灭菌方法与生物指示剂ppt课件

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消毒、灭菌PPT演示课件

无菌物品管理
对手术室内使用的无菌物品进行严格管理，确保在有效期内使用，避免过期或污染。
手术器械处理
对手术器械进行严格的清洗、消毒和灭菌处理，确保手术过程中无菌操作。
医疗废弃物处理要求
分类收集对医疗废弃物进行分类收集，包括感染性废弃物、损伤性废弃物、药物性废弃物和化学性废弃物等。
环保要求在处理医疗废弃物时，应符合环保要求，避免对环境造成污染。
专用容器使用专用的医疗废弃物容器进行收集，容器应防渗漏、防破裂、易于清洗和消毒。
安全处理对收集的医疗废弃物进行安全处理，包括高温焚烧、化学处理、微波消毒等方法，确保废弃物中的病原体被彻底杀灭。
THANKS
感谢观看
辐射灭菌法
原理
应用
利用放射性核素60Co发射的γ射线或电子加速器产生的高能电子束（阴极射线）穿透物品，杀死其中的微生物。
适用于不耐高温和不能用其他方法灭菌的物品，如一次性使用的医疗器械和用品、药品、食品等。
优点
缺点
灭菌效果可靠，不损伤物品，无残留毒性。
设备费用高，操作技术要求高，需要专门的安全防护措施。
消毒目的
消毒的目的是切断传播途径，防止和控制传染病的传播和流行。
灭菌定义及目的
灭菌定义
灭菌是指用物理或化学方法杀灭外环境中所有的微生物，包括细菌芽孢和非芽孢菌、病毒、真菌等的过程。
灭菌目的
灭菌的目的是彻底消除外环境中的一切微生物，以达到无菌状态，保证医疗、科研等活动的安全进行。
消毒与灭菌关系
05
消毒与灭菌效果评价
消毒效果评价方法及标准
细菌学指标
消毒前后细菌数量对比，计算杀菌率。
化学指标

实验室常用灭菌法详细版.ppt

效均一
最新.
10
灭菌容器操作注意
• 使用前认真检查设备的完好性
• 灭菌时须先将灭菌器中冷空气排出，以保
证最佳灭菌效果
• 灭菌时间应从待灭菌物品到达预定温度时
算起
• 灭菌完毕后停止加热，待压力表降至0，放
汽、开启灭菌器，物品温度降至80℃ 以下时才能将灭菌器门全部开启
最新.
11
影响湿热灭菌的因素
• 辐射灭菌：短小芽孢杆菌孢子（ATCC27142等，活孢子数为5×107～
5×108个/片 )
• 气体灭菌：
环氧乙烷灭菌：枯草芽孢杆菌孢子（ATCC9372等，活孢子数为 5×105～5×106菌孢子（ATCC7953等，活孢子数为1×106～5×106个/片 )
不挥发，不易燃
无色醚样臭味气体，沸点 10.8 扩散穿透能力强，属广谱杀菌
环氧乙烷
℃，沸点以下为无色透明液剂；用于对热敏感的药物等的
体，比重 0.882，溶于水。灭菌；时间长，费用贵。
苯酚（石炭酸）
3～5%
地面、墙壁喷撒
甲酚皂溶液（来苏尔）
5～100%
• 效果可靠、操作简便 • 应用广泛：容器、培养基、无菌衣、胶塞等 • 包括
– 热压灭菌 – 流通蒸汽灭菌 – 煮沸灭菌 – 低温间歇灭菌
最新.
9
湿热灭菌条件
• 121℃× 15min、 121℃× 30min 、116 ×
40min 或其他可以保证灭菌效果的程序条件。
×
• 过度杀灭法 • 灭菌过程有适当的装载方式，保证灭菌有
• 微生物种类和数量
• 灭菌物品特性
• 蒸汽的性质
饱和蒸汽热含量高潜热大穿透力强
湿饱和蒸汽

