小鼠白介素1βIL-1βELISA试剂盒使用方法
白介素1β(IL1b)检测试剂盒 SEA563Hu使用说明书
SEA563Hu96T白介素1β(IL1b)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)适用生物：人使用说明书仅供体外研究使用，不用于临床诊断!第12版（2016年05月修订）[预期应用]本试剂盒运用双抗体夹心ELISA法定量测定人血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清或其它相关生物液体中IL1b含量。
[试剂盒内容]试剂名称数量试剂名称数量96孔板（预包被）196孔板覆膜4标准品2标准品稀释液1×20mL检测溶液A1×120μL检测溶液A稀释液1×12mL检测溶液B1×120μL检测溶液B稀释液1×12mLTMB底物1×9mL终止液1×6mL洗涤液（30×）1×20mL使用说明书1[需自备的设备及试剂]1、450±10nm滤光片的酶标仪（建议仪器使用前提前预热）2、单道或多道微量移液器及吸头3、稀释样品的EP管4、蒸馏水或去离子水5、吸水纸6、盛放洗液的容器7、0.01mol/L（或1×）磷酸缓冲盐(PBS)，pH=7.0-7.2[试剂盒的储存及有效期]1、未开封的试剂盒：所有试剂均按试剂瓶标签上所示保存。
请注意，收到试剂盒后请尽快将标准品、检测溶液A、检测溶液B以及96孔板保存于-20o C，其余试剂请置于4o C保存备用。
2、使用后的试剂盒：剩余试剂仍需按照试剂瓶标签所示的温度保存，此外，请将未使用酶标条用包含干燥剂的铝箔袋装好，并拉紧密封铝箔袋，置于-20o C保存。
注意：试剂盒内酶标条可拆卸，按实验需求可分多次使用；使用后的剩余试剂盒建议在首次实验后1个月内使用完毕。
产品过期时间以盒子上的标签为准，保质期内所有组分都确保是稳定的。
[标本的采集与保存]1、血清：将收集于血清分离管中的全血标本在室温放置2小时或4o C过夜，然后1,000×g离心20分钟，取上清即可，将上清置于-20o C或-80o C保存，避免反复冻融。
白介素-1βELISA定量操作分享
白介素-1βELISA定量操作分享
ELISA常见的标本一般包括：液体类标本（包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等）；培养细胞；组织标本。
那么是不是仅仅有了这些标本，就可以开始ELISA实验了呢？这些标本在收集的时间、方法以及保存条件都有一定的要求，划重点：
1.血清：全血样品于室温放置2小时或4℃过夜后于1000×g离心20分钟，取上清即可检测，收集血液的试管应为一次性的无热原、无内毒素试管。
2.血浆：抗凝剂推荐使用EDTA-2Na，样品采集后30分钟内于1000×g离心15分钟，取上清即可检测。
避免使用溶血，高血脂样品。
3.组织匀浆：用预冷的匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。
4.细胞培养上清：取细胞培养上清于1000×g离心20分钟，除去杂质及细胞碎片。
取上清检测。
5.其它生物样品：如固体生物代谢物，按组织样本处理方法操作，悬浮物应离心去除。
以上为样本的实验前处理方法，如果遇到急事不能立刻用这些新鲜的样本来进行实验的话，那么也无妨，接下来跟大家分享，样本处理后的储存方法，在短时间内是可以应急的，但是还是建议新鲜样本最佳：
ELISA方法类型对比
一般ELISA实验类型有四种，竞争法、间接法、双抗体夹心法、双抗原夹心法，这四种方法有哪些不同，以及各自的优缺点是什么？
Abbkine白介素-1β ELISA定量试剂盒特点如下：
1、高效、灵敏、特异的抗体；
2、定量准确稳定的重复性和可靠性；
