生物指示剂GMP
生物指示剂GMP
17.9 生物指示剂的管理《中国药典》附录XV n灭菌法中对生物指示剂有较详细的描述。
生物指示剂，简称BI,是一类特殊的活微生物制品，是对特定灭菌工艺有一定耐受性并且能够定量测定灭菌效力的微生物制剂，可用于确认灭菌设备的性能、灭菌程序的验证、生产过程灭菌效果的监控等。
用于灭菌验证中的生物指示剂一般是细菌的孢子。
17.9.1 制备生物指示剂用微生物的基本要求不同的灭菌方法使用不同的生物指示剂,制备生物指示剂所选用的微生物必须具备以下特性：菌种的耐受性应大于需灭菌物品中所用可能污染的耐受性；菌种应无致病性；菌株应稳定,存活期长,易于保存；易于培养。
若使用休眠孢子,生物指示剂中休眠孢子含量要在90%以上。
17.9.2生物指示剂的制备生物指示剂的制备应按一定的程序进行,制备前,需先确定所用微生物的特性，如D值等。
菌株应用适宜的培养基进行培养。
培养物应制成悬浮液，其中孢子的数量应战优势,孢子应悬浮于无营养的液体中保存。
生物指示剂中包含一定数量的一种或多种孢子,可制成多种形式。
通常是将一定数量的孢子附着在惰性的载体上,如滤纸条、玻片、不锈钢、塑料制品等；孢子悬浮液也了密封于安瓶中；有的生物指示剂还配有培养基系统。
D值与灭菌条件相关外,还与微生物存在的坏境有关。
因此,一定形式的生物指示剂制备完成后，应测定D值和孢子总数。
生物指示剂应选用合适的材料包装，并设定有效期。
载体和包装材料在保护生物指示剂不致污染的同时,还应保证灭菌剂穿透并能与生物指示剂充分接触,载体和包装的设计原则是便于贮存、运输、取样、转移接种。
有些生物是指示剂可直接将孢子接种至液体灭菌物或具有与其相似的物理和化学特性的替代品中。
使用替代品时，应用数据证明二者的等效性。
17.9.3 生物指示剂的应用在灭菌程序的验证中，尽管克通过灭菌过程某些参数的监控来评估灭菌效果，但生物指示剂的被杀灭程度，则是评价一个灭菌程序有效性最直观的指标。
克使用市售的标准生物指示剂，也可使用由日常生产污染菌监控中分离的耐受性最强的微生物制备的孢子。
药品GMP检查要点
药品GMP检查要点药品GMP检查要点包括化学药品注射剂GMP检查要点、中药注射剂GMP检查要点、血液制品GMP检查要点、重组产品GMP检查要点、疫苗菌苗GMP检查要点等，遵循以下原则。
一、检查要与品种相结合根据申请认证的剂型，选择该剂型中产量大、工艺复杂、质量不稳定等高风险品种，从原料购进到成品出厂进行全过程检查。
每个剂型至少选择3个品种，不足3个品种的全部检查。
二、检查要与品种的生产工艺相结合核对并确认其是否能够按其注册申报的处方和工艺生产。
三、措施和工艺参数应有验证数据支持要检查关键工艺参数的验证资料对激素类或抗肿瘤类化学药品与其它药品共用同一设备和空气净化系统的，要重点检查其防止交叉污染的措施及验证数据。
四、药品生产质量管理体系的真实运作情况检查生产和质量管理的现状和各种记录、台帐、凭证，从深层次查清其真实运作情况，即要从表象查到真相。
（一）化学药品注射剂GMP检查要点根据药品GMP原则要求，结合注射剂生产影响药品质量的关键环节，提出化学药品注射剂GMP跟踪检查要点，旨在督查企业质量保证体系的变更情况和实际运行状态。
检查组须对如下内容按照药品GMP要求，逐一核实，并详细陈述。
1、药品GMP认证检查提出缺陷项目的整改落实情况。
2、企业的组织机构是否有变动、是否能够确保履行职责；企业负责人、质量保证负责人及其人员、质量控制负责人及其人员、药品生产、物料管理负责人员专业、学历、资历及其履行职责的实际能力。
3、生产厂房及其设施、生产设备、仓储条件、检测仪器等是否发生变更及其符合药品GMP情况。
4、新增生产品种的工艺验证及相关文件的补充和完善情况；生产规模及其生产品种扩增或调整与生产及检验能力是否匹配。
5、物料供应商审计，包括选择原则、审计内容、实地考核周期、认可标准、审计人员资格、批准及变更供应商的审批程序等是否能够确保物料质量；是否与物料供应商签定合同；物料验收、抽样、检验、发放标准、程序及其执行情况。
灭菌用生物指示剂指导原则(新增)
灭菌用生物指示剂指导原则（新增）生物指示剂是一种对特定灭菌程序有确定及稳定的耐受性的特殊微生物制成品，可用于灭菌设备的性能确认、特定物品的灭菌工艺研发及建立、产品灭菌程序的验证、生产过程灭菌效果的监控、灭菌程序的定期再验证、隔离器和无菌洁净室灭菌效果的验证评估等。
生物指示剂的分类生物指示剂主要有以下三种类型，其特征需符合《医疗保健产品灭菌生物指示物》GB18281的要求。
（1）由微生物芽胞和载体经包装而成，载体可以是碟形或条状的滤纸、玻璃、塑料或其它材料。
载体和内层包装不得含有物理、化学或微生物的污染物，避免影响生物指示剂的性能和稳定性；不得被特定的灭菌工艺降解；能被灭菌介质（蒸汽、射线、化学试剂、过滤等）穿透并使灭菌介质与生物指示剂能充分接触。
载体和包装的设计应保证生物指示剂不受污染、并使其所含的微生物在贮存、运输和使用过程中损失最小，且方便取样、转移和接种。
（2）芽胞悬液生物指示剂，该类生物指示剂是将芽胞混悬于液体中。
若用于液体物品灭菌，建议测定生物指示剂在灭菌液体物品中的芽胞数和、D值和Z 。
（3）自含式生物指示剂，该类生物指示剂是由芽孢和能够恢复微生物生长的培养基组成的系统。
系统中的培养基用于培养灭菌后的生物指示剂，应制定程序确认该培养基能保证残存微生物的生长。
自含式生物指示剂的耐受性是针对整个系统而言。
自含式系统所采用的材料不应该含有或在使用过程释放出抑制残存微生物生长的物质。
该系统的设计应能够承受运输和使用过程中的影响，不发生破损，并使原始接种的微生物损失减少到最小。
生物指示剂用微生物的基本要求生物指示剂含有对灭菌模式有明确耐受性的一种或两种微生物。
除了电离辐射外，微生物芽孢较菌体有更强的耐受性。
一般认为含芽胞的细菌更适合用于制备生物指示剂。
不同灭菌工艺使用不同的生物指示剂，制备生物指示剂所选用的（1）菌种的耐受性应大于需灭菌物品中所有可能污染菌的耐受性。
（2）菌种应无致病性。
（3）菌株应稳定，存活期长，易于保存。
gmp对生产管理的要求
GMP对生产管理的要求一、生产管理文件1、生产工艺规程、岗位操作法和标准操作规程（sop）的制定凡正式生产的产品都必须制定工艺规程、岗位操作法或sop。
（1）工艺规程编写后，应由企业质量管理部门组织专业审核，经主管生产和质量管理的负责人批准后颁布执行。
工艺规程应由编写审核、批准人的签字及批准执行的日期。
（注：制定、审核和批准的日期应间隔3——5天）。
（2）岗位操作法编写后，应由生产部门技术负责人审核批准，报企业质量管理部门备案的执行。
