SSI高效液相的标准操作规程
高效液相操作规程
高效液相色谱操作规程（配示差折光检测器RID）一、开机前准备1.检查桌面是否清洁、整齐。
2.检查设备是否清洁，连接管线是否正常，色谱柱是否需要更换。
3.检查电源线有无破损。
4.接通电源，检查插座上各插孔的指示灯是否显示正常。
5.准备好超声过的流动相和流路冲洗溶剂。
二、开机1.运行检查，打开仪器各部件开关，待机器自检，核实无异常。
2.打开电脑，并打开软件。
（连接仪器与电脑）3.设定柱温箱温度一般为30℃。
4.拧松脱气阀（大约1.5圈左右），设定purge程序约5min,停止后拧紧阀门。
5.执行自动进样器清洗的三个命令（灌注注射器/Prime Syrings、清洗缓冲环/Wash Buf fer Loop和清洗真外壁/Wash Needle Externally）,并将进样阀切换至lnject的状态进行平衡（WPS带T的型号才可进行样品盘温度设置）6.打开示差折光检测器，设定purge程序约5min，停止后用配置好的有机相水溶液平衡30min。
7.监测基线，待平衡后开始测样分析。
三、关机1.关闭仪器各部件上的电源开关,并关闭电脑。
2.拔掉机器电源插头四、安全及操作注意事项1.流动相冲洗用的水，必须是重蒸水或2次蒸馏水，并用微孔滤膜过滤，而且要定期更换，防止长细菌堵塞仪器管路。
建议每周至少更换两次。
2.按比例配置流动相于一个泵中，并在测样时只使用一个泵中的流动相。
3.流动相中有盐或酸时，在流动相冲洗前后一定要用水冲洗流路，防止柱效下降、堵塞或柱塌陷。
4.设置梯度时维持同一梯度浓度至结束。
5.示差折光检测器对温度敏感，维持室内在一定温度。
6.仪器长期不用时，应用甲醇冲洗各流路。
高效液相操作流程简略
高效液相操作流程简略下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
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高效液相色谱测定法标准操作规程
标准操作规程1目的：建立高效液相色谱测定法操作规程，以使检验操作规化。
2适用围：适用于高效液相色谱测定法检验操作全过程。
3责任：QC人员对本SOP实施负责。
4容高效液相色谱法系采用高压输液泵将规定的流动相泵入装有填充剂的色谱柱，对供试品进行分离测定的色谱方法。
注入的供试品，由流动相带入色谱柱，各组分在柱被分离，并进入检测器检测，由积分仪或数据处理系统记录和处理色谱信号。
4.1.对仪器的一般要求和色谱条件高效液相色谱仪由高压输液泵、进样器、色谱柱、检测器、积分仪或数据处理系统组成。
色谱柱径一般为3.9~4.6mm，填充剂粒径为3~10μm。
超高效液相色谱仪是适应小粒径（约2μm）填充剂的耐超高压、小进样量、低死体积、高灵敏度检测的高效液相色谱仪。
4.1.1.色谱柱反相色谱柱：以键合非极性基团的载体为填充剂填充而成的色谱柱。
常见的载体有硅胶、聚合物复合硅胶和聚合物等；常用的填充剂有十八烷基硅烷键合硅胶、辛基硅烷键合硅胶和苯基键合硅胶等。
正相色谱柱：用硅胶填充剂，或键合极性基团的硅胶填充而成的色谱柱。
常用的填充剂有硅胶、氨基键合硅胶和氰基键合硅胶等。
氨基键合硅胶和氰基键合硅胶也可用作反相色谱。
离子交换色谱柱：用离子交换填充剂填充而成的色谱柱。
有阳离子交换色谱柱和阴离子交换色谱柱。
手性分离色谱柱：用手性填充剂填充而成的色谱柱。
色谱柱的径与长度，填充剂的形状、粒径与粒径分布、孔径、表面积、键合基团的表面覆盖度、载体表面基团残留量，填充的致密与均匀程度等均影响色谱柱的性能，应根据被分离物质的性质来选择合适的色谱柱。
温度会影响分离效果，品种正文中未指明色谱柱温度时系指室温，应注意室温变化的影响。
为改善分离效果可适当提高色谱柱的温度，但一般不宜超过60℃。
残余硅羟基未封闭的硅胶色谱柱，流动相pH值一般应在 2〜8之间。
残余硅羟基已封闭的硅胶、聚合物复合硅胶或聚合物色谱柱可耐受更广泛pH值的流动相，适合于pH 值小于2或大于8 的流动相。
高效液相色谱仪操作规程
高效液相色谱仪操作规程1开机先打开电脑，再依次接通2695分离单元、检测器和打印机的电源（注：在打开2424蒸发光散射检测器电源之前，先开启气体供应）。
接通2695分离单元后，约20秒仪器自检，约1分钟后，显示主屏幕，此时继续各部件的初始化，待主屏幕上主标题区出现“Idle”仪器自检通过，进入待命状态。
2溶剂管理系统的准备2.1流动相的脱气确认所有溶剂管路都充满溶剂，按[Menu/Status]，进入“Status（1）”屏幕，光标选“Degasser”按[Enter]显示选项屏幕，Mode为“on”。
2.2启动溶剂管理系统2.2.1干启动当溶剂的管路是干的或是需要更换溶剂时，在“Status（1）”屏幕下，按[Direct Function]，光标选中“Dry Prime”，按[Enter]，显示“Dry Prime”屏幕，按欲启动的溶剂管路的屏幕键，如[Open A]，光标选“Duration”，按数字键输入时间（一般为5分钟），按[Continue]，待限定时间结束后，重复操作，使实验所需的各溶剂管路均启动、排气并充满流动相。
2.2.2湿启动在“Status（1）”屏幕下，光标选“Composition”中欲使用的流动相，输入100%，按[Direct Function]，光标选“Wet prime”，按“Enter”，显示Wet prime”屏幕，输入流速和时间（5ml/min和5min）按[OK]。
待限定时间结束后，对每种流动相重复操作。
