营养物质，促进细胞的正常代谢和生长。
3. 氧气浓度对细菌生长的影响：我们将细菌培养皿分为高氧组、中氧组和低氧组。
结果显示，中氧组的细菌生长速度最快，高氧组次之，低氧组最慢。
这是因为细菌需要氧气参与细胞呼吸和能量代谢。
但过高或过低的氧气浓度都会对细菌的生长产生负面影响。
4. 营养物质对细菌生长的影响：我们将细菌培养皿分为富营养组、中营养组和贫营养组。
结果显示，富营养组的细菌生长速度最快，中营养组次之，贫营养组最慢。
这是因为富营养环境能够提供细菌所需的大量营养物质，满足其生长和繁殖的需要。
讨论与结论：通过本实验的结果，我们可以得出以下结论：1. 温度、湿度、氧气浓度和营养物质都是影响细菌生长的重要外界因素。
2. 不同的外界因素对细菌生长的影响程度不同，但一般来说，适宜的温度、湿度和氧气浓度以及富含营养物质的环境有利于细菌的生长和繁殖。
外界因素对微生物的影响PPT讲稿
二者比较：在同一温度下，后者效力比前者为大。
原因：（1）湿热中细菌菌体蛋白较易凝固； （2）湿热的穿透力比干热大； （3）湿热的蒸汽有潜热存在。
1.干热灭菌法
(1)火焰灭菌法 :火焰直接烧灼，如接种环 。
(2)热空气灭菌法 :
干热灭菌器适用于高温下不损坏、不变质的物品, 如玻璃器皿、瓷器等的灭菌。
（5）高压蒸汽灭菌法
高压蒸汽灭菌器：15磅/平 方英寸，121.3℃温度下维 持15～20min 。 一定要充分排除灭菌器内原 有的冷空气。用于普通培养 基、生理盐水、耐热药品、 手术敷料等。
手提式高压蒸汽灭菌器
四、光线
直射日光有强烈的杀菌作用，是天然的杀菌因素。 许多微生物在直射日光的照射下，半小时到数小时即 可死亡。芽胞对日光照射的抵抗力比繁殖体大得多， 往往需经20h才死亡。日光的杀菌效力因地、因时及 微生物所处环境不同而异 。日光光谱分为可见光线、 红外线和紫外线。
紫外线
波长200-300nm部分有杀菌作用。实验室常使用的紫外 线杀菌灯紫外线波长为253.7nm。常用于微生物实验室、 无菌室、手术室等的空气消毒，或用于不能用高温或化学药 品消毒的物品的表面消毒。还可用于诱变育种。 杀菌机理： （1）损害DNA构型，影响DNA复制和转录 （2） O2 O3 O 杀菌
外界因素对微生物的影响课件
物理因素对微生物的影响
物理因素
干燥 渗透压 温度 光线 射线 滤过除菌 超声波
一、干 燥
微生物在干燥的环境中失去大量水分，新陈代 谢便会发生障碍，甚至引起菌体蛋白质变性和由 于盐类浓度的增高而逐渐导致死亡。不同种类的 微生物对干燥的抵抗力差异很大。主要作用是抑 菌，用于菌种和食品的保藏。
微生物检验外界因素对细菌的影响
微生物检验外界因素对细菌的影响当前对人的身体疾病检测有严格的要求，在方案制定的过程中，需要和抗生素药物联合采用。
针对杀菌消炎以及疾病保证的治疗概况等，需要实施细菌的属性分析。
针对致病菌株的案例在后期治疗中，进行范围的设定。
长期采用抗生素药物时，部分案例产生耐药性。
在疾病的后期干预中，康复时间可能受到影响。
另外一方面，在抗生素药物的应用阶段，需要了解致病菌的繁殖情况，结合医院检验科的具体情况进行监测和指导。
随着医疗水平的提升，各种新型的医学技术与治疗方案被引入临床治疗当中，如介入性治疗、放射性治疗技术和化学药物治疗，虽然这些技术与治疗方案在疾病治愈方面更有效，但同时也会造成耐药菌株出现以及数量持续上升，降低药物的治疗效果。
因此，医院感染在很大程度上会影响到临床常规治疗的周期，不但会让患者在心理与生理上承受痛苦，还会加大患者的经济压力，另外也会造成卫生资源的浪费。
在现代医学界研究领域中，能够为临床感染的治疗提供重要参考数据的微生物检验已经成为被重点关注的内容。