3、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相载体；
4、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型；。
ELISA检测试剂盒操作流程
ELISA检测试剂盒操作流程1.准备实验材料和试剂-检验样本：例如血清、尿液、细胞上清液等。
-ELISA试板：根据样本数量选择96孔或384孔的板。
- 试剂盒：包括标准品、washes缓冲液、检测抗体、底物等。
2.样本处理-对于血清等生物液体样本，可用离心将固体物质沉淀并分离下清液。
-样本需储存或运输途中应避免反复冻融。
3.实验板的板液处理-将实验板从包装中取出，将不需要的孔进行盖膜封闭。
- 根据试剂盒说明书，添加适量的板液（Coating Buffer）到每个孔中，使其充分覆盖孔内壁。
-封闭板液的孔，将实验板在2-8℃下放置静置一夜或在37℃下1-2小时孵育。
4.样本添加-倒掉盘液，用PBS或TBST洗板3次，去除残留物。
-将样本加到每个孔中，根据需要添加正样本、负样本和待测样本。
-注意每个样本的剂量和添加的体积，通过试剂盒说明书和实验设计标准控制。
5.抗体添加-清洗步骤同上，将洗板缓冲液加到孔中，重复3次。
-加入检测抗体，根据试剂盒说明书的建议将其添加到孔中。
-要确保抗体的浓度和添加的体积适宜。
6.洗涤-洗涤步骤同上，用洗涤缓冲液洗板，重复3次。
-每次洗涤时，将洗液完全加满孔，静置1分钟，然后倒出洗液。
-注意洗涤时间和洗涤次数的准确控制，以将非特异性结合物质彻底清除。
7.底物添加-清洗步骤同上，将洗液加到孔中，重复3次。
-加入底物，根据试剂盒说明书的建议将其添加到孔中。
-底物液体应完全覆盖孔底，防止反应过程中氧化。
8.反应停止-根据试剂盒说明书，将反应停止液加入到孔中，停止底物的反应。
-注意反应停止液的体积和浓度，以保证反应的准确停止。
9.色谱分析-用ELISA板读板仪读取各个孔的OD值。
-根据试剂盒说明书和实验设计的标准曲线确定样本中目标物质的含量。
-注意设置适当的控制组和标准曲线来保证测量结果的准确性。
总结：ELISA检测试剂盒的操作流程主要包括实验板处理、样本添加、抗体添加、洗涤、底物添加、反应停止和色谱分析。
简述使用elisa试剂盒的操作流程
简述使用elisa试剂盒的操作流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
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人IL-1β ELISA kit说明书
标本收集: 1. 收集血液的试管应为无热原和内毒素试管。 2. 血浆抗凝剂推荐EDTA。 3. 避免溶血，高血脂标本。 4. 标本应清澈透明，悬浮物应离心去除。
1
5. 标本收集后若不及时检测，请按一次用量分装，冻存于－20℃，避免反复冻融。 6. 可根据实际情况，将标本做适当倍数稀释(建议做预实验，以确定稀释倍数) 。
60分钟。 5. 洗板4次。 6. 除空白孔外，加入酶结合物工作液(100ul/孔)。用封板胶纸封住反应孔，37℃孵箱孵育30分
钟。 7. 洗板4次。 8. 加入显色剂100ul/孔，避光37℃孵箱孵育10--15分钟。 9. 加入终止液100ul/孔,混匀后即刻测量OD450值(5分钟内)。
结果判断: 1. 每个标准品和标本的OD值应减去零孔的OD值。 2. 手工绘制标准曲线。以标准品浓度作横坐标，OD值作纵坐标，以平滑线连接各标准品的坐标
灵敏度，特异性和重复性: 1. 灵敏度：最小可测人IL-1β达2pg/ml. 2. 特异性：不与IL－2,3,4,5,6,8,10,12,IFN,TNF及sTNF-RII等反应。 3. 重复性：板内，板间变异系数均<10%.
