(优选)外界因素对细菌的影响
外界因素对细菌的影响
利用密闭高压蒸汽灭菌锅进行灭菌 加热后随着锅内的压力持续必增高， 温度随之上升，杀菌力亦随之增强， 而达到杀菌和杀灭芽胞的目的。 常用15磅（121℃）30min
• 灭菌对象
普通培养基 生理盐水 玻璃器皿 手术器械 工作服 实验动物尸体
第二节 化学因素对细菌的影响
一、消毒剂 消毒剂使用范围： 体表（皮肤、粘膜、伤口） 器械 排泄物 周围环境
第四章 外界环境因素对细菌的影响
致病菌可随污染的环境经一定途径侵 入机体引起疾病（传染病）；又可从患 病动物体、带菌动物、及病亡动物体排 出污染环境。因而，细菌在自然界中受 许多环境因素的影响，其生命活动与外 界因素有着及其密切的关系。
当环境条件适宜时，能促进细菌的生长繁 殖，当环境条件改变时，其代谢随之发生 相应变化。 由于外因素作用的强度和时间的不同，可 引起细菌的变异、生长繁殖抑制、甚至死 亡。
低温常用于保存菌种。 但是，反复冻融对微生物不宜。 各种细菌对低温的抵抗力亦不同。
㈡ 高温对细菌的影响
高温对细菌有明显的至死作用。
影响高温灭菌的因素： 细菌对高温的耐受性与细菌种类、 发育时期、菌体浓度及细菌所处界质 有关。 分类
1、干热灭菌法：
灭菌对象为玻璃器皿、金属器械及 不宜遇水的油、脂、凡士林等。 • 分类： 烧灼、焚烧灭菌法 热空气灭菌法 红外线、微波
（二）碱类消毒剂 碱类消毒剂对所有细菌及芽胞和 病毒都有杀灭作用。尤其常用于病毒 的消毒： 10-20%石灰乳 20-30%草木灰水 1-3% NaOH
（三）其它常用消毒剂
0.1%升汞用于非金属器械消毒 0.1%KMnO4和3%H2O2用于粘膜和创伤消毒 70－75%乙醇用于体表和体温表的消毒 1－3%碘液用于粘膜消毒 5－10%碘液可杀灭放线菌
第二节 外界因素对细菌的影响
第二节外界因素对细菌的影响细菌在自然界必然不断经受周围环境中各种因素的影响。
当环境适宜时，细菌能进行正常的新陈代谢而生长繁殖；若环境条件变化，可引起细菌的代谢和其他性状发生变异；若环境条件改变剧烈，可使细菌生长受到抑制或导致死亡。
因此掌握微生物对周围环境的依赖关系，在医疗实践中，一方面可创造有利条件，促进微生物的生长繁殖，从病理材料中分离培养病原微生物，有助于传染病的诊断以及制备疫苗，来预防某些传染病；另一方面，也可利用环境对细菌不利因素，抑制或杀灭病原微生物，以达到消毒灭菌的目的。
本节重点介绍外界环境对细菌不利因素，提高对消毒灭菌的认识以便在实际工作中加以应用。
消毒（Disinfection）杀灭病原微生物的方法。
用以消毒的药物称为消毒剂(Disinfectants)一般消毒剂在常用浓度下，只对细菌繁殖体有效。
对于芽胞则需要提高消毒剂的浓度和延长作用的时间。
灭菌（Sterilization）杀灭物体上所有的微生物（包括病原体和非病原体的繁殖体和芽胞）的方法。
因此，灭菌比消毒的要求高；但在日常生活中，消毒和灭菌这两个术语往往通用。
无菌（Asepsis）物体上或容器内无活菌存在的意思。
无菌操作是防止微生物进入机体或其他物品的操作技术。
例如，进行外科手术或微生物学实验时，须注意无菌操作。
防腐（Antisepsis）防止或抑制微生物生长繁殖的方法。
用于防腐的化学药物称为防腐剂。
许多药物在低浓度时只有抑菌作用，浓度增高或延长作用时间，则有杀菌作用。
消毒与灭菌技术的选择，取决于多种因素。
在实际工作中应根据消毒灭菌的对象和目的要求不同，以及条件的不同，选择不同的合适方法。
一、物理因素各种物理因素对细菌都能产生一定的影响作用。
（一）热力灭菌高温对细菌有明显的致死作用。
热力灭菌主要是利用高温使菌体变性或凝固，酶失去活性，而使细菌死亡。
但是，更细微的变化已发生于细菌凝固之前。
有人认为DNA单螺旋的断裂可能是主要的致死因素。
第六章外界因素对细菌的影响 PPT课件
➢低于最低生长温度时，微生物不 生长，温度过低，甚至会死亡。
➢超过最高生长温度时，微生物不
生长，温度过高，甚至会死亡。
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（一）高温对微生物的影响
1.影响
高温对微生物有明显的致死作用，其主要原因是高温能使蛋 白质变性或凝固，酶失去活性，核酸结构遭到破坏等，从而 导致其死亡。
★微生物对热的耐受力与以下因素有关:
(1)微生物种类及发育阶段 ► 嗜热菌比其它类型的菌体抗热 ► 有芽孢的细菌比无芽孢的抗热 ► 老龄菌比幼龄菌抗热
