人表皮生长因子elisa试剂盒使用方法

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人血管内皮细胞生长因子(VEGF)定量检测试剂盒(ELISA)

本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断。

人血管内皮细胞生长因子（VEGF）定量检测试剂盒（ELISA）使用说明书【试剂盒名称】人血管内皮细胞生长因子（VEGF）定量检测试剂盒（ELISA）【试剂盒用途】定量检测人子血清、血浆及相关液体样本中血管内皮细胞生长因子（VEGF）的含量。

【检测原理】本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法（ELISA）。

将标准品、待测样本加入到预先包被人血管内皮细胞生长因子（VEGF））多克隆抗体透明酶标包被板中，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分，再加入酶标工作液，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分。

依次加入底物A、B，底物（TMB）在辣根过氧化物酶（HRP）催化下转化为蓝色产物，在酸的作用下变成黄色，颜色的深浅与样品中人血管内皮细胞生长因子（VEGF））浓度呈正相关，450nm波长下测定OD值，根据标准品和样品的OD值，计算样本中人血管内皮细胞生长因子（VEGF））含量。

【试剂盒组成】1 酶标包被板12孔×8条7 底物夜A6mL2 标准品：1600pg/ml0.6mL 8 底物夜B6mL3 20倍浓缩洗涤液20mL9 终止液6mL4 标准品稀释液6mL10 说明书1份5 样本稀释液6mL 11 封板膜1张6 酶标试剂6mL12 密封袋1个备注：标准品用标准品稀释液依次稀释为：1600、800、400、200、100、50pg/ml【需要而未提供的试剂和器材】1、37℃恒温箱2、标准规格酶标仪3、精密移液器及一次性吸头4、蒸馏水5、一次性试管6、吸水纸【操作步骤】1、准备：从冰箱取出试剂盒，室温复温平衡30分钟。

2、配液：用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。

3、加标准品和待测样本：取足够数量的酶标包被板，固定于框架上，分别设置标准品孔、待测样本孔和空白对照孔，记录各孔位置，在标准品孔中加入标准品50μL；待测样本孔中先加入待测样本10μL，再加样本稀释液40μL（即样本稀释5倍）；空白对照孔不加。

简述使用elisa试剂盒的操作流程

简述使用elisa试剂盒的操作流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。

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人血管内皮生长因子 ELISA 试剂盒说明书

产品说明书人血管内皮生长因子ELISA试剂盒（Human VEGF ELISA KIT）产品货号：H6139S, H6139M, H6139L产品规格：24T, 48T, 96T产品内容：注：终止液和显色剂具有腐蚀性，一旦接触到液体，请尽快用大量清水冲洗。

储存条件4℃避光保存，有效期见外包装。

开封后，保存温度详见说明书。

产品介绍Human VEGF ELISA Kit (Human Vascular Endothelial Cell Growth Factor Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit) ，即人血管内皮生长因子ELISA试剂盒，可以定量检测人血清、血浆或细胞培养上清液等样本中的天然和重组VEGF浓度。

人VEGF是由两个相同亚基以二硫键交联组成的二聚体糖蛋白，基因定位于第6号染色体长臂，由8个外显子和7个内含子交替构成，约14 kb。

由于mRNA剪接方式不同，产生了单链分别含121，145，165，183，189和206个氨基酸的不同变异体。

VEGF 121分子量约为34-46 kDa，是可溶性分泌型蛋白质，以游离状态存在，不能与肝素结合；VEGF 165分子量为45 kDa，30-50%以可溶性形式分泌于细胞外基质，其余部分与细胞膜、基底膜或细胞外基质含有肝素的糖蛋白结合。

VEGF 145存在于胎盘细胞和女性生殖道肿瘤细胞。

VEGF 189及VEGF 206分泌后完全结合于细胞膜或基底膜含有肝素的糖蛋白上。

骨骼肌，心肌，肝细胞，成骨细胞，中性粒细胞，巨噬细胞，角质形成细胞，血小板，褐色脂肪组织，CD34+细胞，星形细胞，神经元和内皮细胞等多种细胞和组织均可产生VEGF。

血清和血浆样本均可检测到VEGF，由于血小板可释放VEGF，因此血清中VEGF含量较高。

VEGF是一种特异作用于血管内皮细胞的多功能细胞因子，可增加血管通透性、促进血管形成、引起细胞外基质成分改变等。

ELISA试剂盒操作方法

ELISA试剂盒操作方法ELISA（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay）是一种常用的免疫学试验技术，用于检测体内或体外的蛋白质、抗体、抗原等物质。

