2.2.2动物体细胞核移植
动物体细胞核移植技术和克隆动物-高二生物课件(人教版2019选择性必修3)
二 体细胞核移植的过程
问题8：实际在克隆高产奶牛时， 科学家并没有从供体细胞中取出细 胞核，而是直接将供体细胞注入去 核的卵母细胞。为什么？
卵母细胞，在体 外培养到MⅡ期
通过显微 操作去核
去核的卵母细胞
供体体细胞 供体细胞培养
对卵母细胞损伤较小； 保证供体细胞的细胞核不被破坏， 操作方便。
将供体细胞注入去 核的卵母细胞
第2.2节 动物细胞工程
三、动物体细胞核移植技术和克隆动物
本节聚焦: 什么是动物体细胞核移植技术？ 动物体细胞核移植的基本过程是什么？ 体细胞核移植技术的应用前景有哪些？ 怎样理性看待体细胞核移植技术存在
的问题？
阅读教材P52，回答下列问题： 问题1：克隆猴用到了什么技术？
动物细胞核移植技术 问题2：为什么用供体猴的一个细胞核进行移植 就可以培育出与它几乎一模一样的克隆猴？
在生物学上包含分子、细胞、个体3个层次，即分子克隆、
细胞克隆、个体克隆。
动物细胞培养技术 植物组织培养技术
单克隆抗体技术、 PCR技术
植物细胞培养技术 核移植技术
(2018·全国Ⅲ)2018年《细胞》期刊报道，中国科学家率先成功地应用体细胞对非人
灵长类动物进行克隆，获得两只克隆猴——“中中”和“华华”。回答下列问题：
困难②：对非人灵长类动物胚
2.神奇的速度 胎进行操作的技术尚不完善。
我国科研工作者能在10秒内对卵母细胞进行细胞去核操作，在15秒之内 将体细胞注入到卵母细胞。因为操作越快，卵细胞受损就越小，这一神 速正是实验成功的最重要基础之一。
一 动物细胞核移植技术
1.定义
动物细胞核移植技术是将动物一个细胞 的细胞核移入去核的卵母细胞中，使这 个重新组合的细胞发育成新胚胎，继而 发育成动物个体的技术。
2.2动物细胞培养和核移植技术学案
2.2动物细胞培养和核移植技术学习目标：1、简述动物细胞培养的过程、条件及应用2、简述通过动物体细胞核移植技术克隆动物的过程及应用前景学习重难点：1.动物细胞培养的过程及条件2.用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。
学海导航：一、动物细胞工程包括：、、、等。
二、动物细胞培养：（一）意义：是其它动物细胞工程的。
（二）概念：从动物机体中取出相关的组织，将它分散成，然后在适宜的培养基上，让这些细胞和。
（三）理论基础：。
（四）过程：说明：1、动物细胞培养特点：生长时、。
细胞贴壁：在培养瓶中，悬液中分散的细胞很快就在瓶壁上，称为细胞贴壁。
接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面时，细胞就会分裂增殖，这种现象叫做接触抑制。
2、分散成单个细胞的方法：剪碎、用或处理。
3、分散成单个细胞的目的：使细胞与培养液充分接触，便于吸收O2和营养物质，排出代谢废物。
4、原代培养：将动物组织消化后的。
（10代以内或分瓶之前）5、传代培养：的细胞继续培养。
（10代以后或分瓶之后）6、两次停止期：（1）10代左右有些细胞不能传代，有些细胞继续传代这些存活的的细胞一般能传到40~50代，这种传代细胞称为细胞系。
（2）50代左右绝大多数细胞死亡，部分细胞发生变化，获得，朝着等同于的方向发展，无限增殖。
这种传代细胞称为细胞系。
细胞株和细胞系的区别：的遗传物质改变，具有细胞的特点，失去接触抑制，容易传代培养。
而的遗传物质没有改变。
思考：1、幼龄与老龄动物组织细胞比较，分化程度低的与分化程度高的组织细胞比较，哪一种更易于培养？为什么？2、为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞？3、取出的动物组织如何就分散成单个的细胞？4、细胞培养用胰蛋白酶处理说明细胞间的物质是什么成分？用胃蛋白酶可以吗？5、胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗？为什么？6、动物细胞培养要脱分化的过程吗？为什么？7、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体？8、目前使用的或冷冻保存的细胞通常为几代以内的细胞？（五）条件：1、、环境。