3样品管理系统的准备A管带黄色标记、B管带蓝色标记号、C管带红色标记、D管带绿色标记，绿色管为冲洗泵头用，白色管为冲洗进样器用，所用溶剂均为甲醇：水=50%（v/v）。
将样品瓶插到样品盘合适的位置，打开样品仓门，显示“Door is Open”屏幕，装入样品盘，按[Next]，直至所有样品盘装毕，关仓门。
4编辑分析方法及执行样品分析表4.1创建项目双击电脑桌面图标“Empower”，用户名输入“system”密码输入“manager”选中操作项目和色谱系统→确定。
高效液相色谱使用详细操作步骤
高效液相色谱使用操作步骤一、泵操作面板PUMP：运行键 START：梯度运行键 PURGE：快冲键RESET：复位键 HOLD：程序暂停键 STOP：泵停止键TIME：程序开启键 FLOW：流速： RSVR： A B C PROG：程序 DEL：删除程序 PMAX：最大压力PMIN：最小压力 ENTER：确定TIME 0 FLOW ENTER （设置流速）TIME 0 RSVR ABC ENTER （设置溶剂）TIME 0 PROG ENTER （设置程序）TIME 0 % A 30 ENTER （设置比例）TIME 0 % B 30 ENTER （设置比例）TIME 0 % C 40 ENTER （设置比例）DEL PROG 1 ENTER （删除程序）1.对于梯度泵设定举例如下：(人参皂苷的梯度)TIME 0 PROG 1 ENTERTIME 0 % A 81 ENTERTIME 15 % A 81 ENTERTIME 60 % A 65 ENTERTIME 65 % A 0 ENTERTIME 80 % A 0 ENTERTIME 81 % A 81 ENTERTIME 100 % A 81 ENTER因为A+B之和始终是100%，所以B相就不用设了。
7．对于对照品在这种条件下只要对照品的峰全部出完后按下RESET键等20分钟即可进第二针进完针后按START键运行梯度程序。
但是对样品来说一定要等峰出完后再按下RESET键等基线基走直才可进下一针。
二、检测器操作面板RESET：复位键 A/Z：调零键 WL：调波长 ENTER：确定三、实验前的准备工作1、实验前流动相提前配好过滤脱气。
2、置换流动相时把泵的滤头从原来的流动相中换到新的流动相中滤头要轻拿轻放。
3、液路排气顺序：首先打开排气阀—按PURGE键进行排气结束后—按STOP键停止—再拧紧排气阀—按PUMP 键让泵运行。
4、打开检测器首先观察右上角氘灯指示灯确认氘灯是否点亮，按WL键调好实验波长后按A/Z键调零。
高效液相色谱仪操作规程
高效液相色谱仪操作规程高效液相色谱仪（HPLC）是一种重要的分析仪器，广泛应用于化学、生命科学、环境监测等领域。
为了保证色谱仪的正常运行和准确分析结果，需要遵守以下操作规程：1. 准备工作a. 首先，确保色谱仪及其附件的电源已接通，并确认仪器处于正常工作状态。
b. 检查溶剂桶内的溶剂是否充足并无杂质，并确认管路连接正常。
c. 检查流动相液位是否正常，并调整泵的流速和梯度程序参数。
2. 样品制备和准备a. 样品应充分溶解并过滤净化，以避免样品中的杂质对色谱分离产生干扰。
b. 选择合适的进样方式（自动或手动），并根据进样方式调整进样器的参数。
3. 进样器操作a. 将样品注射器插入进样口，并注意不要损坏色谱柱。
b. 设置进样体积和进样速度等参数，并进行一次空白进样以清洗进样器。
4. 色谱柱准备a. 定期检查色谱柱是否损坏，并根据需要更换。
b. 根据实验需要选择合适的色谱柱，并注意记录色谱柱的批号和使用次数。
5. 柱温控制a. 根据分析需要选择合适的柱温，并使用温度控制系统保持恒定。
b. 注意避免温度突变和波动，以保证分析结果的准确性和重复性。
6. 检测器操作a. 根据需要选择合适的检测器，如紫外-可见光检测器（UV-Vis）、荧光检测器、电导检测器等。
b. 设置检测器的参数，如波长、增益和灵敏度，并进行基线校准。
7. 数据采集与处理a. 启动数据采集系统，并设置采集参数，如采样率、数据类型和运行时间等。
b. 对采集到的数据进行处理和分析，如峰识别、定量分析和峰面积计算。
8. 清洗和维护a. 实验结束后，关闭色谱柱和进样器的阀门，并用溶剂清洗色谱柱和进样器，以防止堵塞和降低杂质残留。
b. 清洗完成后，注意关闭色谱仪的电源，并按照要求对色谱柱和进样器进行维护和保养。
总结：高效液相色谱仪的操作规程包括准备工作、样品制备、进样器操作、色谱柱准备、柱温控制、检测器操作、数据采集与处理以及清洗与维护等。
遵守这些规程可以确保色谱仪的正常运行和准确分析结果，提高实验效率。
SSI高效液相的标准操作规程
SSI高效液相的标准操作规程适用于所有使用此仪器者1.流动相的处理1。
1过滤溶剂溶剂在使用前一定要用0.5μm的过滤器过滤,如果使用固体化学试剂（缓冲盐）配制流动相，过滤特别重要,不能让固体微粒污染泵，阻塞进样器和柱头过滤片.本实验室有水溶性和有机性两种过滤膜供选择，过滤水溶性流动相时(如甲醇/水)，先用1—2ml甲醇润湿过滤膜,有助于快速抽滤.1.2保持储液瓶的清洁用普通溶剂瓶作流动相储液器应不定期废弃瓶子，最后一次应用HPLC级的水或溶剂清洗,不能在清洗过程中留下污迹。
1.3保证溶剂的质量一定要用HPLC级的溶剂，水也应达到HPLC级，同样也要使用高纯度的缓冲盐.1.4 故障及解决方法1。
4。
1 流动相脱气不充分流动相受热，或者流动相不同组分混合时会有气体产生，气泡进入泵内引起压力波动,增加噪音，色谱图上出现毛刺。
