高效液相色谱仪标准操作规程

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Waters高效液相色谱仪标准操作规程

Waters高效液相色谱仪标准操作规程

1.目的描述 Waters 高效液相色谱仪标准操作规程。

2.适用范围化验室3.责任者化验员应严格遵照该操作规程 , QC 主管负责监督本规程的实施。

4.定义HPLC High Performance Liquid Chromatography , 高效液相色谱仪。

5.安全注意事项5.1有机溶媒有害健康,各溶剂瓶口应封严。

5.2注意检查废液桶中废液应避光,防止废液桶满外溢。

6.规程6.1.Waters HPLC的组成:贮液器→输液泵→自动进样器→分离柱 (柱温箱 )→紫外检测器→控制及数据处理系统 (Millennium 32化学工作站 )。

6.2. HPLC系统的打开及关闭顺序6.2.1打开顺序∙对于分体式:请按泵、进样器、柱温箱、检测器的顺序打开开关,待各部分分别显示初始化完毕后,最后打开M i l l e nn i um32化学工作站。

泵与色谱工作站的连接:对于 510 泵,因为此泵与色谱工作站是单向联系,如要使泵在 Remote 状态下由工作站控制,首先要在泵的键盘上按 Menu 键,待显示屏切换至 Mode 状态下,其状态是Loca ,按 Edit/Enter 键,在Local 的L 前有闪动的光标显示,按 键,Local 转换成Rem,再按Edit/Enter 键,此命令已输入进去, 最后按Stop/Run 键,使泵处于Run 状态这时泵和工作站的连接即告成功。

泵的任何动作都可由工作站来控制。

还应注意这一步工作在每次开机时都要进行。

对于 Alliance 2690 系统:先打开 Alliance 2690 主机、检测器电源开关,待初始化完毕后,再进入 Millennium 32化学工作站。

对于流动相的要求:对于液体试剂应尽量采用色谱纯试剂;对于所用到的固体试剂应采用分析纯试剂;对于水,应采用经纯水机处理过的超纯水;流动相在使用前一定要经 0.45μm 的滤膜(滤膜分为水相膜与有机相膜,确保使用正确的滤膜,参见附表 ) 过滤、超声真空脱气方可使用,严禁含盐的流动相未经过滤直接使用。

高效液相色谱仪标准操作规程

高效液相色谱仪标准操作规程

目的:建立高效液相色谱仪的标准操作程序,以使操作者正确使用。

范围:本文件适用于高效液相色谱仪的标准操作。

职责:质量管理部QC化验员负责本文件的起草、修订及实施。

程序:1接通电源,打开电脑。

按LC-20AT 上“POWER”键及RID-10A上“POWER”键,接通电源。

接通柱温箱的电源,并设置柱温箱温度为40℃。

2 双击电脑桌面上“LC Solution”,点击“1”进入采集窗口。

3 点击“Advanced”进行高级设置。

在“Pump”项中选择“Flow”模式;流速设置为0.5ml/min,泵压0~1.5MPa;在“Detector A”中选择“Analytical”模式,柱温设置为40℃。

设置完成后点击保存图标。

4 点击“Download”下载该方法。

5 将LC-20AT上旋钮“Draw”逆时针旋转180°,按Purge键,仪器自动清洗泵头,约3分钟后听到提示音(轻微长鸣声)后,顺时针旋转“Draw”180°至原位。