高中生物专题2细胞工程2.2动物细胞工程2.2.1动物细胞培养和核移植技术学案新人教版选修3
2．2.1 动物细胞培养和核移植技术[学习目标] 1.归纳动物细胞培养的过程、条件及应用。
2.归纳通过动物体细胞核移植技术克隆动物的过程及应用前景。
方式一2003年，四川少年小林点燃鞭炮，导致面部、四肢被严重烧伤并感染。
为了挽救儿子的生命，小林的爸爸、妈妈向医生恳求“割皮救儿”，烧伤整形科主任魏平最终同意进行这场罕见的亲体皮肤移植手术。
为了全覆盖孩子身体上被深度烧伤并发生感染的创面，医生把取自父子俩的皮肤全部剪成指甲盖大小的皮块，儿子和爸爸的皮肤相隔相嵌，估计父亲的皮肤至少能在其儿子身上存活半年甚至更长时间，这就给儿子自身皮肤的生长带来了生机，孩子的痊愈指日可待。
思考：1．小林在皮肤烧伤之后，很容易得病，为什么？2．选取植皮时，理论上选择谁的皮肤最好？为什么？3．自身的健康皮肤是有限的，能不能通过其他途径获得自身的皮肤？方式二古代神话里孙悟空用自己的汗毛变成无数个小孙悟空的离奇故事，表达了人类对复制自身的幻想。
1978年，美国科幻小说家罗维克(D.Rorvick)写了一本名叫《克隆人》(The Cloning of a man)的书，内容是一位富商将自己的体细胞核移植到一枚去核卵中，然后将其在体外卵裂成的胚胎移植到母体子宫中，经过足月的怀孕，最后生下了一个健康的男婴，这个男婴就是一个克隆人。
现在，克隆人已经不是科幻小说里的梦想，而是呼之欲出的现实。
由于克隆人可能带来复杂的后果，一些生物技术发达的国家，现在大都对此采取明令禁止或者严加限制的态度。
克隆人，真的如潘多拉盒子里的魔鬼一样可怕吗？我们应该怎样正确看待克隆技术呢？一、动物细胞工程和动物细胞的培养1．动物细胞工程2.动物细胞培养 (1)概念：从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。
(2)过程动物组织块或器官――――――――――→剪碎胰蛋白酶(或胶原蛋白酶)处理单个细胞――→加培养液细胞悬液――→初次培养原代培养―→传代培养。
2020-2021学年生物人教版选修3学案：2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体
2．2.2 动物细胞融合与单克隆抗体知识点一 动物细胞融合1．概念：两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程，也称细胞杂交。
2．结果：形成单核杂交细胞。
3．原理：细胞膜的流动性。
4．过程：不同动物的两个或多个细胞――→灭活的病毒或PEG杂交细胞5．诱导方法物理法——离心、振动、电激；化学法——聚乙二醇(PEG)；生物方法——灭活的病毒。
注意：灭活是指用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力，但是并不破坏这些病原体的抗原结构。
6．灭活病毒诱导细胞融合的原理病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞相互凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。
这一过程既能反映出糖蛋白在细胞识别中的重要作用，又能反映出细胞膜结构的流动性特点。
7．动物细胞融合的优点与应用(1)优点：突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能。
目前，已有种间、属间、科间，甚至动物与植物之间的细胞融合获得了成功。
(2)应用：是研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段。
特别是利用细胞融合技术而发展起来的杂交瘤技术，为制造单克隆抗体开辟了新途径。