灭菌方法与生物指示剂

生物指示剂系一类特殊的活微生物制品，可用于确认灭菌设备的性能、灭菌程序的验证、生产过程灭菌效果的监控等。用于灭菌验证中的生物指示剂一般是细菌的孢子。
harmony
生物指示剂的形式
一定数量的孢子附着在惰性载体上，如滤纸条、玻片、不锈钢、塑料制品等
孢子悬浮液密封于安瓿中
harmony
无菌保证水平
ATCC 14756
用于滤膜孔径为0.22μm 的滤器
用于滤膜孔径为0.45μm harmony 的滤器
湿热灭菌法
指将物品臵于灭菌柜内利用高压饱和蒸汽、过热水喷淋等手段使微生物菌体中的蛋白质、核酸发生变性而杀灭微生物的方法。
• 须保证物品灭菌后的SAL≤10-6
• 对热稳定的物品，可采用过度杀灭法，
harmony
常用的灭菌方法
湿热灭菌法干热灭菌法气体灭菌法辐射灭菌法过滤除菌法
harmony
不同灭菌方式不同的菌种种类的选择
灭菌方法
湿热灭菌法
生物指示剂
嗜热脂肪芽孢杆菌 Bacillus stearothermophilus 生孢梭菌孢子 Clostridium sporogenes
harmony
制药工业常用的灭菌方法
原料药：化学合成药——较高熔点药物常用于干热灭菌法，对较低熔点的则用湿热灭菌法，对不耐热药物，如是晶体，可溶解后过滤除菌；
植物提取物——若是用常规或高温提取的单一成分的流浸膏，常用压力蒸汽法、流通蒸汽法消毒灭菌；若是低温提取物，则优先考虑过滤除菌；生化药物——化学消毒灭菌剂，如低温乙醇法、低温间歇法和过滤法等。
harmony
适用范围
不耐热药物的灭菌，医疗器械、容器、高分子材料、包装材料、生产辅助用品、不受辐射破坏的原料药及成品等均可用本法灭菌。

灭菌测定方法和步骤

微生物存活率测定
1. 准备一定数量的微生物样本，确保它们对辐射敏感且易于计数。2. 将样本暴露于预定剂量的辐射下。3. 辐射后，将样本在适宜条件下培养。4. 计算并比较辐射前后的微生物存活率，以评估灭菌效果。5. 根据需要，调整辐射剂量并重复测试以优化灭菌条件。
灭菌测定方法和步骤
灭菌方法
测定方法
步骤
热灭菌（如蒸汽剂（如耐热的细菌孢子）。2. 将生物指示剂放置在待灭菌物品中或附近。3. 进行灭菌处理（如蒸汽灭菌）。4. 灭菌后，将生物指示剂取出，在适宜条件下培养。5. 观察并记录培养结果，评估灭菌效果。
化学灭菌（如使用消毒剂）
中和试验法
1. 准备测试样本和对照样本。2. 将消毒剂应用于测试样本，同时确保对照样本不受影响。3. 使用适当的中和剂来停止消毒剂的活性，同时不破坏潜在的微生物。4. 将处理后的样本在适宜条件下培养。5. 观察并记录培养结果，比较测试样本和对照样本的微生物生长情况，评估灭菌效果。
辐射灭菌（如紫外线、γ射线）

