5环境中微生物的检测
探究题04--《检测不同环境中的细菌和真菌》实验专题(解析版)
探究题04 检测不同环境中的细菌和真菌 1. 提出问题：洗手能减少手上的细菌和真菌数量吗?2.作出假设： 洗手能减少手上的细菌和真菌数量。
3. 图示过程 4. 实验变量：细菌和真菌。
对照组：①号培养皿。
5. 实验现象：25°C 恒温培养一段时间后，①号培养皿中无菌落，②号培养皿中有较多菌落，③号培养皿有较少菌落。
6. 结论：洗手能减少手上的细菌和真菌数量。
1. 培养细菌和真菌的方法：配制培养基(含有机物)→高温灭菌→接种-→恒温培养。
2. 培养皿高温处理的目的：高温杀死培养皿和培养基上的杂菌，排除其他杂菌的污染。
3. 接种问题：实验中要使用无菌棉棒进行接种，不能将培养基暴露在空气中，目的是防止棉棒上的微生物污染培养基。
4. 结果记录问题：及时登记观察结果，这时一定要登记好日期，千万不要在实验过程中打开培养皿。
一、单选题1．细菌和真菌的培养通常包括以下步骤，请选择正确的排列顺序（ ） ①配制培养基；②将接种后的培养基放在适宜的温度下培养；③接种；④高温灭菌冷却图解实验针对演练A．①④③②B．①②③④C．②①③④D．①③②④【答案】A【详解】细菌和真菌的生活需要一定的条件，如水分、适宜的温度、还有有机物。
因此，①首先要配制含有营养物质的培养基，可以用牛肉汁加琼脂熬制，然后把培养基和所有用具进行，④高温灭菌，以防杂菌对实验的干扰，为防止高温杀死细菌、真菌，要等冷却后，在进行③接种，接种后②放在温暖的地方进行恒温培养。
注意定期观察并详细记录实验现象。
故选A。
2．幼儿园的老师想让孩子知道手上有细菌或真菌，用无菌棉棒蘸取手心处，在培养基上轻轻涂抹，此步骤属于细菌、真菌一般培养方法中的（）A．接种B．灭菌C．配置培养基D．放在适宜的环境下培养【答案】A【详解】细菌和真菌的生活需要一定的条件，如水分、适宜的温度、还有有机物。
因此首先要配制含有营养物质的培养基，可以用牛肉汁加琼脂熬制，然后把培养基和所有用具进行高温灭菌，以防杂菌对实验的干扰，为防止高温杀死细菌、真菌，要等冷却后，再进行接种，接种后放在温暖的地方进行恒温培养。
纯牛奶五微生物项目检验方案
纯牛奶五微生物项目检验方案
纯牛奶五微生物项目检验方案是指对纯牛奶进行检验时，需要检测的五项微生物指标，包括大肠杆菌群、酵母菌、乳酸菌、沙门氏菌和致病菌。
纯牛奶五微生物项目检验方案的实施步骤如下：
1.采集样品：采集纯牛奶样品，并将其分装到检测用的容器中；
2.灭菌：将采集的样品灭菌，以防止样品中的细菌污染；
3.培养：将灭菌后的样品放入培养基中，在适宜的温度和湿度条件下培养；
4.分离：将培养后的样品进行分离，以便检测；
5.检测：对分离后的样品进行检测，检测大肠杆菌群、酵母菌、乳酸菌、沙门氏菌和致病菌；
6.结果分析：根据检测结果，对纯牛奶的微生物指标进行分析，以判断纯牛奶的质量。
纯牛奶五微生物项目检验方案是确保纯牛奶质量的重要手段，可以有效检测纯牛奶中的微生物指标，从而确保纯牛奶的质量。
微生物检测标准
微生物取样方法、微生物检测标准举例一：一、空气采样及检验方法1培养基：普通营养琼脂平板，按GB4789.28中3.7条配制2采样（空气沉降法）2.1布点：面积小于30平方米的车间，设一对角线，在线上取3点，即中心一点，两端在距墙1米处各取一点；面积大于30平方米的车间，设东、西、南、北、中5个点，其中东、西、南、北点均距墙1米。
2.2采样高度：与地面垂直高度80-150厘米。
2.3采样方法；用直径为9厘米的普通营养琼脂平板在采样点上暴露20分钟盖上送检培养。
3培养：于37℃培养24小时。
4检测频率：每周空气质量标准：生车间、熟车间、成品车间：低于100个半成品库、成品库：低于10个二、设备的采样与检验方法根据生产过程所要求的重点卫生部位，实验室对其进行涂抹采样，进行细菌总数检验。
1采样方法1.1涂抹法（适用于表面平坦的设备和工器具产品接触面）取经过灭菌的铝片框（框内面积为50平方厘米）放在需检查的部位上，用无菌棉球蘸上无菌生理盐水擦拭铝片中间方框部分，擦完后立即将棉球投入盛有10毫升无菌生理盐水的试管中，此液每毫升代表5平方厘米。
