常用抗凝剂的配制及用法_常用抗凝剂的配制及用法

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常用抗凝剂的配制及用法

常用抗凝剂的配制及用法 Prepared on 22 November 2020在医学实验中常需动物的全身抗凝，采出的全血或血浆有的也需加入适当的抗凝剂抗凝。

对抗凝剂的要求是：用量少、溶解度大、不带进干扰实验的杂质。

一、肝素（1）肝素抗凝作用原理肝素的抗凝作用很强,作死亡复苏等实验时,常用它作动物全身抗凝剂，肝素的抗凝作用主要是抑制凝血致活酶的活力，阻止血小板凝聚以及抑制抗凝血酶等作用，从而使血液不发生凝固。

（2）配制和用量纯的肝素10mg能抗凝65~125 ml血液(按lmg等于125U，10~20U能抗1 ml血液计)。

但由于肝素制剂的纯度高低以及其保存时间长短不等，因而其抗凝效果也不相同。

一般可配成1％肝素生理盐溶液，用时取0．1毫升于试管内，100℃烘干，每管能抗凝5～10ml血液。

也可将抽血注射器用配好肝素湿润一下管壁，直接抽血至注射器内而使血液不凝。

在动物实验作全身抗凝时，一般剂量为：大白鼠2．5～3．0mg/200～300g体质量，兔10mg ／kg体质量，狗5～10mg／kg体质量。

肝素可改变蛋白质等电点，因此当用盐析法分离蛋白质作蛋白质各部分的测定时，不可采用肝素。

市售的肝素钠溶液每毫升含肝素12500U，相当于100mg。

二、草酸盐合剂（1）原理草酸胺能使血细胞略为膨大，而草酸钾能使血细胞微缩小，因此草酸铵与草酸钾按3：2比例配置，可使血细胞体积保持不变；加福尔马林则能防止微生物在血中繁殖。

此抗凝剂最适于作红细胞比积测定。

（2）配制方法及用量草酸铵1．2g、草酸钾0．8g、福尔马林1．0ml、蒸馏水加至100ml每毫升血加草酸盐合剂0．1ml(即相当草酸铵1．2mg，草酸钾0．8mg)。

根据取血量将计算好的草酸盐剂量加入玻璃容器内烤干备用。

如取0．5ml于试管，烘干后每管可使5ml血不凝固。

（3）注意事项草酸的作用在于能够沉淀血凝过程中所必需的钙离子，而达到抗凝目的。

用时注意加的量应适中，不能过多，以免妨碍去蛋白质血滤液的制取。

临床常见抗凝剂使用

枸橼酸钠
与血液中的Ca2+结合形成螯合物，使钙离子失去凝血功能，凝血过程被阻断，从而阻止血液凝固。
4%浓度：200ml:8g
4.0%浓度规格的抗凝剂:血液的比例为1:16
血凝检查、血沉、血小板功能分析等。
大部分凝血实验都可用枸橼酸钠抗凝，它有助于Ⅴ因子和Ⅷ的稳定，并且对平均血小板体积及其他凝血因子影响较小，可用于血小板功能分析。枸橼酸钠细胞毒性较小，也是输血保养液成分之一。但是，枸橼酸钠6mg才能抗凝1ml血液，碱性强，不适用于血液分析和生化检测。
若抗凝剂浓度过高，渗透压上升，会造成细胞皱缩；低Ph可使细胞膨胀。EDTA-K2可使红细胞体积轻度膨胀，采血后短时间内平均血小板体积不稳定半个小时后趋于稳定。EDTA盐能一直或干涉纤维蛋白凝块形成纤维蛋白单体的聚合，不适用于血凝和血小板功能检测，也不适用于钙、钾、钠及含氮物质的测定。此外，EDTA能影响某些酶的活性和抑制红斑狼疮因子，故不适合制作组化染色和检查红斑狼疮细胞的血涂片。
肝素
通过与抗凝血酶Ⅲ结合引起抗凝血酶Ⅲ构型发生变化，加速凝血酶-凝血酶复合体形成而产生抗凝作用。此外，肝素还能借助血浆辅助因子（肝素辅助因子Ⅱ）来抑制凝血酶。
10.0～12.5IU/ml血液
血液流变学检测、细胞渗透性试验、血气、血浆渗透两、红细胞压积及普通生化测定。
肝素具有抗凝血酶作用，不适合做凝血功能检测；肝素过量可引起白细胞聚集和血小板减少，所以不适合做白细胞分类和血小板计数，更不能用于止血检验；肝素抗凝血不能用于制作血涂片，因为瑞氏染色后出现深蓝色背景，影响镜检；肝素抗凝血应于短时间内使用，否则放置过久血液又可凝固。
临床检验常用抗凝剂种类及用途
广西医科大学医学检验技术2014级韦雨欣
名称
原理