ELISA试剂盒是用于进行ELISA实验的一种常见装置。

下面将为您介绍ELISA试剂盒的操作方法。

1.准备工作a.预热-将试剂盒中的所有试剂预热到适当的温度，通常为室温至37°C之间。

b.样品处理-准备好待测样品，可以是血清、细胞上清液、组织提取物等。

如果样品中含有大量的蛋白质或杂质，可以进行样品处理，如稀释、蛋白质去除等。

c.标准品准备-试剂盒通常包含一系列浓度已知的标准品，用于制作标准曲线。

按照说明书的要求，用缓冲液或适当的稀释液将标准品稀释为不同浓度的工作液。

2.涂膜板的处理a.涂膜板选择-根据实验需求选择合适的涂膜板，通常有96孔、384孔等。

b.板钉定位-使用板钉或其他适当的方法将涂膜板固定在适当的工作台上。

c.预涂底物溶液加入-将试剂盒提供的预涂底物溶液加入涂膜板的孔中，注意保持各孔液面平整。

3.样品与试剂添加a.标准品和样品加入-按照实验设计的需要，将标准品和待测样品分别加入涂膜板的孔中。

b.阳性对照和阴性对照加入-根据试剂盒的要求，加入阳性对照和阴性对照。

c.洗涤液加入-在每次试剂或样品加入后，使用专用的洗涤液将孔洗涤，以清除无关物质。

4.反应与显色a.结合抗体加入-按照试剂盒说明书要求，加入适当的结合抗体，用于与待测物质结合形成复合物。

b.二抗加入-加入带有底物标记的二抗，与结合抗体结合形成复合物。

c.显色底物加入-加入含有适当底物的显色底物试剂，使底物与酶结合并发出信号。

5.反应停止与测量a.反应停止液加入-在适当的时间点，根据试剂盒的说明，加入反应停止液，停止底物的酶反应。

b.光密封膜或保护板加盖-加盖光密封膜或保护板，防止溶液蒸发或污染。

6.读取和数据处理a.读取吸光度-使用ELISA读板仪读取各孔的吸光度值。

biosharp 人IL-2 ELISA 试剂盒使用说明书

一、产品简介 �� 二、检测原理 �� 三、试剂盒组分 �� 四、储存条件 �� 五、注意事项 �� 六、其它实验材料 �� 七、使用说明 �� 7.1、样品收集、处理及保存方法 �� 7.2、试剂准备 �� 7.3、操作步骤 �� 7.4、操作流程图 �� 7.5、操作要点提示 �� 7.6、结果判断 �� 八、常见问题分析及解决 �� 2 2 3 3 3 4 4 4 4 5 6 6 6 8目录全国统一热线：400-600-4213 Elisa试剂盒使用说明书本试剂盒用于定量检测人血清、血浆或细胞培养上清液等样本中天然和重组IL-2浓度。

使用前请仔细阅读说明书并检查试剂组分，如有任何疑问请与北京兰杰柯科技有限公司或经销商联系，公司将为您提供强有力的技术支持。

仅供研究，不用于临床诊断。

二、检测原理本实验采用双抗体夹心ELISA，用抗人IL-2单克隆抗体预包被酶标板，加入适度稀释的样本和标准品，其中IL-2会与其单抗结合，洗去游离成分；加入生物素化的抗人IL-2抗体，抗人IL-2抗体与结合在单抗上的人IL-2结合而形成免疫复合物，洗去游离的成分；加入辣根过氧化物酶标记的亲合素，生物素与亲合素特异性结合，洗去未结合的酶结合物；加入显色剂，若反应孔中有IL-2，辣根过氧化物酶会使无色的显色剂现蓝色；加终止液变黄。

人 BMP-2 ELISA试剂盒说明书

人BMP-2ELISA试剂盒Human BMP-2ELISA kitCat#：EHC172尊敬的客户，感谢您选用本公司QuantiCyto®ELISA系列产品。

本产品选用世界著名生产厂家的原料，采用专业体外诊断试剂生产技术制造，仅供科研使用。

本产品可检测血清、血浆、细胞培养上清液、灌洗液、尿液、羊水、腹水、脑脊液、胸腔积液、组织匀浆液等多种类型样本中天然和重组人BMP-2浓度，具体适用样本请咨询。

使用前请仔细阅读说明书并检查试剂组分。

如有疑问，请联系欣博盛生物科技有限公司。

Email:**********************，全国服务热线: 4006800892。

QuantiCyto ®EHC172Human BMP-22试剂盒组成：名称48T 96T 抗体预包被酶标板8×68×12冻干标准品5ng /支×2支5ng /支×3支标准品&标本通用稀释液12ml×1瓶20ml×1瓶浓缩生物素化抗体1支（规格见标签）1支（规格见标签）生物素化抗体稀释液10ml×1瓶16ml×1瓶浓缩酶结合物1支（规格见标签）1支（规格见标签）酶结合物稀释液10ml×1瓶16ml×1瓶浓缩洗涤液20×25ml×1瓶50ml×1瓶显色底物（TMB ）6ml×1瓶12ml×1瓶反应终止液具腐蚀性6ml×1瓶12ml×1瓶封板胶纸3张6张产品说明书1份1份储存条件：未开封完整试剂盒4℃保存，请在保质期内使用。

