细胞实验讲解
细胞实验的基本操作
细胞实验的基本操作【细胞培养】一、细胞的复苏：非原代培养的细胞一般冻存于液氮之中，需要培养时要先从液氮中取出使之复苏。
细胞复苏的原则——快速融化：必须将冻存在－196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。
具体操作如下：1、实验前准备：1.1、将水浴锅预热至37℃，并将含10%FBS的培养液置于其中预热；。
1.2、用75％酒精擦拭紫外线照射30min的超净工作台台面。
1.3、在超净工作台中按次序摆放好消过毒的离心管、吸管、培养瓶等等。
2、取出冻存管及迅速解冻：2.1、根据细胞冻存记录按标签找到所需细胞的编号。
2.2、从液氮罐中取出细胞盒，取出所需的细胞，同时核对管外的编号。
2.3、迅速将冻存管投入到已经预热的水浴锅中迅速解冻，并要不断的摇动，使管中的液体迅速融化，约1-2min后冻存管内液体完全溶解，取出用酒精棉球擦拭冻存管的外壁，再拿入超净台内。
3、平衡离心将细胞悬液吸到离心管中，1000～1500rpm离心3分钟；4、制备细胞悬液吸去上清液，加入10 ml培养液，用吸管轻轻吹打均匀，使细胞悬浮；5、细胞计数细胞浓度以5×105/ml为宜。
6、培养细胞将复合细胞计数要求的细胞悬液吸到培养瓶中，将培养瓶放入37℃和5％CO2的培养箱内培养（略微拧松培养瓶盖），换液的时间由细胞情况而定。
通常，除少数特别注明对DMSO 敏感的细胞外，绝大部分细胞株（包括悬浮性细胞），在解冻之后，可直接放入含有10-15ml（5－10倍）新鲜培养基的培养角瓶中，待隔天再置换新鲜培养基以去除DMSO 即可，如此可避免大部分解冻后细胞无法生长或贴附的问题。
二、细胞的传代：培养的细胞生长至一定密度之后，由于培养液中营养逐渐消耗、代谢物逐步积累（可见到培养液变黄），而且细胞的生长空间也受到限制，就会影响到细胞的继续生存。
这时就需要分离出一部分细胞和更新培养液，这一过程就叫做传代。
细胞计数实验原理
实验原理：当待测细胞悬液中细胞均匀分布时，通过测定一定体积悬液中的细胞的数目，即可换算出每毫升细胞悬液中细胞的细胞数目。
具体操作：1. 将计数板及盖片擦拭干净，并将盖片盖在计数板。
2. 将细胞悬液吸出少许，滴加在盖片边缘，使悬液充满盖片和计数板之间，静置3min，注意盖片下不要有气泡，也不能让悬液流入旁边槽中。
3. 计算板四大格细胞总数，压线细胞只计左侧和上方的。
然后按公式计算：细胞数/mL=四大格细胞总数/4×104说明：公式中除以4，因为计数了4个大格的细胞数。
公式中乘以104因为计数板中每一个大格的体积为：1.0mm（长）×1.0mm（宽）×0.1mm（高）=0.1mm3而1ml=1000mm3（注意：镜下偶见有两个以上细胞组成的细胞团，应按单个细胞计算，若细胞团10%以上，说明分散不好，需重新制备细胞悬液）细胞计数与存活测试1. 原理：1.1. 计算细胞数目可用血球计数盘或是Coulter counter 粒子计数器自动计数。
1.2. 血球计数盘一般有二个chambers，每个chamber 中细刻9 个1 mm2 大正方形，其中4 个角落之正方形再细刻16 个小格，深度均为0.1 mm。
当chamber 上方盖上盖玻片后，每个大正方形之体积为1 mm2 x 0.1 mm=1.0 x 10-4 ml。
使用时，计数每个大正方形内之细胞数目，乘以稀释倍数，再乘以104，即为每ml 中之细胞数目。
细胞计数要点：①进行细胞计数时，要求悬液中细胞数目不低于1×107 L-1，如果细胞数目很少要进行离心再悬浮于少量培养液中。
②要求细胞悬液中的细胞分散良好，否则影响计数准确性。
③取样计数前，应充分混匀细胞悬液，尤其时多次取样计数时更要注意每次取样都要混匀，以求计数准确。
④数细胞的原则是只数完整的细胞，若细胞聚集成团时，只按照1个细胞计算。
如果细胞压在格线上时，则只计上线，不计下线，只计右线，不计左线。
细胞培养的实验步骤
细胞培养的实验步骤细胞培养的实验步骤如下：1、细胞复苏：细胞培养条件2、复苏流程：（1）确认水浴锅的水清洁可用，方可提前打开37度预热。
（2）确认好复苏细胞的液氮罐中具体位置，并做好复苏登记。
（3）提前做好复苏准备，预热培养基。
（4）悬浮和贴壁细胞复苏参数：（5）将细胞快速放入37度水浴锅中迅速溶解，1.8ml时间大概1分30秒，1ml大概1min左右，需计时，其间不要老是拿起来观察，需要快速复溶，避免细胞受到损伤。
（6）贴壁细胞需离心，1000rpm，5min。
悬浮细胞直接加入预热的培养基中然后放入培养箱中（7）贴壁细胞离心后去除上清，用预热的培养基重悬细胞后加入T25方瓶，蕞后放入培养箱中培养。
（8）取小样计数观察，细胞活力在70%以上算正常。
低于70%活力可能细胞状态不太好，需要培养和恢复。
3、细胞传代培养1．悬浮细胞传代流程：（1）先将装有细胞的摇瓶从培养箱拿出，用酒精喷洒瓶身后将摇瓶拿进超净台。
（2）打开摇瓶瓶盖，用200ul移液器取100~200ul细胞放入1.5mlEP管中，瓶盖过火，拧紧，将培养瓶放回摇床。
（3）将200ul细胞混匀，取10ul细胞加入10ul台盼蓝，显微镜下计数。
根据细胞数决定下游实验。
（4）细胞需计数两次求平均值。
（5）悬浮细胞生长参数（6）根据不同细胞的生长曲线在合适的时间和密度给细胞接种传代。
以sf9细胞为例：细胞接种密度0.4x10^6个/ml,24h密度1x10^6个/ml,48h密度2.4x10^6个/ml,72h密度6x10^6个/ml，此时需要传代细胞。