常用抗凝剂及其配置法

常用抗凝剂的配制及用法在医学实验中常需动物的全身抗凝，采出的全血或血浆有的也需加入适当的抗凝剂抗凝。

对抗凝剂的要求是：用量少、溶解度大、不带进干扰实验的杂质。

（2）配制和用量纯的肝素10mg能抗凝65~125 ml血液(按lmg等于125U，10~20U能抗1 ml 血液计)。

但由于肝素制剂的纯度高低以及其保存时间长短不等，因而其抗凝效果也不相同。

一般可配成1％肝素生理盐溶液，用时取0．1毫升于试管内，100℃烘干，每管能抗凝5～10ml血液。

也可将抽血注射器用配好肝素湿润一下管壁，直接抽血至注射器内而使血液不凝。

在动物实验作全身抗凝时，一般剂量为：大白鼠2．5～3．0mg/200～300g体质量，兔10mg／kg体质量，狗5～10mg／kg体质量。

肝素可改变蛋白质等电点，因此当用盐析法分离蛋白质作蛋白质各部分的测定时，不可采用肝素。

市售的肝素钠溶液每毫升含肝素12500U，相当于100mg。

（3）注意事项做全血DNA提取的时候抗凝剂不能采用肝素！因为肝素是聚合酶链式反应的抑制剂！二、草酸盐合剂（1）原理草酸胺能使血细胞略为膨大，而草酸钾能使血细胞微缩小，因此草酸铵与草酸钾按3：2比例配置，可使血细胞体积保持不变；加福尔马林则能防止微生物在血中繁殖。

此抗凝剂最适于作红细胞比积测定。

（2）配制方法及用量草酸铵1．2g、草酸钾0．8g、福尔马林1．0ml、蒸馏水加至100ml每毫升血加草酸盐合剂0．1ml(即相当草酸铵1．2mg，草酸钾0．8mg)。

根据取血量将计算好的草酸盐剂量加入玻璃容器内烤干备用。

如取0．5ml于试管，烘干后每管可使5ml血不凝固。

（3）注意事项草酸的作用在于能够沉淀血凝过程中所必需的钙离子，而达到抗凝目的。

[解答]生化常用抗凝剂

常用抗凝剂阻止血液凝固的原理抗凝----应用化学或物理学的方法，抑制或除去血液中的某些凝血因子以阻止血液凝固的方法。

抗凝剂----能阻止血液凝固的化学试剂。

一、枸橼酸钠【原理】枸橼酸钠（柠檬酸钠）是枸橼酸钠的三钠盐。

它能与血液中的钙离子形成可溶性的螯合物，使Ca2+失去凝血作用，从而阻止血液凝固。

【应用范围】血沉、凝血象、血小板功能检查及血液保养液。

【用量】凝血象: 109mmol/L水溶液,与血液之比为1:9；血沉: 106mmol/L水溶液,与血液之比为1:4。

二、乙二胺四乙酸盐【原理】乙二胺四乙酸（EDTA）盐可与血液中的钙离子结合形成配位化合物，从而阻止血凝。

【应用范围】一般血液学检查和血液粘度测定。

不适于凝血象及血小板功能检查。

【用量】其有效抗凝浓度为1～2mg/ml血液。

血细胞分析仪用EDTA-K2作抗凝剂，用量为EDTA-K2•2H2O 1.5～2.2mg/ml血液。

三、肝素【原理】通过与抗凝血酶Ⅲ结合，增强抗凝血酶的作用，灭活丝氨酸蛋白酶，从而可阻止凝血酶的形成和阻止血小板聚集，阻止血液凝固。

【应用范围】血细胞比容测定、血液粘度测定和多种生化分析。

【用量】通常用肝素的钠盐或钾盐粉剂配成1g/L肝素水溶液。

取0.5ml置小瓶中，37～50℃烘干后，能抗凝5ml血液。

四、草酸盐草酸盐也是常用的抗凝剂，优点是溶解度大，作用原理是溶解后解离的草酸根与标本中的Ca2+形成草酸钙沉淀，使Ca2+失去凝血功能，凝血过程被阻断。

血液采集中用何种抗凝剂1、乙二胺四乙酸（EDTA）EDTA有二钠、二钾和三钾盐。

均可与钙离子结全成螯合物，从而阻止血液Na2C10H14O8N2+CA2+CAC10H12O8N2+2NA++2H+ EDTA盐经1000C烘干，抗凝作用不变，通常配成15g/L水溶液，每瓶0.4ml，干燥后可抗凝5ml血液。

EDTA盐对红、白细胞形态影响很小，根据国际血液学标准公委员会（Internationalcommittee standard of hematology ,ICSH）1993年文件建议，血细胞计数用EDTA二钾作抗凝剂，用量为EDTA-K2。

_实验室常用血液抗凝剂的特点及应用

实验室常用血液抗凝剂的特点及应用在实验室检验中，有许多检测项目的血液标本是需要抗凝才可以检测的。

而抗凝剂种类较多，实际应用中要根据不同的需要进行选择，才能获得理想的效果。

实验室中常用的抗凝剂有肝素、乙二胺四乙酸盐（EDTA盐）、枸橼酸盐、草酸盐等4种，现将它们的特点及应用分别叙述如下：一、肝素抗凝是用于血液化学成分检测的首选抗凝剂。