已开封试剂盒抗体包被板条未用完的板条放回带拉链铝箔袋，封好口。

4℃条件下可储存1个月左右。

标准品冻干粉-20℃可储存6个月左右。

稀释后的标准品使用后请丢弃。

浓缩生物素化抗体浓缩液4℃可储存1个月左右，稀释后即用即弃。

浓缩酶结合物（避光）标准品&标本通用稀释液4℃条件下，可储存1个月左右。

人(Human)转化生长因子β(TGF-β)-NEWA

本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断人（人（Human Human Human））转化生长因子转化生长因子ββ（TGF-β）ELISA 检测试剂盒使用说明书检测原试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。

往预先包被转化生长因子β（TGF-β）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。

用底物TMB 显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的转化生长因子β（TGF-β）呈正相关。

用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

样品收集、处理及保存方法1.血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2.血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。

3000转离心30分钟取上清。

3.细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4.组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。

3000转离心10分钟取上清。

5.保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

自备物品1.酶标仪（450nm）2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒温箱操作注意事项1.试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。

从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。

2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。

3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。

4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。

5.所有液体组分使用前充分摇匀。

试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注：标准品（S0-S5）浓度依次为：0、200、400、800、1600、3200pg/mL试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。

人胎盘生长因子(PLGF)ELISA试剂盒操作步骤

人胎盘生长因子（PLGF）ELISA试剂盒操作步骤试剂盒本试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）.已知待测物质浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。

先将待测物质和生物素标记的抗体同时温育。

洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。

再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。

产生颜色。

颜色的深浅和样品中指标的浓度呈比例关系。

试剂盒内容及其配制：试剂盒成份96孔配置48孔配置96/48人份酶标板1块板（96T）半块（48T）塑料膜板盖1块半块标准品1瓶（1.0ml）1瓶（0.5ml）空白对比1瓶（1.0ml）1瓶（0.5ml）标准品稀释缓冲液1瓶（8.0ml）1瓶（4.0ml）生物素标记抗体1瓶（8.0ml）1瓶（4.0ml）亲和链酶素HRP 1瓶（12ml）1瓶（6.0ml）洗涤缓冲液1瓶（20ml）1瓶（10ml）底物A1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）底物B1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）停止液1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）自备料子：1．蒸馏水。

2．加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。

3．振荡器及磁力搅拌器等。

样品收集、处置及保管方法：1、血清操作过程中躲避任何细胞刺激。

使用不含热原和内毒素的试管。

收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞快速当心地分别。

2、血浆EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。

1000×g离心30分钟去除颗粒。

3、细胞上清液1000×g离心10分钟除颗粒和聚合物。

4、组织匀浆将组织加入适量生理盐水捣碎。

1000×g离心10分钟，取上清液5、保管假如样品不立刻使用，应将其分成小部分70 ℃保管，躲避反复冷冻。

尽可能的不要使用溶血或高血脂血。

假如血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。

不要在37℃或更高的温度加热解冻。

ELISA检测试剂盒使用指南

ELISA检测试剂盒使用指南ELISA（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay）是一种常用的免疫学实验技术，用于检测体内特定抗原或抗体的存在和浓度。