ELISA试剂盒操作方法
ELISA试剂盒操作方法ELISA（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay）是一种常用的免疫学试验技术，用于检测体内或体外的蛋白质、抗体、抗原等物质。
ELISA试剂盒是用于进行ELISA实验的一种常见装置。
下面将为您介绍ELISA试剂盒的操作方法。
1.准备工作a.预热-将试剂盒中的所有试剂预热到适当的温度，通常为室温至37°C之间。
b.样品处理-准备好待测样品，可以是血清、细胞上清液、组织提取物等。
如果样品中含有大量的蛋白质或杂质，可以进行样品处理，如稀释、蛋白质去除等。
c.标准品准备-试剂盒通常包含一系列浓度已知的标准品，用于制作标准曲线。
按照说明书的要求，用缓冲液或适当的稀释液将标准品稀释为不同浓度的工作液。
2.涂膜板的处理a.涂膜板选择-根据实验需求选择合适的涂膜板，通常有96孔、384孔等。
b.板钉定位-使用板钉或其他适当的方法将涂膜板固定在适当的工作台上。
c.预涂底物溶液加入-将试剂盒提供的预涂底物溶液加入涂膜板的孔中，注意保持各孔液面平整。
3.样品与试剂添加a.标准品和样品加入-按照实验设计的需要，将标准品和待测样品分别加入涂膜板的孔中。
b.阳性对照和阴性对照加入-根据试剂盒的要求，加入阳性对照和阴性对照。
c.洗涤液加入-在每次试剂或样品加入后，使用专用的洗涤液将孔洗涤，以清除无关物质。
4.反应与显色a.结合抗体加入-按照试剂盒说明书要求，加入适当的结合抗体，用于与待测物质结合形成复合物。
b.二抗加入-加入带有底物标记的二抗，与结合抗体结合形成复合物。
c.显色底物加入-加入含有适当底物的显色底物试剂，使底物与酶结合并发出信号。
5.反应停止与测量a.反应停止液加入-在适当的时间点，根据试剂盒的说明，加入反应停止液，停止底物的酶反应。
b.光密封膜或保护板加盖-加盖光密封膜或保护板，防止溶液蒸发或污染。
6.读取和数据处理a.读取吸光度-使用ELISA读板仪读取各孔的吸光度值。
Elabscience 未包被小鼠白介素1β(IL-1β)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书
（本试剂盒仅供体外研究使用，不用于临床诊断！）产品货号：E-UNEL-M0064产品规格：96T*5/96T*15Elabscience®未包被小鼠白介素1β(IL-1β)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书Uncoated Mouse IL-1β(Interleukin 1 Beta) ELISA Kit使用前请仔细阅读说明书。
如果有任何问题，请通过以下方式联系我们：销售部电话************，************技术部电话************具体保质期请见试剂盒外包装标签。
请在保质期内使用试剂盒。
联系时请提供产品批号(见试剂盒标签)，以便我们更高效地为您服务。
用途该试剂盒用于体外定量检测小鼠血清、血浆样本中IL-1β浓度。
试剂盒组成及保存试剂体积以实际发货版说明书为准。
相关试剂在分装时会比标签上标明的体积稍多一些，请在使用时量取而非直接倒出。
其他所需试剂ELISA辅助组分试剂盒(Ancillary Reagent Kit，货号：E-ELIR-K001)：包含完成96T*5规格ELISA实验的全套辅助试剂。
或有其他实验需求，可单独购买以下辅助试剂产品：或自行配制指标通用性辅助试剂。
(注：下列配方均为各试剂的基础组分，可根据实验需求和实验结果对配方进行优化)●包被液：1xCBS●封闭液：1xPBS，保护性蛋白●洗涤液：3%Tris●样本稀释液：1xPBS, 保护性蛋白●抗体/酶结合物稀释液：1xPBS, 保护性蛋白●终止液：5%硫酸试验所需自备物品1.酶标仪(450 nm波长滤光片)2.高精度移液器，EP管及一次性吸头：0.5-10μL, 2-20μL, 20-200μL, 200-1000μL3.37℃恒温箱4.双蒸水或去离子水5.吸水纸6.加样槽样品收集方法(具体处理方法可参考官网：/List-detail-241.html) 1.血清：全血样品于室温放置1小时或2-8℃过夜后于2-8℃，1000×g离心20分钟，取上清即可检测。
白介素1β,IL-1βELISA试剂盒说明书
白介素1β，IL-1βELISA试剂盒说明书白介素1β，IL-1βELISA试剂盒说明书kit规格：48孔配置/96孔配置标准品稀释液：1.5ml×1瓶酶标试剂：3ml×1瓶（48）/6ml×1瓶（96）【白介素1β，IL-1βELISA试剂盒说明书】本试剂仅供研究使用计算：以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD 值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。
试剂盒组成：封板膜:2片（48）/2片（96）说明书:1份密封袋:1个标准品：2700ng/L 0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存酶标包被板: 1×48 1×96 2-8℃保存样品稀释液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存终止液: 3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液:（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存【白介素1β，IL-1βELISA试剂盒说明书】实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人铁蛋白(FE) 水平。
用纯化的人铁蛋白(FE) 抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入铁蛋白(FE) ，再与HRP标记的铁蛋白(FE) 抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的铁蛋白(FE) 呈正相关。