6 按LC-20AT上“Pump”键启动泵。

7 点击“R Flow ON/OFF”图标,系统开始运行,约20—30分钟后,点击“Balance RID (Detector A)”平衡系统。

8 基线平稳后,点击“◇”进行样品信息设置,设置完成后点击“确定”。

9 在进样器中吸入样品后插入手动进样口,将进样阀手柄调至“Load”位置,迅速将样品注入液相色谱仪,再将进样阀手柄调至“Inject”位置,开始采集数据。

10 分析完成后,点击红色的“〇”停止分析。

11 分析不同样品时,可重复“8-10”的操作,直至所有的样品均分析完毕。

12 所有的样品均分析完毕后,将流动相换成水继续运行至基线平稳,将色谱柱及系统中残留的物质清洗干净。

13 点击“R Flow ON/OFF”图标,系统停止运行,关闭采集页面。

按LC-20AT上“POWER”键及RID-10A上“POWER”键,关闭电源。

高效液相色谱仪操作规程

高效液相色谱仪操作规程

高效液相色谱仪操作规程高效液相色谱仪(HPLC)是一种重要的分析仪器,广泛应用于化学、生命科学、环境监测等领域。

为了保证色谱仪的正常运行和准确分析结果,需要遵守以下操作规程:1. 准备工作a. 首先,确保色谱仪及其附件的电源已接通,并确认仪器处于正常工作状态。

b. 检查溶剂桶内的溶剂是否充足并无杂质,并确认管路连接正常。

c. 检查流动相液位是否正常,并调整泵的流速和梯度程序参数。

2. 样品制备和准备a. 样品应充分溶解并过滤净化,以避免样品中的杂质对色谱分离产生干扰。

b. 选择合适的进样方式(自动或手动),并根据进样方式调整进样器的参数。

3. 进样器操作a. 将样品注射器插入进样口,并注意不要损坏色谱柱。

b. 设置进样体积和进样速度等参数,并进行一次空白进样以清洗进样器。

4. 色谱柱准备a. 定期检查色谱柱是否损坏,并根据需要更换。

b. 根据实验需要选择合适的色谱柱,并注意记录色谱柱的批号和使用次数。

5. 柱温控制a. 根据分析需要选择合适的柱温,并使用温度控制系统保持恒定。

b. 注意避免温度突变和波动,以保证分析结果的准确性和重复性。

6. 检测器操作a. 根据需要选择合适的检测器,如紫外-可见光检测器(UV-Vis)、荧光检测器、电导检测器等。

b. 设置检测器的参数,如波长、增益和灵敏度,并进行基线校准。

7. 数据采集与处理a. 启动数据采集系统,并设置采集参数,如采样率、数据类型和运行时间等。

b. 对采集到的数据进行处理和分析,如峰识别、定量分析和峰面积计算。

8. 清洗和维护a. 实验结束后,关闭色谱柱和进样器的阀门,并用溶剂清洗色谱柱和进样器,以防止堵塞和降低杂质残留。

b. 清洗完成后,注意关闭色谱仪的电源,并按照要求对色谱柱和进样器进行维护和保养。

总结:高效液相色谱仪的操作规程包括准备工作、样品制备、进样器操作、色谱柱准备、柱温控制、检测器操作、数据采集与处理以及清洗与维护等。

遵守这些规程可以确保色谱仪的正常运行和准确分析结果,提高实验效率。

高效液相色谱法标准操作规程

高效液相色谱法标准操作规程

高效液相色谱法标准操作规程1. 目的建立高效液相色谱法标准操作规程,规范高效液相色谱法检验操作,保证检验操作规范化。

2. 范围适用于高效液相色谱法检验操作。

3. 术语或定义N/A4. 职责质量控制部对本规程的实施负责。

5. 程序5.1依据《中国药典》2020年四部及2019年版《中国药品检验标准操作规范》。

5.2 简述高效液相色谱法系采用高压输液泵将规定的流动相泵入装有填充剂的色谱柱,对供试品进行分离测定的色谱方法。

注入的供试品,由流动相带入柱内,各组分在柱内被分离,并依次进入检测器,由积分仪或数据处理系统记录和处理色谱信号。

5.3 对仪器的一般要求所用的仪器为高效液相色谱仪,由输液泵、进样器、色谱柱、检测器和色谱数据处理系统组成,仪器应按现行国家技术监督局“液相色谱仪检定规程”定期检定并符合有关规定。

5.3.1色谱柱最常用的色谱柱填充剂为化学键合硅胶。

反相色谱系统使用非极性填充剂,以十八烷基硅烷键合硅胶最为常用,辛基硅烷键合硅胶和其他类型的硅烷键合硅胶(如氰基键合硅烷和氨基键合硅烷等) 也有使用。

正相色谱系统使用极性填充剂,常用的填充剂有硅胶等。

离子交换色谱系统使用离子交换填充剂; 分子排阻色谱系统使用凝胶或高分子多孔微球等填充剂;对映异构体的分离通常使用手性填充剂。

填充剂的性能(如载体的形状、粒径、孔径、表面积、键合基团的表面覆盖度、含碳量和键合类型等)以及色谱柱的填充,直接影响供试品的保留行为和分离效果。

孔径在15nm(lnm=10A)以下的填料适于分析分子量小于2000的化合物,分子量大于2000的化合物则应选择孔径在30nm以上的填料。

除另有规定外,分析柱的填充剂粒径一般在3~10μm之间。

粒径更小(约2μm)的填充剂常用于填装微径柱(内径约2mm) 。

使用微径柱时,输液泵的性能、进样体积、检测池体积和系统的死体积等必须与之匹配;如有必要,色谱条件也需作适当的调整。

当对其测定结果产生争议时,应以品种正文规定的色谱条件的测定结果为准。

高效液相色谱仪的操作规程

高效液相色谱仪的操作规程

高效液相色谱仪的操作规程
说明:高效液相色谱仪应安装在有强力通风的实验室中,实验室的高处和低处应设置两个通风口,以利于低沸点和高沸点有机溶剂蒸汽的排放,以保证实验室工作
人员的安全。

一.目的:提供通用的高效液相色谱仪的操作规程
二.范围:适用于侨昌化学有限公司高效液相色谱仪的操作
三.操作规程
1.准备好用作流动相的各种溶剂,经过滤(通过≤0.5um的滤膜)、脱气后,按比例配好
置于储液罐中。

