灭菌与消毒实验报告
消毒与灭菌实验报告
消毒与灭菌实验报告消毒与灭菌实验报告引言在现代社会,随着科学技术的不断进步,人们对于卫生和健康的重视程度也越来越高。
消毒与灭菌作为保障公共卫生的重要手段,被广泛应用于医疗、食品加工、实验室等领域。
本实验旨在探究不同消毒与灭菌方法对细菌的杀灭效果,为卫生防护提供科学依据。
实验设计与方法本次实验选取了常见的消毒与灭菌方法,包括物理方法和化学方法。
物理方法包括高温灭菌和紫外线消毒,而化学方法则包括酒精消毒和过氧化氢灭菌。
实验所用细菌为大肠杆菌,该菌种常见于环境中,易于培养和观察。
实验一:高温灭菌首先,将培养基倒入培养皿中,然后在无菌条件下将大肠杆菌接种于培养基上。
接种完毕后,将培养皿放入高温灭菌器中,设定温度为121摄氏度,时间为15分钟。
灭菌结束后,将培养皿取出,观察菌落生长情况。
实验结果显示,经过高温灭菌处理后,培养皿中的大肠杆菌完全被杀灭,菌落无法生长。
这是因为高温能够破坏细菌的核酸和蛋白质结构,使其失去生命活力。
实验二:紫外线消毒在无菌条件下,将大肠杆菌接种于培养皿中。
然后,将培养皿放置在紫外线消毒器中,设置紫外线照射时间为30分钟。
消毒结束后,观察菌落生长情况。
实验结果显示,经过紫外线消毒处理后,培养皿中的大肠杆菌数量显著减少,但仍有少量菌落存活。
这是因为紫外线能够破坏细菌的核酸结构,导致其死亡,但对于某些菌种,紫外线的杀菌效果有限。
实验三:酒精消毒在无菌条件下,将大肠杆菌接种于培养皿中。
然后,使用无菌棉签蘸取酒精,轻轻擦拭培养皿表面。
消毒结束后,观察菌落生长情况。
实验结果显示,经过酒精消毒处理后,培养皿中的大肠杆菌数量显著减少,但仍有少量菌落存活。
这是因为酒精能够破坏细菌细胞膜,导致其死亡,但对于一些较为耐酒精的菌种,酒精的杀菌效果有限。
实验四:过氧化氢灭菌在无菌条件下,将大肠杆菌接种于培养皿中。
然后,将培养皿放入装有过氧化氢的密闭容器中,密闭容器中的过氧化氢能够释放出氧气,形成氧化反应,杀灭细菌。
灭菌的实验报告总结
一、实验目的本次实验旨在了解灭菌的基本原理和方法,掌握不同灭菌方法的操作步骤,并验证灭菌效果。
二、实验原理灭菌是指杀灭或消除所有微生物,包括细菌、病毒、真菌、孢子等。
灭菌方法主要包括物理灭菌和化学灭菌。
物理灭菌包括高温灭菌、紫外线灭菌、辐射灭菌等;化学灭菌包括消毒剂、氧化剂、酸碱等。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:菌液、无菌水、消毒剂、酒精、无菌棉签等。
2. 实验仪器:高压蒸汽灭菌器、紫外线消毒箱、高压锅、酒精灯、显微镜等。
四、实验步骤1. 高温灭菌(1)将菌液接种于无菌平板上,待菌落生长后,用无菌棉签蘸取菌液涂布于平板表面。
(2)将平板放入高压蒸汽灭菌器中,调节温度至121℃,压力为0.11MPa,灭菌15分钟。
(3)灭菌结束后,取出平板,待菌落生长后,观察并记录菌落数。
2. 紫外线灭菌(1)将菌液接种于无菌平板上,待菌落生长后,用无菌棉签蘸取菌液涂布于平板表面。
(2)将平板放入紫外线消毒箱中,开启紫外线灯,照射时间为30分钟。
(3)照射结束后,取出平板,待菌落生长后,观察并记录菌落数。
3. 化学灭菌(1)将菌液接种于无菌平板上,待菌落生长后,用无菌棉签蘸取菌液涂布于平板表面。
(2)将平板放入装有消毒剂的容器中,浸泡时间为30分钟。
(3)浸泡结束后,取出平板,用无菌水冲洗,待菌落生长后,观察并记录菌落数。
五、实验结果与分析1. 高温灭菌:经过高温灭菌后,菌落数明显减少,说明高温灭菌效果较好。
2. 紫外线灭菌:经过紫外线照射后,菌落数有所减少,但效果不如高温灭菌明显。
3. 化学灭菌:经过消毒剂浸泡后,菌落数明显减少,说明化学灭菌效果较好。
六、实验结论1. 高温灭菌是一种有效的灭菌方法,适用于实验室、医院等场所的灭菌需求。
2. 紫外线灭菌适用于不耐高温的物品和场所的灭菌,但效果不如高温灭菌明显。
3. 化学灭菌适用于不耐高温和紫外线照射的物品和场所,但需要注意消毒剂的选用和浸泡时间。
七、实验注意事项1. 实验过程中,操作人员需穿戴防护用品,避免交叉感染。
灭菌方法实验报告
一、实验目的1. 掌握常用的灭菌方法及其原理。
2. 了解不同灭菌方法的特点和适用范围。
3. 通过实验验证灭菌效果。
二、实验原理灭菌是指通过物理或化学手段,杀灭或消除所有微生物,包括细菌、真菌、病毒等,以达到防止交叉感染的目的。
常用的灭菌方法有物理灭菌和化学灭菌两种。
物理灭菌包括高温灭菌、辐射灭菌、过滤灭菌等;化学灭菌包括化学药剂灭菌、消毒剂灭菌等。
三、实验材料1. 物理灭菌:高压蒸汽灭菌器、干燥烤箱、紫外线消毒灯、滤膜等。
2. 化学灭菌:消毒剂、化学药剂等。
四、实验方法1. 高温灭菌实验(1)将实验器材(如培养皿、试管等)放入高压蒸汽灭菌器内,设定温度为121℃,压力为0.1MPa,灭菌时间为30分钟。
(2)灭菌结束后,取出实验器材,待其自然冷却至室温。
2. 紫外线消毒实验(1)将实验器材(如培养皿、试管等)放入紫外线消毒箱内,设定时间为30分钟。
(2)消毒结束后,取出实验器材,待其自然冷却至室温。
3. 过滤灭菌实验(1)将实验器材(如培养皿、试管等)放入滤膜过滤器内,过滤膜孔径为0.22μm。
(2)过滤结束后,取出实验器材,待其自然冷却至室温。
4. 化学药剂灭菌实验(1)将实验器材(如培养皿、试管等)放入含有消毒剂的容器中,浸泡时间为10分钟。
(2)浸泡结束后,取出实验器材,用无菌水冲洗干净,待其自然冷却至室温。
五、实验结果与分析1. 高温灭菌实验:灭菌后的实验器材在显微镜下观察,无细菌、真菌、病毒等微生物生长,表明高温灭菌效果良好。
2. 紫外线消毒实验:灭菌后的实验器材在显微镜下观察,无细菌、真菌、病毒等微生物生长,表明紫外线消毒效果良好。
3. 过滤灭菌实验:灭菌后的实验器材在显微镜下观察,无细菌、真菌、病毒等微生物生长,表明过滤灭菌效果良好。
4. 化学药剂灭菌实验:灭菌后的实验器材在显微镜下观察,无细菌、真菌、病毒等微生物生长,表明化学药剂灭菌效果良好。
六、实验结论1. 高温灭菌、紫外线消毒、过滤灭菌和化学药剂灭菌均为有效的灭菌方法,可应用于实际生产和生活中。
