油镜血涂片示嗜酸性粒细胞
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仪器法
（二）方法评价
1、显微镜计数法
准确性高、精确性不如仪器 试剂主要作用：
保护嗜酸性细胞（丙酮、乙醇） 破坏红细胞和中性粒细胞（碳酸钾、草酸铵或低滲） 防止乙醇挥发（甘油） 防血凝（抗凝剂）
病例简介
患者女,31岁,有嗜睡、头晕、面色苍白、头发及 指甲易脆。近半年来总是感觉浑身乏力,冬天怕冷。 检查时发现其眼睑苍白。一直无明显的出血病史,月 经也正常。主诉锻炼时心悸,尤其在锻炼强度加大时。 实验室检查：血清铁3.2μmol/L，铁饱和度11%，铁 蛋白<5μg/L，血液血红蛋白79g/L，Hb 68g/L， RBC3.60×1012 /L，HCT0.23L/L，MCV67fl， MCH 20pg，MCHC 280g/L，RDW 0.176。粪便查 虫卵阴性。
边缘整齐, 两侧留有空隙。血片制好后最好立即固定染色, 以免细胞溶解和发生退行性变
（２）观查部位 （３）分类计数的范围和移动规律 （４）计数白细胞数量 （５）注意事项（全片、计数异常和幼稚、其他）
２、质量考核与评价
（四）参考值
白细胞
成年人 新生儿 6月～12岁
(4.0-10)×109/L (15-20)×109/L (6.0-7.0)×109/L
（2）两差比值评价法 （3）双份计数标准差评价法
四、参考值
成人：4-10×109/L 儿童：15-20×109/L 6个月-2岁：11-12×109/L 新生儿：15-20×109/L
五、临床意义
白细胞总数>10×109/L 白细胞总数<4×109/L
增多 减少
二、白细胞分类计数
（differential leukocyte count, DLC)
白细胞检查
武汉大学中南医院检验科 彭剑虹
概述
粒细胞 (granulocyte,GRAN)
白细胞 (white blood cell, WBC)
淋巴细胞 （lymphocyte, L)
单核细胞 (monocyte, M)
中性粒细（neutrophil,N) 嗜酸性粒细(eosinophil,E) 嗜碱性粒细胞(basophil,B)
Nsg(分叶) 50～70% Nst(杆状) 1～5% E 0.5～5% B 0～1% L 20～40% M 3～8%
（五）临床意义 １、白细胞总数和中性粒细胞
⑴中性粒细胞生理性变化
（２）N病理性增多
ａ、反应性增多 ｂ、异常增生性增多 （ 3 ）N减少
ａ、反应性增多
大多感染：（10-30）×109/L 深部感染：> 30×109/L 严重感染：> 50×109/L
红细胞体积分布宽度（Red blood Cell distribution width, RDW）
它是用红细胞直方图分布的宽度比上其高 度来衡量红细胞体积离散程度的指标，正常 参考值为<0.16。
【正 常 值】：＜14.9% 【临床意义】：反应红细胞大小不均程度的指
标，增大多见于缺铁性贫血
结合MCV（红细胞平均体积）进行贫血的形态学分类(六类)
3）恶性肿瘤及白血病：如急、慢性粒细胞白血病、肝癌、 胃癌等
4）其他：如急性有机磷农药中毒、毒菌中毒、尿毒症、 酮症酸中毒等
一、白细胞计数
测定单位体积血液中各种白细胞的总数 （一）方法原理
显微镜法：改良牛鲍计数板 血液分析仪法：
两种方法的比较
计数公式
白细胞数/L=4个大方格内白细胞总数×10 × 20 × 106/4
类白血病
ｂ、异常增生性增多（造血干细胞克隆性疾病）
白血病 （急粒、慢粒） 骨髓增殖性疾病
ｃ、N减少
增殖和成熟障碍 消耗或破坏过多 分布异常
２、嗜碱性粒细胞（0-1％、超敏反应）
增多
３、淋巴细胞（L）（T、B、NK）
增多：绝对值增加
减少：①相对减少 ②绝对减少（<1.0 ×109/L ）
小细胞均一性( MCV↓RDW正常 ) 小细胞不均一性( MCV↓RDW↑) 正细胞均一性( MCV正常,RDW正常 ) 正细胞不均一性( MCV正常RDW↑) 大细胞均一性( MCV↑RDW正常 ) 大细胞不均一性( MCV↑RDW↑ )