用ELISA试剂盒检测人白介素1β IL-1b 方法步骤
双抗体夹心ELISA法检测样本中IL-1β的浓度检测原理:本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测样本中IL-1β的浓度。
IL-1β捕获抗体已预包被于酶标板上，当加入标本或参考品时，其中的IL-1β会与捕获抗体结合，其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。
当加入生物素化的抗人IL-1β抗体后，抗人IL-1β抗体与IL-1β接合，形成夹心的免疫复合物，其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。
随后加入辣根过氧化物酶标记的亲合素。
生物素与亲合素特异性结合，亲合素连接的酶就会与夹心的免疫复合物连接起来；其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。
最后加入显色剂，若样本中存在IL-1β将会形成免疫复合物，辣根过氧化物酶会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质，在加入终止液后呈黄色。
通过酶标仪检测，读其450nm处的OD值，IL-1β浓度与OD450值之间呈正比，通过参考品绘制标准曲线，对照未知样本中OD值，即可算出标本中IL-1β浓度。
标本收集:1.标本的收集请按下列流程进行操作：A.细胞上清标本离心去除悬浮物后即可；B.血清标本应是自然凝固后，取上清，避免在冰箱中凝固血液；C.血浆标本，推荐用EDTA的方法收集若待测样本不能及时检测；D.标本收集后请分装，冻存于－20℃，避免反复冻融。
2.血清标本不应添加任何防腐剂或抗凝剂；3.标本应清澈透明，检测前样本中如有悬浮物应通过离心去除；4.请勿使用溶血，高血脂或污染的标本检测，否则结果将不准确。
注：正常人血清或血浆样本请用标本缓冲液做倍比稀释后再检测。
注意事项:1.试剂盒请保存在2～8℃。
2.浓缩洗涤液因在低温下可能有结晶，请水浴加热使结晶完全溶解后再配制工作液。
3.若标准品复溶后，请在三天内用完。
4.底物请勿接触氧化剂和金属。
5.加样时，请及时更换枪头，避免交叉污染。
6.严禁混用不同批号的试剂盒组份。
7.充分混匀对保证反应结果的准性很重要，在加液后请轻轻叩击边缘以保证混匀。
8.室温反应，请严格控制在25～28℃。
免疫组化il-1β实验步骤
免疫组化il-1β实验步骤免疫组化（Immunohistochemistry，IHC）是一种用来检测组织中特定蛋白质表达的方法。
IL-1β是一种重要的细胞因子，它在免疫和炎症过程中发挥着重要作用。
进行IL-1β的免疫组化实验需要严格遵循一系列步骤，以确保实验结果的准确性和可靠性。
1. 样本处理，首先，需要准备组织样本，可以是组织切片或细胞培养物。
对于组织样本，需要进行固定、脱水和包埋等处理，以保持样本的完整性和稳定性。
2. 抗体处理，选择合适的IL-1β抗体，确保其特异性和敏感性。
将样本切片或细胞培养物与IL-1β抗体孵育，使抗体与目标蛋白结合。
3. 洗涤，将样本进行洗涤，去除未结合的抗体和其他杂质。
4. 二抗处理，加入与IL-1β抗体结合的二抗，如辣根过氧化物酶（HRP）标记的二抗，以增强IL-1β的检测信号。
5. 显色反应，加入适当的显色底物，使IL-1β呈色反应产生，常用的底物包括DAB（二氧化苯胺）或VIP（维克罗尼亚紫）。
6. 停止反应，在IL-1β显色适当程度后，通过停止反应来终止显色过程，常用的方法是将样本浸入脱离液中。
7. 脱水和封片，对样本进行脱水、透明化处理，并最终封片，以便于显微镜观察和图像获取。
需要注意的是，在整个实验过程中，需要严格控制实验条件，包括温度、时间、试剂浓度等，以确保实验的重复性和可比性。
此外，还需要进行负对照和阳性对照实验，以验证实验结果的准确性和特异性。
总之，IL-1β的免疫组化实验是一个复杂而精细的过程，需要熟练的操作和严谨的态度。
通过严格遵循上述步骤，可以获得准确可靠的IL-1β表达情况，为相关研究提供重要的实验数据支持。
ELISA检测试剂盒使用指南
ELISA检测试剂盒使用指南ELISA（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay）是一种常用的免疫学实验技术，用于检测体内特定抗原或抗体的存在和浓度。
ELISA检测试剂盒是用于进行ELISA实验的组合套装，包括抗体或抗原、酶标记物、底物、缓冲液等。
本文将介绍ELISA检测试剂盒的使用指南，以帮助用户顺利进行ELISA实验。
1.准备实验材料：-ELISA检测试剂盒：根据实验需要选择适当的ELISA检测试剂盒，确保其在储存和运输过程中无损坏。
-样本：准备需要检测的样本，如血清、尿液、组织提取物等。
确保样本的质量和浓度满足实验要求。
-微孔板：根据试剂盒的要求选择合适的微孔板，同时注意其质量有无污染。
-基本实验设备：如计量器、洗板机、显微镜等。
2.实验步骤：-取出储存在4℃的试剂，确保其达到室温（一般为20-25℃），再根据实验步骤进行下一步操作。
-预处理样本：根据试剂盒的说明书，进行样本的预处理，包括稀释、纯化、稳定化等步骤。
-加样：将样本按照试剂盒要求的体积加入微孔板中，通常每个孔需要加入100-200μL的样品。
-洗板：使用洗板机或手工操作，将孔中的杂质洗净。
洗板时应注意洗涤缓冲液的使用浓度和洗涤次数。
-加入特异性抗体：根据试剂盒的说明书，将稀释好的特异性抗体加入各孔中，确保操作的准确性和每孔的稀释倍数。
-洗板：重复第4步的操作，将未结合的抗体洗净。
-加入酶标记物：根据试剂盒的说明书，将稀释好的酶标记物加入各孔中，确保加入的量准确无误。
-洗板：重复第4步的操作，将未结合的酶标记物洗净。
-加入底物：将稀释好的底物加入各孔中，使其与酶标记物反应，生成可视化的颜色。
-终止反应：根据试剂盒的要求，在一定的反应时间后，加入终止剂停止反应。
终止剂的选择需符合试剂盒的要求。
-检测结果：使用酶标仪或目视观察检测孔中的颜色变化，通过测量吸光度或颜色强度来确定样本中目标物的浓度。