除菌实验报告
一、实验目的1. 了解细菌的生长条件和繁殖特点。
2. 掌握常用的除菌方法及其原理。
3. 通过实验验证不同除菌方法的效果。
二、实验原理细菌是一类具有细胞壁、细胞膜、细胞质和核区的单细胞生物。
它们具有生长、繁殖、变异等生物学特性。
在实验室和日常生活中,为了防止细菌污染,常采用多种方法进行除菌处理。
本实验主要采用紫外线照射、高温灭菌、高压蒸汽灭菌和化学消毒等方法进行除菌。
三、实验材料1. 实验器材:紫外线灯、高温灭菌器、高压蒸汽灭菌器、酒精灯、接种环、培养皿、无菌水、无菌滤纸、无菌试管等。
2. 实验试剂:琼脂、牛肉膏、蛋白胨、葡萄糖、氯化钠、硫酸铜、氢氧化钠等。
四、实验方法1. 紫外线照射除菌(1)将实验用的培养皿、接种环等放入紫外线照射箱内。
(2)开启紫外线照射灯,照射时间为30分钟。
(3)照射完毕,取出培养皿、接种环等,进行接种实验。
2. 高温灭菌(1)将实验用的培养皿、接种环等放入高温灭菌器内。
(2)将温度设定为121℃,时间为15分钟。
(3)灭菌完毕,取出培养皿、接种环等,进行接种实验。
3. 高压蒸汽灭菌(1)将实验用的培养皿、接种环等放入高压蒸汽灭菌器内。
(2)将压力设定为1.05MPa,温度设定为121℃,时间为15分钟。
(3)灭菌完毕,取出培养皿、接种环等,进行接种实验。
4. 化学消毒(1)将实验用的培养皿、接种环等放入消毒液中浸泡。
(2)浸泡时间为30分钟。
(3)浸泡完毕,取出培养皿、接种环等,进行接种实验。
五、实验结果与分析1. 紫外线照射除菌接种实验结果显示,经过紫外线照射处理的培养皿内没有观察到细菌生长,说明紫外线照射能够有效杀灭细菌。
2. 高温灭菌接种实验结果显示,经过高温灭菌处理的培养皿内没有观察到细菌生长,说明高温灭菌能够有效杀灭细菌。
3. 高压蒸汽灭菌接种实验结果显示,经过高压蒸汽灭菌处理的培养皿内没有观察到细菌生长,说明高压蒸汽灭菌能够有效杀灭细菌。
4. 化学消毒接种实验结果显示,经过化学消毒处理的培养皿内没有观察到细菌生长,说明化学消毒能够有效杀灭细菌。
实验16-消毒灭菌
实验16 消毒灭菌、微生物生长的控制实验16 消毒灭菌、微生物生长的控制一、抗生素对微生物生长的控制(一)目的要求掌握滤纸片的抑菌试验方法。
理解抗生素的抑菌谱。
(二)基本原理抗生素是微生物产生的一类具很高活性的次生代谢产物,敏感微生物以低浓度的抗生素处理后,其生长、繁殖就会受到抑制或死亡。
微生物对不同抗生素的敏感性差异极大,对有的抗生素极敏感,而对别的抗生素没有任何反应。
一种抗生素能够作用的微生物种类的范围也是有限的,抗生素能作用的微生物种类称为该抗生素的抗菌谱。
对多种微生物有作用的抗生素称为广谱抗生素,对种类数量少的抗生素称为窄谱抗生素。
抗生素接触或进入微生物细胞内能使微生物死亡的最低剂量,称为致死剂量。
敏感微生物若在琼脂培养基平板培养过程中接触或进入微生物细胞内的抗生素达到或超过致死剂量的区域内,因微生物不能生长平板呈透明状态,否则因微生物生长平板表面不透明,并在表面形成菌苔。
在敏感微生物细胞或孢子制成的平板上,放置滤纸园片、再在纸片上滴加抗生素溶液后,抗生系将呈园形向外扩散,而且抗生素在培养基内形成浓度梯度,纸片处抗生素的浓度,纸片以外抗生素的浓度逐渐减小。
因而,在恒温培养中的过程中,将在纸片附近出现透明的抗菌圈。
抑菌圈的大小与抗生素的浓度、滴加的体积、抗生系的扩散性、微生物的敏感度、微生物细胞的浓度等有关。
(三)器材1、培养基肉汤蛋白胨平板。
2、器材培养箱、移液品、打孔器、滤纸、镊子、无菌试管、无菌吸管、无菌水、洗尔球等。
3、菌种大肠杆菌、枯草杆菌、金黄色葡萄球菌4、抗生素青霉素(四)操作步骤l、滤纸片准备用打孔器打取滤纸片.放入培养皿内灭菌后备用。
2、抗生素溶液配制称取注射用青霉素粉,以无菌水配成溶液。
3、带菌平板制作将牛肉膏--蛋白胨—琼脂培养基沸水浴溶化后,于45℃恒温水浴保温。
以无菌水将斜面菌种细胞洗下制成悬浮液,以血球计数板测孢子浓度,再加入无菌水将悬浮液浓度调为108-9个细菌/ml。
化学消毒剂消毒灭菌、抗菌素抗菌实验报告
化学消毒剂消毒灭菌、抗菌素抗菌实验报告
这是一份化学消毒剂消毒灭菌和抗生素抗菌实验报告:
实验目的:比较化学消毒剂和抗生素的抗菌效果,验证其消毒灭菌和抗菌能力。
实验材料:
- 细菌液(如大肠杆菌或金黄色葡萄球菌)
- 化学消毒剂(如乙醇、双氧水、次氯酸钠等)
- 多种抗生素(如头孢、青霉素、氨基糖苷类等)
- 洗涤盘和过滤器
- 粘度计
实验步骤:
1. 制备细菌液并将其接种在含有营养液的洗涤盘中。
2. 待细菌培养至一定的密度后,分别在洗涤盘中加入不同浓度的化学消毒剂。
3. 观察细菌生长情况,根据粘度计测量其生长。
4. 同时,也将多种不同类型的抗生素加入洗涤盘中,观察细菌生长情况和粘度计的测量结果。
实验结果:
通过实验发现,化学消毒剂和多种抗生素都有一定的抗菌效果。
化学消毒剂在一定浓度下可以杀死或抑制细菌生长,而抗生素则可以切断细菌的生长过程。
不同抗生素的抗菌效果和作用机制也有所不同,有的可以抑制膜的合成,有的可以修饰蛋白质等。
结论:
化学消毒剂和抗生素都可以在一定程度上达到消毒灭菌和抗菌的功效,但其中使用必须严格遵守规定的浓度和使用方法,否则可能会对人体或环境造成不良影响。
消毒灭菌实验报告
消毒灭菌实验报告实验目的:通过进行消毒灭菌实验,以验证不同消毒方法对细菌的杀灭效果。
实验原理:细菌在适宜的环境下,可以进行繁殖和生长,但在一定条件下,可以被有效地杀灭。
常见的消毒方法包括物理方法(如高温、辐射)和化学方法(如消毒液、酒精等)。
本实验主要通过浸泡法和擦拭法两种方法进行消毒,并通过培养基接种实验观察不同消毒方法的杀菌效果。
实验材料和仪器:1. 细菌溶液:包含细菌培养物的液体。
2. 培养基:含有适宜条件供细菌生长的培养基。
3. 消毒液:本实验选择常见的消毒液进行测试。
4. 培养皿:用于接种细菌和培养细菌的平底无菌培养皿。
5. 具备质量衡量的工具6. 不同消毒方法所需的器械:例如棉签、细菌滴管等。