梯度洗脱时,每种溶剂置于一个储液罐中,将溶剂过滤器插入储液罐底部,
2.将选用的高效液相色谱柱安装在流路中,拧紧连接的柱接头。

3.检查并连接好电路,将检测器输出信号线与数据处理系统连接好。

4.打开高压输液泵电源开关,调节色谱流动相流量 1.0ml/min。

(对内径 4.6mm、柱长
10—25cm色谱柱,填充5—10um填料,柱前压约6—15MPa)。

5.PURGE,冲洗泵头3-5MIN
6.开泵,平衡色谱柱系统。

7.打开可变波长紫外吸收检测器电源,调节好检测波长,排除吸收池中的气泡,待检测器
输出的基线稳定后,就可进行分析。

8.检测
9.若使用折光指数检测器,打开电源后,首先确定检测器温度,待恒温后,再选定待测的
折光指数间隔,待基线稳定后可进行分析。

10.如欲进行梯度洗脱,可由梯度控制单元设定欲进行的梯度洗脱程
序,进样后就可按梯度洗脱程序进行分析。

11.分析结束后,继续用流动相清洗进样阀和检测器约10—20min。

12.依次关闭检测器、梯度洗脱装置,高压输液泵的电源。

高效液相色谱仪操作规程

高效液相色谱仪操作规程

高效液相色谱仪操作规程1.开关机顺序●开机顺序:打开LC各单元电源-控制器电源-电脑-LC-Solution工作站,开机后能听到“哔”声。

●关机顺序:与开机顺序相反,即先关闭LC-Solution工作站-控制器-LC各单元电源2.流动相及样品的准备●流动相配制所用的有机相必须是色谱级的,所用的水必须是双重蒸馏水。

流动相必须经0.45um 的微孔滤膜过滤后方能进入LC系统。

水和有机相所用的微孔滤膜不同,有机相(如甲醇)的过滤用F膜,水用水膜。

●样品溶液亦必须用0.45um 的微孔滤膜过滤后才能进样。

3.工作站的进入及系统的开启●双击桌面上的“labsolution”图标,选择“operation”项并单击,在弹出窗口后按OK进入工作站。

●首先打开A、B泵上的排空阀(open方向旋转180度)。

然后按二泵面板上的“purge”键开始自动清洗A、B流路3分钟,然后在分析参数设置页中设置流速1ml/min,BCONC 0%,并设置合适的检测波长,柱温,停止时间。

在完成后点击“Download”将分析参数传输至主机。

●分析方法的保存:选择file-save method file as-取名保存文件●系统的启动:点击“instrument on/off”键开启系统(此时泵开始工作。

4.进样准备●观察基线及柱压,待基线平直(-5~80mv),压力稳定(0.5Mpa内)时方可进样。

5. 进样●点击助手栏中的“single start”键,弹出对话框,在对话框中输入“sample name”“method”“data file”等。

●填完后点击“start”,出现触发窗口,进样,仪器开始自动采样分析。

6. 数据文件的调用及查看●点击助手栏中的“Postrun analysis”键,打开数据处理窗口。

●打开文件搜索器,定位至数据文件所在文件夹,选择文件的类型,双击文件名即可打开数据文件(此时可以查看峰面积、保留时间等参数)。

Agilent1100高效液相色谱仪操作规程

Agilent1100高效液相色谱仪操作规程

Agilent1100高效液相色谱仪操作规程Agilent 1100高效液相色谱仪操作规程一、引言Agilent 1100高效液相色谱仪是一种常用的分析仪器,广泛应用于生物医药、环境监测、食品安全等领域。