3.数据分析：-计算样本的结果：根据试剂盒的说明书，根据吸光度或颜色强度测量结果，计算样本中目标物的浓度。
elisa 试剂盒操作步骤
操作步骤1．取出试剂盒室温平衡30min，取出血样放至室温。
2．配标准品：取150uL标准品加入150uL标准品稀释液稀释，依次稀释5次。
3．加样：分别于各反应孔中加入标准品50uL，样品40UL，标准品做复孔，样品做3孔。
4．分别于样品孔中加入10UL抗体。
5．标准品和样品孔中分别加入50uL链酶亲和素-HRP，盖上封板膜,轻轻震荡混匀，37℃温育60min。
6．配洗涤液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。
7．洗涤：小心揭开封板膜，弃去液体，甩干，每孔加200uL洗涤液，静置30s后弃去，如此重复5次，拍干。
8．显色：每孔先加入显色剂A 50uL，再加显色剂B 50uL，轻轻震荡混匀，37℃避光显色6min。
9．终止：每孔加入终止液50uL，终止反应（此时蓝色立即转为黄色）。
10．测定：以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度。
测定应在加终止液10min 之内进行。
22．保存结果，收拾桌面。
12．分析处理数据注意事项1. 取出板条前恢复到室温后再打开外包装袋，实验中不用的板条立即放回包装中，密闭封口，其余不用试剂应盖好。
2. 实验操作中请使用一次性的吸头，避免交叉污染。
3．实验板孔加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应孔的孵育时间一致。
4．洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干，勿将滤纸直接放入反应孔中吸水。
5．试剂盒内试剂请在保质期内使用，不同批号试剂不要混用。
6．1000pg/ml以上的结果为非线性的，根据此标准曲线无法得到精确的结果。
大于1000pg/ml 的样品应以标准稀释缓冲液稀释后重做。
在结果分析时，结合考虑相应的稀释度。
ELISA 检测试剂盒 说明书
本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断小鼠小鼠（（MouseMouse））肿瘤坏死因子可溶性受体肿瘤坏死因子可溶性受体ⅠⅠ（TNFsR-TNFsR-ⅠⅠ）ELISA检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。
往预先包被肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅰ（TNFsR-Ⅰ）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。
用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅰ（TNFsR-Ⅰ）呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法1.血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2.血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。
3000转离心30分钟取上清。
3.细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4.组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。
3000转离心10分钟取上清。
5.保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品1.酶标仪（450nm）2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒温箱操作注意事项1.试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。
从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。
4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5.所有液体组分使用前充分摇匀。
达优人 IL-1β ELISA 试剂盒说明书
产品信息和操作指南Human IL-1β预包被 ELISA kit Cat# : DKW12-1012-048 / DKW12-1012-096本试剂盒专用于科研，而非用于诊断Human IL-1βDKW12-1012目录产品简介 (1)知识背景 (1)试剂盒提供的试剂 (2)需要实验者自行准备的试剂与仪器 (2)注意事项 (3)试剂的配制 (5)操作过程 (7)结果分析 (9)试剂盒的保存 (9)操作步骤一览表 (10)参考文献 (11)ELISA测定中可能会出现的问题及解决方法 (12)预包被ELISA 试剂盒系列产品 (15)1、产品简介：达优®人IL-1β ELISA试剂盒是通过酶联免疫吸附技术，体外定量检测人血清、血浆、缓冲液或细胞培养液中的IL-1β，可同时检测天然的和重组的IL-1β。
本试剂盒为预包被板，“夹心一步”完成，整个过程孵育时间不超过4小时，洗涤6次，操作时间大大减少。
本试剂盒专用于科研，而非用于诊断。
使用前请仔细阅读说明书并检查试剂盒组分，若有任何疑问请与达科为生物工程有限公司联系，E-mail：*************.检测范围：500-15.6 pg/mL灵敏度：5 pg/mL重复性：板内、板间变异系数均＜10％。
2、知识背景：白细胞介素-1（Interleukin-1，IL-1）家族蛋白包括IL-1α、IL-1β和IL-1受体拮抗物。
除了皮肤角质化细胞、一些上皮细胞和中枢神经系统的一些细胞之外，IL-1并不在健康个体的未经刺激的细胞中分泌。
生理条件下IL-1的浓度仅在10-12-10-14M之间。
然而，为了应对刺激（如炎症物质、感染、细菌性内毒素），巨噬细胞和各种其它类型的细胞的IL-1分泌量将大大增加（1-4）。