ELISA检测试剂盒是用于进行ELISA实验的组合套装，包括抗体或抗原、酶标记物、底物、缓冲液等。

本文将介绍ELISA检测试剂盒的使用指南，以帮助用户顺利进行ELISA实验。

1.准备实验材料：-ELISA检测试剂盒：根据实验需要选择适当的ELISA检测试剂盒，确保其在储存和运输过程中无损坏。

-样本：准备需要检测的样本，如血清、尿液、组织提取物等。

确保样本的质量和浓度满足实验要求。

-微孔板：根据试剂盒的要求选择合适的微孔板，同时注意其质量有无污染。

-基本实验设备：如计量器、洗板机、显微镜等。

2.实验步骤：-取出储存在4℃的试剂，确保其达到室温（一般为20-25℃），再根据实验步骤进行下一步操作。

-预处理样本：根据试剂盒的说明书，进行样本的预处理，包括稀释、纯化、稳定化等步骤。

-加样：将样本按照试剂盒要求的体积加入微孔板中，通常每个孔需要加入100-200μL的样品。

-洗板：使用洗板机或手工操作，将孔中的杂质洗净。

洗板时应注意洗涤缓冲液的使用浓度和洗涤次数。

-加入特异性抗体：根据试剂盒的说明书，将稀释好的特异性抗体加入各孔中，确保操作的准确性和每孔的稀释倍数。

-洗板：重复第4步的操作，将未结合的抗体洗净。

-加入酶标记物：根据试剂盒的说明书，将稀释好的酶标记物加入各孔中，确保加入的量准确无误。

-洗板：重复第4步的操作，将未结合的酶标记物洗净。

-加入底物：将稀释好的底物加入各孔中，使其与酶标记物反应，生成可视化的颜色。

-终止反应：根据试剂盒的要求，在一定的反应时间后，加入终止剂停止反应。

终止剂的选择需符合试剂盒的要求。

-检测结果：使用酶标仪或目视观察检测孔中的颜色变化，通过测量吸光度或颜色强度来确定样本中目标物的浓度。

3.数据分析：-计算样本的结果：根据试剂盒的说明书，根据吸光度或颜色强度测量结果，计算样本中目标物的浓度。

人表皮生长因子受体 2(EGFR2)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书

（本试剂盒仅供体外研究使用，不用于临床诊断！）产品货号：E-EL-H6083产品规格：96T/48T/24T人表皮生长因子受体2(EGFR2)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书Human EGFR2(Epidermal Growth Factor Receptor 2) ELISA Kit使用前请仔细阅读说明书。

如果有任何问题，请通过以下方式联系我们：销售部电话************，************技术部电话************QQ客服800110755具体保质期请见试剂盒外包装标签。

请在保质期内使用试剂盒。

联系时请提供产品批号(见试剂盒标签)，以便我们更高效地为您服务。

用途该试剂盒用于体外定量检测人血清、血浆或其它相关生物液体中EGFR2浓度。

灵敏度、检测范围、特异性和重复性●灵敏度：18.75pg/mL。

●检测范围：31.25-2000pg/mL。

●特异性：可检测样本中的人EGFR2,且与其它类似物无明显交叉反应。

●重复性：板内，板间变异系数均<10%。

检测原理本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。

用抗人EGFR2抗体包被于酶标板上，实验时样品（或标准品）中的人EGFR2会与包被抗体结合，游离的成分被洗去。

后依次加入生物素化的抗人EGFR2抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素，抗人EGFR2抗体与结合在包被抗体上的人EGFR2结合，生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。

加入显色底物(TMB)，TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。

用酶标仪在450nm波长处测OD值，EGFR2浓度与OD450值之间呈正比，通过绘制标准曲线计算出样品中EGFR2的浓度。

试剂盒组成及保存未拆封的试剂盒可在2-8℃保存一周；如果一周以后才使用试剂盒，请拆开试剂盒并按照下表中的条件分别保存各组分。

试剂体积以实际发货版说明书为准。

相关试剂在分装时会比标签上标明的体积稍多一些，请在使用时量取而非直接倒出。

elisa 试剂盒操作步骤

操作步骤1．取出试剂盒室温平衡30min，取出血样放至室温。

2．配标准品：取150uL标准品加入150uL标准品稀释液稀释，依次稀释5次。

3．加样：分别于各反应孔中加入标准品50uL，样品40UL，标准品做复孔，样品做3孔。

4．分别于样品孔中加入10UL抗体。

5．标准品和样品孔中分别加入50uL链酶亲和素-HRP，盖上封板膜,轻轻震荡混匀，37℃温育60min。

6．配洗涤液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。

7．洗涤：小心揭开封板膜，弃去液体，甩干，每孔加200uL洗涤液，静置30s后弃去，如此重复5次，拍干。

8．显色：每孔先加入显色剂A 50uL，再加显色剂B 50uL，轻轻震荡混匀，37℃避光显色6min。

9．终止：每孔加入终止液50uL，终止反应（此时蓝色立即转为黄色）。

10．测定：以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度。

测定应在加终止液10min 之内进行。

22．保存结果，收拾桌面。

12．分析处理数据注意事项1. 取出板条前恢复到室温后再打开外包装袋，实验中不用的板条立即放回包装中，密闭封口，其余不用试剂应盖好。

2. 实验操作中请使用一次性的吸头，避免交叉污染。

3．实验板孔加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应孔的孵育时间一致。

4．洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干，勿将滤纸直接放入反应孔中吸水。

5．试剂盒内试剂请在保质期内使用，不同批号试剂不要混用。

6．1000pg/ml以上的结果为非线性的，根据此标准曲线无法得到精确的结果。

大于1000pg/ml 的样品应以标准稀释缓冲液稀释后重做。

在结果分析时，结合考虑相应的稀释度。

ELIS操作流程

ELIS操作流程ELISA操作流程（一）、基本操作流程方法一双抗体夹心法（用于检测未知抗原的）1. 包被：用包被液将抗体稀释至蛋白质含量为0.5～20μg／ml，按100ul/孔加入酶标板，4℃包被过夜。