本文将详细介绍Agilent 1100高效液相色谱仪的操作规程,以帮助用户正确、高效地使用该仪器。

二、仪器准备1. 检查仪器是否处于正常工作状态,包括电源是否连接、仪器是否通电等。

2. 检查仪器各部件的完整性,如进样器、泵、柱箱、检测器等。

3. 检查进样器的进样针是否干净,如有污染应及时清洗。

4. 检查溶剂瓶是否充足,必要时更换。

三、样品准备1. 根据实验要求准备样品,并确保样品的纯度和浓度符合要求。

2. 准备样品溶液,注意溶解度和稳定性。

3. 如需稀释样品,请使用纯净溶剂,并按照一定比例稀释样品。

四、仪器操作1. 打开Agilent 1100高效液相色谱仪的电源,确保仪器处于正常工作状态。

2. 打开色谱软件,并进行系统初始化。

3. 在色谱软件中设置实验方法,包括进样量、流速、梯度程序等。

4. 打开进样器盖,将样品注射器插入样品瓶中,吸取适量的样品溶液。

5. 关闭进样器盖,将样品注射器插入进样器,并按下进样按钮进行进样。

6. 打开泵的开关,调节流速至所需数值。

7. 检查柱箱的温度设置,根据实验要求进行调节。

8. 打开检测器,并设置检测器的参数,如波长、灵敏度等。

9. 开始实验运行,观察色谱图的变化并记录实验数据。

10. 实验结束后,关闭泵、检测器等设备。

11. 关闭色谱软件,并保存实验数据。

五、日常维护1. 每次使用后,及时清洗进样器和柱箱,避免样品残留。

2. 定期检查泵的密封件,如有磨损应及时更换。

3. 定期校准检测器,确保准确性和稳定性。

4. 定期更换柱子,避免柱子老化影响实验结果。

5. 清洗仪器外壳,保持仪器的整洁。

六、故障排除1. 若发现仪器无法正常启动,检查电源和连接线是否正常。

2. 若发现进样器无法正常工作,检查进样针是否堵塞或损坏。

高效液相色谱仪使用与操作规程

高效液相色谱仪使用与操作规程

4 、检查仪器各部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正
常。
第二步、开 机
接通电源,依次开启不间断电源、四 元泵、自动进样器、柱温箱、检测器,待 泵和检测器自检结束后,打开电脑显示器、
主机,最后打开色谱工作站。
一)参数设定
1、 波长设定: 2 、流速设定: 3 、流动相规定的流动相冲洗系统,一般最少需6倍柱体积
的流动相。
检查各管路连接处是否漏液,如漏液应予以排除。
观察泵控制屏幕上的压力值,压力波动应不超过1MPa。如
超过则可初步判断为柱前管路仍有气泡,按检查管路后再操
作。
观察基线变化。如果冲洗至基线漂移<0.01mV/min,噪声
二、样品
1、采用过滤或离心方法处理样品,
确保样品中不含固体颗粒; 2、用流动相或比流动相弱(若为反
相柱,则极性比流动相大;若为
正相柱,则极性比流动相小)的 溶剂制备样品溶液,尽量用流动
相制备样品液;
3、手动进样时,进样量尽量小,使 用定量管定量时,进样体积应为 定量管的3~5倍;
第四步、注意事项
人的方法及实验结果;
3、使用手动进样器进样时,在进样前和进样后都需用洗针液洗净进样针筒, 洗针液一般选择与样品液一致的溶剂,进样前必须用样品液清洗进样针
筒3遍以上,并排除针筒中的气泡;
4、溶剂瓶中的沙芯过滤头容易破碎,在更换流动相时注意保护,当发现过 滤头变脏或长菌时,不可用超声洗涤,可用 5%稀硝酸溶液浸泡后再洗
四、出现肩峰或分叉
1.样品体积过大
1.用流动相配样,总的样品体积小于第一峰 的15% 2.样品溶剂过强 3.柱塌陷或形成短路通道 4.柱内烧结不锈钢失效 2.采用较弱的样品溶剂 3.更换色谱柱,采用较弱腐蚀性条件

高效液相色谱仪操作规程

高效液相色谱仪操作规程

高效液相色谱仪操作规程1.目的规范高效液相色谱分析仪的使用和维护。

2.范围高效液相色谱的使用和维护。

3.系统组成本系统由2487检测器(2414检测器),1515输液泵(1525输液泵),717自动进样器及EMPOWER系统组成。

4.程序4.1 流动相和样液制备4.1.1 过滤溶剂溶剂在使用前一定要用0.45μm的过滤器过滤。

4.1.2 保持储液瓶的清洁普通的溶剂瓶作流动相储液器应不定期废弃瓶子。

应用HPLC级的水或溶剂清洗,不能在清洗过程中留下污迹。

4.1.3 保证溶剂的质量一定要用HPLC级的溶剂,水也应达到HPLC级,同样也要使用高纯度的缓冲液。

将流动相过滤、脱气后,用封口膜及时封好待用。

将待测的液体样品经0.45μm的水相滤膜过滤后,滤液备用。

4.2 开机按照检测器、柱温箱、自动采样器、泵、计算机的顺序,依次接通电源。

每次使用示差折光检测器进行样品分析时,需要提前打开,预热稳定。

4.3 高压输液泵的操作4.3.1 液相色谱系统泵的流速在0.1-10.0ml/min之间,要保持泵的良好操作性能,必须维护系统的清洁,保证溶剂和试剂的质量,流动相的过滤和流动相的脱气。

下面列出预防泵故障的注意事项:(1)用高质量的试剂和HPLC级溶剂;(2)过滤流动相和溶剂;(3)脱气;(4)工作时使用泵头的排水孔不停的用10%甲醇/水的混合溶剂冲洗柱塞杆;(5)不让水和腐蚀性溶剂滞留在泵中;(6)定期更换垫圈;(7)加润滑油。