灭菌技术入门知识PPT课件

适于消毒及不耐高热的物பைடு நூலகம்的灭菌，但不能保证杀灭芽孢
用于注射器等的灭菌，必要时加入抑菌剂
低温间歇灭菌法
适于不耐热、热敏物料的灭菌
3
干热灭菌法
❖ 干热灭菌法:是指在干燥环境（如火焰或干热空气）进行灭菌的技术。一般有火焰灭菌法和干热空气灭菌法。 —原理：高热使蛋白质凝固变性；水分缺失使微生物原浆电解质浓缩死亡。 —火焰灭菌法是指用火焰直接烧灼的灭菌方法。该方法灭菌迅速、可靠、简便，适合于耐火焰材料（如金属、玻璃及瓷器等）物品与用具的灭菌 —干热空气灭菌法是指用高温干热空气灭菌的方法。该法适用于耐高温的玻璃和金属制品的灭菌，不适合橡胶、塑料及的灭菌。 —在干热状态下，由于热穿透力较差，微生物的耐热性较强，必须长时间受高温的作用才能达到灭菌的目的。因此。干热空气灭菌法采用的温度一般比湿热灭菌法高。为了保证灭菌效果，一般规定：135-140℃灭菌3-5h；160-170 ℃灭菌2-4h；180200 ℃灭菌0.5-1h。
—蒸气性质 —灭菌器物的性质和灭菌时间 —温度，压力
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❖ 必须用饱和蒸气
保证灭菌效率应注意的事项
❖ 必须排尽灭菌柜内的空气
❖ 全部器物的温度达到所要求的温度时开始计时
❖ 灭菌结束后必须先停止加热
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煮沸灭菌法◆流动蒸汽灭菌法◆低温间歇灭菌法
❖ 煮沸灭菌法是指将待灭菌物置于沸水中灭菌的方法。煮沸时间通常为30-60分钟。。
①对肥皂碘高锰酸钾等阴离子表面活性剂有拮抗作用 ②有吸附作用，会降低药效，所以溶液内不可投入纱布、棉花等物品。
③对铝制品有破坏作用，故不能用铝制品盛装
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小知识
❖ 最早使用的消毒药液—漂白粉（Ca(ClO)2 ） ❖ 芽孢—有些细菌（多为杆菌）在一定条件下，