肝素是一种含有硫酸基团的粘多糖，是分散相物质平均分子质量为15000。

其抗凝原理主要是通过与抗凝血酶Ⅲ结合引起抗凝血酶Ⅲ构型发生变化，加速凝血酶-凝血酶复合体形成而产生抗凝作用。

此外，肝素还能借助血浆辅助因子（肝素辅助因子Ⅱ）来抑制凝血酶。

常用肝素抗凝剂是肝素的钠、钾、锂、铵盐，其中以肝素锂最好，但其价格较贵，钠、钾盐会增加血液中的钠、钾含量，铵盐会增加尿素氮的含量。

通常用肝素抗凝的剂量为10.0～12.5 IU/ml血液。

肝素对血液成分干扰较少，不影响红细胞体积，不引起溶血，适用于做红细胞渗透性试验、血气、血浆渗透量、红细胞压积及普通生化测定。

但肝素具有抗凝血酶作用，不适合做血凝试验。

另外，肝素过量可引起白细胞聚集和血小板减少，所以不适合做白细胞分类和血小板计数，更不能用于止血检验。

此外，肝素抗凝血不能用于制作血涂片，因为Wright染色后出现深蓝色背景，影响显微镜减产。

肝素抗凝血应于短时间内使用，否则放置过久血液又可凝固。

二、乙二胺四乙酸盐(EDTA盐)EDTA能与血液中Ca2+结合成螯合物，凝血过程被阻断，血液不能发生凝固。

EDTA盐有钾、钠、锂盐，国际血液学标准化委员会推荐使用的是EDTA-K2，其溶解度最高，抗凝速度最快。

EDTA盐通常配成质量分数是15%的水溶液，每ml 血液加1.2mgEDTA,即每5ml血液加0.04ml 15%EDTA溶液。

EDTA盐可在100℃下干燥，抗凝作用不变。

此抗凝剂不影响白细胞计数及大小，对红细胞形态影响最小，并且可以抑制血小板的聚集，适用于一般血液学检测。

常用的抗凝剂肝素

常用的抗凝剂肝素、草酸盐合剂、枸橼酸钠和草本钾的配制方法肝素（Heparin）肝素的抗凝血作用很强，常用来作为全身抗凝剂，特别是在进行微循环方面动物实验时的肝素应用更有重要意义。

纯的肝素10mg能抗凝100ml血液（按1mg等于100个国际单位，10个国际单位能抗凝1ml 血液计）。

如果肝素的纯度不高，或过期，所用的剂量应增大2～3倍。

用于试管内抗凝时，一般可配成1%肝素生理盐水溶液，取0.1m l加入试管内，加热80℃烘干，每管能使5～10ml血液不凝固。

作全身抗凝时，一般剂量为：大鼠2.5～3mg·(200～300g体重)-1，兔或猫10mg·kg-1，狗5～10mg·kg-1。

如果肝素的纯度不高，或过期，所用的剂量应增大2～3倍。

草酸盐合剂配方：草酸铵 1.2g草酸钾 0.8g福尔马林 1.0ml蒸馏水加至 100ml配成2%溶液，每1ml血加草酸盐2mg（相当于草酸铵1.2m g，草酸钾0.8mg）。

用前根据取血量将计算好的量加入玻璃容器内烤干备用。

如取0.5ml于试管中，烘干后每管可使5ml血不凝固。

此抗凝剂量适于作红细胞比容测定。

能使血凝过程中所必须的钙离子沉淀达到抗凝的目的。

枸橼酸钠常配成3%～8%水溶液，也可直接用粉剂。

枸橼酸钠可使钙失去活性，故能防止血凝。

但其抗凝作用较差，其碱性较强,不适作化学检验之用。

一般用1：9（即1份溶液，9份血）用于红细胞沉降和动物急性血压实验（用于连接血压计时的抗凝）。

不同动物，其浓度也不同：狗为6%，猫为2%+硫酸钠25%，兔为5%。

草酸钾每1ml血需加1-2mg草酸钾。

如配制10%水溶液，每管加0.1ml则可使5-10ml血液不凝固。

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抗凝剂

抗凝剂种类很多，性质各异，必须根据检验止的适当选择，才能获得预期的结果。

现将实验常用抗凝剂及其使用方法简述如下：1、乙二胺四乙酸（EDTA）盐EDTA有二钠、二钾和三钾盐。

均可与钙离子结全成螯合物，从而阻止血液凝固。

EDTA盐经1000C烘干，抗凝作用不变，通常配成15g/L水溶液，每瓶0.4ml，干燥后可抗凝5ml血液。

EDTA 盐对红、白细胞形态影响很小，根据国际血液学标准公委员会（Internationalcommittee standard of hematology ,ICSH）1993年文件建议，血细胞计数用EDTA二钾作抗凝剂，用量为EDTA-K2。

