肌酸激酶测定SOP_CK临床意义_检验科生化项目SOP
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5.2校准条件
在室内质控失控、更换试剂批号、更换仪器主要配件或进行大保养后均需校准。无特殊情况校准周期为3个月。
5.3校准程序
主屏幕按F5:PROCESS CTRL→F1:CALIBRATION,按enter→F2:SET-UP＆RUN,按项目键选择所需要
肌酸激酶测定
文件编号：
版本号：
页码：第页共页
肌酸激酶测定
文件编Biblioteka Baidu：
版本号：
页码：第页共页
1检测原理
CK催化磷酸从磷酸肌酸到腺苷二磷酸(ADP)的转磷酸过程，产生腺苷三磷酸(ATP)。这种方式形成的ATP用于在己糖激酶(HK)催化的反应中使葡萄糖磷酸化，生成的葡萄糖-6-磷酸盐由葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G-6-PDH)氧化，同时还原磷酸烟碱腺嘌呤二核苷酸(NADP)。形成的NADPH引起的在340 nm处发生的吸光度变化，与CK活性直接成比例，因为其他反应物以不限制比率的数量存在，可以使用双波长(340, 405 nm)技术来测量。
校准的项目名称METHOD，选中相应试剂批号LOT，输入操作者姓名Operator、校准液货号Calibrator
Product和批号Lot，以及最低值校准液在样品架上的位置Start at Position，最后把校准液各个水
平的值按照由低到高的顺序输到对应位置，按F4：ASSIGN CUPS指定样品杯，校准液按顺序排列在样品架上，按F7：LOAD/RUN→F4：RUN或“RUN”运行键运行校准程序。
但在肌肉损伤或疾病，甚至肌注某些药物如青霉素、氯丙嗪等以及电复律、心导管检查时也可引起肌酸激酶活性升高。故肌酸激酶诊断急性心肌梗死阳性率虽高达98%，但特异性不高，约为85%，如有可能同时作肌酸激酶同工酶检查会更好。
杜兴肌营养不良症患者血中肌酸激酶往往明显增高，甚至可高出参考值上限的50倍，而后随病程延长而逐步下降。此病是和性染色体有关的遗传病，在无症状的女性、隐性携带者中约有75%肌酸激酶值也高于正常。其他类型的原发性肌萎缩患者血中肌酸激酶也常有不同程度升高，此可用于区别继发性肌病如神经型或废用性肌萎缩，后者肌酸激酶活性往往正常。
4.4.2双向条形码标本分离血清后直接运行仪器。
4.4.3运行：输入完毕后按F3:LOAD LIST，确认样品已经装载在样本盘上，按Run键，仪器开始进行样品检测。
4.4.4检验后标本保存
标本检验完成后用采血管原盖盖紧，保存于标本冷藏库内，按日期放好，保存期为7天。
5校准程序
5.1校准品准备和储存
直接使用，2~8℃保存。
6质量控制程序
6.1质控品准备和储存
质控品为液体，可以直接使用。原包装质控品-10~-70℃可保存到瓶身有效期，未开启2~8℃可保存90d,开启后2~8℃可保存30d。
6.2质控水平和分析批长度
每24小至少进行一批，每批2个浓度水平。
6.3质控操作程序
与4.4标本检测步骤相同，只需要按F4:NEXT PRIORITY将ROUTINE修改成QC状态。
10参考文献
肌酸激酶测定
文件编号：
版本号：
页码：第页共页
[1]西门子医学诊断产品（上海）有限公司肌酸激酶（CK）测定试剂说明书。
[2]叶应妩，王毓三，申子瑜.全国临床检验操作规程.第3版.南京：东南大学出版社，2006：421~423。
4.1检测过程流程
签收样品→离心→上机检测→审核报告→签发报告→标本保存。
4.2样品签收
严格按照标本接收程序签收标本。
4.3标本处理
以2500~3000r/min,离心6~10min，分离血清上机测定。如不能及时检测，分离血清于2-8℃保存。
4.4标本检测
4.4.1手工编排测试项目：样品按编号装入样品架，主屏幕按F1:ENTER DATA，在Position处输入样品所在样品架字母及所在位置号，按enter，在Patient Name处选择性输入病人名字，按enter，在Sample No处输入样品号，按enter，在Tests处使用检验键或检验组合键选择相应项目，根据需要选择相应的按键改变Mode（按F7:MEXT MODE选择样品管类型）、Priority（按F4:NEXT PRIORITY选择样品的处理模式）、Fluid（按F8:NEXT FLUID选择标本类型）。
