二轮复习选修一 专题五蛋白质的提取与分离知识点梳理导学案填空

血红蛋白的提取和分离导学案

班级姓名

一、基础

1、蛋白质提取与分离的依据:1.分子的大小2.电荷性质和多少3.溶解度4.吸附性质5.对其他分子亲和力

2、血红蛋白由条肽链组成，包括和；因含而成红色；作用：

2、凝胶色谱法：根据被分离物质的

凝胶①性质：一些微小的多孔球体，球内含许多贯穿的；

②化学本质：化合物，如、糖：

原理：的蛋白质由于扩散作用不进入凝胶颗粒内部，路程，移动速度，先流出，的蛋白质由于扩散作用进入凝胶颗粒内部，路程，移动速度，后流出，依此可对血红蛋白进行分离和纯化。

3、透析法：利用透析袋通过，留下。透析袋一般用又称制成

4、电泳法：利用分离样品中各种分子，使带电分子产生不同的迁移速率，从而实现样品中各种分子的分离。

两种常用电泳法和；测定蛋白质分子量常用

SDS能消除的影响，原因：SDS使蛋白质变成链，SDS所带负电荷大大超过蛋白质分子原有的电荷量，因此掩盖了不同种类蛋白质的，使电泳迁移速率完全取决于

二、蛋白质提取与分离四步

1、样品处理（1）红细胞的洗涤：目的：，洗涤次数过少，无法除去

低速短时离心，防止白细胞和淋巴细胞沉淀

加入，防止血液凝固

缓慢搅拌的目的，防止

（2）血红蛋白的释放：加和40%体积

蒸馏水的作用：甲苯的作用

（3）分离血红蛋白第1层（最上层）：无色透明

离心第2层色薄层固体，物质的层，

第3层：色透明的层

第4层：其它杂质的色层

滤纸的作用：___________________________

分液漏斗的作用是：______________________

2、粗分离（4）透析血红蛋白目的将透析袋放入中

缓冲溶液的作用：模拟细胞内的pH环境，保证血红蛋白的正常和。

3、纯化法①胶色谱柱的制作②凝胶色谱柱的. ③.

观察到红色区域移动，说明色谱柱制作成功

注意：凝胶装填时尽量紧密，均匀，以低凝胶颗粒之间的空隙；

装填凝胶柱时不能有气泡存在。（气泡和空隙会，降低分离效果）液面不要低于凝胶表面，否则可能有气泡混入，影响液体在柱内的流动与最终生物大分子物质的分离效果

不能发生洗脱液，露出凝胶颗粒的现象。

4、纯度鉴定

1.判断常考语句，澄清易混易错

(1)纯化主要是根据蛋白质以及蛋白质与其他物质之间的理化性质的差异进行的()

(2)透析法可去除小分子化合物杂质，原理是不同分子所携带净电荷不同()

(3)通过控制离心速率，可使分子大小、密度不同的蛋白质沉降分层，从而分离不同的蛋白质()

(4)不同的物质在同一电场中的泳动速度不同，因此可用电泳法分离蛋白质()

(5)影响泳动速度的因素包括带电颗粒的性质、电场强度、溶液的pH等()

2.分析命题热图，明确答题要点

下图是用凝胶色谱法分离a、b两种蛋白质的示意图，请分析：

(1)先从层析柱中洗脱出来的是哪种蛋白质？为什么？

(2)d是什么？有什么特点？

(3)层析柱装填时不能有气泡的原因是什么？

4.如图表示血红蛋白提取和分离的部分实验装置，请据图回答下列问题：

(1)血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分，它在红细胞中的

作用体现了蛋白质具有______功能

(2)甲装置中，B是血红蛋白溶液，则A是_____________；乙装置中，C溶

液的作用是______________。

(3)甲装置用于___________ ，目的是_______________________________。

用乙装置分离蛋白质的方法叫__________，是根据__________________分离

蛋白质的有效方法。

(4)用乙装置分离血红蛋白时，待____________________________时，用试管

收集流出液，每5 mL收集一管，连续收集。

10.血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分，负责血液中O2和部分CO2的运输。请根据血红蛋白的提取和分离流程图回答下列问题：

(1)将实验流程补充完整：A为______________，B为_________________。凝胶色谱法是根据_________________________而分离蛋白质的有效方法

(2)洗涤红细胞的目的是去除____________________；离心速度过高和时间过长会使__________一同沉淀，达不到分离的效果。洗涤干净的标志是________________________。释放血红蛋白的过程中起作用的是______________。

(3)某同学利用琼脂糖凝胶电泳技术将得到的蛋白质进行分离，在电泳过程中，影响蛋白质迁移速度的因素包括蛋白质分子的______________、分子的大小、形状等。而另一位同学则利用凝胶过滤分离蛋白质。待蛋白质接近凝胶色谱柱底端时，用试管连续收集流出液。先收集到的蛋白质与后收集到的蛋白质的区别是_________________________________________

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