1.2贴纸法（适用于表面不平坦的设备和工器具接处面）将无菌规格纸（5×5厘米，纸质要薄而软）用无菌生理盐水泡湿后，于需测部分分别贴上两张，两张纸面积共50平方厘米，然后取下放入盛有10毫升无菌生理盐水的试管中，此液每毫升代表5平方厘米。
2检验方法2.1细菌总数的检验将上述样液充分振摇，根据卫生情况，相应地做10倍递增稀释，选择其中2-3个合适的稀释度作平皿倾注培养，培养基用普通营养琼脂，每个稀释度作2个平皿，每个平皿注入1毫升样液，于37℃培养24小时后计菌落数。
结果计算表面细菌总数（cfu/cm2）=平皿上菌落的平均数×样液稀释倍数/30×22.2致病菌的检验沙门氏菌，参照GB4789.4进行金黄色葡球菌，参照GB7918.5进行4.检验合格标准：细菌总数10－100个∕cm2，5.关键点：细菌总数≤10个∕cm2一般区域：细菌总数≤100个∕cm2三、人员手表面细菌污染情况的检验1. 采样方法：用一支蘸有无菌生理盐水的棉拭子涂擦被检对象手的全部，反复两次，涂擦的时候棉拭子要相应地转动，擦完后，将手接触部分剪去，将棉拭子放入装有10毫升无菌生理盐水的试管内送检培养。
如何用BOD5测定仪正确检测BOD5
如何用BOD5测定仪正确检测BOD5BOD5测定仪由微处理器、放大器、打印机、BOD培育瓶和生化培育箱等构成。
BOD5测定仪是环境水质监测中常用的仪器。
下面将介绍BOD5测定仪的原理。
BOD5是一种紧要的污染物指标，通过检测水体中微生物在新陈代谢过程中消耗的溶解氧量，间接计算出有机物对水体的污染程度。
一、BOD5测定仪的检测方法：将bod检测仪置于培育箱中，依据预先选定的量程和测量范围，将定量体积的水样倒入培育瓶中，置于搅拌器上进行连续搅拌。
培育箱内温度掌控在20℃±1℃，水样先进行恒温，然后进行五日培育。
必需确保培育瓶中有充足的溶解氧。
样品中的有机物经过生物氧化作用，转化为氮、碳和硫的氧化物，在此过程中，水样中释放的气体二氧化碳，被氢氧化锂汲取。
因此，瓶内气压的降低相当于微生物消耗的溶解氧量。
这样，样品的BOD值与瓶内气压降低的程度成正比。
BOD值可以通过测量气压的变化来获得。
加添或削减取样量可以加添或削减压力降低值。
这使操无需多而杂的稀释步骤即可精准测量大范围的BOD值。
通过压力传感器检测培育瓶内气压的变化，通过液晶显示屏循环显示每个样品的BOD值和生化反应曲线。
二、使用BOD5测定仪进行检测的优点：这种检测方法摒弃了直接使用汞柱读取压差的方法，一方面除去了水银挥发对人体造成的危害，另一方面操作更加简便、智能，采纳智能电子压力传感器，提高了测量的精准度，并拓宽了BOD的测量范围。
三、BOD5测定仪的原理：放大器置于培育箱内，并按预先选择的量程及测量范围，定量体积的水样倒入培育瓶，放在放大器上连续搅拌。
培育箱内温度掌控在20℃±1℃，水样恒温后进行五日培育。
培育瓶中必需保证充足的溶解氧。
样品中的有机物经过生物氧化作用，变化成氮、碳和硫的氧化物，在这一过程中，从水样中跑出来的气体二氧化碳被氢氧化钠（或氢氧化钾）汲取。
因此，瓶中空气压力削减量，相当于微生物所消耗的溶解氧量，这样，样品BOD5值与瓶中空气压力削减的程度成正比，通过测量空气压力的变化可以得到BOD5值。
公共卫生微生物采样、检测方法总结
一、空气中微生物的检测方法------细菌总数（营养琼脂，121℃高压灭菌20min，培养时间37℃,48h）1.两种方法（1）撞击法(二级或者六级微生物采样器)（2）自然沉降法（暴露5min）采样：梅花布点，高度：1.2~1.5m；离墙：1m。
二、茶具微生物检验方法（一）细菌总数1、生理盐水的制法：将氯化钠（8.5g）溶解于蒸馏水（1000mL）中，分装到试管内，每管10mL，121℃高压灭菌20min。
2、采样：棉拭子湿润生理盐水，在茶具内、外缘涂抹50cm2，即口唇接触处一圈（1~1.5cm），用灭菌剪刀剪去棉签手接触处，将棉拭子放入10mL生理盐水中，4h内送检。