压力灭菌用生物指示剂的使用方法

3M压力灭菌用生物指示剂的使用方法压力灭菌用生物指示剂1262该压力蒸汽灭菌生物培养指示剂用于压力蒸汽灭菌效果的生物监测包括下排气锅和预真空锅;通过培养基颜色变化,反应嗜热脂肪杆菌芽孢是否存活,从而判断压力蒸汽灭菌生物监测结果;1.将压力蒸汽灭菌生物培养指示剂放于一标准测试包中;2.按照国家规范,分别将测试包放于锅内不同位置;3.灭菌完毕,取出该生物指示剂;4.挤破内含的安瓿,与一支对照管一起放于56℃培养锅内培养;48小时后阅读结果;结果阅读：1.培养后指示管不变色呈紫色,表示灭菌通过;2.培养后指示管变色呈黄色,表示灭菌不通过,必须及时查出灭菌失败原因;3.同时培养的对照管应为阳性呈黄色,如阴性,可能的原因为:培养条件不符合要求;生物指示剂有问题;应及时查出阴性原因;注意事项：1.灭菌完毕,含生物指示剂的包裹很热并有一定压力;需至少冷却10分钟以上,否则可能引起塑料管内的安瓿破裂,飞溅的碎片导致损伤;2.只有对照管为阳性,其生物监测结果才算有效;3.贮存于室温:15-30℃;相对湿度为35-60%;避免靠近灭菌器和化学消毒剂; 1292该生物指示剂可用以121℃下排气和132℃预真空压力蒸汽灭菌锅;3MATTESTTM压力蒸汽灭菌生物培养指示剂快速在与3MATTEST290培养锅共用时,通过酶活性的灭活与否,探测嗜热脂肪杆菌芽孢是否存活,从而判断压力蒸汽灭菌结果;使用方法:1、在生物指示剂标签上注明灭菌器锅号,负荷数量,灭菌日期;不要在指示剂的瓶或盖上另贴一个标签;将生物指示剂放于一个标准测试包内,并置于最难灭菌的位置;2、将含有生物指示剂的测试包放在灭菌器最难灭菌的位置,通常是灭菌器底层,近门或排气口上面;3、正常装载;4、灭菌循环完毕,取出生物指示剂;5、灭菌结束后,从灭菌器内取出含有生物指示剂的测试包,打开散热5分钟后才能取出生物指示剂;同时在压碎安瓿之前,让生物指示剂在培养锅外再冷却10分钟后才能压碎,然后进行生物培养;6、检查生物指示剂标签上的化学指示剂,颜色由玫瑰色变成棕色证明生物指示剂经过压力蒸汽灭菌过程的处理;该颜色的变化并非表明该处理达到灭菌的目的,如果化学指示剂没有变化,请检查灭菌过程;7、戴上防护眼镜,挤碎安瓿,然后培养生物指示剂;详细步骤请参阅3MATTEST290培养锅操作说明;8、每次培养须同时培养一个未灭菌过的生物指示剂进行阳性对照,阳性对照生物指示剂与经过灭菌处理的生物指示剂为相同生产日期和批号;阳性对照的目的是保证：1正确的培养条件2指示剂的活性不适当的贮存条件可能影响有效期内的指示剂活性33MATTEST290培养锅功能完好9、在3MATTEST290培养锅培养温度62+/-20C内,培养阳性对照和已处理的指示剂3小时,读出最终结果;阳性对照必须得出荧光阳性结果阅读器显示为红灯或+,如阳性对照读出荧光阴性绿灯或-,应检查培养锅温度和操作过程,直至阳性对照为阳性结果,生物监测的结果才是有效的;对于经过灭菌处理的指示剂,荧光阳性红灯或+表明灭菌过程失败,荧光阴性绿灯或-表明灭菌过程合格;10、如果需要通过颜色变化检测生物监测结果,应将生物指示剂放在培养锅内继续培养;同时随时监测阳性结果的出现,如8、12、24,直至168小时7天,最终视觉效果应在168小时7天得出;黄色表明细菌生长,灭菌过程失败;168小时7天没有颜色变化培养基为紫色表明灭菌过程合格;11、对任何为阳性生物监测结果应立即采取行动,如追回同锅次的灭菌物品,和寻找原因;直至生物指示剂的结果呈阴性;注意事项:冷却之前压碎或过度处理生物指示剂可能导致玻璃安瓿的破碎,飞溅的碎屑会使人员受伤;因此建议在从灭菌器内取出生物指示剂时戴防护眼镜和手套,在压碎生物指示剂时也需要戴防护眼镜;禁忌：该生物指示剂不能用于121℃预真空和132℃下排气压力蒸汽灭菌锅,及干热、化学蒸汽、环氧乙烷和其他的低温灭菌过程的生物监测;。

灭菌与灭菌技术PPT课件(模板)