要求留样100ml0.4x10^6个/ml具体操作如下：计算：需要母细胞体积=100*0.4/6=6.6ml需要培养基体积=100-6.6=93.4ml将上面体积的细胞和培养基加入摇瓶中，放回27度培养箱培养即可2.贴壁细胞传代流程：（1）显微镜下观察细胞状态和密度，80%汇合率以上需要传代。
（2）T25方瓶中加入0.5ml~1ml0.25%胰酶溶液（需37度预热），使瓶底细胞都浸入溶液中。
【精品】细胞生物学实验指导讲义
实验一细胞的基本形态结构的观察实验原理与目的（1）通过观察动、植物细胞，了解细胞形态的多样性并掌握光镜下细胞的基本形态结构。
（2）初步掌握临时制片技术和显微绘图的方法。
实验原理细胞是生命活动的基本结构单位和功能单位。
构成人体或其他高等动物或植物的细胞种类繁多，形态各异。
细胞的形态都与它们的功能相适应。
如具有运输O2和CO2功能的红细胞为双凹盘状；具有感受刺激与传导功能的神经细胞呈星芒形，附有长短不等的树枝状突起；上皮细胞是柱形或扁平形；巨噬细胞则呈不规则形状，并能伸出伪足，以利于为执行吞噬和消灭外源的病原微生物的功能。
虽然细胞在形态上多种多样、大小不同，但却具有共同的基本结构特点，即都是由细胞膜（cellmembrane）、细胞质(cytoplasm)和细胞核(nucleus)组成。
实验用品1．器具：显微镜、载玻片、盖玻片、推片、吸管、镊子、牙签、擦镜纸、吸水纸、小剪刀。
2．材料：洋葱、人口腔上皮细胞、鸡血液、人血细胞涂片、蟾蜍血细胞涂片。
3．试剂：2%碘液、Giemsa染液。
试剂配制1．2%碘液：称取碘片2g，碘化钾5g，蒸馏水100ml混匀溶解即可。
2．吉姆萨(Giemsa)染液：吉姆萨粉(Giemsastain)l.0g甘油(AR)66ml甲醇(AR)66ml将Giemsa粉放入研钵中，先加入少量甘油，研磨至无颗粒为止，然后再将全部甘油倒入，放56℃温箱中2h后，加入甲醇，将配制好的染液密封保存棕色瓶内(最好于0~4℃保存)。
内容与方法一、洋葱鳞茎表皮细胞制片与观察：1.临时制片：取一擦净的载玻片，在玻片中央滴一滴2%的碘液，将洋葱茎用小刀分为几块，取一块肉质鳞叶，用镊子在其表面轻轻撕下一小块膜质表皮，再用剪刀剪成3～4mm2的小块，置于载玻片的染液中铺平，染色2～3分钟，盖上盖玻片，用吸水纸吸去盖玻片周围多余的染液。
2.观察：将标本置于低倍镜下观察，可见许多长柱状排列整齐、彼此相连的细胞，选择其中较典型的细胞移至视野中央，然后换成高倍镜观察以下结构：1）细胞壁：在每两个细胞相连处，可看到二层壁状结构，是相邻细胞各自的细胞壁，有纤维素构成。
细胞实验的基本操作方法
细胞实验的基本操作方法
细胞实验的基本操作方法可以包括以下步骤：
1. 细胞培养：将待实验的细胞株从冷冻保存中取出，放入无菌培养皿内，并加入适宜的培养基。
设置适当的培养条件，如温度、湿度和二氧化碳浓度等。
定期观察细胞生长情况并进行细胞的传代。
2. 细胞传代：当细胞培养达到一定密度时，将细胞通过酶消化方法从培养皿中取出，然后转移到新的培养皿中重新培养。
该方法可以获得更多的细胞数量，以维持细胞培养的供应。
3. 细胞分离：对于某些实验需要用到单独的细胞的情况，可以采用细胞分离的方法，如通过胰蛋白酶消化细胞外基质、抑制细胞黏附等，使细胞单个分散。
4. 细胞检测：使用显微镜观察细胞的形态变化，细胞生长情况和细胞颜色等。
也可以利用荧光显微镜观察细胞内的特定荧光标记物，如细胞核染色剂、蛋白质荧光探针等。
5. 细胞培养基交换：定期更换细胞培养基，以保持细胞的生长状态和代谢活性。
6. 细胞处理：根据实验需要，在培养皿中添加不同浓度或种类的化合物，如药物、抗生素等，对细胞进行处理。
7. 细胞采集：根据实验需求，利用细胞刮刀、吸球等方法将细胞从培养皿中收集起来。
8. 细胞冻存：将细胞保存在液氮中，以便长时间保存和后续使用。
9. 细胞裂解：对于某些实验需要提取细胞内的特定分子或蛋白质，可以使用细胞裂解液将细胞内组分释放出来。
10. 细胞计数：通过显微镜或细胞计数仪等方法，对细胞数量进行计数和测定。
请注意，具体细胞实验的操作方法可能因不同的实验目的和细胞类型而有所差异，上述仅为一般的基本操作方法。
在进行细胞实验时，应严格遵守相关实验室规范和安全操作指南。
细胞渗透实验
细胞渗透实验细胞渗透实验是一种常见的实验方法，被广泛用于研究细胞的渗透性和渗透调节机制。
通过这个实验，我们可以了解到细胞在不同渗透压条件下的反应，揭示其中的分子机制。
本文将介绍细胞渗透实验的基本原理、实验步骤和实验结果的分析。
一、实验原理细胞渗透实验是基于“渗透压平衡”的原理进行的。
细胞内外的溶液渗透压不同时，会引发细胞内外水分分子的运动，从而影响细胞的水分平衡和渗透调节。
在实验中，我们常用半透膜将细胞和外界隔开，通过控制细胞外溶液的渗透压，观察细胞内外水分的运动情况，从而了解细胞的渗透性。
二、实验步骤1. 实验材料准备：（1）培养皿：用于培养细胞的培养皿，要干净无菌。
（2）细胞悬液：从培养皿中取得细胞悬液，浓度约为10^5-10^6个/ml。
（3）渗透剂：例如蔗糖、甘露醇等，按一定比例加入培养基中制备各种渗透压溶液。
（4）显微镜：用于观察细胞状态的显微镜设备。
（5）离心机：用于离心细胞和收集细胞沉淀。
2. 实验操作步骤：（1）将培养皿中的细胞悬液离心收集，去除上清液并加入适量的渗透溶液。
（2）用显微镜观察细胞的形态变化和渗透压的影响。
（3）根据实验数据绘制细胞浓度和渗透压关系图。
三、实验结果分析通过细胞渗透实验的结果，我们可以得到如下的结论：（1）在低渗透压溶液中，细胞的浓度较高，呈现膨胀和增大的状态。
