第13章 临床即时检验仪器与技术 PPT

第一节 即时检验的技术原理与特点
一、POCT的概念
• POCT是指在实验室外，靠近检测对象，采用便携式、可 移动的微型检测仪器和试剂，快速及时报告检测结果，并 能对检测结果及时反馈和干预的体外检验系统。
• 美国国家临床生化科学院（National Academy of Clinical Biochemistry，ACB）将POCT的概念定义为： “在接近患者治疗处，由未接受临床检验学科训练的临床 人员或者患者（自我检测）进行的临床检验，是在传统、 核心或中心实验室以外进行的一切检验。”
✓ 从空间来讲没有固定的检验场所，可以在病患和被测对象 身边进行检测；
✓ 检测的实施和操作可以是非检验技术专业人员，甚至是被 检测对象本人。
二、POCT的分类与特点
（一）POCT仪器的分类
1.根据用途分类 血糖检测仪、电解质分析仪、血液分析仪、 血气分析仪、凝血测定仪、心肌损伤标志物检测仪、药物 应用监测仪、酶联免疫检测仪、放射免疫分析仪、甲状腺 激素检测仪等。
✓ 微流控芯片是微流控技术实现的主要平台，是当前微型全 分析系统（miniaturized total analysis systems， MTAS）发展的热点领域，它的最终目标是把整个临床实 验室的功能，包括采样、稀释、加试剂、反应、分离、检 测等集成在微芯片上，实现微型全分析系统的芯片实验室。
第二节 常用即时检验仪器
• 空间上，在患者现场进行的检验，即“床旁检验”；时间 上，在患者发病的时刻进行的检验，即“即时检验”。
一、POCT的概念
• POCT曾有过许多意思相近的表述，如患者近旁检测、床 旁检测、另处检验、分散化检测、家庭检测、患者自我检 测、医生诊所检测等。
• POCT的核心特点包括三个要素：
✓ 从时间上讲是快速检测，缩短了从样本釆集、检测到结果 报告的总的检测周期（turnaround time，TAT）；
三、POCT的技术原理
（二）免疫学检测技术
1.免疫金标记技术 ✓ 由氯金酸（HAuCl4）在还原剂作用下，聚合成特定大小
的金颗粒，并由静电作用成为一种稳定的胶体状态，称为 胶体金。 ✓ 胶体金颗粒具有高电子密度的特性，与样本结合后，可见 红色或粉红色斑点。 ✓ 由胶体金标记单克隆抗体，配合小型检测仪可做半定量和 定量测定。 ✓ 免疫金标记方法包括斑点免疫渗滤法和免疫层析法，二者 均被广泛应用于快速检测蛋白质类和多肽类抗原。是 POCT中应用最广泛的方法学之一。 2.免疫荧光技术
✓ 该技术组合了酶化学、免疫化学、电化学与计算机技术等， 可以对生物体液中的分析物进行超微量的分析，例如电解 质K+、Cl-、Na+、Ca2+、Mg2+以及葡萄糖、pH、 PCO2、PO2血气分析等。
Байду номын сангаас 三、POCT的技术原理
（五）微流控芯片技术
✓ 微流控芯片技术是把生物、化学、医学分析过程的样品制 备、反应、分离、检测等操作单元集成到一块微米尺寸的 芯片上，自动完成分析全过程。
2.根据仪器大小和和外观分类 便携型、桌面型、手提式、手 提式一次性使用型等。
3.根据所用装置特点分类 卡片式装置、单一或多垫试剂条、 微制造装置、生物传感器装置、其他多孔材料等装置。
二、POCT的分类与特点
（二）POCT的特点
1.仪器小型化 2.操作简单化 3.报告即时化 4.检测质量
5.产品应经权威机构质量认证 6.检测费用应合理 7.生物安全
第13章 临床即时检验仪器与技术
目录
第一节 即时检验的技术原理与特点 第二节 常用即时检验仪器 第三节 即时检验仪器的应用 第四节 即时检验存在的问题
重点提示
1.即时检验的定义和主要特点是什么？有哪些临床应用？ 2.即时检验的主要技术大致可分为哪几类？ 3.POCT血糖测定仪的检测原理和基本结构是什么？。 4.POCT血气分析仪的检测原理和基本结构是什么？ 5.POCT免疫分析仪的检测原理和基本结构是什么？ 6.简述微流控芯片技术在POCT仪器中的应用。
一、血糖测定仪
（一）化学比色法POCT血糖测定仪
1.工作原理
• 用反射光度技术测量血糖的原理是通过测定酶与血液葡萄 糖反应产生有色产物的反射光的强度并将其转换为血液葡 萄糖浓度。
• 葡萄糖氧化酶光化学法测定血液葡萄糖浓度，是利用干化 学试纸片上的葡萄糖氧化酶将血样中的葡萄糖氧化成葡萄 酸内酯和过氧化氢，后者又在过氧化氢酶的作用下在干片 上生成有颜色的氧化型色素，其颜色深浅与葡萄糖浓度成 正比。
三、POCT的技术原理
（三）电化学检测技术
✓ 在两电极之间施加一恒定电位，当电活性组分经过电极表 面时发生氧化还原反应（电极反应），电量（Q）的大小 符合法拉第定律：Q=nFN。因此，反应的电流（I）为：
I=nFdN/dt
n为每摩尔物质在氧化还原过程中转移的电子数；F为法拉
第常数；N为物质的摩尔数；t为时间。当流动相的流速一
定时，dN/dt与组分在流动相中的浓度有关。 ✓ 电化学检测的优点表现在：①灵敏度高；②应用范围广。 ✓ 电化学检测的主要不足在于：①干扰较多；②电极寿命有
限，对温度和流速的变化比较敏感。
三、POCT的技术原理
（四）生物传感器检测技术
✓ 能感应（或响应）生物和化学量，利用离子选择电极、底 物特异性电极、电导传感器、酶传感器等特定的生物检测 器进行分析检测，并按一定的规律将其转换成可用信号输 出的器件或装置。
三、POCT的技术原理
（三）电化学检测技术
✓ 电化学检测是测量物质的电信号变化，对具有氧化还原性 质的化合物可采用电化学检测。
✓ 电化学检测器包括极谱、库仑、安培和电导检测器等，前 三种统称为伏安检测器，用于具有氧化还原性质的化合物 的检测，电导检测器主要用于离子检测。
✓ 脉冲式安培检测器最为常用。
大家有疑问的，可以询问和交流
可以互相讨论下，但要小声点
三、POCT的技术原理
（一）干化学检测技术
• 将反应试剂经特殊工艺固定在特殊的纸片上，与样本反应 后产生不同的颜色变化，根据颜色不同与深浅，对检测样 品进行定性或定量分析。
• 多层涂膜技术是从感光胶片技术移植而来，将多种反应试 剂一次涂布在片基上，或采用多层涂膜技术制成干片，用 仪器检测可以准确定量。