2. 洗板：次日弃去孔内液体，在纸巾上轻轻扣打以吸去残留液体，加入洗涤液（约280-300ul/孔），漂洗2-3次，每次3-5min；3. 封闭：按200-250ul/孔加入封闭液，室温2-3小时或37℃1-2小时，也可4℃封闭过夜，然后弃去孔内封闭液；4. 样品处理：用洗涤液或样品稀释液将待检样品(含未知抗原)稀释至所需浓度；5. 标准液：用洗涤液或样品稀释液将标准液稀释至所需浓度（定性分析可省略本步骤）；6. 加样：按排列顺序依次加入50-100ul/孔稀释好的标准液、处理过的待检样品、阴性对照及阳性对照，室温或37℃孵育30-60min；7. 洗板：同步骤2；8. 加酶标抗体：酶标抗体的稀释按产品说明书，按50-100ul/孔加入新鲜配制的酶标抗体，室温或37℃孵育1小时；9. 洗板：同步骤2；10. 加底物液显色：按100-150ul/孔加入新配制的TMB底物溶液，室温避光反应15～30分钟。

11. 终止反应：于各反应孔中加入50ul的终止液。

12. 结果判定：可于白色背景上，直接用裸眼观察结果，反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。

也可在酶标仪上于450nm(若以ABTS 显色，则410nm)处测OD值。

检测时以空白对照孔调零后测各孔OD 值，若样品孔中的OD值大于阴性对照孔的2.1倍，即为阳性。

方法二间接法（用于检测未知抗体）1. 包被：用包被缓冲液将已知抗原稀释至0.5～20μg／ml，按100ul/孔加入酶标板，4℃包被过夜，次日洗涤2-3次；2. 洗板：次日弃去孔内液体，在纸巾上轻轻扣打以吸去残留液体，加入洗涤液（约280-300ul/孔），漂洗2-3次，每次3-5min；3. 封闭：按200-250ul/孔加入封闭液，室温2-3小时或37℃1-2小时，也可4℃封闭过夜，然后弃去孔内封闭液；4. 样品处理：用洗涤液或样品稀释液将待检样品稀释致所需浓度；5. 标准液：用洗涤液或样品稀释液将标准液稀释至所需浓度（定性分析可省略本步骤）；6. 加样：按排列顺序依次加入50-100ul/孔稀释好的标准液、处理过的待检样品(含未知抗体),阴性对照及阳性对照，室温或37℃孵育30-60min；7. 洗板：同步骤2；8. 加酶标抗体：按50-100ul/孔加入新配制的酶标抗体（抗抗体），室温或37℃孵育1小时；酶标抗体的稀释按产品说明书；9. 洗板：同步骤2；10. 加底物液显色：按100-150ul/孔加入新配制的TMB底物溶液，室温避光反应15～30分钟。

Human β-NGF ELISA Kit 说明书

Humanβ-NGF ELISA Kit检测试剂盒（酶联免疫吸附法）Catalog NumberEK1141-48EK1141-96定量检测血清、血浆和细胞培养上清中的人β神经生长因子(β-NGF)浓度。

本产品仅用于科学研究，非诊断试剂，不能用于临床诊断。

一、产品介绍1.背景介绍神经生长因子(NGF)是一种神经肽，主要参与调节某些靶神经元的生长、增殖和存活。

当表达时，NGF最初是以7S、分子量为130kDa的复合物存在，这个复合物由α-NGF、β-NGF和γ-NGF(2:1:2比例)三个蛋白组成。

“神经生长因子”通常指的是2.5S、分子量为26kDa的β亚基蛋白。

β亚基是7S NGF复合物中唯一一个有生物活性的成分(如作为信号分子)。

NGF在先天性和获得性免疫中都起着重要作用。

研究表明NGF通过血浆在机体中循环，对整体的稳态维持很重要。

NGF可促进髓鞘的修复，亦可参与多种精神疾病，如老年痴呆症、抑郁症、精神分裂症、自闭症、雷特综合征、神经性厌食症，神经性贪食症。

NGF信号失调与阿尔茨海默病有关。

同样，NGF在许多心血管疾病中发挥作用，如冠状动脉粥样硬化、肥胖、2型糖尿病、代谢综合征。

NGF也可促进伤口愈合。

2.检测原理本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测技术。

特异性抗人β-NGF抗体预包被在高亲和力的酶标板上。

酶标板孔中加入标准品、待测样本和生物素化的检测抗体，经过孵育，样本中存在的β-NGF与固相抗体和检测抗体结合。

洗涤去除未结合的物质后，加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素(Streptavidin-HRP)。