3、试剂盒提供的试剂：试剂规格配制Cytokine standard 2/1瓶* 干粉状，按瓶上说明操作Biotinylated antibody 2/1瓶* 1：50用Dilution buffer R（1×）稀释Streptavidin-HRP 2/1瓶* 1：100用Dilution buffer R（1×）稀释Dilution buffer R（1×） 3/2瓶* 即用型Washing buffer（50×）1瓶 150∶用蒸馏水稀释TMB 1瓶即用型Stop solution 1瓶即用型Precoated ELISA plate 8×12或8×6*即用型封板膜 2/1张* 即用型说明书1份*：96/48 Tests4、需要实验者自行准备的试剂与仪器：1．酶标仪（建议参考仪器使用说明提前预热）2．微量加液器及吸头：P10，P50，P100，P200，P1000 3．蒸馏水或去离子水4．全新滤纸5．旋涡振荡器和磁力搅拌器5、注意事项：1.试剂应按瓶上标签说明储存，使用前室温平衡20-30分钟。
人白介素1β (IL-1β)操作流程
人白介素1β(IL-1β)酶联免疫分析试剂盒使用说明书产品编号：1910221本试剂盒仅供体外研究使用!预期应用ELISA法定量测定人血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中白介素1β(IL-1β)含量。
实验原理用纯化的抗体包被微孔板，制成固相载体，往包被抗IL-1β抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗IL-1β抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。
TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的IL-1β呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制1. 酶联板：一块（96孔）2. 标准品（冻干品）：2瓶，每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml，盖好后静置10分钟以上，然后反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为1,000 pg/ml，做系列倍比稀释(注：不要直接在板中进行倍比稀释)，分别稀释1,000 pg/ml，500 pg/ml，250 pg/ml，125 pg/ml，62.5 pg/ml，31.2 pg/ml，15.6 pg/ml，样品稀释液直接作为标准浓度0 pg/ml，临用前15分钟内配制。
如配制500 pg/ml标准品：取0.5ml（不要少于0.5ml）1,000 pg/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3. 样品稀释液：1×20ml。
4. 检测稀释液A：1×10ml。
5. 检测稀释液B：1×10ml。
6. 检测溶液A：1×120μl（1:100）临用前以检测稀释液A 1:100稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制（100μl/孔），实际配制时应多配制0.1-0.2ml。
如10μl检测溶液A加990μl检测稀释液A的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。
Mouse Interleukin 1β (IL-1β) ELISA Kit(说明书翻译)
Mouse Interleukin 1β (IL-1β) ELISA KitCatalog Number. CSB-E08054mFor the quantitative determination of mouse interleukin 1β (IL-1β) concentrations in serum, plasma, cell culture supernates, tissue homogenates.用于定量测定血清，血浆，细胞培养上清，组织匀浆中小鼠白介素1β（IL-1β）的浓度。
This package insert must be read in its entirety before using this product.使用本产品前，必须完整阅读本包装说明书。
In order to obtain higher efficiency service, please ready to supply the lot number of the kit to us (found on the outside of the box).为了获得更高效率的服务，请准备好向我们提供套件的批号（位于包装箱的外部）。
PRINCIPLE OF THE ASSAYThis assay employs the quantitative sandwich enzyme immunoassay technique. Antibody specific for IL-1β has been pre-coated onto a microplate. Standards and samples are pipetted into the wells and any IL-1β present is bound by the immobilized antibody. After removing any unbound substances, a biotin-conjugated antibody specific for IL-1β is added to the wells. After washing, avidin conjugated Horseradish Peroxidase (HRP) is added to the wells. Following a wash to remove any unbound avidin-enzyme reagent, a substrate solution is added to the wells and color develops in proportion to the amount of IL-1β bound in the initial step. The color development is stopped and the intensity of the color is measured.该测定采用定量夹心酶免疫测定技术。
