畜牧微生物

一、名词解释
微生物：是一类肉眼看不见，有一定形态结构，能在适宜环境中生长繁殖的细小生物。

细菌L型：细菌细胞壁缺陷仍可存活的细菌。

包括原生质体和原生质球。

菌落：单个细菌在适宜的条件下，在适合固体培养基表面或内部，经过一段时间的培养，生长繁殖，形成一个肉眼可见的，具有一定形态结构特征的独立群体，称菌落。

菌苔:长出的菌落连成一片，称为菌苔，可用来保存菌种。

病毒的复制 :病毒只在活细胞内进行复制。

以病毒基因为模板，合成其核酸及蛋白质，再组装成完整的病毒颗粒的过程称复制。

抗体:动物机体受到抗原物质刺激后，由B淋巴细胞转化为浆细胞产生的，能与相应抗原发生特异性结合反应的Ig，这类Ig称为抗体。

免疫应答：是指机体免疫系统受到抗原物质刺激后，免疫细胞对抗原分子的识别并产生一系列复杂的免疫反应的生物学过程。

ADCC:细胞表面具有IgG的Fc受体。

当靶细胞与相应的IgG结合，K细胞可与结合在靶细胞上的IgG的Fc结合，释放细胞毒，裂解靶细胞，这种作用称为抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用(ADCC)。

微生物学：是研究微生物形态、生理、遗传变异、生态分布、分类及其与人类关系的科学。

芽孢：某些革兰氏阳性菌，在一定条件下，胞质脱水浓缩在菌体内形成一个折光性强的圆形或卵圆形的小体，称为芽孢。

是细胞的休眠模式。

荚膜：
侵袭力：病原微生物在机体内定殖，突破防御屏障及内化作用、在体内繁殖和扩散的能力称为侵袭力。

PAI(毒力岛)：PAI指病原菌的某个或某些毒力基因群，分子结构和功能有别于细菌基因组，但位于细菌基因组之内，称之为毒力岛。

致病性：一定种类的病原菌在一定的条件下，能在宿主体内引起感染的能力称为致病性。

致病性是细菌种的特征之一。

类毒素:经过0.3%－0.5%的甲醛处理过的外毒素叫类毒素。

抗原：凡能刺激机体产生抗体和致敏淋巴细胞并能与之发生反应的物质称为抗原(Ag)。

补体：是存在于正常动物和人血清的一组不耐热具有酶活性的球蛋白。

抗生素：
佐剂：
抗毒素：
抗病毒血清：
青贮饲料：
多价苗：
多联苗：
菌群失调：
消毒：
灭菌：
无特定病原体动物：
二、简答
1、病毒的培养方法及其特点？
答：（1）动物接种：病毒经注射，口服等途径进入易感动物的体内后可大量增殖，并使动物产生特定的反应。

（2）鸡胚培养：一般用于9-12日龄的鸡胚，分别接种于卵黄囊内，羊膜腔，尿囊腔等部位。

病毒生长的标志为鸡胚死亡，畸形和出血。

用于病毒分离与免疫生产
（3）组织培养：在离体或细胞上培养病毒的方法。

①.组织块培养：取组织片（如一段胎儿气管或一小块鼻粘膜）进行培养
②.细胞培养：病毒感染细胞后，大多数引起细胞病变，称为病毒的致细胞病态作用。

表现为细胞变形。

胞浆内出现颗粒化，核浓缩，核裂解等。

4、什么是佐剂？佐剂的作用机制有哪些？
答：一种物质先于抗原或与抗原混合同时注入动物体内，能非特异性地改变或增强机体对该抗原的特异性免疫应答，发挥辅助作用，这类物质统称为佐剂或免疫佐剂。

佐剂作用机制：①在接种部位形成抗原储存库，是抗原缓慢释放，延延长抗原在局部组织内的滞留时间，较长时间使抗原与免疫细胞接触并激发对抗原的应答。

②增加抗原表面积，提高抗原的免疫性原性，辅助抗原暴露并将能刺激特异性免疫应答的抗原表位递呈给免疫细胞。

③促进局部的炎症反应，增强吞噬细胞的活性，促进免疫细胞的增值与分化。

诱导细胞因子的分泌
5、确定某种微生物是否具有致病性的主要依据是什么（柯赫法则）？
答：是确定某种细菌是否具有致病性的主要依据，其要点：
（1）特殊的病原菌应在同一疾病中可查见，在健康者不存在；
（2）此病原菌能被分离培养而得到纯种；
（3）此纯培养物接种易感动物，能导致同样病症；
（4）自感染的动物体内能重新获得该病原菌的纯培养。