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(2)细菌对热的耐受力还受环境条件的影响
▪与培养基的营养成分有关—培养基中蛋白质含量高时比较耐热. ▪与pH 有关—pH适宜时不易死亡，pH不适宜时，容易死亡. ▪与水分有关—含水量大时容易死亡，含水量小时不容易死亡. ▪与含菌量有关 —含菌量高，抗热性增强，含菌量低，抗热性 差。 ▪与热处理时间有关—热处理时间长，微生物易死亡。
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高压蒸汽灭菌法
利用水的沸点随水蒸气压力的增加而上升，以达到100 ℃以上高温灭菌的方法。
方法：121℃（1kg/cm2或15磅/英寸2）维持15-20min。
115℃（0.75kg/cm2或11磅/英寸2）20-30min。
112℃（0.5kg/cm2或8磅/英寸2）20-30min。
应根据灭菌物品的性质或成分选择灭菌温度
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单门烤箱
双门烤箱
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电热干燥箱
back
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高压蒸汽灭菌法 最有效的灭菌方法 121℃ 20-30mim 煮沸消毒法 水煮100℃ 5mim(繁殖体)-2h(芽胞) 间歇灭菌法 反复多次流动蒸汽间歇加热灭菌 巴氏消毒法 较低的温度杀灭致病菌
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湿热灭菌与干热灭菌的比较 同一温度下，湿热灭菌比干热灭菌效果好
外界因素对细菌的影响实验报告
一、实验目的1. 了解外界因素对细菌生长、繁殖的影响。
2. 掌握不同外界因素对细菌生长速率和形态的影响。
3. 分析外界因素对细菌生理特性的影响。
二、实验原理细菌的生长、繁殖和生理特性受到多种外界因素的影响，如温度、pH值、营养物质、氧气、湿度等。
本实验通过模拟不同外界环境条件，观察细菌的生长情况，探讨外界因素对细菌的影响。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌等细菌菌种，牛肉膏蛋白胨培养基、琼脂、生理盐水、pH试纸等。
2. 实验仪器：恒温培养箱、显微镜、酒精灯、高压蒸汽灭菌器、无菌操作台、pH计等。
四、实验方法1. 分组实验：将金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌等菌种分别接种于牛肉膏蛋白胨培养基，分为以下五组：（1）温度组：分别在30℃、37℃、45℃恒温培养箱中培养；（2）pH值组：分别在pH 4.0、6.0、8.0条件下培养；（3）营养物质组：在添加和未添加牛肉膏蛋白胨培养基条件下培养；（4）氧气组：分别在有氧和无氧条件下培养；（5）湿度组：分别在干燥和湿润条件下培养。
2. 观察与记录：观察不同组别细菌的生长情况，包括菌落形态、生长速率、颜色等，并记录实验数据。
3. 数据分析：对实验数据进行分析，比较不同外界因素对细菌生长、繁殖的影响。
五、实验结果与分析1. 温度对细菌生长的影响：随着温度的升高，金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌的生长速率逐渐加快，菌落形态逐渐增大。
在45℃条件下，细菌生长最为旺盛。
2. pH值对细菌生长的影响：在适宜的pH值条件下，细菌生长良好；pH值过高或过低均会抑制细菌生长。
金黄色葡萄球菌在pH 6.0时生长最佳，大肠杆菌在pH 7.0时生长最佳。
3. 营养物质对细菌生长的影响：添加牛肉膏蛋白胨培养基的组别，细菌生长旺盛，菌落形态较大；未添加培养基的组别，细菌生长缓慢，菌落形态较小。
4. 氧气对细菌生长的影响：有氧条件下，金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌的生长速率较快；无氧条件下，细菌生长缓慢。
外界因素对细菌的影响实验报告
外界因素对细菌的影响实验报告摘要：本实验主要研究外界因素对细菌的影响，我们使用几种不同的方法研究了温度、pH值和紫外线对细菌的生长和复制的影响。
结果表明，在不同的温度下，细菌的生长和复制速率不同。
当温度较高时，细菌生长和复制速率较快。
在不同的pH值下，细菌的生长也有所不同。
细菌在pH值为7左右的中性条件下生长最好。