植物体细胞杂交和动物细胞融合的区别植物体细胞杂交动物细胞融合原理细胞膜的流动性和植物细胞的全能性细胞膜的流动性步骤酶解法去掉细胞壁后，诱导原生质体融合，形成杂种体细胞，再经过植物组织培养形成杂种植株分散成单个细胞后诱导细胞融合诱导方法物理方法、化学方法物理方法、化学方法、灭活病毒结果形成杂种植株形成杂种细胞【典题精练1】下列有关植物体细胞杂交与动物细胞融合的比较，正确的是()A．两者应用的原理都是高度分化的细胞具有全能性B．两者都可用聚乙二醇(PEG)诱导细胞融合C．两者细胞融合成功的标志都是形成融合细胞核D．两者的目的都是用于大量生产分泌蛋白【解析】植物体细胞杂交的原理是细胞膜具有流动性和植物细胞具有全能性，动物细胞融合的原理是细胞膜具有流动性，A错误；聚乙二醇(PEG)既可诱导动物细胞融合，又可诱导植物原生质体融合，B正确；植物体细胞融合成功的标志是杂种细胞再生出细胞壁，动物细胞融合成功的标志是形成融合细胞核，C错误；植物体细胞杂交的目的是产生杂种植株，动物细胞融合可用于大量生产分泌蛋白，D错误。
动物细胞核移植技术的原理
动物细胞核移植技术的原理在科技日新月异的今天，动物细胞核移植技术简直像是科幻电影里的桥段！你有没有想过，细胞竟然可以像拼图一样被移来移去？是不是觉得有点不可思议？别急，今天咱们就来聊聊这项技术的原理，顺便带你看看其中的乐趣和神奇之处。
1. 什么是细胞核移植？1.1 定义细胞核移植，简单来说，就是把一个细胞的核（里面装着DNA的地方）搬到另一个细胞里。
就好比把一张精彩的画从旧画框里取出来，放到新画框里去！这看似简单，但实际上可大有学问。
细胞核里面装的是遗传信息，也就是说，决定了动物的许多特征，比如毛色、体型，甚至性格。
想想，如果能把某个动物的“优点”移植到另一个动物身上，那真是太妙了！1.2 技术背景这个技术的诞生可不是一朝一夕的事。
早在上世纪，科学家们就开始琢磨怎么能让细胞“换家”。
最有名的莫过于“多莉羊”的故事，她可是第一个通过细胞核移植技术克隆出来的哺乳动物！这一下子，科学界就炸开了锅，大家纷纷议论这项技术的潜力，仿佛找到了通往未来的金钥匙。
2. 细胞核移植的步骤2.1 步骤一：准备工作首先，咱们得准备好两种细胞。
一个是“供体细胞”，这个细胞的核会被拿出来；另一个是“受体细胞”，这个细胞的核会被替换。
想象一下，这就像是在厨房里准备食材，得先把所有材料都准备齐全。
2.2 步骤二：核的移植接下来，就是关键的移植环节。
科学家们会用微针或者电击的方式，将供体细胞的核转移到受体细胞里。
这一步可得小心翼翼，简直像是在进行外科手术，稍有不慎就可能失败。
移植后，受体细胞会开始“学习”新的DNA，仿佛是个学生开始上新课，慢慢接受并融入新知识。
2.3 步骤三：细胞发育移植完成后，这个细胞就开始分裂、发育，最终形成一个新的个体。
这一过程就像是酿酒，耐心等待，最后才能品尝到美酒的滋味。
经过一段时间，如果一切顺利，就能迎来“新生命”的诞生！3. 应用与展望3.1 医学上的潜力细胞核移植技术不仅限于克隆动物，实际上，它在医学领域也大有作为！科学家们希望能通过这项技术来治疗遗传疾病，甚至能为器官移植提供新的解决方案。
人教版教学课件2.2 动物细胞工程
需抗体的细胞(很多种杂交瘤细胞),需经克隆化培
养和抗体检测,经多次筛选后就可获得足够数量的
能分泌所需抗体的细胞。
(4)2个培养提取场所
①体外培养——培养液提取。
②体内小鼠腹腔中培养——小鼠腹水中提取。
提醒
取相应B细胞前必需先注射相应抗原,形
象地说先“打针”,否则失败。 (5)原理：细胞膜的流动性和细胞增殖。 拓展提升 植物体细胞杂交和单克隆抗体的制备的比较
障碍,大大扩展杂交的亲本 组合范围 (2)克服有性杂交的母系遗 传现象、获得细胞质基因的 杂合子、研究细胞质遗传
(1)制备单克隆抗体 (2)诊断、治疗、预
防疾病。例如:单抗
诊断盒、“生物导
弹”治 疗癌症
对位训练
3.利用细胞工程方法，以SARS病毒核衣壳蛋白为抗 原制备出单克隆抗体。下列相关叙述正确的是 （ D ） A.用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，产 生的血清抗体为单克隆抗体 B.体外培养单个B淋巴细胞可以获得大量针对SARS 病毒的单克隆抗体 C.将等量B淋巴细胞和骨髓瘤细胞混合，经PEG诱 导融合后的细胞均为杂交瘤细胞 D.利用该单克隆抗体与SARS病毒核衣壳蛋白特异 性结合的方法可诊断出病毒感染者
冷冻（或超低温、 （5）在细胞培养过程中，通常在________________ 液氮） 条件下保存细胞。因为在这种条件下，细 胞中 酶 的活性降低，细胞 新陈代谢 的速率降低。