（2）在高渗透压溶液中，细胞的浓度较低，呈现收缩和变小的状态。
（3）在等渗透压溶液中，细胞的浓度保持稳定，不发生明显变化。
细胞渗透实验通常用来研究细胞在不同环境条件下的调节能力，以及细胞内外渗透平衡的稳定性。
通过实验数据的分析，我们可以了解到细胞在渗透压变化时的生理反应和适应机制。
这对于深入研究生物细胞的内部环境调节以及相关疾病的发生机理具有重要的意义。
综上所述，细胞渗透实验是一种重要的实验方法，通过这个实验我们可以了解到细胞在不同渗透压条件下的反应和调节机制。
随着现代生物技术的发展，细胞渗透实验在生物学研究中的应用也越来越广泛，为我们揭示细胞内部环境的奥秘提供了有力的工具。
细胞趋化实验原理
细胞趋化实验原理
细胞趋化实验是一种常用的实验方法，用于研究细胞在化学梯度中的运动和迁移。
其基本原理是通过使用化学物质在实验室条件下建立化学梯度，观察和测量细胞对该梯度的响应。
该实验通常分为以下几个步骤：
1. 清洗：将需要进行实验的细胞样品进行清洗，以去除外部污染物和培养基残留。
清洗通常使用含有细胞生长所需的培养基进行多次漂洗。
2. 定量：将清洗后的细胞样品进行计数，以确定实验中使用的细胞数目。
3. 制备梯度：根据实验设计，准备出含有化学物质的溶液，以制备出所需的化学梯度。
常用的方法包括使用浓度梯度装置、滤纸滤片、药物注入装置等。
4. 添加细胞：将细胞样品加入到含有制备好的化学梯度的溶液中，让细胞在梯度中进行迁移。
5. 观察和测量：使用显微镜观察和记录细胞在梯度中的迁移情况。
可以通过时间-lapse显微镜观察到细胞的运动轨迹，并使
用图像分析软件对细胞的速度、方向和距离等进行测量和分析。
通过细胞趋化实验，可以研究细胞对不同化学物质的趋化效应，
了解细胞运动和迁移的机制，并进一步研究细胞在生理和病理条件下对趋化因子的响应。
细胞凋亡实验详细步骤及说明
细胞凋亡实验详细步骤及说明
细胞凋亡是细胞在正常发育或应激条件下程序性死亡的过程。
为了深入了解细胞凋亡的机制和影响因素，以下是细胞凋亡实验的详细步骤及说明：
步骤一：培养细胞
1. 准备培养皿并涂覆培养基，确保培养基的成分适合所使用的细胞类型。
2. 从培养细胞的主要来源（如细胞培养库）中获取细胞。
3. 将细胞转移到培养皿中并在适当的温度和湿度下孵育。
步骤二：处理实验组
1. 将培养的细胞分为实验组和对照组。
实验组是要进行细胞凋亡诱导的组，而对照组则用于对比分析。
2. 选择适当的方法诱导细胞凋亡，例如化学诱导剂（如某种药物）或物理刺激（如辐射）。
3. 根据实验需要，在指定的时间间隔内观察细胞凋亡的现象和变化。
步骤三：检测细胞凋亡
1. 使用合适的细胞凋亡检测方法，如细胞染色和流式细胞术。
这些方法可用于分析各种细胞凋亡标志物的表达。
2. 准备相应的染色试剂或抗体，并按照说明溶解或稀释。
3. 按照实验需求，将细胞标本与染色试剂或抗体共孵育，并进行相应的分析和读数。
步骤四：数据分析与结果
1. 对实验和对照组的数据进行统计学分析，如均值和标准差计算。
2. 进一步分析和解释实验结果，评估细胞凋亡发生的程度和影响因素。
3. 根据实验结果撰写实验报告，包括方法、结果和结论，并进行讨论和对比分析。
以上是细胞凋亡实验的详细步骤及说明。
通过进行这些实验，
我们可以更好地理解细胞凋亡的机制以及可能对其产生影响的因素。
请根据具体实验的要求和细胞类型的特点，调整实验步骤和方法，
并确保实验过程中的安全性和可重复性。
细胞功能实验
细胞功能实验细胞功能实验是一种科学实验方法，以评估细胞的生理功能和功能。
这些实验可以帮助科学家了解细胞在正常状态下的功能，以及在不同病理条件下的变化。
细胞功能实验通常使用细胞培养技术，即将细胞放入营养物质丰富的培养基中，提供适宜的生长环境。
细胞培养箱提供了稳定的温度、湿度和气体条件，以模拟细胞在体外的生长环境。
细胞功能实验中最常用的是细胞增殖实验。
这种实验可以评估细胞的增殖能力和生长速度，通常使用MTT法或细胞计数法。
MTT法是将一种被代谢活跃的染色剂加入细胞培养物中，待细胞内的代谢物还原染色剂后，通过比色法测定细胞数量。
细胞计数法则是用显微镜观察细胞的数量和形态，通过计算细胞的密度来评估细胞增殖速度。
除了细胞增殖实验，细胞功能实验还包括细胞凋亡实验、细胞迁移和侵袭实验、细胞分化实验等。
细胞凋亡实验可以评估细胞的死亡和存活状态，常用的方法包括Annexin V-FITC/PI双染实验和DNA断裂实验。
细胞迁移和侵袭实验可以研究肿瘤细胞和其他细胞在体外的迁移和侵袭能力，常用的方法包括Transwell迁移和划痕实验。
细胞分化实验通常用于观察干细胞的分化能力，常见的方法包括倒置显微镜观察和特定细胞标记物的染色。
此外，细胞功能实验中还可以使用分子生物学技术，例如PCR、Western blot和ELISA等，来研究细胞内的信号传导通路、基因表达和蛋白质水平等。
这些实验方法的综合应用可以揭示细胞的功能调控机制，为疾病的预防和治疗提供依据。
总之，细胞功能实验是一种重要的科研方法，可以评估细胞的生理功能和功能。
通过这些实验，科学家可以更好地理解细胞的机制和疾病的发生发展，为疾病的治疗和预防提供重要的依据。
高中生物课程教案分享：动物细胞培养实验案例讲解
高中生物课程教案分享：动物细胞培养实验案例讲解导言生物学是指研究生物体及其相互关系和运动规律的学科，其内涵包含了多样性、相互作用、进化和适应性等。
而生物学课程不仅是学生学习生物学或进一步攻读医学或生物科学的必要前提，更是一种较为全面的自然科学。