2H2O1.5-2.2MG （4.45±0.85μmol）/ml血液。

EDTA-NA与EDTA-K2对血细胞计数影响均较小，但二钠溶解度明显低于二钾，有时影响抗凝效果，其他抗凝剂不适合于血细胞计数。

表1-1是几种抗凝剂对白细胞计数的影响，EDTA影响小板聚集，不适合于作凝血象检查和血小板功能试验。

2.枸椽酸钠（trisodium citrate）枸椽酸盐可与血中钙离子形成可溶性螯合物，从而阻止血液凝固。

枸椽钠对凝血因子有较好的保护作用，使其活性减低缓，故常用于凝血象的检查，也用于红细胞沉降率的测定。

因毒性小，是输积压保养中的成分之一。

由于枸椽酸钠溶液是按体积肥比例加入血液内达到抗凝目的的，而抗凝剂主要是作用于积压浆成分，通常所谓的1：9比例抗凝的概念是提1份体积的抗凝剂作用9份红细胞比积正常血液内的血浆成分而言。

所以台果对贫血或红细胞增多症患者的血液仍按1：9的比例加入抗凝剂时，就会发生抗凝剂足或相对过多，这将明显地影响凝象检查结果。

为了避免这种现象，有文献报道应根据抗凝剂用量（ml）=0.00185×血量×（100—病人红细胞比积%）这一公式，来计算抗凝剂的用量。

3．草酸钠（sodium oxalate）草酸盐可与血中钙离子生成草酸钙沉淀，从而阻止血液凝固。

常用抗凝剂种类

黄头管（或橘红管）
用于生化、免疫等一般检验。
标有3、4、5ml刻度。一般采血3ml±。橘红管含有促凝剂，
抽血时混匀几次。(在
冬天或急诊时使用，促进血液尽快凝固，便于血清分离)
凝血项目检查、PLT功能分析、纤溶活性测定
精确采血至2ml刻度（静脉血1.8ml+0.2ml 抗凝剂）。
常用抗凝剂的抗凝原理
大部分凝血试验都可用枸橼酸钠抗凝，它有助于Ⅴ因子和Ⅷ因子的稳定，并且对平均血小板体积及其他凝血因子影响较小，可用于血小板功能分析。枸橼酸钠细胞毒性较小，也是输血中血液保养液的成分之一。但是，枸橼酸钠6mg才能抗凝1ml血液，碱性强，不适用于血液分析和生化测验。
准
常用抗凝剂的抗凝原理
枸橼酸盐主要是枸橼酸钠，其抗凝原理是能与血液中的Ca2+结合形成螯合物，使 Ca2+失去凝血功能，凝血过程被阻断，从而阻止血液凝固。枸橼酸钠有 Na3C6H5O7·2H2O和 2Na3C6H5O7·11H2O两种晶体，通常用前者配成3.8%或3.2%的水溶液，与血液按照1:9体积混合。
抗凝剂：能够阻止血液凝固的化学试剂或物质，称为抗凝剂或抗凝物质。
促凝：帮助血液快速凝固的过程。
促凝剂：帮助血液快速凝固以达血清快速析出的物质。一般成分为胶类物质。
常用抗凝剂的抗凝原理及适用
肝素是用于血液化学成分检测的首选抗凝剂。肝素
是一种含有硫酸基团的粘多糖，是分散相物质平均分子质量为15000。其抗凝原理主要是通过与抗凝血酶 Ⅲ结合引起抗凝血酶Ⅲ构型发生变化，加速凝血酶凝血酶复合体形成而产生抗凝作用。此外，肝素还能借助血浆辅助因子（肝素辅助因子Ⅱ）来抑制凝血酶。常用肝素抗凝剂是肝素的钠、钾、锂、铵盐，其中以肝素锂最好，但其价格较贵，钠、钾盐会增加血液中的钠、钾含量，铵盐会增加尿素氮的含量。通常用肝素抗凝的剂量为10.0～12.5 IU/ml血液。

常用抗凝剂的原理及其实际运用

乙二胺四乙酸盐（EDTA盐）抗凝原理

EDTA盐能与血液中的钙形成螯合物，使钙失去凝血作用，从而阻止血液凝固。常用的 EDTA盐有二钠盐，二钾盐和三钾盐。

抗凝能力：每0.8mg EDTA盐可抗凝1ml血
液。
EDTA盐的临床运用

因为EDTA对于血细胞的形态和血小板计数影响很小，适用于多项血液学检验。也适用于糖化血红蛋白检测项目 1.EDTA—K2抗凝血液在室温下6h其红细胞体积不变，故特别适合做血液分析仪所需全血。血细胞比容测定和血小板计数用血的抗凝剂。抗凝剂比例为1.0～2.0mg/1ml血。 2.国际血液学标准化委员会（ICSH）建议，血细胞计数用EDTA—K2 作抗凝剂时用量为 EDTA—K2.2H2O 1.5—2.0mg/ml.
临床应用：制作血液培养基

问题

1.EDTA盐抗凝管，肝素抗凝管，枸橼酸盐用于血
沉测定管和用于凝血功能测定管各试管的管盖的颜色是什么？

2.枸橼酸钠用于血沉测定时其抗凝浓度是多少？与全血的比例是多少？

3.试述临床上测定血细胞比容用什么抗凝？
谢谢大家！

草酸盐溶解后解离的草酸根离子与血液中
的钙离子形成草酸钙沉淀，使钙离子失去
凝血功能，阻止凝血过程。常用的草酸盐
抗凝剂有草酸钠，草酸钾和草酸铵。
配制方法及用量

