阴离子交换柱使用说明

IC-PAK阴离子交换柱使用指南

2.3平衡

The Ion Exclusion 色谱柱运输过程采用10％甲醇溶液储存，在用测试溶液和向之前必需平衡活化色谱柱

平衡色谱柱：1.将色谱柱安装到仪器上。

2.用要求的洗脱液以0.5Ml/min的流速平衡10分钟，将大部分甲醇冲出色谱柱。

3.以0.1mLl/min的梯度的缓慢增加流速到1.0mL/min

4采用1.0mL/min流速平衡20分钟，或者当基线平稳后才开始分析。

如果基线不稳，检查LC系统的其他部分。

3.1准备洗脱液

指导原则：1.推荐的洗脱液是稀释的酸的水溶液

注意：当流动相采用高浓度的有机相（超过20％）降低柱子的使用效果。避免胺类，金属类，碱类和腐蚀剂，例如HCL.

2.用0.45um或者更小孔径的滤膜过滤洗脱液以除去微生物。用超纯水（18 megohm resistivity）,例如MILLI-Q的水。

3.使用真空脱气机/超声波去掉可溶于水的气体（影响泵）

4.使用Waters 在线过滤系统保护系统。

3.2样品制备和过滤

如果样品中含有那些可溶解的并且可能污染色谱柱的污染物或微粒，选用以下其中一种步骤：

1.用Waters Sample Clarification包，或者Millex过滤样品，避免色谱柱堵塞反压增

加。

2.用SEP-PAK小柱净化样品，避免污染物降低柱寿命。更多的信息请看WC02.

3.用IC-PAK保护柱，能吸收化学和物理污染物。附录A是保护柱清单。

4.1色谱柱指南

注意：新色谱柱使用前，请按4.2方法测试样品的分离。

指导原则：下面的操作指南能帮助您在Waters色谱柱上得到最好的的效果。

1.不要超过13MPa ( 13atm或2000psi )压力下使用

2.过滤所有的洗脱液。决不能使用混浊，有沉淀的流动相。

3.保护色谱柱，避免振动，机械性外力（导致洗脱液成分改变）

4.当用水做流动相组分时，请用Milli-Q 水系统纯化的水。我们可以选择去离子水或

瓶装色谱级水，某些有机化合物改变柱子的敏感性。

4.2柱效测试

4.3洗脱液制备

10mM辛烷磺酸溶液：1. 2.163g辛烷磺酸钠盐（）溶解在100mL Milli-Q水中。

2. 添加100mL 预先净化的H＋离子形式的阳离子交换树脂

（，搅拌均匀。

3.过滤树脂，加大约800mL Milli-Q水，再稀释到1L。

注意：10mM辛烷磺酸溶液可稳定1个月以上。

1mM辛烷磺酸溶液：1. 100mL辛烷磺酸溶液加入1L溶剂瓶中。

（pH3） 2. 用Milli-Q水稀释到1L.

3. 用过滤。

酸中的H＋离子影响分离，酸的阴离子数目没有影响但能改变背景的传导性。因此，可用辛烷磺酸取代其他强酸。

弱酸在205nm到215nm之间被紫外吸收检测。

4.4标准溶液的配制

1.用其钠盐制备1000ppm的储备标准溶液

2. 工作标准溶液，稀释：0.1mL的1000ppm的氟化物/0.5mL的1000ppm 的甲酸盐/1.0mL的1000ppm的醋酸盐/1.0mL的1000ppm的丙酸盐/1.0mL的1000ppm的丁酸盐到100mL Milli-Q水中。

注意：工作标准溶液应该每周配制。

5.1 故障排除

5.1表中列出出了使用过程中可能碰到的问题以及解决的方法。

5.2 清洗和再生色谱柱

如果发生：

1.更换入口筛板。

2.以1.0mL/min的流速反冲15分钟。

3.重新检查柱效。

当出现不明的色谱柱污染物或旧色谱柱或最初检查柱效时反压增加，可以采取以上步骤。

尽管保护柱能保护色谱柱不被化学污染物和某些物质的污染，仍然有必要清洗色谱柱。

可用0.1N H3PO4，0.1N HNO3或者0.1M H2SO4 清洗色谱柱。

可用90％水和10％甲醇溶液清洗吸附了有机物的树脂。最初清洗时可用低流速，再缓慢增加流速。在任何流动相和洗脱液中不要有超过20％有机溶液组分。

5.3色谱柱储存

色谱柱可储存在新鲜的洗脱液或10％的甲醇水溶液中。

储存色谱柱时：请记住：

1.不要仅用水储存色谱柱。仅用水保存色谱柱可能导致色谱柱长菌。用10％甲醇水溶

液保存色谱柱可防止长菌。

2.没有洗脱液流动时不要将柱子留在高温下。

3.拧紧柱子两端堵头放回包装盒中，柱床干涸可能影响色谱柱的效果。