分子病理学技术在肿瘤病理诊断中的应用
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分子病理学技术在肿瘤病理诊断中的应用
一、常用技术:
1。
核酸提取:DNA, RNA
2。
核酸分析:凝胶电泳,转印技术,原位杂交技术,FISH,多种PCR,原位P CR,比较基因组杂交技术,微点阵分析(DNA芯片技术),DNA序列分析,以及R FLP技术。
二、在肿瘤学中的应用:
1。
肿瘤基因分析:
人们发现在脊椎动物中,广泛存在着与由反转录病毒引发动物肿瘤的病毒肿瘤基因(V-onc)同源的所谓细胞肿瘤基因(c-onc)。
这些基因在控制细胞增生中至关重要。
例如:
c-erb能翻译为表皮生长因子(与能在鸟类中引起红细胞白血病的v-erb同源);ras和能在大鼠中引起肉瘤的v-ras一样,参与控制细胞周期的信号传导;fas 能够调节细胞死亡和基因表达。
通过上述技术,如PCR,FISH, PCR 等等,就能对人体肿瘤组织细胞中是否存在肿瘤基因进行检测。
或者可以直接用免疫组化技术检测其肿瘤基因产物。
比如在乳腺癌中检测c-erb对於了解肿瘤的预后或者转移十分有用。
在淋巴组织中检测bcl-2(细胞刁亡基因)对於鉴别淋巴组织的反应性增生或者滤泡型淋巴瘤也具有重要意义。
对肿瘤抑制基因p53的检测,对於肿瘤的预后,转移也是十分重要。
以下是经常检测的一些肿瘤基因:
肺癌-myc
宫颈癌-myc
前列腺癌-ras (检测于ras有关的蛋白质p21)
睾丸畸胎瘤-myc
乳腺癌-ras (60%以上阳性),erb2(60%以上阳性)
胰腺癌-ras (85% 病例阳性)
神经母细胞瘤-myc
结肠直肠癌-ras (60%以上阳性)
2。
基因重排和染色体转位
B 细胞淋巴瘤-免疫球蛋白重链重排
T 细胞淋巴瘤-T细胞表面受体重排
常见恶性肿瘤的染色体转位:
大细胞间变性NHL- t(2;5)
滤泡中心细胞NHL- t(14;18)
Burkitt''s 淋巴瘤-t(8;14)
套细胞淋巴瘤- t(11;14)
AML - t(8;21)
CML - t(9;22)
乳腺癌 - t(9;22)
滑膜肉瘤 - t(x;18)
Ewing氏肉瘤- t(11;22)
腺泡型横纹肌肉瘤-t(2;13)
3。
细胞多元性丧失的检测。
以证明肿瘤是单克隆性增殖。
4。
感染性病原检测:如病毒(HPV-宫颈癌,EBV-淋巴瘤,鼻咽癌,HSV-卡泼西肉瘤,SV40-恶性间皮瘤), TB等等。
5。
检测微小残留病灶。