岗位操作法应有编写、审核和批准人的签字及批准执行的日期。
（3）Sop是某项具体操作的书面文件。
Sop编写后有生产部门技术负责人审核，企业质量管理部门批准后执行。
Sop应有编写、审核和批准人的签字及批准执行的日期。
2、生产工艺规程、岗位操作法和标准操作规程（sop）的修订工艺规程一般3~5年修订一次，岗位操作法和sop不超过2年需修订一次。
修订稿应有编写、审核和批准人的签字以及批准执行的日期。
3、生产工艺规程、岗位操作法和标准操作规程（sop）的更改生产工艺规程、岗位操作法和标准操作规程（sop）不的任意更改。
因工艺改革、设备改进或更新、原辅料变更等，须提出申请并经验证。
生产工艺规程、岗位操作法和标准操作规程（sop）的修订、审核和批准程序与制定时相同。
4、生产管理记录制定、修订程序同1、2、3各条。
二、生产过程的管理1、生产前准备（1）各工序向仓库、生产部门中间库或上下工序领取的原辅料、半成品（中间产品）、包装材料时，应有专人验收、记录登帐并办理交接手续。
（2）特殊产品的主要原辅料，宜建立小样试验制度，凭小样试验报告决定是否投入使用。
当供货单位改变时，须进行验证。
（3）生产操作开始前，操作人员必须对管理文件、工艺卫生、设备状况等进行检查。
检查内容如下：①检查生产场所是否符合该区域清洁卫生要求；②更换生产品种及规格前是否清场过，清场者、检查者是否签字，未取得“清场合格证”不得进行下另一个品种的生产；③对设备状况进行严格的检查，检查合格挂上“合格”标牌后方可使用。
9207灭菌用生物指示剂指导原则(新增)
9207灭菌用生物指示剂指导原则（新增）生物指示剂是一种对特定灭菌程序有确定及稳定的耐受性的特殊微生物制成品，可用于灭菌设备的性能确认、特定物品的灭菌工艺研发及建立、产品灭菌程序的验证、生产过程灭菌效果的监控、灭菌程序的定期再验证、隔离器和无菌洁净室灭菌效果的验证评估等。
生物指示剂的分类生物指示剂主要有以下三种类型，其特征需符合《医疗保健产品灭菌生物指示物》GB18281的要求。
（1）由微生物芽孢和载体经包装而成，载体可以是碟形或条状的滤纸、玻璃、塑料或其它材料。
载体和内层包装不得含有物理、化学或微生物的污染物，避免影响生物指示剂的性能和稳定性；不得被特定的灭菌工艺降解；能被灭菌介质（蒸汽、射线、化学试剂等）穿透并使灭菌介质与生物指示剂能充分接触。
载体和包装的设计应保证生物指示剂不受污染、并使其所含的微生物在贮存、及运输和使用过程中损失最小，且方便取样、转移和接种。
（2）芽孢悬液生物指示剂，该类生物指示剂是将芽孢混悬于液体中。
若用于液体物品灭菌，建议测定生物指示剂在灭菌液体物品中的芽孢数和D值。
（3）自含式生物指示剂，该类生物指示剂是由芽孢和能够恢复微生物生长的培养基组成的系统，其耐受性是针对整个系统而言。
系统中的培养基用于培养灭菌后的生物指示剂，应制定程序确认该培养基能保证残存微生物的生长。
自含式生物指示剂的耐受性是针对整个系统而言。
自含式系统所采用的材料不应该含有或在使用过程释放出抑制残存微生物生长的物质。
该系统的设计应能够承受运输和使用过程中的影响，不发生破损，并使原始接种的微生物损失减少到最小。
生物指示剂用微生物的基本要求除了电离辐射外，微生物芽孢较菌体有更强的耐受性。
一般认为含芽孢的细菌更适合用于制备生物指示剂。
不同灭菌工艺使用不同的生物指示剂，制备生物指示剂所选用的微生物应具备以下特性：（1）菌种的耐受性应大于需灭菌物品中所有可能污染菌的耐受性。
（2）菌种应无致病性。
（3）菌株应稳定，存活期长，易于保存。
SMP-QC-0031-00生物指示剂标准管理规程
1.0 目的1.1规范生测组对生物指示剂的接收、质量检查、储藏、使用、销毁标准操作规程。
2.0 范围2.1验证或监控用生物指示剂的管理。
3.0 职责3.1质量控制（QC）部对本操作规程实施负责。
4.0 定义生物指示剂简称BI，是一类特殊的活微生物制品，是对特定灭菌工艺有一定耐受性并且能够定量测定灭菌效力的微生物制剂，可用于确定灭菌设备的性能、灭菌程序的验证、生产过程灭菌效果的监控等。
5.0 规程5.1生物指示剂管理流程图：5.2生物指示剂的接收5.2.1根据验证要求，确定所需要的生物指示剂。
新购入的生物指示剂应由生测组组长接收，购买的生物指示剂应附有相应的质量报告，内容包括微生物种类、孢子量、D 值、有效期等，仔细检查生物指示剂包装是否破损，有破损的剔出，核对生物指示剂的有效期，过期的剔出，核对生物指示剂是否与计划的相一致，不可用的剔出。
5.2.2登记：核对无误后及时填写《生物指示剂接收与发放记录》(R-SMP-QC-0031-02)内容包括生物指示剂名称、批号、数量、规格、生产厂家、接收日期、接收人、领用日期、领用人等。
5.3生物指示剂质量检验：测试内容包括含指示剂菌种形态学鉴别（Gram染色和芽孢染色）、载菌量检测和D值测定。
5.3.1生物指示剂菌种形态学鉴别（Gram染色和芽孢染色）5.3.1.1革兰氏染色操作步骤见《菌种鉴定标准操作规程》（SOP-QC-0009-00）。
5.3.1.2芽孢染色5.3.1.2.1染色试剂：5％孔雀绿水溶液、0.5％番红液5.3.1.2.2染色步骤5.3.1.2.2.1在载玻片上滴上一滴的超纯水，用无菌接种环挑取一颗菌落均匀涂开；5.3.1.2.2.2将载玻片通过酒精灯火焰上方快速来回 2～3 次使之干燥、固定；5.3.1.2.2.3涂片冷却后，滴加5％孔雀绿水溶液，微火加热，使冒蒸汽，但不干涸（随时补加染液）保持 5min；5.3.1.2.2.4倾去染液，待载玻片冷却后用已灭菌去离子水冲洗涂片至孔雀绿不再褪色为止；5.3.1.2.2.5在涂片上方滴加 0.5％番红液复染 1min 后水洗；5.3.1.2.2.6用滤纸吸干后镜检。
0002015-01 生物指示剂(BI)管理规程
目录1. 目的 (3)2. 范围 (3)3. 定义 (3)4. 职责 (3)5. 程序 (3)6. 相关文件 (5)7. 附件 (5)8. 历史记录 (5)9. 发放部门 (5)1.目的建立生物指示剂管理规程，加强对生物指示剂购入、使用等的管理，保证生物指示剂在预定的质量状态，保证检验结果的准确和可信。
2.范围适用于广州科锐特生物科技有限公司质量控制实验室生物指示剂（BI）的管理。
3.定义3.1生物指示剂（Biological Indicators）：简称BI，是一类特殊的活微生物制品，是对特定灭菌工艺有一定耐受性并且能够定量测定灭菌效力的微生物制剂，可用于确定灭菌设备的性能、灭菌程序的验证、生产过程灭菌效果的监控等。