（6）给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后，发
生了排斥现象，这是因为机体把移植的皮肤组织当
作 抗原 进行攻击。
考点二
动物体细胞核移植技ຫໍສະໝຸດ 与克隆动物植物体细胞杂交 动物细胞融合(单克隆抗体 的制备)
理论基础 细胞膜的流动性、细胞的 细胞膜的流动性、细胞增殖 (原理) 全能性 融合前 酶解法去除细胞壁(纤维 注射特定抗原,免疫处理正 处理 素酶、果胶酶) 常小鼠
动物细胞核移植
2．一只羊的卵细胞核被另一只羊的体细胞核
置换后，这个卵细胞经过多次分裂，再植入第 三只羊的子宫内发育，结果产下一只羊羔。这 种克隆技术具有多种用途，但是不能 D A．有选择地繁殖某一性别的家畜 B．繁殖家畜中的优秀个体 C．用于保存物种 D．改变动物的基因型
3、下列哪_项属于克隆( D )
A．将鸡的某个DNA片段整合到小鼠的 DNA分子中 B．将抗药菌的某基因引入草履虫的细胞内 C．将鼠骨髓瘤细胞与经过免疫的脾细胞融 合成杂交瘤细胞 D．将某肿瘤细胞在体外培养繁殖成一个细 胞系
6.意义：
突破了有性杂交方法的局限，使远缘 杂交（种间、属间、科间、动植物之间） 成为可能。
6.意义：
突破了有性杂交方法的局限，使远缘 杂交（种间、属间、科间、动植物之间） 成为可能。 7. 应用：
成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿 瘤和生物新品种培育等的重要手段 特别是利用杂交瘤技术制造单克隆
抗体
2.结果： 形成单核的杂交细胞
3.原理： 细胞膜的流动性 物理法：离心、振动、电激 4.诱导方式
化学法：聚乙二醇（PEG)
三、动物细胞融合 1.概念： 指两个或多个动物细胞结合形 成一个细胞的过程。
2.结果： 形成单核的杂交细胞
3.原理： 细胞膜的流动性 物理法：离心、振动、电激 4.诱导方式
化学法：聚乙二醇（PEG)
1．生物技术的发展速度很快，已灭绝生物的
“复生”将不再是神话。如果世界上最后一只 野驴刚死亡，以下较易成功“复生”野驴的方 法是 C A．将野驴的体细胞取出，利用组织培养技术， 经脱分化、再分化，培育成新个体 B．将野驴的体细胞两两融合，再经组织培养 培育成新个体 C．取出野驴的体细胞核移植到母家驴的去核 卵细胞中，经孕育培养成新个体 D．将野驴的基因导入家驴的受精卵中，培育 成新个体
2.2 动物细胞工程(第3课时 动物体细胞核移植技术和克隆动物)
2.2 动物细胞工程第3课时动物体细胞核移植技术和克隆动物一、单选题1.随着生物科学技术的发展，动物的生殖方式变得越来越多样化。
如图表示胚胎工程技术研究及应用的相关情况，供体1是良种荷斯坦高产奶牛，供体2是健康的黄牛，下列相关叙述错误的是（）A. 应用1中获得的良种小牛，遗传物质来源于供体1和供体2个体B. 应用2、3、4所用的受精卵只能来源于体外受精，且精子必需进行获能处理C. 应用3过程中对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要注意将内细胞团均等分割D. 应用4中细胞进行定向诱导，可分化形成各种组织和器官，用于器官移植研究2.下列关于动物体细胞克隆和胚胎工程的叙述，正确的是（）A. 克隆羊“多莉”的培育过程中不需要进行胚胎移植操作B. ES 细胞在饲养层细胞上会向不同类型的组织细胞分化C. 排异反应是胚胎工程需要重点克服的难题之一D. 同期发情处理可以使受体的生理状态更适宜来自供体的胚胎着床3.2009年山东省干细胞技术研究中心宣布，成功克隆出5枚人类囊胚。
其中4枚囊胚的供体细胞来源于正常人皮肤纤维细胞，1枚来源于帕金森患者的淋巴细胞，卵细胞通过健康志愿捐献者促排卵获得。