洗涤后，加入显色底物TMB，避光显色。

颜色反应的深浅与样本中β-NGF的浓度成正比。

加入终止液终止反应，在450nm波长(参考波长570-630nm)测定吸光度值。

3.试剂盒检测的局限1)请在本试剂盒标示的有效期内使用。

2)试剂盒的试剂不能与其他批号的试剂或其他来源的试剂混合使用。

3)任何标准品稀释、操作人员、移液技术、洗涤技术、孵育温度、试剂盒保存时间的改变，都将影响结合反应。

人表皮生长因子(EGF)Elisa试剂盒使用说明书

人表皮生长因子(EGF)Elisa试剂盒使用说明书供应商：上海乔羽生物有限公司人表皮生长因子(EGF)Elisa试剂盒使用说明书Elisa Kit规格：48孔配置/96孔配置标准品稀释液：1.5ml×1瓶酶标试剂：3 ml×1瓶（48）/6 ml×1瓶（96）【人表皮生长因子(EGF) elisa试剂盒】本试剂仅供研究使用计算：以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。

试剂盒组成：封板膜:2片（48）/2片（96）说明书:1份密封袋:1个标准品：2700ng/L 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶2-8℃保存酶标包被板: 1×48 1×96 2-8℃保存样品稀释液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存终止液: 3ml×1瓶 6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液:（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人表皮生长因子(EGF) 水平。

用纯化的人表皮生长因子(EGF) 抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入表皮生长因子(EGF) ，再与HRP标记的表皮生长因子(EGF) 抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