可试用下列方法解决问题:流动相再脱气；采用更有效的脱气方法或两种方法配合使用；改系统内混合为系统外预混合. 1。
4.2 流动相供给不畅流动相用完，管道中吸入气体引起泵压力不稳.应经常观察储液器中流动相的量，加足流动相保证所有的样品分析完毕。
输液管上装溶剂滤头，既可使输液管沉至瓶底,又可过滤流动相,储液器盖上留一小孔正好夹住进液管，使其不能上下移动。
溶剂滤头阻塞引起管道和泵腔空化，压力不稳。
溶剂滤头被微粒所阻塞或长霉,去掉溶剂滤头后如果系统运转正常，说明已找出问题，换上新的溶剂滤头则可。
有时候换上新的溶剂滤头仍然不畅，那就需要查查流动相的制备过程，或者换大孔径的溶剂滤头.不管如何，流动相都需要重新过滤。
流速过高、阻力大，造成空化现象，这是由于溶剂滤头孔径、管道内径、流速和溶剂黏度等引起的.如果流速大于10ml/min,常会出现这种现象。
使用下列方法解决：(1）使用低流速;（2）换大孔径的溶剂滤头;（3）增加进液管道内径；(4）抬高或加压储液器；（5）不用溶剂滤头，但流动相一定要先过滤；（6）储液器盖子太紧，在储液器内形成真空，打出的流动相不连续。
高效液相色谱法的标准操作规程
高效液相色谱法的标准操作规程1 定义及概述：1.1 高效液相色谱法是一种现代液体色谱法，其基本方法是将具不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶液作为流动相，用高压输液泵将流动相注入装有填充剂的色谱柱，注入的供试品被流动相带入柱内进行分离后，各成分先后进入检测器，用记录仪或数据处理装置记录色谱图或进行数据处理，得到测定结果。
由于应用各种性质的微粒填料和加压的液体流动相，本法具有分离性能高、分析速度快的特点。
1.2 高效液相色谱法适用于能在特定填充剂的色谱柱上进行分离的药品的分析测定，特别是多组分药品的测定、杂质检查和大分子物质的测定。
有的药品需要在色谱分离前或后经过衍生化反应，方能进行分离或检测。
常用的色谱柱填充剂有：硅胶，用于正相色谱；化学键合固定相，根据键合的基团不同可用于反相或正相色谱，其中最常用的是十八烷基硅烷（又称ODS）键合硅胶，可用于反相色谱或离子交换色谱；凝胶或玻璃微球等填充剂是有一定孔径的大孔填料，用于排阻色谱。
1.3 高效液相色谱仪基本由泵、进样器、色谱柱、检测器和色谱数据处理组成。
检测器最常用的为可变波长紫外检测器或紫外—可见检测器。
色谱信息的收集和处理常用积分仪或数据工作站进行。
梯度洗脱，可用两台泵或单台泵加比例阀进行程控实现。
2 高效液相色谱仪的使用要求：2.1 按国家技术监督局国家计量检定规程汇编中“实验室液相色谱仪检定规程”的规定作定期检定，应符合规定。
2.2 仪器各部件应能正常工作，管路为无渗漏连结，流路中无堵塞或漏液，在设定的检测器灵敏度条件下，色谱基线噪音和漂移应能满足分析要求。
2.3 具体仪器在使用前应详细参阅各操作说明书。
3 操作前的准备：3.1 流动相的制备：用高纯度的试剂配制流动相，必要时照紫外分光光度法进行溶剂检查，应符合要求；水应为新鲜制备的高纯水。
对规定pH值的流动相，应使用精密pH 计进行调节。
配制好的流动相应通过0.45µm适宜的滤膜滤过，用前脱气。
高效液相色谱法标准操作规程
一、目的：建立高效液相色谱法标准操作规程，确保检验人员正确操作。
二、适用范围：适用于高效液相色谱法的测定。
三、职责：检验员负责本操作规程的执行。
四、正文：1 定义及概述：1.1 高效液相色谱系采用高压输液泵将规定的流动相泵入装有填充剂的色谱柱，对供试品进行分离测定的色谱方法，注入的供试品，由流动相带入色谱柱内，各组分在柱内被分离，并依次进入检测器，由积分仪或数据处理系统和处理色谱信号。
2 仪器与用具：高效液相色谱仪、进样器、电脑、试液瓶（1000ml）。
3 试液与试药：色谱甲醇、超纯水等。
4 对仪器的一般要求和色谱条件。
4.1高效液相色谱仪由高压输液泵、进样器、色谱柱、检测器、积分仪或数据处理系统组成。
色谱柱内径一般为3.9-4.6mm，填充剂粒径为3-10um。
超高效液相色谱仪是适应小粒径（约2um）填充剂的耐超高压、小进样量、低死体积、高灵敏度检测的高效液相色谱仪。
4.2 色谱柱4.2.1反相色谱柱以键合非极性基团的载体为填充剂填充而成的色谱柱。
常见的载体有硅胶、聚合物复合硅胶和聚合物等；常用的填充剂有十八烷基硅烷键合硅胶、辛基硅烷键合硅胶和苯基键合硅胶等。
4.2.2正相色谱柱用硅胶填充剂，或键合极性基团的硅胶填充而成的色谱柱。
常见的填充剂有硅胶、氨基键合硅胶和氰基键合硅胶等。
氨基键合硅胶和氰基键合硅胶也可用作反相色谱。
4.2.3离子交换色谱柱用离子交换填充剂填充而成的色谱柱。
有阳离子交换色谱柱和阴离子交换色谱柱。
4.2.4手性分离色谱柱用手性填充剂填充而成的色谱柱。
4.2.5色谱柱的内径与长度，填充剂的形状、粒径与粒径分布、孔径、表面积、键合基团的表面覆盖度、载体表面基团残留量，填充的致密及均匀程度等均影响色谱柱的性能，应根据被分离物质的性质来选择合适的色谱柱。
4.2.6温度会影响分离效果，品种正文中未指明色谱柱温度时系指室温，应注意室温变化的影响。
为改善分离效果，可适当提高色谱柱温度，但一般不宜超过60℃。
高效液相色谱仪操作规程
高效液相色谱仪操作规程
《高效液相色谱仪操作规程》
一、实验目的
本实验旨在通过高效液相色谱仪分析样品，准确测定目标化合物的含量，并学习高效液相色谱仪的操作方法和技巧。
二、实验设备
1. 高效液相色谱仪
2. 注射器
3. 色谱柱
4. 移液管
5. 色谱仪软件
三、操作步骤