在生物课程的教学中，神经元和细胞、遗传学、免疫学等学科是不容忽视的重要内容之一。
在其中，细胞学更是贯穿整个课程的核心。
教学目的细胞培养实验是细胞学领域一个常见的实验技术，使用这种技术，我们可以在实验环境下研究细胞的许多功能和过程。
这一实验的教学目的包括：1.理解细胞培养的重要性和运作原理；2.学习如何准备培养基及其配制方法；3.学会样本准备和理解细胞培养的基本技能；4.掌握无菌操作和安全措施。
教学过程实验材料1.细胞培养基（DMEM）；2.无血清胎牛血清（FBS）；3.法尼迪胆红；4.表面活性剂（如Tween 20）；5.96孔板。
步骤1：样品收集洗涤细胞样品及其培养。
为保证实验能够顺利进行，必须使用无菌技术并避免感染风险。
在进行收集样品作业前，务必洗手及其消毒，并在时期内保持反复按照。
此外，需要准备完整的实验平台及其消毒设备，如消毒液、眼罩、手套、口罩等。
步骤2：试管准备收集样品后，需要将其移动至已经清洗和消毒的环境中。
此时，必须通过微生物循环柜和干燥器来消毒以及干燥工具和表面。
之后，Proceed to add the culture medium, FBS,and penicillin-streptomycin combination.在处理试管时使用无菌循环柜，紧挨着清洁过的手套将保存期点的细胞样品注入，使其均匀分布于试管中。
步骤3：细胞培养在培养过程中，需要定期观察其细胞的生长状况和替换细胞培养基。
此外，还需要为细胞提供必要的营养物质和环境因素。
在这些位置，需要进行的步骤如下：1.使用微量注射器在试管里添加保护培养基和抗生素，确保细胞的生存和稳定；2.在试管上方贴上无菌膜，不仅可以保护试管和培养基，还能增加细胞的纯度和稳定性；3.将试管在配备好了的細胞培養箱中放置，在恒温孵育器上设置适宜的温度、湿度和氧气供应，确保试管保持稳定和深度。
高中生物的细胞实验教案
高中生物的细胞实验教案
实验目的：通过观察显微镜下的细胞结构，了解细胞的组成和功能
实验材料：
1. 显微镜
2. 盖玻片
3. 鲤鱼皮细胞样本
4. 盐水
5. 小刀
6. 小勺
7. 水滴管
8. 缝纫针
实验步骤：
1. 取一片鲤鱼皮细胞样本，用盐水洗净。
将样本放在盖玻片上，加入一滴盐水。
2. 用小刀先将细胞表面削平，然后用小勺轻轻压碎细胞，使细胞内液体渗出。
3. 用水滴管加入一滴水，混合细胞内液体。
用缝纫针搅拌均匀，覆上盖玻片。
4. 将盖玻片放在显微镜台上，调整放大倍率，观察细胞结构。
5. 观察细胞的外观特征，包括细胞核、质体、液泡等结构。
记录观察到的细胞结构和特点。
6. 总结细胞的结构与功能，讨论细胞结构与功能之间的关系。
实验注意事项：
1. 操作过程要轻柔，避免破坏细胞结构。
2. 使用显微镜时要小心操作，避免损坏显微镜。
3. 实验后要注意清洁实验台和实验器材。
拓展实验：
1. 观察其他种类的细胞样本，比较不同种类细胞的结构与功能。
2. 进一步研究细胞器官的功能和相互作用。
实验评价：
通过本实验，学生能够深入了解细胞的结构与功能，培养观察、记录和分析实验结果的能力。
同时，也促进学生的团队合作与沟通能力。
细胞凋亡实验详细步骤及说明
细胞凋亡实验详细步骤及说明实验概述本实验旨在研究细胞凋亡的过程和机制。
细胞凋亡是一种正常的细胞死亡方式，对于维持组织的稳态具有重要作用。
通过本实验，我们可以了解细胞凋亡的特征和调控通路，以及一些常用的检测方法。
实验材料- 培养皿- 细胞培养基- 不同处理条件下的细胞（例如药物处理、基因敲除等）- Annexin V-FITC/PI 细胞凋亡检测试剂盒- 显微镜实验步骤1. 培养细胞：将细胞按照常规方法培养至适当的细胞数目。
2. 细胞处理：根据实验设计，在细胞培养基中添加不同处理条件下所需的药物。
3. 收集细胞：根据实验设计决定收集细胞的时间点，使用适当的方法将细胞收集到离心管中。
4. 染色试剂处理：根据实验需求，使用 Annexin V-FITC/PI 细胞凋亡检测试剂盒中的染色试剂进行细胞染色，按照试剂盒说明书的操作步骤进行。
5. 检测细胞凋亡：将染色后的细胞标本放置在显微镜下观察，并使用适当的过滤器和荧光镜头进行观察。
6. 数据分析：根据观察结果，统计和分析不同处理条件下细胞凋亡的数量和特征。
实验注意事项- 操作过程中应严格遵守实验室安全规范，确保个人和实验室安全。
- 细胞培养过程中，注意细胞接种密度和培养基条件的控制，以维持细胞的正常生长状态。
- 在染色试剂处理过程中，按照试剂盒说明书的要求进行操作，避免试剂污染和误操作。
- 在显微镜观察过程中，注意调整适当的放大倍数和聚焦，以获得清晰的细胞图像。
实验结果与讨论根据实验结果可以获得不同处理条件下细胞凋亡数量和特征的数据。
结合相关文献和已有知识，可以对细胞凋亡的机制和调控通路进行深入的讨论。
实验结果可以为进一步研究细胞凋亡的相关领域提供有价值的数据基础。
以上是细胞凋亡实验的详细步骤及说明。
希望对你的研究有所帮助！。
细胞实验的名词解释
细胞实验的名词解释细胞实验是生物学研究中常用的一种实验手段，用于研究细胞的生理功能、代谢过程以及与生物体内外环境的相互作用等。
在细胞实验中，科学家通常利用细胞培养技术将细胞在体外培养，并运用多种技术手段观察和分析细胞的行为以及生物分子的功能。
细胞实验是现代生物学发展的重要基石，为人们深入了解生命活动提供了重要的数据和实验证据。
一、细胞培养技术细胞培养技术是细胞实验的核心环节。
通过培养基、培养器具和培养条件的优化，科学家能够将细胞在无菌环境中保持活力并进行控制性生长。