生物指示剂按用途可分为湿热灭菌用生物指示剂、干热灭菌用生物指示剂、离子辐射用生物指示剂、环氧乙烷灭菌生物指示剂、液态过氧化氢（VPHP）灭菌用生物指示剂。
生物指示剂按形态可分芽孢条（Spore Strip）、芽孢悬浮液（Spore Suspension）、自含型生物指示剂（Self-contained Indicator）。
3.2COA：产品质量检验报告书。
4.职责4.1质量控制部负责本文件的起草、修订、审核、培训及执行。
4.2质量保证部负责本文件的审核及文件执行过程中的监督。
4.3质量负责人负责本文件的审批。
5.程序5.1生物指示剂的申购5.1.1生物指示剂的使用人员应根据验证要求，选择合适的生物指示剂，应在生物指示剂还有一定的库存的时候，根据日后的验证需求，提出生物指示剂合理的购买数量。
5.1.2供应商需能够提供产品的COA，COA中需包括微生物种类、孢子量、D值、有效期等内容。
5.2生物指示剂的接收5.2.1新购入的生物指示剂由生物安全管理员接收，接收时需核对COA中微生物种类、孢子量和D值等内容，查看生物指示剂的规格是否与计划的一致，不可用的剔出；仔细检查生物指示剂包装是否破损，有破损的剔出；核对生物指示剂的有效期，过期的剔出。
生物指示剂管理规程(精编文档).doc
【最新整理，下载后即可编辑】目的建立生物指示剂管理规程，规范生物指示剂进厂质量验收、储存、使用和销毁程序，保证生物指示剂质量安全有效。
范围本规程适用于公司确认与验证及监控生物指示剂使用管理。
责任生物指示剂使用部门负责采购申请填写及按照说明书要求使用、储存、销毁生物指示剂，质量部QA负责监督和检查执行情况。
内容1.生物指示剂概念生物指示剂（BI）：系一类特殊的活微生物制品，可用于确认灭菌设备的性能、灭菌程序的验证、生产过程灭菌效果的监控等。
用于灭菌验证中的生物指示剂一般是细菌的孢子。
2.生物指示剂形式2.1 一定数量的孢子附着在惰性载体上，如滤纸条、玻片、不锈钢、塑料制品等。
2.2 孢子悬浮液密封于安瓿中。
3.生物指示剂特性3.1 具有较高的耐受性、贮存稳定性、批与批之间的一致性、无致病性、易于培养和制备的细菌芽孢。
3.2 耐受性要高于灭菌前产品中污染菌的耐受性。
3.3 符合地方、国内、国际相关法规要求。
3.4 可根据灭菌程序的设计要求而制备。
4. 生物指示剂分类4.1 第一类生物指示剂：由微生物孢子和载体包装而成。
4.2 第二类生物指示剂：由可接种在产品表面或内部的孢子悬液构成。
4.3 第三类生物指示剂：包含微生物恢复生长培养基的类型。
7. 生物指示剂采购、验收、质量信息登记7.1 生物指示剂使用部门根据年度验证总计划内容及临时需求说明填写生物指示剂购买申请，采购部门根据申请从有资质的生产厂家及供应商处购得相应生物指示剂，购买的生物指示剂应附有相应的合格质量检验报告单。
7.2 生物指示剂进厂验收部门为库房，库房人员应该仔细核对品名、规格、批号、数量、生产日期、有效期、生产厂家，检查外包装应完好，封口严密，标签完整，内容清晰，核对无误后填写《物料验收记录》（1））和《物料台账》（1），不合格的生物指示剂退回厂家处理。
7.3 生物指示剂质量信息登记部门为领用部门，登记内容包括生物指示剂名称，生产厂家，生产批号及生产日期，失效日期，Z值，储存环境和销毁方法。
生物指示剂标准-概述说明以及解释
生物指示剂标准-概述说明以及解释1.引言1.1 概述概述部分的内容可以描述生物指示剂标准的基本概念和背景。
可以包括以下内容：生物指示剂是一种用来评估、监测和验证环境中生物多样性和生态系统健康状况的工具。
它们可以是某种生物物种、种群或者生态系统，在发生环境变化或者受到干扰时，表现出特定的反应或者指示作用。
生物指示剂广泛应用于环境监测、生态研究、生态风险评估以及环境污染和气候变化等方面。
生物指示剂标准的制定是为了确保生物指示剂的使用和结果的准确性、可重复性和可比性。
标准的制定需要考虑多个因素，包括生物指示剂的选择、监测方法和指标以及数据分析和解释等。
通过制定生物指示剂标准，可以实现对于环境变化和生态系统健康的准确评估和监测。
标准可以提供统一的指导和规范，确保不同机构和研究者使用相同的方法和指标进行生物指示剂的研究和应用。
标准还可以促进不同研究和监测结果的比较和合理解释，从而增加生物指示剂在环境保护和生态恢复中的可信度和可行性。
本文将重点介绍生物指示剂标准的制定过程、应用领域以及其重要性、优势和限制，并对未来发展趋势进行展望。
1.2文章结构文章结构部分的内容可以包括以下几点：1.2 文章结构本文将按照以下结构来探讨生物指示剂标准的问题：第一部分是引言部分，概述了生物指示剂标准的背景和相关的重要性。
其中1.1部分简要介绍了生物指示剂的概念和应用领域，1.2部分则详细介绍了本文的文章结构，以便读者了解整个文章的框架和逻辑。
最后，1.3部分明确了本文的目的，即通过探讨生物指示剂标准的制定、重要性、优势与限制以及未来发展趋势，为相关领域的研究和实践提供参考和借鉴。
第二部分是正文部分，主要分为3个小节。
首先，2.1节将详细阐述生物指示剂的定义，以便读者对该概念有更深入的理解。
接着，2.2节将介绍生物指示剂在不同领域的应用，包括环境监测、食品安全、生物疫苗等。
最后，2.3节将探讨生物指示剂标准的制定过程，涉及到相关的标准机构、制定流程和参考标准等内容。
欧盟GMP 和我国GMP 标准的对比
欧盟GMP和我国GMP标准的对比GMP在我国已推行多年，我们有必要重新审视我国与国际先进水平的差距，监管部门也顺应这一形势，正在修订药品生产质量管理规范(即GMP)。
据悉，新版的GMP接近欧盟GMP要求。
下面将从具体阐述欧盟GMP与我国现行GMP的不同，这些不同主要反映在无菌药品上。
1、欧盟GMP与我国现行GMP在非无菌药品方面的不同在欧美国家，洁净级别是对无菌药品而言，因此欧盟GMP对非无菌药品类的管理相对宽松，无环境检测的强制规定，只是提到生产区的设计应有适当的气流，并可能达到10万级水平，需定期做环境检测。
我国现行GMP对非无菌药品规定了10万级和30万级两个级别。
有可能我国新版GMP对非无菌药品中30万级级别的要求将被取消，全部按10万级标准设计，并作静态考核验收。
2、欧盟GMP与我国现行GMP在无菌药品方面的不同欧盟对无菌药品生产的管理较严，欧盟GMP附录1就是针对无菌药品的生产而设立的，共有93条，现将其与我国现行GMP的不同之处作专门列举。
2.1、生产环境(1)、欧盟GMP将无菌药品生产所需的洁净区分为4个级别：A级为高风险操作区。
如灌装区，放置胶塞桶、敞口安瓿瓶、敞口西林瓶的区域及无菌装配/连接操作的区域，通常用层流操作台(罩)来维护该区的环境状态。