另外，微生物检验还能让医生选择抗生素时更有针对性，剂量也更科学合理，从而避免抗生物滥用情况的发生。
只有控制抗生素滥用的情况才能更有效地提升抗生素的治疗效果，让病患早日身体康复。
因此，医院不仅要重视微生物检验的工作，还要要求医护人员必须具备有关抗生素药物的相关知识，能够对微生物检验的结果做出相应的判断。
通常，易感人群、传染源和传染途径是医院感染发生的三大环节，若想真正控制医院感染的出现就必须从这三个环节入手，而这三个环节的处理工作都离不开微生物检验。
当前，导致医院感染情况频发的因素有很多，如放射治疗技术、抗菌药物滥用、化学药物治疗、免疫抑制剂滥用和介入性治疗等。
借助微生物检验，临床医生就能通过诊断信息判断出导致患者感染的原因，并制定出相应的治疗方案。
若医院感染波及人数较多、情况比较严重时，医护人员要第一时间鉴定病原菌种。
微生物分离鉴定是对病原菌种鉴定的主要方法，相比之下，对病原菌型的鉴定方法比较多，如细菌素分析、分子分型、质粒图分析、血清学分型、噬菌体分析等。
实验——外界因素对细菌的影响
实验内容
物理消毒灭菌法 化学因素和生物因素对细菌的影响
目的要求
熟悉紫外线对细菌的杀灭作用。 初步掌握细菌对常用抗菌药物和化学
消毒剂敏感性测定的方法。 了解实验室常用灭菌器的使用方法。
一、紫外线对细菌的杀灭作用
【原理】 紫外线中波长为200～300nm者具有 杀菌能力。其中265～266nm的杀菌 作用最强，紫外线除日光中含有一部 分外，医学上使用的常以人工紫外线 灯产生；其杀菌机制是干扰细菌DNA 的合成。特点是穿透力较弱。
平板纸片法示意图
0.1％新洁尔灭 2%碘酒 1%龙胆紫
2%红汞
3．37℃孵育24小时，观察各消毒剂纸 片周围有无抑菌圈，比较各抑菌圈的 大小。
观察记录结果，并比较不同细对相同 化学消毒剂的敏感性以及同一细菌对 不同化学消毒剂的敏感性。
三、细菌对常用抗生素的敏感度测定
以滤纸圆片浸沾一定稀释度的药物， 贴附于已涂满被测细菌的琼脂平板培 养基上，孵育后，因药物的抑菌作用 及渗透性，纸片周围可以有抑菌圈出 现，据根抑菌圈的有无和大小，以测 知该菌对这些药物的敏感性，但准确 度不如试管法。
3．打开两皿皿盖，在离水银灯约1米处， 直接受紫外线照射30分钟后，以镊子 取出纸片，将纸片投放消毒缸内，盖 好皿盖，37℃孵育24小时后观察生长 情况。
观察记录结果
二、常见化学消毒剂的杀菌作用
【材料】 1．菌种：葡萄球菌、大肠杆菌18～24
小时肉汤培养基。 2．培养基：琼脂平板。 3．0.1％新洁尔灭、1％龙胆紫、2％ 碘
料、玻璃器材、传染性污物及细菌培 养物等都可用本法消毒灭菌。
（三）干热灭菌器
干热灭菌器（干烤箱）是由双层铁板制成 的长方形或正方形金属箱，外壁内层装有 隔热的石棉板。在烤箱中装置电热线圈， 上有小孔，按插温度计供通空气用，箱前 有铁门及玻璃门，箱内有金属板架数层， 电热烤箱的前下方装有温度调节器，可以 保持所需的温度（见图3-5）。
外界因素对细菌的作用实验报告
外界因素对细菌的作用实验报告摘要细菌广泛存在于我们周围的环境中，并且受到各种外界因素的影响。
本实验通过对不同外界因素对细菌生长和繁殖的影响进行观察和分析，旨在深入了解细菌的适应能力和生存机制。
在实验过程中，我们分别研究了温度、pH值和营养物质浓度对细菌生长的影响，并得出了一些有价值的结论。
实验结果表明外界因素对细菌生长具有显著影响，这对于我们在环境控制和疾病防控等方面具有重要意义。
1. 背景细菌是一类原核生物，对各种外界因素的响应非常敏感。
温度、pH值、营养物质等因素常常会对细菌的生长和繁殖产生显著影响。
了解这些外界因素对细菌的作用机制，不仅有助于我们更好地控制细菌的生长，还能为疾病防控提供重要参考依据。