1. 打开高效液相色谱仪的电源并进行系统初始化，启动色谱仪软件。
2. 调整流速，进样量等参数，使得实验条件符合要求。
3. 将样品通过移液管注入色谱柱中，注意避免样品泡沫和气泡的产生。
4. 设置色谱条件，如梯度洗脱，流速等，启动色谱分析。
5. 记录实验数据和结果，并进行数据处理和分析。
6. 清洗色谱仪，保持设备清洁。
四、实验注意事项
1. 在操作色谱仪时，要严格按照操作步骤进行，严禁随意更改参数。
2. 在进行样品进样时，要小心操作，避免产生气泡和样品泡沫。
3. 在进行色谱分析时，注意梯度洗脱条件的设置，保证分析结果准确。
4. 在实验结束后，及时清洗色谱仪，保持设备干净。
五、实验结果
根据实验数据和结果，可以得出目标化合物的含量和纯度，并进行结果的解释和分析。
通过《高效液相色谱仪操作规程》的学习，使我们更加熟悉高效液相色谱仪的操作方法和技巧，能够准确进行样品分析，为科研工作的开展提供了重要的技术支持。
高效液相色谱法操作规程与注意事项
高效液相色谱法操作规程与注意事项1.程序1.1.仪器及性能要求：所用的仪器为高效液相色谱仪，由泵系统，进样系统，色谱柱，检测器和色谱数据处理系统组成。
1.1.1.泵系统：HPLC泵系统通过高压力管和设备从溶剂瓶中吸取计量的流动相到柱子中。
现行的泵系统有一元或多元计算机控制的计量泵组成，这些泵可以按照梯度洗脱的要求改变流动相的比例或者是按等度洗脱的要求混合流动相。
1.1.2.进样系统：化合物被溶解在流动相或合适的溶剂中，可以通过手动进样器或定量环，或自动进样器转移到流动相中。
自动进样器由可存放进样瓶的卡盘组成，进样瓶的顶部有一个可以刺入的隔膜，进样针通过这个隔膜将样品转移到一个定量环中然后输送到色谱系统中。
1.1.3.色谱柱：最常用的色谱柱填充剂为化学键合硅胶。
反相色谱系统使用非极性填充剂，以十八烷基硅烷键合硅胶最为常用，辛基硅烷键合硅胶和其他类型的硅烷键合硅胶（如氰基键合硅胶和氨基键合硅胶）也有使用。
正相色谱系统使用极性填充剂，常用的填充剂有硅胶等。
离子交换色谱系统使用离子交换填充剂量；分子排阻色谱系统凝胶或系统高分子多孔微球等；对映异构体的分离通常使用手性柱。
除另有规定外，柱温为室温。
1.1.4.检测器：常用的检测器包括紫外分光检测器，示差折光检测器，二极管阵列检测器。
固定波长检测器在单一波长下运行，典型的波长是254nm，通过低压力的汞灯发射。
可变波长的检测器包含持续的能源，例如氘灯或高压力氙灯，通过单色器或干涉过滤器产生一定波长的单色光。
1.2.系统适用性试验1.2.1.为了确定最终运行系统的有效性，应当进行系统适用性试验。
整个系统可以用以下指标来评价：信噪比、理论塔板数，分离度，重复性，拖尾因子，其指标及计算方法应在相关分析方法中予以规定，如果没有专门的规定，按以下方法进行计算：信噪比：用于评价色谱系统检测微量物质的能力，美国药典的计算公式：S/N=2H/h，H为峰顶到基线的距离，h为基线中噪声峰最大值与最小值的差，该段基线需取≥5倍半峰高宽的距离，如果有可能，目标峰两侧取相等的距离（如图1）。
SSI 24201型高效液相色谱系统标准操作规程
SSI 24201型高效液相色谱系统标准操作规程1．目的规范SSI 24201型高效液相色谱系统的使用和维护。
2．范围本规程适用于SSI 24201型高效液相色谱系统的使用和维护。
3．职责实验室仪器分析员负责SSI 24201型高效液相色谱系统的日常使用和维护。
4．规程4.1 系统组成：本系统由2个SSI Ⅳ溶剂输送泵（A泵和B泵）、Rheodyne 7725i 手动进样阀、UV201型紫外-可见光检测器、CS4000系统控制器、CSchrom Plus （Ver.3.6）色谱工作站和台式电脑等组成。
4.2 准备4.2.1使用前应根据待检样品的检验方法准备所需的流动相，用合适的0.45μm 滤膜过滤，超声脱气20min。
4.2.2 根据待检样品的需要更换合适的色谱柱（柱流速方向应与流动相流向一致）和定量环。
4.2.3 配制样品和标准溶液（也可在平衡系统时配制），用合适的0.45μm滤膜过滤。
4.2.4 检查仪器各部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。
4.3 开机4.3.1接通电源，依次开启A泵、B泵、检测器、系统控制器，待泵和检测器自检结束后，打开电脑显示器、主机。
4.3.2启动CSchrom Plus色谱工作站4.3.2.1确认仪器、系统控制器启动后，并从Windows的任务栏中选择开始 >程序 > CSchrom Plus Chromatography stations> CSchrom以打开CSchrom菜单窗口。
（可以通过桌面上的快捷方式，迅速打开CSchrom主菜单）4.3.2.2 在CSchrom窗口中双击SSI图标。
4.3.2.3 输入用户名和口令，以登录CSchrom。
(一般情况下可以不设置用户访问权限)4.4在Ccontrol下拉菜单中选中instrument status，查看仪器的实际状态。
逆时针旋转A泵Prime/Purge排液阀旋钮1/2圈,打开排液阀，用注射器抽取一定的溶剂，至流动相管路无气泡止；在instrument status窗口中选择SSI PUMP 选项，将两泵的流速调至5ml/min,运行3分钟，停止泵运行。
高效液相色谱法操作规程与注意事项
⾼效液相⾊谱法操作规程与注意事项⾼效液相⾊谱法操作规程与注意事项1.程序1.1.仪器及性能要求：所⽤的仪器为⾼效液相⾊谱仪，由泵系统，进样系统，⾊谱柱，检测器和⾊谱数据处理系统组成。
