荧光原位杂交仪实验报告

荧光原位杂交仪实验报告

实验者：魏兰兰

实验时间：2016/10/18—2016/10/19

一、实验目的

1．探针试剂吸液量定量—10ul；

2．观察探针试剂滴液时是否有残留；

3．观察探针试剂滴液后盖板是否能压紧，是否均匀摊开，石蜡是否能完全浸裹；

4．观察上一步试剂对探针试剂有无影响；

5．观察探针试剂对下一步试剂有无影响；

6．观察37℃恒温16小时后，探针试剂是否挥发；

二、实验器材

1．荧光原位杂交仪

2．10ul取样器

3．一次性枪头

4．探针试剂（墨水稀释液）

三、实验步骤

1．10ul定量：利用10ul取样器确定一次性枪头吸液10ul液面所在的刻度位置，经过多次调整杂交仪柱塞泵电机的吸液步数，最终确定电机的吸液步数为1920时，吸液量恰好是10ul。

2．对反应池1运行以下程序步骤以确定实验目的的2.3.4.6项：

3．对反应池2、5运行以下程序步骤以确定实验目的的2.3.5.6项：

四、实验结果

1．本实验3次吸探针试剂量均在10ul刻度线处；

2．本实验3次滴探针试剂时基本没有残留；

3．本实验3次滴探针试剂后盖板均能压紧，目测无缝隙，石蜡完全

浸裹；

4．反应池1、5的上一步试剂均排液排尽，对探针没有其他影响；

5．反应池2因上一步（二甲苯试剂）排液时恰在中间位置残留大约50ul试剂，导致探针试剂压紧后溢出到盖板外1/4-1/3的液量；

6．由于探针试剂用到石蜡覆盖，排液时石蜡不能完成排尽，故而下一步试剂上还会有部分石蜡覆盖，除此之外无其他影响；

7．反应池1、5经过37℃恒温16小时后，探针试剂基本无挥发且成均匀摊开状；反应池2经过37℃恒温16小时后，探针试剂挥发1/2左右（因有溢出）基本成均匀摊开状。

8．盖板掀开后探针试剂表面有石蜡油，一种可能是实验中扩散到盖板内覆盖探针试剂，另一种可能是盖板掀开后扩散探针试剂表面。