此法在较高温下可以杀死细菌繁殖体但不能杀死芽胞，所以在较低温度下杀死细菌繁殖体的同时让芽胞发育变为繁殖体，这样下一次加热时可以将其杀死，反复操作至芽胞全部灭绝饱和蒸汽：即蒸汽的温度与水的沸点相当，当蒸汽的压力达到平衡时，蒸汽中不含有微细的水滴。热力灭菌或直接用钴-60辐射灭菌氧化分解细菌内部葡萄糖所需的酶
▪ 热力灭菌法分为干热灭菌法和湿热灭菌法。在同一温度下，湿热灭菌的效力比干热灭菌大
▪ 细菌在湿热下，菌体吸收水分，蛋白质较易凝固。这点可以从鸡蛋白含水量与凝固温度之间的关系看出来，凝固蛋白质所需要的温度与蛋白质的含水量有关
▪ 湿热的穿透力比干热大
▪ 湿热灭菌时，水蒸气与物品接触而凝结成水，因而发出潜热（汽化热），加速细菌的死亡
无菌操作法（Aseptic technique）：是指在整个操作过程中利用和控制一定条件，尽量使产品避免微生物污染的一种操作方法
细菌的耐受性
➢ 致死温度：是指在一定的时间内，杀死某种细菌所需要的最低温度
➢ 致死时间：是指在某一温度下，杀死某种细菌所需要的最短时间，又称热死时间
灭菌和除菌对制剂的影响
▪ 其叫中染N菌t为度灭概菌率后，预一期般达取到N的t为微10生-6 物残存数，又 ▪ 生杀物死F容0值器可中认全为部是微以生相物当所于需1要21的℃时热间压灭菌时
➢ 例如，将含有200个嗜热脂肪芽胞杆菌的5％葡萄糖水溶液以121℃热压灭菌时，其D值为2.4 分，则F0=2.4×（lg200-lg10-6）=19.92min
(一)干热灭菌法
火焰灭菌法
▪ 灼烧是最迅速、可靠、简便、紧急的灭菌方法 ▪ 金属品如铂丝、铁或镍制。不锈钢制的刮刀、镊
子等，瓷制品如研钵等，玻璃制器皿如玻棒、载玻片、试管等的灭菌都可用此 ▪ 采用该法灭菌时，最少须在火焰中加热20秒，通常是要将灭菌的物品迅速通过火焰3～4次。对研钵的简便灭菌方法是在其中加入少量乙醇点火燃烧；对于玻璃、瓷制品，操作前应充分干燥，以免烧灼时炸裂损坏