2. 实验目的本实验的主要目的是通过测量和观察不同外界因素对细菌生长的影响，探究细菌对环境变化的适应能力，进一步了解细菌的生存机制。
3. 实验方法3.1 实验材料•细菌样品：选择一种常见的细菌菌株作为实验样品。
•培养基：提供适合细菌生长的培养基。
3.2 实验步骤1.温度对细菌生长的影响实验：–将培养基分装到不同的培养皿中。
–在不同温度条件下培养细菌样品，如25℃、37℃、50℃等。
–定期观察和记录细菌的生长情况。
2.pH值对细菌生长的影响实验：–将培养基的pH值调节到不同的水平。
–在不同pH值条件下培养细菌样品，如pH 5、pH 7、pH 9等。
–定期观察和记录细菌的生长情况。
3.营养物质浓度对细菌生长的影响实验：–将培养基中的某一种营养物质浓度逐渐增加或减少。
–在不同浓度条件下培养细菌样品。
–定期观察和记录细菌的生长情况。
4.实验对照组：–设置对照组，即在平衡外界因素的情况下培养细菌样品，作为参照。
4. 数据分析与结果4.1 温度对细菌生长的影响随着温度的升高，细菌的生长速度逐渐加快，最适生长温度也会变化。
在本实验中，我们观察到细菌在37℃条件下生长最好，生长速率最快。
4.2 pH值对细菌生长的影响细菌在不同pH值条件下的生长情况存在一定差异。
外界因素对细菌的影响
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有关概念
消毒： 消毒：杀死物体上病原微生物的方法 灭菌：杀死物体上所用微生物的方法。 灭菌：杀死物体上所用微生物的方法。 无菌及无菌操作： 无菌及无菌操作：物体上无活的微生物 存在称无菌， 存在称无菌，防止微生物进入机体或物 品的操作方法，称无菌操作。 品的操作方法，称无菌操作。 防腐： 防腐：防止或抑制微生物生长繁殖的方 法。
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物理因素对细菌的影响
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温度
高温杀菌机制： 高温杀菌机制：高温使菌体蛋白凝固变 酶的活性丧失，细菌代谢停止， 性，酶的活性丧失，细菌代谢停止，细 菌死亡 热力杀菌： 热力杀菌： 湿热灭菌法 干热灭菌法
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湿热灭菌
高压蒸汽灭菌法: 压力103.4kPa、温度 高压蒸汽灭菌法 压力 、 121.3 ℃，持续 ～30分钟 持续15～ 分钟 适用于耐高温、耐高压、 适用于耐高温、耐高压、耐潮湿的物品灭 菌 巴氏消毒法： 巴氏消毒法：61.1～62.8℃或71.1 ℃ ～ ℃ 煮沸法： 煮沸法：100 ℃ 流通蒸汽法:100 ℃ 流通蒸汽法 间歇灭菌法:< 连续3次 间歇灭菌法 100 ℃连续 次，适用于不耐 高温的营养物质灭菌。 高温的营养物质灭菌。
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紫外线杀菌
紫外线： 紫外线：210～300nm波长的紫外线有杀 ～ 波长的紫外线有杀 菌作用， 菌作用，265～266nm杀菌作用最强 ～ 杀菌作用最强 杀菌机制：干扰细菌DNA的复制。 的复制。 ★杀菌机制：干扰细菌 的复制 应用：空气消毒、 ★应用：空气消毒、物品表面消毒 电离辐射：用于不耐热的塑料注射器、 电离辐射：用于不耐热的塑料注射器、 导管等的消毒灭菌
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外界因素对微生物生长的影响实验报告
实验六外界因素对微生物生长的影响[实验目的]1、了解环境因素对微生物生长的影响的原理。