下列相关叙述正确的是（）A. 可以通过显微操作去除卵母细胞中的细胞核，通过核移植后获得囊胚B. 囊胚阶段的细胞处于未分化状态，可从囊胚中获得胚胎干细胞C. 获得的胚胎干细胞可在饲养层细胞上分化成所需要的器官D. 通过该技术可以达到科学家培养克隆人的目的4.下列有关动物细胞工程和胚胎工程的叙述，正确的是（）A. 培养早期胚胎的培养液中含维生素、激素等多种能源物质B. 细胞培养所需气体CO2的主要作用是维持培养液的pHC. 胚胎干细胞在体外培养能增殖但不能被诱导分化D. 体细胞核移植获得克隆动物的难度低于胚胎细胞核移植5.下列有关哺乳动物胚胎工程的叙述，正确的是（）A. 囊胚的内细胞团细胞和滋养层细胞功能上的差异是基因选择性表达的结果B. 胰蛋白酶处理卵裂球获得的细胞可直接移植到同期发情受体的子宫中继续发育C. 胚胎干细胞核移植可得到一群性状完全相同的个体D. 从卵巢中取出的卵母细胞与获能后的精子完成受精作用6.以下技术与应用匹配不正确．．．的是（）A. 核移植技术——培养鲤鲫核质杂交鱼B. 干细胞技术——提供用于移植的细胞或器官C. 细胞融合技术——培育单倍体植物D. 酶的固定化技术——固定α淀粉酶连续水解废水中的淀粉7.进行生物工程设计时，下表各组所选择的实验材料与实验目的配置，不正确的是（）组别实验目的实验材料材料特点1 动物细胞核移植卵母细胞细胞大，细胞质能有效调控核发育2 体细胞诱变育种愈伤组织细胞分裂能力强，易诱发突变3 植物体细胞杂交培育新品种花粉粒易于获取，易于培养4 烧伤患者皮肤细胞移植自体皮肤生发层细胞分裂能力强，且不会引起免疫排斥A. 1组B. 2组C. 3组D. 4组8.中国科学家应用体细胞核移植方法培育了克隆猴“中中”和“华华”。
2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体
学习目标二：单克隆抗体
B淋巴细胞
受抗原刺激 增殖分化
强调：效应B淋巴细胞是 效应B细胞 记忆B细胞 能够产生抗体的B淋巴细 (浆细胞） 胞，下文将其简称为B淋 巴细胞 抗体：能够与抗原发生特异
性结合的免疫球蛋白。
能产生抗体的细胞是浆 细胞（即效应B细胞）。
抗体的传统生产方法:
抗原 反复注射动物 该法制备抗体的缺点：
用途
获得杂种植株
小结:
动物细胞培养过程 三个重点过程 细胞核移植过程 单克隆抗体制备过程 一个诱导动物细胞融合的新方法 —— 灭活病毒 三个“一” 一个新细胞 —— 杂交瘤细胞 一个优势—— 单克隆抗体特异性强、 灵敏度高、可大量制备的优势
P55：1、植物体细胞杂交技术与动物细胞
融合技术有什么不同？
3、单克隆抗体的应用：
单克隆抗体的优点：特异性强、灵敏度高、可大量制备
①作为诊断试剂（最广泛的用途） ：
准ห้องสมุดไป่ตู้识别各种抗原物质，并特异性结合
优点：准确、高效、简易、快速
②应用于 治疗疾病：主要用于癌症治疗 运载药物：制成“生物导弹”
“生物导弹” ＝单克隆抗体＋药物
既不损伤正常细胞，又减少了用药剂量。
2、结果： 形成单核的杂交细胞 3、原理： 细胞膜的流动性 物理法：离心、振动、电激 4、诱导方法 化学法：聚乙二醇（PEG)
生物法：灭活的病毒（最常用）
思考：为什么细胞融合过程中使用的病毒
需要灭活？不灭活行吗？ 因为灭活的病毒能使细胞膜上的蛋 白质分子和脂质分子重新排布，细胞 膜打开，细胞发生融合，不灭活的话 病毒会感染细胞，导致疾病。 灭活丧失感染性，但保留融合活性。
胞，在这种培养基上不能存活增殖的细胞是：
2.2.3 动物细胞核移植课件2021-2022学年高二下学期生物人教版选择性必修3
显微操作 去核
取体细胞 胞 培
动物细胞融合、早期胚胎培养、 胚胎移植。 去核的卵母细胞 供体细胞培养
养
8.克隆动物的遗传特点 克隆动物的亲本有三个，即体细胞核供体、卵 母细胞细胞质供体和代孕母体； 细胞核基因来自体细胞核供体，因此，克隆动 物的性状与体细胞核供体基本相同。
电融合法
供体细胞注入去 核的卵母细胞
A. 该技术涉及动物细胞培养、细 胞核移植等操作 B. 该技术可避免母亲的线粒体遗 传病基因传递给后代 C. 卵母细胞捐献者携带的红绿色 盲基因能够遗传给"三亲婴儿" D. "三亲婴儿"同时拥有自己父亲 、母亲及卵母细胞捐献者的部分基 因
1.大熊猫是我国的国宝。尽管我国政府采取了许多保护措施，但由于大熊 猫的繁殖能力低，幼仔成活率也低，它的数量仍然非常少。有科学家尝试 采用体细胞核移植技术来克隆大熊猫。请你结合本节所学内容并搜集相关 资料了解这方面的研究进展。也有人不赞成进行克隆大熊猫的研究，认为 保护大熊猫的最好措施就是保护现有大熊猫及其生存环境, 对此你有什么看 法?