压力蒸汽灭菌生物指示剂原理

压力蒸汽灭菌生物指示剂原理嘿，朋友们，今天咱们聊聊一个听上去挺严肃但其实蛮有趣的话题——压力蒸汽灭菌生物指示剂。

别看名字长得像个数学公式，其实它就像咱们厨房里的“秘制调料”，可谓是灭菌过程中不可或缺的小助手。

想象一下，你在医院或者实验室里，周围都是高科技设备，像是《星际迷航》里的场景。

每当有人提到灭菌，大家都觉得“哇，这可是大事”。

没错，压力蒸汽灭菌就是用高温高压的蒸汽把细菌杀得一干二净，但这时候就需要我们的生物指示剂来“把关”了。

生物指示剂的工作原理就像是个超级侦探，悄悄地监视着灭菌的全过程。

这个指示剂通常包含一些特定的细菌，比如说“嗜热脂肪杆菌”，它们就像是一群勇敢的战士，耐高温，能在灭菌的环境下存活下来。

但是一旦温度达到了灭菌标准，这些小家伙就会被彻底消灭。

就像一场激烈的比赛，最后胜利的只有一方，那就是咱们的灭菌蒸汽。

嘿，没错，这个过程让人想到“劣势中的逆袭”，是吧？说到这里，你可能会问，这个生物指示剂怎么知道灭菌的效果呢？其实它就是个“变色龙”，它会根据环境的变化做出反应。

如果灭菌成功，指示剂的颜色就会变得“死气沉沉”，变成“黑暗中的一抹灰”。

相反，如果灭菌没有达到要求，颜色就会保持原样，提醒大家“嘿，别高兴得太早，还是要再检查一下哦！”这就好比是个“叛徒”，忠实地告诉我们结果。

使用生物指示剂还有个好处，能够重复使用。

就像你的爱好，有时候玩得开心，想再来一局。

这些小家伙们能够在多次灭菌后，依然发挥作用，真是物超所值。

不仅能节省成本，还能提高效率，谁不想让自己的工作更轻松呢？咱们也不能忽视这个生物指示剂的取样方法。

通常，它们会被放在灭菌器内的不同位置，确保每个角落都能得到关注。

就像咱们打扫卫生，角落里总会藏着一些小脏东西，得认真对待。

这样才能确保，整个灭菌过程都不留死角。

想象一下，最后检测出全灭的结果，那种成就感简直让人心潮澎湃，仿佛自己获得了“灭菌之王”的称号！灭菌的过程可不是一次就能成功的事情。

无菌医疗器械的灭菌ppt课件

❖回风口应均匀分布在洁净室的下部，高度应低于工作台面。
❖洁净室内有局部排风装置时，其位置应设在工作室气流的下风侧，以免气流短路。
洁净级别的设置
无菌医疗器械生产洁净室的洁净度等级，按洁
洁净净度室级空别气中尘的埃含最大尘允浓许数度，和个含/m菌3 量，微分生为物最四大个允等许数
级3100：00级100000级级、≥。3051.0500m000≥级50.、01m 000C沉F0U降10/菌皿级、
• 准备测试样品 • 建立灭菌相关参数 • 确定半周期 • 建立全周期灭菌参数
医疗器械的灭菌 — 环氧乙烷灭菌—灭菌确认
满载（2）生物指示剂 1. 菌种：ATCC9372 2. 产品最难灭菌的位置（ISO11138-1） 3. 生物指示剂的数量： • 可用体积≤5m3，至少20个 • 可用体积大于5m3，小于10m3，每增加1m3，增加 2个BI • 可用体积大于10m3，每增加2m3，增加2个BI • Ⅰ号灭菌柜放置60个，Ⅱ号灭菌柜放置30个 4. 生物指示剂的接种量：≥106 5. 生物指示剂的D值： ≥2.5分钟 6. 测试结果可接受标准：所有BI培养均无生长
❖ 通过调整，使不同级别洁净室室内的空气静压差大于5 帕，与室外大气大于10帕，防止外界污染或交叉污染从门或各种缝隙部位侵入洁净室内
空气过滤和送风系统
❖ 空气净化调节系统向洁净室输送洁净空气，以控制和调节洁净室内的温度、湿度、新空气量、静压差、尘埃数、菌落数等环境参数。
❖ 个级别洁净度的空气净化处理一般应采取初效、中效、高效过滤器三级过滤。独立的洁净车间应采取集中式中央净化空气调节系统。
测试方法：兔法/鲎试剂法
医疗器械的灭菌
灭菌方法的选择
EO灭菌注射器

压力蒸汽灭菌生物指示剂

压力蒸汽灭菌生物指示剂压力蒸汽灭菌生物指示剂是由嗜热指肪杆菌(ATCC 7953)芽孢菌片、恢复培养基和外管组成。

菌片含菌量为5.0× ,5.0× cfu/片。

生物指示剂的抗力符合国际标准和国家标准的规定:既在121?饱和蒸汽作用下，存活时间?3.9min，杀灭时间?19min，D 10 值1.3,1.9min。

【适用范围】适用于 121?下排气式压力蒸汽灭菌器、132?,134?预真空或脉动真空压力蒸汽灭菌136?台式或卡式压力蒸汽灭菌器灭菌效果的监测和制药工业、医院制剂生产等器、134?,各行业使用的压力蒸汽灭菌器灭菌效果的监测。

【使用方法】，，，1 使用时，将生物指示剂放入标准检测包的中心或待灭菌物品包的中心，置于灭菌器的难消毒的位置按规定的灭菌温度和时间进行灭菌处理。

2 灭菌完毕，即刻将生物指示剂取出，盖朝上垂直握于手中，用专门工具夹碎管内安瓶，让培养液流出浸没菌片，置于56?恒温培养箱内或配套的微型培养器内培养24小时观察初步结果，48小时观察最终结果，按规定每月至少用生物指示剂进行一次灭菌效果监测。

【结果判定】培养后生物指示剂中的溴甲酚紫培养液由紫色澄清液体变为黄色澄清液体即表示有菌生长，判定为灭菌不合格;培养液仍为紫色澄清液体为无菌生长，同时阳性对照管中的嗜热脂肪杆菌生长正常即培养液由紫色澄清液体变为黄色澄清液体，判定为灭菌合格。