经过紫外线照射，细菌的生长也呈明显的受到抑制的趋势，紫外线照射的时间越长，细菌生长能力就越弱。
总的来说，外界因素对细菌的生长和复制有着显著的影响，我们需要了解这些影响以便更好地控制和使用细菌。
引言：细菌是一类单细胞原核生物，广泛存在于自然界中，在医学、环境科学等领域中有着广泛的应用。
对于细菌的生长和繁殖，其与环境因素密切相关。
本实验旨在研究外界因素对细菌生长和复制的影响，包括温度、pH值和紫外线照射等。
材料与方法：1. 材料：细菌溶液、培养基、三角量杯、试管、移液管、离心机、紫外线灯、温度控制箱、pH计、电子天平等。
2. 方法：(1) 温度对细菌的影响实验：准备好培养基和细菌溶液，分别取5ml细菌液，分别放入三个试管中，分别放置在20℃、30℃和40℃的温度箱中，过程中每隔1小时进行一次离心取样，记录细菌生长情况。
(2) pH值对细菌的影响实验：将细菌溶液分别放入pH为4、5、6、7、8、9的培养基中，混合均匀后，进行培养，观察48小时内细菌的生长情况。
(3) 紫外线对细菌的影响实验：在细菌培养基中加入适量的细菌液，用紫外线灯照射不同时间（0、10、20、30分钟），然后观察细菌生长情况。
结果：1. 温度对细菌的影响实验结果表明，在温度为20℃的条件下，细菌生长缓慢，到48小时时，只有非常少的细菌复制了。
在30℃的条件下，细菌生长得更快，到48小时时，有很多细菌繁殖了。
在40℃的条件下，细菌的生长呈明显的停滞，只有很少数的细菌繁殖了。
2. pH值对细菌的影响实验结果表明，在pH为7左右的条件下，细菌的生长最好，在48小时后，培养液中细菌数量大大增加。
环境因素对细菌生长与繁殖的影响
环境因素对细菌生长与繁殖的影响细菌是一种微小的单细胞生物体，它们广泛存在于自然界中，无处不在。
一般来说，细菌是靠环境中的有机物进行代谢和生长繁殖的。
不同的环境条件会对细菌生长和繁殖造成影响，因此了解环境因素对细菌的影响有助于我们更好地控制细菌生长和遏制病原微生物传播，保障公众健康。
环境温度环境温度对细菌生长和繁殖具有非常大的影响。
一般来说，细菌在适宜的温度下生长最快，即在37°C左右。
对于各种不同的细菌，它们的适宜生长温度也有所不同。
例如，酸奶中的乳酸菌需要在温度为42°C到46°C之间生长，而耐热菌则可以在60°C甚至更高的温度下生长。
温度的影响还表现在繁殖速率上。
在适宜温度下，细菌的繁殖速率通常很快，一些细菌甚至可以在短短几小时内实现繁殖。
相反，在温度较低或较高的环境下，细菌的繁殖速率则会明显减慢甚至停止。
对于感染性病菌来说，这意味着我们可以通过调节温度限制它们的生长和传播。
环境湿度除了温度，环境湿度也是影响细菌生长和繁殖的重要因素。
一般来说，湿度过低会导致细胞脱水，从而抑制代谢和生长繁殖；相反，湿度过高则有利于许多细菌的生长繁殖，这是因为水分可以提供细菌生长所必需的营养成分，同时水分还可以带走一些细菌代谢产物。
要控制细菌的生长和繁殖，我们需要把握一个适宜的湿度范围。
在医院和食品加工场所等环境中，一般会使用空气调节设备来维护适宜的湿度范围。
环境气味我们周围的气味也会影响细菌的生长和繁殖。
一些化学物质会发出刺激性的气味，这些气味可能会让细菌的代谢调节受到干扰，从而影响细菌的生长和繁殖。
此外，在一些对细菌有害的化学物质存在的环境中，我们也可能通过气味判断到这一点。
例如，一些消毒剂会发出强烈的气味，告诉我们它们正在杀死周围的细菌。
环境污染环境污染是影响细菌生长和繁殖的另一个关键因素。
许多细菌生长的环境都会存在各种各样的细菌、真菌、病毒和化学物质，这些物质可能会影响细菌的健康和生长繁殖。
外界因素对细菌的影响实验报告
外界因素对细菌的影响实验报告外界因素对细菌的影响实验报告引言：细菌是一类微生物，它们广泛存在于我们周围的环境中。
细菌的生长和繁殖受到许多外界因素的影响，包括温度、湿度、氧气浓度和营养物质等。
本实验旨在研究这些外界因素对细菌生长的影响，并探讨其机制。
实验方法：我们选择了一种常见的细菌株作为实验对象，将其分成多个培养皿，每个培养皿中均加入适量的培养基。
然后，我们对不同组的培养皿施加不同的外界因素，包括温度、湿度、氧气浓度和营养物质。
在一定时间内观察细菌的生长情况，并进行定量分析。
实验结果：1. 温度对细菌生长的影响：我们将细菌培养皿分为高温组、中温组和低温组。
结果显示，高温组的细菌生长速度最快，中温组次之，低温组最慢。
这是因为高温能够促进细菌代谢活动，加快细胞分裂和繁殖。
而低温则会抑制细菌的生长，使其代谢减缓。
2. 湿度对细菌生长的影响：我们将细菌培养皿分为高湿度组、中湿度组和低湿度组。