3、检验程序：检样→各1mL加入两块灭菌平皿（若污染严重，可十倍递增稀释）→37℃，48h 培养→菌落计数→报告4、单位：cfu/cm2。
（二）大肠菌群1、培养基：乳糖胆盐发酵培养液（双料的，每管10mL，115℃高压灭菌15min）2、检测方法：发酵法（具体内容课本11页）3、检样（测定细菌总数余下的样品）4、革兰氏染色过程：（阳性菌显紫色，阴性菌显红色）（1）初染：1min，水洗；（2）碘染：1min，水洗；（3）脱色：30s，水洗；（4）复染：1min，水洗，待干，镜检。
5、结果报告：凡乳糖发酵管最终产酸产气，革兰氏染色为阴性的无芽孢杆菌，即可报告检出大肠菌群。
三、毛巾、床上卧具微生物检测方法（一）细菌总数1.采样（1）毛巾、枕巾：对折后两面的中央各25cm2；（2）床单、被单：在上下两部中央25cm2来回涂抹；2、检测程序同茶具细菌总数检测3.计算单位：cfu/25cm2。
(二)大肠菌群（检测程序同茶具大肠菌群检测）1.涂抹法：（用测定细菌总数时采集的样品）四、理发用具微生物检验方法（一）大肠菌群1、采样推子：在推子前部上下部分均匀各涂抹三次；理发刀、剪和修脚工具：在使用的刀、剪面的两侧各涂抹一次采样；两个刀或者两个剪为一份样品。
环境微生物检测标准操作规程作业指导书
环境微生物检测标准操作规程作业指导书持有部门：院感办文件编号：
制定者：审核者：版次：1 制定日期：审核日期：执行日期：
一、监测目的
1.感染暴发或感染流行时，环境因素在感染传播中有流行病学意义。
2.监测潜在的危险环境状况，证明有危险的病原体存在或证明危险的病原体已被清除。
3.当某项感染控制措施改变时，评估其效果。
4.目标性监测的需要。
5.询证医学证据支持。
二、空气培养（沉降法）
1.采样时间：Ⅰ类环境在洁净系统自净后与从事医疗活动前采样；Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ类环境在消毒或规定的通风换气后与从事医疗活动前采样。
2.采样高度：距地面垂直高度
80-150cm。
3.采样点设定：
（1）Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ类环境：室内面
积≤30m2，在对角线上设里、中、外3点，里、外两点位置各距。
环境工程微生物学实验
（1）试管编号；
（2）2只试管分别穿刺接种大肠杆菌和变形杆菌； （3）37 ℃ ，培养24h 3、柠檬酸盐利用试验
（1）试管编号；
（2）2只试管分别划线接种大肠杆菌和枯草杆菌； （3）37 ℃ ，培养24h
四、实验结果观察与记录
1、将实验结果填入下表，＋表示阳性，－表示阴性。 2、思考题：微生物生理生化反应的意义何在？
三操作步骤1微生物大小的测量1枯草杆菌标本片的制作2目镜测微尺的标定放置镜台测微尺放置目镜测微尺校正目镜测微尺计算不同放大倍数下目镜测微尺每格代表的长度3枯草杆菌大小的测量四实验报告1将目镜测微尺校正结果填入下表接物镜接物镜倍数目镜测微尺目镜测微尺每格代表的长度2在高倍镜下测量枯草杆菌大小的实验结果填入下表菌体编号长度的目镜测微尺格数宽度的目镜测微尺格数平均值菌体大小平均值m3分析实验结果一实验目的明确显微镜计数的原理
酵母菌的形态构造
线 粒 体 芽体液泡 芽 体 核 液 泡 膜 细 胞 壁 细 胞 膜
根霉（Rhizopus)
青霉（Penicillum):
曲霉(Aspergillus)
四、实验报告
1. 分析实验结果，绘制酵母菌、青霉、黑曲霉的形
态图，并注明各部位名称，。 2. 怎样才能观察到较为完整的霉菌形态，各种霉菌 制片过程中分别有哪些注意事项？
121℃,灭菌20~30min
使用时, 将培养基加热融化, 待温度降至50 ℃左右时在 100mL培养基中加入1%链霉素0.3mL
糖发酵培养基：
蛋白胨2g，葡萄糖10g， K2HPO4 0.2g, NaCl 5g, 琼脂5～6g， pH7.0～7.2 ，蒸馏水1L ， 1%溴百里酚蓝 3ml. 分装试管，每管4～5cm， 112℃,灭菌30min.
