3D皮肤模型与化妆品体外科学评估

待验证
外周血单核细胞衍生的树突状细胞(PBMDC) ;
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重组人体表皮(RhE)中 IL-18的 效力试验;
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过氧化物酶 肽反应试验 (PPRA) ;
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表皮过敏化分析试验- EpiSensA
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国际体外替代检测方法的发展趋势
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Leabharlann Baidu
毒性终点 眼刺激/腐蚀性
测试方法
牛角膜混浊和渗透性试验 (BCOP) 离体鸡眼试验(ICE) 荧光毒漏出试验 (FL) 短期暴露试验 (STE) 重组人角膜上皮模型试验(RhCE) EpiOcular™ 角膜模型的眼刺激实验(EIT) SkinEthic™眼刺激实验(EIT)（提案） LabCyte 角膜模型（验证中） 微生理仪细胞传感器试验 (CM) 角膜刺激性检测试验（Ocular Irritection®） 三维（3D）半角膜模型 蛞蝓粘膜刺激试验
其他国家相继立法禁止动物实验
加拿大
美国
欧盟*
EC1223
俄罗斯
以色列*
《动物试验法》
印度*
《Rule 148-C》
韩国
中国
中国台湾
日本
巴西 阿根廷
澳大利亚
《终止残忍化妆品法案》 《道德的化妆品法案》
新西兰
《动物福利修正法案》
实施化妆品动物试验/销售禁令的市场（* 全面禁止）
积极开展“终止动物残忍”活动的国家
OECD 442e(2016)
LuSens（角化细胞内ARE受体基因试验）
待同行评议
IL-8记录细胞试验（IL-8 Luc assay ）
同行评议
骨髓U937皮肤刺激性试验（U-SENS）
同行评议
过敏原基因组快速检测(GARD) 试验方法
待验证
利用皮肤模型分析基因试验（The SENS-IS assay）
……
OECD 487*∆ OECD 476 (原1984年采纳的 476 于2015年被分为两个方法：476 和490.) OECD 490 (2015)
计划2016年完成验证。
计划2016年提交法规认可申请。
欧盟率先立法全面禁止动物实验
欧盟法规《EC1223/2009》规定：
2009年立法禁止化妆品动物实验和禁止销售经过动物实验的化妆品原料 2013年3月11日起全面实施
化妆品
新原料/配方
传统方法
• 化学风险评估 • 微生物风险评估 • 动物毒理评估
人体评估
新技术 新模型
体外检测 方法
• 皮肤细胞培养 • 3D模型构建 • 器官芯片技术
•基因水平 •蛋白水平 •细胞组织水平
化妆品体外科学评估
16
第二部分
构建3D皮肤模型
完成系列化3D重组模型的开发
3D表皮模型 EpiKutis
着手立案化妆品动物试验/销售禁令的市场
引自HSI
中国亟待发展体外替代检测体系
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化妆品进出口贸易 技术壁垒
中国化妆品产业发 展与技术升级
新检测技术体系与 市场的发展
消费升级与消费安 全的有力保障
社会经济的发展 与动物福利保护
法规与标准的发展 建立国家竞争力
体外替代检测是中国化妆品产业发展的技术支撑 15
3D皮肤模型与化妆品 体外科学评估
目录 2
1 研究背景 2 构建3D皮肤模型 3 基于3D皮肤模型建立体外替代检测方法
3
第一部分
研究背景
化妆品种类繁多，科学评估是关键
超过67万件化妆品产品
数据来源1：国家食品药品监督管理总局 (CFDA) 数据来源2 : 国家统计局（2015）
化妆品与皮肤的相互作用：安全与功效
人体皮肤
结构与中国人皮肤高度一致，测试与临床结果高度一致
OECD 接受状态 OECD 437∆ OECD 438∆ OECD 460∆ OECD 491 (2015) OECD 492 (2015)
2010年提出草案 EURL ECVAM 审查
国际体外替代检测方法的发展趋势
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毒性终点
测试方法
皮肤吸收
人类离体皮肤吸收试验
光毒性
3T3中性红摄取试验 重组人皮肤模型试验（开发中）
遗传毒性/致突变 细菌回复突变试验
体外哺乳动物染色体畸变试验
OECD 接受状态 OECD 428 *∆ OECD 432*∆
OECD 471*∆ OECD 473*∆
体外哺乳动物细胞微核试验 体外哺乳动物细胞Hprt和xprt基因 突变试验
体外哺乳动物细胞胸苷激酶基因突 变试验 重组3D皮肤模型的微核试验和彗星 试验 人类表皮模型的微核试验
动物实验不能满足评估需求
• 种属、个体差异造成动物实验不能反映人体结果，不科学 • 每年有大量动物被处死，不人道
国际体外替代检测发展先驱——3R理念 8
William M.S. Russell Rex Burch 1959
国际体外替代检测方法的发展趋势
9
毒性终点
测试方法
OECD 接受状态
皮肤刺激/腐蚀 体外重组人体表皮模型- 皮肤腐蚀
3D全层皮肤模型 FulKutis
3D黑素皮肤模型 MelaKutis
3D角膜上皮模型 BioOcullar
含毛囊皮肤模型 FolliKutis
含血管皮肤模型 EndoKutis
含脂肪皮肤模型 AdipoKutis
3D口腔上皮模型 EpiOriis
成功开发国际第一个中国人3D皮肤模型
3D皮肤模型：EpiKutis
传统化妆品毒理学检测项目
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普通化妆品（非特）
特殊用途化妆品
化妆品安全技术规范所列检测项目
急性经口毒性试验 急性经皮毒性试验 皮肤刺激性/腐蚀性试验 眼刺激性/腐蚀性试验
皮肤变态反应 皮肤光毒性试验 鼠伤寒沙门氏菌/回复突变试验 体外哺乳动物细胞染色体畸变试验 体外哺乳动物细胞基因突变试验 哺乳动物骨髓细胞染色体畸变试验 体内哺乳动物细胞微核试验 睾丸生殖细胞染色体畸变试验 亚慢性经口毒性试验 亚慢性经皮毒性试验
OECD 431*∆
体外检测生物膜屏障试验-皮肤腐蚀
OECD 435*∆
体外重组人体表皮模型-皮肤刺激性
OECD 439∆
皮肤致敏
直接肽反应试验(DPRA)
OECD 442c (2015)
ARE-Nrf2荧光素酶试验法(KeratinoSens™)
OECD 442d (2015)
人类细胞系激活试验 (h-CLAT)
致畸试验 慢性毒性/致癌性结合试验
原料
易接触 眼睛类 发用产
品
护肤类
易接触 眼睛类 护肤品
一般彩妆 品
眼部彩妆 品
护唇及 唇部彩 妆品
。。。
育发
染发
烫发
脱毛
美乳
健美 。。。
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化妆品安全技术规范（2015）