实验步骤:1. 将培养基均匀地倒在培养皿中,使其均匀铺满整个培养皿底部,然后静置凝固。
2. 使用棉球蘸取制备好的不同消毒液,在不同的培养皿上分别进行擦拭消毒。
可选择同一种消毒液进行不同时间段的擦拭试验。
3. 使用细菌滴管将细菌溶液滴在培养皿中,同时设置对照组(未进行消毒的培养皿)。
4. 用标签标记好各个培养皿的信息,并放置在恒温箱中进行培养。
培养箱温度设置在适宜菌株生长的条件下。
5. 观察培养皿上是否出现细菌生长,记录所需时间。
6. 分别计算不同消毒方法的杀菌率或杀菌时间,并绘制图表进行比较。
实验结果和讨论:根据实验结果,我们可以比较不同消毒方法对细菌的杀菌效果。
通常,消毒液能够有效杀灭细菌,且杀菌时间较短。
而擦拭方法相对于浸泡法,能够更好地达到细菌灭菌效果。
在实验过程中,要注意避免细菌的外部污染,并保持实验环境的清洁与无菌操作。
结论:消毒液的浸泡方法和擦拭方法都能够有效地杀灭细菌。
其中擦拭方法的效果更佳,能够更好地达到细菌的灭菌效果。
在日常生活中,我们应根据实际情况选择适宜的消毒方法,以达到最好的消毒效果。
细菌分布与消毒灭菌实验报告
细菌分布与消毒灭菌实验报告实验目的:探究细菌在不同环境中的分布情况,并了解消毒灭菌方法的效果。
实验材料:- 细菌培养基- 培养皿- 无菌棉签- 酒精- 消毒液(如漂白粉溶液)- 显微镜实验步骤:1.准备工作:(a) 确保实验环境干净、无菌。
(b) 在净化柜中消毒培养器具,确保无菌。
(c) 配制细菌培养基。
2.取一块无菌棉签,在实验环境的空气中拭取样本,将棉签悬浮于细菌培养基中。
3.将培养皿分为三组,标记为对照组、酒精处理组和消毒液处理组。
4.将无菌棉签均匀地在对照组的培养皿上擦拭。
5.用含有70%酒精的棉签将酒精处理组的培养皿表面擦拭。
6.用含有消毒液的棉签将消毒液处理组的培养皿表面擦拭。
7.将分别进行处理的培养皿密封,放置于恒温箱中进行培养。
8.观察培养皿中菌落的生长情况,并记录每组的菌落数量。
9.对于菌落数量较多的培养皿,可以取一部分菌落进行涂片染色,并在显微镜下观察细菌的形态特征。
10.对实验结果进行分析和总结。
实验结果:根据观察,可以得出下列结果:- 对照组中,培养皿上有较多菌落生长,说明环境中存在细菌。
- 酒精处理组中,培养皿上的菌落数量明显减少,但仍有个别菌落生长。
- 消毒液处理组中,培养皿上几乎没有菌落生长,表明消毒液能有效杀灭细菌。
实验结论:- 本实验的结果表明,细菌分布广泛存在于我们的日常环境中。
- 酒精能够对细菌进行一定程度的抑制,但并不能完全杀灭细菌。
- 消毒液具有较强的杀菌作用,能够有效灭菌,具有消毒和净化环境的能力。
实验的局限性和改进方向:- 实验中只观察了细菌的数量和生长情况,没有进行细菌种类的鉴定。
- 实验中只使用了一种消毒液,可以尝试使用其他不同种类的消毒液来对比效果。
- 实验需要进一步复制和扩大样本数量,以提高实验结果的可靠性和代表性。
总之,这项实验为我们了解细菌的分布情况和消毒灭菌方法的效果提供了基础数据,对我们的生活和卫生保健具有一定的指导意义。
灭菌效果演示实验报告
一、实验目的1. 了解灭菌的基本原理和方法。
2. 演示并验证不同灭菌方法的实际效果。
3. 掌握无菌技术的基本操作。
二、实验原理灭菌是指通过物理或化学方法杀灭或消除所有微生物的过程,包括细菌、病毒、真菌和孢子等。
常用的灭菌方法有高温灭菌、高压蒸汽灭菌、紫外线灭菌、化学消毒剂灭菌等。
本实验旨在通过模拟实验,验证不同灭菌方法的灭菌效果。
三、实验材料1. 菌种:金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、白色念珠菌等。
2. 灭菌方法:高温灭菌、高压蒸汽灭菌、紫外线灭菌、化学消毒剂灭菌。
3. 实验仪器:高压蒸汽灭菌器、恒温培养箱、紫外线消毒灯、酒精灯、显微镜等。
4. 实验试剂:无菌生理盐水、无菌琼脂、酒精、碘伏、甲醛等。
四、实验方法1. 高温灭菌- 将含有菌液的培养皿放入高温灭菌器中,设定温度为121℃,时间为15分钟。
- 灭菌后取出,待冷却至室温,进行菌落计数。
2. 高压蒸汽灭菌- 将含有菌液的培养皿放入高压蒸汽灭菌器中,设定压力为1.05kg/cm²,温度为121℃,时间为15分钟。
- 灭菌后取出,待冷却至室温,进行菌落计数。
3. 紫外线灭菌- 将含有菌液的培养皿放入紫外线消毒箱中,设定时间为30分钟。
- 灭菌后取出,待冷却至室温,进行菌落计数。
4. 化学消毒剂灭菌- 将含有菌液的培养皿浸泡在含有有效氯浓度为1000mg/L的消毒剂中,时间为10分钟。
- 灭菌后取出,待冷却至室温,进行菌落计数。
五、实验结果与分析1. 高温灭菌- 菌落计数结果:0个。
- 结果分析:高温灭菌可以有效杀灭金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、白色念珠菌等微生物。
2. 高压蒸汽灭菌- 菌落计数结果:0个。
- 结果分析:高压蒸汽灭菌可以进一步提高灭菌效果,有效杀灭各种微生物。
3. 紫外线灭菌- 菌落计数结果:10个。
- 结果分析:紫外线灭菌对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌的灭菌效果较好,但对白色念珠菌的灭菌效果较差。
4. 化学消毒剂灭菌- 菌落计数结果:5个。
消毒和灭菌
1) 煮沸与高压灭菌法(2人一组) ●菌液:大肠杆菌/枯草杆菌
●甲组:煮沸(100℃,5min)
●乙组:高压灭菌法(121 ℃,20min)
●丙组:不作任何加热处理
2) 紫外线灭菌(8人一组) 图1
图1
1 以灭菌接种环挑取大肠埃希菌培养物,于琼脂平板上作来
回密集划线接种。
2 半启皿盖(将皿盖遮住涂面的1/2),置于紫外线灯下lm以 内接受照射30分钟。
1) 空气中的细菌(8人一组) 取普通琼脂平板一个,打开盖暴露于空气中约15-30分钟, 然后盖好,放37℃温箱孵育24小时后观察结果,计算有多 少个菌落。
2) 手指皮肤上的细菌(8人一组) 用手指直接涂于普通琼指平板上,放37℃温箱孵育,24小 时后观察结果,记录有多少种不同特征的菌落。
2.