1.1.1.泵系统：HPLC泵系统通过⾼压⼒管和设备从溶剂瓶中吸取计量的流动相到柱⼦中。
现⾏的泵系统有⼀元或多元计算机控制的计量泵组成，这些泵可以按照梯度洗脱的要求改变流动相的⽐例或者是按等度洗脱的要求混合流动相。
1.1.2.进样系统：化合物被溶解在流动相或合适的溶剂中，可以通过⼿动进样器或定量环，或⾃动进样器转移到流动相中。
⾃动进样器由可存放进样瓶的卡盘组成，进样瓶的顶部有⼀个可以刺⼊的隔膜，进样针通过这个隔膜将样品转移到⼀个定量环中然后输送到⾊谱系统中。
1.1.3.⾊谱柱：最常⽤的⾊谱柱填充剂为化学键合硅胶。
反相⾊谱系统使⽤⾮极性填充剂，以⼗⼋烷基硅烷键合硅胶最为常⽤，⾟基硅烷键合硅胶和其他类型的硅烷键合硅胶（如氰基键合硅胶和氨基键合硅胶）也有使⽤。
正相⾊谱系统使⽤极性填充剂，常⽤的填充剂有硅胶等。
离⼦交换⾊谱系统使⽤离⼦交换填充剂量；分⼦排阻⾊谱系统凝胶或系统⾼分⼦多孔微球等；对映异构体的分离通常使⽤⼿性柱。
除另有规定外，柱温为室温。
1.1.4.检测器：常⽤的检测器包括紫外分光检测器，⽰差折光检测器，⼆极管阵列检测器。
固定波长检测器在单⼀波长下运⾏，典型的波长是254nm，通过低压⼒的汞灯发射。
可变波长的检测器包含持续的能源，例如氘灯或⾼压⼒氙灯，通过单⾊器或⼲涉过滤器产⽣⼀定波长的单⾊光。
1.2.系统适⽤性试验1.2.1.为了确定最终运⾏系统的有效性，应当进⾏系统适⽤性试验。
整个系统可以⽤以下指标来评价：信噪⽐、理论塔板数，分离度，重复性，拖尾因⼦，其指标及计算⽅法应在相关分析⽅法中予以规定，如果没有专门的规定，按以下⽅法进⾏计算：信噪⽐：⽤于评价⾊谱系统检测微量物质的能⼒，美国药典的计算公式：S/N=2H/h，H为峰顶到基线的距离，h为基线中噪声峰最⼤值与最⼩值的差，该段基线需取≥5倍半峰⾼宽的距离，如果有可能，⽬标峰两侧取相等的距离（如图1）。
实验室高效液相操作规程
实验室高效液相操作规程1. 引言高效液相色谱（High Performance Liquid Chromatography, HPLC）是一种常用的分析技术，广泛应用于化学、生物、制药等领域。
为了保证实验室高效液相操作的安全性、准确性和高效性，特制定本操作规程。
2. 实验室设备和试剂准备2.1 设备准备•高效液相色谱仪：确保色谱仪处于正常工作状态，检查流路是否畅通，适时更换柱子。
•注射器：检查注射器是否正常工作，确保灵活性和密封性。
•保留机：检查保留机功能是否正常，适时进行更换和校准。
•应用软件：检查计算机和操作软件的工作状态，保持及时更新。
2.2 试剂准备•溶剂：根据实验要求准备所需的溶剂，确保溶剂的纯度和稳定性。
•标准品：准备所需的标准品，确保标准品的纯度和准确度。
3. 实验前准备工作3.1 实验室环境条件•温度：保持实验室温度在适宜范围内。
•湿度：保持实验室湿度在适宜范围内。
•通风：保持实验室通风畅通，防止有害气体堆积。
3.2 装载样品•样品准备：按照实验要求，准备好样品，并确保样品的质量和准确性。
•注射器装载：使用干净的注射器装载样品，并确保装载准确和不漏液。
3.3 流动相配制•流动相溶液的配制：根据实验要求准备好流动相溶液，并确保溶液的纯度和稳定性。
•流动相装载：使用干净的流动相装载样品，并确保装载准确和不漏液。
3.4 色谱柱装载•色谱柱选择：根据实验要求选择合适的色谱柱，并确保柱子的使用寿命和稳定性。
•色谱柱装载：根据色谱柱的要求进行装载，并确保装载准确和不漏液。
4. 操作步骤4.1 仪器操作1.打开高效液相色谱仪电源，启动仪器并进行自检。
2.打开注射器，设置注射器体积和进样模式，保持灵活性。
3.打开保留机，设置保留时间和流速，保持准确性和稳定性。
4.打开计算机，启动操作软件，登录实验账号。
5.设置分析方法，包括流动相梯度、检测波长、采集时间等参数。
6.进行空白试验，检查仪器是否正常，调整参数使峰形对称且分离度良好。
SSI高效液相色谱仪使用操作规程
SSI高效液相色谱仪使用操作规程一、开机前稳压器电源开关置0FF，高压泵开关置0FF，紫外检测器开关置0FF，电脑电源插座置开关0FF。
二、开机打开稳压器电源开关，待电压指针到220V后，依次打开高压泵开关，紫外检测器开关电脑电源插座开关并打开电脑，预热15分钟后。
在此期间可进行流动相的配制、过滤、脱气以及和主机的连接，排气阀，用专用注射器吸出流动相管路中的气泡，然后关闭阀门。
待紫外检测器自检完成后，在其控制面板上设置你选择的波长（可以是单波长、也可以是双波长）和其它参数。
打开色谱工作站（桌面上LabAlliance中文色谱工作站快捷图标）①在仪器控制面板上选择基本控制项；在基本控制项下选择要启动的泵和泵参数如流速、最小和最大压力（最大压力不得超过5000psi）点击启动即启动泵运行，在泵运行过程中严禁打开排气阀。
②如果在线混合流动相或进行梯度洗脱时，在仪器控制面板上选择时间程序项，在时间程序项下编辑你所设置的时间、流速、四元泵的进液比例、总运行时间。
并选择“运行时不使用基本控制参数而使用本页时间参数”选择项，点击运行首行。
即按你选择的方式进流动相。
③进样阀朝下，点击菜单栏项的操作项的采集基线子菜单，仪器开始采集基线，待基线平稳后可以进样。
④将进样阀旋转朝上，进样，再将进样阀旋转朝下，仪器开始自动记录采样。
当完采样后，可以等待仪器完成规定的采集时间自动停止采样，也可手动停止采样（点击菜单栏项的操作项的手动停止子菜单）。
依次进行每个样本进样。
三、关机实验时要是要计算好时间。
实验结束后。
决不因为晚而不作如下操作。