[实验原理]除营养条件因素外，影响微生物生长的环境因素（包括物理因素、化学因素和生物因素）很多，如许多物理因子（如温度、渗透压、紫外线、酸碱度、氧气等）、一些化学因子（如各类药品和抗生素等）对微生物的生长繁殖、生理生化过程均能产生很大的影响。
总之，一切不良的环境条件均能使微生物的生长受到抑制，甚至导致菌体死亡。
但是，一些能形成芽孢的微生物在不良环境下形成休眠体，它对恶劣环境有较强的耐受力和抵抗力。
因此，可以通过控制环境条件，使有害微生物的生长繁殖受到抑制，甚至将其彻底杀死；而对有益微生物的利用则可促使其更快地生长繁殖。
在这些环境因子中物理因素中的温度对微生物的影响最为明显。
不同的微生物生长的繁殖所需要的最适温度不同,根据微生物生长的最适温度范围,可分为高温菌、中温菌和低温菌。
自然界中绝大多数都属于中温菌。
不同的微生物对高温的抵抗力不同，芽孢对高温有强的抵抗能力。
化学药品中的抑菌剂和杀菌剂，有抑菌和杀菌作用。
有些菌类能产生抗生素或细菌素，它们的抗菌机制不同；有些干扰微生物细胞膜的功能，有些阻碍细胞壁合成，有些影响蛋白质或核酸的合成等。
有些植物或中药含有杀菌成分，称为植物抑菌素。
如大蒜、姜、葱、黄芪、金银花、板蓝根等。
[实验材料]1、菌种大肠杆菌、葡萄球菌、枯草杆菌的斜面培养物。
2、培养基普通肉汤、普通平板。
3、仪器和其他物品恒温培养箱、接种环、酒精灯、高压锅、水浴锅、三种消毒剂、圆滤纸片、镊子、药敏纸片等。
[实验内容]1、温度对细菌的影响湿热灭菌实验：通过煮沸灭菌和高压蒸汽灭菌验证高温对细菌的影响无菌勾取两种细菌，分别接种3支普通肉汤，做好标记。
做以下处理后，37℃18-24h 培养后观察结果。
（1）60℃15min（2）煮沸15min（3）15P 15min2、化学消毒剂对细菌的影响密集接种法接种细菌取两块无菌平板，用无菌接种环分别勾取81010和葡萄球菌（编号为8213）培养物少许，先在平板琼脂表面中央划一条线，垂直该线作平行密集划线，划满平板。
外界因素对细菌的影响实验报告
外界因素对细菌的影响实验报告细菌外界因素实验影响外界因素对细菌的影响影响细菌生长的因素篇一：实验微生物的细胞计数实验十微生物的细胞计数目的要求了解血球计数板的计数原理，掌握血球计数板的计数方法。
微生物个体生长的时间较短，很快进入分裂繁殖阶段，个体生长难以测定。
它们的生长一般以繁殖即群体生长作为微生物生长的指标。
群体生长表现为细胞数目的增加或细胞物质的增加。
测定数目的方法有显微镜直接计数法、平板计数法、光电比浊法等。
显微镜直接计数法是将小量待测样品的悬浮液置于具有确定面积和容积的血球计数板上，于显微镜下直接计数的一种简便、快速、直观的方法。
血球计数板是一块特制的载玻片，有四条竖槽和一条横槽。
横槽两边的平台上各有一个有九个大方格的方格网，中间大方格为计数室：边长为1mm，深为0.1mm，容积为0.1mm3。
计数室有两种规格：一是分为16个中方格，每中方格中有25个小方格；另一种是分为25个中方格，每中方格有16个小方格。
两种都共有400个小方格。
实验内容1、镜检计数室对计数板进行镜检。
若有污物，则用自来水冲洗，用电吹风吹干后才能进行计数。
2、加样品在血球计数板上盖上盖玻片, 用滴管将摇匀的酵母菌液由盖玻片边的小槽滴一小滴,菌液会自动进入计数室，静置5分钟。
3、计数将血球计数板置于载物台上，先用低倍镜找到计数室的位置，再换高倍镜计数。
每计数室计5个中格（四角和中间）。
计数原则：计上不计下，计左不计右。
芽体占母细胞一半时算一个。
数出5个中方格中的总菌数A，若菌液的稀释倍数为B，则计算公式如下：(1) 25个中方格的计数板计算公式(2) 16个中方格的计数板计算公式(4) 清洗血球计数板计数后将血球计数板用自来水冲洗干净，勿用硬物刷，吹干后镜检。