实验结果显示，高湿度组的细菌生长速度最快，中湿度组次之，低湿度组最慢。
这是因为湿度足够高时，细菌能够更好地吸收水分和营养物质，促进细胞的正常代谢和生长。
3. 氧气浓度对细菌生长的影响：我们将细菌培养皿分为高氧组、中氧组和低氧组。
结果显示，中氧组的细菌生长速度最快，高氧组次之，低氧组最慢。
这是因为细菌需要氧气参与细胞呼吸和能量代谢。
但过高或过低的氧气浓度都会对细菌的生长产生负面影响。
4. 营养物质对细菌生长的影响：我们将细菌培养皿分为富营养组、中营养组和贫营养组。
结果显示，富营养组的细菌生长速度最快，中营养组次之，贫营养组最慢。
这是因为富营养环境能够提供细菌所需的大量营养物质，满足其生长和繁殖的需要。
讨论与结论：通过本实验的结果，我们可以得出以下结论：1. 温度、湿度、氧气浓度和营养物质都是影响细菌生长的重要外界因素。
2. 不同的外界因素对细菌生长的影响程度不同，但一般来说，适宜的温度、湿度和氧气浓度以及富含营养物质的环境有利于细菌的生长和繁殖。
微生物检验外界因素对细菌的影响
微生物检验外界因素对细菌的影响当前对人的身体疾病检测有严格的要求，在方案制定的过程中，需要和抗生素药物联合采用。
针对杀菌消炎以及疾病保证的治疗概况等，需要实施细菌的属性分析。
针对致病菌株的案例在后期治疗中，进行范围的设定。
长期采用抗生素药物时，部分案例产生耐药性。
在疾病的后期干预中，康复时间可能受到影响。
另外一方面，在抗生素药物的应用阶段，需要了解致病菌的繁殖情况，结合医院检验科的具体情况进行监测和指导。
随着医疗水平的提升，各种新型的医学技术与治疗方案被引入临床治疗当中，如介入性治疗、放射性治疗技术和化学药物治疗，虽然这些技术与治疗方案在疾病治愈方面更有效，但同时也会造成耐药菌株出现以及数量持续上升，降低药物的治疗效果。
因此，医院感染在很大程度上会影响到临床常规治疗的周期，不但会让患者在心理与生理上承受痛苦，还会加大患者的经济压力，另外也会造成卫生资源的浪费。
在现代医学界研究领域中，能够为临床感染的治疗提供重要参考数据的微生物检验已经成为被重点关注的内容。
另外，微生物检验还能让医生选择抗生素时更有针对性，剂量也更科学合理，从而避免抗生物滥用情况的发生。
只有控制抗生素滥用的情况才能更有效地提升抗生素的治疗效果，让病患早日身体康复。
因此，医院不仅要重视微生物检验的工作，还要要求医护人员必须具备有关抗生素药物的相关知识，能够对微生物检验的结果做出相应的判断。
通常，易感人群、传染源和传染途径是医院感染发生的三大环节，若想真正控制医院感染的出现就必须从这三个环节入手，而这三个环节的处理工作都离不开微生物检验。
当前，导致医院感染情况频发的因素有很多，如放射治疗技术、抗菌药物滥用、化学药物治疗、免疫抑制剂滥用和介入性治疗等。
借助微生物检验，临床医生就能通过诊断信息判断出导致患者感染的原因，并制定出相应的治疗方案。
若医院感染波及人数较多、情况比较严重时，医护人员要第一时间鉴定病原菌种。
微生物分离鉴定是对病原菌种鉴定的主要方法，相比之下，对病原菌型的鉴定方法比较多，如细菌素分析、分子分型、质粒图分析、血清学分型、噬菌体分析等。
实验——外界因素对细菌的影响
实验内容
物理消毒灭菌法 化学因素和生物因素对细菌的影响
目的要求
熟悉紫外线对细菌的杀灭作用。 初步掌握细菌对常用抗菌药物和化学
消毒剂敏感性测定的方法。 了解实验室常用灭菌器的使用方法。
一、紫外线对细菌的杀灭作用
【原理】 紫外线中波长为200～300nm者具有 杀菌能力。其中265～266nm的杀菌 作用最强，紫外线除日光中含有一部 分外，医学上使用的常以人工紫外线 灯产生；其杀菌机制是干扰细菌DNA 的合成。特点是穿透力较弱。
平板纸片法示意图
0.1％新洁尔灭 2%碘酒 1%龙胆紫
2%红汞
3．37℃孵育24小时，观察各消毒剂纸 片周围有无抑菌圈，比较各抑菌圈的 大小。
观察记录结果，并比较不同细对相同 化学消毒剂的敏感性以及同一细菌对 不同化学消毒剂的敏感性。
三、细菌对常用抗生素的敏感度测定
以滤纸圆片浸沾一定稀释度的药物， 贴附于已涂满被测细菌的琼脂平板培 养基上，孵育后，因药物的抑菌作用 及渗透性，纸片周围可以有抑菌圈出 现，据根抑菌圈的有无和大小，以测 知该菌对这些药物的敏感性，但准确 度不如试管法。
3．打开两皿皿盖，在离水银灯约1米处， 直接受紫外线照射30分钟后，以镊子 取出纸片，将纸片投放消毒缸内，盖 好皿盖，37℃孵育24小时后观察生长 情况。
观察记录结果
二、常见化学消毒剂的杀菌作用
