液质联用技术及其应用

Interface
HPLC
(Key to
MS
Success!)
by Li Ping
3
LC-MS的接口的发展和种类
传送带(moving belt)式的LC-MS: 目前 已经停用 热喷雾(TSP) LC-MS接口: 已经很少使用 粒子束(PBI) 大气压电离源(API):目前最常用的方法
电喷雾(ESI) 大气压化学电离源(APcI)
雾化器
Neutral Molecules Analyte Ions
Clusters Salts
锥孔
透镜
高能打拿极/ 电子倍增器
毛细管 八极杆 四极杆
+ +
+ +
+ +
+
+
+ + + + + + + ++
+
加热 N2
碎片碰撞电压
(CID)
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8
ES电离原理
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9
大气压化学电离源(APCI)的电离过程
安捷伦-液质联用技术(LC/MS)及其应用
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1
百度文库 液质(LC/MS)联用技术基础
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2
液相(HPLC) 到 质谱(MS)的接口
液相(HPLC)
高效分离混合物 流动相挥发后产生大量气体 出口压力为大气压 无质量限制 可以使用缓冲盐溶液
质谱分析仪(MS)
需要高真空条件 质量分析系统 最好使用挥发性缓冲液
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4
LC/MS联用技术的相对适用范围
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5
大气压电喷雾质谱应用范围
100,000
大气压电喷雾源
10,000
大气压化学源
1000
气相色谱/质谱
分子量
非极性
化合物极性
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极性化合物
6
电喷雾(ESI)的电离过程
带电液滴
+ +
+ -
+ -+
-+
--
+
+ +
大气压化学电离源(APCI)
化合物无需具有挥发性
是分析热不稳定化和物的 首选方法
离子在溶液中以已生成
除了生成单电荷离子之外 还可以生成多电荷离子
化和物需具有一定的挥发性 化和物必需是热稳定的 离子在气态条件中生成 只生成单电荷离子
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13
电喷雾(ESI)和大气压化学离子化(APCI)
Octopole
Fragmentation Zone (CID)
DETAIL
Lenses
Quadrupole
[M ] + [M1 ] +
2
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15
碰撞电压值对质谱图的影响
Abundance
8000 碰撞电压= 100 volts
6000
4000
2000
439 467
C H2O C O O C 11H23 C HO C O O C 13H27 C H2O C O O C 15H31
D e te c to r
U + V cos 2 f t
io n s co llid e w ith th e ro d s
ac and dc voltages
S can n in g o f m ea su rin g ran g e: U a nd V a re va rie d
10
液质联用的大气压化学电离源(APCI)接口
锥孔
透镜
高能打拿极/ 电子倍增器
毛细管 八极杆 四极杆
+
+ +
+
++
+ + + + + + + ++
+
Corona needle
热氮气
碎片碰撞电压（CID）
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11
APCI电离原理
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12
大气压源子化技术
电喷雾(ESI)
液相/单四极杆质谱 LC/MSD VL
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19
四极杆质谱
U V cos 2 f t
io n s w ith co rresp o n d in g m /z
多极离子阱质谱
Main RF
Ring
Low Amplitude Dipole Field
(1/3 Frequency of the Main RF)
ESI
APCI
农药及残留化合物 多肽及蛋白的分子量测定 确定氨基酸序列 多肽及蛋白的纯度分析 单糖和多糖的结构分析 中极性到高极性,包括离子化合物 的分析,如表面活性剂分析
农药及残留化合物 抗生素 碱性药物 小分子量样品 类固醇, 雌激素 单磺酸偶氮染料
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14
什麽是诱导解离碰撞?
m/z-->
350
400
450
500
550
600
650
700
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16
安捷伦液-质联用仪介绍
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17
液质(LC/MS)联用系统的示意图
离子源
离子束 聚焦
M/Z 分析器
检测器
LC 接口
HPLC
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数据 处理
Abund. 100 80 60 40 20 0 100
502
684.65
m/z--> Abundance
8000 6000 4000 2000
350
400
450
500
碰撞电压= 175 volts
467
439
411
495
550
600
650
700
684.65
loss of C12 fatty acid loss of C14 fatty acid
loss of C16 fatty acid
(Collision Induced Dissociation)?
在特定的区域, 通过与氮气分子 碰撞导致分子解离, 从而产生特 征碎片离子
可以得到结构信息用于化和物的 定性分析
可以提供用于定量分析目地的确
任碎片离子
M
n
只要改变单一参数
“fragmentor”来控制CID.
Skimmers Capillary
1: MS, Time=0.4341-0.7177min (#17-#22), 100%=20039000arb 223.0
281.0
质谱图
197.1
150
200
251.0
324.2
250
300
m/z
18
安捷伦LC/MS 产品家族
液相/单四极杆质谱 LC/MSD SL
液相/离子井质谱 (VL和SL)
溶剂--------->[溶剂+H]+
含有气溶胶的分析物
[溶剂+H]++M--------->溶剂 +[M]+
溶剂在蒸发 器中蒸发
+
++ ++
+
+
+
+
+ +
+
+ +
++
++
+ +
++
+
电荷转移至 分 析物分子
蒸汽
通过电晕针放电形 成带电荷的反应剂 离子
流动相
分析物
++ + ++
分析物离子
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+
溶剂蒸发
分析物离子
溶剂离子束
盐/离子对 中性化和物
+
Rayleigh Limit
Reached
++
++
+-+--+-- +++
+
++--++ ++-- ++
+
+
库仑爆炸 （Coulomb Explosions）
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+ 溶剂离子束 + 分析物离子
7
液质联用的电喷雾(ESI)接口
液相的入口 雾化气入口