细胞培养技术的发展使得研究人员可以更好地模拟细胞在体内的环境，有效地开展各种实验研究。
二、细胞株和原代细胞在细胞实验中，常用的细胞来源有两种：细胞株和原代细胞。
细胞株是从体内细胞中分离出来的、在体外经过多代培养后获得的细胞系。
由于经过多次分裂，细胞株往往具有较高的稳定性和可重复性，适合大规模实验。
而原代细胞则是从活体组织或器官中分离出来的尚未经过培养的细胞，具有更接近生理状态的特点，但生长周期短，不适合大规模扩展。
三、细胞增殖和凋亡细胞增殖和凋亡是细胞实验中常研究的重要现象。
细胞增殖是指细胞通过细胞分裂繁殖的过程。
通过测量细胞数量的变化和细胞生长曲线，科学家可以了解细胞增殖的速度和规律，揭示细胞生长调控的机制。
而细胞凋亡则是指细胞主动死亡的过程，是生物体细胞数量调控和组织正常发育的重要环节。
通过分析凋亡信号通路和相关的调控分子，可以深入了解细胞死亡的机制以及其在疾病发生发展中的作用。
四、细胞分化和再编程细胞分化和再编程是细胞实验中研究的另一个重要方向。
细胞分化是指多能性细胞向一定特定类型细胞转化的过程，如由干细胞发育为神经细胞或心肌细胞等。
通过研究细胞分化的机制，可以增进对器官发育和组织再生的理解，并为相关疾病的治疗提供新的思路。
再编程指的是将已经分化的细胞逆转为多能性状态，如将某些体细胞重编程为诱导多能干细胞（iPSCs）。
这一技术的发展对于研究疾病的发生机制和治疗新方法具有重要意义。
细胞实验资料
细胞实验在科学研究中，细胞实验是一种常见的实验方法，用于研究细胞的结构、功能和相互作用。
通过细胞实验，研究人员可以深入了解细胞内部的生物学过程，从而推动生命科学领域的发展。
细胞实验的意义细胞实验在生命科学研究中具有重要的意义。
通过细胞实验，科学家可以观察和探索细胞内部的各种生物学过程，如DNA复制、蛋白质合成、信号转导等。
细胞实验还可以用于研究细胞的遗传变异、生长特性以及对环境的适应能力。
这些研究成果对于理解生命的基本规律、疾病的发生机制以及药物的研发具有重要意义。
细胞实验的常用方法细胞实验的常用方法包括细胞培养、细胞染色、细胞计数、细胞分离和细胞转染等。
其中，细胞培养是最基本的实验方法之一，通过将细胞放置在适当的培养基中，可以使细胞在体外继续生长和繁殖。
细胞染色可以用来观察细胞内部的结构和功能，如核酸、蛋白质、细胞器等。
细胞计数可以用于确定细胞培养的浓度和数量。
细胞分离和细胞转染则可以用于研究细胞的特定功能和相互作用。
细胞实验的应用细胞实验在生命科学领域有着广泛的应用。
在癌症研究中，科学家可以利用细胞实验研究癌细胞的生长特性、信号通路以及对化疗药物的敏感性。
在药物研发中，细胞实验可以用来筛选药物的有效性和毒副作用。
在疾病治疗中，细胞实验可以帮助医生设计个性化的治疗方案。
总结细胞实验是生命科学研究中不可或缺的重要方法，通过细胞实验可以深入了解细胞的结构、功能和相互作用。
细胞实验在疾病治疗、药物研发以及生物学研究中有着广泛的应用前景。
随着科学技术的不断进步，相信细胞实验将发挥越来越重要的作用，推动生命科学领域的发展。
细胞迁移实验详细步骤及说明
细胞迁移实验详细步骤及说明实验目的：本实验旨在通过细胞迁移实验，研究细胞在不同条件下的迁移能力，以深入了解细胞迁移机制。
实验步骤：1. 细胞培养准备：- 选择细胞系：根据研究目的选择合适的细胞系，如癌细胞系、原代细胞系等。
- 细胞培养基准备：根据细胞系要求制备培养基，添加所需的营养物质和补充物。
- 细胞培养器皿准备：选择合适的培养器皿，如细胞培养板、细胞培养皿等。
- 细胞传代：将细胞传代至合适的细胞密度，保证细胞处于快速生长期。
2. 细胞迁移实验装置准备：- 细胞培养皿：选择具有适当孔径的Transwell孔板或细胞迁移室。
- 上下室培养基准备：在上下室中加入适量的培养基，并保持温度和湿度稳定。
3. 细胞迁移实验操作：- 细胞装载：将预处理好的细胞悬浮液加入上室，根据实验要求调整细胞密度。
- 上下室组装：将上室与下室连接，确保上下室之间的通道畅通。
- 孵育条件设置：放置细胞迁移装置于恒温培养箱内，设置适当的温度和CO2浓度。
- 孵育时间：根据实验目的设定合适的孵育时间，一般为24至48小时。
- 停止迁移：取出细胞迁移装置，将上室内的细胞去除，轻轻用PBS或生理盐水清洗下室。
- 下室细胞固定：用适当的固定液对下室细胞进行固定处理，一般使用甲醛或冰乙酸。
- 细胞染色：使用合适的细胞染色剂，如克里斯汀染料，对下室内的细胞进行染色。
- 细胞观察与计数：使用显微镜观察染色后的下室细胞，并进行细胞计数。
4. 数据分析与结果解读：- 统计分析：根据实验设计和目的，选择合适的统计方法进行数据分析，如t检验、方差分析等。
- 结果展示：以图表形式展示实验结果，如柱状图、折线图等。
- 结果解读：根据实验结果和现有知识，解读细胞迁移能力的差异，讨论实验结果与研究目的之间的关系。
实验注意事项：- 细胞培养条件：细胞在培养过程中要保持正常生长状态，培养基和培养条件应符合细胞要求。
- 细胞悬浮液处理：在加入上室前，细胞悬浮液需要进行预处理，如离心去除培养基，保证细胞悬浮液的纯度。
细胞结构的实验报告
一、实验目的1. 通过显微镜观察细胞的结构，了解细胞的基本组成。
2. 掌握制作临时装片和显微镜观察的基本技能。
3. 比较植物细胞和动物细胞的结构差异。
二、实验原理细胞是生物体的基本结构和功能单位。
细胞主要由细胞膜、细胞质、细胞核等部分组成。
植物细胞还具有细胞壁、液泡、叶绿体等特殊结构。