消毒和灭菌
表1细菌分布的实验结果
检查材料 空气
手指
细菌生长 平板培养基表面 培养基表面
情况
或多或少有菌落 涂抹处有菌
菌落个数 生长。
落生长。
2. 消毒和灭菌实验结果
表2煮沸和高压灭菌实验结果
细菌名称 甲组 100℃ 5分 乙组 121℃ 20分 丙组
钟
钟
(对照)
枯草芽胞 混浊
澄清
混浊
杆菌
未加热
大肠埃希 澄清
澄清
1. 了解细菌广泛分布于自然界及正常人体,树立“有菌观念”, 从而认识无菌操作对于微生物学及医学实践的重要性。
2. 了解正常人体中寄居着种类繁多的细菌,正常情况下不引起 人类疾病,称为正常菌群。熟悉外界因素对细菌的影响,掌
握常用的消毒和灭菌方法
3. 观察细菌鞭毛的变异 4. 熟悉生物因素对细菌的作用 2、 实验材料 普通琼脂平板培养基、大肠杆菌肉汤培养液、枯草杆菌肉汤培养 液、无菌毛细吸管、肉汤培养基管、电炉、锅子、高压灭菌器、 接种环、酒精灯、紫外线灯、大肠杆菌培养物 3、 操作方法 1. 细菌的分布
灭菌效率生物实验报告
实验名称:灭菌效率研究实验日期:2023年11月15日实验地点:微生物实验室实验目的:1. 探究不同灭菌方法的效率。
2. 评估高压蒸汽灭菌、紫外线灭菌和化学消毒剂灭菌在微生物灭活方面的效果。
3. 确定最佳灭菌方法适用于不同类型的微生物和实验需求。
实验材料:- 培养基:牛肉膏蛋白胨培养基- 灭菌方法:高压蒸汽灭菌、紫外线灭菌、化学消毒剂灭菌- 仪器:高压蒸汽灭菌锅、紫外线灯、消毒剂、移液器、培养皿、显微镜等- 微生物样本:大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌实验方法:1. 高压蒸汽灭菌:将已制备好的培养基分装至灭菌瓶中,使用高压蒸汽灭菌锅进行灭菌,灭菌参数为121°C,20分钟。
2. 紫外线灭菌:将待灭菌的物品放置在紫外线灯下,距离30厘米,照射时间为30分钟。
3. 化学消毒剂灭菌:将培养基浸泡在含有有效氯浓度为500mg/L的消毒剂中,浸泡时间为30分钟。
4. 灭菌效果检测:灭菌后,取适量灭菌后的培养基进行接种培养,观察细菌生长情况。
实验步骤:1. 培养基制备:按照实验要求制备牛肉膏蛋白胨培养基。
2. 灭菌:分别采用高压蒸汽灭菌、紫外线灭菌和化学消毒剂灭菌三种方法对培养基进行灭菌。
3. 灭菌效果检测:将灭菌后的培养基进行接种培养,观察细菌生长情况,以评估灭菌效果。
4. 数据记录与分析:记录不同灭菌方法下的细菌生长情况,分析灭菌效果。
实验结果:- 高压蒸汽灭菌:灭菌后的培养基中无细菌生长,灭菌效果良好。
- 紫外线灭菌:灭菌后的培养基中大肠杆菌和金黄色葡萄球菌生长良好,白色念珠菌生长受抑制。
- 化学消毒剂灭菌:灭菌后的培养基中大肠杆菌和金黄色葡萄球菌生长良好,白色念珠菌生长受抑制。
实验分析:1. 高压蒸汽灭菌是一种高效、可靠的灭菌方法,适用于各种微生物的灭活。
2. 紫外线灭菌对细菌有一定杀灭作用,但对白色念珠菌的杀灭效果较差。
3. 化学消毒剂灭菌对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌有一定杀灭作用,但对白色念珠菌的杀灭效果较差。
细菌分布与消毒灭菌实验报告
细菌分布与消毒灭菌实验报告一、实验目的本实验旨在探究不同环境下细菌的分布情况,并利用不同的消毒灭菌方法进行对比实验,以了解细菌在不同环境下的分布情况及不同消毒灭菌方法的效果。
二、实验材料与方法1. 实验材料- 实验室培养基- 培养皿- 取样棉签- 75%酒精- 进口细菌培养基- 紫外线消毒仪- 温度控制箱2. 实验方法a. 取样在实验室内外各选取5个不同环境的位置,如洗手间、桌面、空气、水龙头等,用棉签进行取样,并分别划线涂抹于培养皿中。
然后在同一位置同时用另一根消毒过的棉签进行擦拭,作为对照组。
b. 培养将涂抹过的培养皿置于37摄氏度的温度控制箱中进行培养。
c. 观察观察培养皿中细菌的产生情况,记录细菌的数量和分布情况。
d. 消毒灭菌将消毒液涂抹于部分培养皿中,将部分培养皿放置于紫外线消毒仪中进行消毒处理。
e. 对比观察对消毒前后的培养皿进行数量和分布情况的观察,比较不同消毒方法对细菌的杀灭效果。
三、实验结果实验结果显示,在不同环境下取样可观察到细菌培养的差异性,如洗手间细菌数量较高,空气中细菌数量较低。
对比消毒灭菌后的培养皿发现,75%酒精对大部分细菌具有杀灭效果,紫外线消毒亦能显著减少培养皿中细菌的数量。
四、实验分析由实验结果可知,细菌的分布受环境因素影响较大,不同环境下细菌数量和多样性存在明显差异。
消毒方法对细菌的杀灭效果也存在显著差异,不同环境和细菌种类可能需要采用不同的消毒方法。
五、实验结论本实验通过对细菌分布与消毒灭菌的对比研究,揭示了细菌在不同环境下的分布情况和不同消毒方法的杀灭效果。
实验结果为环境卫生管理和细菌防控提供了重要的参考依据,也为细菌学研究提供了新的思路和方法。
六、实验意义本实验结果为加强环境卫生管理提供了科学依据,为制订合理的消毒措施提供了重要参考。
也为细菌分布与消毒灭菌领域的研究提供了新的视角和方法,具有一定的理论和实际价值。
本实验通过对细菌分布与消毒灭菌的研究,为我们深入了解细菌在不同环境下的分布特点和不同消毒方法的效果提供了重要的条件和数据支持。
热力消毒灭菌实验报告
热力消毒灭菌实验报告热力消毒灭菌实验报告引言:热力消毒是一种常见且有效的灭菌方法,它通过高温杀死或抑制微生物的生长,保证物体表面的卫生安全。
本实验旨在探究不同温度和时间对热力消毒的影响,以及评估其在实际应用中的可行性。
材料与方法:1. 实验器材:玻璃器皿、不锈钢器具、培养皿、试管、试管架等。
2. 实验菌株:选择耐热菌株,如枯草杆菌。
3. 实验操作:将菌株接种于培养皿中,分别置于不同温度下进行热力消毒,时间设置为5分钟、10分钟和15分钟。
4. 实验对照:设置未经处理的培养皿作为对照组。
结果与讨论:通过实验观察和菌落计数,我们得出以下结论:1. 不同温度对热力消毒效果的影响:在实验中,我们将温度分为低温组(60℃-70℃)、中温组(80℃-90℃)和高温组(100℃)。
结果显示,高温组的热力消毒效果最好,菌落计数最低,说明高温能够有效灭活微生物。
而低温组的热力消毒效果较差,菌落计数较高,说明低温对微生物的杀灭作用较弱。
2. 不同时间对热力消毒效果的影响:在实验中,我们将时间设置为5分钟、10分钟和15分钟。
结果显示,随着时间的增加,热力消毒效果逐渐提高,菌落计数逐渐减少。
这表明,较长的热力消毒时间有助于更彻底地杀灭微生物。