【注意事项】1将生物指示剂管从灭菌器内取出或从冰箱内取出后，需在室温下放10min左右，再夹碎安瓿，以免过热或过冷夹碎外管。

2液体培养基的pH值低于7.0或高于7.5，均可使嗜热脂肪杆菌不能生长;3 培养温度须在56?,65?之间，否则可导致嗜热脂肪杆菌生长不良，或不能生长。

4 灭菌处理后，生物指示剂中的液体培养基颜色与压力蒸汽灭菌前比较会变浅，呈显浅紫色，这种变化属正常现象。

5 用恢复培养液在56?培养时间过长(72小时以上)，阳性对照管中培养液的黄色容易消退，培养液逐渐干燥，应注意每天观察，随时记录培养结果。

消毒灭菌效果监测方法(部分)ppt课件

内窥镜消毒灭菌效果的生物监测
采样时间
消毒灭菌后使用前
采样方法
监测部位为内镜的内腔面用无菌注射器抽取10ml含有相应中和剂的洗脱液从待检内镜的活检口注入内镜（使用蠕动泵）用无菌试管从活检出口收集注入的液体2h内送检
合格标准
消毒内镜细菌总数 ≤ 20 cfu/件
灭菌内镜无任何细菌检出
遵循WS/T 313 中华人民共和国卫生部行业标准《医务人员手卫生规范》
采样时间
手卫生后接触病人或诊疗操作之前
采样方法
棉拭子法: 1、被检人员将双手伸出，五指并拢。 2、检查者取2支无菌棉试纸，并浸沾于含相应中和剂的无菌洗脱液中。 3、取一支棉拭子在一只手手指屈面，从指根到指端往返涂擦2次（一只手的涂擦面积约30cm2 ），并随之转动采样棉拭子；按同样方法用另一支棉拭子涂擦另一只手。 4、剪去操作者手接触的部位，将2支棉拭子投入10ml含相应中和剂的无菌洗脱液试管内，立即送检。
化验单书写：科室、采样地点、被采人、采样人，采样时间。
采样步骤
用棉拭子蘸取相应中和剂
双手的屈指面，从指跟到指端；往返涂擦2次，同时转动棉签.（一只手一支棉试纸）
将手接触的部分折断，投入10ml含相应中和剂的试管中
合格标准
卫生手消毒：外科手消毒：
细菌菌落总数≤10cfu/cm2 细菌菌落总数≤5cfu/cm2
医院感染监测内容
♦ 医院空气微生物学监测 ♦ 物体表面微生物学监测 ♦ 消毒剂微生物学监测 ♦ 医务人员手微生物学监测 ♦ 灭菌效果生物监测 ♦ 医疗器械消毒效果监测 ♦ 医疗用水的微生物学检测
医院空气微生物学监测
采样时间
消毒后操作前
1、采用洁净技术净化空气的房间（Ⅰ）洁净系统自净后、操作前

