Agilent 1100 HPLC及消耗品简介

组分保留弱或无保留，因此先出峰 组分保留强，因此后出峰
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Agilent Technologies
2003 LC 色谱柱
单元泵
真空脱气机 二元泵
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Agilent 1100 HPLC
系统硬件概观
四元泵
手动进样器
自动进样器 (可选标准、控温、微盘） 柱温箱
质谱检测器
检测器
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手执控制器
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2003 LC 色谱柱
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HPLC连接管线与接头
零死体积接头
PEEK或不锈钢管线或毛细管线构成了LC系统 中的样品流路。 理想的管线：惰性表面，零死体积，紧密无 泄漏的连接。 常见问题：
泄漏或接头松动 压扁或压缩的管线 改变应用
不能使用的接头
2003 LC 色谱柱
溶剂的紫外吸收
Solvent
乙腈 水 环己烷 己烷 甲醇 乙醇 乙醚 二氯甲烷 氯仿 四氯化碳 四氢呋喃 甲苯
UV Cutoff (nm)
190 190 195 200 210 210 220 220 240 265 280 (210) 280
UV 截止波长是吸收等于 1 AU时的波长.
不锈钢滤芯
1/包装 部件号：01018-60025
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2003 LC 色谱柱
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溶剂信息
避免使用下列对不锈钢有腐蚀性的溶剂：
卤化物碱金属溶液和相应的酸溶液。例: 碘化锂, 氯化钾等
高浓度的无机酸例如：硝酸和硫酸。
能够形成卤素自由基或酸的氯化试剂及其混合物。因不锈钢可起 到催化剂的作用
部件号：3150-0577
含：250mL玻璃溶剂瓶, 涂敷有聚四氟乙烯的锥形漏斗底瓶, 锥形 顶部, 1, 000mL烧杯和夹具
聚四氟乙烯滤膜，3150-0509 47mm,10/包,孔径2um
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2003 LC 色谱柱
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2003 LC 色谱柱
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流动相 溶剂准备：过滤
真空
过滤装置
使用HPLC纯溶剂
防止固体颗粒损伤仪器或柱头
使用小于或等于 0.45 m过滤膜.
纤维素滤膜，3150-0576 47mm, 100/包,孔径0.45um
尼龙滤膜，9301-0895 47mm,100/包,孔径0.45um
流动相过滤套件
Gold Seal
Sapphire Insert
Ruby Ball
Spring Insert
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2003 LC 色谱柱
溶剂传输系统
消除流量脉冲－串联柱塞
单向阀
P
脉冲阻尼器
减少了单向阀用量 需要阻尼器 压缩因子补偿来自百度文库
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Agilent 1100 Series Pumps: Solvent Compressibility Compensation
溶剂过滤
不干净的溶剂或在溶剂瓶中长菌的溶剂会阻塞溶剂过滤器，降低泵的操作性能 。
遵从下列建议可以提高性能，延长溶剂过滤器的寿命：
使用无菌溶剂瓶避免溶剂长菌。 用滤膜过滤溶剂去除微生物。 每两天更换或过滤溶剂。 避免溶剂瓶直接日照。
玻璃过滤头
1/包装 部件号：5041-2168
3mm聚四氟乙烯筛板 4/包装 部件号：5062-8517
Piston Displacement (祃)
0
System Pressure>0
System Pressure=0
100
One Piston Cycle
TIME
w/o compensation with compensation
For internal use only 11
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溶剂
分离－基于在固定相与流动相不同的迁移率
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液相色谱类型
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2003 LC 色谱柱
正相 &反相色谱
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正相固定相 溶剂强度 反相固定相
3278
Time, min. Technologies
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Agilent 毛细管管线
颜色
Red Green Blue Orange
内径
用途
0.12 mm 毛细管HPLC分析 <2.1内径色谱柱
0.17 mm 日常分析工作 2.1~4.6内径色谱柱
0.25 mm 0.50 mm
用于半制备工作 9.4内径色谱柱 用于制备色谱 21.2内径色谱柱
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2003 LC 色谱柱
柱外体积的影响
柱外体积
(1µL进样量)
10 µL
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2.1 x 150 mm F = 0.2 mL / min.