1、反相柱子：（C18反相柱）①流动相为甲醇、或不同浓度的甲醇时，分析结束后甲醇以1ml/min的流速冲洗30min，同时用20ml甲醇进样状态冲洗进样阈(里外均冲洗)数次。
②使用含酸或盐类的流动相时，分析后用含5%甲醇的水溶液以1ml/min的流速冲洗30min，再换成要使用甲醇流动相以1ml/min的流速冲洗30min③流动相为乙腈、或不同浓度的乙腈时，分析结束后甲醇以1ml/min的流速冲洗30min，同时用20ml甲醇进样状态冲洗进样阈(里外均冲洗)数次。
高效液相色谱仪操作规程
制药GMP认证文件
一目的：制定高效液相色谱仪操作规程，便于操作者正确使用。
二使用范围：使用于高效液相色谱仪的操作。
三责任者：高效液相色谱仪的操作人员。
四正文：
1依次打开泵、检测器、工作站的电源开关。
2流动相经超声脱气后装入流路，设定工作压力、流速，打开排泄阀，清洗 5
分钟。
3开泵送液半小时左右，直至基线稳定，输入有关参数。
4注入样品，同时按下数据采集键，分析开始。
样品峰出完后，数据采集终
止。
5样品测定结束后，用相应液体冲洗流路和色谱柱半小时左右。
6实验结束后，依次关闭工作站、检测器、泵电源开关，切断电源。
如果长
期停用，应将色谱柱拆下装上螺帽，妥善收藏。
7待仪器冷却后罩上仪器罩。
8填写使用记录，清扫仪器室。
高效液相色谱仪操作规程
高效液相色谱仪操作规程
一、所需流动相经过滤、脱气处理后待用。
安装好色谱柱。
二、检查供电电源是否稳定，各部件连接是否牢固。
三、开启仪器检测器和泵电源，待检测器电源指示灯由黄灯变成绿灯后，开启
仪器工作站，即双击桌面上图标LCwin1.0。
四、点击工作站中控制采集，点击开启，待仪器自检通过后，进入仪器控制采
集界面。
五、依次用甲醇、甲醇：水=2：8、流动相进行冲洗色谱系统，每次更换更换溶
液时，均需拧开放空阀，选择菜单泵下的快速冲洗模式，选定合适的时间进行冲洗，赶走泵内气泡。
确定泵内无气泡后，停止冲洗模式，关闭放空阀。
六、更换换上流动相后，按样品分析条件设置选择合适的流速、波长。
待色谱
设备达到平衡状态（柱压稳定，工作站基线稳定，一般需30-40min）后，即可进样分析。
七、分析完毕后，流动相中存在缓冲盐等溶剂，需先用甲醇：水=2:8，进行冲洗
至少30min，再用甲醇冲洗，待柱压降至正常值（依色谱柱而定，即柱压稳定后），停泵。
柱压降为零后关闭检测器和泵的电源。
八、样品分析应做好原始纪录，内容包括分析样品名称、送样时间、分析时间、
样品编号、检测数据、报告结果、报告时间、送样单位、分析员以便统计和查阅。
九、仪器如出现故障，应及时报告专业维修单位或专职维修人员，未经专业维
修培训或未取得维修资格证书的不能进行维修工作。
十、仪器室内严禁吸烟或进行任何无关明火操作。
仪器室内应配备二氧化碳灭
火器，分析人员应能正确操作使用。
高效液相操作规程
高效液相操作规程引言：高效液相（High Performance Liquid Chromatography，HPLC）是一种常用的分析方法，广泛应用于化学、生物、制药等领域。
为了确保实验的准确性和可重复性，制定一份高效液相操作规程是非常重要的。
本文将详细介绍高效液相的操作规程，包括前准备、仪器准备、样品处理、进样和操作注意事项等内容。
一、前准备1. 阅读并理解所要分析的方法标准，熟悉样品处理和操作流程。
2. 检查使用的溶剂和试剂的质量和纯度，确保其符合要求。
3. 检查仪器的操作状态和性能，如流速范围、波长范围、温度控制等。
4. 准备样品处理所需的试剂和溶剂，并按照标准程序进行前处理。
二、仪器准备1. 打开高效液相仪进行预热，确保仪器处于稳定状态。
2. 检查和调节流速，确保流量稳定和准确。
3. 设置检测器的波长和灵敏度，以适应分析物的特性。
4. 检查进样器和柱箱的温度控制设定，确保温度稳定和准确。
三、样品处理1. 根据方法标准，按照要求进行样品前处理，如溶解、过滤、稀释等。
2. 样品处理过程中需要注意防止污染和杂质的进入，避免影响分析结果的准确性。
3. 样品处理完毕后，将样品转移至进样瓶，并封闭好，待进样使用。
四、进样1. 设置进样装置的参数，如进样体积、进样速度等。
2. 将样品瓶连接到进样装置，并采用适当的方法进行进样操作。
3. 完成进样后，检查进样针和进样口是否清洁，避免样品污染。
五、操作注意事项1. 在操作过程中，避免直接接触仪器部件，使用相应的工具进行操作。
2. 在更换柱子时，确保柱子安装牢固，并检查柱头和连接件是否漏气。
3. 仪器运行过程中，要及时记录好各项参数，以备查阅和分析时使用。
4. 实验室人员应经常对仪器进行保养和维护，保证其正常运行。
结语：高效液相操作规程是确保实验准确性和可重复性的重要依据。
通过熟悉和遵守操作规程，能够更好地开展高效液相分析工作。
在操作过程中，需要严格遵循各项操作步骤，并加强对仪器的维护与保养。
高效液相操作规程
高效液相操作规程
1、打开系统各模块电源，待系统自检结束。
2、开启电脑，双击桌面上工作站图标，进入主菜单，再点击分析图标，进入实时分析界面。
这是可以听到“嘀”的声音，表示联机正常。
3、打开排气阀，按下泵面板上的PURGE键，对系统管路进行排气。
4、点击助手栏中的数据采集图标，再点击仪器参数，按照具体分析条件设置好仪器参数，再点击下载按钮。
点击工具栏上的仪器开启图标开启系统。
5、待系统状态出现就绪，基线平直系统稳定。
6、如果该样品是第一次分析，最好点单次分析，查看样品各组份的分离情况。
必要时调整分析参数，直至各组份完全分离。
7、按照实际色谱图设置好组份表，再保存该方法文件。
