桑葚中克百威和3-羟基克百威残留量测定

Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ａｎ ｕｌｔｒａ ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ ｌｉｑｕｉｄ ｃｈｒｏｍａｔｏｇ ｒａｐｈｙ ｔａ ｎ ｄｅｍ ｍａｓｓ ｓｐｅｃｔ ｒｏｍｅｔｒｙ （ＵＰＬＣ—ＭＳ／ Ｍ Ｓ） ａｓｓａｙ ｆｏｒ
ｑｕａｎ ｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｃａｒｂｏｆｕｒａｎ ａｎｄ ３－ｈｙｄｒｏｘｙｃａｒｂｏｆｕｒａｎ， ｉｎ ｍｕｌｂｅｒｒｙ ｗａｓ ｄｅｖｅｌｏｐｅｄ． Ｔｈｅ ｃａｒｂｏｆｕｒａｎ ａｎｄ ３－ｈｙｄｒｏｘｙｃａｒｂｏｆｕｒａ ｎ ｗｅｒｅ ｅｘｔｒａｃｔｅｄ ｂｙ ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ， ｐｕｒｉｆ ｉｅｄ ｂｙ Ｃａｒｂｏｎ／ＮＨｚ ａ ｎ ｄ ａｎａｌｙｚｅｄ ｗｉｔｈ ａ ｍｅｔｈａ ｎ ｏｌ－０．１％ ｆｏｒ ｍ ｉｃ ａｃｉｄ ｓｏｌｕｔｉｏｎ－ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ ｍｏｂｉｌｅ ｐｈａｓｅ．Ｔｈｅ ｒｅｓｉｄｕｅｓ ｏｆ ｃａｒｂｏｆｕｒａ ｎ ａ ｎ ｄ ３－ｈｙｄｒｏｘｙｃａｒｂｏｆｕｒａｎ ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｒ ｍ ｉｎｅｄ ｂｙ ｍｕｌｔｉｐｌｅ
１材 料 与方 法
１．１ 试验 药 品和 试 剂 克 百威 （标 准 品编 号 为 ＧＢＷ（Ｅ）０８１３１２）和 ３一羟
基 克 百威 （标 准 品 编 号为 ＧＢＷ（Ｅ）０８１３１３）标 准 品购 于农 业部 环境 质量 监督检 验 测试 中 心（天津）， 甲醇 、 乙腈 、 甲苯 、 甲酸均 为质 谱 级 ，购 白 Ｆｉｓｈｅｒ公 司 。 １．２仪 器 和设 备
将 移取 的 ｌ０．００ ｍＬ提 取液加 入 已经过 ５ ｍＬ乙腈 ＋甲苯（体 积 比为 ３：１）预淋洗 Ｍｅｇａ ＢＥ ＣＡＲＢ／ＮＨ２ 柱 ，收集淋洗 液 ，再 用 ２５ ｍＬ乙腈 ＋甲苯 （体 积 比为 ３：ｌ１分 ５次 洗脱 ，合 并 淋洗 液 ，于 ４０ 。Ｃ氮 吹吹 至 近干 ，用 ５．００ ｍＬ ５０％ 甲醇 定容 ，旋 涡 混合 器混 匀后 过 ０．２２ ｕｍ 滤膜 ，待检 测 。 １．５ 超 高效 液相 色谱 一质谱 条件
第 ４Ｏ卷 第 ２期 ２０１８年 ４ 世 界 农 药 Ⅵｒ０ｒｌｄ Ｐｅｓｔｉｃｉｄｅｓ
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桑葚 中克 百威和 ３．羟基克 百威残 留量测定
李 国烈，蒋金 芳 ，苏 旭 ，覃 明丽 ，杜 鑫 ，何沛蓉 ，何家 国
（南充农 产 品质量 监 测检 验 中心 ，四 川 南充 ６３７０００）
作者 简介 ：李 １ ￣ （１９８４－）， 男， 四川 巴中人 ，农 艺 师 ，硕士 ，主 要从 事农 产 品质量 安全 检测 工作 ，Ｅ－ｍａｉｌ：ｇｌｉｅ２０１２＠ １６３．ｃｏｍ。 收稿 日期 ：２０１８—０１．２２。
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世 界 农 药
第 ４０卷
《食 品安全 国家标 准食 品 中农 药最大残 留限量 》中规 定 ，其 残 留物 为克 百威和 ３一羟基 克百威 之和 ，以克百 威表示 ，在 水果 中的最大 残 留限量为 ０．０２ ｍｇ＆ｇ Ｊ。
表 １ 流动相及梯度洗脱 条件
时 间／ｍｉｎ 流速，（ｍＬ·ｍｉｆ ） 甲醇／％ 水（０．１Ｏ％甲酸）／％ 乙腈 ／％ 曲线
表 ２ 测定 桑葚 中克百威和 ３一羟 基克百威残留的质谱参数
