糖皮质激素药效学实验

Degree of swelling ＝左耳片重量－右耳片重量 5. 资料与统计：汇总全班各组 Degree of swelling，并求出其均值和标准差，然后进行 两样本比较（t 检验），观察给药组和对照组两者间是否有显著性差异。
Group
Degree of swelling Control（N.S）
（三）地塞米松抗炎作用（大鼠足跖浮肿法）
Hale Waihona Puke Baidu（赵丽娟）
Effect of Anti-inflammation of Dexamethasone( Method Swelling on Pediphalanxf of ratts)
【目的和原理】 用一定剂量的致炎剂注入大白鼠后肢足跖皮下或踝部皮下，引起炎性介
1. 2%erythrocyte suspension 的制备： （1）颈总动脉插管（cannula to common carotid artery ）：将家兔仰卧位固定在兔台上， 用普鲁卡因局麻颈部后，切开颈部皮肤，常规分离颈总动脉并插管。 （2）取血：将动脉插管内含 heparin 的血液弃掉后，取新鲜动脉血 5～10ml 置于带有 刻度的离心管中。 （3）去除纤维蛋白：用套有胶皮管的玻璃棒搅拌血液 15～20min，直至纤维蛋白黏附 到搅拌棒上为止，将其弃掉。 （4）洗涤红细胞：将 3～4 倍的 saline 加到置血的离心管中，以 3000rpm 离心 10min， 弃去上清。如此反复 3～4 次，直至上清液无色为止，取 1ml 血球加 saline 稀释至 50ｍl 即 为２％的 erythrocyte suspension。 2. 取带刻度的试管三支，分别加入 1ml２％erythrocyte suspension，于第一试管内加入 saline1ml,于第二试管内加入 0.5％的 hydrocortisone 0.5ml，于第三试管内加入 saline0.5ml， 最后于第二、第三试管内分别加入 0.01％ saponin 0.5ml，立即观察三者结果有何不同。 【实验结果】
糖皮质激素药效学实验
Observing the Pharmacological Effect of Glucocorticoid
【目的和原理】 观察 glucocorticoid 的稳定生物膜的效应及抗炎作用（anti-inflammatory effect）；掌握 erythrocyte suspension 的制备方法及急性炎症模型的建立。
皂苷可与细胞膜上的胆甾醇形成复合物，导致细胞膜去稳定，细胞溶解，从而引起溶血。 Glucocorticoid 的膜稳定作用可对生物膜起到保护作用，从而对抗溶血；glucocorticoid 可抑 制炎性介质的释放调节细胞因子（cytokine）而起到抗炎作用。 （ 一 ） 观 察 氢 化 可 的 松 对 红 细 胞 的 保 护 作 用 （ To observe the protective effect of hydrocortisone on erythrocyte ） 【实验动物】家兔（rabbit） 【实验器材和药品】离心机、离心管、试管、量筒、注射器、可调移液瓶，0.5％的氢化可 的松注射液(hydrocortisone )、0.01％皂苷（saponin）、saline、１％普鲁卡因（procaine）、1% 肝素（heparin）。 【实验步骤和观察项目】
group 1 2 3
erythrocyte suspension 1ml 1ml 1ml
saline 1ml
0.5ml
hydrocortison saponin
0.5ml
0.5ml 0.5ml
result
【思考题】
Glucocorticoid 对细胞膜的保护作用有何临床意义？
（二）观察 hydrocortison 的抗炎作用（ear swelling） 【实验动物】小白鼠，雄性，22～25g 【实验器材和药品】 电子称（electronic scale）、φ为 9mm 打孔器、注射器（injection）、粗 剪刀、微量可调移液管；二甲苯(Dimethylbenzene)、saline、0.5％的氢化可的松(hydrocortison) 注射液。 【实验步骤和观察项目】
1.选用健康大鼠 2 只，分别标记为甲、乙鼠。即 saline 对照组与 dexamethasone 组。 2.甲鼠 ip saline 1ml/㎏体重，乙鼠注射 dexamethasone 1mg/㎏。 3.给药 30min 后分别注射致炎剂：将大鼠放入固定筒内，后肢拉直。于每鼠后足外 踝处用记号笔化一道横线标志。用 4 或 5 号针头，0.25 ml 注射器自足跖中部皮下向上注
5.观察指标为各测量时间点，甲、乙两鼠足 swelling 程度，以测量仪测试的 Bulk 数 值表示。 【注意事项】
1.每次测量足的部位要固定，要求所做记号线必须与玻璃筒内液面线保持一致重叠， 然后记录，避免误差。
2.防止硬物撞击玻璃测量筒，爱护仪器。 【思考题】
Glucocorticoid 抗炎作用机制是什么？ （刘洁、关凤英）
1. 称重分组：每个实验小组取体重相近的小白鼠 2 只，作好标记。 2. 制作病理模型：用微量可调移液管器将 0.02ml Dimethylbenzene 均匀涂在每只小白鼠 左耳正反两面。 3. 给药：制模型 30min 后，其中一只小白鼠 i.p0.5％的 hydrocortison 0.1ml/10g，另一只 小白鼠 i.p 等量的 0.9％saline。 4. 观察与计算：1.5～2.0 h 后，分别将两只小白鼠的左右耳于耳根部剪下，用φ为 9mm 打孔器分别在左耳涂药部位及右耳相同部位打下耳片，分别称重记录并计算肿胀度 （Degree of swelling）。
Hydrocortisone
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
X
SD
P
【注意事项】
1.因 Dimethylbenzene 易挥发，涂抹时室内不要通风。
2.打耳片部位一定要一致，最好由一个人操作完成。
3.每只耳朵涂药量要准确，涂抹范围要一致。
【思考题】 1. Glucocorticoid 抗炎的分子机制。 2. Glucocorticoid 抗炎的利弊分析。
质释放，造成足跖或关节肿胀(swelling)。然后测定足跖或关节的容积（bulk），比较给药组 和对照组的差异,反映药物有无抗炎作用。
【实验动物】 Wistar 大白鼠 体重 120～150g，雌雄兼用。 【 实 验 器 材 和 药 品 】 saline ， 地 塞 米 松 注 射 液 （ dexamethasone injection ）， 角 叉 菜 (carrageenan), 右旋糖苷(dextran), 组胺(histamine) ；足跖容积测量仪，烧杯 100ml,注射 器 0.25ml、1ml, 5 号针头，一蒸馏水，线手套。 【实验步骤和观察项目】
入一部分致炎剂，然后掉转针头向下注完药液（0.1ml/只）。 4.采用容积测量法于给予致炎剂后 10、30、60、120、180、240min 测量鼠足跖肿胀
程度。将鼠后肢拉直放入测量仪玻璃筒内，观察筒内液体水平线与鼠足横线标记处重叠 时，踏动脚踏开关，测量仪数字显示屏将显示足趾容积数值（ml）。此时可按打印键，即 时打印数值；也可以实验结束集中打印。