微生物检测标准
微生物取样方法、微生物检测标准举例一：一、空气采样及检验方法1培养基：普通营养琼脂平板，按GB4789.28中3.7条配制2采样（空气沉降法）2.1布点：面积小于30平方米的车间，设一对角线，在线上取3点，即中心一点，两端在距墙1米处各取一点；面积大于30平方米的车间，设东、西、南、北、中5个点，其中东、西、南、北点均距墙1米。
2.2采样高度：与地面垂直高度80-150厘米。
2.3采样方法；用直径为9厘米的普通营养琼脂平板在采样点上暴露20分钟盖上送检培养。
3培养：于37°C培养24小时。
4检测频率：每周空气质量标准：生车间、熟车间、成品车间：低于100个半成品库、成品库：低于10个二、设备的采样与检验方法根据生产过程所要求的重点卫生部位，实验室对其进行涂抹采样，进行细菌总数检验。
1采样方法1.1涂抹法（适用于表面平坦的设备和工器具产品接触面）取经过灭菌的铝片框（框内面积为50平方厘米）放在需检查的部位上，用无菌棉球蘸上无菌生理盐水擦拭铝片中间方框部分，擦完后立即将棉球投入盛有10毫升无菌生理盐水的试管中，此液每毫升代表5平方厘米。
1.2贴纸法（适用于表面不平坦的设备和工器具接处面）将无菌规格纸（5X5厘米，纸质要薄而软）用无菌生理盐水泡湿后，于需测部分分别贴上两张，两张纸面积共50平方厘米，然后取下放入盛有10毫升无菌生理盐水的试管中，此液每毫升代表5平方厘米。
2检验方法2.1细菌总数的检验将上述样液充分振摇，根据卫生情况，相应地做10倍递增稀释，选择其中2-3个合适的稀释度作平皿倾注培养，培养基用普通营养琼脂，每个稀释度作2个平皿，每个平皿注入1毫升样液，于37C培养24小时后计菌落数。
结果计算表面细菌总数（cfu/cm2）=平皿上菌落的平均数X样液稀释倍数/30X22.2致病菌的检验沙门氏菌，参照GB4789.4进行金黄色葡球菌，参照GB7918.5进行4.检验合格标准：细菌总数10—100个/cm2，5.关键点：细菌总数W10个/cm2一般区域：细菌总数W100个/cm2三、人员手表面细菌污染情况的检验1.采样方法：用一支蘸有无菌生理盐水的棉拭子涂擦被检对象手的全部，反复两次，涂擦的时候棉拭子要相应地转动，擦完后，将手接触部分剪去，将棉拭子放入装有10毫升无菌生理盐水的试管内送检培养。
微生物检测方法
微生物检测方法微生物检测是指对环境、食品、药品、生物制品等中的微生物进行检测和监测的过程。
微生物检测的方法多种多样，根据不同的检测对象和要求，可以选择合适的方法进行检测。
下面将介绍几种常见的微生物检测方法。
首先，传统的培养方法是一种常见的微生物检测方法。
这种方法是将样品在适宜的培养基上培养一段时间，然后观察培养基上是否有微生物生长，根据生长的数量和形态来判断样品中是否存在微生物。
这种方法简单易行，但需要较长的时间，且对于某些难以培养的微生物可能无法检测出来。
其次，PCR方法是一种快速准确的微生物检测方法。
PCR方法是利用聚合酶链式反应技术，通过扩增微生物DNA片段来进行检测。
这种方法具有高度的特异性和敏感性，可以快速准确地检测出微生物的存在和数量。
但是，PCR方法需要设备和技术的支持，成本较高，且对样品的前处理要求较高。
另外，免疫学方法也是一种常用的微生物检测方法。
这种方法是利用抗体与特定的微生物抗原结合的原理进行检测。
免疫学方法具有高度的特异性和灵敏度，可以快速准确地检测出微生物的存在和数量。
但是，免疫学方法需要较长的培养时间，且受到环境因素的影响较大。
此外，基因测序技术也是一种新兴的微生物检测方法。
这种方法是通过对微生物的基因进行测序分析，来确定微生物的种属和数量。
基因测序技术具有高度的准确性和全面性，可以对微生物进行全面的检测和分析。
但是，基因测序技术需要较长的分析时间和复杂的数据处理，且对设备和技术要求较高。
综上所述，微生物检测方法有传统的培养方法、PCR方法、免疫学方法和基因测序技术等多种选择。
在实际应用中，可以根据检测对象和要求选择合适的方法进行检测。
随着科学技术的不断发展，相信微生物检测方法会更加快速、准确、全面，为微生物监测和控制提供更好的技术支持。
微生物检验基础知识
微生物检验基础知识
微生物检验是一种使用显微技术对微生物进行观察和测量的方法。
以下是微生物检验的基础知识：
1. 微生物的概念：微生物是微小的生物，通常需要使用显微镜才能看到。
它们包括细菌、病毒、真菌、藻类等。
2. 微生物检验的分类：微生物检验可以分为细菌检验、病毒检验、寄生虫检验和真菌检验等。