处于良好操作状态的泵,应该使色谱图上的基线平稳,保留时间的重复性良好。

等度洗脱时压力波动小于±2%。

梯度洗脱时压力变化应是缓慢和平稳的。

4.3.2 常规准备工作包括:开通电源,溶剂脱气,泵头及溶剂管路除气泡及泵的启动。

4.3.3 接通系统电源,仪器各单元进行自检,数秒后通过,接受操作指令。

4.3.4 流动相脱气方式:超声波脱气10min。

4.3.5 系统中气泡的排除,泵启动时,调节所需要的通道流速为1ml/min,该通道调节为100%。

高效液相色谱仪操作规程

高效液相色谱仪操作规程

高效液相色谱仪操作规程1 溶剂输送泵操作1.1 安装后的准备1.1.1 在烧杯中装入大约100mL异丙醇,在烧杯中放入吸滤器,将一段SUS 管的一端连接在泵出口,而另一端放入烧杯中。

1.1.2 将排液管的一端连接到排液管接口上,另一端放入废液瓶中。

1.1.3 打开电源ON,显示初始屏幕。

1.1.4 逆时针方向转动排液阀180度,打开排液阀。

按purge键,泵开始运行,指示灯亮。

1.1.5 冲洗完毕后,按一次func键,进入流速设定状态,并且设定流速1mL/min。

1.1.6 将排液阀旋钮顺时针方向旋转到底,关闭排液阀。

1.1.7 按pump键,泵启动,指示灯亮。

大约3--5分钟后,再按pump键,泵停止运行,指示灯灭,完成操作准备。

1.2 运行的检查1.2.1 开始运行前务必确保:储液瓶中装有流动相,并且吸滤器已经放入储液瓶中。

排液管的另一端已经放入废液瓶中。

1.2.2 将排液阀旋钮逆时针方向旋转180度,打开排液阀。

1.2.3 按CE 键返回到初始屏幕。

按pump键,泵大约以1ml/min的流速运行(指示灯亮)。

1.2.4 观察流动相流出排液管大约10秒钟。

在此期间,流动相应连续流出并且无气泡出现。

1.2.5 再按pump或purge键,泵停止运行,指示灯灭。

1.3 上面两步完成后仪器进入工作状态。

2 紫外—可见检测器操作2.1 按下电源开关,打开仪器,将发生如下情况。

2.1.1 显示板上所用光点及指示灯亮。

自动检查内存,瞬间显示控制程序的版本号。

2.1.2 预热大约20sec,仪器的单色器找到其初始位置(大约1分钟)。

2.1.3 (使用氘灯的亮线(656nm)自检波长的准确性(大约10 sec)。

2.1.4 如果没有检查出错误,显示正确信息,几秒钟后,由初始屏幕代替原信息2.1.5 如果自检没有错误,屏幕显示正确,此时可以进行操作。

为初始状态,将显示初始屏幕。

2.2 设定测定波长2.2.1 按CE键。

高效液相操作规程

高效液相操作规程

高效液相操作规程一、目的本操作规程旨在规范高效液相色谱(HPLC)的使用流程,确保实验的准确性和重复性,同时保障操作人员的安全。

二、适用范围本规程适用于所有使用高效液相色谱仪进行分析的实验室人员。

三、操作步骤1. 准备工作a. 确保所有使用的试剂纯度符合要求,且无污染。

b. 检查并清洁色谱柱,保证无残留物影响分析结果。

c. 根据实验要求准备流动相,并调整至适当比例。

2. 仪器开机a. 打开电源,预热仪器至工作温度。

b. 检查并确保所有管道连接正确无漏液现象。

c. 启动色谱软件,进行系统自检。

3. 样品准备a. 根据实验要求,准确称量并溶解样品。

b. 通过适当方式(如过滤或离心)去除样品中的不溶物。

4. 样品注射a. 使用适当的注射器抽取样品。

b. 打开注射口,准确注射样品,然后封闭注射口。

5. 分析运行a. 根据实验方法设置流动相流速、柱温等参数。

b. 启动分析程序,实时监控色谱图谱。

c. 记录并保存分析数据。

6. 结束操作a. 关闭分析程序,停止流动相输送。

b. 清洗系统,包括色谱柱和注射器。

c. 关闭仪器电源,清理工作台面。

四、注意事项1. 在操作过程中应穿戴适当的实验室防护装备。

2. 避免直接接触有毒或腐蚀性的试剂和样品。

3. 定期对仪器进行维护和校准,确保分析结果的准确性。

4. 遇到任何异常情况,应立即停止操作并报告给实验室负责人。

五、安全措施1. 熟悉并遵守实验室安全规程。

2. 操作过程中应使用防护眼镜、实验服和手套。

3. 对于易挥发或有毒溶剂,应在通风良好的环境下操作。

4. 紧急情况下,立即启动紧急冲淋设备,并寻求医疗救助。

六、记录与报告1. 记录所有操作参数和样品分析结果。

2. 对于任何偏离标准操作的情况,应详细记录并报告。

3. 定期对操作记录进行审核,以优化操作流程和提高分析质量。

高效液相色谱仪操作规程

高效液相色谱仪操作规程

高效液相色谱仪操作规程
《高效液相色谱仪操作规程》
一、实验目的
本实验旨在通过高效液相色谱仪分析样品,准确测定目标化合物的含量,并学习高效液相色谱仪的操作方法和技巧。