通过核移植方法获得的克隆猴，与核供体相比，克隆猴体细胞的染色体数目 _不__变_____(填“减半”“加倍”或“不变”)。
(2)哺乳动物的核移植可以分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植，胚胎细胞核移植 获得克隆动物的难度__小__于____(填“大于”或“小于”)体细胞核移植，其原因是 _______胚__胎__细__胞__分__化__程__度__低__，__恢__复__全__能__性__相__对__容__易_______________。
一的生物群，即具有完全相同的遗传组成的一群细胞或者 生物的个体。克隆其实就是复制，可以发生在不同的水平， 不同的层次。
动物细胞培养和核移植技术PPT
2．2.1 动物细胞培养和核移植技术
课标领航
1．简述动物的细胞培养及条件。
2．举例论证动物细胞培养技术的应用及意义。
3．简述动物核移植的过程及意义。 【重点】 程。 【难点】 原代培养和传代培养的概念。 动物细胞培养的过程；动物核移植的过
情景导航 克隆羊多利的诞生，为动物细胞工程的发
基础自主梳理
核心要点突破
知能过关演练
基础自主梳理
一、动物细胞培养的概念 动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织， 单个 细胞，然后，放在适宜的培养基 将它分散成______ 中，让这些细胞生长和增殖。
二、动物细胞培养的过程
1．流程图：
原代 培 动物组织― ― →单个细胞―→细胞悬液―→_____
1．过程
2．用于核移植的供体细胞一般都选用10代以内 的细胞，目的是为了保证细胞正常的遗传基础。
减数第 3．接受细胞核的卵母细胞必须体外培养到_______ 二次分裂中 期，原因是此期细胞核的位置靠近第 ____________
一极体，用微型吸管可将二者一并吸出，并且此时
使细胞核的全能性表现出来的物质已近成熟。 七、体细胞核移植技术的应用前景 遗传改良 进程，促 1．在畜牧生产中，可加速家畜_________ 进优良畜群繁育。
制，细胞在培养瓶壁上只能形成单层细胞，A错；
克隆培养法中细胞都是由一个细胞经过有丝分裂而
2．培养过程
动物细胞培养的过程如下所示：
特别提醒 用胰蛋白酶处理组织块，可使细胞分散开，这样做 的目的是使细胞与组织液充分接触，这也说明了细
胞间的主要物质是蛋白质，但是由于细胞膜的主要
成分之一也是蛋白质，因此要控制好处理的时间， 不能太长，否则会损伤细胞。由于多数动物细胞培 养的适宜pH为7.2～7.4，因此不能使用胃蛋白酶分 散细胞。
郑州外国语—闫鹤—高中生物《动物细胞融合与单克隆抗体》教案 新人教版选修3
2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体教学背景：学生学习了植物细胞工程的内容，同时也学习了动物细胞工程的动物细胞培养技术和核移植技术，在有这些技术的基础上继续学习动物细胞融合和单克隆抗体，能更好的理解细胞工程的技术手段，并可以将动植物细胞工程的技术和应用做一个对比。
而“单克隆抗体的制备”是人教版高中生物选修3的内容，属于现代生物高科技的范畴，其实验操作技术复杂，设备、仪器和药品等要求高，在高级中学现有条件下很难动手实践，因此传统的学习方式是以接受式学习为主，由于电子白板可以借助互联网已经应用在教学中，因此在教学中可以借助互联网直接从网上搜集关于单克隆抗体的制备以及关于单克隆抗体在实际生活中的应用。
使学生能借助互联网更好的理解抽象的生物高科技教材分析本节课位于新人教版选修三专题2，共分两大部分内容：动物细胞融合、单克隆抗体的制备。
由于动物细胞融合与前面的章节中植物的原生质体融合相同，所以在本节呈现的较简洁。
单克隆抗体是动物细胞工程的新技术，也是本专题的重点知识，对于学生来说，概念及制备过程都很抽象，也是本节教学中的重难点知识。
必修中细胞的结构、细胞的分裂、体液免疫以及学生刚学过的细胞培养等知识都是学习本节课的知识基础。
大纲规定教学课时1节教学重点（1）动物细胞培养的过程及条件（2）用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程（3）单克隆抗体的制备和应用教学难点（1）用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程（2）单克隆抗体的制备过程教学方法启发法、分析法、归纳法、视频及词条展示法教学工具多媒体教学课件、互联网课时安排1课时教学过程（一）问题设置，引入新课师：对于植物细胞工程的技术手段我们共同学习的有几种？生：植物组织培养和植物体细胞杂交技术师：那么对于动物细胞工程，其技术手段主要有哪些？生：动物细胞培养、动物细胞核移植技术、动物细胞融合和生产单克隆抗体。
师：很好，前面我们学习了动物细胞培养和核移植技术，这一节课我们共同学习动物细胞融合和单克隆抗体。
(完整版)动物体细胞核移植技术