生物指示剂

第三页，课件共有19页
生物指示剂的优点
生物指示剂是一群特定的微生物和载体结合而制成，对相应的灭菌模式有高度抵抗，指示微生物的死亡真实可靠地反映灭菌状况. 能正确反映灭菌过程中有关时间、温度和湿度的关系。
第四页，课件共有19页
生物指示剂的组成形式
目前，常用于灭菌工艺验证的生物指示剂主要有三种形式，它们都是用对特定灭菌工艺具有一定耐受性并已知其种类的微生物芽孢制备而成。有些生物指示剂可能含有两种不同类微生物，并且两种微生物的含量也不相同。 1 .芽孢条（spore strip) 2.芽孢悬浮液（spore suspension) 3.自含型生物指示剂（self-contained indicator)
生物指示剂相关知识目录?生物指示剂的定义?生指指的的组成形物示剂式?生物指示剂的制备?生物指示剂的选择和使用生物指示剂的定义生物指示剂简称为bibiologicalindicator是对特定灭菌工艺具有一定耐受性并且能够定量测定效力的微生物制剂是对特定灭菌工艺具有一定耐受性并且能够定量测定效力的微生物制剂适用于制备生物指示剂的微生物多为芽孢类细菌这是因为除辐射灭菌外芽孢类细菌比常规的生长态微生物对灭菌工艺具有更强的耐受性
第十八页，课件共有19页
生物指示剂的选择和使用
五.液态过氧化氢灭菌用生物指示剂在液态过氧化氢灭菌工艺中，常采用嗜热
脂肪芽孢杆菌芽孢，但也可用梭状芽孢杆菌芽孢或枯草芽孢杆菌芽孢，还可选用其他类的微生物芽孢，只要证明其对过氧化氢的耐受性不低于上述3种芽孢的耐受性即可。
第十九页，课件共有19页
芽孢悬浮液
芽孢悬浮液可被接种于代表性的待灭菌产品溶液或模拟产品溶液中。可用此芽孢悬浮液直接接种于产品内或产品外表面，这样能更加直观的考察产品的实际灭菌效果。

灭菌方法与生物指示剂45页PPT

重复别人所说的话，只需要教育；而要挑战别人所说的话，则需要头脑。—— 玛丽·佩蒂博恩·普尔
44、卓越的人一大优点是：在不利与艰难的遭遇里百折不饶。——贝多芬
45、自己的饭量自己知道。——苏联
灭菌方法与生物指示剂
•
26、我们像鹰一样，生来就是自由的，但是为了生存，我们不得不为自己编织一个笼子，然后把自己关在里面。 ——博莱索
•
27、法律如果不讲道理，即使延续时间再长，也还是没有制约力的。— —爱·科克
•
28、好法律是由坏风俗创造出来的。 ——马克罗维乌斯
•
29、在一切能够接受法律支配的人类的状态中，哪里没有法律，那里就没有自由。— —洛克
•
30、风俗可以造就法律，也可以废除法律。 ——塞·约翰逊
41、学问是异常珍贵的东西，从任何源泉吸收都不可耻。——阿卜·日·法拉兹

灭菌操作中生物指示剂的相关研究

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四、小结
• 保证无菌产品无菌是产品质量保证的核心问题。无菌生产工艺是保障产品无菌的关键手段。而只有经过充分验证后的灭菌（无菌）生产工艺，才能保证生产出无菌的产品。微生物挑战试验是无菌生产工艺验证的重要环节。而选择适当的生物指示剂则是微生物挑战试验结果获得认可的关键。选择恰当的生物指示剂，执行正确的步骤，并提供系统完整的信息，才能使无菌生产工艺验证结果令人信服。
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三、在无菌生产工艺验证中的应用
• 验证过程：将一定量已知耐热性的孢子接入产品中, 用设定的灭菌程序灭菌, 以确认设定的灭菌工艺是否符合标准。 • P.S.研究灭菌程序之前, 必须了解生物指示剂在产品或替代产品中的耐热性
“The requirements of the test are met if the determined D value is within 20% of the labeled D value for the selected sterilizing temperature and if the confidence limits of the estimate are within 10% of the determined D value.”——USP
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三、在无菌生产工艺验证中的应用
• 菌株的“抗力”指标：D值（微生物耐力系数）、存活时间和杀灭时间 eg:对湿热灭菌（121℃）的工艺验证用菌株均应证明“具备合乎要求的抗力”；通常应满足以下要求： D值在1.5～3.0之间；存活时间在4.5～14.0min之间；完全杀灭时间在13.5～32.0剂验证实例
• 验证时，腔室内的物品应按实际生产时的要求进
行装载，生物指示剂的使用数量应足以反映整个物品内、外部的灭菌状况，生物指示剂既要遍布整个腔室，又要尽可能地放在热效应最差的部位，如物品中央、管路拐角以及腔室的排水口（干热灭菌的排风口）等。