3. 微生物检验的方法：微生物检验的方法包括直接观察、分离培养、血清学试验、生化反应等。
4. 微生物检验的步骤：微生物检验的步骤包括采集样品、制备培养基、接种、培养、观察和鉴定等。
5. 微生物检验的应用：微生物检验在医学、环境监测、食品卫生等领域有广泛应用。
例如，在医学领域中，微生物检验可以帮助医生诊断疾病，监测感染情况，并选择合适的药物治疗。
在环境监测中，微生物检验可以用来检测水源、土壤等环境的污染情况。
6. 微生物的特点：微生物具有体积小、数量大、繁殖快等特点。
同时，它们也具有广泛的分布和多样的种类，可以在各种环境中生存和繁殖。
通过以上基础知识的学习，可以对微生物检验有一个基本的了解和认识。
如有更深入的学习需求，建议阅读微生物检验相关书籍或咨询专业人士。
微生物检测流程范文
微生物检测流程范文1.采集样品：选择适当的采集区域和方法，例如将样品直接刮取或用棉签擦拭表面，将液态样品收集在无菌容器中等。
确保采集过程的无菌性，避免外部污染。
2.提取微生物：将样品中的微生物从基质中分离提取出来。
这可以通过物理方法（如震荡、离心等）或化学方法（如试剂的加入）来实现。
提取方法将根据样品的类型和预期的微生物群落进行选择。
3.筛选和培养：筛选样品提取物以寻找微生物的合适生长条件。
将提取物分别接种在不同的培养基上，并设置不同的培养条件，例如温度、pH、氧气浓度等，以优化微生物的生长。
培养基可以选择通用的培养基，也可以针对特定微生物群体使用专门的培养基。
4.观察和鉴定：通过观察培养基上的微生物菌落形态、颜色、气味等特征，初步推测微生物的种类。
为了进一步确认鉴定结果，可以使用显微镜观察微生物的形态特征，如细胞形状、大小、胞壁结构等。
另外，还可以进行生化试验、分子鉴定等方法来确认微生物的种类。
5.数据分析和结果解释：将鉴定结果整理并进行进一步的统计分析。
可以通过分析微生物菌群的组成和丰度来了解环境中微生物的分布和变化规律。
结果解释应该基于已知的微生物信息和实验设计的目的进行。
整个微生物检测流程中需要注意以下几个问题：1.样品采集和处理过程需要严格保持无菌操作，以避免外源性污染对结果的影响。
2.提取方法的选择应根据样品类型和微生物群落的特点来进行。
不同的方法可能会对提取效率和微生物种类的检测结果产生影响。
3.培养和鉴定过程中需要使用正确的培养基、培养条件和鉴定方法，以确保微生物的生长和鉴定准确性。
4.数据分析可以使用统计学方法和生物信息学工具，对微生物群落结构进行分析和解释。
这将有助于理解微生物在环境中的分布和功能。
总结起来，微生物检测流程包括样品采集、微生物提取、筛选和培养、观察和鉴定、数据分析和结果解释等几个关键步骤。
每个步骤都需要妥善处理，确保操作的准确性和结果的可靠性。
通过微生物检测，可以更好地了解微生物在环境中的存在和活动，为环境保护和生物工艺等领域的研究提供基础数据和参考依据。
实验一 实验室环境和人体表面的微生物检查
实验2 实验室环境和人体表面的微生物检查13生物基地刘洋201300140059一、实验目的1.证实实验室环境与人体表面存在微生物2.体会无菌操作的重要性3.观察不同类群微生物的菌落形态特征4.掌握生理生化反应培养基的配置原理和一般方法步骤5.巩固无菌操作技术二、实验器材1.肉膏蛋白胨琼脂平板牛肉膏1.05g、蛋白胨3.5g、NaCl 1.75g、琼脂7g、水350ml、pH 7.0~7.2、121 ℃灭菌20min。
2.溶液和试剂无菌水3.仪器和其他用品灭菌棉签（装在试管内）、试管架、煤气灯或酒精灯、记号笔和废物缸等。
三、实验原理通过培养的方法使肉眼看不见的单个菌体在固体培养基上，经过生长繁殖形成几百万个菌聚集在一起的肉眼可见的菌落。
四、实验内容及步骤1.在标签纸上做好标记并贴在培养皿侧面。
2.牛肉膏蛋白胨培养基的制备：（1）称量：准确称取牛肉膏1.05g、蛋白胨3.5g、NaCl 1.75g放入烧杯中。
（2）熔化：在上述烧杯中加入少于所需的水量（所需水量为350ml），用玻璃棒搅匀，补充水到所需的总体积350ml。
（3）调pH：用1mol/L NaOH和1mol/L HCl进行调节，直至溶液pH达到7.0~7.2。
（4）分装：将其中200ml溶液装入500ml三角瓶中，向三角瓶中加入4.0克琼脂，向烧杯剩余液体中加入3.0克琼脂，在石棉网上加热烧杯，使琼脂溶解，将烧杯中溶液分装到10支试管中，每支试管中加入体积为试管总体积的1/5左右。
（5）加塞：在三角瓶口上塞上棉塞，防止外界微生物进入造成污染。
（6）包扎：加塞后，在棉塞外包一层牛皮纸，将全部试管用麻绳捆好（还有一支装有无菌水的试管），同样的方法把三角瓶包好，扎好。