通过显微镜观察，可以直观地了解细胞的结构和功能。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：洋葱鳞片叶表皮细胞、口腔上皮细胞、载玻片、盖玻片、滴管、碘液、生理盐水、消毒牙签、纱布等。
2. 实验仪器：显微镜、镊子、吸水纸、显微镜载物台、显微镜目镜、显微镜物镜等。
四、实验步骤1. 制作洋葱鳞片叶表皮细胞临时装片：（1）用纱布擦拭载玻片和盖玻片。
（2）在载玻片中央滴一滴生理盐水。
（3）用镊子撕取洋葱鳞片叶表皮，放入生理盐水中。
（4）用镊子夹起盖玻片，使盖玻片一边先接触载玻片的水滴，缓缓盖在载玻片上，避免产生气泡。
（5）在盖玻片一侧滴加稀碘液，用吸水纸从盖玻片另一侧吸引，使染液浸润标本的全部。
2. 制作口腔上皮细胞临时装片：（1）用纱布擦拭载玻片和盖玻片。
（2）在载玻片中央滴一滴生理盐水。
（3）用消毒牙签在漱净的口腔内侧壁上轻轻刮几下，将牙签上的碎屑涂抹在载玻片的生理盐水滴中。
（4）用镊子夹起盖玻片，使盖玻片一边先接触载玻片的水滴，缓缓盖在载玻片上，避免产生气泡。
（5）在盖玻片一侧滴加稀碘液，用吸水纸从盖玻片另一侧吸引，使染液浸润标本的全部。
3. 显微镜观察：（1）将临时装片放在显微镜载物台上。
（2）调整显微镜与临时装片的位置，直至观察到清晰的图像。
（3）观察洋葱鳞片叶表皮细胞和口腔上皮细胞的结构，并比较两者的差异。
五、实验结果与分析1. 洋葱鳞片叶表皮细胞：- 细胞壁：细胞壁是植物细胞特有的结构，由纤维素和果胶组成，起到保护和支持细胞的作用。
- 细胞膜：细胞膜是细胞的外层结构，由磷脂双分子层和蛋白质组成，具有选择性透过性。
- 细胞质：细胞质是细胞膜和细胞核之间的区域，含有细胞器、细胞骨架等。
细胞的观察实验
细胞的观察实验细胞是生物体的基本组成单位，对于研究生命科学具有重要意义。
为了进一步了解细胞的结构和功能，科学家们进行了许多有关细胞的观察实验。
本文将介绍关于细胞观察实验的方法和结果，并探讨实验的意义和应用。
一、细胞的采集与处理在进行细胞的观察实验前，我们首先需要采集样本并进行适当的处理。
常用的样本来源包括植物组织、动物组织以及微生物等。
对于植物组织和动物组织，可以通过切片法或细胞分离法获得样本。
对于微生物，可直接从培养液或环境中进行采集。
采集到的样本一般需要进行固定处理，以保持细胞的形态和结构。
常用的固定剂包括甲醛、乙醛和氯仿等，可以选择合适的固定剂根据需要进行处理。
固定处理后的样本可以保存或进一步进行下一步的实验。
二、细胞的染色实验染色实验是细胞观察中常用的方法，有助于突出细胞的结构和细节。
常用的染色方法有苏木精-伊红染色、格里姆萨染色和荧光染色等。
苏木精-伊红染色是常用的组织切片染色方法，可以染色细胞核和胞浆，使细胞明显可见。
格里姆萨染色则广泛用于细菌和其他微生物的染色，可以染色细胞壁和胞内结构。
荧光染色是一种可选择性染色方法，可以利用荧光标记剂染色特定的细胞结构或分子，利用荧光显微镜观察。
染色实验可以增强细胞结构的对比度，使细胞或细胞组织更易于观察和分析。
三、细胞的显微观察显微观察是细胞观察实验的核心步骤。
根据所采用的样本和研究目的，可以选择不同的显微观察方法，如光学显微镜、电子显微镜和共聚焦显微镜等。
光学显微镜是最常用的显微观察方法，能够观察到细胞和组织的整体结构。
电子显微镜具有更高的分辨率，可以观察到细胞的超微结构，如细胞器、细胞膜和细胞核等。
共聚焦显微镜结合了荧光染色技术，可以对细胞进行三维成像和时序观察。
通过显微观察，我们可以获得大量关于细胞形态、结构和功能的信息，为进一步的研究奠定基础。
四、细胞观察实验的意义和应用细胞观察实验对于生命科学的研究有着重要的意义和广泛的应用。
首先，通过观察细胞的结构和功能，可以深入了解生命的活动规律和机制，为生物学研究提供基础数据。
细胞培养小实验实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 掌握细胞培养的基本操作流程，包括原代培养和传代培养。
2. 了解细胞培养过程中的无菌操作规范。
3. 观察细胞在体外培养过程中的生长、增殖和形态变化。
二、实验原理细胞培养是从生物体中取出某种组织或细胞，模拟体内生理条件，在人工培养条件下使其生存、生长、繁殖或传代的过程。
细胞培养技术的最大优点是使我们得以直接观察活细胞，并在有控制的环境条件下进行实验，避免了体内实验时的许多复杂因素，还可以与体内实验互为补充。
三、实验用品1. 仪器及器材：显微镜、载玻片、盖玻片、移液枪、培养皿、无菌操作台、无菌操作箱、细胞培养箱、CO2培养箱、细胞计数器等。
2. 试剂：细胞培养液、胰蛋白酶、胎牛血清、抗生素、无菌水等。
四、实验步骤1. 原代细胞培养（1）取动物组织，剪碎后用胰蛋白酶消化，制成细胞悬液。
（2）将细胞悬液加入培养皿，置于CO2培养箱中培养。
（3）观察细胞生长情况，每隔24小时更换一次培养液。
2. 传代培养（1）当细胞达到一定密度时，用胰蛋白酶消化细胞，制成细胞悬液。
（2）将细胞悬液按1：2的比例传代到新的培养皿中。
（3）观察细胞生长情况，每隔24小时更换一次培养液。
3. 细胞计数（1）取适量细胞悬液，加入细胞计数器。
（2）计数细胞数量，计算细胞密度。
4. 细胞形态观察（1）取细胞培养皿，用盖玻片覆盖。
（2）置于显微镜下观察细胞形态、生长情况。
五、实验结果1. 细胞生长情况：原代细胞在培养皿中生长良好，细胞密度逐渐增加。
传代培养后，细胞生长速度略有下降，但总体状况良好。
2. 细胞形态：细胞呈多边形，细胞核清晰可见，细胞间连接紧密。