若不干净，则必须重复洗涤干净为止。
实验十一外界因素对细菌的影响实验目的：1、了解紫外线杀菌原理及特点。
2、了解药物敏感实验的操作与判断。
3、学会对单糖发酵分解产物的观察。
动物微生物学及免疫学课件-外界因素对细菌的影响-PPT课件
利用密闭高压蒸汽灭菌锅进行灭菌 加热后随着锅内的压力持续必增高， 温度随之上升，杀菌力亦随之增强， 而达到杀菌和杀灭芽胞的目的。 常用15磅（121℃）30min
• 灭菌对象
普通培养基 生理盐水 玻璃器皿 手术器械 工作服 实验动物尸体
第二节 化学因素对细菌的影响
一、消毒剂 消毒剂使用范围： 体表（皮肤、粘膜、伤口） 器械 排泄物 周围环境
笼或阿诺氏（Arnold）流通蒸汽 灭菌器，在1个大气压下，用 100℃左右的水蒸汽，30min，可 杀灭繁殖体。用于食品、食具及 不耐用高温的物品消毒。
③间隙灭菌法：
• 利用连续3次的流通蒸汽消毒法， 达到彻底 灭菌的目的。即将待灭菌物品放入蒸笼（灭 菌器）内，加热（约100℃）15-30min，取 出置室温24h，次日重复灭菌。连续3次（10 磅20min）。 • 用于一些不宜100℃以上，温度灭菌物质， 以达到杀灭芽胞的目的。常用于含糖、牛乳、 血清等培养基的灭菌。
概念
消毒： 指用化学或物理的方法，杀灭物体中 的病原微生物的方法。 灭菌： 指用物理或化学的方法，杀灭物体中 所有微生物的方法。 防腐： 指用化学药品防止或抑制细菌生长繁 殖的方法（又称抑菌）。
无菌： 是没有活菌的意思，指采取杜绝一切微 生物进入动物体或物体的方法（无菌技 术或无菌操作）这是防止手术感染及人 工培养杜绝杂菌污染的有效措施。
（二）碱类消毒剂 碱类消毒剂对所有细菌及芽胞和 病毒都有杀灭作用。尤其常用于病毒 的消毒： 10-20%石灰乳 20-30%草木灰水 1-3% NaOH
（三）其它常用消毒剂
0.1%升汞用于非金属器械消毒 0.1%KMnO4和3%H2O2用于粘膜和创伤消毒 70－75%乙醇用于体表和体温表的消毒 1－3%碘液用于粘膜消毒 5－10%碘液可杀灭放线菌
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光复活现象：经紫外线照射的细菌，在可见光下，光可以
激活DNA修复酶，该酶能修复DNA上的损伤，使细菌的突 变率或死亡率下降。
细菌对紫外线的抵抗力与以下因素有关：
▪照射时间：照射时间长，死亡率高。
▪照射强度：照射强度大，死亡率高。
▪细菌种类及生长阶段：革兰氏阳性菌比阴性菌抗性强；多 倍体比单倍体抗性强；芽孢比营养细胞抗性强；
五、过滤
►滤菌器:用物理阻留的方法，将液体或空气中
的细菌除去,以达到除菌目的。含有微细小孔 <0.22微米,只允许液体或气体通过，而大于孔 径的细菌等颗粒不能通过。
►适用范围：血清、毒素、抗生素以及空气等
的除菌。
采用滤孔比细菌还小的筛子或滤膜作成各种过滤器 ，当空气或液体流经筛子或滤膜时，细菌不能通过 滤孔而被阻留在一侧，从而达到除菌的目的。但不 能除去病毒。 实验室中常用的滤器： 滤膜过滤器、蔡氏过滤器、玻璃过滤器、磁土过滤 器等。 过滤介质：醋酸纤维素膜、硝酸纤维素膜、聚丙烯 膜；以及石棉板、烧结陶瓷、烧结玻璃等。 滤器孔径：常用0.22 μm 、0.45 μm 。 应用：对于含酶、血清、维生素和氨基酸等热敏物 质除菌。
低温与干燥
冷冻真空干燥法： 在低温状态下真空抽去水分
用途：保存菌种
三、渗透压
细菌处于低渗液中，细胞会吸水膨胀乃至 破裂，称胞浆溢出。
细胞处于高渗液中会脱水，引起细胞质和 细胞壁分离，称质壁分离，导致死亡。
等渗溶液对微生物生长有利。
渗透压与溶质的种类及浓度有关:
o 溶质浓度高,渗透压大.