用记号笔注明培养及名称、组别、配制日期。
（7）灭菌：将上述培养基以0.1MPa，121℃，90min高压蒸汽灭菌。
（8）搁置斜面：将灭菌的试管培养基冷却至50℃左右，将试管口端搁在玻璃棒或其他合适高度的器具上，搁置的斜面长度以不超过试管的总长的一般为宜。
《环境微生物检测与分析》实验指导2015年
《环境微生物的检测与分析》实验指导编者：吴方丽李欧浙江理工大学生命科学学院二零一四年十二月中国浙江杭州目录实验一土壤微生物拮抗菌的分离与测数一、实验目的1、熟悉分离、培养微生物前的有关准备工作及操作方法。
2、初步掌握从土壤中分离微生物和测数的基本方法。
3、了解培养基的配制原理，掌握其配制过程和方法。
4、掌握实验室几种灭菌方法及技术。
5、掌握无菌操作技术。
6、了解平板菌落计数的原理。
7、识别土壤中几大类微生物的菌落特征。
8、学习拮抗作用的试验方法，观察微生物间的拮抗现象及抗生素的抗菌作用。
二、实验原理自然条件下，微生物常以群落状态存在，这种群落往往是不同种类的微生物的混合体。
为了研究某种微生物的特性或者要大量培养和使用某种微生物，必须从这些混杂的微生物群落中获得纯培养，这种获得纯培养的方法称为微生物的分离纯化。
在自然界中，土壤是微生物生活的良好环境，各种微生物混居生活在一起。
其中生活的微生物的数量和种类极其丰富，因此土壤是人类开发利用微生物资源的重要基地。
土壤中微生物的数量、种类与土壤肥力有关，肥沃的土壤中多，贫瘠的土壤中少。
其生理类群则与土壤的其它理化性质，如通气性、pH有关。
例如在通气良好的菜园土中，好气性微生物占有绝对优势。
本实验以肥沃的菜园土为实验材料分离土壤中的好气性细菌、放线菌和霉菌，并进行数量测定。
分离微生物常用的方法有：稀释涂平板法、稀释混合平板法、划线分离法等。
根据不同的实验材料可以采用不同的分离方法。
其最终目的是在培养基上出现欲分离的微生物的单个菌落，必要时再对单菌落进行进一步的分离纯化。
本实验分离细菌时采用牛肉膏蛋白胨琼脂培养基、分离放线菌时采用高氏一号琼脂培养基、分离霉菌时采用马铃薯蔗糖琼脂培养基。
稀释平板计数法是根据微生物在固体培养基上一个活的单细胞繁殖能形成一个菌落这一培养特征设计的计数方法，即一个菌落代表一个活的单细胞。
计数时，首先将待测样品制成一系列稀释液，再取一定稀释度，一定体积的稀释液接种到平板中，使其均匀分布到平板中的培养基内。
环境微生物学-实验四(五) 细菌的纯培养、分离
实验四（五）环境中微生物分离与培养一、实验目的1、掌握从环境（土壤、水体、活性污泥、垃圾堆肥等）中分离培养细菌的方法，获得若干种细菌纯种培养技能。
2、掌握几种接种技术。
3、了解菌种的保藏方法。
二、实验仪器和材料恒温箱、涂布器、细铁丝、接种环、酒精灯、吸耳球、棉花、记号笔；无菌培养皿（直径90毫米）、无菌移液管（1毫升和10毫升）；肉汤蛋白胨培养基、高氏１号培养基、马铃薯培养基；活性污泥或土壤10克、无菌水90毫升、9毫升无菌水（试管中）；酵母、大肠杆菌。
三、细菌纯种分离的操作方法细菌纯种分离的方法有两种：稀释平板法和平板划线法。
（一）稀释平板分离的方法1、取样用无菌锥形瓶到现场取一定数量的活性污泥或土壤，迅速带回实验室。
2、稀释水样将1瓶90毫升和5管9毫升的无菌水排列好，按10-1、10-2、10-3、10- 4、10-5、10-6依次编号。
在无菌操作条件下，将样品（10克）置于第一瓶90毫升无菌水中，用手摇10分钟，将颗粒状样品打散，即为10-1浓度的菌液。
用1毫升无菌移液管吸取1毫升10-1浓度的菌液于一管9毫微升无菌水中，同样方法，依次稀释到10-6。
每次稀释时，需用不同的无菌移液管，或将同一移液管用无菌水洗三次。
3、平板的制作取10套无菌培养皿编号，10-4、10-5、10-6各3个，另1个为空气对照。
取1支1毫升无菌移液管从浓度小的10-6菌液开始，以10-6、10-5、10-4为序分别吸取0.5毫升菌液于相应编号的培养皿内（注：每次吸取前，用移液管在菌液中吹泡使菌液充分混匀），加热熔化培养基，当培养基冷至45℃左右时，右手拿装有培养基的锥形瓶，左手拿培养皿，以中指、无名指和小指托住皿底，拇指和食指夹住皿盖，靠近火焰，将皿盖掀开，倒入培养基后将培养皿平放在桌上，顺时针和逆时针来回转动培养皿，使培养基和菌液充分混匀，冷凝后即成平板，倒置于30℃恒温箱中培养48小时，然后观察结果。
取对照无菌培养皿，打开皿盖10分钟后盖上皿盖，倒置30℃恒温箱中培养48小时后，观察结果。
