细胞计数方法
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如何对细胞计数
购买或者培养的细胞密度能够直观的表示细胞的状态,细胞量太少,可能是细胞状态不好,或者细胞本身生长的慢。
那么如何在短时间内判断细胞是否增值呢,这就需要对细胞进行计数。
细胞计数原理:
当待测细胞悬液中细胞均匀分布时,通过测定一定体积悬液中的细胞的数目,即可换算出每毫升细胞悬液中细胞的细胞数目。
操作步骤:
1. 将计数板及盖玻片擦拭干净,并将盖玻片盖在计数板上。
2. 轻轻吹打细胞悬液,使细胞均匀分布。
吸出少许细胞悬液滴在细胞入口,使细胞悬液充满盖玻片和计数板之间,静置1~2min,使细胞沉降。
注意盖玻片下不要有气泡,也避免细胞悬液进入旁边的槽中。
3. 在显微镜下对A/B/C/D四个大格内的细胞进行计数,压在大格四周边线上的细胞只计数压在2条边线上的细胞(如右侧和下方)。
若镜下有2个细胞
组成的细胞团,则应按单个细胞计算;若细胞团数量较多,占细胞总量的10%左右,则说明细胞分散不好会导致计算不准确,需要重新制备细胞悬液。
4. 按公式计数细胞数量:细胞数/mL=四个大格内细胞总数×104/4 (每一个大格的体积为长1mm×宽1mm×高0.1mm=0.1mm3,1mL=1000mm3,因此计算时需×104)。