o不同种类的溶质形成的渗透压大小不同,小分子溶液比大 分子溶液渗透压大；离子溶液比分子溶液渗透压大；相同 含量的盐、糖、蛋白质所形成的溶液渗透压为 盐>糖>蛋 白质。
四、辐射
辐射：是能量通过空间传递的一种物理现 象。 与微生物有关的辐射： 电磁辐射：可见光、紫外光。 电离辐射：χ、γ、β射线 。
（一）电磁辐射：
1、可见光：
波长在400—800nm的电磁辐射为可见光。
▪大部分微生物不需要光，少数菌需要光作为能源。
▪一般来讲，可见光对大多数化能细菌没有影响， 但是，太强或连续长时间照射也会导致细菌死亡 （光氧化作用）。
（一）消毒剂和防腐剂
消毒剂:可以抑制或杀灭微生物，但对人体也可能产生有害作用 的化学试剂。—主要用于抑制或杀灭物体表面、器械、排泄物 和环境中的微生物。 防腐剂:可以抑制或阻止微生物生长，但对人体或动物体的毒性 较低的化学药剂.——用于肌体表面，如皮肤、粘膜、伤口等处 防止感染，也有的用于食品、饮料药品的防腐作用。 ☆但现时消毒剂和防腐剂间的界限已并不很严格.
► 无菌(asepsis) 不存在活菌的意思。防止微生物进入机体 或其他物品的操作方法称为无菌操作。(aseptic method)
第六章 外界因素对细菌的影响
第一节 理化因素对细菌的影响
物理因素 温度 干燥 渗透压 辐射 过滤 化学因素 化学消毒剂 化学疗剂
一、温度对微生物的影响
115℃（0.75kg/cm2或11磅/英寸2）20-30min。 112℃（0.5kg/cm2或8磅/英寸2）20-30min。 应根据灭菌物品的性质或成分选择灭菌温度 例如：生理盐水、营养琼脂等培养基用121℃。 含葡萄糖、乳糖、氨基酸等培养基用112℃。 •适注用意：事耐项高：温物品，玻璃仪器、含水或不含水的物品。 •排净冷空气； •灭菌终了，缓慢降压； •灭菌结束，趁热取出物品。
干燥细胞比湿润细胞抗性强。
应用：由于穿透力差，只适用于物体表面以及空气、水的
消毒杀菌，也用于诱变育种。
（二）电离辐射：
χ、γ、β射线 ，波长短，能量高，有较强的杀伤力。
作用原理 ：可引起水和其他物质的电离，产生游离 基，使核酸、蛋白质或酶发生变化，造成细胞损伤 或死亡。
特点：穿透力强，非专一性，作用于一切细胞成分， 对所有生物均有杀伤作用。 应用：用于杀菌或菌种诱变。
二、干燥
水分是微生物的正常生命活动必不可少的。 干燥会导致细胞失水而造成代谢停止以致死亡。
微生物的种类，环境条件，干燥的程度等 均影响对微生物杀灭的效果。休眠孢子抗干燥 能力也很强，在干燥条件下可长期不死，这一 特性已用于菌种保藏，如用砂土管来保藏有孢 子的菌种。
在日常生活中也常用烘干、晒干和熏干等 方法来保存食物。
2、紫外线（ＵＶ）
波长在100 — 400nm的电磁辐射为紫外线。
紫外线杀菌或诱变原理：
▪紫外线作用于DNA ，使其产生胸腺嘧啶二聚体，引起 DNA结构变形，阻碍正常的碱基配对，从而造成细菌变异 或死亡。 ▪紫外线会使空气中的分子氧变成臭氧，臭氧释放的原子氧 有杀菌作用。 其中波长在260—280nm处的紫外线杀菌力最强。主要因 为核酸（DNA、RNA）的吸收峰为260nm，蛋白质的吸 收峰为280nm。
➢应用:适用于不耐高温的物品灭菌，如不适于 高压灭菌的特殊培养基、药品的灭菌。缺点是 麻烦、费时。
D、巴氏消毒法(pasteurization)
是食品（牛奶）酿造（啤酒）工业中常用的
方法。
► 低温长时法(Low temperature long time,LTLT)；63-65℃处理30min
► 高温瞬时法 （Hightemperatureshorttime,HTST):71 -72℃处理15s
实验室常见滤过除菌装置
滤菌器
第三章 外界因素对微生物的影响
六 、其他物理因素
► 超声波 频率在2万-20万hz的声波称为超声波。超声
波是由超声波发生器产生的，对细胞有破坏作 用，能使大多数细胞裂解死亡。细菌和酵母菌 在超声波作用下于几十分钟内死亡。小型病毒、 芽孢对超声波有抵抗力。