8、点击助手栏中的批处理图标，设置好批处理表，并保存。
9、将处理好的标准和样品溶液分别装入样品瓶，放入自动进样器样品托盘中。
然后点击开始按钮，待所有分析结束。
10、将上述采集好的色谱图进行数据处理，并打印报告。
11、分析结束后，冲洗系统，如果流动相中含有缓冲盐，请先用纯水冲洗10～20分钟，再用甲醇冲洗30分钟左右。
然后退出工作站，关闭系统各模块电源，并作好仪器使用记录。
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SSI高效液相的标准操作规程适用于所有使用此仪器者1.流动相的处理1.1过滤溶剂溶剂在使用前一定要用0.5μm的过滤器过滤，如果使用固体化学试剂（缓冲盐）配制流动相，过滤特别重要，不能让固体微粒污染泵，阻塞进样器和柱头过滤片。
本实验室有水溶性和有机性两种过滤膜供选择，过滤水溶性流动相时（如甲醇/水），先用1-2ml甲醇润湿过滤膜，有助于快速抽滤。
1.2保持储液瓶的清洁用普通溶剂瓶作流动相储液器应不定期废弃瓶子，最后一次应用HPLC级的水或溶剂清洗，不能在清洗过程中留下污迹。
1.3保证溶剂的质量一定要用HPLC级的溶剂，水也应达到HPLC级，同样也要使用高纯度的缓冲盐。
1.4 故障及解决方法1.4.1 流动相脱气不充分流动相受热，或者流动相不同组分混合时会有气体产生，气泡进入泵内引起压力波动，增加噪音，色谱图上出现毛刺。
可试用下列方法解决问题：流动相再脱气；采用更有效的脱气方法或两种方法配合使用；改系统内混合为系统外预混合。
1.4.2 流动相供给不畅流动相用完，管道中吸入气体引起泵压力不稳。
应经常观察储液器中流动相的量，加足流动相保证所有的样品分析完毕。
输液管上装溶剂滤头，既可使输液管沉至瓶底，又可过滤流动相，储液器盖上留一小孔正好夹住进液管，使其不能上下移动。
溶剂滤头阻塞引起管道和泵腔空化，压力不稳。
溶剂滤头被微粒所阻塞或长霉，去掉溶剂滤头后如果系统运转正常，说明已找出问题，换上新的溶剂滤头则可。
有时候换上新的溶剂滤头仍然不畅，那就需要查查流动相的制备过程，或者换大孔径的溶剂滤头。
不管如何，流动相都需要重新过滤。
流速过高、阻力大，造成空化现象，这是由于溶剂滤头孔径、管道内径、流速和溶剂黏度等引起的。
如果流速大于10ml/min，常会出现这种现象。
使用下列方法解决：（1）使用低流速；（2）换大孔径的溶剂滤头；（3）增加进液管道内径；（4）抬高或加压储液器；（5）不用溶剂滤头，但流动相一定要先过滤；（6）储液器盖子太紧，在储液器内形成真空，打出的流动相不连续。
应松开盖子或留有1mm的缝隙；（7）进液管道阻塞或弯曲使泵抽不到液，注意调整进液管道或更换新的。
其它问题包括渗漏或接头松动、泵部件损坏等，都能引起供液不正常。
1.4.3 流动相和储液器被污染由于污染，噪音越来越大，检测器基线上升。
污染物可能被泵以稳定的浓度打入系统，而再以稳定的浓度流出来，所以在色谱图中不出多余的峰。
用梯度洗脱时弱流动相可以使污染物聚在柱顶，流动相强度增加后污染物可能被洗脱出来一个大的伪峰。
有时基线噪音突然增大或突然提高，都是因为反复加进新的流动相或系统用得太久（通宵）所造成的。
新加进的流动相有污染物或者流动相长霉，繁殖了细菌。
脏的储液器会污染清洁的流动相。
每种流动相备有专用的储液器，或者定期报废储液器。
流动相污染来自这几个方面：试剂质量不高，玻璃器皿不合格；微生物的影响；配制流动相时操作不当等。
因此要求高纯度化学试剂和HPLC级溶剂。
玻璃器皿按规定清洗干净。
为防止微生物生长，每天要用甲醇清洗系统。
怀疑系统内生长了微生物，可用稀硝酸冲洗既可（注意不要损坏柱和管道系统），真空脱气时防止泵油带入流动相。
用清洁的惰性塞子、搅棒、溶剂滤头和玻璃器皿配制流动相。
已经污染的流动相一定要废弃掉。
2. 仪器组成及电源2.1 仪器组成本系统由SeriesⅢ泵，7725i 进样器，Model 500型紫外/可见光检测器，柱温箱（可选件），数据处理系统一套。
2.2 电源仪器使用时按泵、检测器、打印机和计算机的顺序，依次接通电源。
3. SeriesⅢ泵的操作3.1操作环境要求室内应保持环境清净、无尘，并且有恒温和恒湿设备。
一般实验室的温度应保持在20~30℃之间，相对湿度保持在20%~90%之间。
3.2 溶剂使用注意事项除使用PEEK™泵头以外，Series III泵里面跟溶剂接触的所有部件的制造材料为316L不锈钢、蓝宝石、红宝石或聚合物材料。
这里面有一些材质对酸（包括路易斯酸）和卤化酰基非常敏感。
应避免使用以下溶剂：王水、溴、无水氯、氯化铜、氯化铁、氯化亚铁、氟利昂、胍、氢溴酸、盐酸、氢氟酸、过氧化氢、碘、氯化汞等。
注意，三氯甲烷和四氯化碳会缓慢分解，产生游离的氯化氢（盐酸），会腐蚀不锈钢流路系统，应尽量避免使用。
3.3前面板介绍3.3.1 Prime/Purge阀：这是一个高效的空气排放阀，当打开阀时，液体将从此出口排出，而该阀完全关闭时，液体将从Filter/Outlet出口排出，并进入系统。
当泵或者流动相入口管路有气泡时，打开这个阀，用一个大注射器插在阀口抽液，或者按泵前控制面板上的“Prime”键。
一般抽出20~30ml溶液即可。
（注意：当您拧开这个阀的时候，系统压力一定要在100psi以下）3.3.1.1 Filter/Outlet这是泵出口，内置一个高压在线过滤器（0.5um），该接口设计连接管路为1/16’’外径管（分析型泵）。
3.4控制面板介绍3位数字液晶显示器可以显示泵的流速，系统压力或者是用户设置的最高/低压力保护限，显示模式可通过按“MODE“键进行选择。