【材料】 1．菌种：葡萄球菌、大肠杆菌18～24
小时肉汤培养基。 2．培养基：琼脂平板。 3．0.1％新洁尔灭、1％龙胆紫、2％ 碘
料、玻璃器材、传染性污物及细菌培 养物等都可用本法消毒灭菌。
（三）干热灭菌器
干热灭菌器（干烤箱）是由双层铁板制成 的长方形或正方形金属箱，外壁内层装有 隔热的石棉板。在烤箱中装置电热线圈， 上有小孔，按插温度计供通空气用，箱前 有铁门及玻璃门，箱内有金属板架数层， 电热烤箱的前下方装有温度调节器，可以 保持所需的温度（见图3-5）。
外界因素对细菌的影响讲课文档
第四十一页，共65页。
• 日光与紫与外
• 日光是有效的天然杀菌法，对大多数微生物均有损害作用，直 射杀菌效果尤佳，其主要的作用因素为紫外线，此外，热与氧
气起辅助作用。但光线效应受很多因素的影响，如烟尘笼罩的 空气、玻璃及有机物等都能减弱日光的杀菌力。
• 紫外线是一种低能量的电磁辐射，波长范围为200～300nm,
第二十四页，共65页。
第二十五页，共65页。
第二十六页，共65页。
第二十七页，共65页。
第二十八页，共65页。
结核分枝杆菌感染的病人
第二十九页，共65页。
霍乱弧菌感染
第三十页，共65页。
麻风分杆菌感染患者
第三十一页，共65页。
第三十二页，共65页。
物理因素对细菌的影响
第三十三页，共65页。
• 同一种消毒剂的浓度不同，其消毒效果也不一样。大多数消毒剂在高浓度时起杀菌作用，低浓度时则只有抑菌作用。在一定浓度下， 消毒剂对某种细菌的作用时间越长，其效果也越强。若温度升高，则化学物质的活化分子增多，分子运动速度增加使化学反应加速， 消毒所需要的时间可以缩短。
• (2)微生物的污染程度 微生物污染程度越严重，消毒就越困难，因为微生物彼此重叠，加强了机械保护作用。所 以在处理污染严重的物品时，必须加大消毒剂浓度，或延长消毒作用的时间。
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干热灭菌
• 烧灼:常用于接种针、试管口等 • 焚烧：适用于废弃的污染物品和有传染性的动物尸体。
• 干烤：适用于耐高温的玻璃器皿、粉剂药品。
• (1)烧灼和焚烧：烧灼是直接用火焰杀死微生物，适用于微 生物实验室的接种针等不怕热的金属器材的灭菌。焚烧是 彻底的消毒方法，但只限于处理废弃的污染物品，如无用 的衣物、纸张、垃圾等。焚烧应在专用的焚烧炉内进行。 (2)干烤：利用干烤箱，加热160～180℃2小时，可杀死一 切微生物，包括芽胞菌。主要用于玻璃器皿、瓷器等的灭 菌。
外界因素对细菌的影响
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有关概念
消毒： 消毒：杀死物体上病原微生物的方法 灭菌：杀死物体上所用微生物的方法。 灭菌：杀死物体上所用微生物的方法。 无菌及无菌操作： 无菌及无菌操作：物体上无活的微生物 存在称无菌， 存在称无菌，防止微生物进入机体或物 品的操作方法，称无菌操作。 品的操作方法，称无菌操作。 防腐： 防腐：防止或抑制微生物生长繁殖的方 法。
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物理因素对细菌的影响
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温度
高温杀菌机制： 高温杀菌机制：高温使菌体蛋白凝固变 酶的活性丧失，细菌代谢停止， 性，酶的活性丧失，细菌代谢停止，细 菌死亡 热力杀菌： 热力杀菌： 湿热灭菌法 干热灭菌法
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湿热灭菌
高压蒸汽灭菌法: 压力103.4kPa、温度 高压蒸汽灭菌法 压力 、 121.3 ℃，持续 ～30分钟 持续15～ 分钟 适用于耐高温、耐高压、 适用于耐高温、耐高压、耐潮湿的物品灭 菌 巴氏消毒法： 巴氏消毒法：61.1～62.8℃或71.1 ℃ ～ ℃ 煮沸法： 煮沸法：100 ℃ 流通蒸汽法:100 ℃ 流通蒸汽法 间歇灭菌法:< 连续3次 间歇灭菌法 100 ℃连续 次，适用于不耐 高温的营养物质灭菌。 高温的营养物质灭菌。
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紫外线杀菌
紫外线： 紫外线：210～300nm波长的紫外线有杀 ～ 波长的紫外线有杀 菌作用， 菌作用，265～266nm杀菌作用最强 ～ 杀菌作用最强 杀菌机制：干扰细菌DNA的复制。 的复制。 ★杀菌机制：干扰细菌 的复制 应用：空气消毒、 ★应用：空气消毒、物品表面消毒 电离辐射：用于不耐热的塑料注射器、 电离辐射：用于不耐热的塑料注射器、 导管等的消毒灭菌