１．６ 方 法标 准 曲线 和 检测 限 用 桑 葚 空 白基 质 溶液 配 制浓 度 为 １．ｏ０、２．００、
流 动相采用 甲醇 、乙腈和含 有 ０．１％甲酸水溶液进 行梯度洗 脱 ，洗脱程 序见表 １，流动相使用 前用超声 波脱 气 。色谱柱温 ：３５。Ｃ，样 品室温度 １６。ｃ，进样 量 ：１ ｐ．Ｌ。质谱采 用 电喷雾离子源 正离子模式 ｓＩ ， 多反应 监测 （ Ｍ）方 式进行采集 。脱溶剂气 和锥孔气 均为 高纯氮 气 ，流量分 别为 １ ０００ Ｌ／ｈ和 １５０ Ｌ／ｈ，碰 撞气 为高纯 氩气 ，流量 为 ０．１０ ｍＬ／ｍｉｎ，脱溶 剂温度为 ５００。Ｃ。定量 离子对 、定性 离子对 、毛细管 电压 、锥 孔 电压和碰 撞 电压等相关参 数见表 ２。
第 ２期
李 国烈等 ：桑葚 中克 百威和 ３．羟基克 百威残 留量测 定
Ｄｅｔｅｒｍ ｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ Ｃａｒｂｏｆｕｒａｎ ａｎｄ ３－Ｈｙｄｒｏｘｙｃａｒｂｏｆｕｒａｎ
Ｒｅｓｉｄｕｅｓ ｉｎ Ｍ ｕｌｂｅｒｒｙ
ＬＩ Ｇｕｏｌｉｅ，ＪＩＡＮＧ Ｊｉｎｆａｎｇ，ＳＵ Ｘｕ，ＱｒＮ Ｍｉｎｇｌｉ，ＤＵ Ｘｉｎ，ＨＥ Ｐｅｉｒｏｎｇ，ＨＥ Ｊｉａｇｕｏ （Ｎａｎｃｈｏｎｇ Ｍｏｎｉｔｏｒｉｎｇ ａｎｄ Ｔｅｓｔ Ｃｅｎｔｅｒ ｆｏｒ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ Ｑｕａｌｉｔｙ，Ｎａｎｃｈｏｎｇ ６３７０００，Ｃｈｉｎａ）
克百威０ｃａ 蛳 口３ 晤 暾３＿ｈ’ ｏｘｙｃ Ⅱａｎ） 已经 被美 国及我 国明令 禁止 用 于部 分农 产 品 ，农业 属 于广 谱 、高 效 的氨 基 甲酸 酯类 杀 虫 、杀 螨 、杀 线 部 １９９号公告 禁止 克 百威在 蔬菜 、果树 、茶 叶和 中 虫剂 ，具有 内吸 、触杀 、胃毒作 用 ，并有一 定的 杀卵 草 药材 上使 用 】。然 而 ，由于 克 百威 和 ３．羟基 克 百 作用 ，曾广泛 用于害 虫的 防治 ，如蚜 虫、害 螨等 ¨ｌ。 威 具 有 良好 的 防治 效果 ，在 生 产 中还存 在 违规 使用 但是 ，由于克百威和 ３一羟基克百威具有高毒性 ，现 的现 象 ，在 蔬菜 、水果 上时 有检 ，ｑ４引。ＧＢ ２７６３—２０１６
目前 ，克百 威和 ３一羟基 克 百威 在蔬 菜和 水 果 中 的残 留检 测报 道 比较 多 ，检 测 基质 包括 了辣椒 、黄 瓜 、豇 豆 、番茄 、苹 果 、葡 萄 、草 莓 、蜂蜜 、小麦 、 水稻 和土 壤 等Ｌ１，４。 ．１ Ｊ，但 尚未见 这 ２种 农药 在桑 葚 基 质 中的残 留检测 报 道 。本 试验 建 立 了桑 葚 中克 百 威和 ３．羟基 克百威残 留检测 的超高效液相色谱一串 联 质 谱 方 法 （Ｃ￣ＬＣ．ＭＳ／ＭＳ）， 以期 为 桑 葚 中克 百威 和 ３一羟 基 克 百威 的残 留检 测提 供 技术 参考 。
线性关系，相关系数 ２）均大于ｏ．９９，方法检出限均为０．２５ ｇ ｇ，定量限均为 １．Ｏ０ ｕｇ／ｋｇ。在 １．Ｏ０～１００．Ｏ０ ｐｇ／ｋｇ
添加浓度 范围 内，回收率 、精密度和基 质效应均满足分析方法要求 。该试验方法适用于桑葚 中克百威和 ３．羟基 克 百威 残 留 量 的 测 定 。 关键词 ：桑葚 ；克百威；３一羟基 克百威 ；残留；基质效应 ；超高效液相色谱．串联质谱 ＤＯＩ：１０．１６２０１ｄ．ｃｎｋｉ．ｃｎ３１—１８２７／ｔｑ．２０１８．０２．１３ 中图分类号：ＴＱ４５０．７ 文献标志码 ：Ａ 文 章编 号：１００９—６４８５（２０１８）０２ ００５７．０６
在 最 低 浓度 附近 添 加 一系 列 已知 浓度 的双份 样 品进 行测 定 ，采用 Ｍａｓｓｌｙｎｘ Ｖ４．１软件 计算 克百 威和 ３． 羟 基 克 百威 的信 噪 ｔＬ（Ｓ／Ｎ）， 以 Ｓ／Ｎ≥３ 时的样 品浓 度为 方法 检 出限 ｌｌ 。 １．７ 方法 回收 率 和精 密度