2.2.1动物细胞培养和核移植技术第二课时动物体细胞核移植技术和克隆动物学习目标：１、简述克隆动物的概念和原理２、简述体细胞核移植技术和体细胞克隆及其应用前景３、关注体细胞克隆技术的安全性和伦理性问题学习重点和难点：动物体细胞核移植技术克隆动物的过程教学过程：二、动物体细胞核移植技术和克隆动物阅读教材47页相关文字思考：1、对动物来说，为什么不能用类似植物组织培养的方法获得完整的个体？2、根据动物细胞核仍具有全能性的特点,怎样将动物细胞的全能性表达?（一）动物体细胞核移植：是将动物的一个细胞的,移如入一个已经去掉细胞核的细胞中.使其并发育成一个新的,这个新的胚胎最终发育为动物哺乳动物核移植分为和。
思考：1、核移植得到的动物叫什么？2、体细胞核移植和胚胎核移植比较那个难度低一点？为什么？（二）体细胞核移植的培育过程1、【动手设计】1、体细胞核移植过程流程图：（以P48为例）2、回顾克隆多莉羊的生产流程:（多莉的性状和B羊完全相同说明什么问题? ）（多莉体内的遗传物质全部来自B羊吗?为什么? ）思考：1、核移植的原理是什么？2、为什么要去掉受体卵母细胞的核？3、用于核移植的细胞一般都选用10代以内的细胞，这是为什么？4、核移植获得克隆动物是百分之百对供体细胞的复制吗？（三）体细胞核移植技术的应用前景：1、在畜牧业生产中：可以加速进程，促进优良畜群繁育2、在保护濒危物种方面：利用体细胞核移植技术增加这些动物的数量3、在医药卫生领域：转基因克隆动物可以作为，生产许多珍贵的医用4、在治疗人类疾病时：转基因克隆动物细胞、组织、器官可以作为异种移植的。
5、对克隆动物和细胞的研究，使人类深入了解发育及衰老过程6、用克隆动物做疾病模型，使人们更好的追踪研究过程和疾病（四）体细胞核移植技术存在的问题：1、成功率比较2、绝大多数动物还存在许多克隆动物表现出缺陷，如体型过大，异常肥胖，发育困难，脏器缺陷，免疫失调等3、克隆动物食品的问题也存在质疑练一练：1、绵羊的乳腺细胞是高度分化的细胞．但用乳腺细胞的细胞核与去核卵细胞的细胞质重组成一个细胞后，这个细胞核仍然保持着全能性，这主要是因为（）A．细胞核内含有保持物种发育所需要的全套遗传物质B．卵细胞的细胞质内含有生物发育所需要的全套遗传物质C．卵细胞的细胞质为细胞核提供营养物质D．细胞核中的基因在卵胞质中才能表达2．生物技术的发展速度很快，已灭绝生物的“复生”将不再是神话。
2.2-3 动物细胞工程——动物细胞核移植-高二生物课件(人教版2019选择性必修3)
(4)在保护濒危物种方面：
该技术有望增加濒危物种的存活数量
中华眼镜蛇
白鳍豚
黑草黄弄蝶
三、体细胞核移植技术应用前景及存在的问题
（二）存在问题
(1)成功率低 胚胎移植—动物幼体产出概率＜10％
(2)克隆动物存在健康问题 许多克隆动物表现出遗传和生理缺陷，如体 型过大，异常肥胖，发育困难，脏器缺陷， 免疫失调等。易出现早衰（多利羊猜想）。
二、体细胞核移植的过程
以克隆高产奶牛为例
去核的卵母细胞
供体细胞
4.将整个供体细胞注入卵母细胞中有
何优点？
将供体细胞注入去核的卵母细胞的透明带
①对卵母细胞损伤较小；
电融 合法
②保证供体细胞的细胞核不被破坏， 操作方便。
早期胚胎
5.激活重构胚目的是？
重构胚
用物理或化学方法(如电刺激、Ca2+
激活方法： 载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等) ①物理方法； 激活重构胚胎，使其完成细胞分裂 ②化学方法 和发育进程。
毫毛变猴（视频）
毫毛
来自悟空的体细胞
是否可以实现
毫毛来自体细胞，我们能用体细胞“变”出猴来吗？
2017年，中国的科学 家将这一幕变成了现实， 他们利用体细胞核移植 技术成功克隆出两只猕 猴“中中”和“华华” （如下图)。克隆猴的过 程当然不会像孙悟空吹 口气那么简单，最大的 困难是如何才能激发动 物细胞表达其全能性。
思考•讨论 有关体细胞核移植的问题 4.用于核移植的供体细胞一般都选用传代10代以内的细胞，这是为什么？
培养的动物细胞一般当传代至10～50代左右时，部 分细胞核型可能会发生变化，其细胞遗传物质可能 会发生突变，而10代以内的细胞一般能保持正常的 二倍体核型。因此，在体细胞核移植中，为了保证 供体细胞正常的遗传基础，通常采用传代10代以内 的细胞。
生物学案：动物细胞工程(第课时)
2.2 动物细胞工程(第1课时）1．简述动物细胞培养的过程、条件及应用。
2．简述通过动物体细胞核移植技术克隆动物的过程和应用前景。
一、动物细胞工程的常用技术手段动物细胞工程的常用技术手段有______________、动物细胞核移植、动物细胞融合、生产单克隆抗体等，其中______________技术是动物细胞工程的基础.二、动物细胞培养1．概念动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织,将它分散成__________，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和______。
2．动物细胞培养的过程动物____或幼龄动物的器官、组织↓剪碎,用________或胶原蛋白酶处理单个细胞（分离细胞）↓加培养液细胞悬液____培养↓____培养细胞株____培养↓遗传物质改变细胞系（1)原代培养：将动物组织消化后______培养的过程。