层流系统在其工作区域必须均匀送风，风速为0.36-0.54m/s（指导值）。
应有数据证明层流的状态并须验证；B级指无菌配制和灌装A级区所处的背景区域；C、D级指生产无菌产品过程中重要程度较次的清洁操作区。
(2)、洁净区的设计必须符合相应的“静态”标准，以达到“动态”的洁净要求。
“静态”是指安装已经完成并已运行，但没有操作人员在场的状态。
而“动态”是指生产设施按预定工艺模式运行并有规定数量的操作人员现场操作的状态。
(3)、生产操作全部结束，操作人员撤离生产现场并经15～20min（指导值）自净后，洁净区应达到表中的“静态”标准。
药品或敞开容器直接暴露环境微粒动态测试结果应达到表1中A级的标准。
生物指示剂的选择
生物指示剂菌液浓度的计算（阴性分数法）
假设F0=8，用D121℃=0.7的枯草芽孢杆菌计算： SLRbi=F0/ Dbi=11.43 （SLR为孢子对数下降值） SLRbi=lgN0-lgN （N0和N分别为灭菌前后孢子数） 根据阴性分数法，N=2.303×lg(n/q)，其中n为挑战性试验 样品总数，q为试验结果呈阴性的瓶数。如试验结果20瓶 挑战瓶均呈阴性，在计算时可假设只有19只瓶呈阴性（因 为q=n，lg(n/q)=0，代入公式SLRbi=lgN0-lgN时，数学式 无意义），则可得出： N=2.303×lg(n/q)=0.0513 lgN=-1.29 lgN0=SLRbi+lgN=11.43-1.29=10.14 N0= 1010.14=1.4×1010(cfu/瓶)
生物指示剂菌种的选择 08年年度回顾，车间洁净区最耐热菌株D100℃值为 14.2， 09年年度回顾，车间洁净区最耐热菌株 D100℃值为16.7。连续两年，车间洁净区最耐热菌 株D100℃值最高为16.7 ，换算成D121℃约为0.12。 因此，我们应该选择D121℃值比0.12大的菌株。 由于菌株的D值受介质影响，因此，我们需要测定 在各介质中的实际的D值，确保生物指示剂适合我 们公司使用。
法规要求 CHP2010附录ⅩⅦ灭菌法中涉及生物指示剂的相 关要求 生物指示剂的应用： 在生物指示剂验证试验中，需确定孢子在实际灭 菌条件下的D 值，并测定孢子的纯度和数量。验 证时，生物指示剂的微生物用量应比日常检出的 微生物污染量大，耐受性强，以保证灭菌程序有 更大的安全性。
推荐使用的生物指示剂
03版验证指南中列出的湿热灭菌工艺中常用的生物指示剂
菌种名称 嗜热脂肪芽孢杆菌 常规D121℃值/min 1.5～3.0
GMP设备验证
设备验证一、广义的设备不只生产设备，还包括共用设施（水系统、压缩空气系统、空气净化系统和实验室分析仪器等设备）。
设备验证周期分为六个阶段：1、设计需求阶段。
2、设计建造阶段。
3、开发测试阶段。
4、确认阶段。
5、使用阶段和报废阶段。
这是企业一般流程，但每个企业要根据对产品的影响和风险情况在验证方案中确定需要的验证文件。
二、各验证阶段描述（一）、计划和需求阶段1、用户需求标准该文件用于描述满足设备使用目的的要求，用户需求标准通常在技术和质量部门的支持下由设备所属部门或使用部门起草，质量管理人员批准。
用户需求标准中描述的需求具有“SMART”的特性：（1），每个需求应该有具体标准。
（2），每个需求都能通过测试来证实该设备能不能满足用户需求。
（3），每个需求都应该是能实现的、清楚的。
（4）每个需求的测试结果都能重复测试。
（5）、每个需求都能通过设计和测试进行追踪。
对复杂设备如果需要电子记录。
2、验证方案根据验证计划为每个设备定一个详细验证方案，来描述设备的验证流程，需要的验证文件和验证活动。
对每个设备而言，验证方案是一个动态文件，需要按验证项目的要求进行升级。
3、系统描述系统描述是对需要验证的设备进行简单的描述，且可以合并到验证方案中，改文件可以使审核人员对设备有一个了解。
通常文件包括：（1）该设备的用途（2）使用该设备的原因（3）该设备的使用方法（4）该设备的用户（5）该设备同其他设备或共用设施的关联。
4、法规符合性评估该文件用于评估待验证的设备是否对产品质量产生影响。
每个设备均需要在制定验证方案前进行法规性评估。
在进行法规符合性评估前，需全面了解用户需求标准和药品法规，包括该设备的电子记录及签名。
通常法规符合性评估包括以下内容：（1）设备名称和唯一编号（2）描述该部分主要对该设备的用途进行简短的描述。
包括以下内容：1、该设备的用途2、该设备的使用部门3、该设备同其他设备的关联4、该设备的主要功能。
所有的语言清晰、简练，能让未经培训的人也能理解。
高压灭菌生物化学指示剂
高压灭菌生物化学指示剂
高压灭菌生物化学指示剂通常是由一种特定的微生物培养基制成，这种培养基中含有一种或多种特定的微生物菌种，这些微生物
对高压力和高温非常敏感。
在高压灭菌过程中，将这种指示剂置于
被灭菌物品的不同位置，然后进行灭菌处理。
处理完成后，通过观
察指示剂培养基是否有生长，可以判断高压灭菌是否彻底、有效地
杀灭了微生物。
高压灭菌生物化学指示剂的使用对于确保高压灭菌的有效性至
关重要。
如果指示剂培养基中的微生物在灭菌过程中存活，那么被
灭菌物品很可能也存在微生物残留，从而可能对人体健康造成威胁。
因此，高压灭菌生物化学指示剂的使用可以帮助医疗机构、制药企
业和食品加工厂等单位确保其产品的安全性和质量。
总之，高压灭菌生物化学指示剂在高压灭菌过程中扮演着至关
重要的角色，它的使用可以有效监测和验证灭菌过程的有效性，帮
助确保被灭菌物品的无菌状态，从而保障人们的健康和安全。
GMP与制药学名词汇编(原创)