水环境中微生物检测
随着社会的不断发展，水污染也越来越严重，为了尽量避免水质问题影响人们的生命健康，一定要做好水质检测工作，尤其要做好水质检测中的微生物检测工作，为此我国应该不断加大科研力度，不断加强水环境中微生物检测力度，水环境检测相关工作人员要履行好职责，严格控制微生物含量。
1 水污染的危害1.1 水污染对社会经济的影响各行各业在生产经营过程中都需要用到大量的水资源，农业生产需要灌溉，工业生产中各种产品的加工都离不开水，水污染会影响各行各业的生产发展，尤其是对农业生产来说，影响更大，水污染不仅会导致水产生物的病变与死亡，还会间接影响人们的生命健康。
由此可见，水污染会严重影响社会经济的发展。
对于各个行业的可持续发展更是十分不利[1]。
1.2 水污染对人类健康的影响人们的日常生活也需要用到大量的水，一旦饮用水源被污染，通过饮水，水中的有害物质也会被摄入体内，将这些有害物质摄入到体内以后会影响健康，甚至可能还会导致传染性疾病，其中微生物污染的危害性比较大，甚至可能导致传染性疾病。
1.3 影响正常的河流生态环境水是不断流动的，所以一个地方的水受到污染，将会影响周边的河流环境，河流中的生物也将会受到牵连，所以水污染将会影响整个河流生态，造成一系列的直接与间接损失。
2 水环境中微生物检测的重要性对水环境进行微生物检测可以判断水质，保证水环境中的微生物含量符合相关用水标准，避免水环境中的微生物对人类的生产生活造成不利影响，从而维护人们的健康，促进社会经济的发展。
3 水环境中微生物检测手法3.1 利用发光细菌进行水质检测对水环境中的藻类、水藻类以及鱼类进行检测是最常用的水质检测方法，也是最传统的检测方法，在实际检测的过程中，单纯利用仪器直接对这些生物进行检测可能效率不高，可以用发光细菌来进行检测。
所谓的发光细菌由革兰氏阴性兼性厌氧杆菌和一些人造发光元素共同组成，水质检测员将这些发光细菌放入到需要检测的水环境中，并为细菌的有氧运动创造条件，光细菌具有水污染的倾向性，会向污染比较严重的区域聚集，结合水环境发光情况即可判定水质。
5实验室环境与人体表面微生物的检测
• 下次实验准备：
1、收集剩余的固体牛肉膏蛋白胨 培养基(100ml*15瓶), 如不够再配； 2、每人包一包（5套）培养皿； 4、6支试管：各含4.5ml的生理盐水。
实验五、实验室环境与人体表面微
生物的检测
1、实验目的
• （1）证明实验室环境与人体表面微生物的存在，体会无 菌操作的重要性。
• （2）比较不同环境下微生物的数量和类型
• （3）初步学会无菌操作
微生物的分布及数量
1、细菌数亿/g土壤
2、每张纸币带细菌：900万个；
3、人体体表及体内存在大量的微生物：
样品 来源
菌落 数 菌落 （近 类型 似值） 1 2 3
特 大小 形态 干湿
征
描
写 透明度 颜色 边缘
高度
1.
4 5
1
2 3 2. 4 5
与其他同学所做的实验结果进行比较
样品来源 菌落数（1/4平板） 菌落类型数（近似值）
实验结果示例：
• 例1：空气培养后结果：
• 例2 手培养后结果：
三、下次实验：微生物的分离与纯化。
注意事项
1 皿底做标记,字体要小,靠边 2 不随意打开皿盖
3 倒平板时要迅速,12-15ml为宜,平放待冷凝
后备用.
结果记录方法
（1）菌落计数 在划线的平板上，如果菌落很多 而重叠，则数平板最后 1/4 面积内的菌落数。 不是划线的平板，也一分为四，数1/4 面积的 菌落数。 （ 2）根据菌落大小、形状、高度、干湿等特征 观察不同的菌落类型。但要注意，如果细菌数 量太多，会使很多菌落生长在一起，或者限制 了菌落生长而变得很小，因而外观不典型，故 观察菌落的特点时，要选择分离得很开的单个 菌落。
环境中病原微生物的检测与控制
环境中病原微生物的检测与控制现代化的城市环境中，病原微生物难免存在，所以了解环境中病原微生物的检测与控制显得尤为重要。
为了保障民众的健康和安全，我们必须对环境中的病原微生物进行控制和管理。
本文将从病原微生物的来源、影响和检测方法等角度出发，依次分析环境中病原微生物的检测与控制。
一、病原微生物的来源环境中病原微生物的来源一般有两种，一种是人类和动植物的身体排放的生物成分，例如排泄物、分泌物、脱落皮屑等；另一种是环境中本来就存在的微生物，例如土壤、水源、空气等。
这些来源都能够为病原微生物提供一定的生存条件，从而造成人们对病原微生物的疾病感染。
二、病原微生物对环境的影响病原微生物对环境的影响是十分重要的。
在环境中长期存在的病原微生物有可能造成一定的污染，严重影响人们的健康和生活，甚至可能造成流行病传染等后果。