二、实验设备
1. 高效液相色谱仪
2. 注射器
3. 色谱柱
4. 移液管
5. 色谱仪软件
三、操作步骤
1. 打开高效液相色谱仪的电源并进行系统初始化,启动色谱仪软件。

2. 调整流速,进样量等参数,使得实验条件符合要求。

3. 将样品通过移液管注入色谱柱中,注意避免样品泡沫和气泡的产生。

4. 设置色谱条件,如梯度洗脱,流速等,启动色谱分析。

5. 记录实验数据和结果,并进行数据处理和分析。

6. 清洗色谱仪,保持设备清洁。

四、实验注意事项
1. 在操作色谱仪时,要严格按照操作步骤进行,严禁随意更改参数。

2. 在进行样品进样时,要小心操作,避免产生气泡和样品泡沫。

3. 在进行色谱分析时,注意梯度洗脱条件的设置,保证分析结果准确。

4. 在实验结束后,及时清洗色谱仪,保持设备干净。

五、实验结果
根据实验数据和结果,可以得出目标化合物的含量和纯度,并进行结果的解释和分析。

通过《高效液相色谱仪操作规程》的学习,使我们更加熟悉高效液相色谱仪的操作方法和技巧,能够准确进行样品分析,为科研工作的开展提供了重要的技术支持。

高效液相色谱仪操作规程

高效液相色谱仪操作规程

1 目的:建立高效液相色谱仪的操作规程,保证分析结果的准确可靠。

2 范围:本标准适用于高效液相色谱仪的操作使用。

3 依据:《药品生产质量管理规范》(2010年修订),《中国药品标准操作规范》(2010年版)、高效液相色谱仪使用说明书。

4 职责:5 术语与定义:无6 正文:一、操作前准备: 1.1流动相的配制:1.1.1根据所供试品的性质、相关的文献资料、工作经验等按比例配制流动相。

1.1.2根据流动相的性质确定采用有机膜(0.45um)还是水相膜(0.45um)对流动相进行过滤。

1.1.3将过滤后的流动相进行超声脱气10~15分钟。

1.2对照品供试品处理:1.2.1称取或量取适量的对照品或供试品,用适当的溶剂(最好采用流动相或流动相的主成分)进行充分溶解(也可借助超声波进行超声溶解),使其浓度为0.1~1mg/mL(根据检测结果再适当调节溶液的浓度)。

1.2.2根据对照品或供试品的性质确定采用有机针头滤膜(0.45um)还是水相针头滤膜(0.45um)进行过滤。

1.3色谱柱的选择:根据样品的性质选择适当的色谱柱。

二、开机:2.1打开UPS(不间断电源)电源,打开仪器接线板电源开关;2.2打开电脑显示器电源,打开电脑主机电源(POWER),启动电脑;2.3依次打开泵、自动进样器、柱温箱、检测器的电源;2.4双击屏幕右下角“服务管理器”快捷图标,出现对话界面后点击“启动仪器控制器”启动,等显示“本地仪器控制器运行空闲”,可以关闭界面。

2.5双击在桌面上的Chromeleon 7图标(工作站主程序)。

2.6在左下方点击仪器,则在右边会自动显示该仪器控制面板。

2.7旋开泵上的排液阀(两圈以上);设置A通道为100%,点击“冲洗”,然后再出现的对话框中点击“忽略并执行”;(默认冲洗5分钟);然后分别“冲洗”流路中其他通道气泡;排完气泡后关闭排液阀;2.8设置流动相的比例及流速后,点击“马达”。