ELISA检测试剂盒使用指南

ELISA检测试剂盒使用指南ELISA（酶联免疫吸附试验）是一种常用的免疫学实验方法，用于检测病原体、抗体或其他分子的存在和浓度。

它具有高灵敏度、高特异性、易操作和较低成本的优势，被广泛应用于生物医学研究、临床诊断和免疫学领域。

本篇文章将介绍ELISA检测试剂盒的使用指南，包括实验准备、试剂的使用步骤和结果解读。

一、实验准备1.阅读检测项目的说明书：在使用试剂盒前，仔细阅读说明书，了解试剂的使用方法、灵敏度和特异性等关键信息。

2.样本准备：根据实验要求，准备样本。

如果需要检测血清中的抗体水平，可以采集血液样本，离心分离血清；如果需要检测细胞培养上清中的分子，将上清收集，并使其清晰，避免细胞或杂质的污染。

3.样本预处理：根据实验需求，对样本进行必要的预处理。

例如，可以通过加热、稀释、酶解等方式来处理样本，以改变样本组分和浓度。

4.准备品质控制样品：制备阳性和阴性控制样品，用于评估试剂盒和实验操作的稳定性和准确性。

5.实验器材准备：准备所需实验器材，如酶标板、移液器、微孔板洗涤仪等。

确保器材的干净和完整，并按照说明书要求对其进行预处理。

二、试剂使用步骤1.试剂准备：根据说明书要求，将试剂从冰箱中取出，并在室温下放置一段时间使其恢复到室温。

确保试剂瓶盖紧闭，并避免暴露在直接阳光下。

2.实验操作：按照说明书的要求，将试剂加入到酶标板中，并根据实验设计进行标准曲线的设置。

标准曲线用于测量未知样品的数量，并计算出浓度。

3.孵育：根据试剂盒的要求，将酶标板放入孵育箱中进行孵育。

孵育温度和时间应根据实验要求进行调整。

4.洗涤：使用洗涤缓冲液对酶标板上的不特异性结合物进行洗涤。

洗涤过程应准确控制洗涤孔板次数和洗涤液的体积。

5.补液：在洗涤完成后，加入辣根过氧化物酶标况稀释液，促进酶标物与特异性结合物的反应。

6.孵育：根据试剂盒的要求，将酶标板放入孵育箱中进行二次孵育。

7.反应停止：根据试剂盒的要求，加入相应的停止液，停止酶反应。

ELISA试剂盒操作方法

ELISA试剂盒操作方法ELISA（酶联免疫吸附法）是一种常用的实验技术，用于检测目标物（如蛋白质、抗原或抗体）的存在和浓度。

ELISA试剂盒是ELISA实验的核心，包括特定的试剂和材料，用于执行特定的步骤和操作。

以下是一般ELISA试剂盒的操作方法，包含以下步骤：1.准备实验样品：收集所需分析物的样品（例如血清、细胞上清液或组织提取液等），并适当保存或稀释以便后续操作。

2.预处理步骤：根据实验的目的和试剂盒的要求，进行样品的预处理。

这可能包括去除干扰物质、离心、稀释或加热等处理步骤。

3.涂覆酶联免疫板：打开试剂盒中提供的酶联免疫板，将其放置在工作台上。

将涂覆物质（如抗体或抗原）加入到每个酶联免疫孔中，通常使用多通道移液器或微量移液器进行操作。

涂覆后，尽量避免泡沫和交叉污染。

4.触发剂孵育：将涂覆后的酶联免疫板放入孵育箱或板上孵育器中，在适当的温度下孵育一段时间。

此步骤的目的是固定涂覆物质，并优化其活性。

5.洗涤：将试剂盒中提供的缓冲液加入酶联免疫孔中，并倾斜孔盘轻轻敲打或使用洗板仪进行洗涤，以去除未结合的物质和杂质。

通常，洗涤液需要多次更换，充分洗涤以获得更好的准确性和灵敏度。

6. 过量引物（Block）：加入试剂盒提供的阻断缓冲液至孔中，目的是防止非特异性结合的发生。

阻断时间可以根据试剂盒的要求进行调整。

7.加入样品和控制物质：将处理好的样品和控制物质，如阳性对照和阴性对照，加入到各个酶联免疫孔中。

注意要根据试剂盒的要求进行适当的稀释。

8.孵育和洗涤：将孔盘放回孵育箱或板上孵育器中，按照试剂盒的要求进行孵育。

完成孵育后，继续进行洗涤步骤，以去除未结合的物质。

9.检测剂加入：将检测试剂（通常是特异性抗体或酶标记物质）加入酶联免疫孔中。

如有需要，可以进一步稀释试剂以适应实验要求。

10.再次孵育和洗涤：将孔盘放回孵育箱或板上孵育器中，对要求进行的步骤进行孵育。

完成孵育后，进行洗涤步骤以去除未结合的物质。

人重组人表皮生长因子(rh-EGF)说明书

品中的重组人表皮生长因子（rh-EGF）呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度（OD
值），通过标准曲线计算样品中人重组人表皮生长因子（rh-EGF）浓度。试剂盒组成
1 30 倍浓缩洗涤液
20ml×1 瓶
7 终止液
6ml×1 瓶
2 酶标试剂
6ml×1 瓶
8 标准品（2400ng/L） 0.5ml×1 瓶
300 ng/L
3 号标准品
150μl 的 4 号标准品加入 150μl 标准品稀释液
150 ng/L
2 号标准品
150μl 的 3 号标准品加入 150μl 标准品稀释液
75 ng/L
1 号标准品
150μl 的 2 号标准品加入 150μl 标准品稀释液
2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、
3 酶标包被板
12 孔×8 条
9 标准品稀释液
1.5ml×1 瓶
4 样品稀释液
6ml×1 瓶
10 说明书
1份
5 显色剂 A 液
6ml×1 瓶
11 封板膜
2张
6 显色剂 B 液
6ml×1/瓶
12 密封袋
1个
标本要求
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能
马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
大于标准品孔第一孔的 OD 值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n 倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。 5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。 6．底物请避光保存。 7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准. 8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。 9．本试剂不同批号组分不得混用。保存条件及有效期 1．试剂盒保存：；2-8℃。 2．有效期：6 个月

IGF-1测定试剂盒说明书

人胰岛素样生长因子1(IGF-1)Elisa试剂盒说明书检测范围：96T8μg/L -240μg/L使用目的：本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中胰岛素样生长因子-1(IGF-1)含量。

实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人胰岛素样生长因子-1(IGF-1)水平。

用纯化的人胰岛素样生长因子-1(IGF-1)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入胰岛素样生长因子-1(IGF-1)，再与HRP 标记的胰岛素样生长因子-1(IGF-1)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。

TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的胰岛素样生长因子-1(IGF-1)呈正相关。

用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值)，通过标准曲线计算样品中人胰岛素样生长因子-1(IGF-1)浓度。

试剂盒组成：1、30倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2、酶标试剂6ml×1瓶8标准品(480μg/L) 0.5ml×1瓶3、酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4、样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5、显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6、显色剂B液6ml×1瓶12密封袋1个标本要求：1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。

若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3 的样品，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

操作步骤：1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

240μg/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液120μg/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液60μg/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液30μg/L2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液15μg/L1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2. 加样：分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。

