细菌分散仪应用

分散
比浊
关系如何，在菌液浓 度一定时，90度方向
合，在气泡闭合时产
生冲击波。利用这种 超声空化作用，完成 对结团性细菌的分散 。
上散射光强度保持恒
定。再利用光传感器 把光信号转化为电信 号，最终结果以菌液 浓度呈现。
细菌分散仪的定量标准
浊度溯源：
仪器配套的浊度标准液来源于中国计量科学研究院，并申明本系列标准溶液严格按
谢谢聆听 谢谢聆听
1.实时荧光 定量PCR 2.DNA 3.RNA 4.耐药基因 突变 5.菌型鉴定 6.测序
1.HPLC 2.质谱技术 3.流式技术
结核分枝杆菌细菌学检测
涂片
培养
体外药敏
1.直接抹片法 2.离心制片法
1.固体培养法 2.液体培养法
1.罗氏比例法 2.BD仪器法 3.液体微量法
传统方法----菌悬液的制备流程
吹打 研磨棒 磨菌瓶
目视比浊 比浊仪 分光光度计
传统方法----菌悬液制备的困扰
耗时、
操作繁琐
Better Way ？
分散效果及比浊结 果受人为因素影响 大，重现性低 开放容器易 产生气溶胶
细菌分散仪的应用
BACspreaderTM1100
完美替代传统细菌分散方法 使菌悬液制备、定量一步到位！
菌悬液制备过程比较
3
生物制品研发及细菌培养的菌落分散及浊度检测实验
可用于各省市疾控中心结防所、结核病定点医院、科研机构、生物公司等
超声分散法----痰液前处理？？？
体必康集团
体必康，为结核病科学创新领航！
TB Healthcare ， Leading the Way in Scientific Innovation for TB！
公司 介绍
旗下 广州博翀生物科技有限公司进 行生物芯片产品的开发、生产和市 场营销工作，在广州科学城，有 800平米的研发生产和办公场地。
集团科研转化能力
北京 胸科医院
பைடு நூலகம்
上海交通 大学
武汉 肺科医院
体必康集团
中科院生 物物理研 究所佛山 分所
广州胸 科医院 上海市 CDC
深圳华 大基因
武汉市肺科医院结核病实验室诊断技术
细菌分散仪在结核病 实验室诊断中的应用体会
检 验 科 任 易
1. 结核病实验室诊断简介 2. 结核分枝杆菌细菌学检测 3. 传统的细菌学方法介绍
4.细菌分散仪的应用评价
5.细菌分散仪的原理及特点
结核病实验室诊断技术简介
细菌学
免疫学
分子生物学
其他
1.涂片 2.培养 3.药敏 4.菌型鉴定
1.结核抗体 2.结核蛋白 芯片 3.体外r-干 扰素试验 4.结核杆菌 分泌抗原
细菌分散仪的特点
•分散、比浊全过程在密闭容器中进行，最大限度保证 生物安全性； •分散、比浊及稀释在同一支管中完成，减少移液次数， 最大限度减少污染源； •仪器自动超声分散，自动比浊，自动折算稀释体 积，从取菌到配成标准菌悬液仅需3步，菌悬液制 备快捷方便； •与传统方法相比，超声分散更均匀，降低细 菌数量导致的误差；
250 200 150 100 50 0 0m 1m 2m 5m 10-4菌液 10-2菌液
细菌分散仪应用评价
细菌分散仪对细菌生物学活性（药敏试验） 的评价
方法：进行结核分枝杆菌药物敏感性试验（比例法） 分 别将手工磨菌和细菌超声分散计数仪超声分散至 1.0mg/ml（即1.0麦氏浊度）的菌悬液稀释至10-2mg/ml和 10-4mg/ml，参照《结核病诊断细菌学检验规程》。用 22SWG标准接种环分别沾取1满环（即0.01ml）稀释好的 菌液，用划线法均匀接种至对照及含药培养基表面，注 意使菌液尽可能分布于培养基斜面。最终接种菌量为104mg和10-6mg。接种完成后置于37℃温箱中培养28天，观 察结果。
细菌分散仪应用评价
细菌分散效果
手工磨菌染色
分散仪菌悬液外观
分散仪菌悬液染色
细菌分散仪应用评价
细菌分散仪对细菌活力的评价
方法：分散仪制备1.0麦氏 浊度的菌悬液， 分别稀释 成10-2mg/ml、10-4mg/ml菌 液。 然后分别1、2、5分钟继 续使用分散仪超声分散，重 复以上过程。最后用22-SWG 标准接种环分别取1满环菌 液用划线法接种在中性罗氏 培养基上，37℃培养，观察 生长状况，进行菌落计数。
照美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）的规定和国际上公认的配制方法制备成 麦氏标准溶液，并将量值传递到细菌 浊度标准溶液。通过使用满足计量学特性 要求的制备方法和计量器具，保证标准溶 液量值的溯源性。
仪器精准度：
准确度：相对误差≤10%； 精密度：相对标准偏差≤5%
细菌分散仪的应用前景
1 2
分枝杆菌等微生物药敏实验的菌悬液制备 水处理、固液分散、溶液中颗粒的解团聚实验
细菌分散仪应用评价
试验结果
2015年12月至2016年6月期间，本实验室将细菌 超声分散计数仪用于136株结核分枝杆菌临床菌 株和30株国家质控菌株的药物敏感性试验，取得 了很好的试验结果。药敏试验结果参照《结核病 诊断细菌学检验规程》进行判读。与手工磨菌比 浊、稀释后接种的药敏试验结果相比，两种菌悬 液制备方法的药敏试验结果相同，无显著差异。
体必康集团
体必康简介 广东体必康生物科技有限公司， 以”为结核病科学创新领航“为集 团发展的源动力，立志为结核病的 创新提供系统的解决方案。 将科研 团队在结核病领域十余年的研究积 累成果进行转化。体必康基于研发 和平台积累了大量的核心技术，目 前共申请专利28项，其中发明专利 17项、实用新型专利7项、外观专 利4项；授权专利发明授权3项、实 用新型专利5项、外观专利授权4项； 另有两项国际PCT专利在申请中 旗下 广东希格生物科技有限公司 1200平米的GMP生产车间，从事 医疗器械和诊断试剂开发、生产和 市场营销工作。 团队组成 研发团队以中国科学院生物物 理研究所的院士和资深科学家为核 心、青年学术带头人为主体、组成 了多学科交融的老中青结合的强有 力研究团队，员工中博士占28%， 硕士占24%，学士占32%。
安全 高效 标准化
•5秒自动读取浊度数据，避免时间性误差；
•全自动完成，避免人为误差，重现性更高；
细菌分散仪的工作原理
超声波产生 空化作用
细菌分散仪的工作原理
在超声波作用下，试 管中的微小气泡核产 利用90度散射光特性 ，即不论激光波长和 待检测细菌直径大小
生振动，当声压达到
一定值时，气泡将迅 速膨胀，然后突然闭
涂片：抗酸、荧光 金胺O\罗丹明B 分子生物学：TB-DNA\RNA NTM分型
培养：固体 BD960液体
武汉肺科 检验科
耐药基因突变分析 Xpert、Hain… 探针溶解曲线分析
药敏试验： PZA 固体、液体
鉴别诊断： T-spot、ADA、ACE…
Face the problem and find the best solution