地贫 缺铁性贫血 各种慢性疾病所致的贫血 早期缺铁性贫血、营养性贫血 再生障碍性贫血 巨幼红细胞性贫血
Βιβλιοθήκη Baidu
分裂池(mitotic pool)：原粒、早幼粒、中幼粒，可合成 DNA，能分裂
成熟池(maturation pool)：晚幼粒、杆状核
贮备池(storage pool)：部分杆状核、分叶核，成熟后 在贮备池中停留3～5d，其数量约为外周血的5～20倍。 在机体受到感染和其他应激反应时，可释放入循环血液， 正常只释放杆状和分叶核，病情严重时，少量晚幼粒也 能入血。
循环池(circulating pool)：血循环中一半的粒细胞
边缘池(marginating pool)：血循环中另一半的粒细胞 粘附于微静脉血管壁
边缘池与循环池处于动态平衡
外周血白细胞的一般检验的重要项目意义：
1）急性感染或化脓性炎症是中性粒细胞和白细胞升高最 常见的原因。
2）严重组织损伤：如急性心肌梗塞、大面积烧伤、大手 术后、严重的创伤等。
4、单核细胞（M）
增多
三、嗜酸性粒细胞计数
嗜酸性粒细胞（eosinophil,E）来至髓系干细胞分化的 嗜酸性粒细胞祖细胞，该集落形成的因子主要由受抗原刺激 的淋巴细胞产生的，因此E与免疫系统关系密切。 （一）检测原理
手工法 嗜酸性粒细胞/L= (n/10) ×10 ×20 ×106=0.02 ×n109
DLC：将血液制成涂片，经染色后在油镜下进行
分类计数，求得各种类型白细胞的比值（百分率） 和绝对值。
分类计数的意义：反映机体的生理或病理状态
（一）检测原理
传统显微镜分类法（涂片、瑞氏染色、分类比值）
血液分析仪分类计数法
（二）方法学评价
（三）质量保证
１、计数误差 （１）血涂片制备和染色 一张良好的血片,要求厚薄适宜,头体尾分明,分布均匀,
4个大方格内白细胞总数× 50 × 106=白 细胞数/L
（二）方法学评价
（三）质量保证
１、计数误差 （１）技术误差 器材 标本（内因、外因） 操作（盖玻片、充池、计数） （２）固有误差 计数域误差（增加计数面积和细胞数） 计数池误差 吸管误差 （３） 生理状态影响
２、质量考核与评价 （1）经验控制
（二）方法评价
1、显微镜计数法
准确性高、精确性不如仪器 试剂主要作用：
保护嗜酸性细胞（丙酮、乙醇） 破坏红细胞和中性粒细胞（碳酸钾、草酸铵或低滲） 防止乙醇挥发（甘油） 防血凝（抗凝剂）
病例简介
患者女,31岁,有嗜睡、头晕、面色苍白、头发及 指甲易脆。近半年来总是感觉浑身乏力,冬天怕冷。 检查时发现其眼睑苍白。一直无明显的出血病史,月 经也正常。主诉锻炼时心悸,尤其在锻炼强度加大时。 实验室检查：血清铁3.2μmol/L，铁饱和度11%，铁 蛋白<5μg/L，血液血红蛋白79g/L，Hb 68g/L， RBC3.60×1012 /L，HCT0.23L/L，MCV67fl， MCH 20pg，MCHC 280g/L，RDW 0.176。粪便查 虫卵阴性。
边缘整齐, 两侧留有空隙。血片制好后最好立即固定染色, 以免细胞溶解和发生退行性变
（２）观查部位 （３）分类计数的范围和移动规律 （４）计数白细胞数量 （５）注意事项（全片、计数异常和幼稚、其他）
２、质量考核与评价
（四）参考值
白细胞
成年人 新生儿 6月～12岁
(4.0-10)×109/L (15-20)×109/L (6.0-7.0)×109/L
（2）两差比值评价法 （3）双份计数标准差评价法
四、参考值
成人：4-10×109/L 儿童：15-20×109/L 6个月-2岁：11-12×109/L 新生儿：15-20×109/L
五、临床意义
白细胞总数>10×109/L 白细胞总数<4×109/L
增多 减少
二、白细胞分类计数
（differential leukocyte count, DLC)
白细胞检查
武汉大学中南医院检验科 彭剑虹
概述
粒细胞 (granulocyte,GRAN)
白细胞 (white blood cell, WBC)
淋巴细胞 （lymphocyte, L)
单核细胞 (monocyte, M)
中性粒细（neutrophil,N) 嗜酸性粒细(eosinophil,E) 嗜碱性粒细胞(basophil,B)