用途 未应用于消毒灭菌。主要用于裂解细胞， 提取细胞组分等。
第六章 外界因素对微生物的影响源自► 消毒(disinfection) 用物理或化学方法杀灭物体上的病原 微生物，用来消毒的药物叫消毒剂。
► 灭菌(sterilization) 用物理或化学方法杀灭物体上所有微 生物。包括杀灭细菌芽胞在内的全部病原微生物和非病原 微生物。
► 防腐(antisepsis) 用化学药品或物理方法防止和抑制微 生物的方法;用来防腐的药品称作防腐剂。
超声波破碎仪
微 波
从几百兆赫至几十万兆赫频率的无线电波称 为微波。微波灭菌，主要是利用微波的加热作用 完成（交变电场，分子旋转振动、分子相互作用 产生摩擦力，分子克服摩擦力产生热量，使物品 升温，起加热灭菌作用）。
用途 这种灭菌法，需时短、加热均匀。可
用于非金属医药用品等的灭菌。
微波炉
二 化学因素对细菌的影响
大肠杆菌的传代时间:
►10℃
860min
►20℃
90min
►30℃
29min
►38℃
17.5min
►45℃
20min
►47.5℃
77min
温度对微生物生长的影响
温度是影响微生物生长的最重要因素之一。
温度对微生物的影响具体表现在：
➢影响酶活性，温度变化影响酶促反应速率，最 终影响细胞合成。
➢影响细胞膜的流动性，温度高，流动性大，有 利于物质的运输，温度低，流动性降低，不利于 物质运输，因此，温度变化影响营养物质的吸收 与代谢产物的分泌。
双门烤箱
电热干燥箱
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高压蒸汽灭菌法 最有效的灭菌方法 121℃ 20-30mim 煮沸消毒法 水煮100℃ 5mim(繁殖体)-2h(芽胞) 间歇灭菌法 反复多次流动蒸汽间歇加热灭菌
巴氏消毒法 较低的温度杀灭致病菌
湿热灭菌与干热灭菌的比较 同一温度下，湿热灭菌比干热灭菌效果好
原 因
1、湿热中细菌菌体蛋白较易凝固
▪干燥热空气灭菌法(hot-airoven)：将物品放入烘箱内，然后 升温至160℃—170℃，维持1—2小时。
✓适用范围:玻璃、陶瓷和金属物品的灭菌，不适合液体样 品， 及棉花、纸张、纤维和橡胶类物质的灭菌。 ✓特点：由于空气传热穿透力差，菌体在脱水状态下不易杀死 ，所以温度高、时间长。
单门烤箱
(1)微生物种类及发育阶段 ► 嗜热菌比其它类型的菌体抗热 ► 有芽孢的细菌比无芽孢的抗热 ► 老龄菌比幼龄菌抗热
(2)细菌对热的耐受力还受环境条件的影响
▪与培养基的营养成分有关—培养基中蛋白质含量高时比较耐热. ▪与pH 有关—pH适宜时不易死亡，pH不适宜时，容易死亡. ▪与水分有关—含水量大时容易死亡，含水量小时不容易死亡. ▪与含菌量有关 —含菌量高，抗热性增强，含菌量低，抗热性 差。 ▪与热处理时间有关—热处理时间长，微生物易死亡。
➢低于最低生长温度时，微生物不 生长，温度过低，甚至会死亡。
➢超过最高生长温度时，微生物不 生长，温度过高，甚至会死亡。
（一）高温对微生物的影响
1.影响
高温对微生物有明显的致死作用，其主要原因是高温能使蛋 白质变性或凝固，酶失去活性，核酸结构遭到破坏等，从而 导致其死亡。
★微生物对热的耐受力与以下因素有关:
► 超高温巴斯德灭菌法 (Ultrapasteurization):让液体食品停留在 132℃左右1-2s，急剧冷却至75℃，经匀质 化后冷却至20℃。
1.Pasteurized sterilized fresh milk line； 2.Super high temp equipment of Sweden
➢影响物质的溶解度，对生长有影响。
微生物生长的三个温度基点
从微生物整体来看:
生长的温度范围一般在-10℃~100℃
极端下限为-30℃，极端上限为105~300℃
但对于特定的某一种微生物：
只能在一定温度范围内生长，在这个范围内，每种微生物都有 自己的生长温度三基点，即最低、最适、最高生长温度
➢处于最适生长温度时，生长速度 最快，代时最短。