草酸盐合剂：草酸铵1．2g、草酸钾0．8g、福尔马林1．0ml、蒸馏水加至100ml每毫升血加草酸盐合剂0．1ml (即相当草酸铵1．2mg，草酸钾 0．8mg)。根据取血量将计算好的草酸盐剂量加入玻璃容器内烤干备用。如取0．5ml于试管，烘干后每管可使5ml血不凝固。草酸钾：取草酸钾10g，加蒸馏水少许使溶解，再加蒸馏水至100ml。配制成10％水溶液，如每管加 0.1ml则可使5~10ml血不凝。

临床检验基础考点常用抗凝剂和使用方法

临床检验基础考点常用抗凝剂和使用方法常用抗凝剂和使用方法：
（1）乙二胺四乙酸（EDTA）盐：常用有钠盐或钾盐，能与血液中钙离子结合成螯合物，使Ca2＋失去凝血作用，阻止血液凝固。

EDTA盐对血细胞形态、血小板计数影响很小，适用于血液学检查，尤其是血小板计数。

根据国际血液学标准化委员会（ICSH）建议，CBC抗凝剂用EDTA-K2•2H2O，量为1.5～2.2 mg/ml血液。

不适于凝血检查、血小板功能试验。

（2）草酸盐：常用有草酸钠、草酸钾、草酸铵，溶解后解离的草酸根离子能与样本中钙离子形成草酸钙沉淀，使Ca2＋失去凝血作用，阻止血液凝固。

草酸盐不适于凝血检查。

双草酸盐抗凝剂：草酸钾可使红细胞体积缩小，草酸铵则可使红细胞胀大，两者按适当比例混合，恰好不影响红细胞形态和体积，可用于血细胞比容、CBC、网织红细胞计数等项目检查。

双草酸盐抗凝剂可使血小板聚集、影响白细胞形态，不适于血小板计数、白细胞分类计数。

（3）肝素：加强抗凝血酶（AT）灭活丝氨酸蛋白酶作用，阻止凝血酶的形成，并阻止血小板聚集等作用，从而阻止血液凝固。

肝素是红细胞渗透脆性试验的理想抗凝剂。

但肝素可引起白细胞聚集，瑞氏染色后产生蓝色背景，不适于CBC、细胞形态学检查。

（4）枸橼酸盐：常用有枸橼酸钠，能与血液中钙离子结合形成螯合物，阻止血液凝固。

枸橼酸钠与血液的抗凝比例为1:9或1:4。

适用于红细胞沉降率、凝血检查，是输血保养液的成分。

常用抗凝剂的配置、用法和选择

常用抗凝剂的配置、用法和选择常用抗凝剂大致分为三类，一类为化学药品.其作用为消除钙离子作用。

使血液中的钙转变成可溶性的，但不离子化的络合物，药物如枸橼酸钠，草盐酸和二乙胺四乙酸二钠等.另一类为生物制剂，如肝素，其作用是阻止凝血酶的生成，从而抗凝。

第三类为离子交换剂，系采用物理性方法防治血液凝固。

1。

枸橼酸钠(Sodium citrate)：溶于水，不溶于醇。

可直接用本品粉末，每ml血液加3～5mg,用于红细胞沉降率测定。

按30mg/ml的枸橼酸钠溶液1份,血液9份比例混合剂可使血液不凝固。

因本贫碱性较强，可用枸橼酸调节pH接近7.0，所含成份为枸橼酸钠56mg/ml，枸橼酸5mg/ml和葡萄糖29mg/ml，成为复方枸橼酸钠抗凝剂,常用于各种动物连接血压计时的抗凝.现用的枸橼酸钠有两种: （1）枸橼酸三钠（Trisodium citrare）：有两种结晶水含量不同的成品，一种是2Na3C6H5O7·11H2O,其与血浆成等渗浓度为 3.8％;另一种是Na3C6H5O9·2H2O与血浆成等渗浓度为3.2%（2.5%~4.0%）,均为碱性,枸橼酸或其盐与钙作用生成可溶性络合物,当制成2。

5％溶液时，Ph为7。

5.最低的抗凝浓度为0。

2%，一般在血液中的最终浓度应为0.4%~0.6%,是长久以来国际上最通用的抗凝剂。

（2）枸橼酸二钠（Disodium citrare):因其中含有大量的枸橼酸离子，属于酸性的枸橼酸。

3.5%溶液的pH为4。

5，其优点是:简化了配置保存液的处方及其配制手续；防止高压消毒时葡萄糖的焦化现象，但大量输血时,枸橼酸钠可能产生毒性反应。

2.草酸钾（Potassium oxalate)和草酸钠（Sodium oxalate）:草酸溶于水，微溶于醇，具有溶解度大，抗凝作用强的特点。

体外抗凝时1ml血液用草酸钾1～2ml，微量检验用血较少时,可配成20mg/ml溶液。

血液透析抗凝剂的配置和应用

血液透析抗凝剂的配置和应用
抗凝剂配置流程
一、普通肝素配置方法
肝素规格：2ml/支，100mg/支，12500iu/支
1毫升=5mg配制方法：
NS18ml+肝素2ml（1支）
计算方法为：加入NS中肝素的总mg÷（NS+加入肝素的总ml）=每毫升盐水所含肝素量二、低分子肝素的配置方法
低分子肝素目前多是预充式注射器，或粉剂，规格不同，医嘱给药量也不同，为保证给药量的准确性，低分子肝素应盐水稀释后在给患者推注。