GMP与制药学名词汇编×××制药有限公司2013年7月目录1 药品生产质量管理规范（Good Manufacturing Practice for Drugs，GMP） (1)1.1 污染（Contamination） (1)1.2 交叉污染（Cross-contamination） (1)1.3 警戒限度（Alert Limit） (1)1.4 纠偏限度（Action Limit） (1)1.5 变更控制（Changes Control） (1)1.6 偏差（Deviations） (2)1.7 纠正措施和预防措施（Corrective Actions and Preventive Actions，CAPA） (2)1.8 委托生产（Contract Manufacture） (2)1.9 委托检验（Contract Analysis） (2)1.10 投诉（Complaint） (2)1.11 不良反应（Adverse Drug Reactions，ADR） (2)1.12 自检（Self Inspections） (3)1.13 药品认证（Drug Certification） (3)2 质量（Quality） (3)2.1 质量保证（Quality Assurance，QA） (3)2.2 质量控制（Quality Control，QC） (3)2.3 质量风险管理（Quality Risk Management） (3)2.4 质量管理体系（Quality Management System，QM） (3)2.5 质量方针（Quality Policy） (3)2.6 质量目标（Quality Objective） (4)2.7 质量受权人（Qualified Person） (4)2.8 取样（Sampling） (4)2.9 留样（Reference Samples） (4)2.10 留样室（Reference Samples Room） (4)2.11 稳定性研究（Stability Studies） (4)2.12 持续稳定性考察（On-going Stability Program） (4)2.13 标准品和对照品（Reference Standards and Reference Substances） (5)2.14 检验结果超标（Out of Specification，OOS） (5)2.15 超常测试结果（Out of Trends，OOT） (5)2.16 放行（Release） (5)2.17 中间控制（In-process Control） (5)2.18 环境监测（Environmental Monitoring） (5)3 文件（Documentation） (6)3.1 管理标准（Standard Management Procedure，SMP） (6)3.2 技术标准（Standard Technical Procedure，STP） (6)3.3 操作标准（Standard Operation Procedure，SOP） (6)3.4 确认与验证文件（Qualification and Validation Documentation，QVD） (6)3.5 记录（Record） (6)3.6 批记录（Batch Record，BR） (7)3.7 工艺规程（Master Manufacturing Documents） (7)3.8 质量标准（Quality Standard） (7)3.9 内控标准（Inner Quality Standard） (7)3.10 检验记录（Test Record） (7)3.11 批检验记录（Batch Test Record，BTR） (7)3.12 检验报告书（Testing Report） (8)3.13 原始数据（Raw Data） (8)3.14 验证计划（Validation Plan） (8)3.15 验证方案、验证报告（Validation Protocol and Validation Report） (8)3.16 验证合格证书（Validation Certificate） (8)3.17 体系管理员（System Administrator） (8)4 产品（Products） (8)4.1 中间产品（Intermediate Products） (8)4.2 待包装产品（Bulk Products） (9)4.3 成品（Finished Products） (9)4.4 包装（Packaging） (9)4.5 返工（Reprocessing） (9)4.6 回收（Recovery） (9)4.7 重新加工（Reworking） (9)4.8 发放（Dispense） (9)4.9 批（Batch） (9)4.10 批号（Batch Number） (9)4.11 阶段性生产方式（Campaign Production） (10)4.12 工艺验证（Manufacturing Process Validation） (10)4.13 发运（Distribution） (10)4.14 退货（Return） (10)4.15 召回（Recall） (10)4.16 不合格品（Non-conforming Products or Materials） (10)5 物料（Materials） (10)5.1 原料（Raw Materials） (11)5.2 辅料（Excipients） (11)5.3 包装材料（Packaging Materials） (11)5.4 内包装材料（Primary Package Materials） (11)5.5 印刷包装材料（Printed Packaging Materials） (11)5.6 标签（Labels） (11)5.7 物料(产品)代码（Material Code or Product Code） (11)5.8 物料(产品)编号（Material Number or Product Number） (12)5.9 物料平衡（Reconciliation） (12)5.10 供应商（Supplier） (12)5.11 待验（Quarantine） (12)5.12 复验期（Retest Date） (12)5.13 制药用水（Water for Pharmaceutical Use） (12)5.14 饮用水（Drinking Water） (12)5.15 纯化水（Purified Water，PW） (13)5.16 注射用水（Water for Injection，WFI） (13)5.17 灭菌注射用水（Sterile Water for Injection） (13)5.18 压缩气体（Compressed Gas，CG） (13)5.19 纯蒸汽（Pure Steam，PS） (13)6 设施与设备（Premises and Equipment） (13)6.1 确认（Qualification） (14)6.2 验证（Validation） (14)6.3 校准（Calibration） (14)6.44Q验证/3Q验证（4Q Validation/3Q Validation） (14)6.5 设计确认（Design Qualification，DQ） (14)6.6 安装确认（Installation Qualification，IQ） (14)6.7 运行确认（Operational Qualification，OQ） (14)6.8 