（2)传代培养：把______培养增殖的细胞定期用__________处理，使细胞从瓶壁上脱离下来，然后将其分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养的过程.（3）细胞株：传代培养的细胞能传到10～50代，这种传代细胞叫做________。
（4）细胞系：传代培养至50代后，少部分细胞的______________会发生改变，具有癌变的特点，能无限地传代下去，这种传代细胞叫做________.思考：所培养的细胞具有哪些特点？3．动物细胞培养的条件(1）无菌、无毒的环境：培养液和所有培养用具应进行______处理。
(2）营养:合成培养基的成分包括糖、________、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入______、血浆等一些天然成分。
（3）温度:适宜的温度为______±0。
5 ℃；适宜pH为____～7.4。
（4)气体环境：95％空气加5％______。
4．动物细胞培养技术的应用（1）生产______疫苗、干扰素、单克隆抗体等。
（2)动物细胞是基因工程技术中常用的受体细胞。
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3、其他领域
了解胚胎发育及衰老过程 更好追踪研究疾病的发展过程、治疗疾病
（二）体细胞核移植技术存在的问题
1、成功率低 2、克隆动物存在健康问题
原理： 植。 胚胎细胞分化程 度低，恢复其全 能性相对容易。 动物体细胞分化 程度高，恢复其 全能性十分困难
动物体细胞核移植技术
3.回忆克隆羊“多莉”的培育过 Ａ母绵羊 Ｂ母绵羊 程
卵细胞
乳腺细胞
核移植 卵裂 早期胚胎
融合后的卵细胞 胚胎移植
C母绵羊子宫 妊娠 分娩 多莉羊
复习：
1、叙述动物细胞培养的 过程。
2、为什么选用动物胚胎或 幼龄个体的器官或组织做 转入培养瓶 动物细胞培养材料？ 分瓶传代培养 3、为什么培养前要将组 织细胞分散成单个细胞？ 4、动物细胞培养的条件。 10代细胞 40-50代细胞 无限传代
动物胚胎或幼龄动物 的组织、器官 剪碎用胰蛋白酶处理 单个细胞 加培养液稀释 配置细胞悬液 原
◆激活方法： ◆激活目的： ◆胚胎移植至代孕 受体内
◆促融方法： 电刺激 妊娠、分娩
有人说它有三个母亲， 对吗？
讨 论：
１、在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之前， 为什么必须先去掉受体卵母细胞的核？ 为使核移植动物的核遗传物质全部来自有 利用价值的动物提供的细胞。 ２、用于核移植的供体细胞一般都选用传代10代 以内的细胞，为什么？ 10代以内的细胞一般保持正常二倍体的核型， 未发生突变。 3、体细胞核移植方法生产的克隆动物是对体细胞 供体动物进行了100%的复制吗？为什么？ 不是
3.结合P48图2-21，叙述克隆高产奶牛的培育过程。
减数第二次分裂中期 供体细胞培养
（ MⅡ卵母细胞）
将供体细胞注入去核卵母细胞
核移植 胚胎移植
体细胞核 移植流程
◆取供体细胞传代 培养10代以内的细 胞.为什么？
供体：优质高产奶牛
受体：普通奶牛（卵母细胞 的采集与培养）
◆用的是去核 的减数第二次 1.体积大，易操作。 分裂中期细胞 2.含有促使细胞核 （MⅡ中期） 表达全能性的物质 为什么？ 和营养条件。
克隆动物绝大部分DNA来自供体细胞核，但核外还 有少部分DNA（如线粒体DNA）来自受体卵母细胞。
4.体细胞核移植技术有哪些应用前景和缺陷？
（一）体细胞核移植技术的应用前景 1、畜牧业方面：
可以加速家畜遗传改良的进程，促进优良畜群繁育。 保护濒危物种，增加其存活数量
2、医药卫生方面：
生产医用蛋白质 组织器官的移植
1、克隆动物能否用类似植物组织培 养的方法获得？为什么？
目前不能。
因为动物细胞的全能性随着分化程度 的提高逐渐受到限制。目前，用动物体细胞 克隆的动物，实际上是通过核移植来实现的。
2.动物核移植的概念、原理、分类？ 定义： 动物核移植是将动物的一个细胞 的细胞核,移入一个已经去掉细胞核的卵母 细胞中.使其重组并发育成一个新的胚胎,这 个新的胚胎最终发育为动物个体.
代 培 养
传 代 培 养
2.2.1动物细胞培养与核移植技术
自学指导
认真默读课本P47-50页，找出下列思考题的答案并勾划出来， 7分钟后检测自学效果。
1. 举例说明什么是克隆？克隆动物能否用类 似植物组织培养的方法获得？为什么？ 2.动物核移植的概念、原理、分类？ 3.回忆克隆羊“多莉”的培育过程。结合P48 图2-21，叙述克隆高产奶牛的培育过程。 同桌相互讨论P49讨论部分的三道思考题。 4.体细胞核移植技术有哪些应用前景和缺陷？
二、动物体细胞核移植技术和克隆动物 1. 什么是克隆？
克隆就是无性繁殖，具体地说，是指 一个共同的祖先，通过无性繁殖的方法产生出来 的一群遗传特性相同的DNA分子、细胞或个体。 a.分子水平上： 一般指DNA克隆。 b.细胞水平上：
指一个单一的细胞分裂所形成的细胞群体。
c.个体水平上：
指基因型完全相同的两个或一个群体。