1、低分子肝素规格如为5000iu/支，应配制完成后为每毫升1000iu/ml
配置方法：NS4ml+低分子肝素一支（1ml），则每毫升为1000iu。

计算方法：低分子肝素总单位剂量÷（NS量+低分子肝素总毫升量）=每毫升所含低分子量。

2、低分子肝素为粉剂每支5000iu时，应配制完成后为每毫升1000iu/ml
配置方法：用生理盐水5ml稀释后，则配置后的肝素为每毫升1000iu/ml
总部建议：配置低分子时最好使用10ml注射器进行稀释药液，配置完成后每2ml含有低分子肝素1000iu。

（原因是如使用5ml注射器配置，透析用穿刺针管腔容积为2.5ml，如果患者应用1-3千单位的低分子肝素量，在推注1-3ml后，药液只能停留在穿刺针管腔内，未做到提前全身肝素化要求）。

抗凝剂不同种类以及浓度问题

肝素抗凝：通常用肝素粉剂（每mg含100—125U）配成1g /L肝素水溶液，即每ml含肝素1mg。

取1ml可使10ml血液不凝固。

EDTA抗凝：EDTA对血液中钙离子有很大的亲和力，能与钙离子络合而使血液抗凝。

每0.8mg可抗凝1ml血液。

除不能用于血浆中钙、钠及含氮物质之测定外，适用于多种抗凝。

ICSH 、ICTH 推荐使用 3.13% （0.109M与草酸钠相比枸橼酸钠的优越性：首先是Ⅴ因子和Ⅷ因子在枸橼酸钠中更为稳定。

枸橼酸钠抗凝的血浆做 APTT 试验，其对肝素的敏感性远远高于草酸盐抗凝血浆。

草酸盐的缺陷：与钙形成不溶性沉淀物肝素可与 AT- Ⅲ作用并抑制许多凝血反应EDTA 能抑制或干涉纤维蛋白凝块形成时纤维蛋白单体聚合，且对因子Ⅴ保护性差，故草酸盐与肝素这二种抗凝剂除血小板试验外，一般不用。

柠檬酸的枸橼酸根与血中钙离子形成难解离的可溶性络合物，使血中钙离子减少，缓解钙离子促使血液凝固的作用而阻止血液凝固。

仅用于体外抗凝血。

常用的血液抗凝剂1、1%肝素溶液0.1ml于试管内，旋转试管，使溶液均匀浸湿试管内壁，放入80～100℃烘箱烤干，每管能使5～10ml血液不凝。

急性血压实验时可在充满生理盐水的动脉套管内注入肝素20～25mg。

体内抗凝：500～1000u/kg。

市售的肝素注射液每1ml含肝素12500u（相当于肝素钠125mg，即1mg相当于100u）。

应置冰箱内保存。

2、枸橼酸钠 3.8%的枸橼酸钠溶液1份可使9份血液不凝，用于红细胞沉降速率的测定。

因其抗凝血作用较弱而碱性较强，不适用于供化验用的血液样品。

做急性血压实验时则用5～7%的枸橼酸钠溶液。

3、草酸钾常用于供检验用血液样品的抗凝。

在试管内加饱和草酸钾溶液2滴（或10%溶液0.2ml），轻轻敲击试管，使溶液分散到管壁四周，置80℃以下的烘箱中烤干（烘烤温度过高，可使草酸钾分解为碳酸钾而失效），每管能使3～5ml血液不凝。

生化常用抗凝剂

常用抗凝剂阻止血液凝固的原理抗凝----应用化学或物理学的方法，抑制或除去血液中的某些凝血因子以阻止血液凝固的方法。

抗凝剂----能阻止血液凝固的化学试剂。

一、枸橼酸钠【原理】枸橼酸钠（柠檬酸钠）是枸橼酸钠的三钠盐。

它能与血液中的钙离子形成可溶性的螯合物，使Ca2+失去凝血作用，从而阻止血液凝固。

【应用范围】血沉、凝血象、血小板功能检查及血液保养液。

【用量】凝血象: 109mmol/L水溶液,与血液之比为1:9；血沉: 106mmol/L水溶液,与血液之比为1:4。

二、乙二胺四乙酸盐【原理】乙二胺四乙酸（EDTA）盐可与血液中的钙离子结合形成配位化合物，从而阻止血凝。

【应用范围】一般血液学检查和血液粘度测定。

不适于凝血象及血小板功能检查。

【用量】其有效抗凝浓度为1～2mg/ml血液。

血细胞分析仪用EDTA-K2作抗凝剂，用量为EDTA-K2•2H2O 1.5～2.2mg/ml血液。

三、肝素【原理】通过与抗凝血酶Ⅲ结合，增强抗凝血酶的作用，灭活丝氨酸蛋白酶，从而可阻止凝血酶的形成和阻止血小板聚集，阻止血液凝固。

【应用范围】血细胞比容测定、血液粘度测定和多种生化分析。

【用量】通常用肝素的钠盐或钾盐粉剂配成1g/L肝素水溶液。

取0.5ml置小瓶中，37～50℃烘干后，能抗凝5ml血液。

血液采集中用何种抗凝剂1、乙二胺四乙酸（EDTA）EDTA有二钠、二钾和三钾盐。

EDTA盐对红、白细胞形态影响很小，根据国际血液学标准公委员会（International committee standard of hematology ,ICSH）1993年文件建议，血细胞计数用EDTA二钾作抗凝剂，用量为EDTA-K2。