3. 实际应用中的可行性:热力消毒作为一种常见的灭菌方法,广泛应用于医疗、食品加工等领域。
然而,在实际应用中,我们需要综合考虑多个因素,如物体的材质、形状和尺寸等。
不同物体对热力消毒的要求可能不同,因此需要根据具体情况进行调整,以确保灭菌效果。
结论:通过本实验,我们验证了热力消毒在不同温度和时间下的灭菌效果,并探讨了其在实际应用中的可行性。
热力消毒能够有效杀灭微生物,但需要根据实际情况进行调整,以达到最佳效果。
此外,热力消毒也存在一定的局限性,如无法适用于某些特殊材质的物体。
因此,在实际应用中,我们还需要结合其他灭菌方法,以确保物体表面的卫生安全。
结语:热力消毒作为一种常见的灭菌方法,具有广泛的应用前景。
消毒与灭菌实验报告
消毒与灭菌实验报告实验目的:1.了解消毒与灭菌的概念、原理及应用范围。
2.掌握不同消毒灭菌方法的优缺点。
3.通过实验比较不同消毒灭菌方法对常见微生物的杀灭效果。
4.了解消毒灭菌指标及其测试方法。
实验介绍:消毒与灭菌是防止病原菌传播的重要手段。
消毒主要针对人体接触的物品表面,如手术器械、医疗用品、工具、地面等;而灭菌则是针对液体、气体或其他物质中的病原微生物进行杀菌。
因此,在实验中,我们将对消毒与灭菌进行比较。
实验步骤:步骤一:准备实验所需的细菌培养液、玻璃棒、巴氏液及试管、医用棉签、灭菌器等消毒、灭菌设备。
步骤二:将细菌培养液分为四份,每份3毫升,分别装入四只试管中。
步骤三:在将试管中的细菌培养液完全冷却后,使用医用棉签悄悄地在试管中放入一小部分细菌。
步骤四:将试管罩盖好,把装有细菌的试管放入不同的消毒、灭菌设备中(如紫外线消毒箱、压力蒸汽锅、化学消毒液等)。
步骤五:将所用不同的消毒、灭菌设备时间、温度、压力进行标记。
步骤六:将消毒、灭菌完成的试管全部移入无菌培养基中孵育。
步骤七:观察培养基有无杂菌产生,根据培养基上的生长情况记录细菌杀灭效果。
实验结果:通过对实验样本进行灭菌、消毒处理及无处理对照组的培养实验,我们发现不同消毒、灭菌方法的杀菌效果是不同的。
在实验中,我们采用了紫外线灭菌箱、常规蒸汽灭菌器、巴氏消毒液作为消毒灭菌方法进行对比。
我们发现:在适当的条件下,巴氏消毒液的杀菌效果最好,而紫外线的杀菌效果最差。
通过本实验,我们认识到不同消毒、灭菌方法有着不同优缺点,也更清楚地了解了它们的应用范围及原理。
巴氏消毒法是目前比较普遍使用的一种消毒方法。
将培养液放入巴氏液中加热10-15分钟,即可杀灭微生物。
巴氏消毒法快速,但有时会影响培养基的成分。
在实验中,巴氏消毒液的杀菌效果最佳。
常规蒸汽灭菌器是一种在高温高压下灭菌的方法,可灭杀各种细菌、真菌及病毒。
但是,使用时需要特别注意容器密封和温度控制。
常见灭菌法实验报告
一、实验目的1. 了解并掌握常见的灭菌方法及其原理。
2. 通过实验操作,验证不同灭菌方法的效果。
3. 提高实验操作技能,培养严谨的科学态度。
二、实验原理灭菌是指杀灭或消除物体上所有微生物的过程,包括细菌、真菌、病毒等。
常见的灭菌方法有物理灭菌和化学灭菌两大类。
1. 物理灭菌:利用物理因素杀灭微生物,如高温、紫外线、射线等。
2. 化学灭菌:利用化学药剂杀灭微生物,如酒精、消毒剂等。
三、实验器材与试剂1. 实验器材:高压蒸汽灭菌锅、干热灭菌箱、紫外线灭菌灯、培养皿、移液管、试管、酒精灯、剪刀、镊子等。
2. 实验试剂:牛肉膏蛋白胨琼脂培养基、细菌悬液、75%酒精、10%甲醛溶液、紫外线消毒剂等。
四、实验步骤1. 高压蒸汽灭菌实验(1)将细菌悬液接种于培养皿,37℃培养24小时,观察菌落生长情况。
(2)将培养皿放入高压蒸汽灭菌锅中,121℃灭菌30分钟。
(3)取出培养皿,37℃培养24小时,观察菌落生长情况。
2. 干热灭菌实验(1)将细菌悬液接种于培养皿,37℃培养24小时,观察菌落生长情况。
(2)将培养皿放入干热灭菌箱中,160℃灭菌2小时。
(3)取出培养皿,37℃培养24小时,观察菌落生长情况。
3. 紫外线灭菌实验(1)将细菌悬液接种于培养皿,37℃培养24小时,观察菌落生长情况。
(2)将培养皿放入紫外线灭菌灯下,距离30cm,照射30分钟。
(3)取出培养皿,37℃培养24小时,观察菌落生长情况。
4. 酒精消毒实验(1)将细菌悬液接种于培养皿,37℃培养24小时,观察菌落生长情况。
(2)用75%酒精擦拭培养皿表面,重复3次。
(3)取出培养皿,37℃培养24小时,观察菌落生长情况。
5. 甲醛熏蒸实验(1)将细菌悬液接种于培养皿,37℃培养24小时,观察菌落生长情况。
(2)将培养皿放入装有10%甲醛溶液的密闭容器中,熏蒸24小时。
(3)取出培养皿,37℃培养24小时,观察菌落生长情况。
五、实验结果与分析1. 高压蒸汽灭菌实验:灭菌后的培养皿未出现菌落生长,证明高压蒸汽灭菌效果良好。
灭菌效果实验报告
一、实验目的1. 了解和掌握灭菌的基本原理和方法。
2. 评估不同灭菌方法对微生物的杀灭效果。
3. 掌握实验操作步骤和结果分析。
二、实验原理灭菌是指通过物理或化学手段杀灭或消除所有生物体的过程,包括细菌、病毒、真菌等。
常用的灭菌方法有高压蒸汽灭菌、紫外线灭菌、化学消毒等。
三、实验材料1. 试剂:牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、水、琼脂、无菌生理盐水、酒精、碘伏、高压蒸汽灭菌锅、紫外线灯、培养皿、试管、移液管等。
2. 仪器:高压蒸汽灭菌锅、紫外线灯、培养皿、试管、移液管、酒精灯、天平等。
四、实验方法1. 高压蒸汽灭菌法(1)将配制好的培养基分装于试管中,每管约5ml。
(2)将试管置于高压蒸汽灭菌锅中,调节压力至0.1MPa,温度为121℃,灭菌时间为15分钟。
(3)灭菌结束后,将试管取出,待冷却至室温。
(4)将灭菌后的培养基涂布于平板上,置于37℃恒温培养箱中培养24小时,观察菌落生长情况。
2. 紫外线灭菌法(1)将配制好的培养基分装于试管中,每管约5ml。
(2)将试管置于紫外线灯下,距离约30cm,照射时间为30分钟。
(3)照射结束后,将试管取出,待冷却至室温。
(4)将灭菌后的培养基涂布于平板上,置于37℃恒温培养箱中培养24小时,观察菌落生长情况。
3. 化学消毒法(1)将配制好的培养基分装于试管中,每管约5ml。
(2)向培养基中加入适量的消毒剂(如酒精、碘伏等),充分混合。
(3)将试管置于37℃恒温培养箱中培养24小时,观察菌落生长情况。
五、实验结果与分析1. 高压蒸汽灭菌法结果:平板上未观察到菌落生长。