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外界因素对细菌的影响实验报告
外界因素对细菌的影响实验报告细菌外界因素实验影响外界因素对细菌的影响影响细菌生长的因素篇一：实验微生物的细胞计数实验十微生物的细胞计数目的要求了解血球计数板的计数原理，掌握血球计数板的计数方法。
微生物个体生长的时间较短，很快进入分裂繁殖阶段，个体生长难以测定。
它们的生长一般以繁殖即群体生长作为微生物生长的指标。
群体生长表现为细胞数目的增加或细胞物质的增加。
测定数目的方法有显微镜直接计数法、平板计数法、光电比浊法等。
显微镜直接计数法是将小量待测样品的悬浮液置于具有确定面积和容积的血球计数板上，于显微镜下直接计数的一种简便、快速、直观的方法。
血球计数板是一块特制的载玻片，有四条竖槽和一条横槽。
横槽两边的平台上各有一个有九个大方格的方格网，中间大方格为计数室：边长为1mm，深为0.1mm，容积为0.1mm3。
计数室有两种规格：一是分为16个中方格，每中方格中有25个小方格；另一种是分为25个中方格，每中方格有16个小方格。
两种都共有400个小方格。
实验内容1、镜检计数室对计数板进行镜检。
若有污物，则用自来水冲洗，用电吹风吹干后才能进行计数。
2、加样品在血球计数板上盖上盖玻片, 用滴管将摇匀的酵母菌液由盖玻片边的小槽滴一小滴,菌液会自动进入计数室，静置5分钟。
3、计数将血球计数板置于载物台上，先用低倍镜找到计数室的位置，再换高倍镜计数。
每计数室计5个中格（四角和中间）。
计数原则：计上不计下，计左不计右。
芽体占母细胞一半时算一个。
数出5个中方格中的总菌数A，若菌液的稀释倍数为B，则计算公式如下：(1) 25个中方格的计数板计算公式(2) 16个中方格的计数板计算公式(4) 清洗血球计数板计数后将血球计数板用自来水冲洗干净，勿用硬物刷，吹干后镜检。
若不干净，则必须重复洗涤干净为止。
实验十一外界因素对细菌的影响实验目的：1、了解紫外线杀菌原理及特点。
2、了解药物敏感实验的操作与判断。
3、学会对单糖发酵分解产物的观察。
细菌的分布及外界因素对细菌的影响 第四军医大学.
【目的】 本实验要求掌握纸片扩散法试验 【材料】 （1）菌种：金黄色葡萄球菌，埃希大肠杆菌等 （2）培养基：水解酪蛋白平板 （3）含抗生素（青霉素、链霉素、氯霉素）药敏纸 片
【方法】 （1）用棉拭子取菌液涂布整个培养基表面，反复几次， 保证涂布均匀。 （2）镊子分别取含有不同抗生素的滤纸片，贴在已接 种的琼脂平板的表面。每个平板上贴4-6片，各纸片中心 相距约24mm，纸片距平皿边缘约15 mm，各纸片间距离相 等。
【材料】 （1）大肠杆菌斜面培养物 （2）琼脂平板培养基 （3）接种环，酒精灯，无菌滤纸片
【方法】 1．以密集划线法将大肠杆菌接种于琼脂培养基上。 2．将镊子浸酒精燃烧灭菌后取灭菌滤纸片一张，置 于涂有细菌的平板培养基表面。 3．打开培养皿盖，置于紫外灯下一尺处直接照射 30~60min 4 ．取出纸片，盖好平板盖，置37℃孵育，24h后观 察。
（三）皮肤表面细菌的检查 1．将普通培养基分为三等份，将未洗的手指、用肥 皂洗过的手指、经上碘酊+75%酒精处理的手指在培养基 上轻涂。 2．将培养板置37℃培养箱24h，观察培养基中菌落 的数目及菌落的形态特点。
第二节 外界因素对细菌的影响
细菌在自然界必然不断经受周围环境中各种因素的 影响。当环境适宜时，细菌能进行正常的新陈代谢而生 长繁殖；若环境条件变化，可引起细菌的代谢和其他性 状发生变异；若环境条件改变剧烈，可使细菌生长受到 抑制或导致死亡。 消毒: 杀灭病原微生物的方法。 灭菌：杀灭物体上所有的微生物的方法。 无菌：物体上或容器内无活菌存在的意思。 防腐：防止或抑制微生物生长繁殖的方法。
【方法】 （1）取肉汤培养管6支，平均分成3组 （2）每组分别接种大肠杆菌和枯草杆菌 （3）第一组经高压蒸气灭菌15min，第二组置100℃ 水浴中10min，第三组不作处理。 （4）将三组培养管均置37℃孵育，24h后观察。
外界因素对细菌影响共21页
干热灭菌
烧灼:常用于接种针、试管口等 焚烧：适用于废弃的污染物品和有传染 性的动物尸体。 干烤：适用于耐高温的玻璃器皿、粉剂 药品。
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低温