一些有害的微生物如沙门氏菌、大肠杆菌、霍乱弧菌等能够通过口腔、呼吸道、消化道等途径传染给人类，长期存在于环境中则会进一步危害人们的生命健康和生存环境。
三、病原微生物的检测方法病原微生物的检测方法是评估环境中病原微生物含量的基础和前提。
常用的检测方法包括传统的培养方法、PCR、ELISA等分子生物学方法。
常用的培养方法主要是将样本培养在选择性培养基上，再用特定的培养方法将目标细菌分离出来。
PCR方法则是在不同方式扩增微生物的DNA，再将其与一些特定的探针或引物结合。
其原理是以核酸为目标，对特定基因进行鉴定，结果更具有快捷和精确性的特性。
四、病原微生物的控制方法病原微生物的控制方法应该从源头进行控制，包括加强环境卫生管理、减少环境污染、完善抗菌素使用管理等等。
同时，应该执行一些生物安全事故应急预案，以便在出现流行病等情况时，能够迅速控制病原微生物的蔓延。
加强环境卫生管理，建立完善的监管和排查机制，发现潜在病原体的污染源及时进行消除即可有效进行病原控制。
五、结论总而言之，环境中病原微生物具有一定的危害性。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
五、实验报告：
描述平板上观察到的单菌落
放线菌的菌落特征
酵母菌
细菌
霉菌
三、实验材料：
培养皿，三角瓶，火柴，酒精灯，标签纸，恒温 培养箱，接种环，灭菌锅，超净工作台等
四、实验步骤：
(一)培养基的配制 1．配制培养基 2．灭菌 3．倒平板，摆放斜面
(二)周围环境中微生物的检测
在牛肉膏蛋白胨培养基平板上作如下实验： l.取一个平板，分成4区，做好标记(下同)．用未洗过的手指 头以及肥皂洗过1次、2次、3次的手指头(不用毛巾擦)分别 在4个区上涂抹(用力一致)。 2．取一个平板，分区,用正在使用的纸巾、硬币分别在不同的 区上拖动2～3次。 3．往培养基上放置一根头发，并用无菌涂布器压紧。 4．取一个平板，将稍稍打开的嘴唇在培养基上压一下，检查 嘴唇上的细菌。 5．取一个平板，分区，用无菌接种环分别沾一环自来水、河 水以及矿泉水在平板不同区上画线。
试验五 环境中微生物检测与分离
一、实验目的：
使学生初步了解周围环境中的微生物的分布情况； 了解培养不同微生物时配置不同的培养基，根据不同 微生物的菌落形态进行大致的区分，巩固分离、无菌 等操作方法。培养学生综合性实验的能力。
二、实验原理：
不同微生物对营养的需求不同，所以在配置培养基 时要注意符合其生长的需求；微生物能在固体培养基 上形成单菌落，具有不同的形态；便于根据其形态进 行大致的区分，并且可以利用单菌落进行分离纯化。
(三)从土壤中分离微生物 采土样：选择较肥沃韵土壤，铲去表层土，挖5~20cm 深度的或特殊要求的土壤数十克，装入已灭菌的牛 皮纸袋，封好袋口，做好编号记录，带回实验室供 分离用。 制备土壤稀释液，称取土样1.0g，放人盛99ml无菌水 井带有玻璃珠的三角瓶中，置摇床振荡5min使土壤 均匀分散成为土壤悬液(10-2)。用1ml的无菌吸头 从中吸驻0.5ml土壤悬液，注人事先分装有4.5ml无 菌水的试管中，吹吸3次，振荡均匀(10-3)。换一 只新的无菌吸头，用同样方法，分别配置成稀释度 为10-4、10-5、10-6的土各浓度土壤稀释 液中各吸取100μ1，对号较均匀地放入已写好稀释度 的牛肉蛋白胨培养基平板上，用无菌玻璃涂棒涂匀， 一定要多涂几遍，从概率角度来说，涂到细菌均匀分 布为止，此步是实验成功的关键。每个浓度做 3个平 板。 培养：将牛肉蛋白胨培养基平板倒置于37℃温箱中培 养24h，统计所长出的菌落数． 菌落计数；培养24h后，取出培养乎板，算出同一稀 释度三个平扳上的菌落平均数，换算出土样中的菌含 量。 同一稀释度3个平板平均菌落数 土壤中的菌含量(个/g土壤)＝ 0.1 稀释液浓度
6．用无菌牙签取一点牙垢在一个平板培养基上画线。 7．取两个乎板，一个打开皿盖，置实验台上(空气中)l0min， 另一个按无菌操作要求在酒精灯火焰边打开皿盖lmin。 8．取一个平板，打开皿盖，对着培养基咳嗽。
9．另两个平扳可根据自己的兴趣，自由用来检测。 以上平板用报纸包好倒置于37℃培养箱里培养24h观察结果。 任何一个实验，在动手操作前均需先用记号笔在培养皿 底做好标记。标记包括培养物名称、班级、姓名、日期．标 记应明了、占地少，并做在平皿底边缘，不要做在中间，以 免影响结果观察。 本组的平板要统一用报纸包好，在外面写上组号，以免 同学拿乱，找不到自己的平板。