分析:高压蒸汽灭菌法能有效杀灭培养基中的微生物,确保培养基的无菌状态。
2. 紫外线灭菌法结果:平板上观察到少量菌落生长。
分析:紫外线灭菌法对部分微生物具有一定的杀灭效果,但对耐紫外线微生物的杀灭效果较差。
3. 化学消毒法结果:平板上观察到大量菌落生长。
分析:化学消毒法对微生物的杀灭效果较差,部分微生物仍能存活。
消毒与灭菌实验报告
竭诚为您提供优质文档/双击可除消毒与灭菌实验报告篇一:《培养基的制备与消毒灭菌》实验报告《培养基的制备与消毒灭菌》实验报告实验目的1.学习和掌握配制培养基(以牛肉膏蛋白胨培养基的配制为例)的一般方法和原理。
2.了解消毒和灭菌的原理,掌握常用灭菌方法的操作步骤。
实验原理培养基是人工配制的适合微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养基质,用以培养、分离、鉴定、保存各种微生物或积累代谢产物。
在自然界中.微生物种类繁多,营养类型多样,加之实验和研究的目的不同,所以培养基的种类很多。
但是,不同种类的培养基中,一般应含有水分、碳源、氮源、能源、无机盐、生长因素等。
不同微生物对ph要求不一样.雷菌和酵母的培养基的ph一般是偏酸性的,而细菌和放线菌的培养基的ph一般为中性或微碱性的(嗜碱细菌和嗜酸细菌例外)。
所以配制培养基时,都要根据不同微生物的要求将培养基的ph调到合适的范围。
此外,由于配制培养的各类营养物质和容器等含有各种微生物,因此,已配制好的培养基必须立即灭菌.如果来不及灭菌,应暂存冰箱内,以防止其中的微生物生长繁殖而消耗养分和改变培养的酸碱度所带来不利的影响。
高压蒸气灭菌是将持灭菌的物品放在一个密闭的加压灭菌锅内,通过加热,使灭菌锅套间的水沸腾而产生蒸气。
待水蒸气急剧地将锅内的冷空气从排气阀中驱尽,然后关闭排气阀.继续加热,此时由于蒸气不能道出,而增加了灭菌器内的压力,从而使沸点增高,得到高于100℃的温度。
导致菌体蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。
牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基,有时又称为普通培养基。
由于这种培养基中含有一般细菌生长繁殖所需要的最基本的营养物质,所以可供作微生物生长繁殖之用。
基础培养基含有牛肉膏、蛋白胨和nacl。
其中牛肉膏为微生物提供碳源、能源、磷酸盐和维生素,蛋白胨主要提供氮源和维生素,而nacl提供无机盐。
在配制固体培养基时还要加入一定量琼脂作凝固剂,琼脂在常用浓度下96℃时溶化,实际应用时,一般在沸水浴中或下而垫以石棉网煮沸溶化,以免琼脂烧焦。
细菌分布与消毒灭菌实验报告
细菌分布与消毒灭菌实验报告一、实验目的1. 研究不同环境条件下细菌的分布情况;2. 探讨常见消毒灭菌方法对细菌的杀灭效果;3. 建立科学的消毒灭菌操作规范。
二、实验材料与方法1. 材料:a. 培养基:用于培养和检测细菌的典型营养富集培养基;b. 不同环境样本:包括但不限于空气、水、土壤、食品表面等;c. 常见消毒灭菌剂:如酒精、过氧化氢、紫外线等。
2. 实验步骤:a. 采集不同环境样本,制备相应的稀释液;b. 涂布法或滴布法将样本均匀涂布在不同培养基上;c. 细菌培养:将涂布好的培养基培养在适宜的温度下,定时观察并记录细菌的生长情况;d. 消毒灭菌试验:将已经培养好的细菌接种到不同消毒灭菌剂处理后的培养基上,观察并记录细菌生长情况。
三、实验结果与分析1. 细菌分布情况:a. 空气中:培养基上出现多种常见细菌,主要为空气中悬浮细菌;b. 水中:水样品中出现的细菌种类较多,表现为波动的生长曲线;c. 土壤中:土壤样品中的细菌种类丰富,生长繁茂;d. 食品表面:食品表面附着的细菌种类较多,主要为耐热菌和耐寒菌。
2. 消毒灭菌效果:a. 酒精:对大部分细菌有较好的消毒效果,但并不是所有细菌都能被完全杀灭;b. 过氧化氢:对细菌有较好的杀菌效果,多数细菌培养基上的细菌均被消毒;c. 紫外线:对细菌也有比较好的杀菌效果,但需注意照射时间和距离。
四、实验结论1. 不同环境中细菌的分布情况各异,需要根据实际情况选择合适的消毒灭菌方法;2. 酒精、过氧化氢和紫外线是比较常见的消毒灭菌方法,但对于不同细菌种类有不同的杀灭效果;3. 实验结果为建立科学的消毒灭菌操作提供了参考,为日常生活和工作中的消毒灭菌提供了技术支持。
五、参考文献1. 胡伟,刘静. 生物实验指导. 北京:北京大学出版社, 2017.2. 何亚平,李明. 微生物学实验技术. 北京:清华大学出版社, 2018.六、致谢在本研究中,我们由衷感谢指导老师对我们的悉心指导和支持,也感谢提供实验设备和场地的相关部门和同事。
灭菌与消毒实验报告
实验报告灭菌与消毒院系:专业班级: 姓名:学号:同组人:学号:指导老师:实验日期: 实验组号:实验目的:1.了解干热灭菌的原理和应用范围。
学习干热灭菌的操作技术。
2.了解高压蒸气灭菌的基本原理及应用范围。
学习高压蒸气灭菌的操作方法。
3.了解紫外线灭菌的原理和方法。
实验原理:干热灭菌是利用高温使微生物细胞内的蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。
细胞内的蛋白质凝固性与其本身的含水量有关,在菌体受热时,当环境和细胞内含水量越大,则蛋白蛋凝固就越快,反之含水量越少,凝固缓慢。
因此,与湿热灭菌相比,干热灭菌所需温度要高(160~170℃),时间要长(1~2h),但干热灭菌温度不能超过180℃,否则,包器皿的纸或棉塞就会烧焦,甚至引起燃烧。
高压蒸气灭菌是将待灭菌的物品放在一个密闭的加压灭菌锅内,通过加热,使灭菌锅隔套间的水沸腾而产生蒸气。
待水蒸气急剧地将锅内的冷空气从排气阀中驱尽,然后关闭排气阀,继续加热,此时由于蒸气不能溢出,而增加了灭菌锅内的压力,从而使沸点增高,得到高于100℃的温度。
导致菌体蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。
在同一温度下,湿热的杀菌效力比干热大。
其原因有三:一是湿热中细菌菌体吸收水分,蛋白质较易凝固,因蛋白质含水量增加,所需凝固温度降低(表1),,二是湿热的穿透力比干热大(表2),,三是湿热的蒸气有潜热存在。
1g水在100℃时,由气态变为液态时可放出2.26kJ(千焦)的热量。
这种潜热,能迅速提高被灭菌物体的温度,从而增加灭菌效力。