EDTA抗凝剂简易配制法

EDTA抗凝剂简易配制法【关键词】饱和;抗凝;溶解度常用EDTA-Na 2 抗凝剂的浓度是15g/L,每0.4ml干燥后可抗凝5ml血液 [1] 。

EDTA-Na 2 的溶解度较大,22℃时可达11.1克,其有效抗凝浓度为1~2mg/ml,通过计算得知100ul(约两滴)饱和溶液可抗凝5~10ml血液,由于EDTA-Na 2 的溶解度受Nac1影响不大,为防止溶血在实践中我们用500毫升生理盐水加56克EDTA-Na 2 配制成饱和溶液,每份标本滴加3~5滴直接使用,取得了令人满意的效果。

1.材料和方法1.1对象:1999年~2007年潍坊市无偿献血者。

1.2试剂:ELISA试剂盒HBsAg购自厦门新创和上海科华公司,抗-HCV购自厦门新创和上海科华公司,抗-HIV购自北京吉比艾和北京万泰公司,TP-ELISA购自北京中生和吉比艾公司,ALT活性试剂盒购自北京中生和浙江东瓯公司。

1.3仪器:TECAN全自动酶免加样器,FAME全自动酶免分析系统。

1.4方法:配制方法将EDTA-Na 2 粉末直接加入到生理盐水瓶内边加边摇匀直到瓶子底部有少许晶体不能再溶解为止,静置稳定片刻后即为EDTA-Na 2 饱和溶液。

本溶液用普通塑料滴管滴加2~3滴即可,当血液沿试管内壁下流时由于冲击作用自动与抗凝剂混合均匀勿需再人为摇匀。

每人留取两份标本,一份用本法抗凝,一份非抗凝,两份标本用同一种试剂和方法检验,阳性者均做双孔复试。

抗-HIV阳性标本是向同一个人的两份等量标本中加入等量抗-HIV阳性对照物制得。

将得到的结果对比分析。

所有操作均按试剂盒说明书和仪器操作规程严格进行。

2.结果(见表1)表1抗凝和非抗凝标本的检验结果比较注:各组阳性标本中均包含10例弱阳性标本。

3.讨论3.1由(上表可看出)抗凝标本和非抗凝标本检验结果完全相符,二者之间无差异。

3.2乙二胺四乙酸盐对血细胞和血小板形态影响很小,适用于一般血液学检查,稍微过量不影响检验结果。

第二节常用抗凝剂的种类、浓度与配置方法

第二节常用抗凝剂的种类、浓度与配制方法在机能学实验研究中，常用的抗凝剂有3.8%枸橼酸钠、2%草甲酸、2%草酸钠、1%乙二胺四乙酸钠和肝素等。

一、枸橼酸钠它与血液中Ca2+结合形成络合物，去除血Ca2+而防止血液凝固，且枸橼酸盐类对动物机体无毒，故一般若需抗凝血回注动物体内时，宜用枸橼酸钠抗凝。

二、草甲酸其溶解度大，抗凝作用强，是机能学实验和生化实验常用抗凝剂。

能与血液中Ca2+结合生成不溶解的草酸钙，使血液不凝固。

2mg草酸钾可抗凝1mL血，常用于全血抗凝，但不宜用于钾、钙等离子测定。

此外草酸钾对乳酸脱氢酶、酸性磷酸酶及淀粉酶有抑制作用。

2%草酸钾溶液。

取准备取血用的试管数支，每支试管加0.5ml 2%草酸钾溶液，置80℃烤箱内烤干备用，每管可抗凝5mL血。

三、乙二胺四乙酸（EDTA）可与钙形成螯合物，而使血液不凝固。

常用EDTA-Na，1～2mg可抗凝1mL血液。

特别2适用血液学检查，不宜用于含氮化合物和钠的测定。

四、肝素肝素能阻止凝血酶原转变为凝血酶，从而抑制纤维蛋白原形成纤维蛋白，达到抗凝效果。

是机能实验研究中最常用的抗凝剂，最合适电解质、血气与pH值的测定。

肝素浓度表示法有体积-质量百分比和国际单位计量法，两者的等量关系是1mg相当于100U。

其使用浓度因使用目的、方法与对象而定。

①实验动物全身体内抗凝，一般用量为：大白鼠2.5～3mg/200～300g；家兔10mg/kg；狗50～100mg/kg。

②实验动物局部抗凝，如记录实验动物动脉血压时，需在动脉插管和血压换能器等血压传输管道系统内充满0.1%(100U/mL)为例，是取12500U/2mL肝素一支，加水至125mL即成。