6、请简要说出基因水平的科赫法则（即如何从分子水平确定某种微生物的致病性）。

①在致病菌株中能检出某些特定基因或其产物，而无毒力菌株中没有。

②有毒力菌株的某个基因被损坏，则其毒力应减弱或消除。

或者将此基因克隆到无毒菌株内，后者成为有毒力菌株。

③将细菌接种动物时，这个基因应在感染的过程中表达。

④在接种动物能检测到这个基因产物的抗体，或产生免疫保护。

7、各类免疫球蛋白有哪些？主要特性和免疫学功能？
（1）IgG特性:①人和动物血清中中含量最高。

②多为单体，唯一可以通过胎盘的抗体③介导体液免疫的主要抗体。

④抗感染
功能：抗菌，抗病毒，抗毒素，固定补体，通过胎盘与SPA结合
（2）IgM特性:①分泌型IgM为五聚体，②机体初触抗原最早产生的抗体③持续时间短
功能：溶菌，溶血，固定补
（3）IgA特性:① IgA以单体和二聚体两种分子形式存在，②血清型（单体）和分泌型（二聚体）
功能：粘膜免疫，激活补体旁路
（4）IgE特性: ①以单体分子形式存在，②血清中含量最少的免疫球蛋白，③具与皮肤，肥大细胞，血液中嗜碱性粒细胞和血管内皮细胞结合
功能:可通过Fc段介导I型超敏反应。

（5）IgD特性:①血清中含量极低，不稳定，②作为成熟B细胞膜上抗原特异性受体，是B细胞分化发育成熟的标志③与免疫记忆有关
功能：B细胞表面免疫球蛋白，免疫记忆
11、请论述革兰染色的原理、结果判定哪一步最关键，为什么？
答：原理:革兰氏阴性菌的细胞壁，其脂类含量较多，当以95%乙醇脱色时脂类被溶去，使得细胞壁孔隙变大，尽管95%乙醇处理能使肽聚糖孔隙缩小，但因其肽聚糖含量较少，细胞壁缩小有限，故能让结晶紫与碘形成的紫色染料复合物被95%乙醇洗脱出细胞壁之外，而被后来红色的复染剂染成红色。

而革兰氏阳性菌细胞壁所含脂类少，肽聚糖多，经95%乙醇脱色时，其细胞壁孔隙缩小到不易让结晶紫与点形成的紫色染料复合物洗出细胞壁外，而被染成蓝紫色。

革兰氏染色的关键在于严格掌握酒精脱色程度，如脱色过度，则阳性菌可被误染
为阴性菌，而脱色不够时，阴性菌可被误染为阳性菌。

结果判定:革兰氏阳性菌呈蓝紫色，革兰氏阴性菌呈红色。

三、论述
试述病毒鉴定的方法有哪些？
答：病毒核酸型鉴定：是病毒理化特性测定的最主要指标。

经典的方法是代谢抑制法，即添加氟脱氧尿核苷或类似物于病毒培养物中，病毒复制被抑制者，即为DNA病毒，否则为RNA病毒。

也可用DNA酶和RNA酶分别作用，以判定核酸的性质
耐酸性试验：方法与脂溶性试验类似，应设置缓冲液PH3及PH7的病毒比较。

脂溶剂试验：用乙醚或氯仿处理待检病毒液，然后与未处理者比较其TCID50的变化，以判断是否敏感
耐热性、胰蛋白酶敏感试验。

什么是免疫应答？试述免疫应答的过程有哪些？
免疫应答是指机体免疫系统受到抗原物质刺激后，免疫细胞对抗原分子的识别并产生一系列复杂的免疫反应的生物学过程。

这一过程包括：
1.抗原递呈细胞（巨噬细胞等）对抗原的处理、加工和递呈；
2.抗原特异性淋巴细胞（即T、B淋巴细胞）对抗原的识别、活化、增殖、分化，最后产生免疫效应分子（抗体与细胞因子）以及免疫效应细胞（细胞毒性T淋巴细胞(CTL)和迟发型变态反应性T细胞(TD)）；
3.并最终对抗原物质和再次进入机体的抗原物质产生清除效应。