Nsg(分叶) 50～70% Nst(杆状) 1～5% E 0.5～5% B 0～1% L 20～40% M 3～8%
（五）临床意义 １、白细胞总数和中性粒细胞
⑴中性粒细胞生理性变化
（２）N病理性增多
ａ、反应性增多 ｂ、异常增生性增多 （ 3 ）N减少
ａ、反应性增多
大多感染：（10-30）×109/L 深部感染：> 30×109/L 严重感染：> 50×109/L
红细胞体积分布宽度（Red blood Cell distribution width, RDW）
它是用红细胞直方图分布的宽度比上其高 度来衡量红细胞体积离散程度的指标，正常 参考值为<0.16。
【正 常 值】：＜14.9% 【临床意义】：反应红细胞大小不均程度的指
标，增大多见于缺铁性贫血
结合MCV（红细胞平均体积）进行贫血的形态学分类(六类)
3）恶性肿瘤及白血病：如急、慢性粒细胞白血病、肝癌、 胃癌等
4）其他：如急性有机磷农药中毒、毒菌中毒、尿毒症、 酮症酸中毒等
一、白细胞计数
测定单位体积血液中各种白细胞的总数 （一）方法原理
显微镜法：改良牛鲍计数板 血液分析仪法：
两种方法的比较
计数公式
白细胞数/L=4个大方格内白细胞总数×10 × 20 × 106/4
类白血病
ｂ、异常增生性增多（造血干细胞克隆性疾病）
白血病 （急粒、慢粒） 骨髓增殖性疾病
ｃ、N减少
增殖和成熟障碍 消耗或破坏过多 分布异常
２、嗜碱性粒细胞（0-1％、超敏反应）
增多
３、淋巴细胞（L）（T、B、NK）
增多：绝对值增加
减少：①相对减少 ②绝对减少（<1.0 ×109/L ）
小细胞均一性( MCV↓RDW正常 ) 小细胞不均一性( MCV↓RDW↑) 正细胞均一性( MCV正常,RDW正常 ) 正细胞不均一性( MCV正常RDW↑) 大细胞均一性( MCV↑RDW正常 ) 大细胞不均一性( MCV↑RDW↑ )
地贫 缺铁性贫血 各种慢性疾病所致的贫血 早期缺铁性贫血、营养性贫血 再生障碍性贫血 巨幼红细胞性贫血
Βιβλιοθήκη Baidu
分裂池(mitotic pool)：原粒、早幼粒、中幼粒，可合成 DNA，能分裂
成熟池(maturation pool)：晚幼粒、杆状核
贮备池(storage pool)：部分杆状核、分叶核，成熟后 在贮备池中停留3～5d，其数量约为外周血的5～20倍。 在机体受到感染和其他应激反应时，可释放入循环血液， 正常只释放杆状和分叶核，病情严重时，少量晚幼粒也 能入血。
循环池(circulating pool)：血循环中一半的粒细胞
边缘池(marginating pool)：血循环中另一半的粒细胞 粘附于微静脉血管壁
边缘池与循环池处于动态平衡
外周血白细胞的一般检验的重要项目意义：
1）急性感染或化脓性炎症是中性粒细胞和白细胞升高最 常见的原因。
2）严重组织损伤：如急性心肌梗塞、大面积烧伤、大手 术后、严重的创伤等。
4、单核细胞（M）
增多
三、嗜酸性粒细胞计数
嗜酸性粒细胞（eosinophil,E）来至髓系干细胞分化的 嗜酸性粒细胞祖细胞，该集落形成的因子主要由受抗原刺激 的淋巴细胞产生的，因此E与免疫系统关系密切。 （一）检测原理
手工法 嗜酸性粒细胞/L= (n/10) ×10 ×20 ×106=0.02 ×n109
DLC：将血液制成涂片，经染色后在油镜下进行
分类计数，求得各种类型白细胞的比值（百分率） 和绝对值。
分类计数的意义：反映机体的生理或病理状态
（一）检测原理
传统显微镜分类法（涂片、瑞氏染色、分类比值）
血液分析仪分类计数法
（二）方法学评价
（三）质量保证
１、计数误差 （１）血涂片制备和染色 一张良好的血片,要求厚薄适宜,头体尾分明,分布均匀,
4个大方格内白细胞总数× 50 × 106=白 细胞数/L
（二）方法学评价
（三）质量保证
１、计数误差 （１）技术误差 器材 标本（内因、外因） 操作（盖玻片、充池、计数） （２）固有误差 计数域误差（增加计数面积和细胞数） 计数池误差 吸管误差 （３） 生理状态影响
２、质量考核与评价 （1）经验控制