肝素应避光低温保存。

_实验室常用血液抗凝剂的特点及应用

实验室常用血液抗凝剂的特点及应用在实验室检验中，有许多检测项目的血液标本是需要抗凝才可以检测的。

而抗凝剂种类较多，实际应用中要根据不同的需要进行选择，才能获得理想的效果。

肝素是一种含有硫酸基团的粘多糖，是分散相物质平均分子质量为15000。

其抗凝原理主要是通过与抗凝血酶Ⅲ结合引起抗凝血酶Ⅲ构型发生变化，加速凝血酶-凝血酶复合体形成而产生抗凝作用。

此外，肝素还能借助血浆辅助因子（肝素辅助因子Ⅱ）来抑制凝血酶。

常用肝素抗凝剂是肝素的钠、钾、锂、铵盐，其中以肝素锂最好，但其价格较贵，钠、钾盐会增加血液中的钠、钾含量，铵盐会增加尿素氮的含量。

通常用肝素抗凝的剂量为～IU/ml血液。

肝素对血液成分干扰较少，不影响红细胞体积，不引起溶血，适用于做红细胞渗透性试验、血气、血浆渗透量、红细胞压积及普通生化测定。

但肝素具有抗凝血酶作用，不适合做血凝试验。

另外，肝素过量可引起白细胞聚集和血小板减少，所以不适合做白细胞分类和血小板计数，更不能用于止血检验。

此外，肝素抗凝血不能用于制作血涂片，因为Wright染色后出现深蓝色背景，影响显微镜减产。

肝素抗凝血应于短时间内使用，否则放置过久血液又可凝固。

二、乙二胺四乙酸盐(EDTA盐)EDTA能与血液中Ca2+结合成螯合物，凝血过程被阻断，血液不能发生凝固。

EDTA盐有钾、钠、锂盐，国际血液学标准化委员会推荐使用的是EDTA-K2，其溶解度最高，抗凝速度最快。

EDTA盐通常配成质量分数是15%的水溶液，每ml 血液加,即每5ml血液加15%EDTA溶液。

EDTA盐可在100℃下干燥，抗凝作用不变。

此抗凝剂不影响白细胞计数及大小，对红细胞形态影响最小，并且可以抑制血小板的聚集，适用于一般血液学检测。

但如果抗凝剂浓度过高，渗透压上升，会造成细胞皱缩。

抗凝剂的使用

几种常用抗凝剂的合理使用应用物理或化学方法，除掉或抑制血液中的某些凝血因子，阻止血液凝固，称为抗凝。

能够阻止血液凝固的化学试剂或物质，称为抗凝剂或抗凝物质。

抗凝剂的种类很多，性质各异。

因此，必须根据检验目的恰当选择，才能获得预期效果。

现将我院临床检验常用抗凝剂的种类及使用方法简介如下。

一、枸橼酸钠：枸橼酸钠可与血液中钙离子形成可溶性螯合物从而阻止血液凝固。

常用于临床检验中凝血象的检查，其使用浓度为109mmol/l，例如我实验室APTT、PT的检查，抗凝剂与血液比例为1：9。

也用于血沉的测定，抗凝剂与血液比例为1：4。

二、乙二胺四乙酸盐（EDTA）：EDTA的二钠、二钾和三钾盐，均可与血中钙离子形成螯合物，从而阻止血液凝固。

通常配成15g/l水溶液，用于实验室使用。

EDTA盐对血小板形态和血细胞形态影响很小，因此适用于血液常规检查，特别是血小板计数，但影响血小板聚集和白细胞吞噬功能，故不适于做凝血象检查和血小板功能试验。

此外，此抗凝剂特别适用于红细胞比积测定，室温放置48小时红细胞体积不变。

因此，我实验室EDTA—K2抗凝的全血用于血常规检查。

三、肝素：肝素与抗凝血酶Ⅱ一起，低浓度时抑制凝血因子IXa5、PF3之间的作用，加强抗凝血酶Ⅲ（AT—Ⅲ）灭活丝氨酸蛋白酶，从而阻止凝血酶形成，抑制凝血酶的自我催化及抑制因子Ⅹ的作用。

因此，肝素具有抗凝能力强，不影响血细胞体积，不易溶血等优点，是一种较好的抗凝剂。

可用于红细胞计数、血红蛋白测定、红细胞比积测定和多种生化分析，也是抗血栓药物之一。

但过量肝素可引起白细胞聚集和血小板减少，故不适用于白细胞分类和血小板计数，更不能用于凝血象检查。

由于肝素抗凝时间短，久置易失效，价格昂贵，所以凡能使用普通抗凝剂者，一般不用肝素。

如用肝素抗凝的血液，就应在短时间内完成检测。

我实验室血流变检测和血气分析用肝素作为抗凝剂。

四、草酸钠：草酸钠可与血中钙离子生成草酸钙沉淀，从而阻止血液凝固。

常用抗凝剂的配制及用法_常用抗凝剂的配制及用法