3.1.2试剂准备
直接使用。
3.1.3试剂保存
试剂2~8℃保存，有效期内稳定。
肌酸激酶测定
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版本号：
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3.2质控品
美国BIORAD液体多项质控品。
3.3校准品
西门子校准品。
3.4仪器
SIEMENS DIMENSION Xpand Plus/RxL Max全自动生化分析系统。
4操作程序
磷酸肌酸+ ADPCK肌酸+ ATP
Mg++，DTE，EDTA
ATP +葡萄糖HKADP +葡萄糖-6-磷酸盐
Mg++
葡萄糖-6-磷酸盐+ NADP+G-6-PDH6-磷酸葡萄糖内酯+NADPH+(H+)
2标本采集与处理
2.1采血方法
空腹采不抗凝静脉血2~3ml。
2.2标本保存
采集后应及时送检。如果不能及时送检，应将标本及时离心后分离血清，避光置冰箱保存。室温4h、4℃8~12h、冰冻3~4天能维持活性不变。
2.3注意事项
推荐选用血清。酶活性的高低易受标本采集时间的影响较大。避免溶血、脂血、黄疸。
3试剂和设备
3.1试剂
采用西门子医学诊断产品（上海）有限公司提供的试剂盒。
3.1.1试剂组成
试剂船1~6孔为己糖激酶4500 U/L，G-6-PDH 2800 U/L，ADP1.88 Mm，磷酸肌酸18.1 mM，葡萄糖11.65 mM，NADP2.88 mM，缓冲液，AK抑制物，激活剂物，片剂。
7性能参数
本法线性范围为0~800U/L,对于超过测定线性范围的结果，用酶稀释液对标本进行稀释，输入稀释因子后再重新检测。
8生物参考区间
男性：35~232U/L
女性：21~215U/L
9临床意义
肌酸激酶是当今世界上测定次数较多的酶，特别对诊断急性心肌梗死有较高价值。和AST、LDH相比，肌酸激酶最先升高，峰值可达参考上限10余倍，敏感度高。因肝中几乎无肌酸激酶，肝胆疾病时，AST、ALT和LDH常升高而肌酸激酶正常，说明其特异性强。此外，溶血标本对此酶测定干扰远小于AST和LDH。
在室内质控失控、更换试剂批号、更换仪器主要配件或进行大保养后均需校准。无特殊情况校准周期为3个月。
5.3校准程序
主屏幕按F5:PROCESS CTRL→F1:CALIBRATION,按enter→F2:SET-UP＆RUN,按项目键选择所需要
肌酸激酶测定
文件编号：
版本号：
页码：第页共页
肌酸激酶测定
文件编Biblioteka Baidu：
版本号：
页码：第页共页
1检测原理
CK催化磷酸从磷酸肌酸到腺苷二磷酸(ADP)的转磷酸过程，产生腺苷三磷酸(ATP)。这种方式形成的ATP用于在己糖激酶(HK)催化的反应中使葡萄糖磷酸化，生成的葡萄糖-6-磷酸盐由葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G-6-PDH)氧化，同时还原磷酸烟碱腺嘌呤二核苷酸(NADP)。形成的NADPH引起的在340 nm处发生的吸光度变化，与CK活性直接成比例，因为其他反应物以不限制比率的数量存在，可以使用双波长(340, 405 nm)技术来测量。
校准的项目名称METHOD，选中相应试剂批号LOT，输入操作者姓名Operator、校准液货号Calibrator
Product和批号Lot，以及最低值校准液在样品架上的位置Start at Position，最后把校准液各个水
平的值按照由低到高的顺序输到对应位置，按F4：ASSIGN CUPS指定样品杯，校准液按顺序排列在样品架上，按F7：LOAD/RUN→F4：RUN或“RUN”运行键运行校准程序。
但在肌肉损伤或疾病，甚至肌注某些药物如青霉素、氯丙嗪等以及电复律、心导管检查时也可引起肌酸激酶活性升高。故肌酸激酶诊断急性心肌梗死阳性率虽高达98%，但特异性不高，约为85%，如有可能同时作肌酸激酶同工酶检查会更好。