试述炭疽芽孢杆菌的抗原性及微生物学诊断方法？
答：严禁解剖，必要时从耳根部采血，或切开肋间采取脾脏。

（1）显微镜检查：病料涂片发现有荚膜竹节状大杆菌。

（2）分离培养：普通培养基或血液培养基，卷发状大菌落。

（3）动物试验：小鼠、豚鼠、家兔等注射后25-36小时死于败血症。

（4）Ascoli氏环状沉淀反应呈阳性。

（5）反向简介凝集实验。

布氏杆菌病的微生物学诊断方法有哪些？如何进行免疫防治？
布氏杆菌病常表现为慢性或隐性感染，其诊断方法有:细菌学检查、血清学检查、变态反应检查。

免疫防治：菌苗接种虽有显著效果，但欲根除此病，则须严格执行畜群全面检疫及淘汰病畜的措施。

已有的菌苗种类很多，我国创制和应用的菌苗有羊型和猪型两种弱毒菌苗。

狂犬病病毒的致病机理是什么？诊断方法有哪些？如何进行预防和控制？
（1）致病机理
传播 : 主要传播途径为被带毒动物咬伤，病犬唾液具有高度传染性。

病毒复制 : 病毒特异结合神经肌肉结合处的乙酰胆碱受体及神经节苷脂等受体。

在伤口附近的肌细胞内复制，而后侵入外周神经系统，沿神经轴索上行至中枢神
经系统，在脑的边缘系统大量复制，导致脑组织损伤，行为失控出现症状。

病毒从脑沿传出神经扩散至唾液腺等器官，在其内复制，并以很高的滴度分泌到唾液中。

免疫原性 : 病毒蛋白有很强的免疫原性。

但在病毒从咬伤部位向中枢系统扩散的过程中，既不出现体液免疫应答，也不出现细胞免疫应答。

（2）诊断
具有确认资格的人员才能作出狂犬病的实验室诊断。

往往要确定咬人的动物是否患狂犬病，需作脑组织切片，检测包涵体。

取其脑组织如小脑或海马或唾液腺检测，方法为荧光抗体染色。

RT-PCR技术检测组织中的病毒RNA，敏感度高。

（3）预防与控制
应及时扑灭狂犬病患畜。

对家养犬、猫进行弱毒疫苗免疫接种。

四、填空
1、湿热灭菌的方法主要有煮沸消毒、巴氏消毒、流通蒸汽消毒和灭菌及高压蒸汽灭菌。

2、细菌的辐射灭菌法主要有电离辐射和非电离辐射。

3、细菌细胞摄取物质的方式主要有自由扩散、主动运输、协助扩散和内
吞与外排作用四种。

4、免疫器官是免疫细胞发生、分化、成熟、定居和增殖以及产生免疫应答反应
的场所。

根据其功能的不同可分为中枢免疫器官和外周免疫器官。

中枢免疫器官主要包括骨髓、胸腺和腔上囊。

5.外周免疫器官又称次级或二级免疫器官，是成熟的T细胞和 B细胞
定居、增殖和对抗原刺激进行免疫应答的场所，它包括脾脏、淋巴结和淋巴小结等。

6、革兰阳性菌细胞壁的是由磷壁酸、多糖、蛋白质三部分组成。

脂多糖:类脂A,核心多糖，侧链多糖。

肽聚糖:聚糖链支架，四肽侧链，五肽交
联桥
7、亚病毒是一类比病毒结构更为简单的微生物，最重要的亚病毒有类病毒
和朊病毒。

8、抗原根据其来源可以分为异种抗原、同种异型抗原、自
身抗原、异嗜性抗原。

10、细菌的K抗原、O抗原、H抗原分别是指荚膜抗原、菌体抗原、细菌的鞭毛抗原。

11、细菌的基本形态主要有球菌、杆菌、螺旋菌及其他形态。

细菌生长曲线可分为四个时期，分别是迟缓期、对数期、稳
定期、衰亡期。

在对数期期，细菌的生理特性最典型。

细菌细胞基因转移的方式主要转化、转导、接合、原生质融合和转染。

12、免疫球蛋白的功能区，Ig的H链、L链每隔110个氨基酸即由链内二硫键连接形成一个能行使特定功能的球性单位，称为Ig的结构域或功能区（domain），VH和VL为抗体分子结合抗原的所在部位、CH1和CL为遗传标志所在、CH2为抗体分子的补体结合位点与补体的活化有关、 CH3/CH4为与抗体的亲细胞性有关是IgG同一些免疫细胞的Fc受体结合部位。

13、免疫系统中既是中枢免疫器官又是外周免疫器官的是骨髓，T细胞成熟的场所是胸腺；B细胞成熟的场所鸟类是腔上囊，而哺乳动物是骨髓。

14、病毒颗粒极其微小，测量单位是纳米，病毒用电子显微镜才能观察到。

病毒必须在活细胞内生长增殖的细小微生物，病毒人工培养的方法主要有鸡胚接种、动物接种和细胞培养三种。

15、细菌的毒素可分为外毒素和内毒素。

用甲醛灭火以后称为类毒素，可刺激机体产生抗毒素。

16、病毒增殖的过程分吸附、穿入、脱壳、生物合成、组装和释放等几个主要阶段。

根据病毒壳粒数目和排列不同，病毒衣壳主要有螺旋对称型、 20面体对称型与复合对称型三种对称类型。

17.细胞因子类:白细胞介素，干扰素，肿瘤坏死因子，集落刺激因子，生长因子
18.病毒细胞培养的方法:静置，悬浮，旋转，微载体
19.细菌呼吸类型:需氧型，厌氧性，兼性厌氧型。

20.抗原性：包括免疫原性和反应原性。