性能确认（Performance Qualification，PQ） (15)6.9 用户需求标准（User Requirement Specification，URS） (15)6.10 洁净室(区)（Clean Room or Clean Area） (15)6.11 洁净工作台（Clean Bench） (15)6.12 气锁间（Air Lock） (15)6.13 单向流（Unidirectional Airflow） (15)6.14 非单向流（Non-unidirectional Airflow） (16)6.15 层流罩（Laminar Flow Hood） (16)6.16 隔离操作器（Operation Isolation） (16)6.17 高效空气过滤器（High Efficiency Particulate Air-filter，HEPA） (16)6.18 热分布、热穿透（Heat Distribution and Heat Penetration） (16)6.19 在线清洗（Clean In Place，CIP） (17)6.20 在线灭菌（Sterilization In Place，SIP） (17)6.21 计算机化系统（Computerized System） (17)7 无菌药品（Sterile Pharmaceutical Products） (17)7.1 无菌生产（Aseptic Processing） (17)7.2 培养基灌装（Media Filling） (17)7.3 最终灭菌（Final Sterilization） (17)7.4F0值（The Value of F0） (18)7.5 无菌保证水平（Sterility Assurance Level，SAL） (18)7.6 微生物污染水平（Bioburden） (18)7.7 无菌检査（Sterility Test） (18)7.8 热原（Pyrogen） (18)7.9 内毒素（Endotoxin） (18)7.10 微生物（Microorganism /Microbe） (19)7.11 病原微生物（Pathogenic Microorganism） (19)7.12 细菌（Bacteria） (19)7.13 芽孢（Spore） (19)7.14 菌落（Colony Forming Units，CFU） (19)7.15 清洁（Cleaning /Sanitization） (20)7.16 清洁剂（Detergents） (20)7.17 消毒（Disinfect /Disinfection） (20)7.18 消毒剂（Disinfectants） (20)7.19 灭菌（Sterilization） (20)7.20 干热灭菌（Dry Heat Sterilization） (20)7.21 湿热灭菌（Moist Heat Sterilization） (21)7.22 高压蒸汽灭菌（Autoclaving/High Pressure Steam Sterilization） (21)7.23 脉动真空压力蒸汽灭菌（Pulsation Vacuum Pressure Steam Sterilization） (22)7.24 水浴灭菌（Superheated Water Sterilization） (22)7.25 流通蒸汽灭菌（Flowing Steam Sterilization） (22)7.26 巴氏消毒（Pasteurization） (22)7.27 过滤除菌（Filtration Sterilization） (22)7.28 微孔滤膜过滤（Millipore Filtration） (23)7.29 电离辐射灭菌（Ionizing Radiation Sterilization） (23)7.30 化学气体灭菌（Chemical Gas Sterilization） (23)7.31 过度杀灭程序（Over Kill Method） (23)7.32 生物指示剂（Biological Indicators） (24)7.33 化学指示剂（Chemical Indicators） (24)7.34 总有机碳（Total Organic Carbon，TOC） (24)7.35 沉降菌（Settling Microbe） (24)7.36 浮游菌（Airborne Microbe） (24)7.37 悬浮粒子（Airborne Particle） (24)7.38 洁净级别（Cleanliness Level） (25)7.39 动态（Operational） (25)7.40 静态（At-rest） (26)7.41 空态（As-bulit） (26)8 药品（Drugs） (26)8.1 中药（Chinese Drugs） (26)8.2 中药饮片（Prepared Slices of Chinese Crude Drugs） (26)8.3 中成药（Traditional Chinese Medicine Preparations） (26)8.4 化学药品（Chemical Drugs） (27)8.5 化学原料药（Chemical Drugs Substances/Active Pharmaceutical Ingredient） (27)8.6 抗生素（Antibiotics） (27)8.7 生物制品（Biological Products） (27)8.8 疫苗（Vaccines） (27)8.9 血液制品（Blood Products） (28)8.10 处方药（Prescription Drugs） (28)8.11 非处方药（Non-prescription Drugs /Over The Counter，OTC） (28)8.12 新药（New Drugs） (28)8.13 仿制药（Generic Drugs） (28)8.14 基本药物（Essential Drugs） (28)8.15 医保药品（Medicare Drugs） (29)8.16 特殊药品（Special Drugs） (29)8.17 假药（Counterfeit Drugs） (29)8.18 劣药（Substandard Drugs） (30)8.19 药品生产企业（Drug Manufacturers） (30)8.20 药品经营企业（Drug Distributors） (30)8.21 药品批发企业（Drug Wholesalers） (30)8.22 药品零售企业（Drug