表1 蛋白质含水量与凝固所需温度的关系表2干热湿热穿透力及灭菌效果比较在使用高压蒸气灭菌锅灭菌时,灭菌锅内冷空气的排除是否完全极为重要,因为空气的膨胀压大于水蒸气的膨胀压,所以,当水蒸气中含有空气时,在同一压力下,含空气蒸气的温度低于饱和蒸气的温度。
灭菌锅内留有不同分量空气时,压力与温度的关系见(表3)表3 灭菌锅留有不同分量空气时,压力与温度的关系现在法定压力单位己不用磅和kg/cm2表示,而是用Pa或bar表示,其换算关系为:1kg/cm2=98066.5Pa;1Ib/in2=6894.76Pa.一般培养基用0.1Mpa(相当于15 Ib/in2或1.05kg/cm2),121.5℃,15~30min可达到彻底灭菌的目的。
灭菌处理实验报告
一、实验目的1. 理解灭菌处理的重要性及其原理。
2. 掌握常用的灭菌方法及其操作步骤。
3. 评估不同灭菌方法的效果。
二、实验原理灭菌处理是指使用物理或化学手段杀灭或消除微生物的方法。
微生物包括细菌、病毒、真菌等,它们可能存在于实验材料、设备、环境中等。
灭菌处理可以有效防止实验过程中的交叉污染,保证实验结果的准确性。
常用的灭菌方法包括物理灭菌和化学灭菌。
物理灭菌包括高温灭菌、高压蒸汽灭菌、紫外线灭菌等;化学灭菌包括使用消毒剂、酒精、甲醛等。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、水、琼脂、无菌生理盐水、消毒剂、酒精、甲醛等。
2. 仪器:高压蒸汽灭菌锅、三角瓶、培养皿、试管、移液管、试管架、酒精灯、pH试纸、烧杯、报纸、棉花、量筒等。
四、实验步骤1. 高压蒸汽灭菌(1)将待灭菌的物品放入高压蒸汽灭菌锅内,关闭锅盖。
(2)加入适量的水,打开蒸汽阀,调节压力至121℃。
(3)保持121℃灭菌30分钟。
(4)待压力降至0时,打开锅盖,取出灭菌物品。
2. 紫外线灭菌(1)将待灭菌的物品放置在紫外线照射区域。
(2)打开紫外线灯,照射时间根据物品种类和紫外线灯功率确定,一般为30分钟。
(3)照射完成后,关闭紫外线灯,将物品取出。
3. 消毒剂处理(1)将待消毒的物品放入消毒剂溶液中。
(2)浸泡时间根据消毒剂种类和浓度确定,一般为30分钟。
(3)浸泡完成后,取出物品,用无菌生理盐水冲洗干净。
4. 酒精处理(1)将待消毒的物品放入酒精溶液中。
(2)浸泡时间根据酒精浓度和物品种类确定,一般为30分钟。
(3)浸泡完成后,取出物品,用无菌生理盐水冲洗干净。
五、实验结果与分析1. 高压蒸汽灭菌:灭菌后的物品在培养皿中未观察到微生物生长,说明高压蒸汽灭菌效果良好。
2. 紫外线灭菌:灭菌后的物品在培养皿中未观察到微生物生长,说明紫外线灭菌效果良好。
3. 消毒剂处理:消毒后的物品在培养皿中未观察到微生物生长,说明消毒剂处理效果良好。
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实验报告灭菌与消毒院系:专业班级: 姓名:学号:同组人:学号:指导老师:实验日期: 实验组号:实验目的:1.了解干热灭菌的原理和应用范围。
学习干热灭菌的操作技术。
2.了解高压蒸气灭菌的基本原理及应用范围。
学习高压蒸气灭菌的操作方法。
3.了解紫外线灭菌的原理和方法。
实验原理:干热灭菌是利用高温使微生物细胞内的蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。
细胞内的蛋白质凝固性与其本身的含水量有关,在菌体受热时,当环境和细胞内含水量越大,则蛋白蛋凝固就越快,反之含水量越少,凝固缓慢。
因此,与湿热灭菌相比,干热灭菌所需温度要高(160~170℃),时间要长(1~2h),但干热灭菌温度不能超过180℃,否则,包器皿的纸或棉塞就会烧焦,甚至引起燃烧。
高压蒸气灭菌是将待灭菌的物品放在一个密闭的加压灭菌锅内,通过加热,使灭菌锅隔套间的水沸腾而产生蒸气。
待水蒸气急剧地将锅内的冷空气从排气阀中驱尽,然后关闭排气阀,继续加热,此时由于蒸气不能溢出,而增加了灭菌锅内的压力,从而使沸点增高,得到高于100℃的温度。
导致菌体蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。
在同一温度下,湿热的杀菌效力比干热大。
其原因有三:一是湿热中细菌菌体吸收水分,蛋白质较易凝固,因蛋白质含水量增加,所需凝固温度降低(表1),,二是湿热的穿透力比干热大(表2),,三是湿热的蒸气有潜热存在。
1g水在100℃时,由气态变为液态时可放出2.26kJ(千焦)的热量。
这种潜热,能迅速提高被灭菌物体的温度,从而增加灭菌效力。
表1 蛋白质含水量与凝固所需温度的关系表2干热湿热穿透力及灭菌效果比较在使用高压蒸气灭菌锅灭菌时,灭菌锅内冷空气的排除是否完全极为重要,因为空气的膨胀压大于水蒸气的膨胀压,所以,当水蒸气中含有空气时,在同一压力下,含空气蒸气的温度低于饱和蒸气的温度。
灭菌锅内留有不同分量空气时,压力与温度的关系见(表3)表3 灭菌锅留有不同分量空气时,压力与温度的关系现在法定压力单位己不用磅和kg/cm2表示,而是用Pa或bar表示,其换算关系为:1kg/cm2=98066.5Pa;1Ib/in2=6894.76Pa.一般培养基用0.1Mpa(相当于15 Ib/in2或1.05kg/cm2),121.5℃,15~30min可达到彻底灭菌的目的。
灭菌的温度及维持的时间随灭菌物品的性质和容量等具体情况而有所改变。
例如含糖培养基用0.06Mpa(8Ib/in2或0.59kg/cm2)112.6℃灭菌15min,但为了保证效果,可将其他成分先行121.3o C, 灭菌20min,然后以无菌操作手续加入灭菌的糖溶液。
又如盛于试管内的培养基以0.1Mpa,121.5℃灭菌20min即可,而盛于大瓶内的培养基最好以0.1Mpa,122℃灭菌30min。
实验中常用的非自控高压蒸气灭菌锅有卧式和手提式二种,其结构和工作原理相同,本实验以手提式高压蒸气灭菌锅为例,介绍其使用方法,有关自控高压蒸气灭菌锅(autoclave)的使用可参照厂家说明书。
紫外线灭菌是用紫外线灯进行的。
波长为200~300nm的紫外线都有杀菌能力,其中以260nm的杀菌力最强。
在波长一定的条件下,紫外线的杀菌效率与强度和时间的乘积成正比。
紫外线杀菌机理主要是因为它诱导了胸腺嘧啶二聚体的形成和DNA链的交联,从而抑制了DNA的复制。
另一方面,由于辐射能使空气中的氧电离成[O],再使O2氧化生成臭氧(O3)或使水(H2O)氧化生成过氧化氢(H2O2)。
O3和H2O2均有杀菌作用。