3. 细胞计数：细胞密度为1×10^6个/mL。
六、实验结论1. 成功进行了原代细胞培养和传代培养。
2. 细胞在体外培养过程中生长良好，细胞形态正常。
3. 细胞培养技术为生物学研究提供了有力工具。
七、实验总结本次实验成功掌握了细胞培养的基本操作流程，了解了无菌操作规范，并观察了细胞在体外培养过程中的生长、增殖和形态变化。
细胞培养实验基础知识和相关无菌操作流程
细胞培养实验基础知识和相关无菌操作流程细胞培养实验是指将动植物组织或细胞从体内分离并在无菌条件下培养的一种技术手段。
这种技术可以用于研究细胞的生物学特性、疾病的发生机制以及药物的筛选等方面。
以下是细胞培养实验的基本流程和无菌操作的相关知识。
一、细胞培养的基本知识1.细胞培养的种类：常用的细胞培养种类有原代细胞培养、细胞株的维持和传代培养以及细胞系的培养。
2.细胞培养的培养基：细胞培养的培养基可以分为无血清培养基和含血清培养基。
其中，无血清培养基是通过添加一定的生长因子和营养物质来满足细胞生长的需要，而含血清培养基则是使用含有细胞生长因子和营养物质的胎牛血清来供养细胞。
3.传代培养的液氮保存：为了保持细胞株的可用性，可以将细胞株保存在液氮中，以备将来使用。
4.细胞培养中的无菌操作：细胞培养实验需要在无菌条件下进行操作，以防止细胞污染和外源性菌落的输入。
1.工作台和操作区域的消毒：操作前，需要用75％的酒精或其他合适的消毒剂彻底清洁工作台面、培养箱、玻璃器皿等操作区域。
2.培养器具的消毒：需要对培养器具如离心管、移液枪、显微镜等进行高温高压的无菌处理。
3.培养基的制备和滤过：制备培养基时需要将培养基溶液进行高温高压的杀菌处理，并使用0.22微米的滤膜滤过杂质。
4.无菌技术的掌握：在细胞培养实验中，需要学习和掌握无菌技术，如无菌操作台、细菌灯和无菌手套等的正确使用方法。
5.细胞的分离和悬浮：将组织样本放入消化液中，进行细胞的分离和悬浮，并通过离心和过滤的方式获得单个细胞悬浮液。
6.细胞培养的接种：将细胞悬浮液接种在含有培养基的培养皿或离心管中，放入培养箱中进行培养。
7.细胞传代的操作：当细胞达到一定密度后，需要进行细胞传代操作。
传代操作时，需要将细胞悬浮液转移到新的培养皿中，并加入新的培养基进行细胞的维持和生长。
总之，细胞培养实验是生物学研究中不可或缺的一项实验技术，掌握细胞培养的基本知识和无菌操作流程对实验结果的准确性和可靠性至关重要。
细胞构造的实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 了解细胞的基本结构组成；2. 观察植物细胞和动物细胞的结构差异；3. 掌握使用显微镜观察细胞结构的技巧。
二、实验原理细胞是生命活动的基本单位，具有复杂而精细的结构。
细胞主要由细胞膜、细胞质、细胞核等部分组成。
植物细胞还具有细胞壁、液泡和叶绿体等特殊结构。
通过观察细胞结构，可以了解细胞的生命活动规律。
三、实验材料1. 植物细胞：洋葱鳞片叶表皮细胞；2. 动物细胞：鸡肝细胞；3. 实验器材：显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、滴管、碘液、吸水纸等。
四、实验步骤1. 取洋葱鳞片叶表皮细胞和鸡肝细胞，分别制成临时装片；2. 在载玻片上滴加适量的碘液，用镊子将盖玻片轻轻覆盖在样本上；3. 将载玻片放在显微镜下，使用低倍镜观察细胞结构；4. 调整显微镜焦距，使细胞图像清晰；5. 观察植物细胞和动物细胞的细胞壁、细胞膜、细胞质、细胞核、液泡、叶绿体等结构；6. 比较植物细胞和动物细胞的结构差异；7. 记录实验结果。
五、实验结果与分析1. 植物细胞结构：- 细胞壁：位于细胞最外层，具有保护和支持细胞的作用；- 细胞膜：位于细胞壁内侧，具有控制物质进出的功能；- 细胞质：位于细胞膜和细胞核之间，含有各种细胞器，负责细胞的生命活动；- 细胞核：位于细胞中央，含有遗传物质，负责细胞的遗传信息传递；- 液泡：位于细胞质内，具有储存水分、营养物质等功能；- 叶绿体：位于细胞质内，负责光合作用。
2. 动物细胞结构：- 细胞膜：位于细胞最外层，具有控制物质进出的功能；- 细胞质：位于细胞膜和细胞核之间，含有各种细胞器，负责细胞的生命活动；- 细胞核：位于细胞中央，含有遗传物质，负责细胞的遗传信息传递；- 无细胞壁、液泡和叶绿体。
3. 植物细胞和动物细胞结构差异：- 植物细胞具有细胞壁、液泡和叶绿体，而动物细胞没有；- 植物细胞壁由纤维素和果胶组成，具有支持和保护作用，而动物细胞膜较为柔软；- 植物细胞液泡较大，储存水分和营养物质，而动物细胞液泡较小；- 植物细胞叶绿体负责光合作用，而动物细胞无叶绿体。
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荧光素
细胞免疫荧光
在碱性条件下，FITC的异硫氰酸基在水溶液中不免疫球蛋白的自由氨基经 碳酰胺化而形成硫碳氨基键,成为标记荧光免疫球蛋白，即荧光抗体。
一个IgG分子最多能标记15-20个FITC分子
荧光素
细胞免疫荧光
细胞免疫荧光
荧光染料
DAPI (4',6-diamidino-2-phenylindole)
细胞爬片
玻片处理 泡酸+清洗+晾干+高压灭菌+烘干
多聚赖氨酸/层黏蛋白处理 细胞数量
单层细胞密度达到70%左右 细胞铺板
细胞的固定
注意事项
【固定的定义】 将新鲜的活体组织或细胞，立即加入固定液中，以此使细胞保持原有形态、结构 的一种方法。
【固定的意义】