3.4.1 键盘：启动/停止键：数字增加键（设置时用）：数字减少键Prime（排气键）：按下这个键，泵将在最大流速下运行，按任意键停止。
（注意：在按下这个键时，必须确认“Prime/Purge”阀是完全打开的）Mode（功能键）：按下这个键，可以循环选择四个显示模式：“流速、压力、最高压力限、最低压力限”。
3.4.2 LED状态灯介绍ML/MIN（流速显示）：当这个灯亮时，显示的是当前的流速（ml/min），”进行调整PSI（压力显示）：当这个灯亮时，显示的是当前系统的压力（psi）HI PRESS（高压限）：当这个灯亮时，显示的是最高压力保护限，用户可进行调整LOW PRESS（低压限）：当这个灯亮时，显示的是最低压力保护限，用户可进行调整PUMP RUN（泵启动显示）：当这个灯亮时，泵正在运行中FAULT（错误提示）：当这个灯亮时，说明系统有错误产生，泵将停止运行。
您可以在查清错误原因后，按任意键跳过错误检查并重新启动泵。
3.5运行泵调节好所需的流速后，按“RUN”键启动泵，泵工作时可使用它的自清洗功能，用自清洗液（水）在线清洗泵头。
3.6 实验结束后关闭电源开关。
4. 进样4.1 进样阀采用7725i手动进样器，进样环（loop）体积为20μl，上样量在10~20μl 时，进样体积必须大于loop体积的3-5倍，才能得到好的重现性，上样量小于10μl时，可以用10μl的微量进样器直接进样。
进样后，快速旋转进样器的把柄，直接把样品进到色谱柱的柱头。
4.2 标准曲线在做标准曲线时，进样浓度应由低到高。
5. 信号检测及数据处理本系统用Model 500型紫外/可见光检测器，波长范围在190-800nm。
在分析过程中测定吸收信号由计算机进行处理，显示色谱图，列出数据处理结果。
测量结束时按规定退出程序后关机。
Series III型泵故障快速检查与排除全面板显示正常，泵电机不转电机控制板保险丝熔断1. 电源问题.2. 内部短路1. 更换保险丝2. 联系维修.PEEK接头漏液. PEEK接头不能拧得太紧. 1. 接头表面密封不严2. 接头表面盐结晶.3. 接头表面有划痕1. 清理表面.2.如果有划痕，更换接头.自清洗泵头漏液. 清洗面密封不好.1. 大 (016) O型环不能密封.2. 泵头松动3. 表面划痕4.自清洗密封圈1. 更换大 (016) O型环2. 拧紧泵头.3. 更换划痕部件.500检测器的使用和维护图2.1：检测器前面板12 345678 9 10 11 12 13 14前面板见图2.1：以下控制和指示器位于前面板上：1）显示屏：A3 1/2数字显示器。
吸收值可显示到1.999AU。
当按下开关8（SAMP）时，这个显示屏显示样品相对光密度，当按下开关9（REF）时，这个显示屏显示参照光强度。
2）上升时间选择开关：一个四档旋转开关控制，能控制二级Bessel滤器的过滤强度。
可选择的上升时间有0.1，0.3，1.0和3.0秒四档。
上升时间等于2倍的时间常数。
（以秒为单位）3）灵敏度选择开关：十二档的旋转开关控制仪器背板上的输出口的输出电压范围。
可供选择的有2.0，1.0，0.5，0.2，0.1，0.05，0.02，0.01，0.005，0.002，0.001，和0.0005 AUFS。
这个开关不控制仪器背板上的1V/AU积分仪输出端口的输出。
4）波长选择器：连续波长旋钮，可调范围190-800nm。
顺时针旋转降低波长，逆时针旋转增加波长。
箭头指示波长增加方向。
注意：不要强力旋转旋钮，使波长值低于180nm或高于820nm这会损坏波长控制器。
5）波长指示器：一个三位的机械波长指示器，显示当前工作波长。
6）紫外（UV）灯指示器：绿色发光二极管亮表示氘（D2）灯装于设备内并且发光。
7）可见光（VIS）灯指示器：绿色二极管灯亮表明这个设备内装着一个钨灯并且发光。
8）样品光强度开关：按下这个瞬间开关，显示器显示样品室光敏二极管测到的样品光密度。
9）参照光密度开关：也是瞬间开关，按下此开关，显示器显示参照光敏二极管测到的参照光密度。
10）短路开关：瞬时开关，按下这个按钮，记录仪输出端电压降为零伏。
这个按钮必须持续按压一会才能发挥作用。
这个按钮用于调整记录笔在记录纸上的位置，但不影响积分仪输出。
11）标记开关：瞬时开关按下该开关可产生偏转度达20%的输出信号，该开关不影响积分仪输出。
12）等待状态指示灯：绿色LED指示灯，此灯亮表示记录仪输岀端正在输出一个恒定的零电压。
这种情况见于：a）刚刚开机时。
解决办法，按下自动回零开关--14，则记录仪归零，等待指示灯熄灭，记录仪输出端开始有电压输出。
b) 刚刚按下自动归零开关时。
这种情况到仪器完成信号处理时能自动恢复。
等待指示灯熄灭，记录仪输出端开始输出电压。
13）超限指示灯：绿色LED指示灯。
此灯亮表示样品流通池里的吸光度超过了自动归零电路的最大调整范围。
这时仪器仍可以正常输出记录电压，只是输出的电压存在一个偏差，即新基线和真正零基线之间的偏差。
例如自动归零电路己将0.002AU设置为零基线，那么新测得的所有数值都是在0.002AU的基础上的增加值。
在配备标准流通池的条件下自动归零电路最大可以将1.5AU的输出设为零基线。
14）自动归零开关：瞬时开关可以使高达1.5AU的电压回零，按下这个开关等待指示灯点亮，记录仪输出端电压归零。
大约三秒之内，这个仪器即可完成新零电位的记录并计算新电压相对值，等待指示灯自动熄灭。
当超限指示灯亮时表示样品流通池里的吸光度超过了自动归零电路的最大调整范围。