此时泵自动会以设置的流速进行运行。

高效液相色谱操作规程

高效液相色谱操作规程

高效液相色谱操作规程第一部分:进样前准备工作1.溶剂LC的溶剂包括:自己的流动相,超纯水,体积比为1:1的流动相与超纯水的混合溶液。

例如,如果你的流动相是甲醇:水=85:10,那么你需准备的溶剂如下:纯甲醇,超纯水,50%甲醇水混合液。

(以下以甲醇为流动相为例)1.1 过滤使用前,应将纯的甲醇(要求是色谱纯,最好是进口的色谱纯)用0.45µm的滤膜过滤。

50%的甲醇水溶液也用过滤过的甲醇和超纯水配。

注意:此不操作切不能省,尤其是国产色谱纯。

否则,很容易造成色谱柱的堵塞,造成柱压过高,从而使你的测定工作不能进行。

1.2脱气使用前所有的溶剂都要用超声清洗仪脱气15min.原因:液相色谱最重要的一点就是整个流路不能有气泡,否则会造成峰分离不好,响应不理想等后果。

而使用的溶剂或多或少都会融入空气,所以使用前必须脱气。

2.样品样品包括标样和实际样品。

所有样品的最后性状都应是透明的液体。

为避免堵塞,样品同样得用0.45µm的滤膜过滤。

第二部分:仪器使用1.将吸液头放进相应的流动相中.通常标有A的放入纯水中,B泵放进纯有机溶剂中.没有任何标记的吸液头放进50%的有机溶剂水混合液中.2.开仪器.开启顺序为:CTO-20A,SIL-20A,SPD-M20A,LC-20AT.等待几秒钟后,开电脑.3.点击工作站图标,如图: .之后出现界面4.点击出现界面5.点击OK.可听到蜂鸣一声,仪器连接正常,进入工作站.6.设置方法.点击界面中的高级须更改的参数主要有:点击数据采集------输入所需的LC停止时间------点击应用于所有的采集时间点击泵-----选择模式里的低压梯度-----设置泵A总流速,溶剂B浓度.点击柱温箱------设置柱温箱温度.点击自动排气------选择流动相A,流动相B.方法设置完成.另存方法文件到自己建立的文件夹里.保存完成后,点击下载(界面右上角).7.点击自动排气图标.出现排气界面.8.排气完成.点击仪器开关图标,泵开关图标,柱温箱开关图标.9.点击绘图.开始走基线.通常需走30分钟,视基线的好坏更改而定.基线不平,则需更长的分析时间.点击更该分析时间图标,输入所须的时间,点击确定.10.基线平衡之后,就可以进样.将样品放入样品架.如果是单次进样,就点击单次运行。

高效液相色谱仪标准操作规程

高效液相色谱仪标准操作规程

高效液相色谱仪标准操作规程1目的建立高效液相色谱仪(Waters2695-2996Allianee)标准操作规程,为了使操作者操作高效液相色谱仪(Waters2695-2996Allianee)更规范,保证结果更精确。

2范围适用于高效液相色谱仪(Waters2695-2996Allianee)标准操作规程。

3职责操作者。

4程序4.1开机4.1.1打开Allianee电源开关,仪器进入自检状态。

4.1.2打开检测器,“STATUS”闪烁,4分钟后“LAMP”亮,仪器正常。

4.1.3点击menu/Status进入“STATUS”界面,按direactfunction,选择dryprime后,选择“A/B/C/D”四个泵,点击“Enter”,管道快速充满液体。

4.1.4打开电脑,点击“Empower”登陆,输入帐户“system”,密码“manage”,进入“EmpowerPro”。

4.1.5在配置系统中新建一项目。

4.1.6点击“运行样品”,选择“项目”,3分钟后仪器进入运行界面。

4.2样品检测4.2.1点击“编辑”,编辑仪器方法并保存方法名。

4.2.2点击“新建方法组”,编辑方法组名。

(要求方法组与仪器方法同名)4.2.3标识样品名、进样品/进标准品、样品位置、进样体积、运行时间后,于“file”中保存参数4.2.4点击“准备”,仪器显示“准备进样”后,点击进样。

4.2.5点击鼠标右键,选择“波长”和“正好运行时间”,保存参数4.3数据处理4.3.1点击“浏览项目”,于“进样”栏中双击所选的样品名,进入“通道”栏,双击所选的样品名,进入样品数据主窗口4.3.2选择波长,点击“提取色谱”后,积分或以处理方法向导处理数据,保存处理方法后,于“file”“保存”中保存“全部”。

4.4打印报告4.4.1于所选“浏览项目”结果栏中,选择已处理好的数据(如果没有,点击更新),点击右键,选择预览报告。

4.4.2选择报告方法,确定后,进入报告预览状态。

高效液相色谱仪操作规程

高效液相色谱仪操作规程

高效液相色谱仪操作规程(岛津LC-10AT型HPLC)1.仪器组成及开机1.1仪器组成: 岛津LC-10AT泵(两台)CTO-10AS柱温箱RID-10A检测器(SPD-10A检测器)电脑一台(装有威玛龙色谱工作站)1.2 开机:插入电源,依次打开泵、柱温箱、检测器、电脑(并进入色谱工作站)。

2. LC-10AT泵参数设定2.1 开始运行前务必确保储液瓶中装有流动相,并且吸滤器已经放入储液瓶中。

排液管的另一端已经放入废液瓶中。

2.2待仪器自检完毕后, 将排液阀逆时针旋转1800,若显示屏左下角显示的压力值不在-0.3-0.3Mpa范围内,使用ZERO ADJ功能对压力传感器进行调零(反复按func 键,直至显示屏上有ZERO ADJ字样出现,按Enter键,然后再按CE键返回初始屏幕)。