常用于保存菌种 但某些细菌对低温敏感，低温易死亡。
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紫外线杀菌
紫外线：210～300nm波长的紫外线有杀 菌作用，265～266nm杀菌作用最强 ★杀菌机制：干扰细菌DNA的复制。 ★应用：空气消毒、物品表面消毒 电离辐射：用于不耐热的塑料注射器、 导管等的消毒灭菌
拉
60、生活的道路一旦选定，就要勇敢地 走到底 ，决不 回头。 ——左
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滤过除菌
应用：用于不耐高温的血清、抗生素、 抗毒素、药液、空气的除菌
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化学因素对细菌的影响
常用消毒剂的杀菌机制 常用消毒剂种类 影响消毒剂消毒效果的因素
消毒剂的性质和浓度 温度和酸碱度 细菌的种类和数量 化学拮抗作用
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消毒灭菌效果检测
生物指标：嗜热脂肪芽孢杆菌、枯草杆 菌芽孢黑色变种 化学指标：硫磺
温度
高温杀菌机制：高温使菌体蛋白凝固变 性，酶的活性丧失，细菌代谢停止，细 菌死亡 热力杀菌： 湿热灭菌法 干热灭菌法
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湿热灭菌
高压蒸汽灭菌法: 压力103.4kPa、温度 121.3 ℃，持续15～30分钟 适用于耐高温、耐高压、耐潮湿的物品灭 菌
巴氏消毒法：61.1～62.8℃或71.1 ℃ 煮沸法：100 ℃ 流通蒸汽法:100 ℃ 间歇灭菌法:< 100 ℃连续3次，适用于不耐 高温的营养物质灭菌。
噬菌体形态模式图
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毒性噬菌体的溶菌周期 课件制作 陆曙梅
外界因素对细菌的影响病原生物学教研室
影响消毒灭菌的因素
消毒剂的性质、浓度与作用时间 微生物的种类与数量 温度 酸碱度 有机物
抗菌药物的作用与细菌的耐 药性 一、药物种类及作用机制 （一）抗菌药物的种类
1 β-内酰胺类： 2 大环内酯类： 3 氨基糖苷类： 4 四环素类： 5 人工合成的抗菌药： 6 其他：
（二）抗菌药物作用的机制
湿热与干热灭菌效果的比较
热型 温度（℃）时间 （h） 湿热 90-105.3 3 干热 130-140 4 布层内的温度（℃）灭菌效果 20层 40层 100层 101 101 101.5 完 全 86 72 70.5 不 完 全
湿热比干热灭菌好的原因：
1 细菌蛋白质在有水的情况下易于
凝固变性 2 湿热穿透力强 3 湿热蒸气有潜热存在，水蒸气凝固 成水释放潜热，迅速提高被灭菌物 体的温度
（二）耐药性的基因控制
1 基因突变导致耐药性的产生
特点：在染色体；单一耐药；稳定
2 R质粒决定的耐药性
特点：可从宿主菌检出R质粒；多重耐药； 不稳定；可经接合转移
3 转座子的耐药基因
染色体－染色体，染色体－质粒， 质粒－质粒
（三）抗菌药物的使用与细菌的耐药 性的关系 无直接关系，抗菌药物只起到一 种选择和扩大耐药菌株的作用
三 控制耐药性的策略
1 研究不受耐药机制作用的新型药物 2 根据药敏试验选择敏感药物 3 抗菌药物的“轮休” 4 R质粒消除剂的研究
5 表面活性剂： 损伤细胞膜；灭活氧化酶等酶的活性；蛋白 质沉淀 （1）0.05%-0.1%新洁尔灭：皮肤粘膜、手术器 械 （2） 0.05%-0.1%杜灭芬：伤口冲洗，金属器 械、塑料、橡皮类
6 烷化剂： 使菌体蛋白和核酸的烷基化 （1）10%甲醛：物品表面、空气 （2）2%戊二醛： 精密仪器、内窥镜等 缺点：有一定的毒性
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• (4)间歇灭菌法：利用反复多次的流通蒸汽，以达到灭菌的 目的。一般用流通蒸汽灭菌器，100℃加热15～30分钟， 可杀死其中的繁殖体；但芽胞尚有残存。取出后放37℃孵 箱过夜，使芽胞发育成繁殖体，次日再蒸一次，如此连续 三次以上。本法适用于不耐高温的营养物(如血清培养基) 的灭菌。
微生物主要是由核酸、蛋白质、多糖等有机 大分子组成，极易受到各种物理、化学因 素的影响。
2.消毒灭菌相关的医学术语有哪些? 3.要学好这些相关的医学术语关键是什么?