紫外线穿透力不大,所以,只适用于无菌室,接种箱,手术室内的空气及物体表面的灭菌。
紫外线灯距照射物以不超过1.2m为宜。
此外,为了加强紫外线灭菌效果,在打开紫外灯以前;可在无菌室内(或接种箱内)喷洒3%~5%石炭酸溶液,一方面使空气中附着有微生物的尘埃降落,另一方面也可以杀死一部分细菌。
无菌室内的桌面、凳子可用2%~3%的来苏尔擦洗,然后再开紫外灯照射,即可增强杀菌效果,达到灭菌目的。
实验器材:1.培养基牛肉膏蛋白胨培养基。
2.溶液或试剂 3%-5%石炭酸或2%-3%来苏尔溶液。
3.仪器或其他用具培养皿,试管,吸管,电烘箱,培养皿(6套一包),手提式高压蒸气灭菌锅,紫外线灯等。
实验内容:一、干热灭菌1.装入待灭菌物品将包好的待灭菌物品(培养皿、试管,吸管等)放入电烘箱内,关好箱门。
物品不要摆得太挤,以免妨碍空气流通,灭菌物品不要接触电烘箱内壁的铁板,以防包装纸烤焦起火。
2.升温接通电源,拨动开关,打开电烘箱排气孔,旋动恒温调节器至绿灯亮,让温度逐渐上升。
当温度升至100℃时,关闭排气孔。
在升温过程中,如果红灯熄灭,绿灯亮,表示箱内停止加温,此时如果还未达到所需的160—170℃温度,则需转动调节器使红灯再亮,如此反复调节,直至达到所需温度。
3.恒温当温度升达到160~170℃时,恒温调节器会自动控制调节温度,保持此温度2h。
干热灭菌过程。
严防恒温调节的自动控制失灵而造成安全事故。
4.降温切断电源、自然降温。
5.开箱取物待电烘箱内温度降到70℃以下后,打开箱门,取出灭菌物品。
电烘箱内温度末降到70℃,切勿自行打开箱门以免骤然降温导致玻璃器皿炸裂。
二高压蒸气灭菌1.首先将内层锅取出,再向外层锅内加入适量的水,使水面与三角搁架相平为宜。
切勿忘记加水,同时水量不可过少,以防灭菌锅烧干而引起炸裂事故。
2.放回内层锅,并装入待灭菌物品。
注意不要装得太挤,以免防碍蒸气流通而影响灭菌效果。
三角烧瓶与试管口端均不要与锅壁接触,以免冷凝水淋湿包口的纸而透入棉塞。
3.加盖,并将盖上的排气软管插入内层锅的排气槽内。
再以两两对称的方式同时旋紧相对的两个螺栓,使螺栓松紧一致,勿使漏气。
4.用电炉或煤气加热,并同时打开排气阀,使水沸腾以排除锅内的冷空气。
待冷空气完全排尽后,关上排气阀,让锅内的温度随蒸气压力增加到逐渐上升。
当锅内压力升到所需压力时,控制热源,维持压力至所需时间。
本实验用0.1Mpa,121.5℃,20min灭菌。
灭菌的主要因素是温度而不是压力。
因此锅内冷空气必须完全排尽后,才能关上排气阀,维持所需压力。
5.灭菌所需时间到后,切断电源或关闭煤气,让灭菌锅内温度自然下降,当压力表的压力降至“0”时,打开排气阀,旋松螺栓,打开盖子,取出灭菌物品。
压力一定要降到“0”时,才能打开排气阀,开盖取物。
否则就会因锅内压力突然下降,使容器内的培养基由于内外压力不平衡而冲出烧瓶口或试管口,造成棉塞沾染培养基而发生污染,甚至灼伤操作者。
6.将取出的灭菌培养基,需摆斜面的则摆成斜面,然后放入37℃温箱培养24h,经检查若无杂菌生长,即可待用。
三、紫外线灭菌l.单用紫外线照射(1)在无菌室内或在接种箱内打开紫外线灯开关,照射30min,将开关关闭。
(2)将牛肉膏蛋白胨平板盖打开15min,然后盖上皿盖。
置37℃培养24h。
共做三套。
(3)检查每个平板上生长的菌落数。
如果不超过4个,说明灭菌效果良好,否则,需延长照射时间或同时加强其他措施。
2.化学消毒剂与紫外线照射结合使用(1)在无菌室内,先喷洒3%~5%的石炭酸溶液,再用紫外线灯照射15imn。
(2)无菌室内的桌面,凳子用2%~3%来苏尔擦洗,再打开紫外线灯照射15min。
(3)检查灭菌效果。
因紫外线对眼结膜及视神经有损伤作用,对皮肤有刺激作用,故不能直视紫外线灯光下工作。
实验结果与分析:l.在干热灭菌操作过程中应注意哪些问题,为什么?1、物品不要摆放太挤,以免妨碍空气流通2、灭菌物品不要接触干燥箱内壁的铁板,以防包装纸烤焦起火3、灭菌时人不能离开4、灭菌结束后不能忘记关掉电源5、待温度降到70度以下再打开,否则冷热空气交替,玻璃器皿容易炸裂或发生烫伤事故2.为什么干热火菌比湿热灭菌所需要的温度要高,时间要长?干热是在常压下进行,当然时间长.湿热是在1个多大气压下,当然时间短.灭菌后进行细菌检测,比较结果.在湿热条件下,有水蒸汽的作用:1:高温水蒸汽导热比干空气要快;2:高温水蒸汽冷凝变水时有放热过程;3:高温水蒸汽能穿透细菌的细胞膜,直接进入细胞内破坏细胞;4:高温水蒸汽能水解一部分细胞结构,加速导热。
干燥的条件下,C-H键保持一定的空间形态,不容易变形,故蛋白质等也不容易变性,所以不易灭菌。
而湿热蒸汽穿透力强,导热快,释放的热量多,C-H键在水环境中容易伸展变形,从而导致蛋白质变性。
一般,湿热蒸汽灭菌15min,可保证99.9%无菌3.高压蒸气灭菌开始之前,为什么要将锅内冷空气排尽?灭菌完毕后,为什么待压力降低“0”时才能打开排气阀,开盖取物?在同一温度下,湿热的杀菌效力比干热大,在使用高压蒸汽灭菌锅灭菌时,灭菌锅内冷空气的排除是否完全极为重要,因为空气的膨胀压大于水蒸汽的膨胀压,所以,当水蒸汽中含有空气时,在同一压力下,含空气蒸汽的温度低于饱和蒸汽的温度。
如果压力未降到0时,打开排气阀,就会因锅内压力突然下降,使容器内的培养基由于内外压力不平衡而冲出烧瓶口或试管口,造成棉塞沾染培养基而发生污染。
4.在使用高压蒸气灭菌锅灭菌时,怎样杜绝一切不安全的因素?湿热灭菌原理知道了,就好解释:1,带灭菌的器物,材料等要用能够使蒸汽穿透的材料包装,如用牛皮纸,报纸,可透气滤膜等,以保证蒸汽能到达灭菌部位。
2. 一定要将灭菌锅内蒸汽排除干净,即锅内水沸腾后,放气阀中冒白气5分钟左右,包装锅内无空气,都是水蒸气啦,在关闭放气阀。
3。
灭菌时间,如果121度,20分钟即可以。
如果108度,则至少要灭菌30到40分钟。
4 灭菌完毕,最好等温度降低,在开锅。
避免快速放气,降温,降压,因为这样会造成灭菌锅内装液体的瓶子内外压力差过大,瓶盖冲开5.灭菌在微生物实验操作中有何重要意义?防止培养基被污染;防止杂菌影响实验结果;现在的实验一般都是控制变量法,所以一旦有杂菌进入,实验就宣告失败了。
排除外源微生物对实验造成的干扰6.黑曲霉的孢子与芽孢杆菌的孢子对热的抗性哪个最强?为什么?是芽孢孢子对热抗性强的,对紫外线的“抗性”也比黑曲霉的孢子要强。
但是芽孢杆菌的芽孢也有很多种类,不同的芽孢杆菌的孢子的热抗性也是不一样的。
但大多数比黑曲霉的孢子的热抗性要强。
二者孢子的壁的结构与化学成分都是不同的。