大鼠白介素-1ELISA试剂盒说明书
导致试验失败。
-1-
本试剂盒只作为实验室研究使用，不得作为临床诊断的依据
Enzyme Linked Immunosorbent Assay [ELISA]
大鼠白细胞介素 1β[IL-1β]酶联免疫分析试剂盒使用说明书
5 该试剂盒内不包含有传染性试剂。 6 不要混用不同指标不同批号的试剂和包被微孔板。 7 试验过程中试剂和待测样品均应充分混匀。 8 包被微孔板应放置 2-8℃干燥保存，避免受潮。 9 如有剩余试剂请放置 2-8℃冷藏保存。 10 试验过程要严格按照说明书操作，先后顺序不得颠倒。 11 如果样品量较大应注意加样时间，避免加样过慢或间隔时间过长。 12 使用和贮存底物Ⅱ时应注意避光。 13 终止液含有酸性成分具有腐蚀性，勿将其溅落到皮肤或衣服上。如有该情况发生应
分析过程
实验前处理步骤
1 试验前将试剂和待测样品放置室温下平衡[20-25℃]充分混匀。并确定好本次检测 所需的酶标板孔数目，将所需要的微孔放置到配套板架上。
2 按照要求用蒸馏水或纯净水来稀释浓缩清洗液，充分混匀后备用。 3 将本次实验所需微孔做好相应标记，[如有需要做空白对照孔可预留一孔作为空白
对照孔备用]，最好采用双孔平行加样。
大鼠白细胞介素 1β[IL-1β]酶联免疫分析试剂盒使用说明书
试剂盒各项性能指标综述
1 最低检测限：1.0pg/mL。 2 板内批间差异：≤ 6% 3 以标准品浓度及其测定吸光度值拟合出线性回归曲线的相关系数 r≥0.98 4 失效期限：6 个月[具体日期以试剂盒外盒标签为准] 5 由于现有的科学和条件我们还不能对所有原材料进行更全面的鉴定和分析，故本产品可
四正柏生物 人IL-1β ELISA试剂盒说明书
REV20190716仅供研究，不用于临床诊断。
客服热线: 400-7060-959﹡技术支持邮箱: **************公司官网: 目录简介 ......................................................................................................................................................................... - 3 -检测原理 ................................................................................................................................................................. - 3 -试剂盒组分 ............................................................................................................................................................. - 4 -储存条件 ................................................................................................................................................................. - 5 -其他实验材料 ......................................................................................................................................................... - 5 -注意事项 ................................................................................................................................................................. - 5 -样本收集处理及保存方法 ..................................................................................................................................... - 6 -试剂准备 ................................................................................................................................................................. - 6 -操作步骤 ................................................................................................................................................................. - 8 -操作流程图 ............................................................................................................................................................. - 8 -操作要点提示 ......................................................................................................................................................... - 9 -结果判断 ................................................................................................................................................................. - 9 -结果重复性 ........................................................................................................................................................... - 10 -灵敏度 ................................................................................................................................................................... - 10 -特异性 ................................................................................................................................................................... - 10 -参考文献 ............................................................................................................................................................... - 10 -该产品由北京四正柏生物科技有限公司研制。
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小鼠白介素1β (IL-1β)ELISA试剂盒使用方法
检测范围：96T
2.5ng/L-80ng/L
使用目的：
本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中白介素1β (IL-1β)含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠白介素1β (IL-1β)水平。
用纯化的小鼠白介素1β (IL-1β)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入白介素1β (IL-1β)，再与HRP标记的白介素1β (IL-1β)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的白介素1β (IL-1β)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中小鼠白介素1β (IL-1β)浓度。
标本要求
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤
1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀
2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、
待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。
加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用
5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此
重复5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7.温育：操作同3。
8.洗涤：操作同5。
9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色
15分钟.
10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。
测定应在加终止
液后15分钟以内进行。
操作程序总结：
计算
以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。
注意事项
1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。
一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4．请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。
如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。
5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物请避光保存。
7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9．本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。
保存条件及有效期
1．试剂盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6个月。