回 收率 试验 采 用加 标 回 收试 验法 。取 桑葚 空 白 样 品，按 照添 加 浓度 １．００、１０．００、１００．００￣ｔｇ＆ｇ 分 别加 入相 应 的克 百威 和 ３．羟基 克百 威标 品溶 液 中，
摘要 ：建 立 了桑 甚 中克百威和 ３．羟基 克 百威 残 留检 测 的超 高效液 相色谱 ．串联 质谱方 法（ｕｌｔｒａ ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ ｌｉｑｕｉｄ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ｔａｎｄｅｍ ｍａｓｓ ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ，ＵＰＬＣ—ＭＳ／ＭＳ）。桑 葚 样 品经 乙腈 提 取 ，石 墨化 碳 黑氨 基 复合 柱 （Ｃａｒｂｏｎ／ＮＨＤ净 化，以 甲醇和 ０．１％甲酸水溶液作为流动相洗脱 ，采用 电喷雾 离子源 正离子模 式（ＥｓＩ＋），多反 应监测 （ＭＲＭ）方式进 行采集，外标 法定量。结果表 明，克 百威和 ３．羟基 克百威在 １．００～２００．Ｏ０ ｇ／Ｌ浓 度范围 内呈现 良好的
５．０Ｏ、１０．ｏ０、２０．００、５０．Ｏ０、１００．Ｏ０、２００．００ ｇ／Ｌ的 克 百威 和 ３一羟 基 克百 威基 质标 准 溶液 ，采 用 １．５仪 器条 件 进 行分 析 ，分别 以克 百威和 ３．羟 基 克 百威 定 量 离子 的峰面 积 为 纵 坐标 ，质 量 浓度 为 横 坐标 作标 准 曲线 ，并 进 行 回归分 析 求 出回 归方程 和 相关 系数 。 标 准 曲线 采用 Ｍａｓｓｌｙｎｘ Ｖ４．１软件 绘制 。检 出限采 用
ａｎｄ ｔｈｅ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ ｏｆ ｆｒｏｍ １．００ ｔｏ ２００ ｇ／Ｌ ａｎｄ ｔｈｅ ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ ｃｏｅｆ ｉｃｉｅｎｔ ）ｗａｓ ｂｏｔｈ ｍｏｒｅ ｔ ｈａｎ ０．９９．Ｔｈｅ ｌｉｍｉｔｓ ｏｆ
ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｗｅｒｅ Ｏ．２５ ｇｇ／ｋｇ ａｎｄ ｔｈｅ ｌｉｍ ｉｔ ｏｆｑｕａｎ ｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｗｅｒｅ １．００ ｇｇ／ｋｇ．Ｔｈｅ ｒｅｃｏｖｅｒｙ，ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ ａ ｎ ｄ ｍａｔｒ ｉｘ ｅｆｅｃｔ ｏｆｔｈｉｓ ｍｅｔｈｏｄ，ｗｉｔｈ １．Ｏ０— １００ ｐ．ｇ／ｋｇ ａｄｄｉｔｉｖｅ ａｎａｏｕｎｔ，ｃａｎ ｍｅｅｔ ｔｈｅ ｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔｓ ｏｆａ ｎ ａｌｙｔｉｃａｌ ｍｅｔ ｈｏｄ．Ｔ ｈ ｉｓ ｍｅｔ ｈｏｄ ｗａｓ ｓｕｉｔａｂｌｅ ｆｏｒ ｔｈｅ ｄｅｔｅｒｍ ｉｎａｔｉｏｎ ｏｆｃａｒｂｏｆｕｒａｎ ａｎｄ ３－ｈｙｄｒｏｘｙｃａｒｂｏｆ ｏｒａｎ ｒｅｓｉｄｕｅｓ ｉｎ ｍｕｌｂｅｒｒｙ． Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｍｕｌｂｅｒｒｙ；ｃａｒｂｏｆｕｒａｎ ；３－ｈｙｄｒｏｘｙｃａｒｂｏｆｕｒａｎ ；ｒｅｓｉｄｕｅ；ｍａｔｒｉｘ ｅｆｅｃｔ；ＵＰＬＣ—Ｍ Ｓ／ Ｍ Ｓ
准确称取匀浆后的桑葚样品 １０．００ ｇ于 ５０ ｍＬ离
心管 中 ，加入 ２０．００ ｍＬ乙腈 ，置于 摇床上振 摇 ３０ ｍｉｎ， 加入 ５ ｇ氯 化 钠 ，盖 上塞 子 ，剧烈 震荡 １ ｍｉｎ，置 于 离 心机 中 １０ ０００ ｒ／ｍｉｎ 离 心 １０ ｍｉｎ，移 取 上清 液 １０．００ ｍＬ待净化 。 １．４ 样 品净 化