Retailers） (31)9 国家食品药品监督管理总局（China Food and Drug Administration，CFDA） (31)9.1 中国药典（Chinese Pharmacopoeia，Ch.P.） (31)9.2 国家药品标准（National Drug Standards） (31)9.3 药品注册标准（Drug Registration Specifications） (31)9.4 药品标准物质（Drug Reference Standards） (32)9.5 药品批准文号（Drug Approval Number） (32)9.6 药品注册（Drug Registration） (32)9.7 中药品种保护（Protection of Varieties of Traditional Chinese Medicine） (32)9.8 批签发（Batch Release） (32)9.9 药品电子监管码（Drug Electronic Supervision Code） (33)9.10 医疗器械（Medical Devices） (33)9.11 保健食品（Health Foods） (33)9.12 药品经营质量管理规范（Good Supplying Practice for Drugs，GSP） (33)9.13 中药材生产质量管理规范（Good Agricultural Practice for Chinese Crude Drugs，GAP） (34)9.14 药物临床试验质量管理规范（Good Clinical Practice for Drugs，GCP） (34)9.15 药物非临床研究质量管理规范（Good Laboratory Practice for Drugs，GLP） (34)9.16 医疗机构制剂配制质量管理规范（Good Pharmacy Practice，GPP） (35)GMP与制药学名词汇编本文中所列名词术语，主要系参考GMP2010版（正文、附则及无菌药品附录）、《GMP指南》、《中国药典》2010版、药品管理相关法律规章等资料整理而成，对其中部分词条进行了细化；另有少数名词作为公司体系内部的统一规定，此处给予明确定义。
你了解生物指示剂么？最全的生物指示剂知识来了
你了解生物指示剂么？最全的生物指示剂知识来了食品微生物检测生物指示剂的历史19世纪末，一位英国医生使用鸡蛋作为生物指示剂，以鸡蛋的凝固来判定灭菌效果，首次从概念上引入了生物指示剂。
1955年，美国国立卫生研究院（National Institutes of Health, NIH）使用嗜热脂肪芽孢杆菌制备生物指示剂，因为该菌无致病性、无热原、无毒，而且对压力蒸汽的抵抗力在所有微生物中最强。
1957年，美国AMSOO公司在芝加哥的一次全美医院协会上首先推荐市售商品化的生物指示剂。
1965年美国药典就提到已知微生物芽孢，1975年以后比较详细论述了生物指示剂的有关参数。
我国卫生部也制订了生物指示剂的有关法规。
定义和分类在美国药典中生物指示剂被定义为一种对特定的灭菌程序有确定的、稳定的耐受性的特殊微生物制成品。
生物指示剂分类：1）按结构分可分为片状生物指示剂(strip biological indicator)和自含式生物指示剂(self-contained biological indicator)；片状生物指示剂需要使用阳性对照和阴性对照，而自含式生物指示剂只需要阳性对照即可。
2）根据ISO 11138-1(2017)的分类，目前的生物指示剂有环氧乙烷灭菌用生物指示物、湿热灭菌用生物指示物、干热灭菌用生物指示物、过氧化氢低温等离子灭菌生物指示物和甲醛灭菌用生物指示物。
3）按培养时间可分为通用型生物指示剂和快速型生物指示剂。
通用型生物指示剂根据芽孢复苏后指示菌种新陈代谢引起培养液pH值改变，通过酸碱指示剂变色来进行判读，时间一般在24或48小时以上；而快速型生物指示剂根据芽孢复苏后的酶促反应，通过荧光进行判读，时间一般为3-4小时。
同时国外正在研发更加快速的生物指示剂，有望在1小时之内得出结果。
生物指示剂的应用生物指示剂的应用贯穿了灭菌工艺验证的整个流程。
灭菌工艺验证包含了灭菌工艺开发和灭菌程序确认两大部分。
生物指示剂管理规程完整
目的建立生物指示剂管理规程，规范生物指示剂进厂质量验收、储存、使用和销毁程序，保证生物指示剂质量安全有效。
范围本规程适用于公司确认与验证及监控生物指示剂使用管理。
责任生物指示剂使用部门负责采购申请填写及按照说明书要求使用、储存、销毁生物指示剂，质量部QA负责监督和检查执行情况。
内容1.生物指示剂概念生物指示剂（BI）：系一类特殊的活微生物制品，可用于确认灭菌设备的性能、灭菌程序的验证、生产过程灭菌效果的监控等。
用于灭菌验证中的生物指示剂一般是细菌的孢子。
2.生物指示剂形式2.1 一定数量的孢子附着在惰性载体上，如滤纸条、玻片、不锈钢、塑料制品等。
2.2 孢子悬浮液密封于安瓿中。
3.生物指示剂特性3.1 具有较高的耐受性、贮存稳定性、批与批之间的一致性、无致病性、易于培养和制备的细菌芽孢。
3.2 耐受性要高于灭菌前产品中污染菌的耐受性。
3.3 符合地方、国内、国际相关法规要求。
3.4 可根据灭菌程序的设计要求而制备。
4. 生物指示剂分类4.1 第一类生物指示剂：由微生物孢子和载体包装而成。
4.2 第二类生物指示剂：由可接种在产品表面或内部的孢子悬液构成。
4.3 第三类生物指示剂：包含微生物恢复生长培养基的类型。
5 生物指示剂选择7. 生物指示剂采购、验收、质量信息登记7.1 生物指示剂使用部门根据年度验证总计划内容及临时需求说明填写生物指示剂购买申请，采购部门根据申请从有资质的生产厂家及供应商处购得相应生物指示剂，购买的生物指示剂应附有相应的合格质量检验报告单。
7.2 生物指示剂进厂验收部门为库房，库房人员应该仔细核对品名、规格、批号、数量、生产日期、有效期、生产厂家，检查外包装应完好，封口严密，标签完整，内容清晰，核对无误后填写《物料验收记录》（1））和《物料台账》（1），不合格的生物指示剂退回厂家处理。
7.3 生物指示剂质量信息登记部门为领用部门，登记内容包括生物指示剂名称，生产厂家，生产批号及生产日期，失效日期，Z值，储存环境和销毁方法。
2020版药典要来了,生物指示剂孢子含量测定
2020版药典要来了,生物指示剂孢子含量测定
2020版药典要来了，生物指示剂孢子含量测定
一、计数生物指示剂分类：
1、滤纸片类：孢子载体为滤纸
1）与培养液分离，灭菌完毕将培养液与滤纸片接触，依据培养液颜色变化确认灭菌效果。