20 µL
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2003 LC 色谱柱
Agilent 1100系列单元泵 (G1310A)
瓶头组件 溶剂瓶
泵头 1. 单向阀 2. 冲洗阀 3. 主动阀
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溶剂柜 阻尼器
泵
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泵头结构图（单/四元泵）
5
锁定螺丝 (PEEK)
0.5 mm 内径
5065-9927 5022-6509
体积 [mL] 20.6 29.5
5022-6510 55
5065-9926 157
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2003 LC 色谱柱
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Agilent 1100系列泵
Agilent 1100系列泵,G1310A, G1311A,
可变波长检测器 VWD
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二极管阵列检测器DAD or
多波长检测器MWD
荧光检测器FLD or
示差检测器RID
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2003 LC 色谱柱
堆积配置
优化流路减小死体积 流路自上而下
溶剂柜 脱气机
泵
自动进样器 柱温箱
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0.17 mm 内径
5021-1816 5021-1817 5065-9931 5021-1818 5021-1819 5065-9933 5065-9932
体积 [mL] 2.4 3.4 4.6 6.4 9.1 13.6 15.9
0.25 mm 体积 内径 [mL]
5022-6508 13.8
5065-9930 39.3
2003 LC 色谱柱
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Agilent 1100系列泵
单元泵
常规质量控制分析 简单混合物的分析 用于聚合物分析的体积排阻色谱。 半制备工作
二元泵
有两套完整泵头 高压混合，无需脱气 在低流速下要提高操作性能(0.05~5.0ml/min) ，需要真空脱气机 延迟体积 180-480ul (600-900ul with mixer)
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2003 LC 色谱柱
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HPLC常用的色谱柱接头
Swagelok
Parker Valco
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0.090 in =2.33mm
Waters
0.130 in =3.37mm
0.090 in =2.33mm
Rheodyne
0.170 in =4.40mm
Uptight
0.080 in =2.07mm
0.090 in =2.33mm
Troubleshooting LC Fittings, Part II. LC/GC Magazine 6:788 (1988)
J. W. Dolan and P. Upchurch.
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Agilent 1100 HPLC及消耗品简介
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2003 LC 色谱柱
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高效液相色谱
(HPLC)
固定相－在色谱柱中保持静止的相：如C18，硅胶 流动相－在流经色谱柱时载运样品通过固定相
混合器 泵
进样口 色谱柱
色谱图
检测器
正己烷
水
异辛烷
弱
甲醇
甲苯
异丙醇
氯仿
乙腈
二氯甲烷
丙酮
四氢呋喃
乙酸
乙醚
乙醚
乙酸
四氢呋喃
丙酮
二氯甲烷
乙腈
氯仿
异丙醇
强
甲苯
甲醇
异辛烷
水
正己烷
正相吸附色谱
极性:固定相 > 流动相 固定相 - 极性 流动相(己烷, 庚烷)- 非极性
反相分配色谱
极性:固定相 < 流动相 固定相 - 非极性 流动相(甲醇, 乙醇, 乙腈, THF, 水)- 极性
•定购时的注意事项 管线颜色 +长度 + 接头 = 部件号
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2003 LC 色谱柱
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弹性不锈钢管线
长度 0.12 mm 体积 [mm] 内径 [mL] 105 5021-1820 1.2 150 5021-1821 1.7 200 5065-9935 2.3 280 5021-1822 3.2 400 5021-1823 4.5 600 700 800
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溶剂的相溶性
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Immiscible Miscible
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2003 LC 色谱柱
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溶剂脱气
目的 排除溶解在流动相中的氧气和氮气
脱气方法
He脱气 回流加热脱气 真空脱气 超声脱气
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G1312A, G1354A
和Agilent 1100 系列在线真空脱气装
置
(G1322A)
泵的日常维护：
✓更换密封件与活塞 ✓更换聚四氟乙烯滤芯 ✓更换主动入口阀（AIV)上的滤芯 ✓清洗出口球阀 ✓清洗或更换溶剂入口滤芯
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3 活塞杆 密封垫 (反相） P/N 5063-6589
(正相） P/N 0905-1420
4 防磨损护圈
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四元泵
使用2，4，8mm内径的柱子 流量范围从 0.2 到 10 ml/min 应用于研究和常规分析
真空脱气机为标准配置。
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溶剂传输系统
往复活塞泵(单向阀)
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2003 LC 色谱柱
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准备流动相
流动相应该：
HPLC 级 过滤 (最大0.45 um, 0.2 um最好) 脱气，尤其在低流速时 相溶 注意截止波长/折光指数
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2 34 6
1
7
标准泵维护套件（G1311-68710)：包括出口帽（1），PTFE 滤芯（10），活塞密封圈（4），金密封垫、出口（1），主 动入口阀滤芯（1），入口滤头（2）
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1 蓝宝石活塞杆
P/N 5063-6586
2 支持密封垫组件
P/N 5001-3739
含有过氧化物的色谱级醚必须用氧化铝干燥剂。尤其是使用折光 示差检测器时必须考虑
在有机溶剂中的有机酸溶液。例甲醇中1%乙酸会腐蚀不锈钢 含有强络合剂的溶液。
四氯化碳和异丙醇或THF混合液。
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2003 LC 色谱柱
Name Acetic Acid Acetone Acetonitrile Benzene Butyl Alcohol Carbon Tetrachloride Chloroform Cyclohexane Cyclopentane Dichloroethane Dichloromethane Dimethylformamide Dimethyl Sulfoxide Dioxan Ethylacetate Ethyl Alcohol Di-Ethylether Heptane Hexane Methyl Alcohol Methylethyl Ketone I-Octane Pentane I-Propyl Alcohol Di-Propylether Tetrachloroethane Tetrahydrofuran Toluene Trichloroethane Water Xylene