ELISA检测试剂盒使用指南

ELISA检测试剂盒使用指南ELISA检测试剂盒使用指南1.简介：1.1 本文档旨在提供ELISA检测试剂盒的详细使用指南，以帮助用户正确、高效地进行ELISA检测。

1.2 ELISA（酶联免疫吸附试验）是一种常用的免疫测定方法，用于检测体液中特定抗原或抗体的存在与浓度。

1.3 本文档将涵盖ELISA检测试剂盒的准备、样本处理、试剂操作、结果读取等详细步骤。

2.准备：2.1 确保实验室环境整洁，无污染。

2.2 检查所需试剂、仪器和设备是否完整，并检查有效期和储存条件。

2.3 根据实验需要，准备所需样本和质控品，并储存于适当的条件下。

3.样本处理：3.1 根据实验目的选择合适的样本类型，如血清、血浆、尿液等。

3.2 根据试剂盒说明书的要求，对样本进行适当的稀释和预处理。

3.3 严格控制操作条件，避免样本污染和交叉污染。

4.试剂操作：4.1 根据试剂盒说明书，将所需试剂从冰箱中取出，并在室温下适当恢复。

4.2 严格按照说明书的要求，对试剂进行稀释和混合。

4.3 操作过程中注意洁净实验台面，避免试剂交叉污染。

5.检测步骤：5.1 将适量的稀释后的样本、质控品和标准品分别装入试管中。

5.2 添加适量的酶标记抗体或底物，并充分混匀。

5.3 按照试剂盒说明书的要求，进行孵育和洗涤步骤。

5.4 添加底物并进行反应，控制反应时间。

5.5 停止反应，并使用酶标仪测量吸光度。

6.结果读取：6.1 根据试剂盒说明书，根据吸光度值和标准曲线，计算样本中目标物质的浓度。

6.2 将测量结果记录，并进行统计和分析。

6.3 评估实验结果的可靠性，并进行结果的解释和报告。

7.注意事项：7.1 严格按照试剂盒说明书的要求进行操作，避免任何操作步骤的误差和误操作。

7.2 注意实验室安全，避免接触有害化学物质，正确使用防护设备。

7.3 在实验过程中遵循生物安全操作规范，避免潜在的感染风险。

此外，本文档涉及附件，请在附件部分查看相关详细信息。

srgn elisa试剂盒使用说明书

srgn elisa试剂盒使用说明书SRGN Elisa试剂盒使用说明书一、引言SRGN Elisa试剂盒是一种用于检测人体内SRGN（serglycin）蛋白含量的工具。

SRGN是一种分布广泛的天然蛋白质，在多种细胞类型中表达，并参与多种生物学过程。

本文将介绍SRGN Elisa试剂盒的使用方法和注意事项。

二、试剂盒组成SRGN Elisa试剂盒包括以下组成部分：1. 微孔板：包含已涂层的SRGN抗体。

2. 标准品：一系列已知浓度的SRGN标准品。

3. 反应液：包括洗涤缓冲液、稀释液、显色液和停止液。

4. 底物：TMB底物。

三、试剂盒的使用步骤1. 取出所需微孔板的数量，将多余的微孔板密封保存。

2. 向每个孔中加入100μL稀释液，轻轻摇晃，将孔底液完全溶解。

3. 倒出孔内的液体，用洗涤缓冲液冲洗孔底3次，每次加入300μL，倒出液体。

4. 向每个孔中分别加入50μL标准品或待测样本，注意避免交叉污染。

5. 加入100μL SRGN抗体，轻轻摇晃，保证孔底液完全溶解。

6. 将微孔板密封，放置于37℃恒温箱中孵育1小时。

7. 倒出孔内的液体，用洗涤缓冲液冲洗孔底3次，每次加入300μL，倒出液体。

8. 向每个孔中加入100μL显色液，轻轻摇晃，保证显色液均匀分布。

9. 将微孔板密封，放置于室温下避光孵育15分钟。

10. 加入50μL停止液，轻轻摇晃。

11. 使用Elisa阅读器在450nm波长下测量各孔的吸光度值。

四、结果分析根据吸光度值绘制标准曲线，计算待测样本中SRGN的浓度。

根据吸光度值和标准曲线的关系，可以通过软件或手动计算得出结果。

五、注意事项1. 试剂盒的保存应在2-8℃下，避免阳光直射和冻结。

2. 打开试剂盒后，应尽快使用，避免试剂的长时间接触空气。

3. 使用试剂盒前，将所有试剂和标本恢复至室温。

4. 各步骤中的孔内液体倒出时，应使用吸头或洗涤器，避免污染。

5. 实验过程中，避免试剂的接触皮肤和眼睛。