2）不含培养液，灭菌完毕接种至指定培养基培养，依据培养基浑浊与否确认灭菌效果。
2、孢子悬液类：孢子载体为液体，直接分散于培养液中，一般整体为安瓿包装，灭菌完毕直接培养，依据培养液颜色变化确认灭菌效果。
3、不锈钢片类：孢子载体为不锈钢片（圆形或长条形），不含培养液，灭菌完毕接种至指定培养基培养，依据培养基浑浊与否确认灭菌效果。
二、滤纸片类生物指示剂计数方法
1、检验所需仪器及物品：
1）仪器：
生物安全柜、通用水浴、振荡器、培养箱、100~1000μl移液枪、计时器。
2）培养基：
胰酪大豆胨琼脂培养基（TSA），至少200ml/瓶×1瓶，融化后45~50℃水浴保温不超过8h
3）灭菌物品：
a）90mm平皿×8个、1ml带滤芯枪头×1盒（含枪头至少20个，灭菌前先用剪刀剪短枪头约2mm，防止滤纸堵塞影响计数结果）、直径4-6mm玻璃珠24个、50ml平底试管×4支，经湿热灭菌124℃、50min后备用，效期内。
b）无菌纯化水：9ml/支试管×12支，100ml/瓶三角瓶×1瓶，经湿热灭菌121℃、15min后备用，效期内。
c）具体灭菌程序按各灭菌器使用及维护标准操作规程进行。
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生物指示剂G M P
文稿归稿存档编号：[KKUY-KKIO69-OTM243-OLUI129-G00I-FDQS58-
17.9 生物指示剂的管理
《中国药典》附录XVⅡ灭菌法中对生物指示剂有较详细的描述。
生物指示剂，简称BI，是一类特殊的活微生物制品，是对特定灭菌工艺有一定耐受性并且能够定量测定灭菌效力的微生物制剂，可用于确认灭菌设备的性能、灭菌程序的验证、生产过程灭菌效果的监控等。
用于灭菌验证中的生物指示剂一般是细菌的孢子。
17.9.1制备生物指示剂用微生物的基本要求
不同的灭菌方法使用不同的生物指示剂，制备生物指示剂所选用的微生物必须具备以下特性：
菌种的耐受性应大于需灭菌物品中所用可能污染的耐受性；
菌种应无致病性；
菌株应稳定，存活期长，易于保存；
易于培养。
若使用休眠孢子，生物指示剂中休眠孢子含量要在90%以上。
17.9.2生物指示剂的制备
生物指示剂的制备应按一定的程序进行，制备前，需先确定所用微生物的特性，如D值等。
菌株应用适宜的培养基进行培养。
培养物应制成悬浮液，其中孢子的数量应战优势，孢子应悬浮于无营养的液体中保存。
生物指示剂中包含一定数量的一种或多种孢子，可制成多种形式。
通常是将一定数量的孢子附着在惰性的载体上，如滤纸条、玻片、不锈钢、塑料制品等；孢子悬浮液也了密封于安瓶中；有的生物指示剂还配有培养基系统。
D值与灭菌条件相关外，还与微生物存在的坏境有关。
因此，一定形式的生物指示剂制备完成后，应测定D值和孢子总数。
生物指示剂应选用合适的材料包装，并设定有效期。
载体和包
装材料在保护生物指示剂不致污染的同时，还应保证灭菌剂穿透并能与生物指示剂充分接触，载体和包装的设计原则是便于贮存、运输、取样、转移接种。
有些生物是指示剂可直接将孢子接种至液体灭菌物或具有与其相似的物理和化学特性的替代品中。
使用替代品时，应用数据证明二者的等效性。
17.9.3生物指示剂的应用
在灭菌程序的验证中，尽管克通过灭菌过程某些参数的监控来评估灭菌效果，但生物指示剂的被杀灭程度，则是评价一个灭菌程序有效性最直观的指标。
克使用市售的标准生物指示剂，也可使用由日常生产污染菌监控中分离的耐受性最强的微生物制备的孢子。
在生物指示剂验证试验中，需确定孢子在实际灭菌条件下的D值，并测定孢子的纯度和数量。
验证时，生物指示剂的微生物用量应比日常检出的微生物污染量大，耐受性强，以保证灭菌程序有更大的安全性。
在最终灭菌法中，生物指示剂应放在灭菌柜的不同部位。
并避免指示剂直接接触到被灭菌物品。
生物指示剂按设定的条件灭菌后取出，分别置培养基中培养，确定生物指示剂中的孢子是否被完全杀灭。
过度杀灭产品灭菌验证一般不考虑微生物污染水平，可采用市售的生物指示剂。
对灭菌手段耐受性差的产品，设计灭菌程序时，根据经验预计在该生产工艺中产品微生物污染的水平，选择微生物指示剂的菌种和把瓶子数量、耐受性和灭菌程序验证羧获得的数据进行评估。
17.9.4常用生物指示剂
湿热灭菌法
湿热灭菌法最常用的生物指示剂为嗜热脂肪芽孢杆菌孢子。
D值为1.5~3.0分钟，每片活孢子数5×105~5×106个，在121℃、19分钟下应被完全杀灭。
此外，还可使用生胞梭菌孢子，D值为0.4~0.8分钟。
干热灭菌法
干热灭菌法最常用的生物指示剂为枯草芽孢杆菌孢子。
D值大于1.5分钟，每片活孢子数5×105~5×106个。
取热原验证时大肠埃希菌内毒素，加量不小于1000
细菌内毒素单位。
辐射灭菌法
辐射灭菌法最常用的生物指示剂为短小芽孢杆菌孢子。
每片活孢子数107~108个，置于放射剂量25kGy条件下，D值约3kGy。
但应注意灭菌物品中所负载的微生物可能比较短小芽孢杆菌孢子显示更强的抗辐射力，因此短小芽孢杆菌孢子可用于监控灭菌过程，但不能用于灭菌辐射剂量建立的依据。
气体灭菌法
环氧乙烷灭菌最常用的生物指示剂为枯草芽孢杆菌孢子。
气态过氧化氢最常用的生物指示剂为嗜热脂肪芽孢杆菌孢子。
每片活孢子数1×106~5×106个。
环氧乙烷灭菌中，枯草芽孢杆菌孢子D值大于2.5分钟，在环氧乙烷浓度为600mg/L，相对湿度为60%，温度为54℃下灭菌，60分钟应被杀灭。
过滤除菌法
过滤除菌法最常用的生物指示剂为缺陷假单胞菌，用于滤膜孔径为0.22um的滤器；黏质沙雷菌用于滤膜孔径为0.45um的滤器。
17.9.5生物指示剂的实验室管理
生物指示剂作为一种特殊的物料，为了安全、合理地使用，一般应对生物指示剂进行控制管理。
购买的生物指示剂应附有相应的质量报告，内容包括微生物种类、含量、D值、有效期等，实验室在使用前要对BI进行质量复核，进行微生物数量的确认。
进行登记并按说明存放。
进行微生物数量确认时，将原BI的所有含有微生物的部分转移到生理盐水中，稀释后进行计数，与质量报告中的数量进行比较。
常用的生物指示剂以纸条、不锈钢片等作为载体。
对于纸条式生物指示剂，因其不易打碎，可在液体中加入无菌的玻璃珠，然后再震荡打碎，制成纸浆悬液进行计数。
文件要求：典型的微生物数量复核报告包含以下内容。
NI含菌确认、生产商、菌名、批号、标示含菌量、D值、效期、稀释过程、稀释倍数、计数结果、每个BI含菌量、是否合格等。
可用将BI的产品质量报告或其复印件与上述文件一起存放。
检验合格的BI要经过批准和发放后才可使用。
领用时要登记领用人、日期、数量等。