2.3然后按purge ,进行吸入过滤器至泵的冲洗操作,也可用注射器在排液阀的管道处抽吸清洗。

冲洗完成后关闭排液阀。

(注意:如果排液阀旋转大于1800,空气将进入排液管,最终导致空气进入流动相。

)2.4 按一次func键后,设定所需流速(例如:设定1ml/min,按1键,然后按Enter键确定)。

逐次按func跳到相应Pmax,Pmin项下,输入最高和最低保护压力后,按Enter键确定,再按CE键恢复初始状态。

2.5 如果要使用两台泵,则按conc键进入设定状态,输入B泵(从动泵)的百分率,然后按Enter 确定,再按CE键返回初始界面。

2.6 按pump 启动泵,对色谱柱进行平衡,待压力显示稳定,可开始测试操作。

3. CTO-10AS柱温箱参数设定3.1 在初始屏幕下,按func 键进入操作温度设定状态,以数字键输入设定温度,然后按enter 确定。

3.2 再按一次func键设定上限温度,按enter 确定,按CE返回初始屏幕即可。

3.3 按oven 键启动加温程序,仪器会自动控温于所设温度。

4. RID-10A检测器参数设定按shift + R flow键,让流动相依次流过流通池、参比池,待参比池内液体置换完毕,再按一次shift + R flow键让流动相只通过流通池,直至基线跑平。

高效液相色谱仪操作规程

高效液相色谱仪操作规程

高效液相色谱仪操作规程
一、所需流动相经过滤、脱气处理后待用。

安装好色谱柱。

二、检查供电电源是否稳定,各部件连接是否牢固。

三、开启仪器检测器和泵电源,待检测器电源指示灯由黄灯变成绿灯后,开启
仪器工作站,即双击桌面上图标LCwin1.0。

四、点击工作站中控制采集,点击开启,待仪器自检通过后,进入仪器控制采
集界面。

五、依次用甲醇、甲醇:水=2:8、流动相进行冲洗色谱系统,每次更换更换溶
液时,均需拧开放空阀,选择菜单泵下的快速冲洗模式,选定合适的时间进行冲洗,赶走泵内气泡。

确定泵内无气泡后,停止冲洗模式,关闭放空阀。

六、更换换上流动相后,按样品分析条件设置选择合适的流速、波长。

待色谱
设备达到平衡状态(柱压稳定,工作站基线稳定,一般需30-40min)后,即可进样分析。

七、分析完毕后,流动相中存在缓冲盐等溶剂,需先用甲醇:水=2:8,进行冲洗
至少30min,再用甲醇冲洗,待柱压降至正常值(依色谱柱而定,即柱压稳定后),停泵。

柱压降为零后关闭检测器和泵的电源。

八、样品分析应做好原始纪录,内容包括分析样品名称、送样时间、分析时间、
样品编号、检测数据、报告结果、报告时间、送样单位、分析员以便统计和查阅。

九、仪器如出现故障,应及时报告专业维修单位或专职维修人员,未经专业维
修培训或未取得维修资格证书的不能进行维修工作。

十、仪器室内严禁吸烟或进行任何无关明火操作。

仪器室内应配备二氧化碳灭
火器,分析人员应能正确操作使用。

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1.5出峰完毕,如果没有设定自动停止,点击“结束”,结束采集色谱数据。
1.6关机全部测定结束后,按规定用适当溶剂冲洗泵,进样器、柱。关各部件电源开关,并拔下个插头,作好使用登记。
高效液相色谱仪标准操作规程
题目:高效液相色谱仪标准操作规程
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颁发部门:生产部
分发部门:质控部、研发部、生产班组
变更记载:修改号:
批准日期:执行日期:
变更原因及目的:
目的:建立一个岛津LC-10AT型高效液相色谱仪使用操作规程。
范围:适用于岛津LC-10AT型高效液相色谱仪使用操作的全过程。
1.2.2设定流速按FUNC键至出现流速,输入流量,逐次按FUNC键,依次设置最大压力和最小压力。
1.2.3关闭排液阀,按PUMP启动泵,用配制好的流动相对色谱柱进行平衡,待基线平衡,压力显示稳定,可开始分析测试操作。
1.3设定波长按各样品规定设定波长。
1.4进样:在工作站软件中先点击“结束”再点击“开始”,进样阀手柄转到“INJECT”位置,用注射器注入样品。
职责:化验员、化验室主任对本规程实施负责。
规:
基本操作
1.1开机将电源插头分别插入插座后,依次打开泵、检测器、工作站的电源开关,工作站自检完成后,打开PC的电源,打开工作站软件。
1.2 LC-10AT泵参数设定
1.2.1打开排液阀按PURGE键,进行吸入过滤器至泵的冲洗操作,也可用注射器在排液阀的管道处抽吸清洗
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