第一节 相关专业术语
1
消毒disinfection
2
灭菌sterilization
3
无菌asepsis
4
防腐antisepsis
★杀菌机制：干扰细菌DNA的复制。 ★应用：空气消毒、物品表面消毒 • 电离辐射：用于不耐热的塑料注射器、导
管等的消毒灭菌
• 日光与紫与外
• 日光是有效的天然杀菌法，对大多数微生物均有损害作用， 直射杀菌效果尤佳，其主要的作用因素为紫外线，此外， 热与氧气起辅助作用。但光线效应受很多因素的影响，如 烟尘笼罩的空气、玻璃及有机物等都能减弱日光的杀菌力。
• 巴氏消毒法：61.1～62.8℃或 71.1 ℃
• 煮沸法：100 ℃ • 流通蒸汽法:100 ℃ • 间歇灭菌法:< 100 ℃连续3次，
适用于不耐高温的营养物质灭菌。
低温
• 常用于保存菌种 • 但某些细菌对低温敏感，低温易死亡。
紫外线杀菌
• 紫外线：200～300nm波长的紫外线有杀菌 作用，265～266nm杀菌作用最强
湿热灭菌
• (1)煮沸法：煮沸100℃，5 ～6分钟，能杀死一般细菌的繁 殖体。许多芽胞需经煮潮5～6小时才死亡。水中加入2% 碳酸钠，可提高其沸点达105℃。既可促进芽胞的杀灭， 又能防止金属器皿生锈。煮沸法可用于饮水和一般器械(刀 剪、注射器等)的消毒。
• (2)巴氏消毒法(Pasteurization)：利用热力杀死液体中的病 原菌或一般的杂菌，同时不致严重损害其质量的消耗方法。 由巴斯德创用以消毒酒精类，故名。加温61.1～62.8℃半 小时，或71.7℃15～30秒钟。常用于消毒牛奶和酒类等。
干热灭菌
• 烧灼:常用于接种针、试管口等 • 焚烧：适用于废弃的污染物品和有传染性的动物尸体。 • 干烤：适用于耐高温的玻璃器皿、粉剂药品。
• (1)烧灼和焚烧：烧灼是直接用火焰杀死微生物，适用于微 生物实验室的接种针等不怕热的金属器材的灭菌。焚烧是 彻底的消毒方法，但只限于处理废弃的污染物品，如无用 的衣物、纸张、垃圾等。焚烧应在专用的焚烧炉内进行。 (2)干烤：利用干烤箱，加热160～180℃2小时，可杀死一 切微生物，包括芽胞菌。主要用于玻璃器皿、瓷器等的灭 菌。
• 紫外线是一种低能量的电磁辐射，波长范围为200～ 300nm,最适的波长为265 ～ 266nm，这与DNA吸收光谱 范围相一致。其杀菌原理是紫外线易被核蛋白吸收，使 DNA的同一条螺旋体上相邻的碱基形成胸腺嘧啶二聚体， 从而干拢DNA的复制，导致细菌死亡或变异。紫外线的穿 透能力弱，不能通过普通玻璃、尘埃，只能用于消毒物体 表面及空气、手术室、无菌操作实验室及烧伤病房，亦可 用于不耐热物品表面消毒。杀菌波长的紫外线对人体皮肤、 眼睛均有损伤作用，使用时应注意防护。
• 热力杀菌： 湿热灭菌法 干热灭菌法
• 在同样的温度下，湿热的杀菌效果比干热好， 其原因有：①蛋白质凝固所需的温度与其含水量 有关，含水量愈大，发生凝固所需的温度愈低。 湿热灭菌的菌体蛋白质吸收水分，因较大同一温 度的干热空气中易于凝固。②温热灭菌过程中蒸 气放出大量潜热，加速提高湿度。因而湿热灭菌 比干热所要温度低，如在同一温度下，则湿热灭 菌所需时间比干热短。③湿热的穿透力比干热大， 使深部也能达到灭菌温度，故湿热比干热收效好。
防腐：防止或抑制微生物生长繁殖 的方法。
无菌：物体或局部环境中无活的微生物 存在的状态。
无菌操作：是防止活的微生物侵入机体 或污染物品的操作方法。
结核分枝杆菌感染的病人
霍乱弧菌感染
麻风分杆菌感染患者
物理因素对活性丧失，细菌代谢停止，细菌死亡
5 无菌操作 aseptictechnique
(1)消毒: 杀灭物体上病原微生物的方法。
消毒剂
(2)灭菌：杀灭物体上所有微生物 的 方法,包括杀灭芽孢在内的所 有病原微生物和非病原微生物。
灭菌
防腐：? ------“防止腐败/腐烂”
腐败/腐烂：……
• 腐败/腐烂的真相：微生物的生长繁殖
• (5)高压蒸汽灭菌法：压力蒸汽灭菌是在专门的压力蒸汽灭 菌器中进行的，是热力灭菌中使用最普遍、效果最可靠的 一种方法。其优点是穿透力强，灭菌效果可靠，能杀灭所 有微生物。
• 目前使用的压力灭菌器可分为两类：下排气式压力灭菌器 和预真空压力灭菌器。适用于耐高温、耐水物品的灭菌。
湿热灭菌
• 高压蒸汽灭菌法: 压力103.4kPa、 温度121.3 ℃，持续15～30分钟 适用于耐高温、耐高压、耐潮湿 的物品灭菌
鼻咽腔
葡萄球菌、甲，丙型链球菌 肺炎球菌、奈氏菌、类杆菌等
表皮葡萄球菌 口腔
甲，丙型链球菌 类白喉杆菌、肺炎球菌 奈氏菌、乳杆菌、梭杆菌 螺旋体、放线菌、白念珠菌
皮肽
葡萄球菌、绿脓杆菌、白念珠菌 丙酸杆菌、类白喉杆菌、 非致病性分枝杆菌
尿道
白色葡萄球菌、类白喉杆菌、 非致病性分枝杆菌
肠道
大肠杆菌、产气杆菌、变形杆菌 绿脓杆菌、葡萄球菌、厌氧性细 菌 真菌、乳杆菌，双歧杆菌等
（优选）外界因素对细菌 的影响
1.为什么要消毒灭菌?
• (1)自然界中广泛存在:土壤、空气、水中都有。
(2)人体上广 泛分布着 各种微生 物:
眼结膜
白色葡萄球菌、干燥杆菌
人 体 内 正 常 菌 群 的 分 布
阴道
大肠杆菌、乳杆菌 白念珠菌、类白喉杆菌
非致病性分枝等
外耳道
葡萄球菌、类白喉杆菌 绿脓杆菌、非致病性分枝杆菌