1、组织和细胞的蛋白质凝固，终止内源性或外源性酶反应，原位保存抗原，避免 抗原失活或弥散。 2、停止细胞中的生化反应，固定其中的各种生化物质状态，防止细胞死亡后出现 自溶分解。 3、使细胞中蛋白质、脂肪、糖、酶等成分转变为不溶性物质，以保持生前形态。 4、固定细胞形态，防止其变形或破裂。 5、使组织内各种物质产生不同的折光率，便于观察和鉴定。 6、使不同组织成分对染料有不同的亲和力，便于染色。
细胞免疫荧光原理示意图
激光源
丌同颜色的 荧光
抗 体
抗原
细
胞
特异荧光的位置及强度
荧光素
抗原的表达位置及水平
分类
细胞免疫荧光
根据实验目的分为:
目的抗原数目
难 度
单染
越
大
， 使
双染
用
越
少
多染
分类
细胞免疫荧光
根据实验方法分为两类:
荧光素标记位置
直接免疫荧光
间接免疫荧光
实验原理示意图
比较
细胞免疫荧光
细胞转染
步骤
C液 无抗生物素
之： 细胞培养与细胞生物学常用技术学习班
细胞转染
转染质粒
pcDNA3.1 （-） 空载体 pcDNA3.1（ -） -P53 重组载体
免疫荧光
pEGFP-C1 空载体
转染效率检测
实验原理
细胞免疫荧光
利用抗原与抗体特异性结合原理及特殊的荧 光素标记技术，对细胞内的特定抗原进行定位、 定量分析的一门技术。
铺上层凝胶
克隆形成 （2~3周）
之： 细胞培养与细胞生物学常用技术学习班
细胞转染
原理
是将外源 DNA 或 RNA 导入真核细胞的 技术。常用的脂质体 转染法，是利用带正 电的脂质体与核酸带 负电的磷酸基团形成 复合物， 沉积于细胞 表面， 通过内吞作用 进入细胞。
之： 细胞培养与细胞生物学常用技术学习班
细胞通透
常用通透剂及其原理
通透剂
Triton X-100化学名称为聚乙二醇辛基苯基醚，是一种去污剂。在免疫组织 化学（>10um厚切片）和免疫细胞化学中一般用Triton X-100 作为细胞通 透剂，在膜上打孔。
作用原理：Triton X-100 可以溶解细胞膜、细胞核膜、细胞器膜上的脂质 而使抗体及大分子结构的物质进入胞浆和胞核内，故在细胞免疫组化时尤为 推荐使用，这样抗体就能顺利进入胞内不相应抗原结合。
一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料
最常用的细胞核荧光染料
细胞免疫荧光实验步骤
细胞爬片（多聚赖氨酸处理，生长密度70-80%） 细胞固定（合适的固定液，如4%甲醛溶液等） 细胞膜穿透（ Triton X-100 等） 封闭（1%BSA-PBS等） 一抗孵育 荧光二抗孵育 核复染（DAPI染色） 封片荧光显微镜拍照
分类
优点
缺点
应用
简单易行 直接免疫荧光
特异性高
快速方便
灵敏度低 成本高
多重荧光标记实验 大量样本的常规检测
灵敏度高 间接免疫荧光
成本低
步骤相对繁琐
应用广泛
难点
多重荧光标记实验
（1）单荧光素标记+荧光蛋白（GFP等）
（2）直接标记法：不同荧光素标记的一 抗
（3）间接标记法：不同种属来源的一抗 +不同荧光素标记的二抗
之： 细胞培养与细胞生物学常用技术学习班 细胞实验讲解
讲解人：程小艳 20151205
之： 细胞培养与细胞生物学常用技术学习班
细胞 活力测定
细胞
细胞
克隆形成
细胞
划痕
接技种术
细胞 转染
细胞 免疫荧光
之： 细胞培养与细胞生物学常用技术学习班
细胞接种
按照预实验摸索好的细胞数目，将处 于对数生长期的细胞均匀种入细胞培养板 中的过程。
细胞培养 及收集
细胞铺板
细胞计数 及稀释
相同点
之： 细胞培养与细胞生物学常用技术学习班
细胞接种
细胞技术 接种数目 细胞培养板 接种体积 细胞终浓度 （个/孔） /细胞培养皿 (ml) （个/ml）
细胞活力 2000
96孔板
0.1
测定
细胞划痕 60万
30mm直径
1
细胞培养皿
细胞转染 40万
6孔板
2
细胞免疫
常用浓度：0.2%-0.5%
A490检测
之： 细胞培养与细胞生物学常用技术学习班
细胞接种
取出HEPG2细胞 吸弃培养基
PBS缓冲液清洗（两次） 加入胰酶消化细胞
吸弃胰酶 加入培养基重悬细胞
离心收集细胞
之： 细胞培养与细胞生物学常用技术学习班
细胞划痕愈合
原理
在融合的单层细胞上人为制造一个空白区 域（称为“划痕”），记录划痕两边的细胞进 入空白区域使“划痕”愈合的过程，以此检测 细胞迁移运动与修复能力的方法。
荧光
细胞克隆 1000
6孔板
1
形成
2×104 6×105 2×105
1×104
异同点
之： 细胞培养与细胞生物学常用技术学习班
细胞活力测定
原理
活细胞
MTT
琥珀酸脱氢酶
甲瓒 （蓝紫色）
A490
ห้องสมุดไป่ตู้
HEPG2细胞增殖检测
之： 细胞培养与细胞生物学常用技术学习班
细胞活力测定
步骤
细胞接种
细胞荷药
加入MTT
加入DMSO
检测肿瘤细胞恶性程度较为准确的标志之一
细胞培养与细胞生物学常用技术学习班之：
软琼脂糖克隆形成
步骤 Soft agar配置 （1.2%&0.7%）
2 ×Medium配置
1.2% Soft agar + 2 × Medium
铺下层凝胶
单细胞悬液制备
0.7% Soft agar + 2 × Medium+单细胞悬液
HFF-1细胞划痕愈合
之： 细胞培养与细胞生物学常用技术学习班
细胞划痕愈合
步骤
细胞接种
细胞划痕
用10 uL移液枪枪头在单 层细胞上呈“一”字划痕
拍照记录划痕 愈合过程
数据分析
细胞培养与细胞生物学常用技术学习班之：
软琼脂糖克隆形成
原理 将细胞消化成单细
胞，并利用上下两层软 琼脂糖凝胶模拟体内细 胞所处的半固体状态， 检测细胞在处于不贴壁 及单细胞状态时的克隆 形成能力。