杜兴肌营养不良症患者血中肌酸激酶往往明显增高，甚至可高出参考值上限的50倍，而后随病程延长而逐步下降。此病是和性染色体有关的遗传病，在无症状的女性、隐性携带者中约有75%肌酸激酶值也高于正常。其他类型的原发性肌萎缩患者血中肌酸激酶也常有不同程度升高，此可用于区别继发性肌病如神经型或废用性肌萎缩，后者肌酸激酶活性往往正常。
4.4.2双向条形码标本分离血清后直接运行仪器。
4.4.3运行：输入完毕后按F3:LOAD LIST，确认样品已经装载在样本盘上，按Run键，仪器开始进行样品检测。
4.4.4检验后标本保存
标本检验完成后用采血管原盖盖紧，保存于标本冷藏库内，按日期放好，保存期为7天。
5校准程序
5.1校准品准备和储存
直接使用，2~8℃保存。
6质量控制程序
6.1质控品准备和储存
质控品为液体，可以直接使用。原包装质控品-10~-70℃可保存到瓶身有效期，未开启2~8℃可保存90d,开启后2~8℃可保存30d。
6.2质控水平和分析批长度
每24小至少进行一批，每批2个浓度水平。
6.3质控操作程序
与4.4标本检测步骤相同，只需要按F4:NEXT PRIORITY将ROUTINE修改成QC状态。
10参考文献
肌酸激酶测定
文件编号：
版本号：
页码：第页共页
[1]西门子医学诊断产品（上海）有限公司肌酸激酶（CK）测定试剂说明书。
[2]叶应妩，王毓三，申子瑜.全国临床检验操作规程.第3版.南京：东南大学出版社，2006：421~423。
4.1检测过程流程
签收样品→离心→上机检测→审核报告→签发报告→标本保存。
4.2样品签收
严格按照标本接收程序签收标本。
4.3标本处理
以2500~3000r/min,离心6~10min，分离血清上机测定。如不能及时检测，分离血清于2-8℃保存。
4.4标本检测
4.4.1手工编排测试项目：样品按编号装入样品架，主屏幕按F1:ENTER DATA，在Position处输入样品所在样品架字母及所在位置号，按enter，在Patient Name处选择性输入病人名字，按enter，在Sample No处输入样品号，按enter，在Tests处使用检验键或检验组合键选择相应项目，根据需要选择相应的按键改变Mode（按F7:MEXT MODE选择样品管类型）、Priority（按F4:NEXT PRIORITY选择样品的处理模式）、Fluid（按F8:NEXT FLUID选择标本类型）。
3.1.2试剂准备
直接使用。
3.1.3试剂保存
试剂2~8℃保存，有效期内稳定。
肌酸激酶测定
文件编号：
版本号：
页码：第页共页
3.2质控品
美国BIORAD液体多项质控品。
3.3校准品
西门子校准品。
3.4仪器
SIEMENS DIMENSION Xpand Plus/RxL Max全自动生化分析系统。
4操作程序
磷酸肌酸+ ADPCK肌酸+ ATP
Mg++，DTE，EDTA
ATP +葡萄糖HKADP +葡萄糖-6-磷酸盐
Mg++
葡萄糖-6-磷酸盐+ NADP+G-6-PDH6-磷酸葡萄糖内酯+NADPH+(H+)
2标本采集与处理
2.1采血方法
空腹采不抗凝静脉血2~3ml。
2.2标本保存
采集后应及时送检。如果不能及时送检，应将标本及时离心后分离血清，避光置冰箱保存。室温4h、4℃8~12h、冰冻3~4天能维持活性不变。
2.3注意事项
推荐选用血清。酶活性的高低易受标本采集时间的影响较大。避免溶血、脂血、黄疸。
3试剂和设备
3.1试剂
采用西门子医学诊断产品（上海）有限公司提供的试剂盒。
3.1.1试剂组成
试剂船1~6孔为己糖激酶4500 U/L，G-6-PDH 2800 U/L，ADP1.88 Mm，磷酸肌酸18.1 mM，葡萄糖11.65 mM，NADP2.88 mM，缓冲液，AK抑制物，激活剂物，片剂。
7性能参数
本法线性范围为0~800U/L,对于超过测定线性范围的结果，用酶稀释液对标本进行稀释，输入稀释因子后再重新检测。
8生物参考区间
男性：35~232U/L
女性：21~215U/L
9临床意义
肌酸激酶是当今世界上测定次数较多的酶，特别对诊断急性心肌梗死有较高价值。和AST、LDH相比，肌酸激酶最先升高，峰值可达参考上限10余倍，敏感度高。因肝中几乎无肌酸激酶，肝胆疾病时，AST、ALT和LDH常升高而肌酸激酶正常，说明其特异性强。此外，溶血标本对此酶测定干扰远小于AST和LDH。